Рекомбинантные вич антигены опасны ли

Наиболее доступным, распространенным и сравнительно дешевым методом диагностики ВИЧ-инфекции является иммуноферментный анализ (ИФА). Для исследования используют сыворотку и плазму.

Твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) является наиболее популярным при диагностике различных вирусных, бактериальных, грибковых болезней человека. Метод удобен для выполнения большого числа однотипных исследований. В отличие от классических диагностических методов, основанных на агглютинации, преципитации, в ИФЛ на первом этапе происходит образование комплекса антиген-антитело, который затем проявляется с помощью фермент - субстратной реакции (7).

Разработано несколько модификаций ИФА: прямой, непрямой, конкурентный, блокирования, при этом один из специфических реагентов иммобилизуется на твердой фазе, затем последовательно добавляют исследуемую сыворотку, коньюгат, хромоген, проводя после каждой инкубации промывку с целью удаления несвязавшихся компонентов. Результаты регистрируют с помощью многоканального спектрофотометра и проводят сравнение с контрольными образцами.

В качестве твердой фазы используют различные полимерные материалы: полистирол, поливинил, полиамид, полипропилен, а также сефарозу, желатин, пористые мембраны из нитроцеллюлозы. Твердая фаза может иметь форму планшетов, пробирок, шариков. Чувствительность анализа определяется природой гвердои фазы и гидрофобпостью специфического резгента. В большинстве применяемых тест-систем в производственных условиях иммобилизуют антигены трех типов: лизаты ВИЧ-инфицированных клеток, рекомбинантные белки вириоиов, синтетические белки ВИЧ. Антигены должны быть максимально очищены, т.к. специфичность тест-систем, в первую очередь, зависит от чистоты иммобилизованного белка.

Лизатные тест-системы относятся к тестам первого поколения, с их помощью выявляются все присутствующие антитела, но они обладают гиперчувствительностью и дают большое количество ложноположительных результатов. В рекомбинантных тестах используют белки ВИЧ, полученные в прокариотах, за счет встраивания отдельных генов ВИЧ, отвечающих за синтез диагностически значимых белков. Обычно в рекомбинантных тест-системах используют два - три белка ВИЧ, например: GP 120, GP 41, Р 24. Эти тест-системы более специфичны, чем лизатные, но менее чувствительны.

В пептидных тест-системах используют синтетические пептиды ВИЧ, полученные путем биохимического синтеза высококонсерватнвных зпитопов ВИЧ.

Чаше всего это белки генов env, и в силу этого пептидные тест-системы высоко специфичны, по обладают меньшей чувствительностью по сравнению с лизатными тестами. Существуют зарубежные тесты, иммуносорбенты которых содержат комплекс лизатных, рекомбинантных, пептитных антигенов.

Диагноз ВИЧ - инфекции основывается, прежде всего, на выявлении антител к ВИЧ. Серологические тесты для выявления антител к ВИЧ подразделяются на скрининговые тесты и подтверждающие (конфирматорные) тесты.

Большинство известных скрининговых тестов являются тестами с применением метода иммуноферментного анализа (ИФА), который позволяет одновременно, в течение одного рабочей) цикла, исследовать большое количество (не менее 90 на 1 планшете) образцов сывороток или плазмы крови человека.

Известны 3 генерации тестов в зависимости от характеристики применяемых антигенов и коньюгатов в ИФА.

Тесты 1-ой генерации основаны на использовании для сенсибилизации планшет (приготовление иммуносорбента) атигена ВИЧ, представляющего собой очищенный лизат ВИЧ, выращенного в культуре клеток лимфоцитов человека. Такие тесты были первыми при разработке диагностических тест-систем. Как показала практика, тест-системы с использованием вирусного лизата обладали недостаточной чувствительностью и специфичностью.

Тесты 2-ой генерации основаны на применении в качестве антигенов ВИЧ рекомбинантных белков и или синтетических пептидов,соотвестсвующих наиболее антигенно-функциональным эпитолам ВИЧ-qp 160/120, qp41, р55, р24 и т.д. Как правило, для сорбции планшет используется комбинация рекомбинантных и/или пептидных синтетических антигенов соответствующих ВИЧ типов 1 и 2.

Для тестов 2-ой генерации очень часто в качестве коньюгатов применяются моноклональные пероксидазные конъюгаты к иммуноглобулинам человека класса Ми классаG.

Тесты 3-ей генерации - являются сендвич-ИФА, когда для получения конъюгата применяется та же комбинация антигенов ВИЧ типов 1 и 2, которая используется для сорбции планшет, но в этом случае -меченая пероксидазой хрена.

Применение коньюгатов к иммуноглобулинам класса М и конъюгатов антигена ВИЧ+ пероксидаза направлено из повышение чувствительности ИФА-тестов, на выявление антител любой природы, в первую очередь ранних антител (класса М), которые появляются значительно раньше антител класса G (до 6 недели после ВИЧ инфицирования), однако их циркуляция в крови достаточно кратковременная.

Таким образом, эти тесты предназначены для ранней диагностики ВИЧ-инфекиии. Кроме тестов непрямого ИФА и сендвич ИФА разработано большое количество простых, не требующих специального оборудования тестов,таких как агглютинация, иммунофильтрация. иммунохроматография, и т.д. В зависимости от времени постановки теста они подразделяются на быстрые (экспресс-тесты) и простые. Наборы для постановки этих тестов обеспечены готовыми к применению реагентами, капельницами. Исследуемые сыворотки или плазма используются, как правило, в неразведенном виде.

Положительный результат исследования проявляется в виде окрашенного пятна или линии, в виде агглютинации эритроцитов или частиц латекса. Такие тесты особенно пригодны в лабораториях, которые лимитированы оборудованием и исследуют ежедневно небольшое количество образцов сыворотки или плазмы крови человека.

В мире в настоящее время более 40 фирм выпускают более 100 наименований скрининговых тест-систем. К настоящему времени ВОЗ рекомендовано три стратегии тестирования антител к ВИЧ, которые направлены к максимальной информативности тестирования при минимально возможной стоимости анализа. Каждая стратегия тестирования основывается на показателе распространения ВИЧ-инфекции среди населения на конкретной территории той или иной страны.

Во всех случаях обследования крови в организациях переливания крови или трансплантации органов следует применять стратегию №1.

При мониторинге населения на наличие ВИЧ-инфекции при показателе > 10% - стратегия №1, при показателе 30%- стратегия №1,при показателе 10% — стратегия №2, при показателе - 10% - стратегия №3.

Все образцы сывороток плазмы тестируются в ИФА или в простом/ быстром тесте. Реактивные сыворотки обозначаются как положительные, содержащие антитела к ВИЧ, нереактивные - как отрицательные, не содержащие антитела к ВИЧ. Позитивные на ВИЧ сыворотки верифицируются в иммуноблоте. При обследовании доноров крови или органов предпочтение следует отдавать комбинированным ВИЧ -1. ВИЧ 2 тестам с выявлением ВИЧ-антител и ВИЧ-антигена с наиболее высокой чувствительностью. В таком случае доноры, образиы сывороток которых оказались реактивными при первичном обследовании в наиболее чувствительном ИФА-тесте, должны быть отклонены от донорства.

При мониторинге населения на ВИЧ чувствительность ИФА тестов должна быть не менее 95%.

Все образцы сыворотки/плаз мы крови первично тестируются в ИФА-тесте или в простом/быстром тесте. Первично реактивные (позитивные) образцы тестируются повторно в ИФА-тесте или быстром/простом тесте, основанных на других антигенах (вместо рекомбинантных - пептидные и наоборот) или в тестах, полученных по принципиально другой технологии. Повторно реактивные образцы обозначаются как положительные, содержащие антитела к ВИЧ. Нереактивныс образцы признаются отрицательными. Образцы сывороток, реактивные в первичном тесте, но нереактивные при повторном тестировании - должны быть ретестированы в двух различных ИФА-тестах. Если получены противоречивые (конкордантные) результаты в двух ИФА тестах, сыворотка признается как неопределенная. Все неопределенные результаты должны быть зафиксированы и должны анализироваться отдельно в отчетах, а пациенты, от которых получены такие образцы, должны быть взяты под наблюдение для последующего обследования.

Так же. как при стратегии № 2, все сыворотки первично тестируются в ИФА-тест-системе или в простом/быстром тесте, реактивные (позитивные) образцы тестируются повторно в другой тест-системе. Первично нереактивные сыворотки обозначаются как ВИЧ-отрицательные. Сыворотки реактивные при первичном тестировании, но нepeактивные при повторном исследовании, должны быть исследованы еще раз в обеих тест-системах. Стратегия № 3 требует третьего исследования, если сыворотка выявлена реактивной при первичном и повторном исследовании в одной и той же тест-системе. Третий тест при этом в обязательном порядке должен основываться на тест-системе с другими антигенами или на тест-системе, полученной принципиально другой технологией. Сыворотка, реактивная в 3 тесте, обозначается как ВИЧ-позитивная.

Сыворотка, реактивная при первичной и вторичной постановке, но не реактивная при третьем исследовании, обозначается как неопределенная.

Сыворотка, реактивная при первичном исследовании, но не реактивная во втором и третьем исследовании, также обозначается как неопределенная для пациентов, которые имели контакт по ВИЧ в последние 3 месяца и как отрицательная для пациентов, которые не имели какого бы то ни было риска заражения ВИЧ.

У всех пациентов, которые имели серопозитивные результаты при исследовании первого образца сыворотки крови, следует получить дополнительный образец сыворотки крови для повторного тестирования, чтобы избежать технических или случайных ошибок.

Неопределенные результаты исследования сыворотки крови могут быть получены у ВИЧ-пациентов, имеющих III или IV стадию СПИДа (по критериям ВОЗ).

У пациентов, не имеющих симптомов ВИЧ-инфекции, при неопределенных результатах исследования сыворотки крови необходимо исследовать второй образец сыворотки крови, полученный не ранее, чем через 2 недели после первого образца крови. В случае получения неопределенного результата при обследовании второго образца крови, необходимо провести исследование его в подтверждающем тестe. При этом если неопределенный результат подтверждается через 3, 6, 12 месяцев, пациента следует признать ВИЧ-отрицательным.

Таким образом, стратегия №1 применяется только для подтверждения клинического диагноза ВИЧ-пациентов на III или IV стадии CПИДа и когда ВИЧ-инфекция регистрируется более чем у 30% населения региона. При более низких показателях распространения ВИЧ для постановки серологического диагноза) пациентов III-IV стадий СПИДа используют стратегию №2.

При выборе тестов для выявления ВИЧ-антител для использования в стратегиях №2 и №3 для первичною тестирования следует использовать тест-систему с наиболее высокой чувствительностью, тогда как при втором и третьем исследовании тест-системы должны быть с более высокой специфичностью, чем при первичном исследовании образца сыворотки крови.

В Российской Федерации 9 предприятий выпускают 15 наименований иммуноферментных тест-систем дли выявления антител к ВИЧ 1 и 2 типов.

Большинство тест-систем являются препаратами 2 генерации, т.е. в качестве иммуносорбента используются комбинации рекомбинантных белков или синтетических пептидов, соотвествуюших наиболее антигеноактивным участкам ВИЧ 1 и 2 типа. В качестве конъюгатов используются моноклональные или поликлональные антитела к иммуноглобулинам человека класса М и G.

В одной тест-системе в комбинацию антигенов ВИЧ включены рекомбинантные белки ВИЧ-1-0 группы: ИФЛ-анти-ВИЧ Униф".

Кроме того, разработаны и выпускаются 2 тест-системы 3 генерации, в которых в качестве коньюгата используются комбинации антигенов ВИЧ 1 и 2 типов, меченые пероксидатой хрена: "Комби Бест-анти ВИЧ 1+2", "Рекомбинант ВИЧ1,2ДСМ"

Государственная приемка тест-систем при внедрении в практику, постоянная оценка качества каждой выпускаемой серии, регулярные сравнительные испытания (1 раз в 2 года) тест-систем, организуемые МЗ РФ, свидетельствуют о стабильном качестве отечественных препаратов, которые не уступают аналогичным препаратам 2 и 3 генерации зарубежного производства как по чувствительности, так и по специфичности.

Различные комбинации антигенов, различные конъюгаты и другие технологические приемы, используемые при производстве отечественных тест-систем, позволяют взаимозаменять их при обеспечении той или иной стратегии диагностики ВИЧ-инфекции. В РФ зарегистрированы две тест-системы 4 генерации зарубежного производства, которые наиболее эффективны при обследовании доноров крови и органов - наиболее опасных групп для распространения ВИЧ-инфекции -"Вироностика ВИЧ Униформ II Аг/Ат" фирмы "Органон-техника" (Голландия) и"Дженскрин плюс ВИЧ Аг/Ат" фирмы "Биорад" (Франция).

Эти тест-системы предназначены для одновременного качественного выявления антигена р 24 ВИЧ (ранний антиген ВИЧ) и антител к ВИЧ 1 и 2 типа классов М, A, G, т.е. направлены на максимальное сокращение "серологического" окна при ранней диагностики ВИЧ-инфекции.

Источник: АХ. Рахманова, Е.Н. Виноградова, Е.Е. Воронин, А. А. Яковлев "ВИЧ-инфекция"

Пока это препринт и статья ещё не прошла процедуру рецензирования. Авторский коллектив, включает учёных из США, Австрии, Австралии, Финляндии и Швейцарии. На мой взгляд, эта работа сделана великолепно. Я не ставлю целью дать исчерпывающее описание содержания этой статьи, а фокусирую внимание на моментах, имеющих общее значение для всех антительных тестов.

Полученные рекомбинантные белки были очищены практически до гомогенности (см рис. ниже). На нем Spike это тример полноразмерного gp-S, а RBD это рекомбинантный фрагмент RBD; i – insect; m – mammalian обозначают рекомбинантные белки из клеток насекомых и млекопитающих, соответственно.

2. Как работает ИФА тест на антитела.

3. Доказательства аналитической специфичности тест-системы.

Тест-система специфична, если она обнаруживает только те антитела, для определения которых она предназначена. Для тест-системы на антитела против SARS-CoV-2 для подтверждения её специфичности должны быть выполнены следующие условия а) образцы заведомо не содержащие антитела против SARS-CoV-2 должны быть четко отрицательны; б) образцы от больных COVID-19 (диагноз подтверждён) должны быть положительны;
в) при исследовании серийных образцов, взятых от инфицированных людей на начальных и поздних стадиях заболевания должен регистрироваться переход от антитело-отрицательности к антитело-положительности; это называется сероконверсия). Кстати, сероконверсия, если она убедительно продемонстрирована, является таким же надёжным диагностическим признаком SARS-CoV-2 инфекции, как и обнаружение вирусной РНК. Все эти условия были выполнены, что детально задокументировано в статье. На рисунке ниже представлены данные об ИФА реактивности заведомо отрицательных образцов (черные кружки) и положительных контролей (сыворотки больных после сероконверсии — красные прямоугольники). Отчетливо видно, что тест-система хорошо отличает положительные образцы от отрицательных. Особенно эффективен в этом отношении антиген mSpike (тример полноразмерного gp-S, полученного в клетках млекопитающих).

4. Корреляция титров ИФА и вирус-нейтрализующих антител.

Когда у больного берется кровь, она может быть взята в пробирку с антикоагулянтом или без него. В первом случае можно будет получить плазму крови, а во втором сыворотку. В антительных тестах традиционно используют сыворотку крови. Но чаще кровь из вены берут в пробирку с антикоагулянтом. В данной работа доказано, что в их тест-системе можно использовать и сыворотку и плазму крови, разницы нет. Это очень удобно в практике.

Кровь больных COVID-19 может быть заразной. В работе показано, что без всякого ущерба для характеристик теста, образцы сыворотки или плазмы могут быть прогреты до 56 градусов С в течение 1 часа. Эта обработка полностью инактивирует вирус. Нужно ли говорить насколько это повышает безопасность для сотрудников серологической лаборатории.

6. Авторы не коммерциализируют разработанные ими антигены!

Авторы работы уже передали разработанные ими антигены в более чем 200 лабораторий по всему миру и предлагают их всем, кто заинтересован. Полагаю, при условии, что они не будут использоваться в коммерческих целях.

Резюмирую, для того, чтобы оценить тест-систему для определения антител против SARS-CoV-2 необходимо, чтобы в научном публичном пространстве были доступны данные, аналогичные тем, что представлены в работе, о которой шла речь в этом посте.

Плюс интервью с Виталием Васильевичем Зверевым. Вирусологом, профессором, академиком РАН, научным руководителем НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, заведующим кафедрой микробиологии, вирусологии, иммунологии Сеченовского Университета на тему медицинских аспектов коронавирусной эпидемии, а также перспектив появления вакцины.

PS. Из прочего стоит отметить, что Китай поставит в Россию 1,6 млн. костюмов индивидуальной защиты для медиков, который Россия закупает через специальный фонд.

— Наталья Матвеевна, известно, что у гриппа множество штаммов. А у вируса иммунодефицита тоже есть разновидности?

— Разновидностей ВИЧ множество: так же, как люди делятся на разные расы, национальности, так и разные вирусы иммунодефицита различаются по структуре генома — генетического кода, который содержит всю информацию о вирусе. Геном вируса — это как хромосомы у человека, в которых зашифрована вся генетическая информация (какие у вас глаза, губы, рост и т. д.). Молекулярные эпидемиологи расшифровывают генетические коды вирусов и с помощью компьютерных программ сравнивают их, объединяя вирусы по идентичности их генома. Близкие группы вирусов называют субтипами.

Генетическую классификацию ВИЧ ввели вскоре после его открытия. Сначала определили девять основных групп, субтипов — A, B, C, D и т.д, и думали, что на этом все закончится. Но уже в начале 2000-х годов стало очевидно, что ВИЧ меняется. Когда вирус попадает в клетку человека, каждый цикл своего воспроизведения он делает с ошибкой. Считается, что без терапии у одного человека в сутки воспроизводится 10 в десятой степени новых вирусов. И каждый раз вирус при копировании своего генома может делать ошибку — так накапливаются точечные мутации.

Но, кроме этого, оказалось, что вирусы могут и взаимодействовать друг с другом. Если в клетку человека попадает один вирус, а через какое-то время он заражается еще раз уже другим генетическим вариантом вируса (сначала был вирус, условно говоря, голубой, а потом попал красный), то такие вирусы могут частично обмениваться кусками своей информации (в результате может получиться уже вирус с мозаичной структурой генома, где чередуются красный и синий цвета). Это называется рекомбинантный вариант ВИЧ.

Такие варианты стали регистрировать еще в начале 2000-х годов, и некоторые рекомбинантные варианты получили очень широкое распространение в международной эпидемии — пандемии. Например, вирус CRF01_АЕ (это значит, что его прародительские формы — субтипы вируса А и Е), CRF02_AG, CRF03_АВ и т. д.

— Какие варианты вирусов наиболее распространены?

— В России очень долго, примерно до 2008 года, почти на всех территориях распространялся вирус субтипа А. Он распространялся в обычной популяции (наркоманы и люди, получившие ВИЧ половым путем). Исключение составляли мужчины гомосексуальной ориентации, в группе которых циркулировал другой вирус — субтипа B: так сложилось исторически, потому что именно этот вирус в свое время попал в такую группу людей. Но сейчас ситуация очень сильно изменилась.

— Каким образом?

Мы не сразу поняли, что это новый вирус — технологии тогда еще не позволяли, секвенирование (расшифровка генома) было очень дорогим, малодоступным. Сначала мы думали, что мы увидели вирус, который, по данным научной литературы, выявлялся в странах Средней Азии — в Таджикистане, Узбекистане, Киргизии, Казахстане.

Обычно анализ генома ВИЧ проводится по 1/3-1/5 генома, а здесь мы полностью расшифровали вирус, от начала и до конца, сравнили расшифровки между собой и поняли, что восемь геномов ВИЧ-1 абсолютно идентичны.

Есть специальные компьютерные программы, которые позволяют анализировать вирус, сопоставляя кусочки его генома с геномами других вирусов. Такой анализ позволил доказать, что этот новый вирус частично такой же, как среднеазиатский CRF02_AG, а частично такой, как российский субтип А (теперь он называется А6). Таким образом, расшифровка структуры полного вирусного генома позволила понять, что эти два вируса скрестились и возник новый генетический вариант ВИЧ-1.

Первые образцы такого вируса были выделены нами от пациентов, инфицированных в 2003—2004 годах: видимо, он возник на рубеже 2000-х годов. В середине нулевых мы в Новосибирске стали выявлять его все больше и больше. Среди образцов крови, взятых у впервые выявленных людей с ВИЧ, в 2008 году мы находили такой вирус в 30% случаев, а после 2009-10 года количество людей, инфицированных этим типом ВИЧ, увеличилось до 80%.

— Как вы назвали новый вирус?

— Наименование было присвоено не нами, а международными экспертами, которые проверили корректность проведенных нами исследований. Выявленный в Сибири ВИЧ-1 был назван CFR63_02А1. Цифра 63 обозначает, каким по счету этот рекомбинантный вирус был открыт, а 02А1 — прародители этого вируса.

— Где еще обнаруживался новый ВИЧ?

— Мы вели исследования на территории Кемеровской, Томской областей, сейчас работаем в Красноярском крае, проводили анализ на Алтае.

В Томске мы успели зафиксировать ситуацию в самом начале — там до 2013 года были очень низкие темпы эпидемии: в год выявлялось порядка 200 человек, а с 2013 года выявляемость новых случаев увеличилась до 3000 случаев в год — темпы роста заболеваемости выросли почти в 10 раз! И в это же время мы стали выявлять там этот новый вирус.

— Такие темпы роста — это его заслуга?

— Скорее это совпадение всех условий: в это же время в Томске наркоманы перестроились на употребление дешевых синтетических наркотиков из Китая, и проникновение нового вируса совпало с резким увеличением количества людей, употребляющих эти наркотики. Во-первых, они не контролировали использование одноразовых шприцов (могли использовать шприцы совместно), во-вторых, эти наркотики действуют на психику — человек теряет контроль ситуации, у него резко повышаются сексуальные инстинкты и снижаются барьеры. В итоге люди заражались и через потребление наркотиков одной иглой, и через сексуальные контакты с разными партнерами.

В Новосибирске — схожая картина: до 2007 года у нас было всего официально зарегистрирована тысяча ВИЧ-инфицированных людей. С 2008 года пошли синтетические наркотики, и каждый год — по 2,5 тысячи новых случаев, потом больше. Сейчас в среднем мы имеем прирост в 3,5 тысяч новых случаев ВИЧ-инфекции в год, при этом основной вклад, более 80-85%, вносит этот новый вирус CRF63_02A1.

— В других регионах какие данные?

— В уральских регионах где-то проводите исследования?

— На Урале мы работаем в Тюмени: там очень неравнодушные люди, которых очень интересовало, какие вирусы вызывают распространение эпидемии на их территории. Мы провели такое исследование в 2015 году: взяли порядка 100 образцов крови от ВИЧ-инфицированных жителей Тюмени и области и, к своему удивлению, обнаружили, что там 95% зараженных инфицировано старым вирусом (субтипа А), всего в 2 случаях мы нашли мозаичные вирусы, геном которых частично относится к субтипу А, а частично — к 63-му ВИЧ. Есть еще среднеазиатский вирус CRF02_AG и 1 или 2 случая инфицирования ВИЧ субтипа В, во всех остальных случаях был выделен субтип А- вируса.

То есть в Тюмени сохраняется классическая российская ситуация, какая была в конце 90-х.

— В чем его опасность?

— Статистика показывает, что он распространяется очень быстро.

У нас сейчас выявляется все больше людей в острой стадии ВИЧ-инфекции, с очень высокой вирусной нагрузкой и выраженной лихорадкой. С одной стороны, такие люди более опасны для своих половых партнеров, так как вирус, присутствуя в большой концентрации, с большей вероятностью переходит к другому человеку.

С другой стороны, при таком начале заболевания люди чаще обращаются в медучреждения, где им могут быстро поставить правильный диагноз и назначить срочное лечение. Важно, что эти вирусы очень хорошо откликаются на антиретровирусную терапию: если пациенту своевременно назначить лечение, то вирусная нагрузка быстро снижается и человек начинает себя хорошо чувствовать.

— Кто бы могу подумать, что работа таких узких специалистов, как вы, будет столь важной!

— Раньше никто не думал, что вирусы могут так быстро меняться. Анализ последних лет работы показал, что наши затраты сил, времени и финансов были оправданы. К тому же знание особенностей генома вирусов очень важно не только для эпидемиологии, но и для разработки тест-систем. Многие клинические тест-системы основаны на ПЦР-диагностике, а она, в свою очередь, — на знании нуклеотидной последовательности вирусов (вирусного генома). Все свои расшифрованные последовательности мы помещаем в международную базу данных. Эти данные общедоступны, и разработчики тест-систем могут пользоваться ими, чтобы смотреть, соответствует их тест-система изменчивости вирусов или нет.

— В моем представлении, работа с вирусами — это как в кино: лаборатории с уровнями доступа, люди в специальных защитных костюмах а-ля сканфандры. У вас все так же?

— У нас в лабораториях есть боксы биологической безопасности (ламинары), которые, благодаря воздушным потокам, защищают работника и препятствуют выходу материала в окружающую среду. При их использовании расписаны все алгоритмы работы, чтобы она была максимально безопасной. ВИЧ по воздуху не летает, для него не нужны скафандры.

— Как выглядят вирус ВИЧ?

— В интернете есть множество фотографий вируса иммунодефицита человека. А у нас есть электронные фотографии ВИЧ, с которыми мы работаем. Но это малоинформативно: внешне вирионы всех генетических разновидностей ВИЧ выглядят одинаково. Для нас, вирусологов, важно, как выглядит его расшифрованная структура ДНК, так как именно в ней закодированы все различия в свойствах вируса.

— Что бы посоветовал вирусолог людям, живущим с ВИЧ?

— Раньше начинали лечить, только когда иммунитет у человека начинал падать…

Я иногда говорю пациентам с ВИЧ: у меня высокое давление, я каждый день пью таблетки — и вы точно также пейте каждый день, по времени и будете жить нормально. Ну и что, что химия?

Если терапия идет тяжело, можно менять схему лечения, заменив препараты. Если плохая переносимость лекарств, об этом просто нужно говорить врачу.

— Ваша оценка ситуации с ВИЧ в России?

Инфекция

Антиген

Кат. номер

Описание антигена

ВИЧ

Синтезированный в клетках E.coli мозаичный рекомбинантный белок, содержащий слитный с β- галактозидазой иммунодоминантный фрагмент продукта гена gag ВИЧ-1: полноразмерный белок р24 и фрагменты белков р17 и р15

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий полноразмерный белок р24 ВИЧ-1

HIV-1: Δ р24

Синтезированный в клетках E.coli мозаичный рекомбинантный белок, содержащий слитный с β- галактозидазой иммунодоминантный фрагмент продукта гена env ВИЧ-1 из фрагментов белков gр120 и gp41

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с фрагментом β- галактозидазы иммунодоминантный фрагмент белка gp160 ВИЧ-1, предшественника белков gp12 0 и gp41

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β- галактозидазой иммунодоминантный фрагмент белка gp120 ВИЧ-1

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β- галактозидазой иммунодоминантный фрагмент белка gp41 ВИЧ-1

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β- галактозидазой полипептид из трех иммунодоминантных фрагментов белка-продукта гена pol ВИЧ-1

Синтезированный в клетках Ecoli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β-галактозидазой полипептид, включающий иммунодоминантные фрагменты оболочечных белков gp105 и gp36 ВИЧ-2

HIV-2: gp-36 /6 (для БЛОТа) R-0122 Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β-галактозидазой иммунодоминантный фрагмент оболочечного белка gp -36/6 HIV-2: gp-36 для ИФА

Вирус гепатита С

Синтезированный в клетках E . coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β - галактозидазой иммунореактивный фрагмент core- антигена ВГС генотипа 1b

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β -галактозидазой иммунореактивный фрагмент белка NS4а ВГС генотипа 1b

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β -галактозидазой иммунореактивный фрагмент белка NS4 ВГС генотипа 2а

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β -галактозидазой иммунореактивный фрагмент белка NS4 ВГС генотипа 3а

Синтезированный в клетках E . coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β - галактозидазой полипептид из иммунореактивных фрагментов белков NS4а и core ВГС генотипа 1b

Синтезированный в клетках E . coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β - галактозидазой иммунореактивный фрагмент белка NS3 ВГС генотипа 1 b

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитные с β-галактозидазой иммунодоминантные фрагменты белков NS 4 генотипов 2 a и 3 a

Цитомегаловирус

Синтезированный в клетках E . coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β - галактозидазой фрагмент фосфопротеина тегумента pр150 ( p UL 32 ) цитомегаловируса

Синтезированный в клетках E . coli рекомбинантный белок-аналог фосфопротеина тегумента pр65 цитомегаловируса

Синтезированный в клетках E . coli рекомбинантный белок, содержащий фрагмент иммунодоминантного домена AD 1 гликопротеина gB цитомегаловируса (ген pUL83)

Синтезированный в клетках E . coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β - галактозидазой иммунореактивный фрагмент ДНК-связывающего белка цитомегаловируса pp 52 (ген UL44 )

Сифилис
( Treponema pallidum )

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β -галактозидазой иммунореактивный фрагмент липопротеида 15 кДа Treponema pallidum

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β -галактозидазой иммунореактивный фрагмент липопротеида 17 кДа Treponema pallidum

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β- галактозидазой иммунореактивный фрагмент липопротеида 47 кДа Treponema pallidum

Синтезированный в клетках E.coli рекомбинантный белок, содержащий слитный с β- галактозидазой иммунореактивный фрагмент липопротеида TmpA Treponema pallidum

T- клеточная лейкемия