Материал для исследования гонококков
Возбудителем гонореи является Neisseria gonorrhoeaе, вызывающая острые и хронические воспалительные поражения мочеполовых органов, слизистой оболочки ротоглотки и конъюнктивы глаза.
Материалом для исследования является гнойное отделяемое мочеполовых органов, прямой кишки или конъюнктивы глаз (при бленорее), суставной и перитонеальный экссудат. Строго регламентированными методами лабораторной диагностики гонореи являются микроскопическое и бактериологическое (культуральное) исследование. Методы микробиологической диагностики гонореи отражены в схеме 18 .
Схема 18. Методы микробиологической диагностики гонореи
Микроскопический метод заключается в исследовании мазков из исследуемого материала, окрашенных по Граму и метиленовым синим. При окрашивании препаратов на гонорею используют модификацию метода Грама (краситель генциан-виолет заменяют кристал-виолетом, а вместо фуксина применяют нейтральный красный; промывку препарата осуществляют после каждого этапа окраски). В мазках при острой гонорее обнаруживают большое количество полиморфноядерных лейкоцитов, внутри и вне которых расположены бобовидные грамотрицательные диплококки; сопутствующая микрофлора либо минимальна, либо отсутствует вовсе (рис. 25). При хронической гонорее в ряде случаев типичный гонококк в мазках не выявляется, либо выглядит нетипично в виде мелких пылевидных или крупных шарообразных образований, нередко 2 клетки гонококка располагаются под углом друг к другу, при этом обнаруживается обильная сопутствующая микрофлора, лейкоциты, эпителиальные и другие клетки. В качестве экспресс-метода диагностики может использоваться ИФМ.
Рис. 25. Возбудитель гонореи(Neisseria gonorrhoeaе) в мазках из уретры больного острой гонореей. Внутри и внеклеточно расположенные грамотрцательные диплококки, обилие лейкоцитов.
Бактериологический метод.Гонококк отличается высокой чувствительностью к различным неблагоприятным факторам, поэтому культуральное исследование необходимо проводить сразу после отбора материала. Посев производят на специальные питательные среды. Основой этих сред является МПА из кроличьего мяса с добавлением дрожжевого аутолизата, гидролизата казеина или гемогидрализата и сыворотки крупного рогатого скота. Асцитическая жидкость и яичный желток в качестве добавок к среде для культивирования гонококка в настоящее время не применяются. Второй тип питательных сред является селективным и включает в свой состав, помимо вышеуказанных компонентов, антибиотики (полимиксин, линкомицин, а для диагностики фарингеальной гонореи – оротовую кислоту). Посевы выращивают при 37 0 С в течение 24-72 часов в атмосфере с повышенным содержанием СО2. Колонии гонококков круглые, прозрачные, в виде капелек росы. Типичные для гонококков колонии пересевают в пробирки со средой для культивирования гонококка для получения чистых культур, которые идентифицируют по морфологическим и сахаролитическим свойствам на средах "пестрого" ряда (полужидкий агар с сывороткой и углеводом) или с помощью микротест-систем. В мазках из чистых культур гонококки располагаются не попарно, а отдельно. В биохимическом отношении гонококки малоактивны и ферментируют только глюкозу с образованием кислоты, вырабатывают оксидазу. Для выявления оксидазы применяют пробу с 1% водным раствором диметилпарафенилендиамина или диэтилпарафенилендиамина, которые окрашивают колонии гонококка сначала в розовый, затем в красный, а через несколько минут – в черный цвет. Исследуют также чувствительность гонококков к антибиотикам и его бета-лактамазную активность.
Серологический метод (определение антител к гонококку в крови пациентов с помощью РСК и ИФА) не является строго регламентированным, не представляет диагностической ценности, не является методом контроля эффективности проводимого лечения и в реальной практике в настоящее время не используется.
Генодиагностика. Направлена на обнаружение специфических фрагментов ДНК гонококка с помощью ПЦР и может быть использована в качестве дополнительного высокоинформативного метода диагностики гонореи.
Гонорея — заболевание, передающееся половым путем. Носителями могут быть мужчины, женщины и дети, инфицированные от матери во время рождения. Важна своевременная диагностика заболевания, при отсутствии адекватного лечения могут быть серьезные осложнения.
В Поликлинике Отрадное можно выполнить диагностику венерических заболеваний анонимно и в короткий срок.
Как подготовиться к мазку на гонорею
Чтобы результаты были точными, необходимо выполнить подготовку:
- с вечера провести гигиену половых органов без использования мыла,
- женщинам отказаться от влагалищных суппозиториев, спреев и кремов,
- отказаться от антисептиков и средств для очищения,
- прекратить прием медикаментов,
- 3 дня не заниматься сексом и не применять метод вагинального орошения,
- воздержаться от похода в туалет 2‒3 часа.
Мужчины могут проводить исследование в любое время, женщинам нельзя сдавать анализ во время месячных. Манипуляция безболезненна, при проведении может наблюдаться небольшой дискомфорт.
Для чего назначается исследование
Бактериоскопия для выявления гонореи назначается при появлении таких симптомов:
- жжение, резь, зуд в области мочеиспускательного канала или влагалища,
- учащенное мочеиспускание,
- чрезмерное выпадение волос,
- сбои менструального цикла,
- увеличение лимфатических узлов,
- выделения непривычного характера,
- изменение объема и вида спермы,
- ощущение тяжести внизу живота,
- высыпания на половых органах, ладонях, ступнях, во рту,
- болезненное мочеиспускание.
При подозрении на венерическое заболевание обязательно выполняется мазок на гонорею у обоих половых партнеров. Получить материал для исследования на гонококки можно:
- из влагалища,
- уретры,
- ротоглотки,
- прямой кишки,
- цервикального канала.
Как берется мазок у женщин
Взятие мазка на гонорею у женщин выполняется на гинекологическом кресле. Доктор использует специальные зеркала и стерильные инструменты. Биоматериал помещается на предметное стекло. Сама процедура проводится быстро и безболезненно.
Для девственниц манипуляция проводится по-другому, доктор не применяет зеркала, используется инструмент, который вводится через отверстие в девственной плеве. После исследования целостность девственной плевы не нарушается. Еще взятие материала для анализа производится через анальное отверстие, так как заражение могло произойти при анальном или оральном сексе.
Мазок на гонорею обязательно берут у беременных женщин, даже при отсутствии симптомов болезни. Проводится исследование обычным методом.
Важная информация! Взятие анализа не выполняется во время менструации. Необходимо выбрать период за 3‒5 дней до месячных или спустя 5 дней после них.
Осложнения после процедуры появляются редко, но не исключены выделения и тянущие боли внизу живота. Такие побочные эффекты проходят самостоятельно и не нуждаются в медикаментозном лечении. При повышении температуры, нестерпимых болях и общем ухудшении самочувствия необходимо обратиться к доктору.
Взятие мазка на гонорею у мужчин
Алгоритм взятия мазка на гонорею у мужчин отличается: забор материала производится из передней части мочеиспускательного канала. Перед манипуляцией доктор рассказывает, как берется мазок на гонорею у мужчин, чтобы пациент был готов к процедуре. В уретру вводится прибор на 1‒4 сантиметра, область предварительно обрабатывается антисептиком. Специалист вращает зонд по кругу для лучшего взятия материала, аккуратно изымает его и полученный биоматериал отправляет в лабораторию для проведения анализа.
В течение первых суток не исключена болезненность во время мочеиспускания и появление примеси крови. Иногда показан массаж предстательной железы перед исследованием, о чем врач предупреждает пациента заранее. Для снятия болезненности мужчине назначаются обезболивающие медикаменты, а подмывание выполняется теплой водой.
Как проводится исследование мазков на гонококки
Если анализ брался в лаборатории, исследование проводится сразу же после выполнения манипуляции. Когда необходима транспортировка полученного материала, его помещают в стерильную емкость. Для достоверного результата, необходимо провести микроскопическое исследование в течение 15 минут после получения материала.
Факт! Образец окрашивается по методу Грама, чтобы гонококки визуально были заметны и отличались от других видов бактерий.
Расшифровка результатов обследования
В полученных результатах важное значение имеют такие параметры:
Гонорея упоминается еще в Библии.
Основные трудности, которые приходится преодолевать врачам венерологам – скрытые формы инфекции и неэффективность многих антибиотиков. Ко многим из них гонококки выработали стойкость.
Выявить заболевание и установить наиболее эффективные в отношении возбудителей препараты позволяет современная комплексная микробиологическая диагностика гонореи.
- Общая характеристика гонококков
- Откуда брать материал для диагностики гонококков
- Методы диагностики гонококков
- Микроскопическое исследование мазка на гонококк
- Расшифровка микроскопии на гонококк
- Бактериологическое исследование мазка на гонококки
- Расшифровка бакпосева на гонококки
- Молекулярно-биологические исследования на гонококки
- Расшифровка молекулярно-биологических тестов на гонококки
- Иммунологические тесты на гонококки
- Чувствительность гонококков к антибиотикам
- Трудности диагностики гонококков
Общая характеристика гонококков
Под большим увеличением в микроскопе, гонококки нейссера выглядят как сцепленные вместе два мелких боба. Из-за такой особенности строения, гонококки по критериям таксономии отнесли к семейству диплококков.
В род Neisseria входит еще 13 видов, микробов, некоторые патогенны для человека (менингококк). Окраска по Гаму придает микробам красный цвет (грамотрицательные). Неподвижны и не образуют спор.
Однако под влиянием неблагоприятных факторов, трансформируются в не делящиеся L-формы (палочки). При наступлении благоприятной ситуации они активируются, становятся причиной обострения гонореи. Гонококки – достаточно привередливый микроорганизм. Отлично себя чувствует себя только на поверхности слизистых оболочек.
Попав на эпителиальные клетки, в течение нескольких минут сцепляется с ними, потом проникает в подслизистый слой, где и оседает. В кровь попадает редко. Во внешней среде быстро погибает.
Наиболее важное свойство гонококков Нейссера – высокая иммуногенность. Тканевые макрофаги активно поглощают возбудителей, но переварить их не в состоянии. Отсюда и гнойные явления, характерные для гонореи.
При этом иммунитет не формируется.
Заражаться можно сколько угодно раз и каждый эпизод приведет к заболеванию. Заразность и патогенность у возбудителей очень высоки.
Наиболее восприимчив к гонококкам эпителий мочеполовых путей: уретры, шейки матки у женщин, предстательной железы и яичек у мужчин. Проблема в том, что основным местом обитания возбудителей гонореи становится подслизистый слой. Там, в глубине, они образовывают ограниченные капсулами скопления. Иногда это приводит к ошибкам при поверхностном сборе диагностических проб.
Откуда брать материал для диагностики гонококков
Кроме мочеполовых путей, возбудители гонореи успешно обсеменяют эпителий прямой кишки, ЛОР-органов и конъюнктиву. Поэтому перед тем, как собрать анализы, сначала выясняется локализация гонореи.
Самый характерный симптом – гнойное отделяемое с пораженного участка.
У женщин это скудные или достаточно обильные бели, у мужчин – выделения из уретры.
Для детей характерно поражение глаз – бленнорея.
Если человек практикует анальный секс, то симптомы появятся со стороны прямой кишки – выделения, жжение, позывы на дефекацию.
Список биоматериала включает отделяемое или мазок из разных мест:
- мочеиспускательный канал
- задний свод влагалища
- цервикальный канал
- прямая кишка
- конъюнктива
- задняя стенка глотки
- секрет предстательной железы
Кроме этого, еще берется моча и кровь.
Опытные дерматовенерологи одновременно с анализами на гонококк Нейссера назначают исследование на трихомонаду. Потому что эти две инфекции очень часто встречаются вместе.
И еще из-за способности трихомонад сберегать внутри себя жизнеспособных гонококков.
Если такой момент упустить, то курс антибиотиков уничтожит активных возбудителей гонореи. А трихомонады к таким препаратам не чувствительны. И через несколько дней вышедшие из них гонококки спровоцируют рецидив.
Методы диагностики гонококков
Комплекс обследований, проводимых для выявления гонореи и контроля выздоровления, называется микробиологической диагностикой.
Основной метод – микроскопия. Это прямой метод, обладающий хорошей специфичностью, но страдающий недостатком чувствительности.
Кроме него, в современной венерологии используются бактериологический (посев) и молекулярно-генетический (молекулярно-биологический) подходы.
Каждый из перечисленных методов имеет свои особенности в постановке тестов и расшифровке результатов. Общим для них является диагностический материал. Это обязательно должны быть биологические субстраты, содержащие в себе гонококки.
Техника забора одинакова: стерильным ватным тампоном или щеточкой с воспаленных слизистых оболочек собирают отделяемое, комочки гноя. Если очаги множественные, то для каждого из них берется свой тампон. Собранный таким образом материал необходимо как можно скорее отправить в работу.
Для микроскопии – делают отпечаток на предметной стекле.
Для микробиологического исследования – переносят образец на питательную среду и ставят на культивацию в термостат.
Чтоб провести ПЦР, диагностикум помещают в специальную транспортную среду и отправляют в лабораторный центр, который проводит молекулярно-биологические анализы.
Микроскопическое исследование мазка на гонококк
Наиболее актуально для выявления уретрита у мужчин или конъюнктивита, при правильном проведении, точность достигает 95%. В отношении мазка из половых путей женщины – менее чувствителен.
По современным нормам диагностики гонококков Нейссера методом световой микроскопии, мазки-отпечатки на стекле окрашивают двумя способами: по Грамму и метиленовым синим. Разумеется, для каждого метода используется отдельный образец.
Микроскопия проводится последовательно под двумя увеличениями – в 100 и 1000 раз с применением иммерсионной методики.
Метиленовый синий, спиртовой раствор, предназначен для быстрой окраски. Позволяет ориентировочно установить диагностическую ценность образца. То есть если после такой обработки в окуляре не видно скоплений микрофлоры, подозрения в отношении гонореи можно снять.
И наоборот – выявление микробов после метиленового синего заставляет пристальнее присмотреться к препарату. Окрашивание по Грамму помогает выявить в образце (мазке, соке простаты или первой порции мочи) наличие диплококков красного цвета. Параллельно оценивается сопутствующая картина – эритроциты, лейкоциты, эпителий и другая флора. Это дает врачам возможность установить факт воспаления (много лейкоцитов, эпителия и микробов).
Микроскопия делается быстро, дает понятный результат: обнаружен в мазке гонококк Нейссера или нет. Для того, чтоб найти больного активной гонореей человека, этого достаточно.
Диагноз гонореи по микроскопии мазка выставляется только при наличии в образце диплококков, обладающих тремя характерными признаками:
- форма – возбудитель выглядит как кофейное зерно, сцепленное с таким же микробным телом, вогнутыми сторонами друг к другу
- расположение – гонококки обнаруживаются как в свободном виде, так и внутри лейкоцитов, макрофагов и эпителиальных клеток
- красная окраска по Граму – грамотрицательные диплококки
Если диплококки располагаются только вне клеток, свободно, то их принадлежность к гонококкам Нейссера необходимо подтвердить другими методами.
Бактериологическое исследование мазка на гонококки
Универсальный метод, который подходит для диагностики гонореи любой локализации. Принцип основан на том, что на специальной питательной среде, ничего кроме гонококков нейссера расти не может.
Биологический материал от пациента помещают на такую среду. Если там будут хот бы единичные особи возбудителей, то через несколько дней можно будет заметить рост колоний микроорганизмов. Благодаря высочайшей чувствительности посев применяется для исследования мазков с эпителия любой локализации. Из уретры и цервикального канала, изо рта, с конъюнктивы глаза, ануса.
Проводится в таких случаях:
- подозрение на гонорею у детей
- обследование женщин (из-за значительной бактериальной нагрузки мазков из влагалища)
- бессимптомная или экстрагенитальная гонорея (глотка, прямая кишка, глаза)
- секс с доказано больным партнером
- люди после эпизодов сексуального насилия
- для установления профиля медикаментозной стойкости гонококков нейссера к антибиотикам
- при необходимости получить чистую культуру, например – с целью сделать генотипирование выделенного от больного человека штамма возбудителей
- пациентам, завершившим курс лечения (контрольные анализы)
Среды для посева достаточно сложные. Поэтому бактериологическое исследование проводится только в специальных бак лабораториях. Первая оценка результатов посева мазка, сока простаты или мочи, проводится через 72 часа. Если на питательной среде нет признаков роста, культивирование прекращают.
Результат анализа признается отрицательным. В противном случае, если отмечается формирование колоний, то исследование продолжается: проводится выделение и идентификация нейссерий.
Колонии диплококков выглядят на плотной питательной среде как выпуклые прозрачные округлые скопления серо-белой окраски. При исследовании мазков из ротовой полости, глотки, к интерпретации результатов необходимо подходить осторожно. Так как с глотки могут высеваться и менингококки, и непатогенные диплококки.
Их колонии отличаются между собой деталями внешнего вида. Но из-за изменчивости микробов, доверять визуальной характеристике нельзя.
Для идентификации гонококков Нейссера, образцы со сред исследуют дальше на предмет оксидазной активности. Окончательная идентификация проводится путем пересева чистой культуры из колоний на специальные энзимсубстратные среды. Они меняют цвет, если на них начинает расти именно гонококки нейссера. Такой результат считается положительным, но на это требуется еще как минимум 48 часов.
Питательные среды, на которых ничего не выросло в течение 72 часов, позволяют говорить об отрицательности образца, мазка. Если же колонии появляются, то устанавливать диагноз рано.
Прежде необходимо подтвердить, что были выделены именно патогенные гонококки, на это требуется еще как минимум двое суток. То есть суммарно, результаты посева на гонококки готовятся до 5 суток.
Молекулярно-биологические исследования на гонококки
Для таких тестов применяется не только мазок, но и моча, сок простаты. Суть всех этих методов (ПЦР, SDA, TMA и других) состоит в том, что в исследуемом образце выявляются уникальные для гонококка нейссера последовательности ДНК или РНК.
Методики отличаются высочайшей чувствительностью и специфичностью.
Однако применяются с оглядкой. После лечения, даже успешного, результаты молекулярно-биологических анализов могут оставаться положительными, реагируя на ДНК погибших возбудителей.
Время, необходимое для получения результатов, составляет примерно сутки.
В ответе указывается только один из двух вариантов:
- ДНК Neisseria gonorrhoeae обнаружена
- ДНК Neisseriagonorrhoeae не обнаружена
Такие данные всегда нужно оценивать в соответствии с текущим состоянием пациента. Если есть явная клиническая картина, то обнаружение ДНК гонококков нейссера говорит о заболевании.
Полное клиническое благополучие может указывать на ложноположительный результат. Так что расшифровку тестов должен проводить специалист.
Иммунологические тесты на гонококки
Такие исследования в клинической практике не используются. Но с академической целью могут применяться.
Распространение получили три подхода:
Материалом для всех таких тестов является культура, полученная путем посева. Те иммунологические исследования, которые относятся к категории серологических, в отношении поиска антител к возбудителям гонореи признаны неактуальными.
Чувствительность гонококков к антибиотикам
Несмотря на большое разнообразие лабораторных исследований на предмет гонококков, оптимальным остается бактериологический подход. Он отличается высокой точностью, накапливает бактериальную массу для других тестов.
Бак посев еще и единственный способ установить, к каким противомикробным средствам выделенные от конкретного пациента возбудители сохранили чувствительность.
Для этого есть два пути:
- К среде, на которую пересевается выделенная чистая культура, примешивают разные антибиотики. В разных пробах – разные препараты и там, где роста нет, то средство и эффективно против гонококков
- На колонии накладывают диски, пропитанные разными лекарствами. Вокруг которого рост прекращается – тот антибиотик и нужно назначать, чтоб уничтожить возбудителя
Трудности диагностики гонококков
Любой, даже абсолютно точный анализ не сможет дать правильный ответ, если его провести неправильно. Ошибок может быть две: неквалифицированный сбор материала и неправильная подготовка к исследованиям. Чтоб избежать первого, достаточно обратиться к профессиональному врачу.
А вот по поводу второй проблемы, нужно самим подготовиться:
- не пить никакие антибиотики как минимум за 10 дней до исследования на гонококки нейссера
- если пили – сообщить об этом врачу
- женщинам – приходить в середине цикла
- мужчинам – не заниматься сексом за 24 часа до сбора диагностического материал
- если нужна моча – не мочиться с утра, сдавать только первую порцию
Ответственный момент – повторение диагностики после лечения гонореи. Для этого применяется культуральный метод и микроскопия.
Сдавать анализы нужно сразу по концу курса и еще раз через 10 дней.
Отсроченные тесты призваны вовремя заметить рецидив инфекции, если гонококки под влиянием терапии только затаились.
Для диагностики на гонококки обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.
- ВИЧ
- Гарднереллез
- Кондиломатоз
- Молочница
- Сифилис
- Трихомониаз
- Баланопостит
- Герпес
- Гонорея
- Микоплазмоз
- Уреаплазмоз
- Уретрит
- Хламидиоз
- ЗППП
Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) относятся к грамотрицательным кокам, встречающимся преимущественно парами. Бактерия вызывает триппер (гонорею). Это инфекционный процесс с преимущественным поражением слизистых оболочек мочеполового аппарата.
В редких случаях становится причиной бленнореи – гнойного патологического процесса соединительной оболочки глазного яблока. Диагностика гонококков требуется пациентам после незащищенной сексуальной близости с малознакомым партнером. Либо при подозрениях на инфицирование (иногда патологический возбудитель передается через полотенце или мочалку).
Лабораторная диагностика гонококков состоит из:
- микроскопического метода (окраска двух мазков)
- бактериологического (посев на питательные среды)
- реакции Борде-Жангу (серология)
- ПЦР
Свойства гонококка Neisseria gonorrhoeae
Гонококки – разновидность грамотрицательных диплококков, относятся к роду Neisseria. Для гонококков характерна высокая выживаемость в условиях организма. Вне приемлемой среды обитания для жизнедеятельности (во внешней среде) бактерии гибнут.
Также это происходит в результате высыхания субстрата при температуре от 40 градусов. Быстро погибают под воздействием антисептических и антибактериальных растворов, солей серебра и в мыльной воде.
Как выглядят гонококки?
Две половинки парной бактерии схожи на кофейные зерна, соприкасающиеся друг с другом вогнутой стороной. Под угрозой гибели (к примеру, на фоне антибиотикотерапии) трансформируются в L-форму.
Методы лабораторной диагностики
Инкубационный период длится от 3 до 7-ми дней с момента инфицирования. Дальнейшая клиника проявляется острыми симптомами. Это слизистые, с примесями гноя выделения из половых путей, чувство жжения, болезненность в уретре, в особенности при опорожнении мочевого пузыря).
Либо болезнь принимает бессимптомное течение. Анализ на гонококки Нейссера проводится различными способами.
Наиболее информативным считается ПЦР, так как позволяет обнаружить ДНК-возбудителя уже в первые несколько дней после проникновения бактериального агента в организм. У женщин в несколько раз чаще гонококковая инфекция имеет хроническую форму, при которой симптомы отсутствуют.
Возможность выявить гонококки в мазке ПЦР можно через 2-3 дня после сексуального контакта с зараженным партнером. Также применяются другие методы исследования, не менее информативные и позволяющие дополнительно определить чувствительность бактерий к антибиотику.
Микроскопический (бактериоскопический) метод
Анализ на гонококки проводится с использованием микроскопа и методики окраски двух мазков – по Грамму и с применением 1% жидкого раствора метиленового синего и 1% Эозина.
Для исследования наибольшую ценность представляют патологические жидкости. Забор которых производится из мочеиспускательного канала, влагалища, ануса, глотки или крови.
Метод Грамма
Обнаружить гонококки можно с помощью двойной окраски с применением двух красителей.
Первый – основной, второй считается дополнительным. Помимо красителей используется спирт и различные кислоты. Их действие заключается в обесцвечивании бактериального агента. Для выявления возбудителя гонореи применяются анилиновые красители (кристаллвиолет, метиловый фиолетовый) и дополнительные.
После обесцвечивания грамотрицательных диплококков используется фуксин. Он придает гонококкам красный окрас, определяющего идентифицирующего наличие гонококка.
Ход исследования:
- Биоматериал наносят на предметное стекло тонким слоем
- Следующий этап – сушка
- Проводится окраска анилиновыми красителями, промывка водой и использование раствора Люголя
- После высыхания материал фиксируется – необходимо для того, чтобы бактериальные клетки остались на поверхности стекла и не смылись. Для фиксации применяют один из двух методов – облучение бактериального агента высокими температурами либо применение специальных препаратов, приводящих к коагуляции цитоплазмы
- Далее стекло промывают и дополнительно применяют контрастные краски, после чего бактерии выделяются красным либо розовым цветом, после чего их легко обнаружить
Применение метиленового синего в микроскопическом исследовании
Взятый биоматериал наносится на предметное стекло и фиксируется 96 % этанолом либо над спиртовой горелкой. После полного высыхания мазка выполняется его окрас 1% р-ром метиленовой синьки. Спустя 1 минуту предметное стекло промывают в проточной воде комнатной температуры, подсушивают и помещают под микроскоп для изучения.
Анализ мазка на гонококк позволяет отличить патологическую микрофлору, которая принимает выраженный синий окрас (может иметь различные оттенки). Под микроскопом отличаются бактерии, размещенные парно, их бобовидная форма.
Характерной особенностью остро протекающего инфекционного заболевания является месторасположение возбудителя. То есть внутри гранулоцитарных лейкоцитов, которые выявляются в больших количествах на эпителии и в слизистой.
Для хронического течения характерно отсутствие гонококков при данном исследовании. В единичных случаях бактериальный агент идентифицируется, но в нетипичном для него виде.
Гонококки представлены мелкими или крупными шарообразной формы формированиями. Также выявляется другая патологическая флора, клетки эпителия и белые кровяные клетки (лейкоциты).
Бактериологический способ
Бактериологический или культуральный метод – производится посев биоматериала больного на питательные среды с белками, имеющими нативную пространственную структуру, сыворотку.
Чаще применяются безасцитные питательные среды. Основой которых является мясопентонный агар (производится из мяса кроликов или бычьих сердец). По результатам посевов на гонококки определяется не только возбудитель инфекции, но и его чувствительность к антибиотикам.
Точность и достоверность исследования во многом зависит от правильности сбора биоматериала. Важно использовать стерильные емкости и соблюдать правила подготовки к сбору анализа.
Сдача крови производится медицинским работником в условиях лаборатории.
Мочу пациенты собирают самостоятельно, используя для этого стерильную емкость.
Доставка биоматериала должна быть быстрой.
Мазки из половых путей или уретры выполняются в лаборатории и сразу наносятся на питательные среды. Очень важно провести диагностику до начала приема антибактериальных средств. В противном случае результативность проведенного анализа дает недостоверные результаты.
Если обследование назначается для контроля проведенной терапии, следует выждать не менее 10-ти дней после приема последней дозы антибиотика. При острой необходимости анализ проводится раньше.
Для исследования, отделяемого из половых путей у женщин производится забор материала через две недели после окончания менструации. За несколько часов запрещается опорожнение мочевого пузыря.
Мужчинам перед сдачей выделяемой слизи на анализ следует удержаться от посещения туалета в течение 4-5 часов.
Через сколько времени будет готов результат?
Культуральный метод занимает от 4-х дней. Все зависит от исследуемого материала – исследование каловых масс занимает от 3-4 дней до недели.
Соскоб из уретры будет готов в течение 7-ми дней, кровь – через 10. Несмотря на длительность диагностики, предварительные результаты анализа озвучиваются на 3-ий день.
Что показывает бактериологическая диагностика?
Расшифровка исследования включает информацию о наличии бактериального агента, а также о его концентрации. Определение количества присутствующей патологической микрофлоры имеет большое значение.
Выделяют 4 степени роста гонококков:
- 1 степень (отсутствует рост бактерий на твердой среде, на жидкой – незначительный рост)
- 2 степень (рост до 10 колоний)
- 3-я (рост от 10 до 100 колоний)
- 4-я (больше 100 колоний)
Первые две степени не являются этиологическими факторами развития болезни.
В данном случае говорят о загрязненности исследуемого биоматериала. Последние две степени (3 и 4) говорят о том, что присутствующие микроорганизмы стали причиной развития инфекционных процессов.
Окончательная расшифровка (подсчет колоний КОЕ/мл) имеет следующий вид:
- 102 – 103/мл – 1 колония
- 104/мл – 0т 2 до 5 колоний
- 105/мл – от 6 до 15 колоний
- 106/мл и более – от 16 колоний
Диагностика имеет весомое значение для контроля проводимой антибиотикотерапии и позволяет оценить ее эффективность.
Серологический метод
Методика основывается на иммунологической реакции выявления антител (Реакция Борде-Жангу) в плазме крови больного с подозрением на заражение гонококковой инфекцией. Зачастую используется для диагностики бессимптомных форм патологии.
В современной исследовательской практике серологический метод мало информативен. Не применяется для контролирования состояния после медикаментозной терапии.
Диагностика методом ПЦР
Определение гонококков при анализе ПЦР наиболее точный метод. Позволяет уже в впервые дни после заражения идентифицировать бактериального возбудителя.
Для получения максимально верных результатов огромное значение имеет подготовка:
- исключить сексуальный контакт за сутки
- после приема антибиотиков должно пройти не менее 7-ми дней
- перед взятием мазка запрещается посещение туалета за 2-3 часа
- не проводится у женщин вовремя месячных
Для диагностики триппера производится забор материала из мочеиспускательного или цервикального канала, можно использовать мочу.
Если в исследуемом биоматериала обнаруживают ДНК гонококков – это говорит о наличии гонореи. Информативность диагностики составляет 98%. Анализ проводится в течение 1-3 дней, что зависит от оснащенности лаборатории и квалификации специалистов.
Основным преимуществом исследования на гонококки является возможность выявления бактериального возбудителя даже при условии его минимальной концентрации в мазке (моче). В лабораторных условиях производится размножение генов возбудителя.
Клонирование ДНК участка, даже если он единичный, позволяет выявить всю имеющуюся патологическую флору в материале. Так, в большинстве случаев исследование на гонококки определяет одновременно диплококков и трихомонад, которые также передаются при половом акте.
Анализ ПЦР высоко информативен на ранних стадиях. Поэтому диагностика рекомендуется пациентам при частой смене половых партнерах или случайной сексуальной связи, в первые дни после интимной связи. Проведенная терапия на начальных стадиях болезни предотвращает развитие неприятных симптомов и возможные осложнения.
Расшифровка анализа ПЦР на гонококки выглядит следующим образом:
- высокий уровень лейкоцитов (свыше 10-ти говорит о присутствии воспалительного очага, свыше 20 – острое воспаление)
- повышенная концентрация клеток эпителия (более 10 в поле зрения)
- наличие грамотрицательных кокков, характерной формы
О чем говорит отсутствие гонококковой инфекции в исследуемом материале?
Если в ходе обследования с применением одного из методов в мазке не были обнаружены гонококки? Это говорит о том, что пациент полностью здоров. Либо о том, что в исследуемом материале, взятом из половых путей или уретры, бактерия отсутствует, но может быть обнаружена в других частях тела.
Для подтверждения диагностики выполняется забор материала из ротовой полости, прямой кишки или конъюнктивы глазного яблока. Если симптоматические проявления локализуются вне половой системы, а присутствие гонококков исключено, выполняются другие методы обследования для идентификации возбудителя патологии.
Диагностика после проведенного лечения
При обнаружении гонококковой инфекции лечащий врач-венеролог назначает комплексное лечение. Его основой является антибиотикотерапия.
Так как бактерии быстро адаптируются к пенициллинам, применяются препараты цефалоспоринового ряда. Чаще назначается Цефтриаксон для инъекций либо перорально Цефиксим.
Длительность лечения составляет 10-14 дней. Спустя 2-3 суток после приема последней дозы исследуют мазок из урогенитального тракта на выявление гонококков. Отрицательные результаты говорят о правильно проведенном лечении.
Диагностика после лечения также проводится второй раз через две недели. Отсутствие бактериального возбудителя означает полное выздоровление, больного снимают с учета у венеролога. Обследованию подлежат все половые партнеры.
Как подготовиться к диагностике гонококков?
Для предотвращения получения в ходе диагностики ложноположительных результатов перед взятием материала пациентам необходимо как следует подготовиться.
Соблюдение подготовительного этапа одинаково требуется представителям женского и мужского пола.
Подготовка
Этап подготовки включает:
- Исключение сексуальной близости за трое суток до забора материала
- Прекращение медикаментозной терапии, не только антибактериальных средств, но и других лекарственных групп, в частности химический средств контарацепции (спермициды). При невозможности прекращения приема некоторых препаратов пациент заранее сообщает об этом врачу
- Исключается использование влагалищных суппозиториев, кремов и спреев
- Исключается спринцевание за 3 дня до процедуры
- Гигиена половых органов выполняется накануне вечером, в утро забора мазка и взятия крови подмывание запрещается
- Опорожнение мочевого пузыря производится за 3 часа до исследования. При наличии незначительного количества бактериальных возбудителей существует вероятность вымывания некоторой части совместно с мочой и получение ложноотрицательных результатов
- У женщин манипуляция проводится за 4-5 дней до начала предполагаемых месячных либо спустя несколько дней по завершению. В острых случаях проводится не зависимо от менструального кровотечения
Анализ мазка на выявление гонококка Нейссера выполняется перед началом медикаментозного лечения и несколько раз после окончания.
Методику исследования выбирает лечащий врач, который занимается расшифровкой результатов и разработкой схемы лечения. Самостоятельный прием антибактериальных средств на фоне возникшей клинической картины искажает результаты обследования.
При подозрении на гонорею обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.
Читайте также: