Газоанализаторы для неинвазивной диагностики хеликобактериоза

Статья просмотрена: 34707 раз

Инфекция Helicobacter pylori имеет глобальное значение и широкое распространение в мире, в том числе и в России, где по эпидемиологическим данным инфицированы более 80% взрослого населения. Воспаление слизистой оболочки желудка, вызванное Helicobacter pylori, составляет 90% среди всех форм гастритов. В статье представлены современные методы диагностики хронического Helicobacter pylori -ассоциированного гастрита, основанные на рекомендациях международных консенсусов по диагностике заболеваний, ассоциированных с инфекцией Helicobacter pylori, а также по материалам консенсуса Маастрихт IV (Флоренция, 2010).

Ключевые слова: хронический гастрит, Helicobacter pylori, инвазивные и неинвазивные методы диагностики.

Helicobacter pylori infection is a global concern and widespread in the world, including in Russia, where the epidemiological data are infected with more than 80% of the adult population. Inflammation of the mucous membrane of the stomach caused by Helicobacter pylori, 90% of all forms of gastritis. The paper presents methods of diagnosis of chronic Helicobacter pylori-associated gastritis, based on the recommendations of an international consensus on the diagnosis of diseases associated with infection Helicobacter pylori, as well as based on consensus Maastricht IV (Florence, 2010).

Key words: chronic gastritis, Helicobacter pylori, invasive and non-invasive diagnostic methods.

Хронический Helicobacter pylori (НР)-ассоциированный гастрит — одно из наиболее часто встречающихся гастроэнтерологических заболеваний в связи с тем, что распространенность инфицирования Helicobacter pylori прогрессивно возрастает. В России около 80% случаев хронического гастрита ассоциировано с Helicobacter pylor i [1]. Международное агенство по изучению рака классифицировало Helicobacter pylori как канцероген I класса в отношении рака желудка кишечного типа [2]. Хронический НР-ассоциированный гастрит все чаще выявляется у людей молодого трудоспособного возраста, включая их в группу высокого риска развития рака желудка кишечного типа. Неуклонное прогрессирование атрофии слизистой оболочки желудка у пациентов с хроническим НР-ассоциированным гастритом может привести к развитию дисплазии/неоплазии [3]. Разработка алгоритмов ранней и точной диагностики хронического НР-ассоциированного гастрита позволит улучшить качество лечения и диспансерного наблюдения за данной категорией пациентов.

В соответствии со стандартами диагностики и лечения ассоциированных с H elicobacter pylori заболеваний [4], наиболее точный диагноз хронического НР-ассоциированного гастрита может быть установлен после морфологического исследования биоптатов слизистой оболочки желудка. Такой подход позволяет оценить состояние слизистой оболочки желудка, дать характеристику воспалительного процесса и оценить прогноз развития рака желудка на основании выраженности атрофических изменений слизистой оболочки желудка, что дает возможность клиницисту персонифицировать программу наблюдения больного хроническим НР-ассоциированным гастритом [2].

По требованиям Модифицированной Сиднейской системы для того чтобы правильно интерпретировать состояние слизистой оболочки желудка, необходимо минимум пять биоптатов: 2 из антрального отдела на расстоянии 2-3 см от привратника по большой и малой кривизне, 2 из тела желудка на расстоянии 8 см от кардии по большой кривизне и на 4 см проксимальнее угла по малой кривизне, 1 - из угла желудка [2]. Заключение должно содержать сведения об активности и выраженности воспаления, степени атрофии, метаплазии и о наличии Helicobacter pylori [5]. Современный подход для установления уровня выраженности атрофических изменений слизистой оболочки желудка предполагает определение стадии хронического гастрита согласно современной классификации хронического гастрита OLGA — Operative Link for Gastritis Assessment [6]. Модифицированный вариант OLGA system — Российский пересмотр классификации хронического гастрита был утвержден III Съездом Российского общества патологоанатомов (Самара, 2009), где для интегральной оценки атрофии слизистой оболочки использована визуально-аналоговая шкала, разработанная в виде таблицы стадий хронического гастрита [7]. Принципиально важным для практического использования предлагаемой оценки стадии хронического гастрита является прогнозирование риска развития рака желудка, возможное на основании оценки лишь атрофических изменений слизистой оболочки, то есть еще до появления признаков эпителиальной дисплазии/неоплазии [7]. Известно, что с нарастанием стадии атрофии увеличивается риск рака желудка кишечного типа, так как на стадии III-IV риск рака желудка кишечного типа возрастает в 6 раз [7]. Следовательно, врач, наблюдающий больного НР-ассоциированным гастритом, должен проводить эрадикационную терапию с целью предупреждения появления атрофических изменений слизистой оболочки желудка.

На этапе диагностики хронического НР-ассоциированного гастрита принципиальное значение имеет выявление этиологического фактора, а именно – Helicobacter pylori [8]. Все методы верификации Helicobacter pylori подразделяют на прямые и непрямые, инвазивные и неинвазивные (Табл.1).

(требуют проведения эндоскопического исследования с прицельной биопсией и дальнейшим изучением гастробиоптатов)

(эндоскопическое исследование не требуется)

прямые: гистологический метод, молекулярно-генетический метод – ПЦР в биоптате, бактериологический метод;
непрямые: быстрый уреазный тест (Хелпил-тест).

Иммунологические методы: исследование кала на наличие антигенов H elicobacter pylori с применением моноклональных антител; серологический метод (выявление антител IgG к H elicobacter pylori)
биохимический метод: уреазный дыхательный тест с 13 С-мочевиной.

Основой гистологического метода является микроскопическое морфологическое и морфометрическое исследование парафиновых срезов, окрашенных различными способами: гематоксилин-эозином, по Гимзе, толуидиновым синим, по Вартину-Старри и др. При этом специфичность метода составляет 93-94%, чувствительность - 95% [9].

С использованием метода ПЦР возможно выделение высокопатогенных и низкопатогенных штаммов H elicobacter pylori. Это важно для определения прогноза заболевания и эффективности эрадикации. Специфичность метода - 95%, чувствительность - 94% [8,9].

Культуральное исследование и стандартное определение чувствительности H elicobacter pylori к антибиотикам перед терапией первой линии важно проводить в регионах или популяциях с высокой резистентностью к кларитромицину (более 15-20%), если планируется использовать стандартную трехкомпонентную эрадикационную терапию, одним из компонентов которой является кларитромицин. Бактериологический метод с определением чувствительности к антибиотикам также необходимо применять при неэффективности терапии второй линии [10]. Специфичность метода составляет практически 100%, чувствительность — 76-90% [9].

Основой быстрого уреазного теста является определение H elicobacter pylori по уреазной активности микроорганизма в биоптатах слизистой оболочки желудка. H elicobacter pylori продуцирует уреазу, под влиянием которой происходит гидролиз мочевины с образованием иона аммония. При этом увеличивается рН среды, что можно зафиксировать с помощью изменения цвета индикатора. Биоптаты слизистой оболочки желудка помещают в раствор, содержащий мочевину и индикатор, изменение цвета которого косвенно свидетельствует о наличии H elicobacter pylori [8]. Специфичность - 96%, чувствительность - 95% [9].

В клинической практике для выявления H elicobacter pylori используется несколько неинвазивных диагностических тестов. Уреазный дыхательный тест, основанный на определении 13 С-мочевины, является лучшим тестом для диагностики инфекции H elicobacter pylori [10]. Это быстрый и высокоточный метод определения инфицированности H elicobacter pylori слизистой оболочки желудка по уреазной активности микроорганизма: способности уреазы разлагать мочевину до NH 4+ и HCO 3- с последующим образованием из HCO 3- углекислого газа, который, попадая в кровоток, затем выделяется через легкие и может быть определен спектрометром в выдыхаемом воздухе. Специфичность метода - 93-100%, чувствительность - 95-97% [9].

Серологический метод – третий среди неинвазивных диагностических тестов для диагностики инфекции H elicobacter pylori. Учитывая хронический характер инфекции, следует определять только IgG . Предпочтительным методом является иммуноферментный анализ (ИФА). Серологическое определение антител IgG к H elicobacter pylori в сыворотке крови является простым и доступным методом первичного скрининга инфекции [8]. Учитывая, что антитела к H elicobacter pylori сохраняются в течение многих месяцев после эрадикации микроорганизма, использование серологического метода не рекомендуется для оценки эффективности проведения эрадикационной терапии [10].

Врачу, осуществляющему первичную диагностику хеликобактериоза с помощью инвазивных тестов, необходимо помнить, что может быть получен ложноотрицательный результат при низкой плотности обсеменения слизистой оболочки желудка H elicobacter pylori, что часто имеет место на фоне приема ингибиторов протонной помпы (ИПП), антибиотиков и препаратов висмута, а также при выраженном атрофическом гастрите. В таких случаях рекомендуется обязательная комбинация инвазивных методов с определением антител к Helicobacter pylori в сыворотке крови [11].

Гастрин-17 вырабатывается G-клетками антрального отдела желудка, и при атрофии в этом отделе уровень гастрина снижается. В случае атрофического гастрита тела желудка при отсутствии атрофии в антруме содержание гастрина-17 возрастает (> 10 пмоль/л) в связи с включением механизма отрицательной обратной связи регуляции кислотопродукции через гастрин. При атрофии тела желудка снижается уровень сывороточного пепсиногена-I, который продуцируется главными клетками тела желудка. Пепсиноген-II вырабатывается во всех отделах желудка и в двенадцатиперстной кишке, и при атрофическом гастрите тела желудка снижается отношение пепсиноген-I/пепсиноген-II. Повышение уровня антител IgG к H elicobacter pylori до 42 ЕI U (EIU — иммуноферментные единицы) и более свидетельствует о наличии хеликобактерной инфекции [12].

Комплексный анализ, предназначенный для выявления H . pylori у пациентов с подозрением на гастрит, язву желудка или двенадцатиперстной кишки, включающий основные серологические тесты и метод РТ-ПЦР.

Комплексная диагностика геликобактериоза.

H. pylori diagnostic panel, H. pylori Abs, IgA, IgG, H. pylori, PCR.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

H. pylori – это грамотрицательный, факультативно-анаэробный микроорганизм, способный инфицировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. В большинстве случаев инфицирование H. pylori (геликобактериоз, или хеликобактериоз) носит постоянный, хронический характер. Геликобактериоз очень распространен: бактерия H. pylori может быть выявлена у 50 % людей земного шара. При этом H. pylori-ассоциированные заболевания (гастрит, язва желудка или двенадцатиперстной кишки, аденокарцинома желудка, MALT-лимфома) возникают только у 15-20 % инфицированных пациентов. Особенностью этих заболеваний является их благоприятный прогноз при условии их ранней диагностики и полной эрадикации H. pylori. Ведущее значение в диагностике геликобактериоза принадлежит лабораторным методам исследования.

Существует несколько методов выявления H. pylori. Прямые методы позволяют непосредственно выявить сам микроорганизм. Для большинства прямых методов необходим образец ткани слизистой оболочки (биоптат) и/или содержимое желудка и двенадцатиперстной кишки (аспират), которые обычно получают во время эндоскопического исследования. Таким образом, прямые методы исследования, как правило, являются инвазивными. В отличие от этого, непрямые методы выявляют не сам микроорганизм, а косвенные признаки инфекции, например специфические антитела в сыворотке крови (серологические тесты) или содержание меченого атома углерода в выдыхаемом воздухе (дыхательный уреазный тест). Так как для проведения непрямых тестов не требуется эндоскопического исследования, они называются неинвазивными. Как прямые, так и непрямые тесты на H. pylori, имеют свои преимущества и недостатки. Для точной диагностики геликобактериоза требуется сразу несколько тестов. В связи с этим особенно удобным для врача и пациента является комплексный анализ, включающий все необходимые тесты на H. pylori.

Одним из самых чувствительных методов выявления H. pylori является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (РТ-ПЦР). РТ-ПЦР – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в образце ткани) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Так как анализ основан на выявлении генетического материала, РТ-ПЦР позволяет выявлять присутствие любых форм H. pylori (не только активных спиралевидных, но и неактивных кокковых, некультивируемых), в результате чего исследование характеризуется очень высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность метода бактериологического посева. Теоретически для осуществления РТ-ПЦР достаточно присутствие 1 молекулы ДНК. На практике концентрация возбудителя в образце должна составлять около 10-100 КОЕ/мл. Такая высокая чувствительность теста означает, что получение отрицательного результата исследования позволяет исключить H. pylori как причину заболевания. Это имеет принципиальное значение при дифференциальной диагностике НПВС-ассоциированных, стрессовых и ишемических гастритов и язв.

Следует отметить, что, несмотря на очень высокую чувствительность теста (85-98 %), ложноотрицательные результаты все же возможны. Так, например, ложноотрицательный результат может быть получен, если бактериальная нагрузка очень низкая (например, на фоне приема некоторых антибиотиков). Ошибок диагностики можно избежать при комбинации этого прямого теста с серологическими исследованиями.

Инфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови. Эти иммуноглобулины (антитела) определяются в крови с помощью непрямых тестов. IgG обнаруживаются в 95-100 % случаев геликобактериоза, а IgA – в 68-80 %. Исследование позволяет определить титр антител, то есть является количественным. Как правило, высокие титры антител более характерны для активной, текущей инфекции. Следует отметить, однако, что четкой корреляции между титром антител и степенью тяжести инфекции нет.

Серологические тесты, как и метод РТ-ПЦР, имеют некоторые ограничения. Так, результат анализа зависит от особенностей иммунного ответа пациента. Иммунный ответ пациентов, принимающих цитостатические препараты, и пожилых людей характеризуется пониженной выработкой специфических антител (любых, в том числе к H. pylori). По этой причине во избежание диагностических ошибок серологические тесты целесообразно дополнять прямыми тестами. Эта особенность была учтена при составлении комплексного анализа на H. pylori.

Таким образом, комплексный анализ на H. pylori – это комбинация необходимых и достаточных тестов для выявления этого микроорганизма. Комплексный анализ не предназначен для контроля лечения. Результат как РТ-ПЦР, так и исследования иммуноглобулинов IgG и IgA будет оставаться положительными даже в случае полной эрадикации H. pylori. Ложноположительный результат РТ-ПЦР в этом случае обусловлен способностью этого метода выявлять ДНК любых, даже разрушенных микроорганизмов, ложноположительный результат серологических тестов − особенностями динамики иммунного ответа.

Для чего используется исследование?

Для выявления H. pylori у пациентов с подозрением на гастрит, язву желудка или двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

При обследовании пациента с признаками диспепсии: дискомфорт или боли в эпигастральной области, тошнота, рвота, нарушение аппетита.

Что означают результаты?

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

Бактерии Helicobacter pylori повреждают поверхностный эпителий желудка и вызывают воспаление. Чаще всего обнаруживаются у пациентов с язвенной болезнью желудка (в 60-80 % случаев) и двенадцатиперстной кишки (90-100 % случаев).В настоящее время диагностика хеликобактериоза не представляет трудностей.

Чтобы выявить инфицирование бактериями, нужно сдать анализ крови из вены или пробы выдыхаемого воздуха (аэротест). В период обострения заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки назначается гастроскопия (ФГДС), при проведении которой врач-эндоскопист может взять участок слизистой (биоптат) для экспресс-теста или морфологического исследования на наличие Helicobacter pylori.

Методы диагностики

доступен всем пациентам;
не сопровождается выраженным дискомфортом и стрессом при проведении процедуры (инъекционный метод забора крови);
прием лекарственных препаратов, применяемых для лечения заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки, не оказывает влияние на результат исследования.

Процедура забора крови проводится утром натощак.

За сутки до исследования из рациона исключается жирная пища.
Курение прекращают за 8 часов до анализа.

Забор крови производится путем венепункции. Материал отбирают в стерильную вакуумную пробирку с активатором свертывания для быстрого отделения сыворотки. Кровь доставляется в лабораторию в течение 2 часов. Микропробирки с сывороткой разрешается хранить в холодильнике при температуре 2-8 °С или в морозильной камере при -20 °С до 10 суток.

Для выявления бактерий применяется иммуноферментный анализ – ИФА. Это лабораторный метод предполагает исследование сыворотки крови. Путем химических реакций врачи определяют наличие в ней антител – специфических белков иммунологической природы, выделяющихся при воздействии на организм человека различных антигенов, не знакомых ему (чужеродных бактерий, вирусов, грибов, токсинов, аллергенов и т. д.). Helicobacter pylori является инфекционным возбудителем гастропатологии. При попадании в желудочно-кишечный тракт он активирует систему иммунитета и вызывает выработку антител – иммуноглобулинов (Ig). ИФА помогает диагностировать наличие или отсутствие данной инфекции.

Бывают ситуации, когда обнаруженные антитела в сыворотке крови является ложноположительным результатом. Это может быть связано с длительным циркулированием в плазме иммуноглобулинов после уничтожения бактерий вследствие эрадикационной терапии. Антитела присутствуют в крови в течение месяца после лечения, а у некоторых остаются пожизненно. В другом случае все наоборот. Инфицирование есть, а антитела в сыворотке крови не определяются (ложноотрицательный результат). Это может быть связано с ранним периодом после заражения. Антитела не успевают выработаться из-за слабого иммунного ответа. Чтобы избежать неточностей в результатах, необходимо дополнительно исследовать фракции иммуноглобулинов 3 видов: M, G, A.

Характеристики специфических белков крови:

Существует качественное и количественное определение антител к Helicobacter pylori. В первом случае диагностируют наличие специфических иммуноглобулинов, а во втором их концентрацию. При качественном анализе определяются суммарные антитела (IgM, IgG, IgA). При количественном исследовании используют нормы содержания специфических белков в крови.

У каждой лаборатории свои референсные значения, применяемые для определенного вида реактивов.

Вид исследования	Норма	Патология
Качественный анализ на антитела к Helicobacter pylori	Отрицательный (отсутствие антител)	Положительный (наличие антител)
Количественный анализ на антитела к Helicobacter pylori:	Нормальные референсные значения	Превышение показателей
IgM	Отрицательный (значения IgM в пределах нормы)

При нормальных показателях IgG и IgA инфицирования нет Положительный (референсные значения превышают норму)

Определяется сразу после заражения хеликобактериозом (выявляется в течение 3-4 недель от контакта с возбудителем)

Отрицательный

IgG может быть ложноотрицательным в течение 3-4 недель после заражения (IgM положительный) Положительный

Инфицирование Helicobacter pylori

Может превышать норму в течение месяца после эрадикационной терапии

Отрицательный

Может быть ложноотрицательным в ранний период после контакта с возбудителем (в течение 2-3 недель от момента заражения) Положительный

Чем выше концентрация IgA в сыворотке крови, тем активнее протекает воспалительный процесс

Возможны сомнительные результаты исследования. В таких случаях анализ на антитела к Helicobacter pylori повторяют через 2-3 недели.

помогает выявить даже низкие концентрации возбудителя;
безопасный метод, не сопровождается радиоактивной нагрузкой на пациента (при использовании тестовых растворов мочевины, меченой нерадиоактивными изотопами);
оценивается процент бактерий на всей поверхности слизистой желудка;
удобен для пациентов (неинвазивный метод);
дыхательный уреазный тест с раствором карбамида разрешен беременным и младенцам;
является точным диагностическим исследованием.

Дыхательный уреазный тест проводится натощак. Перед исследованием с утра можно почистить зубы без применения ополаскивателей и освежителей для полости рта. Не рекомендуется использовать жевательные резинки.
Накануне забора проб разрешен легкий ужин. С 22 часов вечера и до начала процедуры есть нельзя, питье отменяют за час до исследования.
За 2-3 дня до аэротеста запрещен прием алкоголя (пары алкоголя искажают результаты проб). Также на этот период исключаются продукты, вызывающие метеоризм (капуста, бобовые, чеснок, яблоки, грибы, черный хлеб и другие).
Курение прекращают за 8 часов до начала процедуры.
За 2 недели до исследования отменяют препараты висмута (“Де-нол”, “Викалин”, “Викаир”), ингибиторы протонной помпы (“Омез”, “Нольпаза”, “Нексиум” и другие). Данные средства угнетают активность уреазы.
За неделю до проведения теста прекращают прием нестероидных противовоспалительных и антибактериальных препаратов.
За 2 дня до процедуры исключаются лекарственные средства из группы блокаторов Н₂ – гистаминовых рецепторов (“Гистодил”, “Примамет”, “Ранитидин”, “Фамотидин” и другие).
Разрешены препараты, снижающие избыточную продукцию соляной кислоты желудком (антациды – “Алмагель”, “Фосфалюгель”, “Маалокс”, “Гевискон” и т. д.).

Специфичность метода

Дыхательный уреазный тест на Helicobacter pylori связан с особенностями жизнедеятельности бактерии. Возбудитель в процессе своего существования выделяет защитный фермент – уреазу. Это биологически активное соединение помогает микроорганизму справляться с агрессивным воздействием соляной кислоты, выделяемой в составе желудочного сока. В процессе пищеварения уреаза расщепляет продукт метаболизма белков – мочевину. В результате образуется аммиак и углекислота. Эта химическая реакция стала основой для аэротеста. При дыхании пациента можно измерить концентрацию углекислого газа в выдыхаемом воздухе.

Аэротест с применением тестового раствора или драже мочевины, меченой радиоактивным углеродом ( 14 С). Данный метод применяется редко из-за лучевой нагрузки на организм человека.

Пациент дышит через специальную трубку, находящуюся глубоко в ротовой полости. Дыхание должно быть ровным и спокойным. Трубка подсоединяется к специальному газовому спектрометру, замеряющему процент меченого углекислого газа в выдыхаемом воздухе. В начале процедуры берут 2 фоновые пробы аэротеста. Затем пациенту дают выпить тестовый раствор или проглотить специальное драже с мочевиной, меченой радиоактивным изотопом. Через каждые 15 минут (в течение часа) осуществляют забор дополнительных 4 проб выдыхаемого воздуха. Не допустимо попадание слюны в трубку, результат исследования может стать недостоверным. В этом случае пробу придется повторить через 40-60 минут после предыдущей. Чтобы избежать неприятной ситуации, трубку во время процедуры необходимо периодически вынимать, а слюну сглатывать.

Дыхательный уреазный тест с применением стабильного раствора мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом ( 13 С). Данный метод является “золотым стандартом” в диагностике хеликобактериоза (подробнее о методе см. здесь).

Во время исследования осуществляют забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Процедура проводится на голодный желудок, в положении сидя. Пациент делает глубокий вдох и на несколько секунд задерживает дыхание. Затем выдыхает в герметичный одноразовый пакет, который сразу же плотно закрывают. Пациенту дают выпить тестовый раствор мочевины, меченой нерадиоактивным изотопом. Через полчаса осуществляют повторный забор выдыхаемого воздуха. С помощью масс-спектрометра измеряют концентрацию углекислоты в выдыхаемом воздухе. Полученные результаты сравнивают и делают выводы о наличии инфицирования.

Аэротест с применением раствора мочевины (карбамида). Данная методика не является максимально точной. Рекомендуется для диагностики хеликобактериоза у беременных женщин и маленьких детей.

Методика схожа с предыдущим тестом. У пациента делают забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Измеряют концентрацию углекислого газа до и после применения тестового раствора карбамида.

Вид исследования	Норма	Патология
Качественное определение уреазной активности Helicobacter pylori	Отрицательный аэротест

Инфицирования нет или полное излечение после эрадикационной терапии Положительный аэротест

Инфицирование Helicobacter pylori Количественное определение уреазной активности Helicobacter pylori (по процентному содержанию изотопа в выдыхаемом воздухе) Менее 1%

Хеликобактериоза нет

1-3,4% – легкое инфицирование Helicobacter pylori
3,5-6,4% – среднетяжелый воспалительный процесс
6,5-9,4% – тяжелое инфицирование
Более 9,5% – крайне тяжелая степень хеликобактериоза

Во время проведения гастроскопии (ФГДС) врач-эндоскопист берет кусочек слизистой из любого отдела желудка. Биоптат помещают на реагентную тест-полоску, обработанную раствором мочевины. Под действием фермента уреазы, выделяемой бактериями Helicobacter pylori, происходит ощелачивание среды. Мочевина расщепляется. Вследствие этого индикаторная полоска меняет свою окраску – с желтой на малиновую. Тест считается положительным. От скорости изменения цвета реагента зависит выраженность воспалительного процесса и концентрация возбудителя в биоптате.

Оценка полученного результата:

Helicobacter pylori (+) – слабое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение суток).
Helicobacter pylori (++) – умеренный инфекционный процесс (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение 2-3 часов).
Helicobacter pylori (+++) – тяжелое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение одного часа).

наиболее точный метод диагностики Helicobacter pylori (специфичность до 100%);
исключает возможность ложноположительных результатов, подтверждает наличие инфекции.

Процедура ФГДС предусматривает 3-х дневную диету с исключением продуктов, раздражающих пищеварительный тракт (нельзя жареные, копченые, соленые, жирные и острые блюда).
Запрещаются газированные напитки, кофе, алкоголь.
Диета бесшлаковая на основе легкоусвояемого меню (каши на воде, отварное мясо, йогурты, овощные салаты и т. д.). Последний прием пищи за 12 часов до проведения ФГДС.
За 3 часа до начала исследования необходимо отказаться от сигарет.
Нельзя принимать лекарства перед эндоскопической процедурой.
Прием жидкости прекращают за 1-2 часа до начала исследования.
Не разрешается перед процедурой чистить зубы, применять ополаскиватели или освежители для полости рта, а также жевательные резинки.
Гастроскопия проводится на голодный желудок.

ФГДС сопровождается введением специального зонда в желудок. Процедура неприятна из-за диспепсических проявлений. Во время проглатывания зонда происходит раздражение рецепторов ротоглотки, и пациент испытывает чувство тошноты и рвотные позывы. Длительность процедуры обычно не превышает 10-15 минут. За это время специалист осматривает слизистую желудка и двенадцатиперстной кишки, выявляет очаги воспаления (эрозии, язвы, дефекты и т. д.) и проводит забор материала для последующего морфологического исследования.

Для бактериологического посева биоптата на питательную среду потребуется не менее 5 образцов тканей. Их помещают в стерильные пробирки с транспортным раствором. Затем доставляют в бактериологическую лабораторию. Helicobacter pylori выращивают на питательных средах в течение 3-6 дней, иногда дольше (до 12 суток).

Гистологическое исследование мазков-отпечатков, полученных из биоптатов слизистой желудка, является “золотым стандартом” среди инвазивных методов диагностики хеликобактериоза. Участки тканей при ФГДС берут с неповрежденного эпителия (исключают эрозивно-язвенные дефекты). Helicobacter pylori живет на здоровой слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки. Затем полученные мазки-отпечатки окрашивают (по Романовскому-Гимзе, по Граму или другими красителями). Производят микроскопию. Бактерии обнаруживаются в желудочной слизи, располагаются свободно. Helicobacter pylori имеет характерные для него изогнутые формы: спиралевидную, в виде буквы “S” или распахнутых крыльев птицы.

Вид исследования	Норма	Патология
Бактериологический посев биоптата на Helicobacter pylori	Отрицательный

(рост бактерий не обнаружен) Положительный

(на питательной среде выросли культуры Helicobacter pylori) Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (качественный анализ) Отрицательный

(бактерии в мазке отсутствуют) Положительный (обнаружена одна или большее количество бактерий при микроскопии) Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (количественный анализ) Отрицательный (0 бактерий в мазке, инфицирования нет) 3 степени распространения возбудителя (микроскопия на увеличении в 360 раз):

Слабая обсемененность Helicobacter pylori (+) – в поле зрения не более 20 бактерий
Умеренная обсемененность Helicobacter pylori (++) – в поле зрения от 20 до 50 микроорганизмов
Высокая обсемененность Helicobacter pylori (+++) – в поле зрения более 50 микробных тел

Резюме

Таким образом, существует 2 точных диагностических метода выявления хеликобактериоза. Они являются “золотым стандартом” в современной гастроэнтерологии. Первый метод – неинвазивный: дыхательный уреазный тест с раствором мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом; второй – инвазивный: ФГДС с биопсией и последующим гистологическим изучением образцов тканей.

Для подтверждения инфицирования Helicobacter pylori требуется не менее 2 различных исследований. Диагноз ставят на основании клинической симптоматики и результатов, полученных в процессе лабораторных и эндоскопических мероприятий.

Читайте также: