Лайн блот на сифилис

Поиск

Введение

Сифилис — инфекционное заболевание человека, лабораторная диагностика которого требует проведения микробиологических и серологических исследований [1]. Несмотря на значимость прямых методов обнаружения Т.pallidum, серологические реакции являются в настоящее время основным инструментом диагностики сифилиса. Серологическая диагностика сифилиса, исключая скрининговые обследования, носит комплексный характер. Применение двух методов: нетрепонемного и трепонемного — позволяет увеличить вероятность постановки правильного диагноза [1, 2].

В силу ряда объективных и субъективных причин специфические тесты на сифилис не всегда дают однозначные результаты. На этом фоне достоверность диагноза зависит от количества проведенных исследований, что в свою очередь делает всю диагностическую процедуру трудоемкой и дорогостоящей. В связи с этим разработка новых чувствительных и специфичных диагностических наборов с целью минимизировать объем необходимых серологических исследований является актуальной проблемой сифилидологии [3, 4].

Дизайн тест-системы

В состав набора входят: 10-кратный концентрат промывочного раствора (ПР), раствор для разведения исследуемых образцов (РРО), раствор для разведения конъюгата, конъюгат — антитела козьи к IgG человека, конъюгированные со щелочной фосфатазой, раствор хромогенного субстрата для выявления ферментативной активности щелочной фосфотазы, контрольные образцы (К+ и К-) — сыворотки крови человека, содержащие и не содержащие антитела к T.Pallidum, и тест-полоски (стрипы) из нитроцеллюлозной мембраны, на которые в виде дискретных линий нанесены четыре рекомбинантных белка TpN15, TpN17, TpN47 и TmpA.

Кроме линий (зон) рекомбинантных антигенов, на каждом стрипе имеются четыре контрольные линии. Линия контроля антигена (Каг) — для оценки корректности проведения теста на данном исследуемом образце (при правильном проведенном исследовании эта полоса не окрашивается). Три калибровочные линии, которые при проведении анализа дают зоны дискретно уменьшающейся интенсивности окрашивания соответствующие баллам 3+, 1+, 0,5+ (рис. 1).

Проведение исследования

Регистрация и интерпретация и результатов

Регистрацию результатов проводят визуально, оценивая интенсивность окраски антигенных линий в баллах, посредством сравнения интенсивности окраски антигенных линий с интенсивностью окраски контрольных линий согласно таблице 1.

Интенсивность окрашивания антигенных линий

Оценка в

По интенсивности и количеству полос, проявившихся на стрипе, интерпретируют результат исследования анализируемого образца сыворотки или спинномозговой жидкости согласно таблице 2.

B. — П-АТ-Т.Pallidum; Панель сывороток, содержащих и не содержащих антитела к Тreponema рallidum; МБС; 24 инактивированных лиофилизированных сыворотки; Кат. № А-091

C. — Панель сывороток с нормированным содержанием IgG антител к антигенам р17 и р41 (TmpA) Тreponema Pallidum; 18 сывороток

F. — ВЛ-Контроль-АТ- Т.Рallidum; МБС; Контрольная сыворотка, содержащая антитела к Тreponema Pallidum для проведения внутрилабораторного контроля; Кат. № А-092

Таблица 3.

антиген

№ образца

TpN15

0,5

TpN17

TmpA

0,5

TpN47

Обсуждение результатов

Разработка технологий производства рекомбинантных антигенов бледной трепонемы способствовало широкому внедрению в серологическую диагностику сифилиса методов иммуноферментного анализа 5.

C.Г. Марданлы, В.А. Арсеньева, М.В. Захаров

1. Larsen S.A., Steiner B.M., Rudolph A.H. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis. Clin. Microbiol. Rev. 1995; 8: 1-21.

2. Morse S.A. Advances in diagnostic tests for bacterial STDs. Salud Publica Mex 2003; 45 Suppl 5: S698-S708.

3. Кубанова А.А., Говорун В.М., Китаева Н.В., Фриго Н.В., Кубанов А.А., Ротанов С.В. Достижения и перспективы изучения Treponema pallidum. Вестник дерматологии и венерологии, 2006; 5: 34-37.

5. Sambri V., Marangoni A., Eyer C., Reichhuber C., Soutschek E., Negosanti M., D’Antuono A., Cevenini R. Western Immunoblotting with Five Treponema pallidum Recombinant Antigens

6. Schmidt B.L., Edjlalipour M., Luger A. Comparative evaluation of nine different enzyme-linked immunosorbent assays for determination of antibodies against Treponema pallidum in patients with primary syphilis. 2000; J Clin Microbiol. 38: 1279-82.

7. Zrein M., Maure I., Boursier F., Soufflet L. Recombinant antigen-based enzyme immunoassay for screening of Treponema pallidum antibodies in blood bank routine. 1995; J Clin Microbiol. 33:525-7.

8. Young H., Moyes A., Seagar L, McMillan A. Novel recombinant-antigen enzyme immunoassay for serological diagnosis of syphilis. 1998; J Clin Microbiol. 36:913-7

Описание

Сифилис, подтверждающий тест (иммуноблот) IgM — современный метод диагностики сифилиса, самый достоверный высокочувствительный метод идентификации белков.

Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передающееся в основном половым путем, склонное к хроническому течению и поражающее большинство органов и систем организма. Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов.

Клиническая картина при сифилисе
Клинические проявления сифилиса очень разнообразны и зависят от стадии заболевания. Выделяют несколько стадий сифилиса. Первичная стадия наступает примерно через 2–3 недели после заражения. На этой стадии проявляются одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Во многих случаях твердый шанкр безболезненный и остается незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Шанкр исчезает через 4–6 недель.

Вторая стадия заболевания начинается через 2–8 недель после возникновения твердого шанкра. Она характеризуется появлением сыпи, чаще на ладонях и подошвах. Иногда встречаются и другие симптомы, к примеру лихорадка, усталость, опухание лимфатических узлов, боль в горле и ломота в теле.

Сифилис способен протекать в скрытой форме, во время которой у инфицированного человека не проявляется никаких симптомов, но в то же время он продолжает оставаться носителем инфекции. Это может длиться годами.

Без лечения примерно у 15% больных развиваются симптомы позднего, или третичного, сифилиса. Эта стадия иногда длится несколько лет и приводит к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам, болезням сердца и даже к смерти.

От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков (предпочтительно применять производные пенициллина). Причем на ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее.

При контакте человека с Treponema pallidum, его иммунная система вырабатывает антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида таких антител: IgM и IgG.

Антитела класса IgM при сифилисе
Антитела класса IgM вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются в сыворотке крови в конце второй недели заболевания и исчезают у нелеченых больных примерно через 1–1,5 года, при лечении раннего сифилиса — через 3–6 мес., позднего — через год. Они присутствуют у большей части пациентов с первичным и вторичным сифилисом, поэтому тест на IgM может быть использован для различения давней инфекции от только приобретенной.

Специфических трепонемных антител IgM нет у лечившихся в прошлом пациентов, но их отсутствие само по себе не говорит об эффективности проведенной терапии, поскольку у большинства из тех, кто не лечился, в скрытой стадии сифилиса IgM-антитела тоже отсутствуют.

Исследование IgM антител к антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum методом иммуноблота используют в качестве дополнительного специфического трепонемного теста при необходимости углубленного исследования при неубедительных результатах скрининговых и подтверждающих тестов диагностики сифилиса.

Тест основан на методе Вестерн-блота. В ходе исследования выявляют наличие в сыворотке пациента антител класса IgG к электрофоретически разделенным и перенесенным на нитроцеллюлозную мембрану избранным антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum.

Используемые антигены в методе Вестерн-блота:

47 кДа мембранный белок (TpN47) — специфичный;
45 кДа (TmpA) — специфичный;
22 кДа (Р 22) — неспецифичный;
17 кДа мембранный белок (TpN17) — специфичный;
15 кДа мембранный белок (TpN15) — специфичный.

Показания
В комплексе тестов диагностики заболеваний, вызванных инфекцией Treponema pallidum (сифилис).

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Формат выдачи результата исследования — качественный (описание наличия/отсутствия полос, характеризующих выявление антител к каждому из указанных антигенов; общее заключение о результате исследования в форме: положительный/отрицательный/неопределенный).

Референсные значения: отрицательный.

При общей оценке результата учитывают положение окрашенных полос (специфичность антигена) и интенсивность их окрашивания (поскольку иногда возможна неспецифическая слабая ложная реакция с отдельными антигенами):

Отрицательный результат: отсутствуют полосы специфических антигенов;
Неопределенный результат: одна четкая полоса специфического антигена: р15 кДа, р17 кДа, р45 кДа или р47 кДа;
Положительный результат: более одной четкой полосы специфических антигенов: р15 кДа, р17 кДа, р45 кДа или р47 кДа.

Примечание: для установления диагноза недавней инфекции Treponema pallidum, положительный результат по IgM-антителам должен быть подтвержден положительным результатом по IgG-антителам (сероконверсией), на свежем образце крови, взятом на 3–6 недель позднее.

Специфичность исследования 98%, чувствительность 100%. Положительная предсказательная значимость 94%.

Исследование, направленное на диагностику антител к Treponema pallidum класса IgG методом иммуноблотинга в целях диагностики или подтверждения сифилиса, а также для дифференциальной диагностики свежеприобретенного и давнего инфицирования T. рallidum.

Антитела класса IgG к возбудителю сифилиса; иммуноглобулины класса G к антигенам Тreponema pallidum.

Синонимы английские

Syphilis IgG; anti-Treponema pallidum, IgG; anti-TP IgG; antibodies to Т. pallidum, IgG; immunoblotting.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Сифилис является одним из наиболее распространенных инфекционных заболеваний, передающимся преимущественно половым путем при непосредственном контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром). Возможен и вертикальный путь передачи от инфицированной матери к плоду, а также через кровь и реже при контакте с контаминированными предметами. Источником инфекции является больной человек, возбудитель инфекции – Treponema pallidum (T. pallidum), семейство Spirochaetaceae, род Treponema.

Соответственно клиническому течению заболевания, классифицируют несколько стадий сифилиса: первичную, вторичную, латентную и третичную. Первичный сифилис возникает на 14-21-й день заражения и проявляется возникновением твердого шанкра в месте контакта и проникновения возбудителя. Твердый шанкр представляет собой одну или несколько безболезненных язв, исчезающих в течение 2-6 недель без лечения. Возможно также увеличение регионарных лимфатических узлов. Вторичный сифилис диагностируется на 4-8-й неделе от момента появления твердого шанкра или на 2-3-й месяц после заражения. Для него характерны следующие клинические проявления: розеолезно-папулезная сыпь преимущественно на ладонях и стопах, энантема на слизистых оболочках, слабость, лихорадка, головная боль, генерализованная лимфоаденопатия, тонзиллит, фарингит. Далее симптомы исчезают и инфекция переходит в латентную форму, возможно с возникновением рецидивов. При нелеченном заболевании развивается третичный сифилис, проявляющийся поражением нервной системы, сердечно-сосудистой системы, костно-суставного аппарата.

Клиническая лабораторная диагностика играет важную роль в диагностике сифилиса в сочетании с эпидемиологической и клинической картинами заболевания. Чаще всего используются серологические методы лабораторной диагностики, основанные на выявлении антител.

Различают нетрепонемные и трепонемные тесты. Нетрепонемные тесты направлены на выявление антител к кардиолипину, фосфолипиду, компоненту клеточной и митохондриальной мембран бактерий. Трепонемные тесты выявляют антитела, направленные конкретно против антигенов, компонентов бактерий T. pallidum. К ним относятся реакция пассивной гемагглютинации, реакция иммунофлуоресценции, метод иммуноферментного анализа и метод иммуноблотинга.

Метод иммуноблотинга используется в качестве теста второй линии для подтверждения скрининговых методов исследования или в качестве дополнительной диагностики сифилиса, при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований. Он основан на определении антител классов IgM и IgG к молекулам-антигенам, разделенным с помощью метода электрофореза в соответствии с их молекулярной массой. Диагностическая чувствительность метода составляет 99 %, диагностическая специфичность – 100 %.

Известно несколько липопротеинов-антигенов наружной клеточной мембраны T. рallidum, которые обладают наибольшей иммуногенностью и играют важную роль в серологической диагностике сифилиса методом иммуноблотинга. К ним относятся следующие специфичные мембранные белки: Tp15 (15 кДа), Tp17 (17 кДа), Tp45 (45 кДа), Tp47 (47 кДа). Иммуноглобулины класса G к T. pallidum появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Их количество постепенно увеличивается, начиная преобладать на шестой неделе заболевания над уровнем иммуноглобулинов IgM. Антитрепонемные антитела класса IgG могут сохраняться на определённом уровне в течение месяцев и лет. Уровень данных антител нарастает в зависимости от длительности заболевания.

Антитела к антигенам трепонем класса IgG играют важную роль в диагностике первичного, вторичного, третичного и латентного сифилиса. Для подтверждения ранее диагностированного инфицирования T. pallidum рекомендуется определение антител класса IgG через один-два месяца после обнаружения антител класса IgM, но обязательно в свежем образце крови. По некоторым данным, антитела класса IgGк Tp17, Tp45 и Tp47 обнаруживаются при первичном сифилисе на его более поздних стадиях. Анти-Tp45 и анти-Tp47 IgG чаще встречаются при латентной форме сифилиса. Через 24 месяца после проведенной патогенетической терапии у пациентов с первичным и вторичным сифилисом антитела класса IgGметодом иммуноблотинга не детектируются.

Для чего используется исследование?

Для диагностики сифилиса;
для подтверждения скрининговых методов исследования;
для дополнительной диагностики сифилиса при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований;
для дифференциальной диагностики свежеприобретенного и давнего инфицирования T. рallidum;
для диагностики первичного, вторичного, латентного и третичного сифилиса;
для профилактического обследования беременных женщин;
для оценки проведенной патогенетической терапии сифилиса.

Когда назначается исследование?

При подозрении на сифилис и при симптомах данного заболевания: наличие твердого шанкра, генитальных язв, лимфоаденопатии, слабости, лихорадки, розеолезно-папулезной сыпи преимущественно на ладонях и стопах, энантемы на слизистых оболочках;
при подтверждении скрининговых методов исследования и для дополнительной диагностики сифилиса, при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований;
при наличии полового партнера, больного сифилисом;
при ведении беременностив целях профилактического обследования беременных женщин желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет в женской консультации;
при лечении от другого заболевания, передающегося половым путем;
при определении точной причины заболевания, при наличии неспецифических симптомов, схожих с признаками сифилиса;
если пациент был инфицирован, он должен повторить анализы на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца для оценки проведенной патогенетической терапии против сифилиса.

Что означают результаты?

Мембранный белок TpN47: отрицательный.

Мембранный белок TpN17: отрицательный.

Мембранный белок TpN15: отрицательный.

первичный, вторичный, третичный сифилис;
латентный сифилис.

отсутствие сифилиса;
проведение диагностики на раннем сроке, когда не сформировался иммунный ответ против возбудителя T. рallidum;
поскольку антитела IgG к T. pallidum могут свободно проникать через плаценту, положительный результат у младенцев не является основанием для постановки диагноза "врождённый сифилис";
отсутствие антител класса IgG у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает наличия врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Что может влиять на результат?

Возможно получение ложноположительного результата при наличии ВИЧ-инфекции, болезни Лайма, малярии, аутоиммунных заболеваний, в частности системной красной волчанки, при атипичной пневмонии, у людей, употребляющих наркотики внутривенно, у пожилых.

Результаты данного исследования должны интерпретироваться только комплексно, с учетом анамнеза, клинических данных, результатов лабораторного обследования.
Для подтверждения ранее диагностированного инфицирования T. pallidum рекомендуется определение антител класса IgG через один-два месяца после обнаружения антител класса IgM, но обязательно в свежем образце крови.
Отрицательный результат иммуноблотинга не исключает наличие сифилиса.
Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.

32 Treponema pallidum, IgG, титр

42 Treponema pallidum, IgM, титр

34 Treponema pallidum, антитела

54 Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр

42 Treponema pallidum, IgG в ликворе

93 Сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), титр

99 anti-Treponema pallidum, IgM (иммуноблот)

Кто назначает исследование?

Дерматолог, дерматовенеролог, гинеколог, уролог, инфекционист, терапевт, врач общей практики, педиатр.

Трепонемные тесты на сифилис. Общее описание.

Общие характеристики трепонемных тестов

живые или фиксированные трепонемы;
очищенные и обработанные ультразвуком трепонемы (соникат). Используются культуральные или (редко) патогенные штаммы T. Pallidum;
специфические для T. pallidum биосинтетические или рекомбинантные антигены.

Проведение скрининга населения (используются методы ИФА, РПГА, простые быстрые тесты). Скрининг отдельных категорий населения на сифилис (доноров, беременных, больных офтальмологических, психоневрологических, кардиологических стационаров, ВИЧ-инфицированных).
Подтверждение положительных результатов нетрепонемных тестов
Тесты применяются для исключения ложноположительных результатов (ЛПР), ретроспективного подтверждения диагноза
Подтверждение в случае расхождения результатов скринингового трепонемного теста и последующего нетрепонемного теста, а также скринингового и подтверждающего трепонемных тестов;

трепонемные тесты не могут быть использованы для контроля эффективности терапии, т. к. антитрепонемные антитела длительно циркулируют в организме больного, перенесшего сифилитическую инфекцию;
дают положительные результаты при невенерических трепонематозах и спирохетозах (боррелиоз, пинта, фрамбезия, беджель);
могут давать ложноположительные реакции у больных с аутоиммунными заболеваниями, проказой, онкопатологией, эндокринной патологией и при некоторых других заболеваниях.
трепонемные тесты дороже для проведения в расчете на одного больного, чем нетрепонемные тесты, поэтому возрастают затраты при проведении скрининговых обследований на сифилис

Трепонемные тесты на сифилис. Виды серологических реакций.

Реакция связывания комплемента (реакция Вассермана) с трепонемным антигеном (РСКт).
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ; Fluorescent treponemal antibody, FTA). Она применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс (FTA-abs; FTA-abs double staining; FTA-abs IgM; РИФ-абс-IgM; 19S-IgM-FTA-abs); РИФц — реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью.
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА; Treponema pallidum haemagglutination assay, TPHA).
Реакция пассивной агглютинации желатиновых частиц, сенсибилизированных антигенами возбудителя сифилиса (TPPA, Treponema pallidum particle agglutination assay)
Иммуноферментный анализ (ИФА; Enzyme Lynced Immunosorbent Assay, ELISA).
ИХЛ — иммунохемилюминесцентное исследование (ИХЛ; Chemiluminescence immunoassays, CLIA)
Реакция иммобилизации бледных трепонем РИБТ (РИТ), в зарубежной литературе TPI (Treponema pallidum immobilization test). В последние годы используется все реже и только в научных целях и в исследовательских лабораториях.
Иммуноблотинг (ИБ; Western Blot, Line Blot). Как правило, используется метод линейного иммуноблотинга, являющийся вариантом иммуноферментного анализа. Применяется в двух вариантах: для выявления IgG и IgM-антител к возбудителю сифилиса

Антиген	Улавливающая система	Тест
Взвесь живых трепонем
Интактные трепонемы	Трепонемы, фиксированные на стеклах
Очищенные и разрушенные ультразвуком трепонемы	Связаны с эритроцитами	РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)
Связаны с желатиновыми частицами	Реакция агглютинации частиц (TPPA)
Связаны с поверхностью лунок микропланшета	ИФА
	Иммуноблоттинг
Рекомбинантные	Связаны с поверхностью лунок микропланшета	Рекомбинантный ИФА
	Иммуноблотинг с рекомбинантными АГ
Связаны с частицами латекса	Латекс-агглютинация

РСКт - Реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (Реакция Вассермана)

диагностики всех форм сифилиса,
контроля за эффективностью лечения,
обследования лиц, имевших половой контакт с больным сифилисом,
обследования лиц с клиническим и анамнестическим подозрением на сифилис
при профилактическом обследовании на сифилис больных психиатрических и неврологических стационаров, доноров и беременных, в том числе лиц, направляемых на искусственное прерывание беременности.

Комплекс классических серологических реакций (КСР)

РИТ, РИБТ - Реакция иммобилизации бледных трепонем

положительная при иммобилизации 51 — 100% трепонем,
слабоположительная:31 — 50% неподвижных трепонем,
сомнительная:21 — 30% неподвижных трепонем,
отрицательная:0 — 20% неподвижных трепонем.

РИБТ требует работы с живыми патогенными бледными трепонемами штамма Никольс, остающегося заразным для человека несмотря на адаптацию для кроликов
постановка реакции сложна, трудоемка и дорогостояща
необходимо наличия вивария
требуется высококвалифицированный персонал для постановки реакции, учета результатов и содержания вивария
субъективность оценки результатов
отсутствие автоматизации
нет возможности стандартизировать этот серологический метод.
реакция неприменима на фоне проводимой антисифилитической терапии
невозможность использовать для контроля излеченности. РИБТ у больных сифилисом может оставаться положительной в течении многих лет (и даже – пожизненно), несмотря на полученное полноценное лечение.
реакция может давать ложноположительные результаты у больных злокачественными опухолями, диабетом, лепрой, аутоиммунными заболеваниями, пневмонией, тяжелой сердечно-сосудистой патологией.

РИФ (Реакция иммунофлюоресценции)

как подтверждающая реакция при раннем, скрытом сифилисе
при установлении ретроспективного диагноза
для дифференциации скрытых форм сифилиса и ложноположительных результатов исследований на сифилис.
как подтверждающий тест при нейросифилисе.

РИФ-абс – наиболее чувствительный метод серодиагностики сифилиса, становится позитивным раньше других реакций (с 3-ей недели от заражения);
РИФ-200 (сыворотка пациента при постановке разводится в 200 раз) – высоко специфичный метод серодиагностики сифилиса.
РИФ-10 (разведение испытуемой сыворотке в 10 раз) - более чувствительный метод, чем РИФ-200.
РИФ-ц проводят с ликвором.
РИФ-абс-IgM - выявление ранних противотрепонемных антител класса IgM.

диагностика скрытых и поздних форм сифилиса,
выявление ложноположительных результатов КСР и РМП, особенно у беременных и соматических больных при подозрении на сифилис,
для установления ретроспективного диагноза заболевания.

Реакция иммунного прилипания (РИП, TPIA — Treponema pallida immunoadherence).

РПГА-реакция пассивной гемагглютинации

простой в постановке и интерпретации,
не требует специального оборудования,
время получения результата – 45 минут,
пригоден для массового скрининга (необходимо всего 25 мкл сыворотки в разведении 1:20),
высокая степень стандартизации,
наличие внутренних контролей,
большой срок годности,
приемлемая цена
возможность автоматизации учета.

возможность неспецифических реакций при наличии антиэритроцитарных антител,
отсутствие корреляции титра и стадии сифилиса,
более поздняя позитивация реакции на ранних стадиях сифилиса,
возможность ложноположительных реакций у лиц, принимавших алкоголь, наркоманов,
чувствительность к вибрации и температуре в лаборатории.

использование промышленных тест-систем,
возможность автоматизации реакции,
нет необходимости работать с живой бледной трепонемой,
отпадает потребность в виварии.

при исследовании сывороток крови пациентов с невенерическими трепонематозами,
за счет ревматоидного фактора
за счет перекрестно реагирующих с трепонемным антигеном антител, образующихся при различных системных или индуцированных лекарствами и наркотиками нарушениях обмена,
из-за аномального уровня иммуноглобулинов;
у новорожденных детей - за счет образования в организме плода или ребенка IgM-антител к IgG матери, что осложняет трактовку результатов и диагностику врожденного сифилиса.

загрязненные микропланшеты
неправильное пипетирование
наличие вибрации в лаборатории
температура воздуха в лаборатории выходит за диапазон температуры: 18–25 градусов

неточное разведение ингредиентов,
нарушение температурного режима,
нарушение времени инкубации реагентов,
нарушение сроков нанесения реагентов на планшет,
несоответствие рН растворов требуемым,
загрязнение лабораторной посуды.

исследование в реакции гиперлипидемичной, гемолизированной сыворотки крови или образцов с признаками бактериального пророста;
исключение из постановки реакции контрольных сывороток крови;
неравномерная концентрация эритроцитов в диагностикуме вследствие недостаточного его перемешивания перед использованием;
нарушение сроков и условий хранения диагностикума и контрольных эритроцитов; использование наборов с истекшим сроком годности;
использование при постановке реакций загрязненных пробирок, наконечников пипеточных дозаторов, пипеток, иммунологических планшетов, растворов;
неточности при первичном разведении образца сыворотки крови;
недостаточная тщательность выполнения последовательных двукратных разведений;
несоблюдение температурного режима и времени инкубации;
наличие посторонних вибраций и встряхиваний иммунологического планшета во время инкубации;
нарушение методики постановки РПГА, выражающееся в отказе от выполнения исследования с контрольными эритроцитами.

ТРРА (Treponema pallidum particle agglutination) - реакция агглютинации искусственных частиц для выявления антител к Treponema pallidum

ИФА - Иммуноферментный анализ

лизатными — полученными в результате разрушения ультразвуком бледной трепонемы;
пептидными — полученными в результате химического синтеза фрагментов белков бледной трепонемы и имеющими антигенную реактивность, аналогичную исходным белкам возбудителя;
рекомбинантными — полученными с помощью методов генной инженерии, несущими антигенные детерминанты, идентичные бледной трепонеме.

Дает возможность дифференцированного и суммарного определения IgM и IgG антител к возбудителю сифилиса.
высокая чувствительность и специфичность, приближающиеся к 100%,
воспроизводимость
возможности автоматизации

возможные ошибки персонала при проведении исследования (оплошность, небрежность, нарушение технологии);

невозможность полной стандартизации процесса исследования при ручном варианте постановки ИФА;

повышенный риск заражения персонала.

ИХА (иммунохемилюминесцентный анализ), ИХЛ (иммунохемилюминесценция)

исключение влияния субъективных факторов на аналитическом этапе исследования
безопасность персонала при выполнении исследований потенциально инфицированного биологического материала
повышение скорости получения результатов пациентом
стандартизацию исследований и контроль качества исследования
выдачу надежных достоверных результатов пациентам
высокое качество клинических лабораторных исследований.

Иммунохроматография (ИХГ).

ПБТ (простые быстрые тесты у постели больного)

Иммуноблотинг (Western Blot)

xMAP-технология

Адрес: г. Москва, Ленинский проспект, дом 82/2
Часы работы: Пн - Пт: с 10.00 до 20.00; Сб - Вс, праздники: с 11.00 до 18.00

Читайте также: