Что такое коэффициент позитивности в анализах на сифилис

ИФА — иммуноферментный анализ — является одним из самых прогрессивных методов диагностики сифилиса. Он выявляет признаки присутствия возбудителя заболевания на разных стадиях последнего. В основе анализа лежит выявление специфических антител, которые появляются в крови больного при внедрении в организм бледной трепонемы (бактериального возбудителя).

Метод ИФА работает не только для группы заболеваний, передающихся половым путем. В равной степени он применим и для диагностики самых разных болезней инфекционного характера. Принцип проведения анализа был разработан еще в 60-х годах прошлого столетия. Однако активно использоваться он начал только спустя 20 лет.

Сейчас ИФА применяется для диагностики сифилиса, СПИДа, туберкулеза и многих других болезней. Для обнаружения антител используются специально разработанные ферменты, активно реагирующие на специфические белки крови.

В каких случаях назначают ИФА?

Больной может сам прийти в клинику для проведения анализа, если у него присутствуют подозрительные симптомы (характерные высыпания на теле, повышенная температура, боли в мышцах и пр.). Однако на определенных стадиях недуг не проявляется столь явно. Через несколько недель после инфицирования симптомы исчезают, и пациент может ошибочно считать себя выздоровевшим. По этой причине существует ряд случаев, когда анализ ИФА проводится в обязательном порядке:

1. При устройстве на работу на предприятия, где есть контакт с большим количеством людей, продуктами питания, детскими и медицинскими товарами.
2. При постановке на учет беременной. Болезнь передается от больной матери младенцу, поэтому важно ее вовремя выявить.
3. При донорстве крови. Перед тем как сдавать кровь, донор обязан проверить ее на наличие опасных инфекций, в том числе и сифилиса.
4. Во время подготовки к операции. Проведение такого рода вмешательств подразумевает прямой контакт с кровью больного. Это может быть небезопасно для медперсонала и других пациентов клиники.
5. При обнаружении симптомов у одного из половых партнеров. В этом случае второй партнер также обязан сдать кровь на пробу.
6. При прохождении воинской службы, а также в случае тюремного заключения. Обе ситуации предполагают продолжительный контакт с большим количеством людей. Поскольку недуг передается не только половым, но и контактно-бытовым путем, любой человек из окружения инфицированного находится под угрозой.

Как проводится?

Главная особенность ИФА — высокая точность данных. Позволяет не просто обнаружить антитела, но и определить их количественное соотношение.

Это значит, что иммуноферментный анализ позволяет с 99,99%-ной вероятностью выявить болезнь и одновременно определить, на какой стадии развития болезнь в данный момент находится.

При проведении ИФА у пациента берут кровь из вены. Затем ее особым образом подготавливают и размещают на полистироловой панели со множеством лунок. При диагностике в сыворотку крови добавляют специальные ферменты, которые при наличии антител/антигенов недуга образуют с ними прочные соединения.

Результатом образования таких соединений становится изменение цвета плазмы крови в лунке (с бесцветного — на ярко-желтый). Работнику лаборатории достаточно визуально оценить результат, чтобы понять, что на панели — кровь больного.

Трактовка результатов

При ИФА на сифилис оценивают наличие 3 классов антител (иммуноглобулинов): A, M и G. Эти вещества образуются в крови инфицированного человека в строго определенной последовательности:

1. Наличие иммуноглобулина A указывает на то, что с момента заражения бледной трепонемой прошло больше месяца.
2. Антитела M выявляются при длительном присутствии инфекции в организме. Также они могут быть реакцией на обострение хронической болезни.
3. Иммуноглобулин G организм вырабатывает на самом пике заболевания, а также после уже проведенного лечения.

Интенсивность окрашивания плазмы крови в ярко-желтый цвет при проведении ИФА напрямую указывает на количество антител. Если цвет плазмы слегка желтоватый, результаты ставят под сомнение и процедуру повторяют. При отрицательном результате цвет плазмы не меняется и остается прозрачным.

Ложноположительный результат ИФА

На протяжении всей жизни человеку довольно часто приходится делать ИФА на сифилис (перед устройством на работу и пр.). Положительный результат всегда становится стрессом. Однако не стоит паниковать раньше времени! Иногда ИФА может дать ложноположительный результат. В этом случае есть смысл провести повторное обследование.

Специалисты не советуют беспокоиться после первого же положительного результата ИФА, поскольку это исследование направлено на выявление не самой бледной трепонемы, а антител, которые организм вырабатывает в ответ на атаку патогенных бактерий. ИФА — анализ с высокой точностью (вероятность погрешности меньше 1%). При наличии сомнений врачи не ставят диагноз сразу же, а предлагают пациенту сдать кровь еще раз.

Ложноположительный ответ ИФА возможен при болезнях:

• соединительной ткани, суставов (васкулит, ревматоидный артрит и пр.);
• сердца (главным образом это касается воспалительных заболеваний: миокардита, эндокардита);
• эндокринной системы (диабет);
• инфекционных (гепатит, туберкулез и пр.).

Ложноположительный результат может быть при беременности или в том случае, если незадолго до ИФА пациенту была проведена вакцинация. Изменить итоги анализа не в лучшую сторону способно и употребление алкоголя, наркотиков.

В достаточно большом количестве случаев положительную реакцию дает проверка крови пациентов, которые уже прошли лечение. У 10% излеченных положительная реакция остается на всю жизнь, поскольку в крови постоянно циркулирует определенное количество антител как иммунный ответ на возникшее однажды заболевание.

Ложноотрицательный результат

Наряду с ложноположительным возможна и ложноотрицательная реакция. В самом начале болезни, когда трепонема только попала в организм, антитела вырабатываются в недостаточном для выявления количестве. Ферменты могут их не зафиксировать, поэтому итоги ИФА оказываются отрицательными.

При наличии подозрений на сифилис (пациент имел незащищенный половой акт, тем или иным образом контактировал с возможными больными и пр.) проводится повторный анализ.

Обследование контактных лиц

Существует определенный протокол действий на тот случай, если у пациента со 100%-ной достоверностью был выявлен недуг. В первую очередь обследование проходит его половой партнер: муж, жена, другие лица, вступавшие с зараженным в интимную связь. В этом плане медики категоричны. Обследование сексуальных партнеров является обязательным во избежание распространения опасного заболевания.

Лечение проходят все члены семьи больного, даже если их анализы показали отрицательный результат. Помним: сифилис — острозаразная болезнь, передающаяся контактно-бытовым путем. Дети и другие члены семьи могут получить трепонему во время пользования санузлом, общими полотенцами, посудой.

Действия после подтверждения диагноза

Как только данные ИФА на сифилис подтвердились, инфицированный и контактировавшие с ним лица проходят терапию антибиотиками. Все рекомендации врача — дозировку, периодичность приема лекарств — необходимо соблюдать в точности!

На время лечения работающим гражданам выдается справка с зашифрованным согласно МКБ-10 диагнозом. После полного излечения медицинская книжка продлевается. Выздоровевший работник может приступать к своим непосредственным обязанностям. Работодатель не вправе отказать ему в восстановлении на рабочем месте.

Таковы основные данные по проведению ИФА. Заразившимся нужно помнить: постановка диагноза не ставит крест на всей последующей жизни больного. Сейчас существуют эффективные препараты, позволяющие надежно излечивать это заболевание. Вовремя проведенные обследование и лечение позволяют избежать самых опасных последствий недуга и защитить от него других членов общества.

Описание

Сифилис, антитела к Treponema pallidum lgM, IgG количественный — метод количественного определения антител к антигенам Treponema pallidum, возбудителя сифилиса. Относится к высокочувствительным методам диагностики сифилиса.

Данное исследование рекомендуется проводить совместно с дополняющим его исследованием — диагностика сифилиса RPR.

Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передающееся в основном половым путем, склонное к хроническому течению и поражающее большинство органов и систем организма. Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов.

Клиническая картина при сифилисе
Клинические проявления сифилиса очень разнообразны и зависят от стадии заболевания. Выделяют несколько стадий сифилиса. Первичная стадия наступает примерно через 2–3 недели после заражения. На этой стадии проявляются одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Во многих случаях твердый шанкр безболезненный и остается незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Шанкр исчезает через 4–6 недель.

Вторая стадия заболевания начинается через 2–8 недель после возникновения твердого шанкра. Она характеризуется появлением сыпи, чаще на ладонях и подошвах. Иногда встречаются и другие симптомы, к примеру лихорадка, усталость, опухание лимфатических узлов, боль в горле и ломота в теле.

Сифилис способен протекать в скрытой форме, во время которой у инфицированного человека не проявляется никаких симптомов, но в то же время он продолжает оставаться носителем инфекции. Это может длиться годами.

Без лечения примерно у 15% больных развиваются симптомы позднего, или третичного, сифилиса. Эта стадия иногда длится несколько лет, и приводит к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам, болезням сердца и даже к смерти.

От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков (предпочтительно применять производные пенициллина). Причем на ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее.

При контакте человека с Treponema pallidum, его иммунная система вырабатывает антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида таких антител: IgM и IgG.

Антитела класса IgM
Антитела класса IgM вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются в сыворотке крови в конце второй недели заболевания и исчезают у нелеченых больных примерно через 1–1,5 года, при лечении раннего сифилиса — через 3–6 мес., позднего — через год. Они присутствуют у большей части пациентов с первичным и вторичным сифилисом, поэтому тест на IgM может быть использован для различения давней инфекции от только приобретенной.

Специфических трепонемных антител IgM нет у лечившихся в прошлом пациентов, но их отсутствие само по себе не говорит об эффективности проведенной терапии, поскольку у большинства из тех, кто не лечился, в скрытой стадии сифилиса IgM-антитела тоже отсутствуют.

Антитела класса IgG
Антитела класса IgG появляются в крови через 3–4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и достигает максимума на 6-й неделе, в этот момент их концентрация преобладает над концентрацией IgM. Иммуноглобулины класса G на определённом уровне сохраняются длительное время, иногда пожизненно.

Показания:

• диагностика и подтверждение сифилиса;
• планирование беременности;
• подготовка к операции;
• беспорядочные половые контакты;
• проверка доноров.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Единицы измерения: УЕ*

Положительный результат будет сопровождаться дополнительным комментарием с указанием коэффициента позитивности пробы (КП*).

• КП >= 1,1 — положительно;
• КП *Коэффициент позитивности (КП) — это отношение оптической плотности пробы пациента к пороговому значению. КП — коэффициент позитивности, является универсальным показателем, применяемым в иммуноферментных тестах. КП характеризует степень позитивности исследуемой пробы и может быть полезен врачу для правильной интерпретации полученного результата. Поскольку коэффициент позитивности не коррелирует линейно с концентрацией антител в пробе, не рекомендуется использовать КП для динамического наблюдения за пациентами, в том числе контроля эффективности лечения.
  

Расшифровка анализа на сифилис не представляет сложностей для пациента, если врачом было назначено исследование крови на инфекцию с помощью неспецифических тестов. Результаты, полученные с применением иммуноферментных реакций, обычному человеку интерпретировать затруднительно, и поставить правильный диагноз способен только врач.

Какие анализы используются в диагностике сифилиса?

Выявить наличие патогенного возбудителя сифилиса помогают серологические тесты:

Реакция Вассермана (RW). Основана на связывании комплемента с комплексом антиген-антитело. Для идентификации применяется гемолитическая система. Повышению чувствительности пробы способствует кардиолипиновый антиген. Если значение положительно, на бланке с направлением ставятся кресты. Исследования крови с применением реакции Вассермана в некоторых случаях дают ложное показание.

Если венеролог подозревает наличие у пациента трепонемной инфекции при получении положительного анализа, назначается диагностика с применением других методов.

Как расшифровать результат неспецифического обследования

Расшифровка анализа на сифилис, проведенного с помощью неспецифических тестов, может содержать:

• четыре креста (++++), означающих резко положительную пробу;
• три креста (+++) – положительная реакция;
• два креста (++) – слабоположительная проба;
• один крест (+) – отрицательный или сомнительный результат;
• обозначение знаком минус (-) – заболевания нет.

Как понять результаты специфического исследования

При использовании реакции иммуноферментации (ИФА) в крови пациента определяются иммуноглобулины (обозначения IgM, IgA, IgG):

1. При выявлении IgA можно говорить о недавнем инфицировании, произошедшем около двух недель назад.
2. Обнаружение иммуноглобулинов класса A и M позволяет определить первую стадию заболевания и окончание инкубационного периода.
3. Получение сразу трех видов антител класса А, М, G указывает на прогрессирование сифилиса и борьбу организма с инфекцией.
4. При выявлении IgG имеет смысл говорить об излечении сифилиса и правильно проведенной терапии.

Результаты тестов могут выражаться в процентах:

• 20% – отрицательно;
• 20-30% – сомнительный;
• 30-50% – слабоположительный;
• более 50% – положительный анализ.

Не всем людям, получившим результаты исследования удается расшифровать числа, представленные в виде отношения. Если в бланке указаны значения 1:2 — 1:800, говорить об инфицировании рано.

У части пациентов, прошедших курс терапии, антитела обнаруживаются в течение длительного периода.

При их росте врач подозревает наличие в организме пациента патогенного возбудителя. Титры снижаются при правильном лечении.

Достоверность анализов

Не всегда лабораторные исследования крови показывают правильный результат. Факторами, влияющими на достоверность результатов, являются беременность, хронические заболевания и аутоиммунные процессы. Показания тестов могут стать ложноположительными при приеме пациентом лекарственных препаратов.

Обнаружить наличие сифилиса могут исследования, проведенные с применением реакции Вассермана. К положительным результатам приводят вирусные заболевания (пневмония, туберкулез, малярия), нарушение работы печени, кроветворной системы. В этом случае врач выдает направление на ИФА, РПР.

Анализ РМП выдает ложноположительные значения при ревматоидных процессах, циррозе печени, онкологических заболеваниях, бруцеллезе, мононуклеозе, туберкулезе, лептоспирозе.

Иммуноферментный метод также способен показать ошибочный результат при нарушенном метаболизме у пациента, наличии системных патологий, новорожденных, родившихся от инфицированных матерей. В таких случаях назначаются исследования РМП, РПГА.

Что делать больным

При выявлении у пациентов возбудителей сифилиса или антител к нему назначается курс терапии. Помимо анализов на это венерическое заболевание больной должен пройти рентгенографию, УЗИ. В обязательном порядке проводится биохимическое и общее исследования крови, мочи.

Схему лечения врач подбирает после определения срока инфицирования и стадии болезни. Сифилитический больной должен пройти курс антибиотикотерапии. При выявлении бледных трепонем назначаются препараты пенициллиновой, тетрациклиновой группы, макролиды. Высокой эффективностью в борьбе с бледной трепонемой обладают доксал, цефтриаксон, азитромицин.

При выявлении поздней формы сифилиса используются не только антибиотики, но и лекарственные средства, содержащие висмут, йод, иммуностимулирующие препараты, физиотерапевтические процедуры.

При обнаружении вторичной формы венерического заболевания у беременных назначаются курсы пенициллина. Препарат считается безопасным для плода при условии правильно подобранных дозировок. Если у женщины выявлена ранняя стадия сифилиса, терапия проводится двухкратным введением антибиотика.

Лечение вторичной формы заболевания, обнаруженного своевременно, занимает 1-1,5 месяца. В некоторых случаях терапия продолжается год и более. Поздние стадии сифилиса при отсутствии лечения приводят к серьезным осложнениям. При поражении внутренних органов и формировании мягкотканных опухолей возможна угроза жизни больного.

Правильно интерпретировать полученные результаты анализов может только врач.

При положительных значениях назначаются другие виды исследования, позволяющие поставить правильный диагноз. Своевременное обнаружение сифилиса и правильно назначенная терапия позволяют избежать грозных последствий и полностью вернуть здоровье.

Что такое ИФА на сифилис

ИФА на сифилис — доступный и высоко информативный тест

ИФА — это иммуноферментный анализ, применяющийся в качестве высокочувствительного теста в диагностике различных патологий, в том числе сифилиса. Позволяет выявить заболевание и максимально точно определить его стадию.

Сифилис зарождается при проникновении в организм бактерии Treponema pallidum (Трепонема бледная). Через 2 — 4 недели на кожных покровах образуется твёрдый шанкр в локализации, где произошло внедрение, чаще всего характерная для сифилиса папула образуется на половых органах, что означает начальный этап первичного сифилиса. По мере развития заболевания папулы преобразуются в язвы, а затем в большинстве случаев исчезают, что даёт пациенту ложную надежду на самоизлечение. Но латентный период переходит в стадию вторичного сифилиса, при этом трепонемы распространяются уже по всему организму, проникая в ткани и органы. На коже и слизистых оболочках образуются множественные высыпания. При отсутствии лечения наступает следующий этап — третичный сифилис с формированием гумм и поражением ЦНС, сердца, костной ткани, ЖКТ, ротовой полости и других органов.

Выявление антител подтверждает инфицирование

ИФА определяет первичный, вторичный, третичный (чаще всего только на начальном этапе), врождённый, рецидивный и латентный сифилис. Суть метода заключается в обнаружении антител, которые организм вырабатывает в ответ на внедрение трепонемы. На начальном этапе болезни образуются антитела класса М, через несколько недель к ним присоединяются иммуноглобулины класса G. Концентрация тех или иных антител меняется в зависимости от этапа развития сифилиса, что позволяет определить стадию болезни. При выполнении ИФА используется истинная трепонема бледная либо её антигены, поэтому тест относится к трепонемным анализам.

Преимущества и недостатки метода

Любой метод исследования не лишен недостатков

Ранее в диагностике сифилиса применялись различные методы, такие как: РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), RW (реакция Вассермана), МР (микрореакция преципитации), РСК (реакция связывания комплемента) и другие тесты. Разнообразие анализов в качестве отборочных тестов и отсутствие единой системы нередко приводило к путанице, а в результате — к негативным последствиям, например, когда донор с ложноотрицательным результатом становился посредником в заражении реципиентов. С 2006 года тестирование стало более стандартизированным, ИФА был признан одним из наиболее эффективных методов диагностики и используется в настоящее время в качестве проверочного теста при обнаружении положительного результата нетрепонемного анализа.

Нетрепонемные тесты являются скриннинговыми

Теперь нетрепонемные анализы используются для выявления возможного заражения сифилисом у всех групп населения, то есть являются скрининг-тестами. При сомнительном либо положительном результате назначается ИФА либо иной трепонемный анализ. ИФА стал одним из ведущих тестов на сифилис благодаря своим преимуществам:

• высокая чувствительность, позволяющая выявить антитела к трепонеме в очень низкой концентрации;
• высокая специфичность достигается за счёт использования антигенов трепонемы бледной;
• объективность результатов благодаря автоматическому учёту;
• лёгкость постановки реакции осуществляется благодаря полной комплектации наборов для диагностики;
• универсальность теста: может применяться для профилактического обследования населения, для диагностики всех стадий болезни и проверки сомнительных результатов.

Антитела к Treponema pallidum схожи на некоторые виды иммуноглобулинов, образующихся при иных видах инфекции, поэтому несмотря на специфичность ИФА ложноположительные результаты могут выявляться в небольшом количестве. Ещё один недостаток ИФА заключается в том, что по мере развития болезни число антител снижается, что может привести к ложноотрицательному результату.

Показания к проведению исследования.

Период беременности — показание для проведения анализа

ИФА проводится как подтверждающий тест после нетрепонемного анализа, но может выступать и в качестве отборочного анализа. Назначается в следующих случаях:

• плановое тестирование при устройстве на некоторые виды работ;
• плановое выявление риска инфицирования;
• госпитализация, предоперационный период;
• донорство;
• беременность;
• обследование при симптомах сифилиса.

Заподозрить сифилис можно по специфичному признаку — образованию твёрдого шанкра, а также болевым ощущениям в суставах и костях, отёчности половых органов, повышению температуры тела до 38 °С, увеличению лимфоузлов. В качестве профилактики рекомендуется проходить исследование регулярно при активной сексуальной жизни со сменой партнёров.

Подготовка к исследованию

В лихорадочный период стоит воздержаться от теста

Для минимизации риска получения ложного результата следует выполнять правила.

1. Образец крови сдаётся на голодный желудок, в зависимости от лаборатории период голода должен составлять от 4 до 12 часов.
2. В предыдущие сутки исключается алкоголь и жирная пища, курение ограничивается минимум за час до исследования.
3. Накануне анализа пить можно только чистую воду, не допускается употребление соков, кофе, лекарственных препаратов.
4. Все иные исследования и медицинские манипуляции проводятся после сдачи теста.
5. Не следует сдавать анализ, если в предыдущие дни отмечалось лихорадочное состояние либо проводилась вакцинация.
6. Женщинам не рекомендуется проходить тест в период менструации.

Расшифровка результатов

Положительный результат свидетельствует о наличии вируса

• наличие инфицирования трепонемой бледной;
• ложноположительный результат при наличии иных факторов;
• последствия вылеченного ранее сифилиса.

• отсутствие заражения;
• инкубационный (ранний первичный) период сифилиса;
• поздний период, в том числе поздние этапы развития третичного сифилиса.

Ложноположительный результат и его причины

Ложноположительный тест может быть при сахарном диабете

Treponema pallidum является спирохетой, содержащей 42 семейства генов, 17% из них аналогичны белкам иных видов бактерий, что провоцирует в небольшом количестве случаев положительный результат при наличии заражения другими микроорганизмами. Например, при ряде аутоиммунных заболеваний выявляются антифосфолипидные антитела, схожие с антителами при сифилисе. На рубеже XXI века было установлено, что в данном случае разница между антителами заключается в факторе зависимости, при аутоиммунных болезнях антитела зависимы от p2-гликопротеина-1, при сифилисе — не зависимы. Но на сегодняшний день вопрос о возникновении ложноположительных реакций остаётся открытым, так как причина таких результатов не всегда ясна.

По статистике чаще всего ложноположительные результаты проявляются в следующих случаях:

• гепатиты;
• лепра;
• инфаркт миокарда;
• интоксикация;
• заболевания соединительной ткани;
• аутоиммунные патологии;
• сахарный диабет;
• беременность;
• период менструации;
• поствакцинальный период.

Трепонема имеет сходство с другими возбудителями

Treponema pallidum является не единственным видом трепанем, к патогенным возбудителям относятся и другие спирохеты: Treponema pertenue (возбудитель явса), Treponema bejel (возбудитель беджеля), Treponema carateum (возбудитель пинты) и многие другие. При микроскопическом осмотре они мало отличаются от бледной трепонемы, а антитела против них схожи на иммуноглобулины при сифилисе.

Положительный результат может отражать наличие болезни в прошлом, так как иммуноглобулины класса G способны задерживаться в кровотоке годами.

Ложноотрицательный результат и его причины.

В инкубационном периоде результат может быть отрицательным

На начальном этапе болезни ИФА показывает отрицательный результат, этот период является инкубационным, когда первичный сифилис ещё не наступил, и отсутствуют характерные признаки болезни. Инкубационный период по сравнению с данными по инфицированию сифилисом середины XX века увеличился на 7 — 10 дней, в настоящее время составляет около 3 недель. Это означает, что после проникновения трепонемы в организм, ложноотрицательный результат будет выявляться на протяжении 3-х, а иногда и более недель.

Третичный сифилис при отсутствии терапии обычно развивается через 3 — 5 лет с момента инфицирования, в некоторых случаях болезнь может проявиться через 10 — 15 лет на фоне бессимптомного протекания и перехода сифилиса из одной стадии в другую. К этому времени число антител значительно снижается или они отсутствуют вовсе, что приводит к ложноотрицательному результату. По некоторым данным на некорректный ложный итог могут повлиять различные инфекционные заболевания, сахарный диабет, приём некоторых антибиотиков.