Взятие образцов и клеток

Добавил пользователь Alex
Обновлено: 21.12.2024

Взятие патологического материала на гистологию — биопсия — важная часть преаналитического этапа, к выполнению которой нужно подходить со всей возможной ответственностью и подготовкой. Чтобы помочь врачам с этим, мы опишем основные способы взятия материала на гистологию.

Общие рекомендации CYTOVET по взятию материала на гистологию

Полезная заметка:

Punch-биопсия

Панч-биопсия (от англ. punch — дырокол, компостер) — метод взятия патологического материала, преимущественно, кожи с помощью специального трубчатого скальпеля — панча. Этот метод позволяет получить цилиндрический образец ткани заданной высоты и диаметра.

Выбор места биопсии зависит от вида поражения. Поэтому перед взятием материала лучше проконсультироваться с врачом-морфологом.

При взятии материала панч направляют перпендикулярно поверхности кожи, растягивая кожу по сторонам. При этом на панч слегка надавливают сверху вниз и вращают его по и против часовой стрелки до погружения на требуемую глубину. После панч аккуратно извлекают. С помощью иглы из полости скальпеля извлекают биоптат и при помощи острых ножниц или лезвия отделяют нижнюю часть образца от тела пациента. При необходимости на образовавшуюся ранку накладывают швы и бактерицидный пластырь.

Чем раньше сделать биопсию кожного поражения, тем лучше. Оптимальное время для взятия воспалительного элемента на биопсию — 24-36 часов.

Прежде, чем фиксировать взятый материал, сделайте аккуратный отпечаток на предметное стекло, приложив отобранный биоптат боковой стороной к поверхности стекла. Ни в коем случае не делайте мажущие движения по стеклу, чтобы не вызвать раздавливания клеток и не размазать по поверхности стекла жировые клетки подкожной клетчатки, которые будут препятствовать сцеплению других клеток с предметным стеклом.

Core-биопсия

Кор-биопсия (от англ. core — сердцевина), которую также называют сердцевинная или режущая биопсия — метод взятия патологического материала в виде тканевого столбика с помощью специальной иглы на подобии гарпуна и биопсийного пистолета. В отличии от punch-биопсии, которая позволяет брать материал с поверхности тела, core-биопсия делает возможным взятие полноценных гистологических образцов из глубоколежащих тканей и внутренних органов. При этом диаметр иглы такой же, как и при цитопункции, что позволяет обойтись минимальным травмированием животного.

Принцип метода заключается в том, что пистолет с большой скоростью выстреливает в заданную область гарпунную часть иглы. Гарпун имеет желоб, в котором фиксируется образец мягких тканей. После этого с такой же высокой скоростью выстреливается трепанная часть иглы, которая своей режущей кромкой срезает тканевой столбик, расположенный в гарпуне. Таким образом, удаётся получить полноценную ткань образования или внутреннего органа для последующего гистологического исследования.

Для обеспечения точности и правильности биопсии её проводят под контролем УЗИ-аппарата.

Скарификационная биопсия

Скарификационная (поверхностная) биопсия или shaving biopsy (от англ. shave — брить) — метод взятия материала на гистологию путём срезания тонкого слоя тканей с поверхности образования. Данный метод, в основном, применяется при диагностике кожных образований.

Петлевая биопсия

Петлевая (электрохирургическая) биопсия — метод забора тканей с помощью специального коагулятора, представляющего собой тонкую проволочную петлю, через которую проводится высокочастотный электрический ток слабого напряжения. Основная область применения данного метода — эндоскопическая хирургия, а также гинекология.

Щипковая биопсия

Щипковая биопсия — ещё один метод взятия материала для гистологии, используемый в гинекологии и эндоскопической хирургии. Для взятия материала используются специальные биопсийные щипцы — форцепты.

Трепан-биопсия

Трепан-биопсия — метод взятия тканевых образцов при помощи заостренной полой трубки — трепана. Этот метод биопсии используется для забора материала из плотной ткани, например, костной.

Эксцизионная и инцизионная биопсии

Эксцизионная биопсия — метод взятия патологического материала путём полного удаления органа или новообразования в ходе хирургической операции. Является самой масштабной из всех видов биопсии и, помимо диагностической цели, зачастую проводится с целью лечения.

Инцизионная биопсия — метод взятия патологического материала путём удаления лишь поражённого участка органа или части новообразования. Также производится в ходе хирургической операции, но преследует обычно лишь диагностические цели.

Панчи для взятия материала по методу панч-биопсии.

Так проводится панч-биопсия.

Пистолет для взятия материала методом core-биопсии.

Скарификационная биопсия с помощью обычного бритвенного лезвия.

Электрод-петля для проведения электрохирургической биопсии.

Щипцы для взятия образцов ткани при проведении эндоскопии с целью проведения дальнейших морфологических исследований.

Что такое биопсия под УЗИ-навигацией?

Что такое биопсия? Кому и зачем она назначается? Как проводятся эта манипуляция? На эти и другие вопросы ответила Мамедова Сабина Камрановна – врач ультразвуковой диагностики консультативно-диагностического Центра НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова. Она регулярно проводит обследования, направленные на раннее выявление онкологических патологий.

Что такое биопсия?

Биопсия – это взятие образцов тканей и клеток человека для последующей диагностики. Биопсия назначается пациентам в случае подозрения на онкологическое заболевание. Во время исследования врач вводит в подозрительное новообразование тонкую иглу, именно с ее помощью осуществляется забор исследуемого материала.

В большинстве случаев биопсия проводится под ультразвуковым наблюдением, т.е. игла вводится под контролем УЗИ-аппарата. Это позволяет точно визуализировать патологическое новообразование, а также кровоток вокруг него (чтобы не повредить сосуды и предотвратить образование гематом).

Когда пациента направляют на биопсию?

Если в ходе приема врач любой специализации обнаруживает у человека образование, то он направляет пациента к онкологу. Специалист определит характер новообразования – доброкачественное или злокачественное. В этом ему поможет ряд исследований, среди них – имуногистохимическое, гистологическое (тканевое) и/или цитологическое (клеточное). Чтобы это осуществить, онколог направит пациента на биопсию, т.е. забор клеток и тканей новообразования.

Какие виды биопсии бывают?

Пункционная тонкоигольная. Во время манипуляции в новообразование вводится тонкая игла и производится забор материала для цитологического (клеточного) исследования.

Трепан-биопсия. Выполняется под местной анестезией. Во время манипуляции врач вводит в новообразование специальную трепан-иглу и выполняет забор гистологического (тканевого) материала.

Стереотаксическая биопсия. Это более сложная манипуляция, которая проводится в операционной. С помощью специальных аппаратов врачи делают снимки исследуемой локализации. Снимки накладываются друг на друга, что позволяет получить объемное изображение. На его основе специалисты выбирают место введения иглы.

На каких органах проводится биопсия под УЗИ-навигацией?

Данная манипуляция проводиться на молочной железе, щитовидной железе, лимфоузлах различной локализации. Ее применяют для пункции патологических очагов в глубоко расположенных органах (печень, поджелудочная железа, селезенка, почки, опухоли грудной клетки, малого таза, забрюшинного пространства).

Как осуществляется биопсия?

Пациент во время манипуляции находится в положении лежа. Предварительно врач выполняет обезболивание. В большинстве случаев достаточно местной анестезии. Специалист проводит контрольное УЗИ, определяет точное месторасположение новообразования. После того, как анестезия подействует, врач осуществит забор тканей патологического участка. Чаще всего пациент не испытывает болезненные ощущения, но может чувствовать легкое надавливание, жжение, покалывание. Когда забор материала произведен, врач извлекает иглу, а место прокола обрабатывает анестетиком. В некоторых случаях рекомендуется приложить холод на 30-40 минут.

Как быстро заживет прокол?

Разрез от иглы заживает быстро – около 2-3 дней. Один-два дня после манипуляции лучше избегать сильных физических нагрузок и занятий спортом.

Куда направляется биоматериал, полученный во время биопсии?

После выполнения биопсии полученные фрагменты тканей направляют в лабораторию, где проводится их гистологический(тканевый) и/или цитологический(клеточный) анализ. Исследование выполняется в срок от 14 до 45 дней. На основе полученного гистологического и/или цитологического исследования, лечащий врач выберет дальнейшую тактику лечения или наблюдения.

Список литературы:

Мититьков В.В. «Практическое руководство руководство по ультразвуковой диагностике диагностике. Общая ультразвуковая диагностика» , 2018 год, С.69.

Hederstorm E, Forsberg L, Floren CH et al. Liver biopsy complications monitored by ultrasound. Hepatol. 1989. Vol. 8. P. 94.4.

Ткачев В.Д., Логинов А.Г., Аруин Л.И. Современные представления о роли чрескожной биопсии печени в клинической практике. Хронический гепатит. Сб. науч. тр. М., 1988. С. 71.

Алауи Аль-Асс Абдулмаджид. Ультразвуковая диагностика и мини-инвазивные вмешательства при объемных образованиях брюшной полости. Автореф. дис. … канд. мед. наук. Саранск, 2004. С. 17.

Авторская публикация:
Мамедова Сабина Камрановна, врач ультразвуковой диагностики консультативно-диагностического Центра ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России

Что вам необходимо сделать

Если вы хотите узнать побольше о бесплатных возможностях ФБГУ НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова Минздрава России, получить очную или заочную консультацию по диагностике и лечению, записаться на приём, ознакомьтесь с информацией на официальном сайте.

Если вы хотите общаться с нами через социальные сети, обратите внимание на аккаунты в ВКонтакте и Одноклассники.

Взятие образцов и клеток

Биопсия почек (во время которой берется и исследуется под микроскопом образец почечной ткани) в основном используется для диагностирования нарушений, оказывающих воздействие на специальные кровеносные сосуды почек (клубочки) и канальцы, а также для выявления необычных причин острого повреждения почек Острое повреждение почек Острое повреждение почек — это быстрое (от нескольких дней до нескольких недель) ухудшение способности почек фильтровать метаболические продукты жизнедеятельности, поступающие из крови. Прочитайте дополнительные сведения . Нередко выполняют биопсию пересаженной почки, чтобы выявить признаки отторжения.

При выполнении биопсии почки человек ложится лицом вниз, и в кожу и мышцы спины над почкой вводится местное обезболивающее средство. Чтобы определить расположение отдела почки, в котором находятся клубочки, и избежать повреждения больших кровеносных сосудов используется ультразвуковое исследование или компьютерная томография (КТ). Через кожу в почку вводится биопсийная игла.

Эта процедура обычно не проводится у людей с неконтролируемым повышенным артериальным давлением, нарушениями свертываемости крови, активной инфекцией мочевыводящих путей или с одной почкой (за исключением пересаженной почки Трансплантация почки Трансплантация почки — это изъятие здоровой почки у живого или недавно умершего человека с ее последующей пересадкой человеку с терминальной стадией почечной недостаточности. (См. также Общие. Прочитайте дополнительные сведения

Биопсия мочевого пузыря

Биопсия может быть проведена в кабинете врача под местной анестезией или в операционной больницы под общей анестезией. Если удаляется большое количество ткани, или если присутствует риск кровотечения после процедуры, в мочевом пузыре может быть оставлена дренажная трубка (катетер), чтобы отводить кровь и сгустки крови, предотвращая тем самым закупорку мочеиспускательного канала.

Биопсия предстательной железы

Биопсия предстательной железы является единственным точным методом диагностики рака предстательной железы Рак предстательной железы Риск развития рака предстательной железы увеличивается с возрастом. Чаще всего симптомы (затрудненное мочеиспускание, позывы к срочному и частому мочеиспусканию, кровь в моче) появляются только. Прочитайте дополнительные сведения

Некоторые врачи в течение определенного времени до и после биопсии назначают пероральные или инъекционные антибиотики, а некоторые рекомендуют перед биопсией сделать клизму. Чтобы получить изображения предстательной железы, которые помогают контролировать введение биопсийной иглы, врачи вводят в прямую кишку ультразвуковой зонд. Обычно врачи выполняют пациенту местную анестезию или седацию, а затем через ультразвуковой зонд вводят в предстательную железу иглу и берут много образцов ткани. Затем эту ткань исследуют в лаборатории для выявления признаков онкологических заболеваний. Модификация биопсии предстательной железы — это МРТ-фузионная биопсия. Мужчине проводят МРТ предстательной железы, а затем через 1–2 недели проводят биопсию предстательной железы под контролем УЗИ. Во время биопсии происходит цифровое соединение (сочетание) МРТ-изображений и ультразвуковых изображений, что помогает создать более точное изображение областей с патологическими изменениями для биопсии.

Цитологическое исследование мочи

Цитологическое исследование мочи (микроскопическое исследование мочи на наличие раковых клеток) иногда бывает полезным для диагностики рака почек и мочевыводящих путей. Для людей с высоким риском, например, для курильщиков, работников нефтехимической промышленности и людей с безболезненным кровотечением цитологическое исследование мочи может использоваться для проверки на онкологические заболевания. У людей, которым удалили опухоль почки или мочевого пузыря, эту процедуру могут использовать для последующего обследования. Однако иногда результаты могут указывать на онкологические заболевания при их отсутствии или могут не показать онкологических заболеваний при их наличии, особенно если опухоль только появилась или растет медленно.

ПРИМЕЧАНИЕ: Это — пользовательская версия ВРАЧИ: Нажмите здесь, чтобы перейти к профессиональной версии

Исследование костного мозга

Эритроциты Эритроциты Основные компоненты крови включают: плазму; эритроциты; лейкоцитов; тромбоциты. Прочитайте дополнительные сведения и тромбоциты Тромбоциты Основные компоненты крови включают: плазму; эритроциты; лейкоцитов; тромбоциты. Прочитайте дополнительные сведения

Аспират костного мозга: забор жидкости и клеток посредством иглы, вставленной в костный мозг, через которую втягивают (аспирируют) жидкость и клетки

Пункционный биоптат костного мозга: забор интактного участка костного мозга с использованием устройства для пункции (похоже на иглу с большим диаметром)

При исследовании аспирата костного мозга исследуют, какие клетки — нормальные и патологические — содержатся в костном мозге, а также получают информацию об их размере, объеме и других характеристиках. Используя такой образец, можно выполнить специальные анализы — например, определить наличие бактерий, грибков или вирусов, выполнить хромосомный анализ или анализ белков клеточной поверхности.

С помощью толстоигольной биопсии извлекают цельный образец костного мозга, с помощью которого исследуют не только клетки, но также заполнение костного мозга клетками и локализацию клеток в костном мозге.

Взятие образца костного мозга

Как правило, образцы костного мозга забирают из подвздошной кости (подвздошного гребня). Обычно человек лежит на одном боку, отвернувшись от врача и согнув в колене ногу, которая расположена сверху. После дезинфекции кожи и введения анестезирующего средства местного действия в ткани над костью с целью обезболивания врач вводит в кость иглу и извлекает образец костного мозга.

Аспирация костного мозга часто позволяет получить достаточное количество информации для постановки диагноза, но в процессе взятия образца в шприц костный мозг может быть поврежден. В таком случае определение исходного расположения клеток оказывается затруднительным.

В ситуациях, когда необходимо определить точные анатомические взаимосвязи клеток и оценить структуру тканей, врач также выполняет пункционную биопсию. Небольшой столбик интактного костного мозга удаляют специальной иглой для биопсии костного мозга и делают тонкие срезы ткани, которые исследуют под микроскопом.

Оба типа образцов обычно берут из кости таза (подвздошный гребень), часто во время одной процедуры. В редких случаях аспират берут из грудины. Иногда у детей самого младшего возраста образцы костного мозга забирают из одной из костей голени (большеберцовой кости).

Взятие образцов костного мозга начинается с обработки, дезинфекции и обезболивания кожи над костью. Во время процедуры пациенты, как правило, испытывают незначительную боль, вслед за которой сохраняются минимальные неприятные ощущения. Процедура занимает несколько минут и не вызывает долговременного поражения кости.

Как проводится гистологическое исследование: виды, методы, особенности

Злокачественные новообразования — это группа заболеваний, насчитывающая несколько тысяч видов опухолей разных типов и разной степени злокачественности. Они подразделяются на большие группы в зависимости от того из каких тканей они развиваются: если из эпителиальных (барьерных) — то это раки, если из соединительных тканей (мягких тканей и костей) – саркомы, если из лимфоидных (иммунных) – лимфомы/лейкозы. От того насколько правильно верифицирована опухоль (определен ее тип, степень злокачественности и другие характеристики) зависит правильность и эффективность лечения. Важную роль в этом играют гистологические исследования.

О том, как проходят гистологические исследования, какие задачи кроме диагностических они позволяют решать, что влияет на сроки их выполнения рассказывает заведующая патологоанатомическим отделением с прозектурой НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, к.м.н. Анна Сергеевна Артемьева.

Что служит материалом для патоморфологических (гистологических) исследований?

Кусочек ткани пациента: кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, головного и спинного мозга и т.п., так называемый биоптат.

Процесс получения фрагмента ткани (биоптата) — биопсия – это несколько разных способов забора материала для гистологического исследования.

Пункционная биопсия – «тычок», тонкой или толстой иглой. Пункционные биоптаты редко имеют диаметр больше 1-2 мм.
Ножевая биопсия – открытая или эндоскопическая (малоинвазивная), в том числе лапароторако-медиастиноскопия.

Биопсию внутренних органов делают под УЗИ-навигацией, либо с помощью хирургического вмешательства.

Операционный материал – это все что удалено во время операции, как правило, орган или его часть, или несколько органов и/или их частей с образованием (опухолью) или без него.

Как обрабатывают эти материалы для проведения гистологического исследования?

1 Этап. Фиксация — «консервирование» биоптата в формалине — специальном химическом растворе, который предотвращает гниение, позволяет сохранить структуры ткани.

Фиксация биоптата может занимать от 6 до 24 часов – в зависимости от его вида и размера.

Операционный материал фиксируется дольше, в несколько этапов. Сначала предварительная фиксация, которая занимает примерно 12 часов. Затем вырезка нужных фрагментов и повторная фиксация еще 24 часа.

Соотношение объема материала к объему формалина должно быть 1:20.

2 Этап. Процессинг — процесс обезвоживания, обезжиривания и пропитки материала парафином. Автомат перемещает кусочек материала из раствора в раствор.

В качестве растворов применяются: абсолютированный изопропиловый спирт (6-8 смен), ксилол (2 смены), расплавленный парафин (2 смены).

Программа разнится для «жирного» материала (к которым относятся, например, ткани молочной железы) и «нежирного» – 36 и 24 часа соответственно.

Процесс получения парафиновых блоков.

3 Этап. Изготовление парафинового блока. Кусок материала помещается в форму с расплавленным парафином (уже другим нежели во время процессинга – с более высокой температурой плавления) и охлаждается. Выполняется вручную, сложно ускорить.

4 Этап. Изготовление срезов. Толщина образца — кусочка ткани, залитого в парафин – 1-3 мм. Толщина каждого среза 4-5 мкм (0,004-0,005 мм). Выполняет лаборант с использованием специального инструмента – микротома.

Срезы монтируются на стекла и должны высохнуть.

Несмотря на то, что часть материала теряется при выравнивании в микротоме, при должном профессионализме, из одного образца — материала от одной биопсии, операционного материала от одной опухоли, возможно изготовить около 100 стекол (микропрепаратов).

Для чего делаются срезы?

Срезы делаются для рутинной окраски гематоксилинном и эозином, иммуногистохимического исследования и других видов исследований.

Срезы для всех исследований используются одинаковые, различается окраска, могут отличаться стекла, на которые они монтируются, так для ИГХ и FISH нужны специальные адгезивные стекла или заряженные стекла.

Блоки и стекла способны храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований, пересмотров, а также в научных целях.

Архив гистологических материалов собирается в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова с 1927 года и содержит более 10 млн единиц хранения (микропрепараты — стекла, парафиновые блоки, архивные карточки, влажный архив).

Какие виды гистологических исследований наиболее информативны?

Гистологическое исследование
Иммуногистохимия (ИГХ)
Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH), может быть хромофобной (принцип тот же, другой тип метки)

Что позволяют определить разные виды гистологических исследований

Гистологическое исследование – что это такое?

Позволяет верифицировать опухоль – то есть определить из каких клеток она состоит (из какой ткани она развивается), степень ее дифференцировки (зрелости).

Рутинная окраска, выполняющаяся при гистологическом исследовании, позволяет выявить патологический процесс в анализируемом материале (биоптате, операционном материале):

воспаление,
специфическое воспаление,
аномалия развития,
опухоль.

Также, в большинстве случаев, благодаря рутинной окраске, можно определить степень злокачественности опухоли и, если она достаточно зрелая, то какова ее природа.

Окрашенные срезы под микроскопом

Инвазивный протоковый рак er 100%.

Карцинома сигмовидной кишки.

Крупноклеточная нейроэндокринная опухоль.

МТС крупноклеточной нейроэндокринной опухоли.

Неспецифический рак молочной железы. Участок in situ карциномы внутри протока, криброзного типа.

Низкодифферинцированный рак пищевода.

При гистологическом исследовании биоптата и операционного материала можно оценить распространенность: размер опухоли и прорастание в окружающие ткани, насколько затронуты лимфоузлы и есть ли метастазы в отдаленные органы (если эти все структуры присланы для гистологического исследования). При консультации готовых микропрепаратов – стекол, это, как правило, невозможно, если опухоль больше размеров гистологической кассеты или рассечена предыдущим исследователем и не предоставлены данные макроскопического исследования.

Во время гистологического исследования изучаются все стекла от одного образца – материала, полученного от одного вмешательства — одной операции или одной биопсии, вне зависимости от их количества, это считается одной консультацией.

Сроки выполнения гистологического исследования зависят от количества микропрепаратов и от категории сложности того процесса, который в них обнаруживается, сроки могут удлиняться, особенно при необходимости использования дополнительных методов исследования и анализа дополнительных сведений. На сроки выполнения гистологического исследования влияет полнота предоставленной пациентом клинической информации, в том числе данных уже проведенных исследований.

Иммуногистохимия (ИГХ)

Сложное многоэтапное исследование, выполняется после гистологического исследования на том же материале. Опухолевые срезы окрашиваются антителами, которые способны связываться антигенами (белками), которые несут опухолевые клетки. Разные опухолевые клетки несут разные антигены, к каждому из которых подобно ключа к замку подходит антитело.

Один из этапов ИГХ

ИГХ исследование — это комбинаторика. 100% специфичных и чувствительных к какой-то опухоли маркеров не существует, но есть набор антигенов, которые в определенном типе опухоль должны быть и набор тех, которых там быть не должно, таким образом ИГХ-панель строится так чтобы включать несколько антител, которые должны быть позитивны и несколько, которые должны быть негативны. Для разных опухолей различаются эти наборы позитивных/негативных маркеров.

При проведении прогностической ИГХ – выявлении маркеров чувствительности к терапии определяется набор таких маркеров для конкретных опухолей, например, рака молочной железы: рецепторы стероидных гормонов (эстроген, прогестерон), рецептор эпидермального фактора роста (HER2) и индекс пролиферативной активности Ki67 (скорости деления клеток).

Стекла окрашиваются последовательно — различными антителами красятся наборы маркеров в несколько этапов, процесс окраски стекол одним антителом занимает 48 часов.

Таким образом, каждое антитело наносится на отдельный срез ткани, монтированный на отдельное стекло, как правило с соответствующим внешним контролем, количество реакций (используемых антител) и этапов окраски может существенно варьировать в зависимости от конкретной диагностической ситуации, все зависит от индивидуальных особенностей опухоли. Проводится такое количество окрасок, которое необходимо для того, чтобы выявить наиболее характерный для определенной опухоли набор позитивных и негативных маркеров.

Кому-то для этого будет достаточно 5 антител, а кому-то необходимо сделать 20 окрасок и более. Максимальное количество окрасок, которое нам приходилось делать – 212.

Поэтому точные сроки и стоимость этого исследования невозможно определить заранее. Разные по течению и прогнозу опухоли могут быть очень похожи друг на друга, только минимальные различия в окрашивании, с учетом клинических данных и данных других методов обследования, могут позволить установить верный диагноз.

Есть целый ряд доброкачественных опухолей, симулирующих злокачественные, в том числе высокоагрессивные, а некоторые злокачественные высоко дифференцированные опухоли трудно отличить от воспалительных и реактивных процессов. В таких ситуациях только опыт и квалификация патоморфолога, анализ всего комплекса доступной информации (снимки КТ, МРТ, рентген, протокол операции, и др.) позволяют поставить диагноз.

В грамотной интерпретации результатов ИГХ очень важна роль эксперта, ведь те случаи, с которыми приходится работать, в большинстве своем, сложные. Практически не существует антител, которые могут выступать в качестве 100%-х маркеров той или иной опухоли, врачу всегда приходится взвешивать различные вероятности.

Что определяется с помощью ИГХ?

Наличие рецепторов гормонов прогестерона и эстрогена при раке молочной железы;
Экспрессию HER-2/neu в клетках при раке молочной железы, раке желудка;
Определить ходжкинские и неходжкинские лимфомы — установить точный диагноз лимфомы на сегодняшний день невозможно без применения этого вида исследования.
Определить первичная это опухоль или метастазы, тканевую принадлежность метастазов.

Иммуногистохимия позволяет оценить потенциальный темп роста опухоли, ответ на химио-, таргетную, гормональную терапию.

Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH-тест)

Это метод молекулярно-генетической диагностики в ткани.

FISH проводится в срезе ткани и позволяет привязать генетическую перестройку к конкретной опухолевой клетке.

В этом тесте также используются специальные красители, которые связываются только с определенными участками хромосом. Их называют зондами, которые могут быть помечены флуоресцентным или хромогенным красителем, визуализирующимися при помощи флуоресцентного или светового микроскопа.

Технические операции по подготовке гистологических стекол к этому исследованию занимает 2 рабочих дня.

Анализ препарата с помощью многоголового микроскопа.

Полученные микропрепараты очень чувствительны к внешней среде – они могут выцвести со временем, чтобы избежать потерь информации все FISH-препараты сканируются, создается их цифровая копия, которая доступна для внешнего пересмотра. Специалисты просматривают флуоресцирующий материал в темном поле, в анализе препарата принимают участие как минимум 2 специалиста. При необходимости используется и цифровой анализ.

Что определяется с помощью FISH-теста?

FISH-тест позволят диагностировать некоторые виды опухолей, определяет целесообразность использования некоторых химиотерапевтических препаратов.

определяется наличие амплификации HER2 в случаях пограничного результата по данным ИГХ, что необходимо для назначения таргетной терапии;
проводится диагностика, то есть выявление генетических перестроек специфичных для определенного типа опухолей, когда невозможно окончательно установить диагноз при помощи более простых методик, чаще всего это саркомы мягких тканей и опухоли головного мозга;
генетические отклонения, вызывающие рак того или иного органа;
при лимфомах эта методика используется в диагностических целях и для выявления факторов неблагоприятного прогноза, то есть показаний для ранней интенсификации лечения.

Проведение гистологического исследования, и в первую очередь FISH-теста — это экспертная работа, которая зависит от квалификации специалиста. Очень многие мутации, которые выявляются в опухолях, не всегда являются метками опухолей, они могут находиться и в доброкачественных образованиях или нормальных тканях.

За год патологоанатомическое отделение НМИЦ онкологии имени Н.Н. Петрова выполняет около 20000 гистологических исследований (пациентов), из них около 5000 консультативных случаев (пересмотров), более 30000 ИГХ исследований, а также участвует в программе внешнего контроля качества ИГХ исследований NordIQ.

Специалисты отделения обладают огромным опытом проведения гистологических исследований и экспертными компетенциями.

Помните! Гистологические исследования – это отправная точка, от того насколько грамотно они выполнены зависит точность поставленного диагноза и эффективность назначенного лечения.

Скорость выполнения гистологических исследований и адекватность гистологического заключения зависят от ряда факторов:

Качества стекол и блоков;
Комплектности предоставления стекол (необходимо предоставить все стекла и блоки);
Предоставление пациентом дополнительной информации, которая поможет верно интерпретировать данные гистологического исследования, ИГХ и FISH-теста, а именно: данные анамнеза заболевания, данные о сопутствующих заболеваниях, в первую очередь инфекционных (ВИЧ, гепатиты); все данные всех проведенных обследований и вмешательств: снимки — рентген, КТ, МРТ, УЗИ, протоколы операций, выписки.

После выполнения гистологического исследования пациент получает гистологическое заключение/протокол исследования гистологического материала.

Расшифровка гистологического исследования: на что обратить внимание?

Гистологическое заключение включает в себя несколько рубрик (полей):

Макроскопическое описание

Заполняется как для биоптатов — не обязательно, так и для операционного материала, для которого имеет крайне важное значение в ряде случаев.

Микроскопическое описание

Описание изменений на микроскопическом уровне, не обязательно к заполнению, так как вся необходимая информация может быть отражена в поле «заключение».

Результаты иммуногистохимического исследования

В этом поле описано какие антитела использовались в данном случае и каков результат окрашивания: наличие окрашивание или его отсутствие, локализация в клетке при необходимости, а также процент позитивных клеток и интенсивность реакции, когда это имеет значение.

Патологоанатомическое заключение

Содержит нозологическую/классификационную единицу, если ее возможно установить по исследованному материалу, то есть дает ответы на вопросы:

Это первичная опухоль или метастаз?
Где локализован первичный опухолевый очаг?
Каков гистологический тип опухоли (из клеток какого типа она состоит).

Также приводятся все необходимые прогностические данные: степень дифференцировки, параметры, влияющие на стадию, состояние краев резекции, если возможно их оценить и т.п.

Дополнительные замечания и рекомендации

Поле может содержать комментарии, относительно возможного направления дальнейшего обследования, вероятности того или иного диагноза, необходимости ознакомиться с теми или иными клиническими данными и др.

Мы не рекомендуем пациентам самостоятельно заниматься расшифровкой показателей гистологического исследования, используя информацию, полученную на различных Интернет-сайтах и форумах пациентов, так как на интерпретацию данных влияет большое количество факторов, в том числе, возраст пациента, данные других исследований и др.

Расшифровкой исследования может заниматься только специалист – врач онколог по профилю заболевания!

Авторская публикация:
АРТЕМЬЕВА АННА СЕРГЕЕВНА
заведующий патологоанатомического отделения с прозектурой ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, кандидат медицинских наук

Читайте также: