Вакцина бруцеллез сухая живая
1ампула/4-10 доз №5 в комплекте с растворителем.
однократно накожно или внутрикожно,
ревакцинация через 12 месяцев.
Вакцина бруцеллезная представляет собой лиофилизированную культуру живых микробов вакцин штамма В.abortus 19 ВА, имеет вид однородной аморфной массы белого или желтоватого цвета.
Вакцина бруцеллезная через 20-30 дней после прививки обеспечивает развитие иммунитета продол жительностью 10 12 месяцев, максимальная напряженность иммунитета сохраняется 5-6 месяцев.
Профилактика бруцеллеза козье-овечьего типа у взрослых. Прививкам подлежат лица, выполняющие следующие работы:
- по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрируются заболевания скота бруцеллезом;
- по убою скота, больного бруцеллезом, заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов
Животноводы, ветеринарные работники, зоотехники в хозяйствах, энзоотичных по бруцеллезу. Лица, работающие с живыми культурами возбудителя бруцеллеза.
Прививки следует проводить не позднее, чем за 3-4 недели до начала работы, связанной с риском за ражения.
Перед каждой прививкой у вакцинируемого в обязательном порядке определяют наличие специфического иммунитета с помощью одной из серологических или кожно-аллергических реакций. Прививкам подлежат лица с отрицательной реакцией.
Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно. Одна доза при накожном введении составляет 2 капли и содержит 1*10 10 микробных клеток, при подкожном ведении 0,5 мл и содержит 4*10 8 микробных клеток. Ревакцинацию проводят через 10-12 мес. накожно, используя половинную дозу (5*10 9 ).
Допускается одновременная накожная вакцинация живыми вакцинами против бруцеллеза с прививками против одной из следующих инфекций: ку-риккетсиоза, туляремии и чумы.
Не подлежит применению вакцина, целостность упаковки которой повреждена, с измененными физическими свойствами (посторонние примеси, не растворяющиеся хлопья), с истекшим сроком годности, при нарушении режима хранения.
Вскрытие ампул и процедуру введения препарата осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Разведенная вакцина, сохраняемая с соблюдением правил асептики, может быть использована в течение 2 ч. Неиспользованную вакцину уничтожают кипячением в течение 30 мин.
Проведенную прививку регистрируют в установленных учетных формах с указанием наименования препарата, даты прививки, дозы, название предприятия-изготовителя препарата, номера серии, реакции на прививку.
Препарат растворяют 0, 9%-м раствором натрия хлорида для инъекций, который вносят в ампулу стерильным шприцем с иглой из расчета 0, 1 мл (2 капли) на одну прививочную дозу. Ампулу встряхивают до образования равномерной суспензии. Время растворения вакцины не должно превышать 1 мин. Раствори мый препарат не должен содержать осадков или хлопьев. Место прививки, наружную поверхность средней трети плеча, обрабатывают спиртом или смесью спирта с эфиром; применение дезинфицирующих растворов не допускается. После испарения спирта и эфира, не прикасаясь к коже, наносят две капли вакцины на расстоянии 30-40 мм друг от друга, кожу натягивают и стерильным скарификатором проводят через каждую нанесенную каплю вакцины 6 насечек (3 продольных и 3 поперечных) длиной 10 мм каждая с расстоянием между насечками 3 мм. Насечки не должны кровоточить, кровь должна выступать только росинками.
Плоской стороной скарификатора втирают вакцину в насечки в течение 30 сек. и дают подсохнуть 5 мин. При ревакцинации применяют половинную дозу, т. е. 1 кашпо вакцины, через которую делают 6 насечек.
Прививочная доза препарата при этом способе в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации; раз ведение вакцины производят из расчета 12, 5 мл 0, 9%-го раствора натрия хлорида для инъекций на одну дозу вакцины для накожного применения (подкожная доза 0, 5 мл х 25 = 12, 5 мл). Препарат, содержащийся в ампуле, растворяют так же, как для накожной вакцинации, после чего полученную суспензию переносят в стерильный флакон для инъектора, в который вносят необходимый объем растворителя (например, если в ампуле содержится 7 накожных доз вакцины, то содержимое должно быть суспендированным в 12, 5 мл х 7, т. е. в 87, 5 мл).
Прививки проводят в область наружной поверхности плеча на границе между верхней и средней тре тью. Место введения обрабатывают так же, как и при накожной прививке. Вакцину вводят в объеме 0, 5 мл при режиме работы инъектора, рассчитанном на подкожное введение (согласно Инструкции по применению инъектора БИ-ЗМ и противоинфекционным протектором ППИ-2).
Местная и общая реакция на вакцинацию незначительны. Местная реакция при накожной вакцина ции может появиться через 24-48 ч в виде гиперемии, инфильтрата кожи или в виде розово-красных узелков по ходу насечек, иногда сливающихся в валик или образующих небольшую припухлость. При безыгольном методе введения через 12-24 ч на месте инъекции могут появиться гиперемия, инфильтрат диаметром до 25 мм, слабая болезненность. Общая реакция возникает в первые сутки у 1-2% привитых и выражается недомоганием, головной болью, повышением температуры тела до 37, 5-38 °С.
Учитывая возможность развития анафилактического шока у отдельных высокочувствительных лиц, вакцинированный должен находиться под медицинским наблюдением не менее 30 мин. Места проведе ния прививок должны быть обеспечены средствами противошоковой терапии.
- Переболевание бруцеллезом. Положительная серологическая или кожно-аллергическая реакция на бруцеллез.
- Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения - прививки проводят не ранее, чем через 1 мес. после выздоровления (ремиссии).
- Первичные и вторичные иммунодефициты. При лечении стероидами, антиметаболитами, химио- и рентгенотерапии - прививки проводят не ранее, чем через 6 мес. после окончания лечения.
- Системные заболевания соединительной ткани.
- Злокачественные новообразования и злокачественные болезни крови.
- Распространенные рецидивирующие заболевания кожи.
- Аллергические заболевания (бронхиальная астма, анафилактический шок, отек Квинке в анамнезе).
- Беременность и период лактации.
С целью выявления противопоказаний врач (фельдшер) в день прививки проводит опрос и осмотр прививаемого с обязательной термометрией. При температуре выше 37 °С прививка откладывается. В случае необходимости проводят необходимое лабораторное обследование.
Прививки против бруцеллеза проводят не ранее, чем через 1 мес. после других профилактических прививок или за 1 мес. до них.
Категорически запрещается вводить подкожно вакцину, разведенную для накожного применения.
По 1 мл (4-10 накожных доз) в ампуле. Упаковка содержит 5 ампул. Срок годности - 3 года
Вакцину хранят и транспортируют в соответствии с СП 3. 3. 2. 028. 95 при температуре не выше 8 °С.
Рекламации на физические и другие свойства препарата направляют в ГИСК им. Л. А. Тарасовича (121002, Москва, Сивцев-Вражек, д. 41, тел/факс (095) 241-39-22) и в адрес предприятия-изготовителя.
О случаях повышенной реактогенности или развития поствакцинальных осложнений следует сооб щить по телеграфу или телефону с последующим представлением медицинской документации в ГИСК им. Л. А. Тарасевича.
Действующее вещество:
Инструкция по медицинскому применению
Вакцина бруцеллезная живая сухая
Инструкция по медицинскому применению - РУ № Р N003612/01
Дата последнего изменения: 28.04.2017
Лиофилизат для приготовления суспензии для подкожного введения и накожного скарификационного нанесения.
Одна доза вакцины для подкожного введения взрослым содержит от 3,4 х 108 до 4,6 х 108 живых микробных клеток (м.к.) в 0,5 мл, для накожного скарификационного нанесения - от 4 х 109 до 1,6 х Ю10 живых м.к. в 0,1 мл растворителя. В зависимости от количества живых микробных клеток в ампуле должно содержаться от 4 до 10 накожных доз.
В одной дозе вакцины для накожного скарификационного нанесения, содержатся стабилизаторы: сахароза - 0,015 г, натрия глутамата моногидрат - 0,00225 г, тиомочевина -0,00075 г, желатин - 0,00225 г.
Имеет вид пористой массы белого или белого с желтоватым оттенком цвета.
Препарат представляет собой лиофилизированную культуру живых микробов вакцинного штамма Brucella abortus 19 BA.
Вакцина через 20-30 дней после прививки обеспечивает развитие иммунитета продолжительностью 10-12 месяцев, максимальная напряженность иммунитета сохраняется 5-6 месяцев.
Профилактика бруцеллеза козье-овечьего типа у взрослых.
Прививкам подлежат лица, выполняющие следующие работы:
- по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрируются заболевания скота бруцеллезом;
- по убою скота, больного бруцеллезом, по заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов.
Животноводы, ветеринарные работники, зоотехники в хозяйствах энзоотичных по бруцеллезу.
Лица, работающие с живыми культурами возбудителя бруцеллеза.
- Перенесенный бруцеллез в анамнезе. Положительная серологическая или кожноаллергическая реакция на бруцеллез.
- Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения - прививки проводят не ранее, чем через 1 мес. после выздоровления (ремиссии).
- Первичные и вторичные иммунодефициты. При лечении стероидами, антиметаболитами, химио- и рентгенотерапии прививки проводят не ранее, чем через 6 мес. после окончания лечения.
- Системные заболевания соединительной ткани.
- Злокачественные новообразования и злокачественные болезни крови.
- Распространенные рецидивирующие заболевания кожи.
- Аллергические заболевания (бронхиальная астма, анафилактический шок, отек Квинке в анамнезе).
- Беременность и период лактации.
Применение препарата противопоказано.
Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно. Одна доза при накожном введении составляет 2 капли (0,1 мл) и содержит 1х10 10 м.к., при подкожном введении составляет 0,5 мл и содержит 4х10 8 м.к. Ревакцинацию проводят по показаниям через 10-12 мес. накожно, используя половинную дозу, которая составляет 1 каплю (0,05 мл) и содержит 5 х 10 9 м.к.
С целью выявления противопоказаний врач (фельдшер) в день прививки проводит опрос и осмотр прививаемого с обязательной термометрией. При температуре выше 37°С прививка откладывается. В случае необходимости проводят необходимое лабораторное обследование.
Перед каждой прививкой у вакцинируемого в обязательном порядке определяют наличие специфического иммунитета с помощью одной из серологических или кожно-аллергических реакций. Прививкам подлежат лица с отрицательной реакцией.
Прививки следует проводить не позднее, чем за 3-4 недели до начала работы, связанной с риском заражения.
Проведенную прививку регистрируют в установленных учетных формах с указанием наименования препарата, даты прививки, дозы, названия предприятия- изготовителя препарата, номера серии, реакции на прививку.
Вакцинация накожным способом
Препарат растворяют натрия хлорида раствором для инъекций 0,9%, который вносят в ампулу стерильным шприцем с иглой из расчета 0,1 мл на одну прививочную дозу. Ампулу встряхивают до образования равномерной суспензии. Время растворения вакцины не должно превышать 1 мин. Растворимый препарат не должен содержать осадков или хлопьев. Место прививки - наружную поверхность средней трети плеча - обрабатывают спиртом или смесью спирта с эфиром; применение других дезинфицирующих средств не допускается. После испарения спирта и эфира, не прикасаясь к коже, наносят две капли вакцины на расстоянии 30-40 мм друг от друга, кожу натягивают и стерильным скарификатором проводят через каждую нанесенную каплю вакцины 6 насечек (3 продольные и 3 поперечные) длиной 10 мм каждая с расстоянием между насечками 3 мм. Насечки не должны кровоточить, кровь должна выступать только росинками.
Плоской стороной скарификатора втирают вакцину в насечки в течение 30 сек и дают подсохнуть 5 мин.
При ревакцинации применяют половинную дозу, т.е. 1 каплю вакцины, через которую делают 6 насечек.
Вакцинация подкожным способом
Прививочная доза препарата при этом способе в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации; разведение вакцины производят из расчета 12,5 мл натрия хлорида раствора для инъекций 0,9% на одну дозу вакцины для накожного скарификационного нанесения (подкожная доза - 0,5 мл х 25 = 12,5 мл).
Препарат растворяют так же, как для накожной вакцинации, после чего полученную суспензию переносят в стерильный флакон для инъектора, в который вносят необходимый объем растворителя (например, если в ампуле содержится 7 накожных доз вакцины, то содержимое должно быть суспендированным в 12,5 мл х 7, т.е. в 87,5 мл).
Вакцину вводят инъектором, рассчитанном на подкожное введение (БИ-ЗМ или противоинфекционным протектором ППИ-2), согласно Инструкции по применению инъектора в объеме 0,5 мл.
Прививки проводят в область наружной поверхности плеча на границе между верхней и средней третью. Место введения обрабатывают так же, как и при накожной прививке.
Местная и общая реакция на вакцинацию незначительны. Местная реакция при накожной прививке может появиться через 24-48 ч в виде гиперемии, инфильтрата кожи или в виде розово-красных узелков по ходу насечек, иногда сливающихся в валик или образующихся небольшую припухлость. При безыгольном методе введения через 12-24 ч на месте инъекции могут появиться гиперемия, инфильтрат диаметром до 25 мм, слабая болезненность. Общая реакция возникает в первые сутки у 1-2% привитых и выражается недомоганием, головной болью, повышением температуры тела до 37,5 - 38°С.
Прививки против бруцеллеза проводят не ранее, чем через 1 мес. после других профилактических прививок или за 1 мес. до них.
Допускается одновременная накожная вакцинация живыми вакцинами против бруцеллеза с прививками против одной из следующих инфекций: ку-риккетсиоза, туляремии и чумы.
Сведения о возможном влиянии лекарственного препарата на способность управлять транспортными средствами, механизмами
Лиофилизат для приготовления суспензии для подкожного введения и накожного скарификационного нанесения. По 4-10 накожных доз в ампуле. По 5 ампул в пачке вместе с инструкцией по применению и ножом ампульным или скарификатором ампульным.
При упаковке ампул с кольцом или точкой для вскрытия нож ампульный или скарификатор ампульный не вкладывают.
В соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8°С.
В соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8°С в недоступном для детей месте.
3 года. Препарат с истекшим сроком годности применению не подлежит.
Бруцеллез (Brucellosis) — инфекционная, хронически протекающая болезнь домашних, некоторые виды диких животных и человека, характеризующаяся поражением многих систем жизнеобеспечения, нарушением функций сосудистой, пищеварительной, мочеполовой систем и системы воспроизводства.
Изучая причины мальтийской лихорадки, английский врач Д. Брюс в 1886 – 1887 гг. установил, что виновником ее является специфический микрококк, названный им Micrococcus melitensis. Дальнейшие исследования показали, что источником возбудителя мальтийской лихорадки являются козы, пораженные инфекцией, а причиной заражения людей — потребление молока от таких коз. Несколько позже Micrococcus melitensis был выделен у овец.
В1897 г. датские ученые Банг и Стриболд установили, что массовые аборты у коров вызывает микроорганизм, названные B. abortus bovis. В 1914 г. Траум обнаружил очень сходный микроорганизм, названный Br. abortus suis, при массовых абортах у свиней.
Для диагностики бруцеллеза в 1897 г. Райтом была предложена серологическая реакция агглютинации, а в 1922 г. Берне разработал внутрикожную аллергическую пробу, облегчающую распознавание болезни.
Долгое время мальтийская лихорадка у людей и массовые аборты у домашних животных считались самостоятельными заболеваниями. В 1918 – 1920 гг. Ивенс, Мейер и Фезье, изучая биологические свойства возбудителя мальтийской лихорадки и массовых абортов у крупного рогатого скота, обнаружили их чрезвычайную близость. Эти исследования явились основанием объединить указанных возбудителей, в том числе и возбудителя массовых абортов у свиней, в одну родовую группу под наименованием Brucella (в честь Брюса), а вызываемые ими заболевания именовать бруцеллезом.
В России начало изучения бруцеллеза было положено работами Е. И. Марциновского (1911), но детальному изучению заболевание подверглось в различных местностях СССР лишь с 1935 г. Большой вклад в изучение бруцеллеза сельскохозяйственных животных внесли отечественные ученые: С. Н. Вышелесский, П. Ф. Здродовский, П. А. Вершилова, М. К. Юсковец, Е. С. Орлов, Р. А. Цион, А. П. Бессонов и др. Были всесторонне изучены биологические свойства возбудителя, усовершенствованы методы диагностики, показаны значение в борьбе с бруцеллезом вакцинальной профилактики и пути ее совершенствования.
Клинические признаки бруцеллеза у крупного рогатого скота
Длительность инкубационного периода 2 – 3 недели. Первым показателем развившегося инфекционного процесса служит появление в крови инфицированных животных агглютининов в постепенно нарастающих титрах.
У коров основным клиническим признаком бруцеллеза является аборт и реже рождение нежизнеспособного приплода. Коровы, заразившиеся до покрытия, в большинстве случаев приносят нормальный приплод. Аборт чаще всего происходит на 5 – 8-м месяце. За 1 – 2 дня до наступления аборта у коров отмечается припухание наружных половых органов, выделение из влагалища бесцветной или буроватой жидкости и набухание вымени. После аборта происходит задержка последа и развивается эндометрит, сопровождающийся обильными слизисто-гнойными или гнойно-фибринозными выделениями. При тяжело протекающем эндометрите повышается температура тела, снижаются удои, отмечается потеря веса, убыстряется СОЭ; умеренный лейкоцитоз. Эндометритам нередко сопутствуют серозные или серозно-катаральные маститы. В процессе могут вовлекаться яичники и фаллопиевы трубы, что приводит к нарушению полового цикла и временному или стойкому бесплодию.
У отдельных животных в связи с абортом или независимо от него можно наблюдать развитие серозных бурситов или серофибринозных артритов. Последние в большинстве случаев возникают в суставах передних конечностей — запястном, путовом, коленном, локтевом. У быков бруцеллез, хотя и редко, сопровождается развитием орхитов и эпидидимитов.
Лабораторная диагностика бруцеллеза основана на результатах бактериологического и серологического исследований. Бактериологическое исследование в основном применяют при первичной постановке диагноза на бруцеллез в ранее благополучных хозяйствах.
В лабораторию направляются пробы крови (сыворотки) для серологического исследования, абортивный плод с плодными оболочками, околоплодную жидкость, истечения из родовых путей или желудок плода, кусочки печени, селезенки, пробы молока (последние порции). При убое животных берут паренхиматозные органы, лимфатические узлы, пораженные суставы, у самцов — семенники. Объектом исследования могут быть молочные продукты (брынза, сыр, масло), объекты внешней среды.
При массовых диагностических исследованиях ставят пробирочную РА, роз бенгал пробу (РА на стекле), РСК, РДСК, кольцевую реакцию с молоком (КР). Диагностикумы для этих исследований, а также бруцеллин ВИЭВ для аллергической диагностики готовятся на Щелковском биокомбинате.
По данным К. В. Шумилова до 1952 года борьба с бруцеллезом крупного рогатого скота в нашей стране сводилась к проведению диагностических исследований и удалению из стад больных животных, без применения противобруцеллезных вакцин. В связи с осложнением эпизоотической ситуации в 1953 году в систему противобруцеллезных мероприятий была включена иммунизация животных вакциной из штамма B. abortus 19.
Вакцину из штамма B. abortus 19 применяли до 1970 года. За 20 лет применения вакцины многие хозяйства, даже области, были оздоровлены от болезни. Однако в регионах с широким распространением бруцеллеза эффективность оздоровительных мероприятий оказалась низкой. В первую очередь, это было обусловлено высокой агглютиногенностью вакцины. Агглютинины и комплементсвязывающие антитела, вырабатывающиеся в ответ на введение вакцины, сохраняются в организме животных до 5 – 8 лет и затрудняют дифференциацию иммунизированных животных от больных бруцеллезом.
С 1971 по 1974 год вакцину из штамма B. abortus 19 использовали только на телках 5 – 8 месячного возраста. С 1974 года и по настоящее время в России в комплексе противобруцеллезных мероприятий применяются вакцины из штаммов B. abortus 82 и 19. Живая сухая вакцина против бруцеллеза из слабоагглютиногенного штамма № 82 отличается от вакцины из штамма 19 слабым серологическим ответом с быстрым снижением уровня гуморальных антител, что позволяет при помощи серологических реакций дифференцировать вакцинированных животных.
За 30 лет работы с применением вакцины из штамма B. abortus 82 и смены пяти поколений коров к 2004 году (К. В. Шумилов) количество неблагополучных по бруцеллезу пунктов и заболевших животных значительно сократилось.
Сухая живая вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма B. abortus 75/79-АВ разработана сотрудниками ВГНКИ и Алтайской НИВС с использованием культуры штамма 75/79, выделенного от коровы, ранее иммунизированной вакциной из штамма B. abortus 82. После многократных пассажей выделенного штамма через организм морских свинок и телок и целенаправленной селекции на питательных средах, был получен новый вакцинный штамм 75/79-АВ. Вакцины не обладает абортогенными свойствами, что дает возможность проводить иммунизацию маточного поголовья независимо от сроков стельности. Вакцина является слабоагглютиногенной; агглютинины и комплементсвязывающие антитела регистрируются у привитых животных в течение трех месяцев после иммунизации, что делает возможным их исследование по истечении указанного срока. У животных, иммунизированных вакциной, выраженный иммунитет сохраняется в течение года, что позволяет за указанный срок оздоравливать неблагополучные хозяйства от бруцеллеза.
Штамм B. abortus КВ 17/100, находящийся в R-форме, получен путем целенаправленной селекции по культуральным, морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам из вакцинного штамма B. abortus 104М, находящегося в S-форме. Адъювант-вакцина не индуцирует синтез S-бруцеллезных антител в диагностических титрах у животных, не сенсибилизированных бруцеллами. Адъювант-вакцина индуцирует синтез S-бруцеллезных антител у крупного рогатого скота с латентной формой бруцеллеза, что позволяет за счет быстрого удаления из стад таких животных, ускорить оздоровление хозяйств, неблагополучных по бруцеллезу.
Адъювант-вакцина не абортогенна и может быть использована для иммунизации маточного поголовья крупного рогатого скота независимо от сроков стельности.
Состав. Вакцина представляет собой лиофилизированную живую культуру вакцинного штамма Вг. abortus 19-ВА.
Выпускаетсяв ампулах во 1,0 мл (5-10 доз), по 5 ампул в упаковке, имеет вид однородной аморфной или кристаллической массы белого или желтоватого цвета.
Назначение. Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза козье - овечьего вида у взрослых с 18 лет. Обеспечивает развитие иммунитета продолжительностью 10—12 мес.
Способ введения и дозировка. Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно, ревакцинацию — накожно, интервал между прививками составляет 10— 12 мес. Для вакцинации накожным способом препарат вводят в наружную поверхность средней трети плеча. 2 капли вакцины наносят на расстоянии 30 - 40 мм друг от друга, кожу натягивают и стерильным оспопрививателем пером производят через каждую каплю 6 насечек. При ревакцинации применяют половинную дозу, т. е. наносят 1 каплю, через которую делают 6 насечек. Для вакцинации подкожным способом препарат вводят по 1 мл в область наружной поверхности плеча. Прививочная доза препарата в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации.
Противопоказания— острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения или декомпенсации, аллергические заболевания, коллагенозы, болезни крови, беременность, переболевшие бруцеллезом (положительная серологическая или аллергическая реакция на бруцеллез), лечение стероидными гормонами, антиметаболитами, рентгенотерапия, злокачественные новообразования.
Экзаменационный билет №27
Иммуноферментный анализ, радиоиммунный анализ, иммуноблоттинг. Механизм, компоненты, применение.
Ответ: Иммуноферментный метод, или анализ (ИФА)ИФА — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой. После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом, и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.
Твердофазный ИФА — наиболее распространенный вариант иммунологического теста, когда один из компонентов иммунной реакции (антиген или антитела) сорбирован на твердом носителе, например в лунках планшеток из полистирола (рис. 13.11).
При определении антител в лунки планшеток с сорбированным антигеном последовательно добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную ферментом, и субстрат (хромоген) для фермента.
Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют несвязавшие- ся реагенты путем тщательного промывания. При положительном результате изменяется цвет раствора хромогена. Твердофазный носитель можно сенсибилизировать не только антигеном, но и антителами. Тогда в лунки с сорбированными антителами вносят искомый антиген, добавляют иммунную сыворотку против антигена, меченную ферментом, а затем субстрата для фермента.
Конкурентный вариант ИФА: искомый антиген и меченный ферментом антиген конкурируют друг с другом за связывание ограниченного количества антител иммунной сыворотки. Другой тест — искомые антитела и меченые антитела конкурируют друг с другом за антигены.
ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В и др., а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ, содержащихся в исследуемом материале в минорных концентрациях — 10 |(| н-10 12 г/л.
Радиоиммунологический метод, или анализ (РИА)
Высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген—антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом ( 125 J, 14 С, 3 Н, 51 Сг и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение):
интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.
При твердофазном варианте РИА один из компонентов реакции (антиген или антитела) сорбирован на твердом носителе, например в лунках микропанелей из полистирола. Другой вариант метода — конкурентный РИА. искомый антиген и меченный радионуклидом антиген конкурируют друг с другом за связывание ограниченного количества антител иммунной сыворотки. Этот вариант используют для определения количества антигена в исследуемом материале.
РИА применяют для выявления антигенов микробов, определения гормонов, ферментов, лекарственных веществ и иммуноглобулинов, а также иных веществ, содержащихся в исследуемом материале в минорных концентрациях — 10"'°-н10" 12 г/л. Метод представляет определенную экологическую опасность.
Иммуноблоттинг (ИБ)— высокочувствительный метод, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА.
антигенов. На эти полоски наносят сыворотку больного. Затем после инкубации отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. Образовавшийся на полоске комплекс антиген + антитело больного + антитело против Ig человека выявляют добавлением субстрата/хромогена, изменяющего окраску под действием фермента (рис. 13.12).
ИБ используют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции и др.
Ответ:Диагноз гепатит В позволяют поставить следующие симптомы: боль в эпигостральной области справа, печень уплотненная, болезненная, так как клиническая картина гепатита В характеризуются поражением печени. От других видов гепатита позволяет отдеференцировать то, что заболевание передается при половом контакте, через микротравмы.
Переход острой формы в хроническую обеспечивается нарушением Т-клеточного иммунитета. Первичная инфекция характеризующаяся исчезновением из крови НВе-антигена и появлением антител к нему: анти-HBc-IgM анти-HBe-IgM, анти- HBc-IgG, анти-HBs антител
Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).
Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.
Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.
Состав. Препарат представляет собой лиофилизированные живые бактерии вакцинного штамма Br.abortus 19ВА.
Иммунологические свойства. Вакцинация обеспечивает формирование иммунитета через 20-30 дней после прививки продолжительностью 10-12 мес.
Назначение. Профилактика бруцеллеза козье-овечьего вида с 14 летнего возраста.
Применение и дозы. Препарат вводят однократно накожно или подкожно (безыгольным инъектором). Для накожного применения в ампулу вносят растворитель (0,9 %-ный раствор натрия хлорида) из расчета 0,1 мл на одну прививочную дозу (количество доз в ампуле указано на этикетке). Доза для подкожного введения в 25 раз меньше, чем для накожной вакцинации, поэтому препарат, разведенный для накожной вакцинации, дополнительно разводят в 25 раз. Ревакцинацию проводят накожно через 10-12 мес половинной дозой.
Противопоказания. Перенесенный бруцеллез, положительная серологическая или аллергическая реакция на бруцеллез. Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, обострение хронического заболевания - прививки проводят не ранее 1 мес после выздоровления (ремиссии). Аллергические заболевания, заболевания соединительной ткани, болезни крови, беременность. Первичные иммунодефициты; после лечения стероидными гормонами, антиметаболитами, рентгенотерапии - прививки проводят не ранее, чем через 6 мес после окончания терапии; болезни кожи с обширным поражением. Злокачественные новообразования.
Побочные действия. Повышение температуры в первые сутки до 37,5-38,0 °С не более, чем у 1 % привитых, развитие местной реакции при накожном введении через 24-48 ч в виде гиперемии, инфильтрата или появлении розово-красных узелков по ходу насечек, иногда сливающихся в валик, при безыгольном введении через 12-24 ч в виде гиперемии, инфильтрата, болезненности до 2 сут.
Взаимодействие с другими МИБП. Допускается одновременная вакцинация накожным способом против бруцеллеза и одной из следующихвакцин: Ку – лихорадки, чумы, туляремии на разных участках кожи.
Предостережения. Категорически запрещается вводить подкожно вакцину, разведенную для накожного применения.
Информация для медицинского персонала. Перед прививкой у вакцинируемого в обязательном порядке определяют наличие специфического иммунитета с помощью одной из серологических или кожно-аллергической реакций.
Срок годности. 3 г.
Форма выпуска. В ампулах по 1 мл (4-10 доз).
АЛЛЕРГЕН БРУЦЕЛЛЕЗНЫЙ ЖИДКИЙ
ДЛЯ ВНУТРИКОЖНОГО ПРИМЕНЕНИЯ
Состав. Препарат представляет собой 0,1 % раствор полисахаридно – белкового компонента, выделенного из Br.Abortus 19BA, в 1 мл содержит, 10 внутрикожных доз.
Иммунологические свойства. Больные (с 7-9-го дня заболевания) , переболевшие бруцеллезом и имеющие иммунитет лица отвечают на введение аллергена местной реакцией в виде гиперемии, отека, инфильтрата и болезненности, интенсивность которых зависит от тяжести заболевания и степени сенсибилизации.
Назначение. Выявление аллергической перестройки у больных, переболевших и вакцинированных против бруцеллеза.
Применения и дозы. Препарат вводят строго внутрикожно в сгибательную поверхность средней трети предплечья в объеме 0,1 мл. Учет реакции проводят через 24 ч, при отрицательном результате - дополнительно через 48 ч и 72 ч. Слабоположительная реакция характеризуется гиперемией и отеком (или инфильтратом), площадью до 4 см 2 , положительная - площадью от 4 см 2 до 20 см 2 , резко положительная - более 20 см 2 . Диагноз бруцеллеза подтверждают при положительной и резко положительной реакции.
Противопоказания. Декомпенсированные заболевания, бронхиальная астма и другие аллергические заболевания, аллергические реакции в анамнезе, заболевания кожи, беременность. После острых инфекционных и неинфекционных заболеваний, хронических в стадии обострения кожную пробу ставят не реже чем через 1 мес после выздоровления (ремиссии).
Побочные действия. Не обладает сенсибилизирующим и агглютиногенными свойствами. Не вызывает реакции у лиц, не инфицированных возбудителем бруцеллеза. У лиц, высоко сенсибилизированных к бруцеллезному антигену, возможно развитие общих реакций с повышением температуры тела до 38 °С, ознобом, головной болью, недомоганием, лимфангоитом, болями в суставах, болезненностью в месте введения.
Срок годности. 2 г.
Форма выпуска. В ампулах по 1 мл.
Вакцина брюшнотифозная спиртовая
Состав. Вакцина представляет собой брюшнотифозные бактерии, инактивированные этиловым спиртом;
Иммунологические свойства. Двукратное введение препарата обеспечивает защиту 65% привитых от заболевания брюшным тифом в течение 2-х лет.
Назначение. Профилактика брюшного тифа у взрослых (мужчины до 60 лет, женщины до 55 лет).
Применение и дозы. Вакцинацию проводят 2-кратно с интервалом 25-30 сут первая вакцинация 0,5 мл, II вакцинация – 1,0 мл. Ревакцинацию проводят через 2 г в дозе 1,0 мл. Препарат вводят подкожно в подлопаточную область.
Противопоказания. Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, обострение хронических заболеваний – прививку проводят не ранее, чем через 1 мес после выздоровления (ремиссии); острые и хронические заболевания печени и желчных путей; острые и хронические заболевания почек; Болезни эндокринной системы; болезни сердечно-сосудистой системы: ревматизм, пороки сердца, миокардит, гипертоническая болезнь; бронхиальная астма и другие аллергические заболевания; системные заболевания соединительной ткани; инфекционные и неинфекционные заболевания центральной нервной системы; наличие в анамнезе заболеваний, сопровождающихся судорогами; болезни крови, злокачественные новообразования; беременность.
Побочное действие. Общая реакция проявляется через 5-6 час и выражается повышением температуры, недомоганием, головной болью. Продолжительность реакции, как правило, не превышает 48 ч. Местная реакция характеризуется гиперемией кожи, болезненностью, образованием инфильтрата, продолжительностью 3-4 сут.
Срок годности. 2 г 6 мес.
Форма выпуска. В ампулах по 5 млр микр.кл.
Читайте также: