Мрп на вич отрицательно
Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.
ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.
Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.
Спецпредложения, скидки и акции помогут существенно сэкономить на медицинском обследовании.
Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, — дополнительная гарантия точности результатов анализов.
Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.
Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа
Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.
Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.
Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.
ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.
Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.
Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.
В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.
ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.
Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:
- Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
- IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
- IgG к ВИЧ;
- Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
- Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
- Ig M и IgG к токсоплазмозу;
- Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
- Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
- Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
- Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).
Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.
Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.
При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.
- IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
- IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
- IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
- IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.
В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.
Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).
Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.
Информативность ИФА делает этот анализ важным инструментом в работе многих медицинских центров. Но можно ли доверять такую диагностику государственным лабораториям или лучше самим выбрать, где провести такое исследование?
Одним из видов нетрепонемных тестов является микрореакция на сифилис. Это исследование считается экспресс-методом и позволяет выявить присутствие антител к бледной трепонеме. Такие тесты используются для обследования больших групп населения, и после определения положительного анализа требуется дополнительное обследование.
Что такое микрореакция на сифилис и когда нужно сдать анализ
Как только бледная трепонема попадает в организм человека, она начинает вырабатывать кардиолипиновые антигены, которые запускают развитие антифосфолипидных антител. Данный анализ считается неспецифичным, так как не выявляет самого возбудителя, а исследует наличие определенной реакции организма на сифилис.
Важно отметить, что микрореакция – это отборочный метод, который не подтверждает диагноз, а только выявляет наличие антител.
Они возникают не только при сифилисе, но и при развитии туберкулеза, аутоиммунного заболевания или сахарного диабета.
Микрореакция преципитации возникает при соединении эмульсии кардиолипинового антигена с плазмой или сывороткой больного сифилисом образуется флокулянт, который выглядит как белые снежинки. Для осуществления анализа используют капиллярную кровь – собранную из пальца.
Различают несколько видов микрореакций:
- Микроскопический тест проводят при помощи светового микроскопа, под увеличением которого подсчитывают число преципитатов.
- Макроскопический тест – предполагает подсчет невооруженным глазом, для этого добавляют химическое вещество, которое окрашивает комплекс антиген-антитело.
- Тест с количественным показателем – предполагает многократное разведения биологического материала, с последующим подсчет титров в каждой порции.
Наиболее информативной микрореакция будет в период от трех недель после предполагаемого заражения.
Как подготовится к обследованию
Для получения точных данных, необходимо подготовиться к сдаче анализа. Для этого специалисты рекомендуют придерживаться правил:
- не принимать антибиотики не менее чем за неделю перед сдачей крови;
- отказаться от алкоголя за два дня до анализа;
- за день исключить жирную и острую пищу из рациона;
- не курить за час до процедуры;
- сдавать кровь необходимо натощак.
Стоит воздержаться от сдачи анализов, если наблюдаются симптомы простудного заболевания.
Также нужно предупредить врача о наличии хронических заболеваний, сахарного диабета или беременности.
Оценка результатов – нормы и отклонения
Интерпретация результатов выглядит следующим образом:
- Образование большого количества хлопьев – положительная реакция, которая свидетельствует о наличии любой формы сифилиса.
- Отсутствие хлопьев – отрицательная реакция, которая подтверждает, что обследуемый здоров.
- Присутствие небольшого количества хлопьев – пограничное состояние, которое часто считают ложноположительным. Обычно бывает на ранних стадиях болезни или при развитии других недугов. Необходимо дополнительное обследование.
Ложноположительная реакция возникает при следующих обстоятельствах:
- развитие туберкулеза;
- беременность;
- недавно перенесенное инфекционное заболевание;
- гепатиты вирусного типа;
- сахарный диабет;
- наличие опухолей в организме;
- при длительном употреблении алкоголя;
- зависимость от наркотиков;
- аутоиммунные заболевания.
Существует и ложноотрицательная реакция, которая возникает при небольшом количестве антител, связано это с ранней стадией развития сифилиса. В ситуациях, если результат теста отрицательный, но в дальнейшем проявились другие признаки заболевания, назначается консультация венеролога и дополнительные серологические анализы.
Микрореакция преципитации(мр) на сифилис считается методом выявления сифилитических антител у широких масс населения, это позволяет избежать эпидемий и контролировать развитие заболевания, но несмотря на свою эффективность, возможны ошибочные реакции. Часто это связано с несоблюдением техники поведения исследования.
Влиять на результат может неправильный забор крови из пальца, несоблюдение сроков хранения биологического материала, а также нарушение температурного режима.
Использование загрязненной посуды, просроченной эмульсии. Даже незначительная замена реагентов или недостаточное перемешивание материала может способствовать ошибочным результатам.
Несмотря на большое количество нюансов проведения процедуры, микрореакцию на сифилис считают качественным методом, который дает информацию о наличии антител в 98% случаев. Но точное определение диагноза возможно только при дополнительной диагностике.
Цена вопроса
Микрореакция на сифилис считается скрининговой процедурой, которая направлена на обследование широких слоев населения, в том числе и группы риска, которые, как часто это бывает, не располагают финансовыми средствами.
В среднем скрининговое исследование на сифилис стоит около 7$ в частных клиниках. Также пациенту предоставляется полная анонимность. Стоит отметить, что коммерческие клиники предоставят результат уже через несколько часов после забора крови.
Государственные медицинские учреждения также могут осуществить данное тестирование, и на бесплатной основ, но для этого у пациента должен быть медицинский полис и документы удостоверяющие личность. Он должен посетить венеролога или терапевта, который напишет направление на сдачу крови. Результат анализа обычно готов не раньше чем через три дня. И получить его можно только на приеме у врача.
Нередко министерство здравоохранения финансирует скрининг населения в рамках профилактики распространения венерических заболеваний. Такие мероприятия заранее анонсируются властями, носят анонимный характер и предоставляют результат в короткие сроки.
Где сдать анализ крови на микрореакцию
Существует несколько способов сделать скрининг крови на сифилис:
- В домашних условиях при помощи экспресс-тестов. Такой способ доступен в любое время, человек сохраняет за собой анонимность, а результат исследования можно узнать уже через 20 минут. Но существует погрешность в случаях ложноположительного или ложноотрицательного результата.
- Обратиться в поликлинику или венерологический диспансер. Услуга будет предоставляться бесплатно, но результат анализ и направление получить у лечащего врача. Такой способ имеет меньшую погрешность чем домашний тест, но срок получения итогов анализа может длиться до трех дней.
- Посетить платное медицинское учреждение. Данный вариант предполагает анонимность, возможность предварительной записи на сдачу анализа, а также получение результата в короткие сроки. Получение отчета об анализе обговаривается индивидуально, в редких случаях его могут отправить по электронной почте, но в основном предоставляют его лично в руки.
Такие клиники как Инвитро, KDL имеют представительства во всех областных центрах страны, и готовы предложить услуги по проверке микрореакции на сифилис. При получении положительного результата, нужно обратиться к врачу для уточнения диагноза и назначения лечения.
Для диагностики ВИЧ-инфекции проводится определение в крови антител к вирусу, его антигенов или генетического материала. Основных методов исследования два: Комботест, в ходе которого определяются антитела и антигены, а также ПЦР для оценки концентрации РНК в крови. Первое исследование в основном используют для первичной диагностики ВИЧ, второе – для оценки вирусной нагрузки, и лишь в небольшом числе случаев для первичной диагностики.
Особенности назначения исследования на вирус иммунодефицита
Обследование на ВИЧ проводится в рамках скрининга, по клиническим или эпидемиологическим показаниям. В некоторых случаях оно является обязательным, в других – добровольным.
Обязательное обследование
Обязательному периодическому обследованию на эту инфекцию подлежат:
- Доноры любого биоматериала. Чаще всего донорство используется в гематологии и онкологии. Доноры могут сдавать кровь и половые клетки (сперматозоиды, яйцеклетки). Реже используется донорство стволовых клеток, внутренних органов. В ходе переливания крови или использования любого другого биоматериала может произойти передача ВИЧ, поэтому всех доноров проверяют на эту инфекцию. В случае получения даже сомнительных результатов анализов донорство для них запрещают пожизненно.
- Представители некоторых профессий обследуются каждый раз, устраиваясь на работу. Некоторые также проходят периодическое профилактическое обследование на ВИЧ.
- Беременные. Согласно действующему приказу, беременных обследуют однократно, в последнем триместре. Если женщина не прошла диагностику в этот период, анализы берутся сразу после поступления в роддом.
- Дети, рожденные от ВИЧ-инфицированных матерей. Требует проведения обследования минимум три раза. Первый раз диагностика проводится сразу после рождения. Затем требуются повторные анализы в возрасте одного и полутора лет.
- Все учащиеся в военных учебных заведениях – обследуются однократно, при поступлении. Анализы также сдают при поступлении на воинскую службу.
- Иностранцы, которые запрашивают российское гражданство, вид на жительство или разрешение на работу в РФ.
Добровольное обследование
Поводом для добровольного обследования на ВИЧ-инфекцию могут стать три группы показаний. Это пациенты, имеющие симптомы острого заболевания, лица с признаками иммунодефицита, а также люди без каких-либо проявлений ВИЧ, но имеющие высокий риск этого заболевания (обнаружение одного или нескольких факторов риска, свидетельствующих о значительной вероятности заражения).
- длительные, плохо поддающиеся лечению, частые пневмонии;
- любые бактериальные, вирусные, грибковые инфекции, которые протекают тяжелее, чем у большинства людей (включая диссеминированную герпетическую инфекцию, герпетический менингоэнцефалит, инвазивный кандидоз или глубокие микозы);
- хронические воспалительные процессы малого таза у пациентов женского пола, которые не поддаются лечению стандартными методами.
- опоясывающий герпес у лиц, моложе 60 лет;
- криптококкоз (кроме легочной формы);
- пневмоцистная пневмония;
- поражения головного мозга токсоплазмой;
- криптоспоридиоз;
- гистоплазмоз;
- саркома Капоши;
- онкогематологические заболевания.
Обследоваться на ВИЧ рекомендовано лицам из групп риска по этому заболеванию. К факторам риска относятся гомосексуализм, проституция, беспорядочная половая жизнь, наркомания, пребывание в местах лишения свободы. Обследуют контактных лиц: в основном после полового акта с носителем инфекции или медицинских работников, проконтактировавших с кровью ВИЧ-позитивного пациента.
Методы лабораторной диагностики иммунодефицита
Основным методом первичной диагностики у взрослых является одновременное определение антител к ВИЧ 1 и 2 типов и антигена р25/24. Для этого используют ИФА или иммунохемилюминесцентный анализ. В качестве подтверждающего теста используют иммуноблот (может обозначаться аббревиатурой ИБ).
ПЦР используют как уточняющий метод для определения показаний к назначению лечения, оценки его эффективности. В некоторых ситуациях метод используют для первичной диагностики. Он применяется:
- Для обследования контактных лиц. Антитела в крови не образуются моментально. Они появляются только через несколько месяцев. Чтобы получить ответ в короткие сроки, определяется наиболее ранний маркер ВИЧ в крови – РНК вируса.
- Для обследования новорожденных. В их крови циркулируют материнские антитела. Поэтому проведенный анализ ИФА всегда будет положительным, независимо от того, болен ребенок или нет. Но вирусной РНК в его крови быть не должно. Поэтому ПЦР позволяет дать ответ, заразился ли новорожденный во время родов.
Расшифровка результата анализа при СПИДе
Стандартная схема обследования пациента предполагает проведение ИФА. В случае получения положительного результата нужно исключение ложноположительных реакций. Поэтому выполняется иммуноблот. Этот тест считается подтверждающим, он очень редко дает ложные результаты. Если они и бывают, то в основном связаны с человеческим фактором – ошибкой лаборатории, в которой проводилось тестирование.
Расшифровка ИФА и ИБ
Первичная диагностика может дать три варианта результатов:
Результаты обследования с помощью иммуноблота могут быть сомнительными. В этом случае человек должен наблюдаться в течение 6 месяцев. Повторное обследование проводят через 1-3 месяца. Если снова получен сомнительный результат, с высокой вероятностью человек здоров. Последнее обследование проводят спустя полгода. Получение сомнительного результата не является поводом для установления ВИЧ. Но пациент пожизненно отстраняется от донорства.
При выполнении перечисленных тестов расшифровка не представляет затруднений. На бумаге, выданной пациенту, пишется, положительный результат получен в ходе анализа или отрицательный. Количественных результатов нет.
Расшифровка ПЦР
Особого внимания заслуживает расшифровка результатов ПЦР. Ведь этот анализ дает количественные показатели. Он не только оценивает факт наличия или отсутствия вируса, но также сообщает врачу о количестве копий РНК вируса на 1 мл крови. Иногда обозначение результатов выглядит по-другому: может использоваться геномный эквивалент.
- Любое количество копий вирусной ДНК – повод для установления диагноза ВИЧ-инфекции.
- Вирусная нагрузка 100 000 копий/мл и более – оценивается как высокая.
- Вирусная нагрузка 10 000 копий/мл и меньше – классифицируется как низкая.
Вирусная нагрузка – важный показатель, позволяющий оценить эффективность проводимой антиретровирусной терапии. ПЦР помогает понять, работают ли назначенные врачом препараты. Если они работают, то назначение лекарств позволяет снизить вирусную нагрузку на 99% в течение 2 недель. У 85% пациентов после начала антиретровирусной терапии через 4 недели вирусная нагрузка не превышает 1000 копий/мл. Если лечение начинают при исходном уровне РНК ВИЧ меньше 1000 копий/мл, то через 2 недели она становится неопределяемой. При исходном уровне РНК 1 миллион копий/мл вирус перестает определяться в крови в среднем через 113 дней терапии.
В ходе лечения вирусная нагрузка при помощи ПЦР измеряется через каждые 4 недели. Этого срока вполне достаточно, чтобы спрогнозировать дальнейшую динамику. Если препарат не работает, это видно намного раньше – уже через 1-2 недели ПЦР позволяет получить результаты, которые демонстрируют вирусологическую неудачу с точностью 99%.
Порог определения вирусной нагрузки у разных лабораторных тестов отличается. В основном он составляет 20-50 копий/мл. Целью лечения является достижение отрицательных результатов ПЦР. До этого момента тест проводится каждый месяц. После получения отрицательного результата достаточно дальнейшего контроля 1 раз в 3 месяца. С такой периодичностью лабораторных контроль успешности лечения осуществляется до того момента, пока вирусная нагрузка снова не начнет увеличиваться. В этом случае пациента вновь будут обследовать через каждые 4 недели.
Обычно в первый месяц терапии вирусная нагрузка уменьшается в 100 раз и более. Максимум через 6 месяцев (при высокой исходной нагрузке) она становится неопределяемой.
Теоретически, ПЦР может определять вирус иммунодефицита не только в крови. В качестве материала для тестирования подходит эякулят, вагинальное отделяемое или ликвор. Но в медицинской практике такие исследования не проводятся. Их используют только в научных целях.
Значительно реже ПЦР используется как метод, позволяющий определить показания для начала антиретровирусной терапии. Пациентов с нормальным иммунитетом, без уменьшения CD4 клеток, обычно не лечат. В том числе в случаях, когда вирусная нагрузка высокая. Но эти показатели напрямую взаимосвязаны. Обычно чем выше количество копий РНК вируса, тем быстрее прогрессируют иммунные нарушения.
Основным исследованием, позволяющим оценить показания к началу антиретровирусной терапии, остается определение CD4. По европейским рекомендациям, лечение может быть назначено при уровне CD4 более 350 клеток/мкл только при наличии дополнительных факторов риска развития СПИД. Одним из них является вирусная нагрузка свыше 100 000 копий РНК в мл крови.
Как исключают вероятность получения ложного результата исследований
Основной метод диагностики ВИЧ – ИФА. Он обладает чувствительностью 99% и специфичностью 99,5%. Это означает, что ложноотрицательные результаты получает 1 из 100 пациентов, ложноотрицательные – 1 из 200 больных. К тому же, анализ может оказаться отрицательным в первые месяцы после инфицирования. Риск его получения, в зависимости от сроков проведения:
- через 3 месяца – 5-10%;
- через 6 месяцев – 1-2%.
- наличие антител к аутоантигенам HLA класса II;
- реактивные воспалительные процессы;
- заболевания печени;
- недавняя вакцинация.
Если для первичной диагностики использовалась ПЦР, при возникновении сомнений в результатах тест может быть проведен повторно. Методы обнаружения РНК ВИЧ-1 дают 2-5% ложных отрицательных результатов. Концентрация вируса при этом всегда составляет менее 2000 копий/мл. Повторное проведение теста с высокой вероятностью дает правильный отрицательный результат, если пациент не инфицирован.
Микрореакция на сифилис является наиболее распространенным методом диагностики заболевания и основывается на образовании связи между особыми белковыми структурами — фосфолипидами и антителом. Доступность и простота проведения исследования позволяет за короткий промежуток времени обследовать большое количество пациентов.
Что из себя представляет данный анализ?
В организме в ответ на внедрение патогенной микрофлоры или при повреждении собственных клеток образуются особые белковые элементы – антитела. При диагностике сифилиса методом микрореакции (МРП) в крови пациента пытаются найти связь между антителами и фосфолипидами — белками, входящими в состав всех клеточных мембран.
Иммунный ответ в виде выработки антител формируется как раз тогда, когда фосфолипиды из клеточных мембран попадают в кровь. Это происходит при проникновении в ткани человека бледной трепонемы – возбудителя сифилиса и ряда других инфекций.
Чтобы при заражении сифилисом антитела начали вырабатываться, требуется определенное время. Это происходит не мгновенно, а, самое раннее, спустя 3-4 недели после инфицирования. Именно поэтому этот анализ не подходит для ранней диагностики. Но благодаря легкости проведения и невысокой стоимости МРП относится к скрининговым исследованиям, предназначенным для выявления болезни среди широких масс населения.
Диагностика сифилиса этим методом состоит из следующих этапов:
- подготовка больного к сбору материала;
- сдача крови в лаборатории. Для анализа требуется кровь пациентов, которую чаще всего берут из вены, но в некоторых лечебных учреждения используется и из пальца;
- на специальном оборудовании отделяют плазму крови от клеточных элементов;
- в полученную биологическую жидкость добавляют антиген с визуализирующим агентом. Чаще всего для этого используется уголь;
- при наличии в сыворотке фосфолипидных антител происходит их склеивание с введенным антигеном, что проявляется образованием черных хлопьев, указывающих на положительную реакцию. При отсутствии в организме антител к фосфолипидам хлопья не образуются.
Также проводится количественная оценка наличия бледной трепонемы в организме с вычислением показателей титра. Для этого микрореакцю на сифилис выполняют в разведениях. В процессе исследования сыворотку крови пациента разводят физиологическим раствором сначала в два раза, потом в четыре и так далее, каждый раз удваивая разведение и проводя тест на выявление антител в материале. При этом отмечается разведение, на котором микрореакция последний раз остается положительной. Например, 1:320 означает, что даже при разведении в 320 раз в сыворотке крови еще содержатся антитела. Это цифра является показателем титра и указывается в анализе. Чем выше значение титра, тем активнее протекает патологический процесс в организме.
Количественное определение титра важно для контролирования результативности терапии и диагностирования окончательного излечения сифилиса. В течение года после курсовой терапии должно отмечаться падение титров в 4 раза. Контрольные анализы проводят через 3 месяца, полгода и год после лечения.
Показания к исследованию
Микрореакция преципитации на сифилис выполняется в диагностических целях и при проведении скрининговых исследований. Для выявления и констатации наличия инфицирования бледной трепонемой анализ МРП назначают следующим группам пациентов:
- имеющие клинические проявления болезни. В первую очередь, это больные с характерными изъязвлениями на половых органах и участках тела, контактирующих с партнером в процессе полового акта. Также обращается внимание на увеличенные близкорасположенные к очагу лимфатические узлы;
- лицам с любыми высыпаниями или язвочками в области гениталий;
- сексуальным партнерам и членам семьи больного;
- новорожденным, родившимся от матерей, болеющих или имеющих сифилис в анамнезе;
- больным любой другой патологией, передающейся при интимных контактах.
Для установления заболеваний используются разные способы, в том числе и лабораторные методы. Микрореакция крови — это вид анализа в ходе диагностики сифилиса для выявления повреждения клеток.
Цель микрореакции крови
Исследование не является специфическим анализом, поскольку не ставит задачей найти возбудителя. Разрушение клеток может происходить и при других заболеваниях. Поэтому если результаты теста распознаются как положительные, необходимо проведение других лабораторных тестов.
Заболевания, передающиеся половым путём, вызываются различными возбудителями. Когда они попадают в организм, иммунитет реагирует на это повышением синтеза веществ, которые должны бороться с ними. В ответ на размножение возбудителя вырабатываются антитела, связывающие его. Сколько бактерий, столько должно быть и антител.
В ходе борьбы бледная трепонема или другой возбудитель разрушает мембрану собственных клеток. Эти остатки также требуется удалить, на что и реагирует антитело.
Анализ показывает наличие таких компонентов, их комплексов, антител и антигенов. Каждый из них можно количественно определить.
Виды исследования
Все неспецифические исследования можно разделить на две большие категории: макро- и микрореакции. Первая осуществляется без дополнительного оборудования, оценивается визуально. Вторая требует оборудования в виде микроскопа высокой степени увеличения.
Электронная микроскопия позволяет выявить разрушенные клетки без использования реактива.
Различают несколько типов анализа крови на микрореакцию:
- экспресс-тест с макроскопией;
- классическое исследование с изучением осадка;
- количественное определение.
Первый метод не требует исследования материала под микроскопом, результат виден невооруженным глазом.
Суть проведения анализа в том, что кровь больного помещается в центрифугу, получается сыворотка, в которую необходимо добавить концентрат раствора. При наличии возбудителя происходит окрашивание жидкости.
При втором способе сыворотку крови исследуют под микроскопом, дополнительные вещества не используются. Для получения количественного значения сыворотка многократно разводится, потом направляется под микроскоп, и лаборант регистрирует количество связанных комплексов антиген-антитело в мазке.
Показания к проведению исследования
Ввиду простоты исследования и отсутствия необходимости использования дорогостоящих реагентов, микрореакция преципитации используется для больших групп населения, чаще всего при плановом обследовании.
Сдача анализа назначается:
- военнослужащим;
- беременным;
- больным перед операцией;
- при обследовании в тюрьме или следственном изоляторе;
- при осмотре медицинских работников, сотрудников общественного питания;
- перед сдачей крови на донорство;
- перед трансплантацией органов.
При лечении для контроля эффективности назначенной терапии исследование проводится несколько раз.
Тест на количественную реакцию показан лицам, у которых обнаружились признаки патологии, детям больных родителей, при язвах на половых органах. Также обследование нужно для подтверждения диагноза после первичных тестов или если пациент имеет другие венерические заболевания.
Подготовка
Чтобы получить достоверный результат, необходимо соблюдать правила сдачи крови. Есть несколько важных моментов, которые необходимо учитывать.
Чтобы не спровоцировать выброс излишка гормонов, обследуемый должен отказаться от значительной физической нагрузки перед забором крови, от курения, от алкоголя накануне, жирной пищи.
Сдача крови происходит натощак, поскольку липиды будут появляться пленкой сверху пробирки и могут исказить результат. Последний прием пищи должен происходит накануне около 19 часов вечера.
Забор крови для исследования
Для микрореакции необходимо взять капиллярную кровь, то есть из пальца. Она подвергается центрифугированию, то есть удаляется сгусток из форменных элементов, остается плазма. Дополнительно берут кровь из вены. Если ее невозможно взять, то подойдет спинномозговая жидкость.
Биологический материал отстаивается, плазма или сыворотка смешивается с антигеном. Одновременно с этим идет оценка протекания реакции. Медицинский работник должен следить, появляется ли изменение окраски жидкости.
Сколько годен анализ на микрореакцию крови
Венозная кровь показывает наличие следов возбудителя уже через 3-4 недели после заражения. Срок годности исследования зависит от его назначения и нормативов лечебного учреждения.
- В ходе лечения результат реакции оценивается каждые несколько недель.
- Действие анализа для медицинских работников при отрицательном результате составляет 12 месяцев.
- После контакта с потенциально больным человеком необходимо провести тест через месяц анализ независимо от того, как давно проводилось предыдущее исследование.
Расшифровка результата
Рассказывая, что это такое — микрореакция крови, необходимо также упомянуть о том, как происходит расшифровка результатов. Она может предполагать отрицательный, положительный или сомнительный итог.
Иногда определяется ложноположительный результат или ложноотрицательный. О причинах такого явления будет рассказано ниже.
Такая реакция наблюдается, если на предметном стекле обнаруживаются хлопья. Значит, в сыворотке имеются антитела, которые вырабатывались к фрагментам антигена или разрушенным ими клеткам.
Результат “+” длительное время может наблюдаться даже после проведенного лечения, поскольку на очищение крови от всех фрагментов трепонем и остатков разрушенных клеток требуется немалый период. Но титр антигена будет иметь небольшое значение.
Положительная реакция может свидетельствовать о наличии у больного сифилиса, получении серорезистентности, остаточных явлениях после терапии. Бывает и ложноположительный результат.
Отрицательная реакция наблюдается, если на предметном стекле не произошло никаких изменений, нет хлопьев. Это показывает, что нет заболевания или оно уже достигло поздней стадии.
В некоторых случаях реакция проводится слишком рано, когда еще нет антител или их фракция настолько мала, что оценить результат как положительный нет возможности. Это ложноотрицательная реакция.
Пациент успокаивается, считая, что не болен, и узнает об инфекции, когда разворачивается клиническая картина.
Исследование материала может выявить наличие незначительного осадка, то есть антител мало. Такой результат получается, если не соблюдать правила хранения или забора материала, использовать нестерильные материалы или нарушить правила подготовки. Достоверные результаты получаются, только если соблюдать все рекомендации перед тестированием.
Сомнительный анализ бывает и при наличии некоторых заболеваний или состояний, о которых пациент мог не знать или умолчать:
- беременность;
- опухоль;
- диабет;
- аутоиммунные процессы;
- острый воспалительный процесс легких;
- туберкулез;
- алкоголизм;
- подагра;
- наркозависимость.
Этот метод исследования при положительном результате не говорит о том, что сифилис подтвержден. Это только общий, первичный анализ, который требует уточнения. Реакция может показать наличие антител к другим возбудителям.
Для подтверждения диагноза требуется проведение трепонемных тестов — ИФА или РИА, основанных на комплексе антиген-антитело. Они позволяют определить трепонему, результат ее активности и следы жизнедеятельности.
Таким образом, анализ на микрореакцию позволяет определить наличие антител к трепонеме, но не является специфическим. Он применяется для обследования широких групп населения и позволяет выявить здоровых людей и тех, кому нужны дополнительные, более сложные анализы.
Кровь на микрореакцию (микрореакция преципитации) – это, так называемый, нетрепонемный тест. Данная реакция имеет цель определить в крови человека антитела, которые вырабатываются на липиды клеток, поврежденных возбудителем сифилиса – бледной трепонемой (антилипидные антитела).
Следует отметить, что эти антитела вырабатываются организмом не только при сифилисе, но и при многих других болезнях, которые сопровождаются тканевыми разрушениями. Следовательно, микрореакция преципитации не может подтвердить сифилис, а является только лишь отборочным тестом.
Название микрореакция преципитации связано с тем, что для ее проведения необходимо минимальное количество реагента и исследуемого материала, а комплекс антиген – антитело, который образуется в результате реакции, выпадает в осадок (преципитация).
Виды анализа
- Микроскопический тест. Оценка его результатов производится с помощью светового микроскопа.
- Макроскопический тест. Оценка результатов в данном случае происходит невооруженным глазом. Другие названия этого теста – отборочная реакция на сифилис или экспресс – диагностика сифилиса.
Реакция преципитации используется в основном для обследования населения на сифилис, для диагностики и контроля лечения данной болезни.
Кому надо сдавать анализ на микрореакцию крови?
- Доноры крови.
- Доноры внутренних органов, используемых для пересадки.
- Беременные женщины.
- Медицинский персонал.
- Военнослужащие.
- Работники пищевой промышленности.
- Любой человек, проходящий лечение в стационаре.
- Пациенты, которых ожидает оперативное лечение.
- Заключенные в тюрьмах и колониях.
Для того чтобы поставить диагноз сифилиса, необходимо провести серологические исследования (трепонемные тесты на сифилис и количественную микрореакцию преципитации).
- С наличием клиническим симптомов сифилиса.
- Людям, имеющим язвы на половых органах.
- При контакте с больным человеком или при наличии полового партнера с данной болезнью в анамнезе.
- Детям, которые родились от больных родителей.
- При наличии других половых инфекций.
- Для того чтобы подтвердить результаты скринингового исследования (отборочной реакции).
Для контроля за лечением сифилиса тоже используют реакцию микропреципитации. Даже после клинического выздоровления болевшего сифилисом человека и снятия его с учета, специфические реакции могут еще долго быть положительными. Это следующие реакции: ИФА, РИТ, РПГА и другие. Они и являются критерием излеченности.
Для проведения микрореакции исходным материалом может служить – кровь из пальца, из вены или спинномозговая жидкость. Перед забором крови не следует кушать.
- Отрицательной,
- Положительной,
- Сомнительной.
О чем же может говорить положительная реакция преципитации?
- Наличие у человека сифилиса (первичного, вторичного или третичного).
- Вылеченный сифилис (у небольшого количества людей в течение всей жизни не происходит негативация).
- Приобретенная после лечения серорезистентность.
- Реакция может оказаться ложноположительной.
О чем говорит отрицательный результат реакции?
- Отсутствие болезни сифилиса.
- Не исключен поздний сифилис.
- Наличие первичного серонегативного сифилиса.
- Реакция может оказаться ложноотрицательной.
- Причины, связанные с неправильной техникой проведения реакции (неправильный забор крови, заражение бактериями исходного материала, использование грязной посуды для проведения реакции, недостаточное перемешивание, неправильное хранение материала и реагентов).
- Причины, связанные с некоторыми заболеваниями, такими как: туберкулез, сахарный диабет, онкологические болезни, хронический алкоголизм, вирусные гепатиты, пневмонии, аутоиммунные заболевания, подагра, инфекционный мононуклеоз и многие другие.
- Беременность тоже может явиться причиной ложноположительного результата.
Ложноотрицательные результаты встречаются гораздо реже. Они связаны, чаще всего, с высоким количеством антител в крови. Нужно отличать ложноотрицательный результат от отрицательного, который бывает в самом начале болезни, когда организм еще не успел ответить на внедрение инфекции выработкой антител или при последней стадии сифилиса (третичный сифилис), когда количество антилипидных антител существенно снижается.
Важно знать, что, в случае получения положительного результата реакции (при контроле лечения сифилиса), необходим осмотр врачом дерматовенерологом и проведение трепонемных тестов.
Читайте также: