Бактериологический метод диагностики холеры его особенности

Во время вспышки холеры проводят массовое обследование на носительство V.cholerae.

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: ректальные мазки (фекалии, взятые тампоном из прямой кишки).

Бактериологическое исследование.Посев материала от 10 обследуемых на обогатительную среду с 01-агглютинирующей диагностической сывороткой. В положительных случаях через 3—4 ч начинается выпадение хлопьев в результате агглютина­ции размножившихся вибрионов. При обнаружении в осадке грамотрицательных подвижных вибрионов каждый из 10 паци­ентов обследуется индивидуально.

Рефераты и конспекты лекций по географии, физике, химии, истории, биологии. Универсальная подготовка к ЕГЭ, ГИА, ЗНО и ДПА!

Микробиологическая диагностика холеры

Возбудитель Vibrio cholerae входит в семью Vibrionaceae, рода Vibrio. Наибольшее значение в патологии человека имеют 2 биоварами: V. cholerae и V. Eltor.

Материалом для исследования от больных является стул и рвотные массы, а от вибрионосителей - стул В ру, погибших от холеры исследуют тонкий кшечник и желчный пузырь (секционный материал). С Объекта окружающей среды изучается вода открытых водоемов и воды стоков.

В микробиологической диагностике холеры используют экспресс-метод, бактериологический и серологический методы.

Экспресс-метод диагностики. Позволяет выявить холерный вибрион непосредственно в материале, который исследуется. Для этого используют РИФ (см. Приложение).

Для быстрого обнаружения холерного вибриона используют также РОПГА с антительным эритроцитарных диагностикумом и цепную полимеразной реакции (ПЦР). (См. Приложение). Бактериологический метод. Является основным методом диагностики холеры. Выделение чистой культуры вибриона и его идентификацию проводят круглосуточно в специализированной лаборатории. Окончательный ответ должен быть предоставлен через 36 часов от начала исследования.

При проведении бактериологического метода диагностики необходимо соблюдать следующие требования.

1. Посев материала лучше выполнять у постели больного, поскольку холерный вибрион плохо сохраняется в испражнениях больных и носителей.

2. Посуда, в который собирают исследовательский материал, не должен обеззараживанию химическими веществами, поскольку вибрион к ним очень чувствителен.

3. Необходимо исключить возможность заражения окружающих и загрязнения объектов окружающей среды.

Висел стула или иного материала, который исследуется выполняют у постели больного или непосредственно на месте отбора материала на 1% щелочную пептонную воду (ПВ) и доставляют в специализированную лабораторию с соблюдением всех правил безопасности в сопровождении медицинского персонала. После 6 часовой инкубации высева на 1% пептонной воде образуется хрупкая пленка с немного голубым оттенком, которая во время встряхивания пробирки легко разрушается и оседает на дно.

Независимо от полученного результата, исследования продолжают по следующей схеме: содержание пленки пересевают второго 1% щелочную ПВ и щелочной МПА или среду TCBS, которое является лучшим селективным средой для холерных вибрионов, поскольку сопутствующая флора на нем не растет. На фоне голубовато-серого цвета этой среды образуются колонии холерных вибрионов с желтым оттенком. Вторую ПВ инкубируют 6:00 при t 37 ° С и проводят исследования по той же схеме.

В случае выявления в пленке грамотрицательных подвижных палочек, которые аглютинуються О-холерной сывороткой, делают предварительный вывод, что обнаружен холерный вибрион, и продолжают исследования дальше. Со второй ПВ делают еще раз пересел на щелочной МПА.

Подозрительными считают мелкие, гладкие, стекловидное-прозрачные колонии с едва заметным голубоватым оттенком, которые выросли за 12:00 на щелочной МПА.

Чистую культуру выделяют на лактозо-цукрозному среде и культивируют 12:00 при t 37 ° С. Отбирают колонии и ставят пробу на оксидазу. При культивировании на элективных средах проба на оксидазу не делается.

Идентификация чистой культуры проводится по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам, подвижностью и окончательным типированием с помощью диагностических агглютинирующих сывороток О, OR, Инаба, Огава и бактериофагов.

Окончательный ответ об обнаружении того или иного биовара холерного вибриона возможна при:

1. Выявленные подвижных грамотрицательных немного изогнутых палочек, которые выросли в пленке через 6:00 инкубации на второй ПВ;

2. Выявленные мелких, стекловидное прозрачных колоний, выросших из 12:00 на щелочной МПА и дают положительную реакцию на оксидазу;

4. Ферментации углеводов: сахарозы (+), арабинозы (-), маннозы (+).

5. Положительному феномене агглютинации с О-и OR- холерными сыворотками Инаба и Огава.

Серологический метод. Носит вспомогательный характер. Обнаруживают специфические антитела в сыворотке крови больного в РА, РПГА, ИФА, РИФ (косвенная). Токсиннейтрализуючи антитела появляются на 5-6 день болезни и достигают максимума на 14-21 сутки. Диагностическим титром в РПГА считается разведение 1: 160.

Стоматология

ЗАНЯТИЕ 18

Тема: Микробиологическая диагностика холеры.

Цель: На основе знаний биологии холерных вибрионов - возбудителей особо опасной инфекции, особенностей их взаимодействия с макроорганизмом уметь обосновать тактику микробиологической диагностики, профилактику и терапию.

1. Правила работы с возбудителями особо опасных инфекций.

2. Классификацию, морфо-биологические особенности возбудителя холеры.

3. Особенности экологии, эпидемиологии, патогенеза и иммунитета при холере.

4. Правила забора и транспортировки материала при диагностике холеры.

5. Методы микробиологической диагностики холеры.

6. Специфическую профилактику холеры.

7. Этиотропную терапию холеры.

1. Провести экспресс-диагностику холеры (РИФ).

3. Микроскопировать нативный препарат методом фазового контраста.

4. Идентифицировать и дифференцировать холерные вибрионы.

1. Критерии принадлежности холеры к группе особо опасных инфекций. Правила ТБ при работе с возбудителями особо опасных инфекций.

2. Классификация и морфо-биологические особенности возбудителя холеры.

3. Экология, источники, пути распространения, особенности патогенеза и иммунитета при холере.

4. Правила забора и доставки материала при диагностике холеры, как особо опасной инфекции.

5. Методы микробиологической диагностики холеры.

6. Методы экспресс-диагностики холеры.

7. Специфическая профилактика, основы патогенетической терапии холеры.

Задания, выполняемые в ходе занятия (УИРС):

1. Провести бактериологическое исследование испражнений обследуемого с подозрением на холеру с целью выделения предполагаемого возбудителя:

1.1.Учесть и оценить результаты РИФ с материалом отобследуемого и холерной люминесцирующей сывороткой. Сделать вывод.

1.2.Изучить посев исследуемого материала на щелочной агар:

- отобрать характерные изолированные колонии, дать их описание;

- приготовить фиксированный препарат из характерной изолированной колонии, окрасить его по Граму, промикроскопировать;

- поставить и учесть РА на стекле с О-холерной сывороткой(1:50);

1.3.Описать характер роста выделенной культуры на среде Клиглера; учесть и оценить результаты теста на оксидазу.

1.4.Учесть и оценить результаты:

- реакции гемолиза с эритроцитами барана;

- реакции фаголизиса с классическим бактериофагом и фагом эльтор;

- развернутых РА с холерной О-сывороткой и сыворотками Огава и Инаба;

Методические указания к выполнению исследовательского задания:

1. Проведите поэтапное бактериологическое исследование по обнаружению и выделению предполагаемого возбудителя из испражнений, взятых у больных с подозрением на холеру.

На 1 этапе. Учтите и оцените результаты РИФ с материалом отобследуемого и холерной люминесцирующей сывороткой. Сделайте вывод.

Холера относится к особо опасным инфекциям, поэтому работа должна выполняться только специально подготовленным персоналом при тщательном соблюдении всех правил работы с возбудителями ООИ.

Испражнения забирают из предварительно тщательно отмытого от дезраствора судна или с помощью ректальной петли. Наилучшей транспортной средой является 1% пептонная вода с рН 8,2-8,6. Материал необходимо доставить в лабораторию не позднее 2-х часов.

Экспресс-методом является РИФ с люминесцирующей холерной сывороткой и исследуемым материалом (демонстрация). Техника выполнения: приготовленный препарат на стекле помещают в чашку Петри, заливают люминесцирующей сывороткой, кладут комочек мокрой ваты, закрывают крышкой и инкубируют в термостате при 37 о С 30 мин. После инкубирования препарат отмывают, высушивают и микроскопируют в люминесцентном микроскопе. При положительной реакции на темном фоне видны светящиеся изогнутые палочки – ориентировочно холерные вибрионы.

Исследуемый материал засевают в 1% пептонную воду (так называемая 1-ая пептонная вода) и на чашки со щелочным агаром; инкубируют в термостате при 37 о С - чашки в течение 10-12 часов, пробирки с пептонной водой - 4-6 часов.

Через указанное время пептонная вода мутнеет, на поверхности её образуется нежная серовато-голубоватая плёнка, состоящая из бактерий, легко разрушающаяся при встряхивании. Плёнку специальной изогнутой петлёй диаметром 7-10 мм пересевают на вторую пептонную воду; одновременно проводят высев на чашки со щелочным агаром.

На 2 этапе.Изучите и оцените результаты посева испражнений на щелочной агар. Дайте характеристику выросшим колониям.

Приготовьте фиксированный препарат из характерной изолированной колонии, окрасьте по Граму и промикроскопируйте.

Поставьте и учтите реакцию иммобилизации с частью отобранной колонии и О-холерной сывороткой.

Поставьте и учтите РА на стекле с О-холерной сывороткой (1:50) и частью характерной колонии.

Полученные результаты занесите в протокол и сделайте вывод.

Холерные вибрионы образуют на плотной питательной среде нежные, прозрачные, округлые, выпуклые колонии (S-форма) диаметром 2-3 мм, серовато-голубоватые в проходящем свете. В мазках, окрашенных по Граму, холерные вибрионы имеют вид изогнутых грамотрицательных палочек. Они активно подвижны в нативном препарате и агглютинируются О-холерной сывороткой (1:50).

Типичные колонии пересевают на косяк со щелочным агаром и на комбинированную среду с лактозой и сахарозой, инкубируют в термостате при 37 о С 10-12 часов.

На 4 этапе учитывают результаты исследований, начатых на 3 этапе идентификации выделенной культуры.

Учтите и оцените результаты:

- реакции гемолиза эритроцитов;

- развёрнутых РА с О-холерной сывороткой и типовыми сыворотками Огава, Инаба.

На основании полученных результатов идентифицируйте культуру, укажите вид, биовар и серовар. Заполните бланк-направление и бланк-ответ из бак.лаборатории.

Вопросы для самоконтроля:

1. Назовите правила забора и доставки исследуемого материала при диагностике холеры как особо опасной инфекции.

2. Назовите особенности бактериологической диагностики холеры и с какими свойствами возбудителя это связано.

3. Назовите свойства холерных вибрионов, лежащих в основе экспресс-диагностика холеры.

4. Обоснуйте выбор питательных сред, используемых при исследовании на холеру.

5. Назовите тесты дифференциации биологических вариантов возбудителей холеры.

6. Назовите серологические варианты возбудителей холеры и метод их определения.

7. Назовите сроки выдачи окончательного ответа при исследовании на холеру при проведении бактериологического метода.

8. Обоснуйте тактику специфической и неспецифической профилактики холеры.

9. Обоснуйте тактику терапии холеры.

10. Назовите особенность 7-ой пандемии холеры.

11. Дайте характеристику современной эпидемиологической ситуации по холере в России, в Красноярском крае.

2. Медицинская микробиология /Гл. ред. В.И. Покровский, О.К. Поздеев. - М.: ГЭОТАР Медицина, 1998. – С 417-429.

3. Поздеев О.К Медицинская микробиология /Под. ред. акад. РАМН В.И. Покровского. –М.: ГЭОТАР Медицина, 2001. – С. 375-381.

Холера — особо опасное, карантинное инфекционное заболевание, вызываемое Vibrio cholerae биоваров cholerae и eltor, проявляющееся в виде острого гастроэнтерита с выраженной интоксикацией и обезвоживанием (эксикозом) в результате нарушения водно-электро­литного обмена, cвязанного с выработкой вибрионами холерного энтеротоксина (холерогена).

Основной метод лабораторной диагностики холеры – бактериологический.

Исследования на холеру проводятся круглосуточно в специальной лаборатории медицинскими работниками, прошедшими подготовку по особо-опасным инфекциям. Методы, применяемые для микробиологической диагностики холеры, представлены в схеме 13.

Бактериологический метод состоит из нескольких этапов.

Первый этап. Исследуемый материал засевают на щелочные (элективные) плотные питательные среды (щелочной агар Монсура – МПА с триптиказой, хлоридом на­трия, таурохолатом натрия, карбонатом натрия; TCBS - тиосульфат-цитрат-бромтимол-сахарозный агар;ще­лочной МПА) и жидкие среды обогащения (1% щелочная пептонная вода).

Третий этап выполняется через 12— 14 ч от начала анализа. Производится пересев из верхней части 2-й среды накопления на плотные элективные питательные среды. Изучают и отбирают для исследования типичные для холерного вибриона колонии на плотных средах, засеянных нативным материалом.

Четвертый этап. (через 18-24 ч от начала анализа). Изучают и отбирают с помощью стереомикроскопа типичные для холерного вибриона колонии на всех плотных средах. Хо­лерный вибрион образует прозрачные, круглые, диаметром 1-2 мм, гладкие, пло­ские, го­могенные, с ровными краями колонии, имеющие голубоватый оттенок и маслянистую кон­систенцию. На агаре TCBSколонии холерного вибриона ярко-желтые на зеленом фоне среды, на сре­де Монсура — полупрозрачные бесцветные с темным центром. Колонии проверяют на наличие оксидазы (холерные вибрионы оксидазоположительны), ставят РА на стекле с холерны­ми сыворотками О-1, О-139 и RO, а также специфическую иммунофлюоресценцию.

Положительная РА или ИФМ в сочета­нии с типичными морфологическими, тинкториальными и культуральными свойствами выделенной культуры позволяет вы­дать предварительный положительный ответ.

Пятый этап проводится через 24 —36 ч от начала исследования. На этом этапе изучают и отбирают характерные для холерного вибриона культуры на среде Ресселя, на которой холерный вибрион расщепляет сахарозу, что сопровождается покраснением среды в столбике без образования газа, но не ферментирует лактозу (отсутствие изменений скошенной части среды). Со среды Ресселя готовят мазки в окраске по Граму с целью обнаружения характерных по морфологическим свойствам вибрионов, проверяют наличие подвижности и оксидазы, ставят РА с холерными сыворотками (О-1, RO,Огава, Инаба, при отрицательном результате - с сывороткой О-139) и при наличии положительных результатов выдают ответ о выделении соответствующего холерного вибриона.

Окончательную идентификацию оксидазопопожительных культур проводят, используя сокращенную или полную схемы (табл. 15).

Таблица 15.Дифференциация холерных вибрионов

Сокращенная схема предполагает постановку развернутой РА с сыворотками Инаба и Огава, пробы с диагностическими холерными фагами, определение ферментативной группы по Хейбергу. Полная схема дополнительно включает тесты для дифференциации биоваров холерного вибриона (классического и Эль-Тор), в частности, определение гемагглютинирующих и гемолитических свойств, чувствительности к полимиксину, способности давать положительную реакцию Фогес-Проскауэра (образование ацетилметилкарбинола - ацетоина из глюкозы). Ацетоин определяют добавлением в культуру, выращенную на глюкозо-фосфатном бульоне Кларка, 5% α-нафтола и 40%-го гидроксида калия; при встряхивании пробирок среда окрашивается в розовый или рубиново-красный цвет.

Для ускоренной биохимической идентификации холерных вибрионов и их дифференциации от холероподобных и нехолероподобных вибрионов используют систему индикаторных бумажных дисков (СИБ), в состав которой входят тесты на оксидазу, индол, ферментацию лактозы, глюкозы, саха­розы, маннозы, арабинозы, маннита, инозита, аргинина, лизи­на и орнитина.

Шестой этап (выполняется через 36-48 ч от начала анализа) - окончательная идентификация выделенных куль­тур, определение их чувствительности к антибиотикам, формулировка окончательного ответа о выделении холерного вибриона с указанием биовара, серогруппы (серовара) и эпидемической значимости по косвенным биологическим признакам (гемолитической активности, группе Хейберга и др.). Типичные куль­туры Vibrio cholerae представляют собой грамотрицательные изо­гнутые в виде запятой или прямые полиморфные активно подвижные палочки, обладающие оксидазой, разлагающие глюкозу с образованием кислоты без газа, декарбоксилирующие лизин и орнитин, но не ферментирующие аргинин, принадлежа­щие к 1-й (реже 2-й) группе Хейберга, агглютинирующиеся хо­лерными сыворотками и лизирующиеся диагностическими фагами. Если выделенная культура не агглютинируется сыворотками к О1 и О139, ее относят к группе НАГ-вибрионов, а при наличии соответствующих сывороток определяют ее принадлежность к другой серогруппе. Токсигенные штаммы холерных вибрионов серогрупп Ои О139 обычно не лизируют бараньи эритроциты, относятся к 1-й группе Хейберга (ферментируют маннозу и сахарозу, но не арабинозу), лизируются определенными фагами в комплексном методе с применением ХДФ.

Вирулентность холерных вибрионов определяют в специализированных лабораториях путем внутрикишечного заражения кроликов-сосунков, а также методами генодиагностики (ПЦР или ДНК-ДНК-гибридизация с целью определения гена, ответственного за выработку токсина).

Серодиагностикаявляет­ся дополнительным методом лабораторной диагностики холеры. Исследуют пар­ные сыворотки крови больных, взятые с интервалом в 6-8 дней, с целью выявления агг­лютининов с помощью РА (диагностический титр 1:40 и выше), антитоксинов с помощью РНГА с эритроцитарным холерным энтеротоксическим диагностикумом (диагностический титр - 1: 160) и вибриоцидных антител с помощью реакции иммобилизации вибрионов (диагностический титр1:1000). Учитывается также нарастание титра антител (не менее чем в 4 раза) в процессе инфекции.

Самостоятельная работа студентов

1. Микроскопический метод. Промикроскопировать и зарисовать демонстрационный микропрепарат холерного вибриона V.cholerae, окрашенный по Граму. Холерный вибрион - грамотрицательная изогнутая палочка.

2. Бактериологический метод. Ознакомиться с ос­новными биологическими свойствами классического биовара холерного вибриона и биовара Эль-Тор:

· фаголизабельность. Классический холерный вибрион лизируется фагом С и нечувствителен к действию фага Эль-Тор II. Вибрион Эль-Тор лизируется фагом Эль-Тop и нечувствителен к фагу С (демонстрация);

· чувствительность к полимиксину. Учесть рост классического холерного вибриона и вибриона Зль-Тор на среде с добавле­нием полимиксина. Вибрион Эль-Тор к полимиксину не чувствителен, классический холерный вибрион – чувствителен;

· гемолитические свойства. Вибрион Эль-Тор лизирует эритроциты; классический холерный вибрион, как правило, нет (демонстрация);

· определение серовара холерного вибриона. Учесть разверну­тую реакцию агглютинации c сыворотками Инаба и Огава (демонстрация).

3. Изучить биопрепараты, используемые для диагностики, лечения и профилактики бактериальной дизентерии и холеры:

· люминесцирующая хо­лерная сыворотка для постановки реакции иммунофлюоресценции с целью выявления вибрионов;

· агглютинирующие холерные сыворотки Инаба и Огава (для постановки реакции агглютинации при идентифика­ции холерного вибриона);

· холерные фаги: классический (фаг С) и Эль-Тор. Использу­ются для фагодиагностики;

· поливалентный холерный бактериофагдля лечения и профилактики;

· холерная вакцина.Создано 3 вакцины против холеры (убитая Эль-Тор; холероген- анатоксин, обогащенный О-антигеном холерного вибриона для подкожных инъекций; холероген-анатоксин, обогащенный О-антигеном холерного вибриона таблетированный). Используются для специфи­ческой профилактики холеры.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

По тяжести клинического течения, по летальности, по способности одновременно охватывать большие территории холера относится к группе ООИ. Диагностические исследования на холеру регламентируются и осуществляются специально подготовленными специалистами лабораторий ООИ центров госсанэпиднадзора ведомственных и противочумных учреждений.

Классификация возбудителя холеры.Сем. Vibrionaceae, род Vibrio, вид V. cholerae О1 (биовары сholerae, eltor; серовары Инаба, Огава и Гикошима) и О139 серогрупп.

Холерные вибрионы – слегка изогнутые палочки (1,5-3,0 х 0,2-0,6 мкм), имеющие полярно расположенный жгутик; характеризуются значительным полиморфизмом; грамотрицательные; спор и капсул не образуют.

Холерные вибрионы – факультативные анаэробы, к питательным средам не требовательны. Щелочелюбивы. Размножаются при температуре 35-37°С и pH равном 8,6-9,0. Элективной средой является 1% пептонная вода с pH 8-9. На поверхности этой среды через 6-8 часов они образуют тонкую нежную, голубоватую “пленку”. На щелочном агаре через 12-14 часов колонии круглые, диаметром 1-2 мм, гладкие, плоские, прозрачные, голубоватые в проходящем свете, гомогенные, с ровным краем.

Вибрионы – хемоорганотрофы. Биохимически активны. Сахаролитические свойства выражаются в расщеплении сахаров с образованием кислоты без газа. Ферментация сахарозы, маннозы и отсутствие ферментации арабинозы является важным диагностическим признаком (1 ряд Хейберга).

Протеолитические свойства: разжижают желатину, образуют индол, не образуют сероводород, восстанавливают нитраты в нитриты, расщепляют крахмал и т.д.

Вибрионы содержат термостабильные О-антигены (соматические) и термолабильные Н-антигены (жгутиковые). По О-антигену они разделяются на серогруппы. V. cholerae, V. eltor принадлежат к О1 серогруппе. О1-антиген состоит из трех компонентов – А, В, С, сочетание которых определяет серовары: Огава (АВ), Инаба (АС), Гикошима (АВС).

Встречаются вибрионы, которые не агглютинируются холерной О1-сывороткой. Это так называемые НАГ-вибрионы. В настоящее время установлено около 200 серологических О-групп НАГ-вибрионов.

Факторы вирулентности и патогенности. У холерных вибрионов 2 типа токсинов – эндотоксин и экзотоксин или энтеротоксин. Эндотоксин – ЛПС клеточной стенки, термостабилен, стимулирует выработку вибриоцидных антител и агглютининов. Основная роль в развитии симптома холеры принадлежит холерогену, который вызывает расстройство функциональных систем, ответственных за транспортировку жидкости и электролитов из внутренней среды в просвет кишечника.

Токсигенные, эпидемически значимые варианты холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп, содержащие гены холерного токсина (ctx AB) и токсин-корегулируемых пилей (tcp A), вызывают заболевания холерой, склонные к широкому эпидемическому распространению. Нетоксигенные (не содержащие гена холерного токсина), эпидемически не опасные варианты холерных вибрионов О1 и других серогрупп могут вызывать спорадические или групповые заболевания, не склонные к широкому эпидемическому распространию.

Экология, источники, пути распространения, особенности патогенеза и иммунитета при холере.Холера – антропонозное заболевание. Источником инфекции является больной человек и бактерионоситель. При холере, вызванной V. eltor, отмечается более длительное бактерионосительство и наличие значительного количества атипичных форм болезни.

Заражение происходит алиментарным (через инфицированные воду или продукты) или контактно-бытовым путем.

Вибрионы преодолеют желудочный барьер, достигают тонкой кошки, начинают интенсивно размножаться и выделять экзотоксин. Без предварительной нейтрализации соляной кислоты желудочного содержимого лишь очень большие дозы холерного вибриона (10 11 ) вызывают у отдельных лиц заболевание, а после предварительной нейтрализации соляной кислоты желудка заболевание возникает уже при введении 10 6 вибрионов (т.е. в 100 000 раз меньшей дозой).

Энтеротоксин активирует аденилатциклазу слизистой оболочки кишечника, что способствует увеличению количества цАМФ и выходу солей и воды в просвет кишечника. Начинается профузный понос. Потеря жидкости достигает одного литра в течение часа. Больные погибают в результате тяжелого обезвоживания, ацидоза, уремии. Заражение холерными вибрионами может вызывать различную клиническую картину – от бессимптомного носительства до состояния алгида.

При холере иммунитет носит антимикробный и антитоксический характер и связан с выработкой специфических антител, усилением фагоцитоза. Большую роль придают факторам местной защиты – секреторным иммуноглобулинам.

Правила забора и доставки материала при диагностике холеры, как особо опасной инфекции.Материал для исследования – испражнения и рвотные массы больных. Для установления факторов передачи и путей распространения инфекции – трупный материал, вода и пищевые продукты. Для выявления носителей – фекалии, желчь.

Учитывая слабую устойчивость холерных вибрионов к кислотам, дезинфицирующим веществам, сбор проб необходимо осуществлять в чистую стерильную стеклянную посуду, которая не должна содержать следов дезинфицирующих веществ. Материал необходимо забирать до приема антибиотиков.

Доставка материала в лабораторию должна быть осуществлена не позднее 2-х часов от момента его сбора или следует помещать пробы в консервант: 1% пептонную воду, щелочную пептонную воду с теллуритом калия.

Важно обеспечить безопасность при транспортировке материала, так как холера относится к числу особо опасных инфекций.