Что такое вектор по вич

1 декабря – Всемирный день борьбы со СПИДом. Каждый год к этой дате внимание учёных и людей всего мира обращается к новым достижениям в исследованиях ВИЧ.
Когда было установлено, что причиной СПИДа является вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), казалось, что создание вакцины – дело ближайшего будущего. C тех пор прошло более 25 лет и, несмотря на огромные материальные и интеллектуальные ресурсы, затраченные за это время, вакцина против ВИЧ-инфекции все ещё не создана.

Создание вакцин – история

Чтобы понять проблемы, осложняющие разработку вакцин против ВИЧ-1, поучительно рассмотреть обстоятельства успешной разработки вакцин в прошлом. Создание вакцины против оспы – одно из наиболее ярких достижений в истории медицины. Почему 200 лет назад, в отсутствии современных знаний, создание вакцины против оспы так быстро увенчалось успехом, в то время как создание вакцины против СПИДа остается нерешённой задачей уже более четверти века? Ответ заключается в том, что сама природа дала проницательному наблюдателю чёткие указания. Эдвард Дженнер обратил внимание на то, что молочницы, ранее переболевшие коровьей оспой, не заболевали оспой натуральной. Это наблюдение позволило установить факт перекрёстной иммунологической реакции двух родственных вирусов, позволяющий использовать вирус коровьей оспы для защиты от оспы натуральной.

Известные подходы

Для создания вакцин против ВИЧ были испробованы практически все известные подходы, однако все они оказались бесперспективны.

Использование аттенуированного или инактивированного вируса связано с опасностью инфицирования, иммунитет ограничен очень узким кругом вирусных изолятов, а продолжительность иммунитета достаточна мала и не генерируется ЦТЛ.

Использование полноразмерных вирусных антигенов для создания рекомбинантных вакцин также осложнено: во-первых, требуется использование большого числа рекомбинантных антигенов ВИЧ-1, многие из которых достаточно сложно получить с использованием генноинженерных систем их синтеза; во-вторых, ВИЧ-1 имеет множество изменённых штаммовых вариантов, что также делает малоэффективным использование полноразмерных антигенов, в-третьих, полноразмерные вирусные антигены, являются потенциальными онкогенами и содержат районы, которые могут либо ингибировать протективный иммунитет, либо индуцируют развитие иммунопатологии.

Все эти проблемы ограничивают возможность использования традиционных подходов для создания вакцин против ВИЧ-1 и требуют разработки новых нетрадиционных подходов.

Новое поколение вакцин

На наш взгляд, одним из наиболее перспективных и обещающих подходов к созданию нового поколения надёжных и безопасных вакцин против ВИЧ-1 связан с созданием искусственных полиэпитопных вакцин на основе специально отобранных В- и Т-клеточных эпитопов. Такие вакцины должны содержать только те эпитопы, которые необходимы для формирования специфического иммунитета, и должны быть лишены недостатков, которые присущи субъединичным вакцинам и вакцинам, разрабатываемым на основе аттенуированного или инактивированного вируса. Искусственные полиэпитопные конструкции имеют потенциал, который позволяет улучшить иммунный ответ против ВИЧ-1 по сравнению с иммунитетом, индуцируемым при естественной ВИЧ-инфекции.

Как получают искусственные полиэпитопные иммуногены?

Вначале проводится анализ структуры вирусных белков и отбираются наиболее важные в иммунологическом плане эпитопы. При этом отбрасываются те эпитопы, которые могут вызвать нежелательные последствия. Затем осуществляется компьютерный дизайн искусственной белковой молекулы и рассчитывается соответствующая нуклеотидная последовательность искусственного гена. Ген синтезируют в пробирке путём химико-ферментативного синтеза и встраивают в подходящую векторную молекулу для его экспрессии в клетках бактерий, животных или растений. Данный подход использовался нами при конструировании двух искусственных полиэпитопных конструкций TBI и TCI.

Искусственные иммуногены - TBI и TCI

Первый полученный нами искусственный иммуноген был белок TBI. Он включает четыре Т-клеточных эпитопа и пять В-клеточных нейтрализующих эпитопов и сконструирован в виде белка с заранее заданной третичной структурой. Белок TBI прежде всего проектировался для индукции В-клеточного ответа, поэтому предсказанная структура эпитопов в составе белковой молекулы должна была обеспечить их распознавание иммунной системой и высокий уровень ответа. И действительно, созданный нами искусственный белок сохранил иммунологическую активность, поскольку его узнавали антитела из сыворотки больных ВИЧ-1. Кроме того, впервые для белка с гипотетически заданной третичной структурой были выращены кристаллы. Поскольку известно, что только природные белки способны к кристаллизации, этот факт является подтверждением того, что белок TBI по своей структуре подобен природным белкам. И самое главное – у мышей и обезьян, иммунизированных белком TBI, регистрируется появление ВИЧ-специфических антител, обладающих способностью нейтрализовать ВИЧ-1 на культуре клеток человека.

При конструировании белка TCI были выбраны эпитопы, высоко консервативные для 3-х основных субтипов ВИЧ-1, что может позволить обойти высокую вариабильность вируса. Чтобы выбранные эпитопы не обладали способностью индуцировать аутоиммунные реакции, были исключены нежелательные эпитопы, которые потенциально могут индуцировать антитела, обладающие перекрёстной специфичностью с нормальными клеточными белками. В результате белок TCI имеет более 80 оптимально отобранных эпитопов и является самым представительным среди известных полиэпитопных конструкций.

Кандидатные вакцины

КомбиВИЧвак представляет собой комбинацию двух искусственных иммуногенов, один из которых - белок TBI. Вакцина сконструирована в виде вирусоподобных частиц. На её поверхности расположено большое число молекул TBI, что позволяет значительно увеличить иммуногенность вакцинной конструкции. Один из основных показателей эффективности вакцины – способность индуцировать антитела, которые не только узнают, но и нейтрализуют вирус. Наши результаты показали, что сыворотки мышей, иммунизированных КомбиВИЧвак, эффективно подавляют репликацию вируса на культуре клеток, инфицированных вирусом ВИЧ-1, причём на том же уровне, что и сыворотки, полученные от ВИЧ-инфицированного человека. Т.о., кандидатная вакцина КомбиВИЧвак обладает рядом уникальных свойств: она объединяет В- и Т-клеточные иммуногены в одной конструкции, индуцирует как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ, а эпитопы, входящие в состав её полиэпитопных иммуногенов, являются консервативными и представлены разными белками ВИЧ-1.

Лариса Ивановна Карпенко,
д.б.н., зав. лабораторией разработки средств иммунопрофилактики
Сергей Иванович Бажан,
д.б.н., зав. теоретическим отделом,
Александр Алексеевич Ильичёв,
д.б.н., профессор, зав. отделом иммунотерапевтических препаратов

Общее описание

ВИЧ-инфекция — заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), длительное время персистирующим в лимфоцитах, макрофагах, клетках нервной ткани, в результате чего развивается медленно прогрессирующее поражение иммунной и нервной систем организма, проявляющееся вторичными инфекциями, опухолями, подострым энцефалитом и другими патологическими изменениями. Возбудители — вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типов — ВИЧ-1, ВИЧ-2, (HIV-I, HIV-2, Human Immunodeficiency Virus, types I, II) — относятся к семейству ретровирусов, подсемейству медленных вирусов. Вирусная частица имеет сферическую форму диаметром 100−140 нм с наружной фосфолипидной оболочкой, включающую гликопротеины (структурные белки) с определенной молекулярной массой, измеряемой в килодальтонах. У ВИЧ-1 это gp 160, gp 120, gp 41. Внутренняя оболочка вируса, покрывающая ядро, также представлена белками с известной молекулярной массой — р17, р24, р55 (ВИЧ-2 содержит gp 140, gp 105, gp 36, р16, р25, р55). Выявление антител (АТ) к вирусу иммунодефицита человека — основной метод лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. В основе метода лежит ИФА (чувствительность — более 99,5%, специфичность — более 99,8%). Также для диагностики ВИЧ-инфекции применяется определение антигена (Аг) p24 методом ИФА.

Для достоверной оценки результата обследования на ВИЧ следует помнить, что она зависит от времени, прошедшего от момента потенциального заражения:

тест на ВИЧ-инфекцию, выполненный непосредственно после потенциального заражения, не информативен, так как антитела к ВИЧ еще не образовались. По этой причине выполнение теста целесообразно не ранее 3-й недели после потенциального контакта с вирусом. Исключение составляют юридические основания (например, у медицинских работников при травме иглой, содержащей биологический материал), когда необходимо удостовериться, что на момент контакта с потенциальным носителем ВИЧ-инфекции она у данного пациента отсутствовала;
с достаточной точностью ВИЧ-инфекцию можно исключить только через 3 месяца после потенциального заражения. Поэтому после контакта с носителем инфекции обязательно выполнение контрольного обследования. Тем не менее, повторное выполнение анализа через 3 месяца (т.е. через 6 месяцев после потенциального заражения) имеет смысл только в исключительных случаях, к примеру, при наличии клинического подозрения на острый ретровирусный синдром;
отрицательный результат теста является надежным только в том случае, если в течение прошедших трех месяцев отсутствовал повторный контакт с вирусом.

При наличии клинического подозрения на острую ВИЧ-инфекцию (острый ретровирусный синдром, контакт группы риска с ВИЧ-инфицированным человеком) целесообразно выполнение ВИЧ-ПЦР. С учетом возможного ложноотрицательного результата, в общих случаях ВИЧ-ПЦР может использоваться для исключения факта передачи ВИЧ-инфекции, однако лишь условно — она не может заменить серологический анализа на ВИЧ. Поэтому метод ВИЧ-ПЦР должен применяться только в дополнение к серологическому анализу, но не вместо него. Метод ВИЧ-ПЦР, используемый в рутинной клинической практике, позволяет определять исключительно ВИЧ-1.

В ряде случаев проводят экспресс-тесты на ВИЧ-инфекцию. Эти тесты дают быстрый результат и просты в использовании, для их выполнения и оценки результатов не требуется применение специальных приборов, поэтому экспресс-тесты могут применяться непосредственно на месте оказания помощи. В качестве материала для исследования, наряду с плазмой и сывороткой крови, может использоваться также цельная или капиллярная кровь (из пальца или мочки уха), которая не требует центрифугирования. Некоторые тест-системы позволяют использовать мочу или транссудат слизистой оболочки ротовой полости. Тест показывает результат уже через 15-30 минут. Экспресс-тесты особенно подходят для ситуаций, когда результат теста влечет за собой непосредственные последствия. К примеру, это относится к таким ситуациям, как экстренные операции или травма иглой, содержащей биологический материал. При использовании данного теста существуют ограничения, касающиеся диагностики ВИЧ-инфекции до сероконверсии, поскольку почти все имеющиеся экспресс-тесты позволяют определять только антитела к ВИЧ, но не антиген p24. Экспресс-тесты должны использоваться только для первичной ориентировочной оценки. Они не подходят для подтверждения или исключения острой инфекции. Результат экспресс-теста должен быть подтвержден при первой же возможности в ходе рутинного лабораторного исследования с использованием стандартного анализа на ВИЧ.

при наличии клинического подозрения на ВИЧ-инфекцию после личного или профессионального контакта с больным;
при госпитализации в стационар;
перед хирургической операцией;
донорам крови и органов;
при планировании и вынашивании беременности;
при обследовании на инфекции, передающиеся половым путем;
при вероятном заражении (переливание инфицированной крови, близком контакте с ВИЧ-инфицированным, после случайного незащищенного секса);
для выяснения инфекционного статуса полового партнера пациента;
медицинским работникам при травме иглой, содержащей биологический материал;
при длительном субфебрилитете;
при частых повторных инфекционных заболеваниях.

Главное условие для сдачи анализа — отказ от еды минимум за 8 часов до процедуры, а также запрет на алкоголь.

Забор крови осуществляется амбулаторно по стандартной технологии — из вены стерильным шприцем. Для исследования достаточно 5 мл.

В случае инфицирования ВИЧ продукция антител начинается не ранее чем через две недели.

Антиген p24 может определяться приблизительно за 5 дней до первичного появления специфических антител. Аг р24 — белок стенки нуклеотида ВИЧ. Стадия первичных проявлений после инфицирования ВИЧ — следствие начала репликативного процесса.

Через 4 недели после заражения ВИЧ-специфические антитела определяются в 60-65 % случаев, через 6 недель — в 80 % случаев, через 8 недель — в 90 % случаев, через 12 недель — в 95 % случаев. В стадии СПИДа количество АТ может снижаться вплоть до полного исчезновения. При получении положительного ответа (выявлении АТ к ВИЧ) во избежание ложноположительных результатов анализ необходимо повторить еще один или два раза, желательно с использованием диагностикума другой серии. Результат считают положительным, если из двух — в обоих анализах или из трех — в двух анализах отчетливо выявлены АТ.

Аг р24 появляется в крови через 2 недели после инфицирования и может быть выявлен методом ИФА в период от 2 до 8 недель. Через 2 месяца от начала инфицирования Аг р24 исчезает из крови. В дальнейшем в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечают второй подъем содержания в крови белка р24. Он приходится на период формирования СПИД. Существующие тест-системы ИФА для детекции Аг р24 используют для раннего обнаружения ВИЧ у доноров крови и детей, определения прогноза течения заболевания и контроля за проводимой терапией. Метод ИФА обладает высокой аналитической чувствительностью, что позволяет обнаруживать Аг р24 ВИЧ-1 в сыворотке крови в концентрациях 5−10 пкг/мл и менее 0,5 нг/мл ВИЧ-2, и специфичностью. Вместе с тем следует отметить, что содержание Аг р24 в крови подвержено индивидуальным вариациям, что позволяет выявить только 20−30% пациентов с помощью этого исследования в ранний период после инфицирования.

АТ к Аг р24 классов IgM и IgG в крови появляются, начиная со 2-й недели, достигают пика в течение 2−4 нед и держатся на таком уровне различное время — АТ класса IgM в течение нескольких месяцев, исчезая в течение года после инфицирования, а АТ IgG могут сохраняться годами.

Нормы

АТ к ВИЧ 1/2 в сыворотке крови в норме отсутствуют.
Антиген р24 в сыворотке в норме отсутствует.

В стадии СПИДа количество АТ может снижаться вплоть до полного исчезновения. На период формирования СПИД отмечается подъем содержания в крови белка р24.

Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии Вектор, архивное фото

НОВОСИБИРСК, 11 фев — РИА Новости, Елена Жукова. Вакцины против рака и ВИЧ, уникальные тест-системы и ряд других разработок новосибирских ученых способны если не победить, то как минимум остановить распространение опасных заболеваний. Ко Всемирному дню больного РИА Новости подготовило обзор ряда новых препаратов и методик, успешность которых уже подтверждена различными испытаниями.

Иммунитет против рака

В числе уже получивших известность новых препаратов — вакцина от рака, созданная на основе дендритных клеток (играют основную роль в формировании антивирусного иммунитета).

По словам директора НИИ клинической иммунологии СО РАМН академика Владимира Козлова, дендритные клетки берут у больного, размножают, "подлечивают и обучают работать против опухолевых клеток этого же пациента". Козлов уверяет, что способ совершенно безвреден, так как используются собственные клетки больного, и его эффективность уже полностью подтверждена при лечении рака груди, прямой кишки и аденомы простаты.

Однако отсутствие федерального закона о клеточных технологиях, который долгое время находится в стадии проекта, является причиной, по которой разработанная в Новосибирске вакцина не может применяться.

"Альтернативы для иммунотерапии рака нет. Все остальные (способы) только задержать могут, а в принципе полное излечение — только через иммунную систему. Вот это самое главное, что всем надо понять, и сюда вкладывать деньги. А не в поиски новых химических препаратов", — считает Козлов.

Другой препарат от рака — на основе грудного молока — разработали в Институте химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН.

Лекарство создано на основе генно-инженерного аналога белка лактаптина (белка грудного молока). Препарат действует на несколько видов опухолей, не оказывая токсического воздействия на здоровые клетки. К настоящему времени успешно завершены испытания на животных.

По словам директора института Валентина Власова, испытания на добровольцах предстоит провести в ближайшее время. Однако точных сроков он пока не называет.

ВИЧ победят в XXI веке?

Разработка, которая обещает справиться ВИЧ, создана в научном центре вирусологии и биотехнологии "Вектор". По информации пресс-службы центра, вакцина "КомбиВИЧвак" — одна из наиболее продвинутых в мире, на платформе которой можно проводить работы по совершенствованию вакцинных конструкций в будущем.

Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"

"Эта вакцина индуцирует высокий гуморальный ответ (образование антител), причем антитела высокоспецифичны, они не только распознают антигены ВИЧ-1, но и способны нейтрализовать вирус в системе invitro (в пробирках)", — сообщали ученые.

Первая стадия клинических испытаний успешно завершена более двух лет назад. Решение о начале второй фазы должен принять Научный центр экспертизы средств медицинского применения (Москва).

Кроме того, на вторую и третью стадию клинических испытаний необходимо порядка 500 миллионов рублей. По словам гендиректора центра Александра Сергеева, при самом благоприятном варианте, если будут инвестиции, испытания завершатся через три-четыре года.

Уникальные тесты

Новосибирские ученые активно занимаются и диагностическими системами, позволяющими на ранних стадиях распознать опасные заболевания.

В числе особо значимых специалисты называют разработанную "Вектором" систему диагностики рака. Она позволяет выявлять на ранней стадии не только тип онкологии, но и пораженный орган. По словам гендиректора "Вектора", система может обнаружить онкологию на той ранней стадии, когда человека еще ничего не беспокоит, а это как раз то время, когда шансы на излечение максимальны.

Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"

Тест-система уже проверена на таких онкозаболеваниях, как рак молочной железы и прямой кишки. При обеспечении финансирования, как уверяет Сергеев, специалисты центра готовы проверить ее как минимум на половине известных форм онкологии.

По двум уже "проверенным" формам онкологии система находится на стадии окончания научно-исследовательских работ. При наличии необходимых средств, а это около 20-30 миллионов рублей, она может быть запущена в производство через два года.

На "Векторе" разработаны и другие тест-системы, в том числе для быстрой диагностики по капле крови заболеваний сердца и ряда других.

"Разработан метод, с помощью переменных электрических полей — по оценке вязкоупругих характеристик крови, в частности эритроцитов. Эритроциты являются зеркалом здоровья человека, особенно связаны с соматическими заболеваниями. Например, сердечно-сосудистые заболевания, печень, почки и так далее", — сообщил Сергеев.

Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"

В центре на завершающей стадии находятся разработки еще десяти тест-систем, в том числе мультиплексной системы, которая включает в себя четыре агента клещевых инфекций: клещевого энцефалита, боррелиоза, риккетсиоза, лихорадки Западного Нила.

Экспресс-тест, который уже в первые четыре часа после начала инфаркта позволяет точно его определить, разработан в НИИ терапии и профилактической медицины СО РАМН. Классический тест, основанный на сердечных белках (тропонинах), выявляет заболевание только после шести-восьми часов от начала инфаркта.

По словам сотрудника организационно-методического отдела Президиума СО РАМН Светланы Борисовой, изобретение можно считать прорывным в лечении этого недуга, поскольку после инфаркта из-за недостаточного кровообращения начинает отмирать сердечная мышца и любое промедление с лечением чревато необратимыми последствиями.

Как пояснила начальник организационно-аналитического отдела Президиума СО РАМН Лариса Гаврилова, исследователи НИИ предложили использовать для диагностики белок, связывающий жирные кислоты, наличие которого в организме человека и служит точным признаком острого инфаркта в первые четыре часа от начала болезни.

Преимущество теста еще и в том, что его можно использовать вне лаборатории, в том числе врачам скорой помощи.

Тест прошел клинические испытания на тысяче пациентов в разных регионах России. По этой разработке имеются все разрешительные документы, но на федеральном уровне, по словам разработчиков, пока не принято решение о внедрении методики в медицинскую практику.

Наночастицы и трансгены

Совершенствуют ученые и, как они называют на профессиональном языке, "способы доставки" лекарств в организм.

По словам Борисовой, многие лекарства, принимаемые традиционными способами, быстро разрушаются в печени, и лечебный эффект не достигается. А у некоторых пациентов развивается лекарственная аллергия. Кроме того, есть случаи, когда доставка препарата требуется непосредственно в пострадавшую клетку.

Как рассказал директор Института цитологии и генетики (ИЦиГ) СО РАН Николай Колчанов, интересной разработкой в этом направлении являются так называемые живые вакцины.

"Это морковка, в которую введены гены интерлейкинов и некоторых других стимуляторов иммунной системы. Мыши, которые едят эту трансгенную морковь, у них очень сильно активируется иммунная система. С учетом того, что сейчас в России получено разрешение на производство трансгенных продуктов, для медицины это будет очень позитивно",- считает Колчанов.

Исследователи ИЦиГ также нашли новый способ доставки лекарств в мозг — с помощью наночастиц, которые поступают по волокнам обонятельных нервов. Эта идея родилась во время эксперимента над мышами. Нанопесок, применяемый в лакокрасочной промышленности, закапывали животным в нос. Обследование на томографе показало, что частицы попали в мозг животных.

Еще один способ доставки лекарств в мозг через нос разрабатывают сотрудники Института теоретической и прикладной механики СО РАН. С помощью математических методов они создают модели носа и проводят на них виртуальные манипуляции.

Цель — изучить движение воздуха в верхних дыхательных путях и просчитать ряд параметров: под каким углом подавать лекарственные частицы, какого размера они должны быть, как пациент должен дышать во время процедуры. Результаты исследования лягут в основу методики применения лекарственных аэрозолей.

Сейчас математики налаживают сотрудничество с медиками, чтобы подкрепить свои изыскания клинической практикой. В частности, ученые надеются, что дальнейшие работы получится провести совместно с клиникой имени Мешалкина.

Вступайте в наши группы и добавляйте нас в друзья :)

Сложно судить, но от всей души надеюсь, что наши учёные всерьёз взялись за решение проблем, изначально созданных мировой фармацевтикой. Я исключительно отрицательно отношусь к любым вакцинам. В подавляющем большинстве случаев их применения банально статистически неоправдано. Взять, к примеру, вакцину от гепатита, которую в обязательном порядке колят новорождённым в США. Риск последующего заболевания гепатитом возрастает в 8 раз после примения это вакцины. Но на госзаказе на производство оной "навариваются" фармацевтические компании. Как мы знаем - в капиталистическом мире есть три пути заниматься теми или иными госпоставками: 1) выиграть конкурс, 2) дать взятку, 3) иметь монополию или единственный в своём роде "патент". В любом из этих случаев, как Вы думаете, как будут действовать корпорации, существующие под лозунгом "ничего личного - только бизнес"? Правильно, они будут искать пути сокращения расходов. Не нужно быть поклонником теорий заговора, чтобы распознать огромные возможности для влияния в этой связи. Предлагаю любому просто почитать что кладут в прививки (окромя самого "подкрученного в лаборатории" вируса). А потом попытаться оправдать наличие там всех этих "вкусностей". Хочется надеяться, что у нащих учёных проснётся совесть, и делать они будут именно лекарства, а не зарабатывать чужеродные "гранты" и "спонсорства", подобно неким всем вам известным личностям из медицины и связанных с медициной наук, которые по такой вот "схеме" в том числе "лоббируют" у нас в стране американские и европейские ГМО, смертельная вредность которых была неоднократно доказана.

Что касается рака, то заболевание это исключительно разнообразное, прививочному лечению не особо поддаётся, почему собственно на первые роли и вышли хирургия и химиотерапия. Однако, необходимо заметить, что всё больше людей находят выход в альтернативной медицине, народной медицине и вообще в гомеопатии. Есть огромное множество подходов к решению проблемы рака, в том числе и научно доказанных профилактических (например, употребление тофу как профилактика рака простаты), которые "официальная" наука всеми правдами и неправдами старается очернить и замолчать. А то - сеанс химиотерапии или операция по раку груди стоят больших денег (и какая разница им, в конце концов, частник им заплатит, государство или страховая контора). Делают "бизнес".

Что касается СПИДа и ВИЧ - то эта тема, к несчастью, в медицине столь же запретная, как осуждение Эйнштейна и присвоенных им в корне неверных теорий относительности в 20-м веке. Лично я в своих поисках данных о ВИЧ пришёл к развилке, после которой вижу только два правдоподобных заключения - либо ВИЧ - вирус совершенно иного порядка, нежели про него говорят и пишут (если бы это в действительности был стабильный ретровирус, каким его "малюют" - уже давно решили бы; стало быть не хотят или не могут), либо ВИЧ не существует в принципе как некий стабильный вирус, а является, скажем, мутацией вируса гриппа из прививки, который победил и без того подавленную навязываемым нынче (и тем более - за последние 20 лет, причём не только у нас) нездоровым образом жизни. В общем - простанство для размышления - огромное, но надежда остаётся по-прежнему той же: что у наших людей честь возобладает над западными пороками и вместо "бизнеса" будут делать настоящие прививки (а, может, и вообще откажутся от такого подхода), и если займутся ГМО - то и испытания будут проводить не по "экономической целесообразности" (взятка чиновнику из системы контроля - и продавай не хочу), а заботясь о здоровье людей (для человека нужен период проверки 40-50 лет, с обязательной публикаций проверок на животных, что, собственно, и "дисквалифицирует" современные ГМО от "Монсанто", "Сингенты" и иже с ними - даже крысы становятся бесплодны).

"Для спасения Антонины были предприняты титанические усилия"

18.02.2020 в 18:31, просмотров: 124636

Ученые всего мира пытаются создать вакцину против Covid-19 — нового коронавируса, который сейчас бушует в Китае. Работают самоотверженно, как и раньше, когда искали противоядие от геморрагической лихорадки Эбола и Марбург. Цена научных прорывов была порой слишком большой. Некоторые из вирусологов и лаборантов расплатились за это своими жизнями.

Нас отправили на трехмесячные курсы в Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока. За группой был закреплен инструктор, который наблюдал, как мы работали с культурами микробов. Не должно было быть никаких ошибок, никаких случайных действий или неправильных телодвижений, так как любая капля, упавшая не туда, — это лабораторная авария. Начинали работать с банальными микроорганизмами пневмококка, а потом уже с опасными культурами: туляремией, холерой и бактериями чумы. Был очень серьезный контроль. Смотрели, в частности, есть ли у нас тремор в руках, обращали внимание на психологическую устойчивость. По окончании курсов инструктор давал заключение — способен человек к такой работе или нет. Мы с Николаем Устиновым получили необходимые документы.

После учебы его назначили руководителем отдела по наработке вирусов. Мне предложили создать лабораторию инструментального контроля отдела биологической безопасности. Возбудители не должны были проникнуть во внешнюю среду.

— Это был секретный объект?

— Институт позиционировал себя как открытое научное учреждение. Хотя проверка при приеме на работу была весьма серьезная. Документы оформлялись от полугода до года.

Что касается жидких отходов, то они собирались сначала в емкости в изолированных боксах, проходили дезинфекцию в течение нескольких часов, а то и на протяжении всей ночи. Потом попадали в огромные накопительные емкости по 16 кубов, которые располагались в подвале. И следом проходили через змеевик, куда подавался перегретый пар температурой около 160 градусов.

— В виде чего хранились в институте опасные патогены?

— Мы работали с вирусами Эбола, Марбург, Венесуэльский энцефаломиелит лошадей и другими. Специальные емкости находились в низкотемпературных хранилищах. Выбор емкости зависел от количества материала. Например, когда забирали печень обезьяны, которая погибла от заражения вирусом Марбург или Эбола, то в ряде случаев использовали и обычные стеклянные банки, поскольку других, пластиковых, тогда не было. Но чаще в ходу были пенициллиновые флаконы, которые мы закрывали черными резиновыми лабораторными пробками. Их помещали в специальные герметичные металлические контейнеры, герметизировали, опечатывали и помещали в низкотемпературные холодильники. Они хранились при температуре -70, -80 градусов.

— Что собой представлял виварий?

— В садках, которые помещались в металлические шкафы со стеклянными дверцами, содержались животные. Крыс я не держал, могли укусить. Работал в основном с морскими свинками, кроликами и обезьянами — либо с зелеными мартышками, либо с макакой резус. Для работы с вирусом Эбола наиболее подходили павианы — гамадрилы, только надо было подбирать не очень крупных животных. Бывало, что обезьяны у нас сбегали, они носились по верхам шкафов и воздуховодам, и поймать их, тем более в костюмах, это был тот еще квест.

— Сотрудники, работающие с инфекциями, на самом деле должны были жить в городке-спутнике института Кольцово и не имели права выезжать за пределы поселка, не пройдя карантин.

— Отмечу, что работать с возбудителями, передающимися от человека к человеку, могли только сотрудники, постоянно проживающие в Кольцово. Выезд на срок более суток без прохождения карантина (21 день) не разрешался.

Существовало такое понятие, как обсервационный период. Это сложилось еще в тридцатых годах, когда один из сотрудников Саратовского противочумного института, заразившись и не заметив этого, уехал в командировку в Москву. Через несколько дней у него начали проявляться признаки болезни. Это привело к тому, что и он, и врачи, которые были привлечены к лечению, не сразу распознали чуму и погибли. Это было еще до открытия антибиотиков. После этого было принято решение о карантине для сотрудников, которые работают с заразными возбудителями.

— Вы жили с Николаем Устиновым по соседству; общались вне работы?

— Когда в Кольцово сдали новый дом, мы оба получили в нем квартиры. Жили в соседних подъездах. У Николая был уже значительный опыт работы с Марбургом, а я в руках этот вирус не держал, работал ранее с нейротропными вирусами. Решил воспользоваться нашими добрыми отношениями и напросился к нему в ученики. Николай был очень отзывчивым и доброжелательным человеком, и я в течение трех недель сопровождал его при проведении работ, получил навыки работы с приматами. Потом уже вернулся в свой корпус, чтобы приступить к исследованиям. Когда появилась возможность работать с заразными возбудителями, я сосредоточился на изучении биологии вируса Эбола. Марбург и Эбола объединены в одно семейство. Оба характеризуются уровнем летальности от 30 до 90%.

— Как узнали, что Николай Устинов заразился?

— Была надежда на положительный исход?

— Поскольку не было движения поршня шприца, не было введения суспензии, оставалась надежда, что при прохождении через внешний кожный покров свинки иголка очистилась и полученная доза могла быть очень маленькой. Мы провели эксперимент, пытаясь выяснить, сколько могло быть возбудителя при таких работах на срезе иглы. И насчитали очень высокую дозу — порядка тысячи и более летальных доз.

Дальше потекли страшные дни ожидания. На четвертый день появились признаки заболевания. Болезнь развивалась, и никакими средствами из использованных, в том числе введением иммуноглобулинов, которые привезли, правда, поздновато (они эффективны в первые сутки и даже часы), ее нельзя было остановить. У Николая резко поднялась температура, возникли боли в мышцах, рвота, диарея и коагуляционные нарушения с кровотечениями. А потом наступила стадия геморрагий, когда кровь продолжала течь не свертываясь… Через неделю Николая не стало. Ему было 44 года.

— При лечении Николая Устинова и впоследствии, при вскрытии его тела, заразились врач и патологоанатом, который случайно поцарапался иглой шприца, которым брал у покойного образцы костного мозга. Как сложилась их судьба?

— Действительно, у реаниматолога из Министерства здравоохранения (жаль, не помню его имени) была шприцевая травма. Его поместили в соседней палате и ввели гаммаглобулин. У него наблюдали то ли абортивную, самопрервавшуюся форму течения болезни, что характерно для Марбурга при передаче от человека к человеку, то ли реакцию на чужеродный (лошадиный) глобулин. Но все обошлось, вскоре он вернулся к лечению Николая Устинова. Также получил травму при вскрытии один из ведущих специалистов института Олег Костырев. Ему был тоже введен глобулин, он подвергся карантину и, к счастью, вскоре поправился.

— Это правда, что Николай Устинов изучал возможность применения вируса в военных целях?

— В этой области знаний все исследования имеют и медицинский, и оборонный смысл.

— Ученым предназначалась какая-то страховка?

— Никто нас не страховал, но существовала очень солидная по тем временам ежемесячная доплата всем, кто работал с особо опасными инфекциями.

— Этот случай очень необычный. Сергей Визунов, который проводил исследования с вирусом Марбург, был изначально госпитализирован в инфекционный стационар с признаками простуды. На этот счет есть инструкция. В случае повышения температуры всех, кто работал с вирусами Марбург или Эбола, направляли на обследование.

Ситуация несколько дней не вызывала никакого беспокойства, а диагностика для этой болезни еще не была разработана. Тем не менее у больного были взяты кровь и носоглоточные смывы и введены восприимчивым животным. На шестой день морские свинки начали болеть и погибать. Да и у Сергея Визунова температура потихоньку подкралась к 38 градусам. Стало понятно, что очень нехарактерно и медленно развивается болезнь Марбург, очевидно, вследствие необычного пути заражения — предположительно через слизистую глаз. Работая с сывороткой крови лабораторного животного, зараженного вирусом, и считая этот материал утратившим инфекционность, он, возможно, случайно задел пальцем глаза.

Болезнь брала свое, через пару недель на фоне высочайшей температуры и тяжелейшего состояния больной практически оказался при смерти, несмотря на применение всех возможных средств. Спасением неожиданно стала процедура плазмофереза — забор крови, ее очистка и возвращение обратно в кровоток. После этого у Сергея резко спала температура, произошло улучшение всех показателей. Но ненадолго. Процедуру повторили. И, казалось бы, больной пошел на поправку. Через месяц уже заговорили о выписке, но тут Сергея Визунова накрыла вторая волна болезни, и все началось сначала. В целом в стационаре он провел полгода.

— Трагедией для всех стала смерть 46-летней опытной старшей лаборантки Антонины Пресняковой.

Мы с ней и ее командой неоднократно пересекались по работе. Я по-доброму завидовал их слаженности и умению. И подумывал, как бы мне переманить их в мою лабораторию. Когда их лаборатория распалась, они начали работать под моим началом. В целом у нас собралась очень квалифицированная команда, но Тоня, пожалуй, была самой умелой из всех. В тот роковой день, 5 мая 2004 года, по этой причине именно ее попросили помочь отобрать кровь из сердца у морской свинки. Она взяла шприц, которым уже пробовали совершить эту манипуляцию, но, поняв, что игла затромбирована (в ней свернулась кровь, и она стала непроходимой), положила его в емкость с дезраствором — хлорамином. Взяла новый шприц, забрала кровь и отдала ее в работу. А сама начала приводить в порядок рабочее место. Убрала животных, замочила в хлорамине шприц, которым работала. И, чуть помешкав, решила закрыть защитным колпачком затромбированный шприц. Достала его из дезраствора и, вдевая иглу, промахнулась, уколола руку. Ее поместили в изолятор.

— Шприц, которым укололась Антонина, побывал ведь в хлорамине. Беды не ждали?

— Мы вообще не ожидали, что она заболеет. В первые дни меня к ней пускали. Инкубационный период составил 7 дней. На седьмой день утром температура была 37.2, у Антонины появилось першение в горле. А первым характерным признаком лихорадки Эбола как раз и является затруднение при глотании. Потом мне позвонили и сказали, что у нее поднялась температура до 39 градусов, Тоню перевели в бокс интенсивной терапии, и началась борьба за жизнь.

Я привел на территорию института, к стационару, детей Антонины, сына и дочь. Мы подошли к окну так, чтобы она могла их видеть. Она еще двигалась, выглядела неплохо. Там на окнах была наклеена специальная пленка. Тоня видела нас, а мы ее — плохо.

Все очень надеялись на плазмаферез. Но он не помог. Не помогло и введение иммуноглобулина. Для спасения Антонины были предприняты титанические усилия. Наши медики даже связывались с врачом в Африке, через которого прошли сотни больных вирусом Эбола. По его рекомендации применили все возможные средства. Но силы ее таяли. Это очень мучительная, страшная болезнь, с множественными наружными и внутренними кровоизлияниями.

— Говорят, что Антонину Преснякову хоронили в закрытом цинковом гробу, а тело, чтобы исключить распространение вируса, обработали специальными препаратами, которые якобы составляли государственную тайну.

— Никаких там специальных и секретных технологий не было. Пришли двое сотрудников, обработали бокс. Один из них завернул тело Антонины в некий саван, в простыни, которые были пропитаны дезинфектантами — противомикробными веществами. Положили Тоню в обычный гроб, который поместили в саркофаг, цинковый гроб, и запаяли его. Потом у нас заговорили о мистике. Тот, кто оборачивал тело Антонины в простыни, на следующий день после похорон погиб в автокатастрофе. Смерть Антонины стала для всех нас большой утратой. Поскольку все испытывали сильный стресс, я опасался, что одно неосторожное движение может привести к новой трагедии. И администрация пошла на то, чтобы пригласить для сотрудников нашей лаборатории психолога.

— Память о погибших сотрудниках как-то увековечена?

— Нет, к сожалению, никаких барельефов им не сделано и памятных досок не открыто. 19 мая, в день смерти Антонины Пресняковой, мы приходим на ее могилу на Кольцовское кладбище. Собирается ее семья и мы — всей лабораторией. А потом идем поклониться Николаю Устинову.

Заголовок в газете: Война с вирусами: охотники и жертвы
Опубликован в газете "Московский комсомолец" №28199 от 19 февраля 2020 Тэги: Смерть, Вирус Эбола, Биотехнологии, Медицина, Здравоохранение, Наука Организации: Министерство здравоохранения Места: Китай, Москва

Читайте также: