Когда делается анализ иммуноблот на сифилис
Анализ на сифилис давно стал частью рутинного медицинского обследования. Его обязательно назначают при беременности, перед госпитализацией. Результаты анализа часто требуют при приеме на работу или в ходе диспансеризации. Сегодня диагностика сифилиса находится на высоком уровне развития, но искоренить болезнь окончательно не удается — каждый год выявляют тысячи новых случаев заболевания.
Так ли страшен сифилис, как о нем говорят?
Сифилис вызывает бактерия Treponema pallidum, или бледная трепонема. Попадая в организм, она постепенно поражает все органы. Причем вне организма трепонема быстро погибает. Дезинфицирующие, моющие средства и даже обычный солнечный свет губительно воздействуют на нее. Эта бактерия может долго сохраняться только во влажных условиях и при замораживании.
Первый симптом сифилиса — сифилома. Уплотнение на коже, на котором появляется эрозия или язвочка. Она возникает в том месте, где трепонема проникла в организм. Чаще всего это кожа половых органов и промежности.
Через некоторое время язвочка бесследно проходит и человек часто думает, что полностью излечился. Но примерно через 1,5 месяца на коже появляется сыпь в виде розовых небольших пятен. Это стадия вторичного сифилиса, которая может длиться несколько лет.
Если и на этой стадии человек не проходит лечение, развивается третичный сифилис. Болезнь поражает все органы и ткани, появляются гуммы — плотные узлы, которые разрушаются и оставляют грубые рубцы.
Самые серьезные осложнения сифилиса — нейросифилис, поражение внутренних органов, воспаление суставов. Особенно тяжело протекает врожденный сифилис. Если во время беременности женщина переносит это заболевание, то примерно в 25% случаев ребенок погибает на 6–7 месяце беременности, еще в 14% — сразу после рождения [2] . А у выжившего младенца развиваются тяжелые поражения кожи, легких, печени и внутренних органов.
На рубеже XX–XXI веков Россия пережила вспышку сифилиса. За 2000 год было выявлено более 239 тысяч новых заболевших. После этого заболеваемость начала снижаться. В 2005 году новых заболевших было 97,9 тысяч, в 2010 — 63,7 тысяч, а в 2015 — только 34,4 тысячи. В феврале 2017 года за один месяц в России выявлено 2300 новых случаев сифилиса [3] . Но, к сожалению, как говорят специалисты, реальное количество заболевших примерно в 3–4 раза больше.
Сифилис до сих пор является распространенной болезнью в том числе и из-за проблем диагностики. Первичная сифилома не вызывает боли и самостоятельно бесследно заживает, поэтому далеко не все обращаются к врачу. Сыпь во вторичном периоде не вызывает боли, зуда и шелушения, проходит сама и не оставляет следов. В третичном периоде количество антител против этой инфекции может снижаться настолько, что не обнаруживается серологическими тестами. Есть проблемы и с обследованием половых партнеров — далеко не все готовы раскрыть врачу историю своих любовных похождений и пригласить своих партнеров на обследование.
Стоит помнить, что любые высыпания, особенно возникшие на половых органах — повод обратиться к дерматовенерологу и пройти обследование.
Для беременных и доноров анализ на сифилис обязателен. Для некоторых работающих (госслужащие, военнослужащие, медицинские работники, повара) предоставление результатов данного исследования обязательно при поступлении на работу и затем каждый год при диспансеризации.
Анализ также сдают перед плановой операцией, при поступлении в стационар или при обращении к врачу с симптомами, характерными для этого заболевания.
Основная часть методов диагностики предполагает анализ сыворотки крови. Из нее выделяют антитела к трепонеме и ДНК возбудителя. Сами трепонемы чаще обнаруживают в соскобах с высыпаний, которые появляются при сифилисе.
Для выявления ДНК трепонемы также могут проводить исследование мочи, эякулята, соскоба со слизистых оболочек, спинномозговой жидкости, клеток кожи или конъюнктивы глаза. То есть биоматериала из тех органов, которые могут быть поражены сифилисом.
В зависимости от вида исследования кровь могут брать из вены или из пальца. Некоторые исследования желательно проводить натощак, для других достаточно не есть 4 часа до забора биоматериала.
Материал для выявления ДНК трепонемы лучше собирать до начала антибактериальной терапии. Спинномозговую жидкость забирают только в стационаре в стерильную емкость. Соскоб со слизистых оболочек, с поверхности кожи или глаза не требует особой подготовки. Его может взять врач или специалист лаборатории.
Женщинам, перед тем как сдавать анализ на сифилис из влагалища, желательно воздержаться от спринцевания, половых контактов, диагностических гинекологических манипуляций хотя бы в течение двух суток.
Исследования на сифилис разделяют на две группы — выявление трепонемы или косвенных следов ее присутствия. Для выявления возбудителя заболевания исследуют материал с язвы или из пораженных органов. Эти методы эффективны уже при первых признаках болезни.
Серологические исследования можно проводить примерно через 8–9 дней после появления первичной язвы. То есть сдавать анализ на сифилис сразу после полового контакта бесполезно.
К прямым методам относят темнопольную микроскопию, ПЦР и RIT-тест. Темнопольная микроскопия — это быстрое исследование, которое занимает один рабочий день. Его достоверность — 100%. Но при выраженном воспалении, кровоточивости, при травме элемента или после начала наружного лечения обнаружить живые трепонемы становится почти невозможно.
Микроскопия практически полностью уступила место ПЦР-диагностике. Метод ПЦР позволяет выделить участки ДНК трепонемы в соскобах с кожи и слизистых, из другого биологического материала.
Специфичность ПЦР диагностики приравнивается к 100%. Чувствительность зависит от расходных материалов, которые используются в лаборатории.
RIT-тест — это биологический метод, при котором материал от заболевшего человека прививают лабораторным кроликам. Этот метод очень точен, но сейчас используется только в исследовательских целях. Во-первых, это дорого. Во-вторых, ждать, пока у животного появятся признаки заболевания, слишком долго. Поэтому рассматривать его как реальную альтернативу другим методам диагностики нет смысла.
Непрямые методы позволяют выявить в крови признаки присутствия трепонемы — различные виды антител. Они разделяются на специфические и неспецифические.
РПР-тест (RPR) , или тест с быстрыми плазменными реагинами — это современный зарубежный аналог реакции микропреципитации. К этой же группе относится исследование с толуидиновым красным.
Все эти методы обладают хорошей чувствительностью, но могут давать положительные результаты при отсутствии заболевания. Поэтому если одна из этих проб оказалась положительной, проводятся подтверждающие тесты. К ним относят РСКт, РИТ, ИФА, РИФ, РПГА и иммуноблот.
ИФА и РПГА — это специфичные (100%), чувствительные (95%) и незатратные методы. Эти реакции иногда дают ложный положительный результат при воспалении и некоторых нарушениях обменных процессов. Поэтому чтобы поставить диагноз, нужны результаты минимум двух тестов.
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) и иммобилизации бледных трепонем (РИТ) — это специфичные, но достаточно дорогие методы. На практике они почти не используются.
Реакция связывания комплимента с трепонемным антигеном (РСКт) является более точным аналогом реакции Вассермана. В ней анализируется антиген, характерный только для бледной трепонемы.
Еще одним подтверждающим тестом является иммуноблот . Этот метод используется для углубленной диагностики в сомнительных случаях. В отличие от других анализов, которые могут быть готовы за 1–2 рабочих дня, результата иммуноблота придется ждать около недели.
Цена анализа на сифилис зависит от его вида. Скрининговые реакции, такие как РМП или RPR, обойдутся примерно в 320–380 рублей. Определение ДНК в различных субстратах от соскобов со слизистых оболочек до спинномозговой жидкости стоит около 350–450 рублей. Стоимость зависит от ценовой политики лаборатории и используемых расходных материалов. Чем более чувствителен тест, тем больше будет его цена.
ИФА анализ на сифилис стоит приблизительно 500–800 рублей в зависимости от модификации метода. За иммуноблот придется отдать около 1600–1700 рублей. Другие методы исследования практически не используются в реальной практике.
Кровь для исследования на сифилис можно сдать в любой поликлинике или лаборатории. Преимущество поликлиники в том, что биоматериал на анализ по направлению можно сдать бесплатно. Это актуально при обследовании перед плановой госпитализацией, при диспансеризации или если человек устраивается на работу. Минус — время ожидания, в некоторых случаях отсутствие современного оборудования и относительная открытость информации.
Если результат нужен быстро, точно и строго конфиденциально, возможно, стоит обратиться в частные лаборатории. За такой анализ придется заплатить, но при этом есть возможность выбрать метод исследования, а результат в большинстве случаев будет готов уже через 1–2 дня. Для особенно нетерпеливых есть возможность заказать экстренное проведение исследования и получить результаты уже через 2 часа.
Некоторые лаборатории проводят такие исследования на условиях анонимности: личные данные пациента не фигурируют даже в бланке направления. Результат такого анализа нельзя предъявить в больницу или работодателю, но зато можно не беспокоиться за раскрытие личных данных.
Обязательно обратите внимание на метод исследования. Вместо морально устаревшей RW желательно выбирать более современные тесты — РМП или RPR и их аналоги. При ПЦР исследовании обратите внимание на чувствительность метода, количество копий ДНК в образце, при котором тест сработает как положительный.
Сифилис — заболевание, которое может вызвать многочисленные осложнения. Но оно развивается достаточно медленно. Это значит, что у человека есть время, чтобы сдать биоматериал на анализы и пройти лечение до того, как последствия станут необратимыми.
Исследование, направленное на диагностику антител к Treponema pallidum класса IgG методом иммуноблотинга в целях диагностики или подтверждения сифилиса, а также для дифференциальной диагностики свежеприобретенного и давнего инфицирования T. рallidum.
Антитела класса IgG к возбудителю сифилиса; иммуноглобулины класса G к антигенам Тreponema pallidum.
Синонимы английские
Syphilis IgG; anti-Treponema pallidum, IgG; anti-TP IgG; antibodies to Т. pallidum, IgG; immunoblotting.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Сифилис является одним из наиболее распространенных инфекционных заболеваний, передающимся преимущественно половым путем при непосредственном контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром). Возможен и вертикальный путь передачи от инфицированной матери к плоду, а также через кровь и реже при контакте с контаминированными предметами. Источником инфекции является больной человек, возбудитель инфекции – Treponema pallidum (T. pallidum), семейство Spirochaetaceae, род Treponema.
Соответственно клиническому течению заболевания, классифицируют несколько стадий сифилиса: первичную, вторичную, латентную и третичную. Первичный сифилис возникает на 14-21-й день заражения и проявляется возникновением твердого шанкра в месте контакта и проникновения возбудителя. Твердый шанкр представляет собой одну или несколько безболезненных язв, исчезающих в течение 2-6 недель без лечения. Возможно также увеличение регионарных лимфатических узлов. Вторичный сифилис диагностируется на 4-8-й неделе от момента появления твердого шанкра или на 2-3-й месяц после заражения. Для него характерны следующие клинические проявления: розеолезно-папулезная сыпь преимущественно на ладонях и стопах, энантема на слизистых оболочках, слабость, лихорадка, головная боль, генерализованная лимфоаденопатия, тонзиллит, фарингит. Далее симптомы исчезают и инфекция переходит в латентную форму, возможно с возникновением рецидивов. При нелеченном заболевании развивается третичный сифилис, проявляющийся поражением нервной системы, сердечно-сосудистой системы, костно-суставного аппарата.
Клиническая лабораторная диагностика играет важную роль в диагностике сифилиса в сочетании с эпидемиологической и клинической картинами заболевания. Чаще всего используются серологические методы лабораторной диагностики, основанные на выявлении антител.
Различают нетрепонемные и трепонемные тесты. Нетрепонемные тесты направлены на выявление антител к кардиолипину, фосфолипиду, компоненту клеточной и митохондриальной мембран бактерий. Трепонемные тесты выявляют антитела, направленные конкретно против антигенов, компонентов бактерий T. pallidum. К ним относятся реакция пассивной гемагглютинации, реакция иммунофлуоресценции, метод иммуноферментного анализа и метод иммуноблотинга.
Метод иммуноблотинга используется в качестве теста второй линии для подтверждения скрининговых методов исследования или в качестве дополнительной диагностики сифилиса, при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований. Он основан на определении антител классов IgM и IgG к молекулам-антигенам, разделенным с помощью метода электрофореза в соответствии с их молекулярной массой. Диагностическая чувствительность метода составляет 99 %, диагностическая специфичность – 100 %.
Известно несколько липопротеинов-антигенов наружной клеточной мембраны T. рallidum, которые обладают наибольшей иммуногенностью и играют важную роль в серологической диагностике сифилиса методом иммуноблотинга. К ним относятся следующие специфичные мембранные белки: Tp15 (15 кДа), Tp17 (17 кДа), Tp45 (45 кДа), Tp47 (47 кДа). Иммуноглобулины класса G к T. pallidum появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Их количество постепенно увеличивается, начиная преобладать на шестой неделе заболевания над уровнем иммуноглобулинов IgM. Антитрепонемные антитела класса IgG могут сохраняться на определённом уровне в течение месяцев и лет. Уровень данных антител нарастает в зависимости от длительности заболевания.
Антитела к антигенам трепонем класса IgG играют важную роль в диагностике первичного, вторичного, третичного и латентного сифилиса. Для подтверждения ранее диагностированного инфицирования T. pallidum рекомендуется определение антител класса IgG через один-два месяца после обнаружения антител класса IgM, но обязательно в свежем образце крови. По некоторым данным, антитела класса IgGк Tp17, Tp45 и Tp47 обнаруживаются при первичном сифилисе на его более поздних стадиях. Анти-Tp45 и анти-Tp47 IgG чаще встречаются при латентной форме сифилиса. Через 24 месяца после проведенной патогенетической терапии у пациентов с первичным и вторичным сифилисом антитела класса IgGметодом иммуноблотинга не детектируются.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики сифилиса;
- для подтверждения скрининговых методов исследования;
- для дополнительной диагностики сифилиса при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований;
- для дифференциальной диагностики свежеприобретенного и давнего инфицирования T. рallidum;
- для диагностики первичного, вторичного, латентного и третичного сифилиса;
- для профилактического обследования беременных женщин;
- для оценки проведенной патогенетической терапии сифилиса.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на сифилис и при симптомах данного заболевания: наличие твердого шанкра, генитальных язв, лимфоаденопатии, слабости, лихорадки, розеолезно-папулезной сыпи преимущественно на ладонях и стопах, энантемы на слизистых оболочках;
- при подтверждении скрининговых методов исследования и для дополнительной диагностики сифилиса, при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований;
- при наличии полового партнера, больного сифилисом;
- при ведении беременностив целях профилактического обследования беременных женщин желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет в женской консультации;
- при лечении от другого заболевания, передающегося половым путем;
- при определении точной причины заболевания, при наличии неспецифических симптомов, схожих с признаками сифилиса;
- если пациент был инфицирован, он должен повторить анализы на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца для оценки проведенной патогенетической терапии против сифилиса.
Что означают результаты?
Мембранный белок TpN47: отрицательный.
Мембранный белок TpN17: отрицательный.
Мембранный белок TpN15: отрицательный.
- первичный, вторичный, третичный сифилис;
- латентный сифилис.
- отсутствие сифилиса;
- проведение диагностики на раннем сроке, когда не сформировался иммунный ответ против возбудителя T. рallidum;
- поскольку антитела IgG к T. pallidum могут свободно проникать через плаценту, положительный результат у младенцев не является основанием для постановки диагноза "врождённый сифилис";
- отсутствие антител класса IgG у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает наличия врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.
Что может влиять на результат?
- Возможно получение ложноположительного результата при наличии ВИЧ-инфекции, болезни Лайма, малярии, аутоиммунных заболеваний, в частности системной красной волчанки, при атипичной пневмонии, у людей, употребляющих наркотики внутривенно, у пожилых.
- Результаты данного исследования должны интерпретироваться только комплексно, с учетом анамнеза, клинических данных, результатов лабораторного обследования.
- Для подтверждения ранее диагностированного инфицирования T. pallidum рекомендуется определение антител класса IgG через один-два месяца после обнаружения антител класса IgM, но обязательно в свежем образце крови.
- Отрицательный результат иммуноблотинга не исключает наличие сифилиса.
- Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
34 Treponema pallidum, IgG, титр
31 Treponema pallidum, IgM, титр
44 Treponema pallidum, антитела
27 Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
28 Treponema pallidum, IgG в ликворе
92 Сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), титр
104 anti-Treponema pallidum, IgM (иммуноблот)
Кто назначает исследование?
Дерматолог, дерматовенеролог, гинеколог, уролог, инфекционист, терапевт, врач общей практики, педиатр.
Иммуноблот представляет собой современный безопасный метод тестирования, отличающийся высоким уровнем точности, используемый с целью диагностики сифилиса. Специфика анализа заключается в исследовании плазмы крови и выявлении в ней антител (Ig М и Ig G), которые вырабатываются в ответ на присутствие бактерии бледной трепонемы в организме.
Метод иммуноблота на сифилис отличается высоким уровнем чувствительности, что позволяет определить инфекционное поражение на первичных стадиях и на фоне отсутствия симптоматики. Недостатком анализа является возможность применения данного способа только с целью подтверждения факта наличия заболевания, но не осуществления контроля над процессом его лечения.
Характеристика методики
При подозрении на сифилис на первичных этапах диагностических мероприятий используются так называемые нетрепонемные тесты, которые позволяют определить антитела в крови к возбудителю заболевания. Для подобных способов является характерным низкий уровень точности, возможно получение положительного результата даже при отсутствии бледной трепонемы в организме, так как антитела могут вырабатываться и при других заболеваниях. Данные исследования расцениваются в качестве ориентировочных методов, в числе их преимуществ — затрата малого количества времени на получение результатов, дешевизна, широкая доступность для населения.
При получении положительного результата нетрепонемных тестов требуется проведение высокоточного тестирования (трепонемного), которое позволит точно определить наличие возбудителя сифилиса, а также продолжительность заражения. В этом случае и проводят иммуноблот, при котором используются специфические антигены, являющиеся свойственными исключительно для антител бледной трепонемы.
Если антитела есть в крови больного, на данном тесте будут образовываться специальные полоски. Их оценивают визуально по расположению и интенсивности, на основании чего делают выводы:
- Положительный – для антител, отнесенных к классу IgM является характерным присутствие единичной насыщенной полосы, для IgG – несколько выраженных линий.
- Неопределенный – IgM – слабовыраженная единичная полоса, IgG – одна четкая линия.
- Отрицательный – IgM, IgG – отсутствие полос.
В ходе проведения иммуноблота могут быть получены положительные, отрицательные, неопределенные результаты:
- Положительные результаты говорят о недавнем заражении сифилисом. Процент неинтерпретирумых и ложноположительных результатов крайне низок, так как метод выявления сифилитической инфекции характеризуется в качестве высокоточного. При задействовании непосредственно иммуноблота используются специфические антигены, являющиеся свойственными исключительно для бледной трепонемы.
- При отсутствии полос на мембране вероятность инфицирования бледной трепонемой не исключена. Отрицательный результат может говорить о сравнительно недавнем заражении, в ответ на которое иммунная система не успела спродуцировать выработку антител. При наличии подозрений на инфицирование рекомендуется провести повторное исследование через несколько недель.
- При получении неопределенных результатов требуется проведение повторного тестирования. Как правило, подобное случается на ранних этапах заражения бледной трепонемы, а также при допущении ошибок при проведении иммуноблота, сифилис в данном случае может отсутствовать.
Спровоцировать получение ложноположительных или неопределенных результатов иммуноблота могут различные факторы, в числе которых приводятся следующие:
- Период беременности. Особенно часто подобное наблюдается у женщин в период третьей или последующих гестаций. Причина получения неверных результатов заключается в разбалансировке гормонального фона.
- Прохождение в недавнем времени процедуры вакцинирования.
- Перекрестные реакции аллергического характера.
- Вирусные поражения организма. Чаще подобное наблюдается при инфицировании гепатитом или гриппом.
- Воспалительные процессы, поражающие сосудистую систему организма.
- Нарушения состава крови – низкий уровень свертываемости или, напротив, повышенная густота.
- Туберкулез, протекающий на различных стадиях.
- Аутоиммунные поражения печени.
- Использование в ходе проведения исследования неспецифичных антигенов.
Для определения инфицирования или подтверждения отсутствия в организме бледной трепонемы рекомендуется повторное проведение исследования не ранее, чем через 2-3 недели после первой процедуры.
Показания к проведению
Иммуноблот может быть рекомендован специалистом пациенту при подозрении на сифилис. В иных ситуациях показаниями к исследованию могут быть следующие состояния:
- Появление симптоматики, косвенно либо прямо указывающей на вероятность заражения бледной трепонемой.
- Наличие подозрений на развитие сифилиса первичной или вторичной формы на фоне получения отрицательных данных при иных вариантах исследования. В таких ситуациях иммуноблот необходим, если другие тесты демонстрируют отрицательный результат, однако развернутая клиническая картина указывает на наличие заболевания.
- Наличие изъязвлений, схожих на шанкры при сифилисе. В качестве показаний могут выступать поражения кожных покровов, расположенные в полости рта, в зоне половых органов.
- Заболевания, имеющие венерическую природу происхождения (ВИЧ, гепатит).
- Врожденная форма сифилиса.
- Различные варианты аутоиммунных заболеваний, в числе которых красная системная волчанка, сахарный диабет, ревматоидный артрит.
- Незащищенный половой контакт с лицом, которое предположительно заражено сифилитической инфекцией.
Также к числу показаний относят получение неинтерпретируемых, сомнительных или положительных данных при методах, обладающих низким уровнем точности. Как правило, подобное происходит при стандартных исследованиях при ряде заболеваний, в числе которых туберкулез, болезнь Лайма, сахарный диабет, а также состояние беременности, алкогольная и наркотическая зависимость.
Сроки определения противотрепонемных антител
Нужно знать, что ни один, даже самый точный метод, в том числе, иммуноблот, не позволит получить точных данных, если заражение сифилисом произошло несколько дней назад. Обусловлено это тем, что болезнетворные микроорганизмы находятся в инкубационном периоде на ранних этапах внедрения в организм, соответственно, иммунная система в указанные сроки не начинает продуцировать антитела, выявляемые в ходе проведения иммуноблота.
- Продуцирование организмом антител IgM для борьбы с проникшей в организм сифилитической инфекцией начинается в период с седьмого по четырнадцатый день заражения сифилисом. Но вероятность обнаружения их в это время даже посредством высокоточных анализов крайне мала. Максимальной концентрации уровень антител достигает в период с шестой по девятую неделю инфицирования.
- Полное исчезновение выявляемых анализом IgM происходит через три – шесть месяцев после курса терапевтического лечения. Если больной не получал лечение, подобное наблюдается через год – полтора после внедрения в организм сифилитической инфекции. Выявление антител возможно при первичном и вторичном периоде заболевания. При этом определение может быть исключено в том случае, если сифилис протекает в скрытой форме. Появление IgM после полного исчезновения говорит о повторном заражении или низкой эффективности лечения.
- Выработка организмом специфических антител, отнесенных к классу IgG, начинается примерно через четыре – пять недель с момента внедрения бледной трепонемы в организм. В отличие от IgM, концентрация IgG постоянно увеличивается, достигая максимальной величины к двенадцати – двадцати четырем месяцам после инфицирования и сохраняясь на протяжении нескольких лет или всей жизни даже при условии успешного лечения.
Подготовка к анализу
Необходимость в проведении специальной подготовки к иммуноблоту отсутствует, как таковая. Однако с целью получения точных результатов пациенту может быть порекомендовано соблюдение следующих правил:
- Отказ от приема пищи минимум за восемь часов до процедуры. Так как анализ рекомендуется проводить в утренние часы, важно в день его проведения исключить завтрак до забора биологических материалов.
- Исключить тяжелые физические нагрузки.
- Отказаться от потребления напитков, содержащих алкоголь, за один – три дня до процедуры.
Важно помнить, что получение положительных результатов при проведении иммуноблота не всегда говорит о заражении сифилитической инфекцией, так как всегда есть вероятность ложных данных. Подобное может произойти не только на фоне причин перечень которых приведен выше, но также ввиду человеческого фактора, то есть, ошибки, допущенной лаборантом при исследовании.
Для точной диагностики рекомендуется прохождение повторного исследования. Особенно важно сделать это, если в анамнезе присутствуют ситуации, подразумевающие риск инфицирования, однако клиническая картина заболевания исключена.
Иммуноблот представляет собой современный безопасный метод тестирования, отличающийся высоким уровнем точности, используемый с целью диагностики сифилиса. Специфика анализа заключается в исследовании плазмы крови и выявлении в ней антител (Ig М и Ig G), которые вырабатываются в ответ на присутствие бактерии бледной трепонемы в организме.
Метод иммуноблота на сифилис отличается высоким уровнем чувствительности, что позволяет определить инфекционное поражение на первичных стадиях и на фоне отсутствия симптоматики. Недостатком анализа является возможность применения данного способа только с целью подтверждения факта наличия заболевания, но не осуществления контроля над процессом его лечения.
Иммуноблот на сифилис — что это
При подозрении на сифилис на первичных этапах диагностических мероприятий используются так называемые нетрепонемные тесты, которые позволяют определить антитела в крови к возбудителю заболевания. Для подобных способов является характерным низкий уровень точности, возможно получение положительного результата даже при отсутствии бледной трепонемы в организме, так как антитела могут вырабатываться и при других заболеваниях. Данные исследования расцениваются в качестве ориентировочных методов, в числе их преимуществ — затрата малого количества времени на получение результатов, дешевизна, широкая доступность для населения.
При получении положительного результата нетрепонемных тестов требуется проведение высокоточного тестирования (трепонемного), которое позволит точно определить наличие возбудителя сифилиса, а также продолжительность заражения. В этом случае и проводят иммуноблот, при котором используются специфические антигены, являющиеся свойственными исключительно для антител бледной трепонемы.
Если антитела есть в крови больного, на данном тесте будут образовываться специальные полоски. Их оценивают визуально по расположению и интенсивности, на основании чего делают выводы:
- Положительный – для антител, отнесенных к классу IgM является характерным присутствие единичной насыщенной полосы, для IgG – несколько выраженных линий.
- Неопределенный – IgM – слабовыраженная единичная полоса, IgG – одна четкая линия.
- Отрицательный – IgM, IgG – отсутствие полос.
В ходе проведения иммуноблота могут быть получены положительные, отрицательные, неопределенные результаты:
- Положительные результаты говорят о недавнем заражении сифилисом. Процент неинтерпретирумых и ложноположительных результатов крайне низок, так как метод выявления сифилитической инфекции характеризуется в качестве высокоточного. При задействовании непосредственно иммуноблота используются специфические антигены, являющиеся свойственными исключительно для бледной трепонемы.
- При отсутствии полос на мембране вероятность инфицирования бледной трепонемой не исключена. Отрицательный результат может говорить о сравнительно недавнем заражении, в ответ на которое иммунная система не успела спродуцировать выработку антител. При наличии подозрений на инфицирование рекомендуется провести повторное исследование через несколько недель.
- При получении неопределенных результатов требуется проведение повторного тестирования. Как правило, подобное случается на ранних этапах заражения бледной трепонемы, а также при допущении ошибок при проведении иммуноблота, сифилис в данном случае может отсутствовать.
Спровоцировать получение ложноположительных или неопределенных результатов иммуноблота могут различные факторы, в числе которых приводятся следующие:
- Период беременности. Особенно часто подобное наблюдается у женщин в период третьей или последующих гестаций. Причина получения неверных результатов заключается в разбалансировке гормонального фона.
- Прохождение в недавнем времени процедуры вакцинирования.
- Перекрестные реакции аллергического характера.
- Вирусные поражения организма. Чаще подобное наблюдается при инфицировании гепатитом или гриппом.
- Воспалительные процессы, поражающие сосудистую систему организма.
- Нарушения состава крови – низкий уровень свертываемости или, напротив, повышенная густота.
- Туберкулез, протекающий на различных стадиях.
- Аутоиммунные поражения печени.
- Использование в ходе проведения исследования неспецифичных антигенов.
Для определения инфицирования или подтверждения отсутствия в организме бледной трепонемы рекомендуется повторное проведение исследования не ранее, чем через 2-3 недели после первой процедуры.
Показания к проведению
Иммуноблот может быть рекомендован специалистом пациенту при подозрении на сифилис. В иных ситуациях показаниями к исследованию могут быть следующие состояния:
- Появление симптоматики, косвенно либо прямо указывающей на вероятность заражения бледной трепонемой.
- Наличие подозрений на развитие сифилиса первичной или вторичной формы на фоне получения отрицательных данных при иных вариантах исследования. В таких ситуациях иммуноблот необходим, если другие тесты демонстрируют отрицательный результат, однако развернутая клиническая картина указывает на наличие заболевания.
- Наличие изъязвлений, схожих на шанкры при сифилисе. В качестве показаний могут выступать поражения кожных покровов, расположенные в полости рта, в зоне половых органов.
- Заболевания, имеющие венерическую природу происхождения (ВИЧ, гепатит).
- Врожденная форма сифилиса.
- Различные варианты аутоиммунных заболеваний, в числе которых красная системная волчанка, сахарный диабет, ревматоидный артрит.
- Незащищенный половой контакт с лицом, которое предположительно заражено сифилитической инфекцией.
Также к числу показаний относят получение неинтерпретируемых, сомнительных или положительных данных при методах, обладающих низким уровнем точности. Как правило, подобное происходит при стандартных исследованиях при ряде заболеваний, в числе которых туберкулез, болезнь Лайма, сахарный диабет, а также состояние беременности, алкогольная и наркотическая зависимость.
Сроки определения противотрепонемных антител
Нужно знать, что ни один, даже самый точный метод, в том числе, иммуноблот, не позволит получить точных данных, если заражение сифилисом произошло несколько дней назад. Обусловлено это тем, что болезнетворные микроорганизмы находятся в инкубационном периоде на ранних этапах внедрения в организм, соответственно, иммунная система в указанные сроки не начинает продуцировать антитела, выявляемые в ходе проведения иммуноблота.
- Продуцирование организмом антител IgM для борьбы с проникшей в организм сифилитической инфекцией начинается в период с седьмого по четырнадцатый день заражения сифилисом. Но вероятность обнаружения их в это время даже посредством высокоточных анализов крайне мала. Максимальной концентрации уровень антител достигает в период с шестой по девятую неделю инфицирования.
- Полное исчезновение выявляемых анализом IgM происходит через три – шесть месяцев после курса терапевтического лечения. Если больной не получал лечение, подобное наблюдается через год – полтора после внедрения в организм сифилитической инфекции. Выявление антител возможно при первичном и вторичном периоде заболевания. При этом определение может быть исключено в том случае, если сифилис протекает в скрытой форме. Появление IgM после полного исчезновения говорит о повторном заражении или низкой эффективности лечения.
- Выработка организмом специфических антител, отнесенных к классу IgG, начинается примерно через четыре – пять недель с момента внедрения бледной трепонемы в организм. В отличие от IgM, концентрация IgG постоянно увеличивается, достигая максимальной величины к двенадцати – двадцати четырем месяцам после инфицирования и сохраняясь на протяжении нескольких лет или всей жизни даже при условии успешного лечения.
Читайте также: