Обнаружение возбудителей лептоспироза и мелиоидоза в мясе

Глава 40. Возбудители лептоспирозов

Патогенные лептоспиры включены в семейство Spirochaetaceae, род Leptospira. Открыты в 1915 г. японскими исследователями Инадо и Идо.

К роду Leptospira относится группа микроорганизмов, вызывающих заболевания у животных и человека.

Морфология. Лептоспиры - спиралевидные нити, длиной 6-20 × 0,1-0,25 мкм. Имеют многочисленные (12-18) мелкие, тесно прилегающие друг к другу завитки. Концы спиралей загнуты в виде крючков. Существуют и безкрючковые штаммы. Лептоспиры очень подвижны. Имеют все формы движения.

Они плохо окрашиваются анилиновыми красителями, поэтому с целью обнаружения их в патологическом материале и в культурах используют метод микроскопии живых лептоспир в темном поле или метод серебрения - при этом способе они окрашиваются в коричневый цвет.

Культивирование. Лептоспиры строгие аэробы. Размножаются с жидких и полужидких питательных средах, содержащих сыворотку кролика, при температуре 28-30° С и рН среды 7,2-7,4. Растут медленно (7-10 дней). Среды при размножении лептоспир остаются прозрачными. Рост определяют по опалесценции или при микроскопии препаратов в раздавленной капле (в темном поле). Лептоспиры можно выращивать и на плотных питательных средах, содержащих кроличью сыворотку. Рост появляется на 5-7-й день. При выращивании лептоспир на искусственных питательных средах они теряют вирулентность.

Ферментативные свойства. У лептоспир обнаружены ферменты: каталаза, оксидаза, липаза и др.

Токсинообразование. Наличие эндотоксина у лептоспир не доказано.

Антигенная структура. Антигенную структуру лептоспир изучают в реакции микроагглютинации с монорецепторными сыворотками. На основании этой реакции лептоспиры делят на 19 серо групп и 169 сероваров. Каждая серогруппа и серовар имеют название.

Устойчивость к факторам окружающей среды. Лептоспиры чувствительны к высоким температурам: 56° С губит их через 30 мин. При низких температурах (- 70-80° С) они длительно сохраняются. Лептоспиры очень чувствительны к высыханию. Они чувствительны к действию кислот, желчи. Обычные концентрации дезинфицирующих веществ губят их через несколько минут.

В воде лептоспиры выживают до двух месяцев, в молочных продуктах, хлебе - несколько часов.

Восприимчивость животных. Наиболее восприимчивы к лептоспирам грызуны, но болеют парнокопытные, крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, собаки и даже хищные животные. У животных заболевание протекает обычно в хронической форме.

Из экспериментальных животных наиболее чувствительны к лептоспирам морские свинки, золотистые хомяки. Однако вызвать у них заболевание могут только некоторые серовары лептоспир. У грызунов заболевание протекает тоже в хронической форме и лептоспиры выделяются с мочой.

Источники инфекции. Источниками заражения являются больные животные - сельскохозяйственные и грызуны (в основном крысы). Они инфицируют мочой окружающую почву, открытые водоемы (речки, пруды, колодцы). Кроме того, они заражают пищевые продукты.

Пути передачи. Контактно-бытовой (при купании и выполнении различных работ в воде, зараженной лептоспирами больных животных; при уходе за больными животными), пищевой (через воду и пищевые продукты).

Патогенез. Входными воротами являются поврежденная кожа и неповрежденные слизистые оболочки рта, глаз и желудочно-кишечного тракта. Первичный аффект на коже и слизистых оболочках не образуется. Лептоспирозы протекают в желтушной и безжелтушной форме. Проникнув в организм, лептоспиры через лимфатические пути проникают в кровь, где циркулируют. С током крови они проникают в паренхиматозные органы и локализуются в печени и почках. К этому времени образуются антитела, разрушающие лептоспиры.

В процессе распада лептоспир выделяется токсическое вещество, которое приводит к явлениям интоксикации и кровоизлияниям в паренхиматозных органах. В тяжелых случаях развивается желтуха и острая почечная недостаточность (нефрит) у человека и у чувствительных к лептоспирам животных.

При легких формах течения поражения паренхиматозных органов выявляются только при специальных методах исследования.

Иммунитет. Связан с образованием агглютининов и спирохетолизинов, максимальная концентрация которых достигается на 3-4 нед (антитела бывают в высоких титрах 1:1000 и выше). Иммунитет сохраняется длительно.

Профилактика. Борьба с грызунами, осушение болот и другие мелиоративные мероприятия, а также защита пищевых продуктов от крыс и мышей. Сельскохозяйственных животных вакцинируют.

Специфическая профилактика. Вакцинация людей, работающих в очаге. Лептоспирозная вакцина представляет собой взвесь убитых нагреванием лептоспир нескольких сероваров.

Лечение. Пенициллин, тетрациклин, противолептоспирозный иммуноглобулин (приготовленный из наиболее распространенных серогрупп лептоспир).

1. Расскажите о морфологических и культуральных свойствах лептоспир.

2. Какова устойчивость лептоспир во внешней среде?

3. Патогенность для животных, источники заражения и пути передачи.

4. Назовите входные ворота. Каков патогенез лептоспирозов?

5. Иммунитет. За счет каких антител он образуется?

Цель исследования: выявление лептоспир у больных и обнаружение их во внешней среде. Определение серовара.

3. Спинномозговая жидкость.

4. Водные источники и пищевые продукты.

5. Секционный материал.

Способы сбора материала

2. Бактериологический (с микроскопией).

Ход исследования

1. Что служит материалом для исследования при подозрении на лептоспироз?

2. Перечислите основные методы исследования.

3. Расскажите как ставят биологическую пробу.

Среда Терских. Готовят фосфатную смесь: 1) фосфат натрия двузамещенный - 11876 г; 2) дистиллированная вода - 1 л; 3) фосфат калия однозамещенный - 9078 г (приготовленные растворы хранят в темном месте). Смесь стерилизуют и добавляют 10% прогретой сыворотки кролика. После посева среду покрывают слоем жидкого парафина или вазелинового масла.

Среда Ферворта - Вольфа. На 1 л среды: 1) пептон - 1 г; 2) натрия хлорид - 0,5 г; буферная смесь Зермсена - 100 мл; 4) дистиллированная вода - 900 мл; 5) 10% инактивированная сыворотка кролика.

ВОЗБУДИТЕЛЬ И ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА МЕЛИОИДОЗА

Мелиоидоз регистрируется в ряде стран Южной и Юго-Восточной Азии, на Цейлоне, Мадагаскаре, в Австралии, Южной Америке, Панаме, США, в Африке, Европе (Франция, Англия).

Естественным резервуаром возбудителя являются домашние животные: козы, овцы, свиньи, коровы, лошади, собаки, кошки и др. Инфицированные животные, выделяя возбудителя с естественными жидкостями и экссудатом раневых поверхностей, обсеменяют объекты окружающей среды. В. pseudomallei длительно сохраняется в воде и почве, активно участвуя в процессах денитрификации.

Целью работы является изучить возбудителя и лабораторную диагностику мелиоидоза.

1. Изучить характеристику заболевания;

2. Изучить лабораторную диагностику заболевания;

3. Изучить профилактику и методы лечения заболевания.

Характеристика заболевания. Мелиоидоз (ложный сап, болезнь Уитмора) - острая инфекционная болезнь, протекающая в виде тяжелого сепсиса с образованием множественных абсцессов в различных органах или в виде относительно доброкачественных легочных форм.

Воротами инфекции являются мелкие повреждения кожи или слизистой оболочки органов пищеварения или респираторного тракта. Лимфогенно возбудитель достигает регионарных лимфатических узлов, где размножается иногда с образованием гнойного очага. При септических формах мелиоидоза возбудитель проникает в кровь и гематогенно распространяется по различным органам и системам, образуя там множество вторичных очагов с казеозным распадом и абсцессами.

Характеристика возбудителя.

История открытия возбудителя. Первые сведения о мелиодозе относятся к 1911 г., когда английский врач Уитмор при вскрытии трупов людей описал обнаруженные им патологоанатомические изменения.

Рис.1 Возбудители мелиоидоза под микроскопом.

Морфология возбудителя. Возбудитель - Pseudomonas pseudomallei (бацилла Уитмора). Представляет собой грамотрицательную, биполярно окрашивающуюся палочку длиной 2-6 мкм и шириной 0,5-1 мкм. Аэроб имеет жгутики, подвижен, хорошо растет на питательных средах.

Лабораторная диагностика заболевания.

Особенности взятия и пересылки патологического материала. У больных животных и человека возбудитель мелиоидоза может быть выделен из содержимого абсцессов, мокроты, гнойного отделяемого язв, рвотных масс. При острой септической форме возбудитель обнаруживается в крови, моче, цереброспинальной жидкости и в полостных экссудатах.

При необходимости пересылки материала для исследования используют жидкую минимальную среду с антибиотиками. Контейнеры с объектами содержат при комнатной температуре.

Бактериологическая диагностика. Бактериологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии и биопробы, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим, ферментативным и серологическим свойствам. В мазках при окраске по Граму клетки выглядят в форме палочек розового цвета.

Рис.2 Окраска по Граму.

Культуральные свойства. Асептически полученную кровь, цереброспинальную жидкость, экссудат и прочий материал для исследований засевают в МПГБ, одновременно делая посев на МПГА и селективную среду Эшдауна.

Посевы из внутренних органов умерших людей и павших животных осуществляют методом мазков-отпечатков с последующим рассевом петлей на плотные среды: МПГА, Мак Конки или Эшдауна.

При посеве на МПГА возбудитель мелиоидоза через сутки формирует полупрозрачные сероватого цвета колонии. Через 48 ч наблюдается морфологическая диссоциация колоний - одни из них блестящие, гладкие, выпуклые, другие имеют шероховатую или складчатую поверхность. В отдельных случаях выявляются мукоидные колонии. При выращивании на среде Эшдауна мелиоидозные колонии приобретают темно-красный цвет за счет сорбции из среды нейтрального красного, вокруг колоний наблюдается просветление среды.

Биохимические и токсигенные свойства возбудителя. При острой форме мелиоидоза, вызванной высоковирулентным штаммом, уже на ранней стадии заболевания в макроорганизме выявляются значительные нарушения белкового, углеводного, липидного обменов.

Биохимические свойства выражены слабо и нестабильны. Обычно ферментирует глюкозу, маннит, ксилозу с образованием кислоты, желатин не разжижает. Не образует индола и не восстанавливает нитраты в нитриты. На жидких средах образует сероводород и аммиак. Обладает каталазной активностью. Свертывает, но не пептонизирует молоко.

Антигенное строение возбудителя. Возбудитель мелиоидоза имеет сложное антигенное строение (5 антигенов) и родство с возбудителем сапа, что устанавливается РСК, РА и МФА.

К высокой температуре и действию дезинфицирующих средств возбудитель мелиоидоза неустойчив. Нагревание до 56 °С убивает его через 10—15 мин; 1%-ный раствор фенола, 0,5%-ный раствор формалина — через 10 мин. На холоде ( -4°С) погибает через 2—3 недели. Устойчив к высушиванию. В воде сохраняет жизнеспособность до 44 дней, в фекалиях—до 27 дней, в моче — до 17 дней.

Серологическая диагностика. Для серодиагностики применяют реакции агглютинации, гемагглютинации и связывания комплемента. Ни одна из них не позволяет дифференцировать мелиоидоз от сапа. Наиболее достоверные результаты дает реакция гемагглютинации. У больного рекомендуется проводить все три реакции парными сыворотками, взятыми с десятидневным интервалом. Для аллергической диагностики применяют аллерген (мелиоидин). Для постановки проб используется уайт-морин (препарат, аналогичный маллеину) или капсульный антиген.

Биопроба. В качестве биопробных животных используют золотистых хомячков. Кровь, цереброспинальную жидкость, экссудат из серозных полостей вводят в объеме 0,5-1,0 мл 2-5 золотистым хомячкам подкожно. Материал из абсцессов, отделяемого ран, рвотных масс, измельченные кусочки внутренних органов (печень, селезенка, почки, легкие) суспендируют в 2-3 мл 0,85% раствора NaCl и после отстаивания надосадочную жидкость вводят двум животным подкожно по 0,5-1,0 мл.

Исследуемую воду вводят внутрибрюшинно золотистым хомячкам. Мелиоидоз у золотистых хомячков протекает в острой септицемической форме, заканчивающейся к 4-5 дню летально. При посевах из внутренних органов павших животных на чашках с МПГА выделяют чистую культуру возбудителя мелиоидоза. За выжившими животными наблюдают не менее 20 сут., после чего их забивают, вскрывают и исследуют бактериологически. Отбор подозрительных колоний производят через 36-72 ч инкубации при температуре 37 °С.

Устойчивость возбудителя. Во внешней среде палочка мелиоидоза довольно устойчива. В почве она сохраняется до одного месяца, в питьевой воде-до 45 дней, в кале-27 дней, в моче-до 17 суток, в трупе -до 8 суток. Палочка мелиоидоза устойчива к высушиванию, температура 56° инактивирует ее через 10 минут; плохо переносит воздействие хлорной, извести, сулемы и других дезинфицирующих средств. Агаровые и бульонные культуры при температуре 22-28° остаются жизнеспособными в течение 2-3 месяцев; на холоде при минус 4° погибают через 2-3 недели.

Особенности специфической профилактики и иммунитет. Специфическая профилактика не разработана. Больные мелиоидозом подлежат изоляции и госпитализации. В эндемичной местности проводят мероприятия по уничтожению грызунов и защите от них продуктов.

При подозрении на мелиоидоз больных животных изолируют и исследуют бактериологически. В неблагополучном хозяйстве проводят дезинфекцию, дератизацию и дезинсекцию.

Лечение. Используется длительная этиотроппая терапия. Наиболее эффективными являются тетрациклины, левомицетин и бактрим (бисептол). Тетрациклин назначают в дозе 3 г в сутки (40 мг/кг), левомицетин по 0,75 г через 6 ч (40 мг/кг сут) в течение не менее 30 дней. При тяжелых септических формах в настоящее время рекомендуют назначать 4-6 г тетрациклина в сутки (80 мг/кг), 4-6 г левомицетина (80 мг/кг сут). Антибиотики следует вводить парентерально.

Прогноз. До введения в практику антибиотиков смертность при септических формах приближалась к 100%, при современных методах лечения при септических формах умирает около 50% и более.

В последние годы интерес исследователей к мелиоидозу значительно возрос, что объясняется расширением ареала инфекции, связанным с изменяющимися климатическими условиями, глобальным потеплением и другими природными факторами, способствующими появлению этой опасной инфекции на ранее неэндемичных территориях и формированию вторичных очагов.

Библиографический список:

1. Алексеев В.В., Кивокурцева Т.Ю., Замараева C.B. Экологические аспекты механизма адаптации возбудителя мелиоидоза [Текст]:учебник/ В.В. Алексеев, Е.Ю. Кивокурцева, С.В. Замараева. - Волгоград, 2002. - С. 203 - 204.

2. Алексеевская, Л. В. Общая микробиология [Текст]: учебник/ Л. В. Алесеевская. – Москва: КолосС, 2006. 288с.

3. Антонов В.А., Ткаченко Г.А., Алтухова В.В. и др. Использование ПЦР для идентификации мелиоидоза [Текст]:учебник/ В.А Антонов, Г.А. Ткаченко, В.В. Алтухова. –Москва: КолосС, 2004. - С. 12 – 17.

4. Бессарабов Б.Ф.,Сидорчук., А.А.,Воронин Е.С. Инфекционные болезни животных [Текст]:учебник/А.А. Сидорчука. – М: КолосС, 2007. – 671 с.

6. Красникова, Л.В. Практикум по микробиологии. [Текст]: учебник/ Красникова, Л.В. – СПб.: Троицкий мост, 2012

7. Нетрусов А.И. Общая микробиология. [Текст]: учебник/ Нетрусов, А.И. – М.: Академия, 2007.

10. Шлегель, Г.Г. История микробиологии [Текст]: учебник / Г.Г. Шлегель. – Москва, 2006.

Диагноз на лептоспироз ставят путем проведения микроскопических, бактериологических, серологических и гистологических исследований с учетом эпизоотологических, эпидемиологических, клинических и патологоанатомических данных.

Материалом для прижизненной диагностики является кровь и моча, для посмертной — трупы мелких животных, от крупных животных ветспециалист отбирает в ветлабораторию следующий патматериал: сердце, кусочки паренхиматозных органов , почку, транссудат грудной и брюшной полостей, перикардиальную жидкость, мочевой пузырь с содержимым. Абортированный плод доставляют в лабораторию целиком или берут желудок с содержимым и паренхиматозные органы. В летнее время патологический материал должен быть взят и исследован в течение 6 часов, зимой при условии хранения его в охлажденном состоянии — в течение 10-12 часов. При обнаружении больных или подозрительных по заболеванию животных берут не менее 50 проб крови от животных каждого скотного двора, свинарника, гурта; спустя 7-10 дней у тех же животных ветспециалист берет кровь повторно. В хозяйстве рекомендуется провести микроскопию мочи не менее чем от 100 животных.

Бактериологическая диагностика состоит в обнаружении в исследуемом материале или в органах лабораторных животных, зараженных этим материалом, лептоспир путем микроскопии, а также в выделении и идентификации чистых культур.

Серологическая диагностика основана на обнаружении специфических антител в крови животных реакцией микроагглютинации (РМА) или реакцией макроагглютинации.

Диагноз на лептоспироз считается установленным и хозяйство признается неблагополучным по лептоспирозу, если при лабораторном исследовании материала обнаруживаются лептоспиры: при микроскопии; при выделении культур; выявлении возбудителя в гистологических срезах почек или печени; установлении нарастания титра антител при повторном исследовании в 5 раз и более или при обнаружении антител у ранее не реагировавших животных, если специфические антитела обнаружены в сыворотке крови при однократном исследовании по РМА в титре 1:100 и выше более чем у 25% обследованных животных или по РА 1-4креста более чем у 20% животных.

Дифференциальный диагноз. При установлении причины падежа животного специалистам необходимо учитывать, что животные –лептоспироносители, а также животные, имеющие в крови антитела к лептоспирозу, могут погибать от других инфекционных и незаразных болезней. При заболевании крупного и мелкого рогатого скота необходимо исключить гемоспоридиозные заболевания, злокачественную катаральную горячку, бруцеллез, кампилобактериоз (вибриоз), трихомоноз, листериоз, сальмонеллез, вирусные пневмоэнтериты, кормовые отравления. У свиней необходима исключить бруцеллез, сальмонеллез, чуму, рожу, дизентерию, микотоксикозы. У лошадей — инфекционную анемию, инфекционный энцефаломиелит. У собак и пушных зверей — чуму, инфекционный гепатит, сальмонеллез и вирусный энтерит.

Лечение. Заболевших лептоспирозом животных изолируют и подвергают лечению. Лечение может быть специфическим и симптоматическим. Из специфических средств хороший лечебный эффект оказывает поливалентная гипериммунная противолептоспирозная сыворотка, особенно если ее применить в самом начале болезни. Сыворотку вводят подкожно в разовых дозах: крупному рогатому скоту 50-120 мл; телятам 20-40 мл; свиньям, овцам, лисицам 5-30 мл. При тяжелом течении болезни введение сыворотки через 1-2 дня повторяют. Внутривенно сыворотка вводится в половинных дозах. Эффективно также применение антибиотиков: стрептомицин (по 10-12 тыс. ЕД на 1кг массы животного 2 раза в день 4-5дней подряд), дитетрациклин (свиньям по 30 тыс.ЕД на 1кг массы животного 2-3 раза с интервалом 2-3дня). Для симптоматического лечения используют глюкозу. При лептоспирозе в организме животных наблюдается гипогликемия. Использование глюкозы компенсирует недостачу сахара, пополняет энергетические ресурсы организма, 40% раствор глюкозы вводят внутривенно : крупному рогатому скоту и лошадям 500 мл; молодняку 50-200 мл; лисицам, песцам и собакам 5-10мл. Для устранения атонии желудочно-кишечного тракта используют слабительные (внутрь — глауберовую соль 25-500г). Для дезинфекции мочевых путей внутрь применяют уротропин с водой: крупным животным 5-10г, телятам 1-2г. Для поддержания сердечной деятельности подкожно инъекция кофеина: крупным животным 2-3г; мелкому рогатому скоту и свиньям 0,5-2г. При поражении ротовой полости ее промывают растворами марганцовокислого калия (1:1000). Некротические очаги кожи смазывают ихтиоловой мазью, борным вазелином и т.д. Больным животным создают наилучшие условия кормления и содержания. В рацион вводят рыбий жир, рыбную муку, микроэлементы, витамины. Телят и поросят облучают кварцевой лампой.

Больных животных необходимо предохранять от действия солнечных лучей, необходимо их чаще поить.

Иммунитет и иммунизация. Чрезвычайно широкое распространение лептоспир в природе дают частые возможности контакта всех видов животных с этими микроорганизмами. В то же время при вспышках лептоспироза в сельскохозяйственных предприятиях большинство животных не заболевает. Чаще болеют молодые животные, а это говорит о том, что естественная иммунизация животных против лептоспироза (иммунизирующая субинфекция) является бесспорным фактором.

В создании невосприимчивости к лептоспирозу в организме животного большую роль играют гуморальные и клеточные факторы. При попадании лептоспир в организм их обнаруживают в макрофагах различных органов, купферовских клетках печени; доказано, что фагоцитарная активность клеток крови (нейтрофилов) через несколько дней после заражения увеличивается в 4-6раз. То есть можно сказать, что в начальном периоде после заражения защитные функции выполняют клеточные факторы иммунитета, которые приобретают специфичность под влиянием появляющихся несколько позднее антител, агглютининов, лизинов, комплемент связывающих антител, преципитинов. Преципитины делают фагоцитоз не только завершенным, но и разрушают паразитов (лизис). Конечно, эффективность механизмов иммунитета зависит от состояния нервной системы организма, и в первую очередь от ее чувствительности, способной своевременно пускать в ход защитные механизмы.

Изучая иммуногенез, ученые заметили, что переболевшие лептоспирозом животные приобретают иммунитет к повторному заражению гомологичным серотипом, а кровь реконвалисцентов обладает лечебными и профилактическими свойствами. Эти факторы были учтены учеными при изыскании вакцин и сыворотки против лептоспироза.

Первая вакцина против лептоспироза в СССР была предложена С.Я. Любашенко в 1940г., а начиная с 1946 по 1958г., лептоспирозную вакцину готовили из трех серотипов (гриппотифоза, помона, иктерогеморрагия). В дальнейшем в соавторстве с А.Г. Малявиным для приготовления вакцины стали использовать еще два серотипа (каникола и тарасови).

Сейчас для активной иммунизации животных используют поливалентную депонированную вакцину ВГНКИ, выпускаемую в двух вариантах (различное сочетание серогрупп лептоспир).

Противолептоспирозные вакцины применяют как для профилактики, так и при проведении вынужденной вакцинации животным в возрасте от 1месяца и старше в неблагополучных, откормочных и угрожаемых по лептоспирозу хозяйствах, при выпасе животных в зоне природного очага болезни, при выявлении в хозяйстве животных, сыворотка крови которых реагирует на лептоспироз по РМА или РА, и в районах с отгонным животноводством. Специалисты при проведении вакцинации должны учитывать то, что крупный рогатый скот, буйволов, коз, свиней и лошадей нельзя вакцинировать в последнею неделю беременности и в первую неделю после родов, а собак, лисиц и песцов — во вторую половину беременности. Иммунитет у привитых животных наступает через 14 дней и продолжается до года. Сыворотку крови от вакцинированных животных не исследуют на лептоспироз в течение 2-3 месяцев после вакцинации.

Для пассивной иммунизации применяют поливалентную сыворотку против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных. Владельцам животных необходимо помнить, что сыворотка, как и вакцина, не освобождает организм животных от лептоспироносительства; и не может профилактировать наступление абортов у зараженных животных.

Меры борьбы. Борьба с лептоспирозом проводится согласно ветеринарных правил ВП 13.3. 1310-96 утвержденных Начальником Департамента ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации — Главным государственным ветеринарным инспектором Российской Федерации В. М. Авиловым 18июня 1996г. и Санитарных правил СП 3.1. 091-96, утвержденных первым заместителем председателя Госкомсанэпиднадзора России — заместителя Главного государственного санитарного врача Российской Федерации. С.В. Семеновым 31 мая 1996г.

При установлении диагноза лептоспироз Постановлением Губернатора области выносится решение об объявлении хозяйства (отдельной его части), населенного пункта неблагополучным по лептоспирозу, вводятся ограничения и утверждается план оздоровления хозяйства.

В плане оздоровительных мероприятий предусматриваются необходимые диагностические исследования животных, ограничительные, ветеринарные, санитарные, организационно-хозяйственные мероприятия с указанием сроков проведения и ответственных лиц.

По условиям ограничений запрещается:

• выводить (ввозить) животных для целей воспроизводства, продавать животных населению;
• перегруппировывать животных без ведома ветеринарного специалиста, обслуживающего хозяйство;
• допускать животных к воде открытых водоемов и использовать ее для поения и купания животных;
• выпасать невакцинированных животных на пастбищах, где выпасались больные лептоспирозом животные, или на территории природного очага лептоспироза;
• скармливать невакцинированным животным корма, в которых обнаружены инфицированные лептоспирами грызуны.

Молоко, полученное от больных лептоспирозом животных, нагревают до кипения и используют в корм. Молоко клинически здоровых коров, сыворотка крови которых дает положительную РМА без нарастания титра, используют без ограничений.

В неблагополучном по лептоспирозу хозяйстве (ферме, отделении, стаде, свинарнике, и т.д.) проводят клинический осмотр и измерение температуры тела у подозрительных по заболеванию животных.

Больных и подозрительных по заболеванию животных изолируют, лечат гипериммунной сывороткой и антибиотиками в дозах, указанных в наставлениях по их применению.

Клинически здоровых животных всех видов и возрастных групп, восприимчивых к лептоспирозу, вакцинируют. Животных, подвергнутых лечению, вакцинируют через 5-7дней после выздоровления.

Всех животных откормочных хозяйств, неблагополучных по лептоспирозу, и малоценных животных в племенных и пользовательных хозяйствах откармливают и сдают на убой.

Маточное поголовье, производителей и ремонтный молодняк, которые необходимо сохранить для воспроизводства, после вакцинации обрабатывают лептоспироцидными препаратами и переводят в продезинфицированное помещение.

Эффективность обработки проверяют через 10-15дней путем микроскопии мочи.

Молодняк, полученный после проведения мероприятий, выращивают отдельно, вакцинируют в сроки, предусмотренные наставлением по применению вакцины против лептоспироза и, после снятия ограничений, реализуют на общих основаниях.

Вывод животных для откорма разрешается в пределах области (края, республики) через месяц после последнего случая выздоровления животного, проведения вакцинации и заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий.

У производителей (быки, хряки, жеребцы, бараны) инфицированных лептоспирами ( положительная реакция РМА, лептоспиры в моче), прекращают получать сперму и, исходя из хозяйственной целесообразности, направляют их на убой или обрабатывают стрептомицином и проводят дезинфекцию помещения. Все поголовье вакцинируют против лептоспироза. Через 10-15 дней эффективность лечения контролируют путем микроскопии мочи. При обнаружении лептоспир в моче повторяют курс лечения и проверку его эффективности. От быков, признанных здоровыми, продолжают брать сперму. Сперму, полученную от быков — лептоспироносителей, уничтожают.

Повторное исследование сыворотки крови в РМА и микроскопию мочи всех производителей на ранее неблагополучном по лептоспирозу предприятии (станции) проводят через 3 месяца и при получении отрицательных результатов далее каждые 6месяцев.

Производителей на предприятиях (станциях, пунктах) искусственного осеменения, расположенных в неблагополучной или угрожаемой по лептоспирозу зоне, вакцинируют против лептоспироза.

Ограничения в неблагополучных по лептоспирозу хозяйствах снимают в следующем порядке:

• в откормочных хозяйствах-после сдачи поголовья на убой и проведения заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий;
• в племенных и пользовательных хозяйствах — после установления их благополучия по лептоспирозу лабораторными методами исследований. Для этой цели через 1-2 месяца после проведения мероприятий исследуют в РМА не менее 50 проб сыворотки крови молодняка, предназначенного для продажи (не должно быть положительных реакций), и не менее 100 проб мочи от каждой 1000 взрослых животных или группы ремонта, среди которых не должно быть лептоспироносителей; РМА у взрослых животных может оставаться положительной;
• повторные исследования на лептоспироз в ранее неблагополучных хозяйствах проводят через 6 месяцев после снятия ограничений;
• хозяйство считается оздоровленным при получении отрицательных результатов исследований у всех обследованных животных.

В целях недопущения заболевания животных лептоспирозом собственники и владельцы скота, ветеринарные специалисты обязаны выполнять следующее:

• осуществлять контроль за клиническим состоянием животных, учитывать количество абортов и при подозрении на лептоспироз отбирать патматериал для лабораторных исследований;
• комплектование племенных хозяйств (ферм), предприятий, станций искусственного осеменения из благополучных по лептоспирозу хозяйств;
• исследовать всех поступающих в хозяйство животных в период 30-дневного карантина на лептоспироз в РМА в разведении 1:25;
• разрешается комплектовать откормочные хозяйства (отделения, фермы) клинически здоровыми животными без обследования на лептоспироз, но с обязательной вакцинацией их против лептоспироза в период карантинирования;
• не допускать контакта животных со скотом неблаголучных по лептоспирозу хозяйств (ферм), населенных пунктов на пастбищах, в местах водопоя и т.д.;
• не выпасать невакцинированных животных на территории природных очагов лептоспироза;
• не устраивать летних лагерей для животных на берегах открытых водоемов;
• систематически уничтожать грызунов в животноводческих помещениях, на территории ферм, местах хранения кормов и т.п.