Тест на вич стоматология
Пандемия и вирусных гепатитов — одна из сложнейших проблем, стоящих сегодня перед человечеством. В России ситуацию с этими заболеваниями многие эксперты давно называют катастрофической. Для стоматологов, которые являются наиболее часто посещаемыми врачами, эта проблема стоит очень остро.
Для начала — немного статистики. За прошедший год в России официально выявлено 104 402 новых Эти сухие цифры заиграют новыми красками, если подсчитать: ежечасно в России 10 человек заражаются ВИЧ.
При этом ежегодно в России регистрируется более 50 тысяч новых случаев заболевания гепатитом С и примерно столько же эта болезнь отправляет на тот свет.
Такие данные позволяют говорить о генерализованных эпидемиях и вирусных гепатитов, В этих условиях автоматически возрастает риск инфицирования ВИЧ и гепатитами во время медицинских манипуляций, в том числе и в стоматологическом кабинете. Рискуют здесь и здоровые пациенты, и врачи. Поэтому профилактику заражения и вирусными гепатитами в стоматологии можно назвать актуальной и социально значимой.
Конечно, можно просто отправлять первичных пациентов сдавать кровь на ВИЧ и гепатит С в специализированный центр. Однако нет никаких гарантий, что они согласятся на это. Многие предпочтут найти врача с менее строгим подходом к безопасности, к тому же в случае острой боли ждать результатов анализа несколько дней — это просто негуманно.
Гораздо быстрее и проще использовать неинвазивную и безболезненную а именно активно внедряемые в сети клиник Юнидент Стоматология современные OraQuick ADVANCE (на антитела и OraQuick HCV Rapid Antibody Test (на антитела к вирусу гепатита С).
Эффективность и надежность подтверждена как зарубежными, так и российскими специалистами. Технические и медицинские испытания показали его чувствительность и специфичность, не уступающие методу ИФА. Встроенный контроль сводит к минимуму вероятность ошибки применения или неправильного считывания результата.
Это единственный в мире официально одобренный метод исследования, способный выявить ВИЧ и гепатит С с помощью анализа слюны. позволяют получить результат за 20 минут, причем не выходя из стоматологического кабинета, и это делает их незаменимыми в стоматологической практике. Для проведения тестов не требуются ни лабораторные условия, ни специальная подготовка медицинского персонала.
Данные дают возможность незамедлительно выявлять инфицированных пациентов и в случае получения сотрудниками травм во время их лечения сразу начинать процедуры. Кроме того, врач получит возможность использовать при лечении инфицированных пациентов одноразовые буры, которые все чаще применяются в клиниках Юнидент Стоматология для снижения риска внутрибольничного инфицирования. Помимо основной цели, а именно защиты от инфекций врачей и пациентов клиники, пациентов может решить и более широкую задачу.
По статистике, взрослые люди посещают стоматолога чаще, чем любого другого врача, а значит, введение тестирования в стоматологических клиниках позволит существенно расширить возможности раннего выявления ВИЧ и вирусных гепатитов в масштабах всей России.
Еще один сложный момент, с которым, к сожалению, не раз придется столкнуться персоналу клиник, — это сообщение пациентам о положительных результатах теста. Такая информация может вызвать у человека самую бурную реакцию — от истерики до шока.
Разумеется, такое тестирование может быть только добровольным. Однако врачам стоит приложить все усилия для того, чтобы убедить пациентов проходить его каждые полгода. Ведь в конечном итоге от его применения выигрывают обе стороны.
Система OraQuick Advance проста и удобна — тестирование можно проводить в любых условиях, в том числе за пределами медучреждений
После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.
Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.
Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.
Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.
Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.
Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.
Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.
Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.
Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.
В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.
Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.
Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.
Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.
Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.
Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.
Какие бывают тесты ИФА?
● Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.
Что важно знать об ИФА-тестах?
Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)
Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.
Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.
Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.
Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.
Что важно знать о вестерн-блоте?
В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.
1. Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.
2. Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.
В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?
В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.
Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.
Комбинированные тесты
Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.
● Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.
Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.
Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.
Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.
После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.
Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.
ПЦР: самый сложный анализ
Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.
Видео: как работает ПЦР-тест
Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.
Редкая штука
Пришлось позвонить в единую справочную аптек Барнаула (тел. 8 (3852) 63-50-00 — прим. ред.) и узнать, где же купить такую редкость. Оказалось, тест на ВИЧ на тот момент продавался только в одной аптеке города — в центре, неподалеку от ЦУМа. Даже цену уточнили — 265 рублей.
Вечером того же дня после работы я зашла в указанную аптеку, и без проблем взяла тест. Провизоры отреагировали на запрос нормально, и сказали, что никакого ажиотажа на эти тесты не ощутили.
Что входит в набор теста на ВИЧ
Поскольку я сама на днях сдала экспресс-анализ в алтайском СПИД-центре, то предложила использовать тест из аптеки коллегам. Самой смелой оказалась Дарья Эйдемиллер. Мы вместе изучили инструкцию и принялись за дело.
Итак, в состав теста на ВИЧ 1/2 входят:
- тест-полоска в герметичной упаковке (на вид почти не отличается от теста на беременность);
- автоматический ланцет (скарификатор) для прокалывания пальца;
- пластиковая пробирка для сбора венозной крови;
- реагент для разведения венозной крови;
- пипетка для сбора крови;
- две спиртовых салфетки.
Как проходил тест
По составу уже можно понять, что тест годится для определения как по капиллярной, так и по венозной крови. Правда, приспособлений для взятия венозной крови в наборе нет — не ланцетом же вену прокалывать, в самом деле.
Мы волновались во время эксперимента, а потому не сразу поняли, что ни пробирка, ни реагент не нужны при взятии крови из пальца. Нужно было просто выдавить каплю на тест-полоску пониже стрелочек и подождать 10-15 минут. Но мы пошли другим путем.
Испытуемая сама проколола себе палец и стала собирать кровь в пипетку. Затем она выдавила кровь в пробирку, после чего я добавила туда две капли реагента. Далее мы опустили тест-полоску внутрь пробирки, вытащили и положили на сухое место. Довольно долго на тесте ничего не появлялось. Мы перечитали инструкцию и поняли свою ошибку. Тогда мы взяли и добавили крови на тест-полоску.
Наконец минут через 10 проявилась бледная розовая черточка. Одна, в верхней части теста, как и было указано в инструкции. Все выдохнули и признали, что самостоятельно проводить тест довольно волнительно, пока ждешь результата, можно и поседеть. Кажется, спокойнее всех была сама Дарья:
— Страшно не было. Благодаря интернету и работе я многое знаю о ВИЧ. На получении такой инфекции жизнь не заканчивается. Если даже был бы положительный результат, я не думаю, что это кардинально изменило бы мою жизнь. Наоборот, хорошо было бы узнать об этом — чем раньше, тем лучше, — поделилась впечатлениями испытуемая.
Какие риски несет домашнее тестирование на ВИЧ
В алтайском СПИД-центре не имеют ничего против такого тестирования, но предупреждают о возможных рисках. Во-первых, такие тесты имеют точность 95-98% — это ниже, чем даже при экспресс-тестировании в медучреждении. Во-вторых, в случае положительного результата в СПИД-центре сразу же начинают оказывать психологическую и информационную помощь, а при самостоятельном тестировании человек зачастую находится в помещении один, и ему некому будет помочь и уберечь от возможных неразумных действий.
Экспресс-тестирование в алтайском СПИД-центре проводится бесплатно и анонимно, в порядке живой очереди, без предварительной записи. Нужно просто приехать на ул. 5-я Западная, 62 и пройти к 119 кабинету. Тесты проводят по вторникам с 10 до 12 часов и по четвергам с 13 до 15 часов. В остальное время можно сдать кровь на ВИЧ из вены, но платно. Такой анализ стоит около 300 рублей, готовится минимум сутки, зато после него можно получить справку об отсутствии вируса.
Топ-семь главных вопросов о ВИЧ
Как передается вирус?
— Есть только три пути передачи: через кровь (инъекционный либо через ранки), через секс и от матери к ребенку (через родовые пути и грудное молоко). Нельзя заразиться ВИЧ в сауне через мокрые полотенца, в бассейне, от крышки унитаза и тому подобные места. Комары не способны распространять вирус.
Сколько раз нужно сдавать анализ?
Что будет, если не лечить ВИЧ?
— Многие люди могут жить до 10 лет без всяких симптомов. Затем иммунитет ослабевает и в конце концов развивается СПИД — синдром иммунодефицита. Это последняя стадия заболевания, при которой у человека развиваются другие инфекции, опухоли и болезни, от которых он в итоге и умирает.
Правда ли, что от ВИЧ не умирают?
— Правда. Умирают от СПИДа и сопутствующих заболеваний. СПИД-центры отслеживают причины смертности своих пациентов.
Презервативы защищают на 100%?
— Не на 100%, но близко к этой цифре при правильном использовании. В США проводили исследование в течение 4-х лет среди пар, где один партнер был ВИЧ-положительным. За это время никто из тех, кто правильно использовал презервативы, не заразился. А при приеме терапии возможен секс без презерватива и рождение здорового ребенка в 98% случаев.
Может ли терапия не помогать при ВИЧ?
Ни один из препаратов не может быть эффективен на 100% — бывают очень стойкие вирусы. Некоторые люди никогда не могут достичь не обнаруживаемых результатов вирусной нагрузки, но при этом хорошо себя чувствуют много лет.
Можно ли сдать тест без крови?
— Есть тесты, определяющие вирус по слюне — как в аптеках, так и в медучреждениях. Но это стоит дороже, чем анализ крови.
Какие тесты еще можно купить в аптеках
Производители выпускают множество тестов для самостоятельного использования: на уровень глюкозы в крови, на алкоголь в слюне, на гепатиты В и С, стрептатесты на выявление стрептококка в горле при ангине, на скрытую кровь в кале , на определение овуляции, на уровень кислотности влагалища, кольпо-тесты на половые инфекции для женщин, на определение молочницы и даже тест-прокладки на подтекание околоплодных вод при беременности.
ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:
Все больше людей приходят сдать анализ в алтайский СПИД-центр: если раньше в день приходило по 20-25 человек, то сейчас — 30-40. И что самое важное: стало больше молодежи (подробнее)
Экспресс тест на ВИЧ используется в случае, когда результат надо получить быстро. Такие тесты проводятся как в медицинских учреждениях, так и в домашних условиях и позволяют получить результат в течение 10 — 20 минут. Экспресс анализ на ВИЧ используется для определения антител в крови, моче или слюне обследуемого. Для его проведения не требуется специального оборудования и высокой квалификации персонала. Они просты в использовании и выдают очевидный результат, который должен быть подтвержден стандартными методами тестирования.
Экспресс тесты на ВИЧ применяются в приемных отделениях и лабораториях медицинских учреждений, в отделениях скорой и неотложной помощи, в неотложных случаях при поступлении на роды или операцию не обследованного на ВИЧ лица, у доноров перед сдачей крови, при массовом тестировании в передвижных лабораториях и в домашних условиях — везде, где появляется необходимость срочного тестирования на наличие вирусов в крови. Домашний тест на ВИЧ характеризует простота, анонимность и быстрота получения результата.
При помощи быстрых тестов можно:
- увеличить количество обследуемых лиц,
- выявить инфицированные лица,
- увеличить число учреждений, где существует высокая степень риска заражения ВИЧ у отдельных групп населения.
Для срочного тестирования на ВИЧ в медицинские учреждения в РФ закупается только качественная продукция.
Рис. 1. Профессиональный тест Determine HIV Combo, производится в Японии. Лучший в медицине тест четвертого поколения, не имеет аналогов. Позволяет одномоментно определить наличие в крови или сыворотке больного антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и антиген р24 на ранней стадии заболевания (в период серонегативного окна), что способствует снижению распространения инфекции. Используется в медицинских учреждениях.
Принцип работы экспресс-тестов
Новейшие экспресс тесты на ВИЧ работают по принципу иммунохроматографии. Их основным компонентом является узкая бумажная или пластиковая хроматографическая пластинка, на кончик которой наносится проба (цельная кровь, сыворотка или слюна). Исследуемый материал быстро диффундирует (распространяется) вдоль пластины, которая пропитана необходимыми реагентами. При наличии антител к вирусам на пластине появляется окрашенная полоска. При проведении некоторых экспресс анализов на ВИЧ в качестве реагента используется не один, а два антигена (принцип сэндвича). Результат получается в течение 2 — 10 минут. Тесты хранятся при температуре от 15 о С до 30 о С, легко транспортируются.
Рис. 2. Новейшие экспресс тесты на ВИЧ работают по принципу иммунохроматографии. Их основным компонентом является узкая бумажная или пластиковая хроматографическая пластинка, на кончик которой наносится проба (цельная кровь, сыворотка или слюна).
Что такое простые тесты
Работа простых тестов основана на реакции агглютинации, они не требуют специального лабораторного оборудования, достаточно чувствительны и дешевы, проводятся с минимальными трудозатратами, позволяют получить результат в течение 1,5 — 2 часов. Эритроциты, частицы желатина или латекса, покрытые антигенами ВИЧ, при соприкосновении с сывороткой крови, содержащей антитела к данным вирусам, агглютинируют (выпадают в осадок). При использовании эритроцитов данная методика носит название пассивной гемагглютинации. При использовании латекса — латекс-агглютинацией. Наличие термостата является обязательным условием для проведения простого теста. Комплекты реагентов должны храниться в холодильнике при температуре 2 — 8 о С.
Рис. 3. В ряде городов РФ ежегодно в передвижных лабораториях проводится бесплатное и анонимное тестирование на ВИЧ.
Домашний тест на ВИЧ
Экспресс анализ на ВИЧ можно провести в домашних условиях самостоятельно, придерживаясь прилагаемой инструкции. Разработанные методики являются прекрасным изобретением современной медицины и позволяют каждому следить за состоянием своего здоровья. Простота, анонимность и быстрота получения результата — главные особенности домашнего теста. При применении данного исследования можно в качестве исследуемого образца использовать кровь, мочу или слюну.
Экспресс тест можно приобрести в аптеке или заказать через интернет.
Стоимость экспресс теста находится в пределах 200 — 300 рублей.
По отзывам многих пользователей экспресс анализы на ВИЧ являются недорогими и простыми в использовании. Они позволяют получить результат в течение нескольких минут. При возникших сомнениях результат всегда можно повторить.
Экспресс тесты по точности и чувствительности сопоставимы с классическими лабораторными методами диагностики ВИЧ-инфекции.
Рис. 4. При возникших сомнениях результат домашнего теста всегда можно повторить.
Главный недостаток домашних тестов
Раннее проведение экспресс анализа на ВИЧ приводит к получению отрицательных результатов при наличии вирусов в крови исследуемого.
Дотестовое консультирование специалиста поможет предотвратить рискованное поведение человека при получении положительного результата исследования на ВИЧ-инфекцию (попытка самоубийства) и получить необходимую поддержку.
Экспресс тест на ВИЧ необходимо повторить дважды и в случае получения сомнительного или положительного результата сдать анализ в специализированной лаборатории.
Рис. 5. Для срочного тестирования на ВИЧ в РФ закупается только качественная продукция.
Методика проведения экспресс теста на ВИЧ
- Вскройте пакет и выложите все содержимое на столе.
- Вымойте руки и хорошо осушите палец, который будет прокалываться.
- Тест полоска извлекается только перед тестированием и размещается на строго горизонтальной поверхности.
- Скарификатором прокалывается палец.
- Капля крови вносится в специальный приемник.
- В тестовую зону вносится буферный раствор.
- Результат регистрируется через 15 минут.
Основным условием проведения экспресс анализа на ВИЧ является соблюдение периода его применения — от момента предполагаемого риска должно пройти не менее 10 — 12 недель.
Рис. 6. Забор крови для проведения теста. Скарификатором сделайте прокол на безымянном пальце. Каплю крови внесите в отверстие картриджа.
Рис. 7. В положенную зону внести положенное количество буферного раствора (при этом емкость необходимо удерживать вертикально). Через 15 минут регистрируем результат.
После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.
Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.
Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.
Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.
Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.
Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.
Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.
Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.
Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.
В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.
Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.
Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.
Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.
Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.
Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.
Какие бывают тесты ИФА?
● Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.
Что важно знать об ИФА-тестах?
Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)
Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.
Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.
Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.
Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.
Что важно знать о вестерн-блоте?
В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.
1. Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.
2. Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.
В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?
В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.
Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.
Комбинированные тесты
Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.
● Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.
Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.
Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.
Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.
После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.
Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.
ПЦР: самый сложный анализ
Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.
Видео: как работает ПЦР-тест
Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.
Читайте также: