Иммуногистохимия опухолей. Маркерные белки промежуточных волокон.

Добавил пользователь Владимир З.
Обновлено: 21.12.2024

Электронная микроскопия позволила выявить в клетках тонкие (актиноеые) волокна толщиной около 6 им, промежуточные волокна толщиной 7—11 нм и микротрубочки толщиной 24 нм.

Промежуточные волокна участвуют в построении цитоскелета и имеются практически во всех клетках организма. Они связаны с процессами морфогенеза, участвуя в сложных межклеточных взаимодействиях, их значение для функции отдельной клетки, по-видимому, не существенно. В промежуточных волокнах обнаружено 5 основных типов белков виметин, десмин, цитокератин (прекератин), белок нейрофиламентов, белок глиальных фнламентов. В клетках мезенхимального происхождения промежуточные волокна состоят из виметииа, в клетках миогенного характера — из десмина, в эпителиальных клетках — из цитокератнна, в клетках глии — из белка глии, в нервных клетках — из так называемых белков нейрофиламентов. Из этого правила есть небольшие исключения, требующие объяснения.

Так, клетки радужки и хрусталика, являющиеся эпителиальными, содержат промежуточные волокна, построенные из виметииа, гладкомышечные клетки аорты содержат промежуточные волокна преимущественно из внметина, а не из десмина, как все остальные мышечные клетки. В некоторых нейронах нет промежуточных волокон. Перечисленные выше типы белков промежуточных волокон, образуя одно семейство, в то же время четко отличаются друг от друга по физико-химическим (имеют разную молекулярную массу) и иммунологическим свойст вам.

Моноклональные антитела в отличие от поликлоиальных позволяют определять широкий диапазон белков промежуточных волокон — от детерминант общих для всех типов белков до индивидуальных пептидов. Поэтому белки промежуточных волокон, как справедливо подчеркивает Г. А. Банников (1984), могут служить прекрасными маркерами определенного типа клеток как в исследованиях по изучению нормативного эмбриогенеза и дефференцировкн, так н при исследованиях патологических процессов, в частности, опухолевом росте.

Белки промежуточных волокон клетки эпителиального происхождения — цитокератины — составляют наибольшую группу, включающую 19 различных полипептидов, которые определенным образом распределены в эпителиальных тканях. Цитокератины многослойного и однослойного эпителия, клеток базаль-ного и шиповатого слоев, эпителиальные клетки различных внутренних органов содержат разные цитокератины или их наборы, причем в одном органе может выявляться значительная гетерогенность клеток по признаку содержания в них цнтокератинов. Распределение цитокератинов в различных эпителиальных клетках строго специфично.

Имеются наблюдения о том, что в некоторых клетках встречаются два типа белков, принадлежащих к промежуточным волокнам различного тканевого происхождения. Десмин и виметин обнаружены в мезангиальных клетках почки и в гладкомышечных клетках аорты. Некоторые астроциты содержат белок глиальных фила ментов и виметин. Перечисленные исключения, с одной стороны, подтверждают правило о высокой специфичности белков промежуточных волокон как маркеров тканевого происхождения клеток, с другой — требуют пересмотра некоторых, казалось бы, устоявшихся представлений о гистогенезе отдельных типов клеток.

Г. А. Банников (1984) проанализировал сведения о сроках появления белков промежуточных волокон в онтогенезе. Первыми на стадии поздней морулы появляются цитокератины вначале — цитокератины однослойных эядодермальных, затем многослойных эктодермальных клеток. Десмин, белок глиальных и нейроиальных фила ментов в полной мере появляются в лостнатальном периоде. Сроки появления виметина в онтогенезе сильно колеблются. В париетальной эндодерме эмбриона происходит одновременная выработка цитокератина и виметина, у взрослых виметин из этой ткани исчезает. Клетки мезодермы синтезируют виметин, многочисленные мезенхимальные клетки, возникшие из мезодермы, продолжают синтезировать виметин во взрослом организме, различные виды мышечной ткани переключаются в этот период онтогенеза на синтез десмина. Эпителиальные ткани, возникшие из мезодермы, например почки, переключаются с синтеза виметина на синтез цитокератинов. При развитии нейронов виметин полностью заменяется белком нейральных филаментов. В глиальных клетках также синтез виметина замещается синтезом белков глиальных филаментов.

Накопление фактического материала о закономерностях синтеза белков промежуточных волокон в эмбриогенезе крайне важно для понимания этих закономерностей в опухолевых клетках.

Иммуногистохимическое изучение с помощью моноклональных антител белков промежуточных волокон в опухолевых клетках различных эпителиальных и мезенхнмальных новообразований показало, что в них стойко сохраняются те белки, которые характерны для промежуточных волокон нормальных клеток, явившихся

На клиническом материале были исследованы раковые опухоли молочной железы, толстой кишки, кожи, легких, щитовидной железы, почки, печени, различные саркомы мышечного, нейрогенного, фибробластического происхождения, разнообразные типы лимфосарком и т. д. Во всех случаях в опухолевых клетках эпителиального происхождения обнаружены различные цитокератины, в опухолях мышечного происхождения — десмин, иногда в сочетании с виметином; в новообразованиях глиального происхождения — белок глиальных филаментов, в нейрогекных опухолях — белки нейрофнла ментов Следует подчеркнуть, что в раковых опухолях, как правило, сохраняется сложный набор цитокератинов, присущий промежуточным волокнам гомологичных нормальных клеток 8 некоторых раках опухолевые клетки содержат неполный набор цитокератинов, характерных для соответствующих нормальных тканей. Это явление может быть объяснено развитием в новообразованиях ограниченного набора типов опухолевых дифференцированных клеток или ограниченной степенью дифференцировки, о чем свидетельствуют электронно-микроскопические исследования.

С электронно-микроскопических позиций может быть объяснен к редкий случай обнаружения в одном новообразовании анально-ректальной области опухолевых клеток с различными цитокератинами, свойственными разным эпителиальным тканям (железистому н многослойному плоскому эпителиям). При ультраструктурном исследовании в одном и том же новообразовании нередко обнаруживаются клетки с признаками и плоского (тонофибриллы и т. д.), и железистого эпителия. В электронно-микроскопической идентификации нуждаются и редкие случаи, когда в раковых опухолях клетки содержатся цитокератины, отсутствующие в дифференцированных клетках исходной ткани. Как показал ультраструктурный анализ, некоторые новообразования состоят только из недифференцированных клеток, которые могут содержать другие цитокератины, чем соответствующие дифференцированные клетки.

-