Антиген пуллорный на сальмонеллез
Соматический (О-антиген) (от нем. Ohne Hauch – не образующие налета на агаре), обозначается арабскими цифрами, он расположен на поверхности клетки и состоит из фосфолипидно-полисахаридных комплексов, включающих до 60 % полисахаридов, 20–30 % липидов и 3,5–4,5 % – гексозамина, термостабилен, выдерживает кипячение в течение 2,5 часов и незначительно разрушается автоклавированием при 120°С в течение 30 мин, не разрушается спиртом, денатурируется формалином. Липополисахарид сальмонелл изучен наиболее детально, и его обычно принимают за стандарт, с которым сравнивают ЛПС других бактерий. В липополисахаридном комплексе выделяют три компонента: полисахаридная часть (О-специфические цепи), ядро – образовано цепочками гексоз и липид А, при этом важнейшим антигенным компонентом является полисахаридная часть. Липополисахариды являются носителями О-эндотоксинных свойств, обнаруживая высокую токсичность [3, 14, 15]. Средняя летальная доза его при парентеральном введении мышам, крысам, морским свинкам составляет 0,5–10 мг/кг. Химический анализ показывает, что липополисахариды состоят из фосфорополисахаридного компонента, связанного с фосфоролипоидным компонентом. Полисахаридный компонент содержит определенные углеводы, среди которых превалируют гексозамины и гексозы, часто содержатся метилпентозы (рамноза), иногда дезоксиметилпентозы. Углеводный состав полисахаридов у различных видов сальмонелл различен, обусловливая высокую специфичность получаемых токсических фракций. Последние осаждаются специфической сывороткой в чрезвычайно высоких разведениях (1:1 000 000–1:10 000 000). При этом речь идет не о групповой специфичности, а о специфичности для каждого вида бактерий в соответствии со специфичностью полисахаридной части, так как полисахарид, освобожденный от других веществ, осаждается специфической сывороткой в высоких разведениях [8].
Состав основной полисахаридной последовательности (О-специфические цепи) у Salmonella весьма стабилен, но такие модификаторы, как ацетильные группы, остатки сахаров, образующие ветви, присутствуя не у всех молекул полисахарида, определяют микрогетерогенность ЛПС даже у одной бактериальной клетки. Число олигосахаридных последовательностей в разных молекулах ЛПС может значительно варьировать. Так, у S. typhimurium некоторые цепи состоят из 30–35 повторов, тогда как некоторые молекулы ЛПС совсем лишены О-цепей. О-антигенные цепи выступают над поверхностью внешней мембраны бактериальной клетки, образуя ворсинки до 150 нм длиной.
Основная специфичность О-антигена в серологических реакциях обусловлена присутствием на концах полисахаридных цепочек, формирующих отдельные антигенные факторы, определенных полиозидов (дидезоксигексоз).
Иммунный комплекс О12-антигена обусловлен присутствием двух латеральных цепей, на концах которых находится в одном случае рамноза, в другом – глюкоза.
Синтез ядра ЛПС происходит независимо от синтеза О-специфических цепей. При синтезе ядра мембранным носителем выступает липид А, который затем остается в составе ЛПС. Липид А, входящий в состав полноценных, не мутантных, молекул ЛПС, не обладает антигенностью. Однако, в реакциях с R-мутантами или при использовании очищенных препаратов липида А антитела к нему образуются.
Позднее описан еще один соматический антиген, названный Т-антигеном (от слова transient). Первый Т-антиген (T1) был обнаружен у S. paratyphi B и S. typhimutium, второй Т-антиген (Т2) – у S. bareilly [3].
Таким образом, антигенное разнообразие, обусловленное различиями структуры О-цепей, дает бактериям определенные селективные признаки.
Жгутиковый (Н-антиген) имеет две фазы, при этом первая фаза обозначается строчными буквами латинского алфавита, вторая фаза – арабскими цифрами или латинскими буквами. Например, II – O 1, 6, 14 H, e, n, x, z . Это значит, что штамм с такой антигенной характеристикой относится к виду enterica subsp. Salamae [1]. Н-антиген сальмонелл, белковый по химической структуре, термолабильный (75–100 °С), разрушается фенолом и спиртом, но устойчив по отношению к формалину. Н-антиген определяет, как известно, типовую специфичность многих энтеробактерий, и его используют для идентификации штаммов [3].
Помимо указанных антигенов у сальмонелл известны и другие антигены. К их числу относятся К-антигены (капсульные), объединяющие ряд различных антигенов:
2. Антигены 5 и 27 (у сальмонелл группы В) также отличают по физико-химическим свойствам от О- и Vi-антигеиов.
3. М-антиген (слизистый антиген), обнаруженный F. Kauffmann у слизистых штаммов S. paratyphi В, S. choleraesuis, S. anatum, S. dublin и др. [Цит. по Е.С. Станиславскому, 1971], по-видимому, идентичный для всех типов сальмонелл. М-антиген – кислый полисахарид, он не растворим в воде, разрушается под воздействием кислоты и этанола и обладает слабыми антигенными свойствами.
По химической природе К-антигены представляют собой фосфолирированные белково-липо-полисахаридные комплексы и отличаются от О-антигенов качественным составом сахаров и структурным построением полисахарида. К-антигены характеризуются анодной электрофоретической подвижностью, обладают выраженными антигенными свойствами [7]. Подобно жгутиковым антигенам, капсульные антигены сальмонелл не токсичны [2, 3, 5].
Из вышесказанного следует, что антигенная структура сальмонелл имеет мозаичное строение и определяется наличием вариаций антигенных детерминант, которые приводят к некоторым закономерным изменениям антигенного состава штаммов [3].
По Кауфману (1959) различаются следующие 4 вида антигенных вариаций:
1. Н–О-вариации, характеризующиеся переходом из жгутиковой НО-формы в безжгутиковую О-форму и сопровождающиеся потерей Н-антигена. Данный переход встречается редко, и он почти всегда необратим.
3. Вариации формы:
а) О-вариации, представляющие собой количественные изменения О-антигена;
б) V–W-вариации, касающиеся исключительно Vi-антигена;
в) М–N-вариации, представляющие собой превращение слизистой (М) формы в нормальную (N) форму.
4. Вариации фазы, являющиеся определенными качественными изменениями жгутиковых антигенов.
Рецензенты:
Прочитайте:
|
Лабораторно-практическое занятие
САЛЬМОНЕЛЛЕЗ
Цель занятия. Ознакомиться с видами сальмонелл, вызывающих заболевание у птиц, а у людей пищевые токсикоинфекции. Отработать технику постановки кровекапельной реакции.
Материалы и оборудование. Птица; эритроцитарный пуллорный антиген, грелка-качалка Артемичева, инъекционные иглы, йод, вата, ножницы, предметные стекла, пастеровские пипетки, эмалированные кюветки, карандаши по стеклу; биопрепараты по специфической профилактике сальмонеллеза.
Примерный план занятий. Контрольные вопросы.
Демонстрация: а) эритроцитарного пуллорного антигена; б) грелки-качалки Артемичева; в) приемов взятия крови из гребня, подкрыльцевой вены; г) техника постановки ККРНГА; д) учета реакции.
Самостоятельная работа студентов по постановки ККРНГА.
Подведение итогов занятия.
Задание к следующему занятию.
СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ
Сальмонеллез (Salmonellosis avium)- инфекционное заболевание многих сельскохозяйственных и диких птиц, протекающее в виде септицемии с поражением желудочно-кишечного тракта и органов дыхания у молодняка и хронически или латентно у взрослых птиц с поражением репродуктивной системы. Кроме того, сальмонеллы могут вызвать пищевые токсикоинфекции у людей.
Болезнь регистрируют во всех странах мира; в условия промышленного птицеводства она часто носит стационарный характер, причиняя большой экономический ущерб, который складывается из значительной летальности молодняка (до 80…90%), снижения яйценоскости несушек и процента вывода цыплят (от3…7 до 40 %), повышение выбраковки на 3…5%, а также больших затрат на лечебно профилактические мероприятия. Удельный вес сальмонеллеза среди инфекционных заболеваний составляет от 26,6 до 40%.
Этиология. Возбудитель принадлежит к семейству энтеробактерий (Enterobacteriaceae), роду сальмонелл (Salmonella). В зависимости от этиологии различают следующие виды сальмонелла птиц (табл. 1).
Виды сальмонеллеза птиц
| Виды сальмонеллеза | Возбудитель | Серологическая группа | Вид поражаемой птицы |
| Пуллороз-тиф | S. gallinarum-pullorum | Д | Куры, индейки, фазаны, цесарки, перепела |
| Сальмонелла энтеритидис-инфекция* | S. enteritidis | Д | Куры, реже индейки; Гуси (молодняк) |
| Сальмонеллез водоплавающих птиц | S. typhimurium | В | Гуси, утки, а также голуби |
| Сальмонеллез, вызывающий неадаптированными к птице серотипами | S. ifantis S. anatum S. londou S. haifa | С Е Е В и др. | Куры, индейки, цесарки |
*Болеет также человек
По морфологическим свойствам возбудитель представляет собой мелкие (0,5…2 мкм) палочки с закруглёнными концами, грамотрицательные, неподвижные или слабоподвижные, не образующие спор и капсул. Оптимальная температура культивирования 38 0 С, рН 7,4…7,5. Сальмонеллы хорошо растут на питательных средах: на МПА образуют мелкие росинчатые колонии, иногда – сплошной налет с голубоватым оттенком. В МПБ вызывают равномерное помутнение с образованием рыхлого осадка, легко разбивающегося при встряхивании.
Биохимические свойства варьируют в зависимости от вида и типа возбудителя, но все сальмонеллы не расщепляют лактозу, адонит, сахарозу, салицин, желатин, не свертывают молоко. На дифференциальных питательных средах Эндо, Дригальского, Плоскирева образуют мелкие прозрачные колонии, не изменяют цвет среды.
Возбудители сальмонеллеза способны продуцировать термостабильные экзо - и эндотоксины. Антигенная структура возбудителя у птиц включает в себя соматические антигены 01,09, 012, 078.
Возбудитель сальмонеллеза характеризуется высокой устойчивостью во внешней среде и к действию физических и химических факторов: в помете и кормах он сохраняет жизнеспособность до 100 дней, в почве – свыше 400 дней.
Диагностика.Диагноз на сальмонеллез устанавливают на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений, результатов серологического и бактериологического исследований.
Эпизоотологические данные. Наиболее восприимчивы к сальмонеллезу цыплята, индюшата, особенно мясных пород, в первые 15…20 дней жизни. Основным источником инфекции служит больная птица, выделяющая с пометом большое количество возбудителя, инфицирующего корм, воду и предметы ухода.
При сальмонеллезе большое значение может иметь вертикальный (трансвариальный) способ заражения. Возбудитель инфекции содержится в желтке, вызывая гибель зародышей на всех стадиях эмбрионального развития. Оставшиеся цыплята выводятся больными и служат основным источником распространения пуллороза-тифа. Отмечают также и горизонтальный путь передачи инфекционного начала, который включает в себя алиментарное и аэрогенное заражение.
Возбудитель инфекции может содержаться в рыбной и мясокостной муке: в среднем каждая пятая партия комбикорма заражена сальмонеллезом.
Все вышеуказанные факторы обуславливают постоянную циркуляцию и рециркуляцию возбудителя (рис 1).
загрязненные корма, вода
Резервуары
возбудителя: Сточные воды
дикие животные, птица
Продукты убоя
Мясокостная мука, Сельскохозяйственная Продукты
перьевая мука, кровь, птица питания
неликвиды
Человек
Инкубационное яйцо
Товарное яйцо
Цыплята и мясо птицы
Рис.1. Схема циркуляции и рециркуляции сальмонелл
S. gallinarum-pullorum вызывает у людей пищевые токсикоинфекции. S. Enteritidis адоптировалась к организму кур, реже выделяется от индеек, гусят и другой птицы. Она является также одним из основных возбудителей тяжело протекающих пищевых токсикоинфекций человека. Может вызывать в неблагополучных хозяйствах поголовное инфицирование и отход цыплят до 10…15% в первые дни их жизни. Взрослая птица переболевает бессимптомно и остается, также как и выжившие цыплята, носителем и выделителем сальмонелл с преимущественной локализацией возбудителя в яичниках, печени, селезенке и толстом кишечнике.
Для сальмонеллеза характерна стационарность проявления; к заболеванию предрасполагает неполноценное и несвоевременное кормление птицы, скученность, переохлаждение и перегрев.
Клинические признаки. Клиническое течение болезни у цыплят чаще острое и подострое, реже хроническое. При этом аппетит отсутствует, оперение взъерошено, дыхание учащенное; цыплята жалобно пищат. Главный признак – наличие массовых поносов; налет, засыхая, закупоривает клоаку, вызывая гибель цыплят.
Течение болезни у взрослой птицы хроническое, бессимптомное, с поражением органов репродуктивной системы.
Патологоанатомические изменения. У погибших эмбрионов наблюдают плотный неиспользованный желток зеленого цвета, увеличенный желчный пузырь, заполненный тягучей желчью, ампулообразное расширение прямого отдела толстой кишки, увеличенную печень с некротическими очажками.
У цыплят, погибших при остром и подостром течении , печень увеличена, неравномерно окрашена, содержит некротические узелки, желчный пузырь увеличен, селезенка и почки незначительно увеличены, в кишечники очаговые точечные кровоизлияния, гиперемия. При хроническом течении на слизистой оболочке кишечника обнаруживают отрубевидный налет, мелкие язвы, поражение печени и сердца некротическими очагами. При клеточном содержании молодняка, особенно бройлеров, нередко поражается суставы конечностей.
У взрослой птице наблюдается перерождение желточных фолликулов, содержимое которых плотной консистенции, зеленого цвет, неправильной форсы (в норме округлая). Отмечают воспаление яйцевода, клоаки, поражение печени, иногда овариосальпингит.
Бактериальное исследование. Используют не менее 5..10 свежих трупов цыплят. Делают посевы на простые и дифференцированные питательные среды из крови сердца, желчного пузыря, селезенки, костного мозга. Если материалом служат трупы кур – то из пораженных фолликулов.
Серологическое исследование. Антигенную структуру выделенной культуры определяют в реакции агглютинации на стекле с монорецепторными сыворотками.
S. gallinarum-pullorum и S. Enteritidis имеют одинаковые соматические антигены, поэтому птица, инфицированная той или другой бактерией, выявляется при исследовании в кровекапельной реакции непрямой гемагглютинации (ККРНГА) на стекле с пуллорным эритроцитарным антигеном или поливалентными антигенами.
Пуллорный эритроцитарный антиген для ККРНГА представляет собой жидкость коричневого цвета, состоящую из 10%-й взвеси формалинизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных полисахаридно-полипептидной фракцией возбудителя пуллороза-тифа, на фосфатно-буферном растворе. В процессе хранения эритроциты выпадают в осадок, легко разбивающийся при встряхивании в гомогенную взвесь.
Эритроцитарный антиген расфасован во флаконы. На каждом флаконе должна быть этикетка с указанием предприятия-изготовителя, наименования биопрепарата и его количества во флаконе, даты изготовления, контроля, срока годности и условий хранения.
Срок годности антигена 9 месяцев со дня изготовления при хранении в темном сухом помещении при температуре 4…8 0 С. Антиген, подвергшийся замораживанию или содержащий хлопья, комочки, а также при нарушении целостности флакона к применению непригоден.
Сроки исследования в благополучном хозяйстве: на пуллороз-тиф в ККРНГА птицу исследуют в возрасте 50…55 дней и повторно в возрасте 7 мес.
Постановка реакции: кровь для ККРНГА берут у птицы из гребня или подкрыльцевой вены. Каплю на сухое обезжиренное предметное стекло и добавляют антиген. Соотношение антигена и крови 1:1. Можно вначале на стекло нанести антиген и к нему добавить каплю крови. Последовательность нанесения компонентов реакции на предметное стекло не отражает на ее результат. Кровь смешивают с антигеном покачиванием предметного стекла на грелке-качалке Артемичева при температуре 37…40 0 С. На одном предметном стекле ставят одновременно не более трех реакций.
Учет реакции заключается в следующем. Реакцию на эритроцитарный антиген считают положительной, если в течении 2 мин в смечи крови с антигеном выпали хорошо заметные хлопья коричневого цвета, сомнительной – если за это же время появилось слабовыраженные мелкозернистые хлопья коричневого цвета. Отрицательная реакция характеризуется образованием в капле крови с антигеном равномерной стабилизированной гомогенной взвеси эритроцитов барана.
Птицу, кровь которой дала положительный результат или сомнительную реакцию с антигеном, изолируют и отправляют на убой.
Чтобы избежать неспецифических реакций, за 5 дней до исследования из рациона птицы исключают избыточного количество рыбьего жира, белка, антибиотики и другие лекарственные препараты.
При подтверждении диагноза на пуллороз-тиф и сальмонеллез энтеритидис хозяйство (отделение, ферму) объявляют в установленном порядке неблагополучным.
Сроки исследования в неблагополучном хозяйстве: ремонтный молодняк – цыплят исследуют в возрасте 50…55 дней, а индюшат – 45…50 и дополнительно 90…120 дней.
Ограничения по пуллорозу-тифу и сальмонеллезу энтеритидис снимают в хозяйстве в том случае, если при поголовном серологическом исследовании ремонтного молодняка и при двукратной проверке взрослой птицы родительского стада, не было выявлено положительно реагирующей в ККРНГА птицы, а также в течение последних 3 месяцев не были отмечены клинические, патологоанатомические признаки заболевания и при систематическом бактериологическом исследовании отходов инкубации, трупов цыплят или индюшат не выделены культуры возбудителя.
Меры борьбы. Борьба с сальмонеллезом кур заключается в организации санитарно-гигиенических мероприятий, серологическом выявлении подозреваемых в заражении или бактерионосительстве кур, обработке птиц антибиотиками и другими химиотерапевтическими препаратами. По рекомендации экспертов ВОЗ в промышленных птицеводческих хозяйствах применяют средства иммунопрофилактики: живые, инактивированные и химические вакцины, а также бивалентный сальмофаг против сальмонеллеза энтеритидис и пуллороза-тифа кур.
В утководческих и гусеводческих хозяйствах, неблагополучных по сальмонеллезу тифимуриум, для иммунизации используют сухую живую вакцину против сальмонеллёза водоплавающей птицы.
Дата добавления: 2015-08-26 | Просмотры: 983 | Нарушение авторских прав
Это исследование, позволяющее выявить в крови антитела к О-антигену абсолютного большинства видов сальмонелл.
Антитела класса IgG и IgM к Salmonella A, B, C1, C2, D, E, иммуноглобулины классов G и M к возбудителям сальмонеллеза вида A, B, C1, C2, D, E.
Salmonella A, B, C1, C2, D, E – antibodies, IgG, IgM, anti-Salmonella A, B, C1, C2, D, E – IgG, IgM.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Сальмонеллез – это острая кишечная инфекция, передающаяся фекально-оральным путем. Ее возбудителями являются различные бактерии рода Salmonella (Salmonella enterica). Чаще всего она развивается при употреблении воды, яиц или мяса, содержащих возбудителя инфекции. Инкубационный период длится от нескольких часов до 2-3 суток.
Сальмонеллез сопровождается поражением кишечника: диареей, спастическими болями в животе и лихорадкой. При распространении инфекции (в 5-10 % случаев) есть риск угрозы жизни: возможен сальмонеллезный сепсис, менингит, пневмония, эндартериит, эндокардит, пиелонефрит и тромбоэмболические осложнения.
Последствиями перенесенного сальмонеллеза могут быть синдром Рейтера и дисбактериоз. Возможно бактерионосительство – острое (выделение возбудителя в течение 3 месяцев после выздоровления), хроническое (выделение возбудителя более 3 месяцев после выздоровления) и транзиторное (однократный положительный результат бактериологического или серологического исследования при отсутствии симптомов заболевания). Специфические антитела при сальмонеллезе появляются в крови на 4-6-й день инфицирования, и их концентрация достигает максимума на 8-10-й день.
У сальмонелл есть следующие антигены: жгутиковый (Н-антиген) и соматический (O-антиген), который определяет степень болезнетворности бактерий. По типу О-антигена (соматического) сальмонеллы разделяются на группы (А, В, С, D, Е и т. д.), в пределах одной группы – на серовары по Н-антигену. Существует свыше 2000 серотипов сальмонелл, причем из тех, которые вызывают заболевания у человека и животных, около 95 % относятся к серогруппам А-E, поэтому для диагностики сальмонеллеза, как правило, используется определение антител к О-антигену сальмонелл именно этих групп.
Для чего используется исследование?
- Для выявления больных сальмонеллезом.
- Для выявления бактеpионосителей, в том числе сpеди pаботников пищевых пpедпpиятий.
Когда назначается исследование?
- При обследовании лиц с симптомами пищевого отравления, – на 4-5-й и на 10-14-й день с начала заболевания.
- При обследовании pаботников пищевых пpедпpиятий в целях выявления бактеpионосителей – пpи поступлении на pаботу новых сотрудников.
- При дифференциальной диагностике заболеваний, протекающих со сходными симптомами: холеры, шигеллеза, эшерихиоза, кампилобактериоза, тифо-паратифозных заболеваний, гастроэнтеритов, вызванных ротавирусами, аденовирусами и др.
Что означают результаты?
Референсные значения: "отрицательно" или " Причины повышения/высокого титра антител
- Острый или перенесенный сальмонеллез.
- Хроническое бактерионосительство.
Причины понижения/низкого титра антител
- Отсутствие иммунного ответа к возбудителям сальмонеллеза в связи с тем, что инфицирования нет.
- Отсутствие иммунного ответа или слабый иммунный ответ к возбудителям сальмонеллеза из-за нарушений в иммунной системе или тяжелого течения заболевания.
Что может влиять на результат?
- У детей до 1 года исследование неинформативно, потому что антитела к возбудителю сальмонеллеза у них не вырабатываются.
- При тяжелом течении заболевания или микст-инфекции возможен ложноотрицательный результат.
- Дети, пожилые люди, а также лица с сопутствующими болезнями желудочно-кишечного тракта и нарушениями в иммунной системе входят в группу риска по развитию сальмонеллеза, особенно генерализованных его форм.
- Для постановки диагноза "сальмонеллез" обязателен положительный результат бактериологического или серологического исследования. При вспышке заболевания диагноз может быть поставлен при положительном результате серологического или бактериологического исследования хотя бы у одного человека.
Кто назначает исследование?
Инфекционист, терапевт, врач общей практики, гастроэнтеролог.
Лабораторная диагностика брюшного тифа и паратифов. проводится с учетом патогенеза заболевания. Основными методами лабораторной диагностики являютсябактериологический и серологический.
При сальмонеллезах иммунитет нестойкий непродолжительный.
С первого для заболевания исследуют кровь на гемокультуру (бактериологический метод). Для этого 5-10 мл крови больного засевают в колбы с 50-100 мл питательной элективной среды с желчью – среды Раппопорта. Желчь нейтрализует бактерицидные свойства сыворотки крови. После инкубирования в термостате производят пересев на среды Эндо, Левина, Плоскирева (для получения изолированных колоний и чистых культур из них). Прозрачные бесцветные колонии отсевают на среду Ресселя (Олькеницкого), на которой учитывают ферментацию сальмонеллами глюкозы и отсутствие ферментации лактозы.
Чистую культуру идентифицируют по биохимическим свойствам(сахаролитическим - по результатам посева на среды Гисса и протеолитическим - тестами на индол, Н2S, NH3 в посевах на МПБ) и антигенной структуре. Для сероидентификации ставят реакцию агглютинации на стекле с поливалентной О-сывороткой к сальмонеллам групп А, В, С, Д, Е. Положительный результат свидетельствует о принадлежности выделенной культуры к роду Salmonella. Затем определяется О-серогруппа в реакциях агглютинации с отдельными О-сыворотками (входящими в поливалентную сыворотку). Для определения серовара (вида возбудителя) устанавливают Н-антигены с монорецепторными Н-сыворотками первой, а затем второй фазы. Для полноты идентификации выделенную культуру проверяют на лизабельность поливалентным брюшнотифозным фагом.
S. typhi, кроме того, фаготипируют (определяют фаговар) Vi-фагами для установления эпидемиологической цепочки.
Для ранней ускоренной диагностики перспективным является иммунофлюоресцентный метод, позволяющий выявить специфический антиген в исследуемом материале ( крови, костном мозге).
Со второй недели заболевания проводятбактериологические исследования с испражнениями(получение копрокультуры), мочой(получение уринокультуры), желчью.
Испражнения (мочу, желчь) непосредственно, а также после проведения их через среды обогащения засевают на одну из дифференциально-диагностических сред (Эндо, Левина, Плоскирева) так, чтобы выросли изолированные колонии. Из бесцветных колоний получают чистые культуры, которые идентифицируют так же, как и гемокультуру.
Серодиагностика(выявление антител в сыворотке больного) осуществляется с конца первой - начала второй недели заболевания путем постановки реакции агглютинации Видаля с О-, Н-брюшнотифозными и А- и В-паратифозными диагностикумами.
Более чувствительной является РНГА (реакция непрямой гемагглютинации) с О-, Н-, Vi-эритроцитарными диагностикумами.
Положительная реакция агглютинации с О- и Н-антигенами свидетельствует о наличии заболевания, а положительная реакция только с Н-антигенами может быть и у переболевших, и у привитых, так как О-антитела накапливаются в разгар заболевания и исчезают к моменту выздоровления, а Н-антитела появляются к концу заболевания и сохраняются у переболевших длительное время. Диагностический титр реакции Видаля 1:200. По нарастанию титра агглютининов в динамике можно отличить имеющуюся инфекцию от реакции на прививку. В последнем случае нарастания титра антител не будет.
Для серологического исследования реконвалесцентов и выявления бактерионосителей широко используют реакцию пассивной Vi-гемагглютинации. Vi-антитела после полного выздоровления исчезают, но при наличии брюшнотифозного носительства они присутствуют постоянно. Выявление Vi-антител в титре 1:40 и выше имеет диагностическое значение: такие лица подлежат многократному бактериологическому обследованию.
Основным методомлабораторной диагностики является бактериологический. Исследуют рвотные массы, промывные воды желудка, дуоденальное содержимое, (желчь) кровь, мочу, фекалии, гной или экссудат из воспалительных очагов, пищевые продукты. Засевают на среды обогащения (селенитовый или 20% желчный бульон), а затем на висмут-сульфит агар (высокоселективная среда), Плоскирева (среднеселективная) Эндо, Левина.
Схема микробиологических исследований аналогична таковым при выделении и идентификации гемо-и копрокультуры при брюшном тифе.
Из серологических методов применяют реакцию агглютинации с О- и Н-диагностикумами, иногда с аутоштаммами бактерий, выделенными от больных; более чувствительна РНГА с эритроцитарными диагностикумами.
Возможно использование биологического метода путем вскармливания белых мышей зараженными пищевыми продуктами. S. enteritidis и S. typhimurium вызывают гибель мышей через 1-2 суток. Посевы крови из сердца и материала из внутренних органов дает рост сальмонелл.
Для экспресс-диагностики применяют иммунофлюоресцентный метод исследования (обнаружение антигенов возбудителя с помощью иммунных сывороток, обработанных флюорохромами).
| | | следующая лекция ==> | |
| Патогенез, клиника сальмонеллезов | | | Лечение сальмонеллезов |
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
Читайте также: