Бактериологическое исследование клинического материала на стафилококк

Посев на элективные среды (желточно-солевой, молочно-солевой или молочно-желточно-солевой агар). Засеянные среды выдерживают в термостате при 37°С в течение 2 суток, либо одни сутки в термостате и дополнительно 24 часа на свету при комнатной температуре.

Просмотр чашек, фиксация в журнале характера и массивности роста. На вышеуказанных средах стафилококк растет в виде руглых, блестящих, маслянистых, выпуклых пигментированных колоний. На средах, содержащих желток, золотистый стафилококк, деленный от человека, в 60-70% случаев образует радужный венчик вокруг колонии (положительная лецитовителлазная реакция). Стафилококки животного происхождения дают положительную лецитовителлазную реакцию в 5-10% случаев. Отвивка на скошенный агар для дальнейшего исследования не менее 2-х колоний, подозрительных на стафилококк. Для исследования отвивают прежде всего колонии, дающие положительную лецитовителлазную реакцию. При тсутствии на чашках таких колоний дальнейшему исследованию подвергаются пигментированные колонии, схожие по морфологии со стафилококком. При одновременном наличии на чашках колоний стафилококка, отличающихся по пигменту, следует отвивать не менее двух колоний различного вида. Пробирки с посевом помещают в термостат при 37°С на 18-20 часов.

После суточной инкубации у выделенных штаммов проверяют морфологию, тинкториальные свойства (окраска по Граму) и наличие плазмокоагулирующей активности. Следует отметить, что характер роста культуры на скошенном агаре в ряде случаев дает возможность "предвидеть" принадлежность ее к виду золотистого стафилококка или эпидермального стафилококка. Первые, как правило, дают обильный равномерный, сочный рост, вторые - очень скудный и неравномерный рост по ходу посева. Окраску по Граму проводят общепринятым методом. Под микроскопом окрашенные по Граму стафилококки имеют вид фиолетово-синих кокков, располагающихся гроздьями или небольшими кучками ("кружево"). Плазмокоагулирующую активность проверяют в реакции коагуляции плазмы (РКП). С учетом результатов РКП и лецитовителлазной активности в 70-75% случаев, на четвертый день исследования может быть подтверждена принадлежность выделенного штамма к виду золотистого стафилококка и выдан соответствующий ответ. На схеме представлены возможные варианты сочетаний результатов определения плазмокоагулирующей и лецитовителлазной активности. Если культура обладает только плазмокоагулирующей или только лецитовителлазной активностью, то для окончательного ответа требуется определение других признаков патогенности (ферментации маннита в аэробных условиях - АФМ или ДНКазной активности). В этих случаях ответ выдают в зависимости от результатов, полученных при определении названных признаков. В случае необходимости на 4-ый день исследования может быть поставлена реакция определения ДНКазной активности или анаэробной ферментации маннита. Определение антибиограммы проводят только после выделения чистой культуры, по показаниям (выбор способа лечения и т.д.). Выделенные культуры золотистого стафилококка подлежат фаготипированию.

Учет результатов фаготипирования, определения чувствительности к антибиотикам, ДНКазной активности. Окончательная выдача ответа. 3.2 Исследования микробной обсемененности объектов внешней среды.

Бактериологическое исследование микробной обсемененности предметов внешней среды предусматривает выявление стафилококка синегнойной палочки, бактерий группы кишечных палочек и аэроманад (строго по показаниям). Забор проб с поверхностей различных объектов осуществляют методом смывов.

Взятие смывов производят стерильным ватным тампоном на палочках, вмонтированных в пробирки, или марлевыми салфетками, размером 5х5 см, простерилизованными в бумажных пакетах или в чашках Петри. Для увлажнения тампонов в пробирки с тампонами наливают по 2,0 мл стерильного физиологического раствора. При использовании салфеток стерильный физиологический раствор разливают в стерильные пробирки по 2,0 мл. Салфетку захватывают стерильным пинцетом, увлажняют физиологическим раствором из пробирки, после протирания исследуемого объекта помещают в ту же пробирку.

При контроле мелких предметов смывы забирают с поверхности всего предмета. При контроле предметов с большой поверхностью смывы проводят в нескольких местах исследуемого предмета площадью примерно в 100-200 кв. см.

Для выделения стафилококков делают посев непосредственно на чашку Петри с желточно-солевым агаром. Кроме того, в качестве среды накопления используют бульон с 6,5% хлористого натрия, бульон с 1% глюкозы, разлитые в пробирки по 0,5 мл, в которые засевают по 0,2-0,3 мл смывной жидкости. Засеянные пробирки инкубируют при 37°С в течение 20-24 часов, после чего делают высев на ЖСА.

Для выявления бактерий группы кишечных палочек производят посев на среду обогащения, для чего тампон (марлевую салфетку) погружают в 10-20% желчный бульон или среду Кесслера. Через сутки инкубирования при 37°С делают пересев на среду Эндо. Подозрительные колонии на среде Эндо микроскопируют и пересеивают на 2-ую бродильную пробу - среду Гисса с глюкозой. Среду выдерживают 24 часа при 43°С.

Дата добавления: 2014-12-20 ; просмотров: 34 | Нарушение авторских прав

Методы микробиологической диагностики стафилококковых заболеваний отражены в схеме 1. Выполняется следующий комплекс методов исследования.

Бактериоскопический метод – микроскопия мазков из материала от больного, окрашенных по Граму. Выявление в мазках кокков, располагающихся небольшими группами по 2-3 бактерии; типичное расположение в виде гроздьев винограда характерно для чистых культур стафилококка (рис. 1 – цветная вкладка).

Бактериологический метод.Исследуемыйматериал засевают на чашки с желточно-солевым (ЖСА) и кровяным МПА, инкубируют при 37 0 С сутки. На 2 день учитывают характер

роста колоний на обеих средах. На желточно-солевом агаре колонии стафилококка имеют ровные края, гладкую поверхность, вокруг колонии образуется радужный венчик в результате расщепления лецитина яичного желтка ферментом лецитовителлазой; цвет пигмента колоний варьирует от золотистого до белого. На кровяном МПА вокруг колоний образуются зоны

гемолиза. Из типичных для стафилококка колоний делают мазок, окрашивают его по Граму, микроскопируют. Оставшуюся часть колонии пересевают на скошенный МПА для получения чистой культуры. На 3 день проводят идентификацию выделенной культуры стафилококка с дифференциацией основных видов в соответствии с таблицей 2, определяют чувствительность к антибиотикам методом бумажных дисков и фаговар (набор для фаготипирования состоит из фагов 21 типа, разделенных на 4 группы; при внутрибольничных инфекциях наиболее часто встречаются фаговары 77 и 80).

Таблица 1.Этиология бактериальных раневых и гнойно-воспалительных инфекций

Читайте также:

A. Использование клинического, психолого-педагогического и логопедического исследования.
II. Маркетинговые исследования
II. Методы исследования
II. Методы исследования
II. ОБОБЩЕННАЯ СТРУКТУРНАЯ СХЕМА КОМПЬЮТЕРА
III. ДАННЫЕ ОБЪЕКТИВНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ БОЛЬНОГО
III. ДАННЫЕ ФИЗИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
RS-триггеры на интегральных микросхемах.
VI. Дальнейшие задачи и пути исследования
VI. ЛАБОРАТОРНЫЕ, ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Аэробы

Анаэробы

Грамположительные бактерии Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Erysipelotrix rhusiopathiae Грамотрицательные бактерии Burkholderia cepacia, Citrobacter koseri, Edwardsiella tarda, Eikenella corrodens, Enterobacter spp, Escherichia coli, Haemophylus influence, Klebsiella spp, Listeria monocytogenes, Moraxella catarrhalis, Proteus spp, Pseudomonas spp, Salmonella enterica, Serratia spp, Spirillum minus, Streptobacillus moniliformis, Vibrio vulnificus

Неспорообразующие грамположительные бактерии Bacteroides spp, Prevotella spp, Porphiromonas spp, Fusobacterium spp, Veilonella spp Неспорообразующие грамотрицательные бактерии Peptostreptococcus spp, Propionibacterium spp Cпорообразующие грамположительные бактерии Clostridium perfringens, Clostridium novy, Clostridium oedematiens, Clostridium septicum, Clostridium sordelli, Clostridium histolyticum, Clostridium sporogenes, Clostridium ramosum

Схема 1. Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций
Материал: гной, раневое отделяемое, пунктаты из полостей и абсцессов, кровь, мокрота, моча, ликвор, рвотные массы, испражнения, остатки пищи.
Микроскопический метод Выявление грамположительных кокков (группами по 2-3 клетки) в мазках из материала от больного, окрашенных по Граму Серологический метод РНГА или РН для определения α-антитоксина в сыворотке крови больных хроническими стафилококковыми инфекциями. ИФА для определения антител к стафилококку. Имеет вспомогательное значение Бактериологический метод 1 день. Посев материала на чашки с желточно-солевым (ЖСА), кровяным МПА, сахарным МПБ. 2 день -учет характера роста колоний. На ЖСА колонии стафилококка с ровными краями, гладкой поверхностью, радужным венчиком вокруг, цвет - от золотистого до белого.	На кровяном МПА - зоны гемолиза, в МПБ –равномерное помутнение. В мазке из колоний в окраске по Граму – кокки в виде гроздьев винограда. Пересев оставшейся части колонии на скошенный МПА для получения чистой культуры, а с сахарного МПБ на кровяной МПА и ЖСА для получения изолированных колоний. 3 день - идентификация выделенной культуры стафилококка, дифференциация видов по биохимическим свойствам, определение чувствительности к антибиотикам и фаговара. Выделение чистой культуры с ЖСА и кровяного МПА. 4 день.Заключение о виде стафилококка. Идентификация культуры, выделенной из сахарного МПБ 5 день.Заключение о виде стафилококка, выделенного из сахарного МПБ.

Таблица 2. Дифференциация основных видов стафилококка

Признаки	Виды стафилококков
S. aureus	S. epidermidis	S. saprophyticus
Плазмокоагулаза	+	-	-
Лецитиназа	+	-	-
Альфа-токсин	+	-	-
Анаэробная ферментация глюкозы	+	+	-
Анаэробная ферментация маннита	+	-	-
Чувствительность к новобиоцину	S	S	R

Обозначения: (+) – наличие признака; (-) – отсутствие признака; S - чувствительный; R – резистентный.

Для выявления плазмокоагулазы цитратную плазму крови кролика разводят в 2 раза, разливают по 0,4 мл в пробирки, куда вносят петлей культуру стафилококков. Результаты регистрируют через 2, 4, 24 часа. При наличии плазмокоагулазы образуется сгусток.

В некоторых случаях у выделенных чистых культур стафилококка определяют наличие ДНК-азы, каталазы, лизоцимной активности, фибринолизина, гиалуронидазы.

Лизоцимную активность выявляют по зонам просветления вокруг колоний стафилококка при его посеве на МПА в чашках Петри с культурой Micrococcus luteus.

Определение ДНК-азы. Суточную агаровую культуру стафилококка засевают на МПА в чашке Петри, содержащий ДНК. После инкубации посевов при температуре 37 0 С в течение 18-24 часов поверхность МПА заливают 1 N раствором соляной кислоты. Наличие ДНК-азы характеризуется появлением зоны просветления вокруг колоний.

Каталазный тест. Чистую культуру стафилококка вносят в каплю 3%-10%-го раствора перекиси водорода на стекле и растирают круговыми движениями. При наличии каталазы перекись водорода разлагается с образованием пузырьков кислорода.

Cерологический методв диагностике стафилококковых инфекций имеет вспомогательное значение, используясь, в основном, для диагностики хронических процессов (остеомиелит, септикопиемия и др.). Для определения антител к токсину стафилококка применяют РНГА с эритроцитарным диагностикумом, нагруженным α-токсином стафилококка или РН (реакция нейтрализации гемолитической активности стафилококкового токсина антитоксинами сыворотки крови больного в присутствии эритроцитов кролика). У здоровых лиц титр стафилококкового антитоксина составляет 0,5-4 АЕ. Разработан также ИФА.

Клинически значимые виды стафилококка Коагулазоположительные: S. aureus, S. hyicus Коагулазоотрицательные: S. epidermidis, S. saprophyticus, S. haemolyticus, S.hominis

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Бесплатная горячая линия юридической помощи

Главная
ПРИКАЗ Минздрава СССР от 31.07.78 N 720 "ОБ УЛУЧШЕНИИ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ БОЛЬНЫМ С ГНОЙНЫМИ ХИРУРГИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ И УСИЛЕНИИ МЕРОПРИЯТИЙ ПО БОРЬБЕ С ВНУТРИБОЛЬНИЧНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ"

5. Схема бактериологического исследования на стафилококк

5.1. Первый день. Посев на элективные среды (желточно-солевой, молочно-солевой или молочно-желточно-солевой агар). Засеянные среды выдерживают в термостате при 37 град.С в течение 2 суток, либо одни сутки в термостате и дополнительно 24 часа на свету при комнатной температуре.

5.2. Второй-третий день. Просмотр чашек, фиксация в журнале характера и массивности роста. На вышеуказанных средах стафилококк растет в виде круглых, блестящих, маслянистых, выпуклых, пигментированных колоний. На средах, содержащих желток St.aureus выделенный от человека, в 60-70% случаев образует радужный венчик вокруг колонии (положительная лецитовителлазная реакция). Стафилококки животного происхождения дают положительную лецитовителлазную реакцию в 5-10% случаев.

5.3. Отвивка на скошенный агар для дальнейшего исследования не менее 2-х колоний, подозрительных на стафилококк. Для исследования отвиваются прежде всего колонии, дающие положительную лецитовителлазную реакцию. При отсутствии на чашках таких колоний дальнейшему исследованию подвергают пигментированные колонии, схожие по морфологии со стафилококком. При одновременном наличии на чашах колоний стафилококка, отличающихся по пигменту, следует отвивать не менее двух колоний различного вида; пробирки с посевом помещают в термостат при 37 град.С на 18-20 часов.

5.4. Четвертый день. После суточной инкубации у выделенных штаммов проверяют морфологию, тинкториальные свойства (окраска по Граму) и наличие плазмокоагулирующей активности. Следует отметить, что характер роста культуры на скошенном агаре в ряде случаев дает возможность "предвидеть" принадлежность ее к виду St.aureus или St.epidermidis. Первые, как правило, дают обильный равномерный, сочный рост, вторые - очень скудный и неравномерный рост по ходу посева. Окраска по Граму проводится общепринятым методом. Под микроскопом окрашенные по Граму стафилококки имеют вид фиолетово - синих кокков, располагающихся гроздьями или небольшими кучками ("кружево"). Плазмокоагулирующая активность проверяется в реакции коагуляции плазмы (РКП).

5.5. С учетом результатов РКП и лецитовителлазной активности в 70-75% случаев, на четвертый день исследования может быть подтверждена принадлежность выделенного штамма к виду St.aureus и выдан соответствующий ответ. Возможные варианты сочетаний результатов определения плазмокоагулирующей и лецитовителлазной активности представлены на схеме 1.

5.6. Если культура обладает плазмокоагулирующей и лецитовителлазной активностью, выдается ответ о выделении St. aureus без проведения дополнительных исследований. Если культура обладает только плазмокоагулирующей или только лецитовителлазной активностью, то для окончательного ответа требуется определение других признаков патогенности (ферментация маннита в анаэробных условиях - АФМ или ДНКавной активности). В этих случаях ответ выдается в зависимости от результатов полученных при определении названных признаков.

5.7. Если культура не обладает ни плазмокоагулирующей, ни лецитовителлазной активностью и выделяется из слизи верхних дыхательных путей практически здоровых лиц, то может быть выдан ответ о выделении St. epidermidis без проведения дополнительных исследований. Однако, следует помнить, что в 1-2% случаев речь может идти о выделении культуры St. aureus, лишенной основного видового признака - способности коагулировать плазму.

5.8. Определение антибиограммы проводится только после выделения чистой культуры по показаниям (выбор способа лечения и т.д.). Выделенные культуры St. aureus подлежат фаготипированию. В случае необходимости на 4-й день исследования может быть поставлена реакция определения ДНКазной активности или анаэробной ферментации маннита.

5.9. Пятый день. Учет результатов фаготипирования, определения чувствительности к антибиотикам, ДНКазной активности. Окончательная выдача ответа.

Бактериоскопический метод– микроскопия мазков из материала от больного, окрашенных по Граму. Выявление в мазках кокков, располагающихся небольшими группами по 2-3 бактерии; типичное расположение в виде гроздьев винограда характерно для чистых культур стафилококка (рис. 1 – цветная вкладка).

Бактериологический метод. Исследуемый материал засевают на чашки с желточно-солевым (ЖСА) и кровяным МПА, инкубируют при 37 0 С сутки. На 2 день учитывают характер

Таблица 1. Этиология бактериальных раневых и гнойно-воспалительных инфекций

Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Erysipelotrix rhusiopathiae

Неспорообразующие грамположительные бактерии

Неспорообразующие грамотрицательные бактерии

Peptostreptococcus spp, Propionibacterium spp

Cпорообразующие грамположительные бактерии

Clostridium perfringens, Clostridium novy, Clostridium oedematiens, Clostridium septicum, Clostridium sordelli, Clostridium histolyticum, Clostridium sporogenes, Clostridium ramosum

Схема 1. Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций

Материал: гной, раневое отделяемое, пунктаты из полостей и абсцессов, кровь, мокрота, моча, ликвор, рвотные массы, испражнения, остатки пищи.

Выявление грамположительных кокков (группами по 2-3 клетки) в мазках из материала от больного, окрашенных по Граму

РНГА или РН для определения α-антитоксина в сыворотке крови больных хроническими стафилококковыми инфекциями. ИФА для определения антител к стафилококку. Имеет вспомогательное значение

1 день. Посев материала на чашки с желточно-солевым (ЖСА), кровяным МПА, сахарным МПБ.

2 день - учет характера роста колоний. На ЖСА колонии стафилококка с ровными краями, гладкой поверхностью, радужным венчиком вокруг, цвет - от золотистого до белого.

На кровяном МПА - зоны гемолиза, в МПБ –равномерное помутнение. В мазке из колоний в окраске по Граму – кокки в виде гроздьев винограда. Пересев оставшейся части колонии на скошенный МПА для получения чистой культуры, а с сахарного МПБ на кровяной МПА и ЖСА для получения изолированных колоний.

3 день - идентификация выделенной культуры стафилококка, дифференциация видов по биохимическим свойствам, определение чувствительности к антибиотикам и фаговара. Выделение чистой культуры с ЖСА и кровяного МПА.

4 день. Заключение о виде стафилококка. Идентификация культуры, выделенной из сахарного МПБ

5 день. Заключение о виде стафилококка, выделенного из сахарного МПБ.

Таблица 2.Дифференциация основных видов стафилококка

Анаэробная ферментация глюкозы

Анаэробная ферментация маннита

Чувствительность к новобиоцину

Обозначения: (+) – наличие признака; (-) – отсутствие признака; S- чувствительный;R– резистентный.

Для выявления плазмокоагулазыцитратную плазму крови кролика разводят в 2 раза, разливают по 0,4 мл в пробирки, куда вносят петлей культуру стафилококков. Результаты регистрируют через 2, 4, 24 часа. При наличии плазмокоагулазы образуется сгусток.

Лизоцимную активностьвыявляют по зонам просветления вокруг колоний стафилококка при его посеве на МПА в чашках Петри с культуройMicrococcus luteus.

Определение ДНК-азы.Суточную агаровую культуру стафилококка засевают на МПА в чашке Петри, содержащий ДНК. После инкубации посевов при температуре 37 0 С в течение 18-24 часов поверхность МПА заливают 1Nраствором соляной кислоты. Наличие ДНК-азы характеризуется появлением зоны просветления вокруг колоний.

Каталазный тест.Чистую культуру стафилококка вносят в каплю 3%-10%-го раствора перекиси водорода на стекле и растирают круговыми движениями. При наличии каталазы перекись водорода разлагается с образованием пузырьков кислорода.

Cерологический метод в диагностике стафилококковых инфекций имеет вспомогательное значение, используясь, в основном, для диагностики хронических процессов (остеомиелит, септикопиемия и др.). Для определения антител к токсину стафилококка применяют РНГА с эритроцитарным диагностикумом, нагруженным α-токсином стафилококка или РН (реакция нейтрализации гемолитической активности стафилококкового токсина антитоксинами сыворотки крови больного в присутствии эритроцитов кролика). У здоровых лиц титр стафилококкового антитоксина составляет 0,5-4 АЕ. Разработан также ИФА.

При бактериоскопическом исследовании почти со всех исследуемых материалов (раневой содержание, экссудат, мокроты, осадок мочи и т.д.) с помощью бактериологической петли изготавливают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Только из крови и смывов мазки не делают так в них малое количество микроорганизмов. В типичных случаях стафилококки имеют шарообразную форму, фиолетовый цвет, располагаются несимметричными гроздьями, но встречаются и одинокие клетки, пары или тетради.

В последнее время в связи с широким использованием антибиотиков морфология стафилококков изменилась и типового их расположения в мазках из гноя часто не наблюдают. В связи с этим отличить стафилококки от стрептококков по их морфологии и взаимным расположением часто практически невозможно. Поэтому нужно делать посев, выделять чистую культуру и идентифицировать ее.

Материал от больных и бактерионосителей засевают немедленно или не позднее 3-4 ч после взятия при условии хранения его на холоде. В первый день петлей, шпателем или непосредственно тампоном делают посевы на кровяной агар и элективные для стафилококков среды (желточно-солевой (ЖСА) или молочно-желточно-солевой агар (МЖСА)). Чашки с посевами инкубируют при температуре 37°С в течение 48 часов, или сутки в термостате и дополнительно 24 часа при комнатной температуре при хорошем освещении. Если в исследуемом материале бактерий мало (данные микроскопии) - то для обогащения делают еще в тиогликолевой среду. На второй день производят высев из сахарного бульона на указанные элективные среды, исследуют массивность роста и характер колоний после посевов других материалов. На кровяном агаре стафилококки образуют непрозрачные, слегка выпуклые колонии средних размеров с гладкой, блестящей, словно полированной поверхностью, четко очерченным краем, маслянистой консистенции. Патогенные штаммы образуют вокруг колоний прозрачные зоны гемолиза. На элективно-дифференциальных средах, как правило, вырастают только колонии стафилококков. В частности, на желточно-солевом агаре они образуют колонии с зоной помутнения вокруг них и характерным радужным венчиком по периферии. На молочно-желточно-солевом агаре выявляют наличие пигмента, который может быть золотистым, палевым, белым, желтым, оранжевым и другим. Из всех типов колоний изготовляют мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют, проявляя типичные грамположительные стафилококки. Не менее двухтипичных или подозрительных в отношении стафилококков колоний пересевают на скошенный агар. В первую очередь отсеивают колонии с гемолизом и те, которые дали положительную лецитовителазную реакцию. Пробирки с посевами помещают в термостат при температуре 37? С на 18-20 часов. В последующие дни проводят идентификацию выделенных чистых культур, для чего проверяют их морфологические и тинкториальные свойства (окраска по Граму).

Патогенные стафилококки, вызывающие пищевые токсикоинфекции выделяют и идентифицируют так же, как и стафилококки вообще. Они отличаются способностью продуцировать энтеротоксины, характеризующие термостабильностью и антигенной специфичностью. Наиболее часто встречаются типы A и D. Указанные токсины получают путем посева культуры в специальную полужидкую среду и инкубируют 3-4 суток при 37? в эксикаторе с 20% CO2. Среды пропускают через мембранные фильтры. Полученные фильтрат прогревают при 100?C 30 мин и вводят поросятам внутрибрюшинно или через зонд в желудок. Через 30-60 минут возникает рвота, позже понос и общее прострация. Чтобы выявить энтеротоксин в пищевых продуктах, которые повлекли токсикоинфекцию, ими кормят поросят. В последнее время идентификации и типирования энтеротоксинов проводят с помошью реакции имунопреципитации в агаровом геле. Это самый простой и чувствительный метод.

Проводится исследование тогда, когда возбудителя не удается выявить, например, при хронических процессах (остеомиелит, септикопиемия) особенно если они долго лечатся антибиотиками. Среди современных серологических реакций часто используют РПГА, ИФА. [5]

Стафилококки относятся к группе условно-патогенных бактерий. Это микроорганизмы, которые присутствуют на коже и слизистых оболочках и на общем благоприятном фоне не оказывают негативного воздействия на организм — до тех пор, пока в порядке иммунитет. Как только происходит сбой, бактерии начинают атаковать. Чтобы выявить конкретный штамм стафилококка, ставший причиной воспалительного процесса, и его чувствительность к антибиотикам, важно знать, какие именно анализы вам потребуется сдать.

Врач назначил анализ на стафилококк: почему?

Стафилококки — это малоподвижные округлые бактерии, внешне напоминающие виноградные грозди. Их обнаружили еще 150 лет назад. Французский биолог Луи Пастер доказал взаимосвязь стафилококка и гнойного воспаления. Современным микробиологам известно около 20-ти типов бактерий этой группы, большинство из которых не наносят вреда здоровью. Существуют штаммы, опасные только для животных. Есть те, которые вызывают патологические реакции и у животных, и у человека. Наиболее часто гнойно-воспалительные процессы провоцируют S.aureus, S.saprophiticus и S.epidermidis . При ослаблении защитных сил организма они вызывают заболевания, общую совокупность которых называют стафилококковой инфекцией. Возникает она и в случаях, когда бактерии попадают в те органы, где их быть не должно.

Стафилококки обладают биохимической активностью. Они вырабатывают токсины, которые оказывают сильное воздействие на системы органов и тканей. Сложность профилактики и лечения обусловлена высокой устойчивостью бактерии к антибиотикам и факторам внешней среды. Микроорганизмы не боятся солнечных лучей, активно размножаются на воздухе, живут в воде и пищевых продуктах, полгода способны храниться в замороженном или высушенном состоянии, не погибают под воздействием спирта, хлорида натрия, перекиси водорода.

Путей заражения стафилококком несколько. Основные из них:

Контактный. Факторы передачи — одежда, предметы обихода и гигиены, постельное белье, домашняя пыль, перевязочные материалы.
Воздушно-капельный. Распространение происходит через воздух. Возможный фактор передачи — при вдыхании кондиционированного воздуха или воздуха, прошедшего по системе вентиляции.
Пищевой. Стафилококк активно размножается в несвежих продуктах: молоке, кефире, консервах, сладостях и т.д.
Парентеральный — через биологические жидкости: кровь, слюну, слезную жидкость, грудное молоко.

Человек часто не подозревает о наличии у него стафилококка и невольно становится разносчиком. Особенно это опасно, если по долгу службы ему приходится работать с большими группами людей. Речь идет о таких профессиях, как школьные учителя, продавцы, раздатчики готовых блюд в общепите, медицинские работники. Последние, впрочем, регулярно проходят обследование. Для остальных факт носительства может оставаться неизвестным на протяжении многих лет. Врачи условно выделяют группы лиц, которые в большей степени подвержены воздействию стафилококка. Среди них онкобольные, пациенты с диабетом, дети и пожилые люди, больные с открытыми ранами, травмами и ожогами, кормящие матери, военнослужащие, заключенные, работники образовательных и лечебных учреждений.

Симптомы, которые указывают на инфекцию, крайне разнообразны, сразу обнаружить истинную причину проблемы удается далеко не всегда. Между тем развивается она стремительно, переходя из одной стадии в другую. Стафилококковой инфекции в целом присущи симптомы интоксикации:

подъем температуры тела;
снижение аппетита;
сонливость;
слабость.

Болезнь имеет и местные проявления в зависимости от того, в какой части организма локализован процесс.

кожа : гнойнички, фурункулы, абсцессы, воспаление пупка у новорожденных;
кости и суставы : покраснения кожи, боли в руках и ногах при движении и надавливании;
дыхательные пути : налет на миндалинах, боль в горле, насморк, сухой кашель, покраснение;
оболочки сердца : резкий подъем температуры, шумы;
ЖКТ : боли в животе, вздутие, жидкий стул, тошнота, рвота.
мочеполовая система : частое и болезненное мочеиспускание, боль в спине.

Именно стафилококк в 95% случаев становится причиной остеомиелита — воспаления костного мозга с разрушением костных слоев. Если поражение переходит на суставы, возникает артрит. При попадании стафилококка к сердцу разрушается сердечный клапан, что влечет за собой закупорку периферических артерий, абсцесс миокарда, сердечную недостаточность. При поражении стафилококком головного мозга развивается абсцесс (образование гнойной полости), возникает менингит. Бактерии в дыхательной системе провоцируют воспаление легких и плевры. Существует понятие стафилококкового сепсиса — это состояние, для которого характерно поражение всех органов и систем. Оно требует неотложной помощи и несет прямую угрозу жизни. Все эти осложнения плохо поддаются терапии, часто оставляют последствия на всю жизнь или приводят к инвалидности.

Клиническая картина стафилококковой инфекции обширна. Симптомы часто схожи с признаками других заболеваний, не связанных с бактериальным заражением. Тем не менее в совокупности проявлений грамотный специалист способен заподозрить стафилококк, диагностировать наличие которого можно лишь лабораторно. Отсюда — важность своевременного и качественного анализа на стафилококк. Часто анализ является обязательным перед госпитализацией больного в стационар либо при наличии в больнице инфекции.

Выписать направление может терапевт, педиатр, врач общей практики, инфекционист или лор. В результате исследования определяют тип бактерии и степень устойчивости к антимикробным препаратам.

В числе известных медицине видов стафилококка чаще всего речь идет о трех из них:

Золотистый стафилококк . Он вызывает инфекции у взрослых и детей практически в любом органе и участке тела, затрагивает слизистые оболочки, кожу и даже нервную ткань.
Эпидермальный стафилококк. Наиболее опасен для людей с ослабленным иммунитетом, для больных с онкологией и ВИЧ, а также для недоношенных детей.
Сапрофитный стафилококк. Провоцирует заболевания мочеполовой системы, встречается, как правило, у женщин.

В каждой группе несколько разновидностей. В зависимости от штамма, бактерии поражают те или иные органы. Решение о том, какие анализы на стафилококк сдавать пациенту, принимает только квалифицированный специалист, ориентируясь на жалобы и общую картину заболевания. Для диагностики в лаборатории проводят микробиологическое исследование биоматериала. Для анализа берут кровь, кал, мочу, мокроту, грудное молоко, жидкости из раны или уха и различные виды мазков: ректальный, урогенитальный, из носоглотки и полости рта. У каждой процедуры — свои особенности проведения, которые напрямую влияют на результаты. Для того чтобы исследование оказалось достоверным, к сдаче анализов на стафилококк необходимо подготовиться.

Анализ на золотистый и другие виды стафилококка проводят до начала антибактериальной терапии. Если она назначена по другому поводу, пациенту следует отказаться от приема антибиотиков (после консультации с врачом), чтобы не допустить ложноотрицательного результата исследования на стафилококк. За 48 часов, также по согласованию, прекращают прием мочегонных препаратов. В числе других рекомендаций:

за 12 часов до исследования мокроты выпить максимально возможное количество воды, чтобы мокрота легко отхаркивалась и не была вязкой;
не ходить в туалет за 3–4 часа до анализа мочи или урогенитального мазка;
женщинам — не сдавать анализ мочи и урогенитальный мазок во время менструации и 2 дня до/после;
при анализе кала — за 3 дня прекратить использование ректальных свечей, слабительных препаратов и средств, влияющих на перистальтику кишечника и окраску каловых масс. К числу таких препаратов относят пилокарпин, белладонну, сернокислый барий, висмут, железо.

Помимо подготовительных мероприятий, крайне важен правильный забор материала для анализа. Необходимо использовать специальные контейнеры, пробирки, тампоны и другие атрибуты лабораторного исследования. В некоторых случаях пациенту предоставляют право собрать материал в домашних условиях, обращая внимание на необходимость точного следования инструкции.

Самостоятельно собранный биоматериал у пациентов принимают, когда речь идет об анализе кала на стафилококк, исследованиях мочи и грудного молока. Общее правило: для сбора используют стерильную тару (пластиковый одноразовый контейнер с винтовой крышкой), которую доставляют в лабораторию максимально быстро. Современные медицинские центры при подготовке к исследованию выдают пациентам подробную инструкцию, как правильно собрать материал.

Требования к сбору кала для анализа на стафилококк:

каловые массы должны быть естественными, не допускается применение слабительных препаратов;
собирать кал на чистую поверхность (лист бумаги или полиэтилен). Не рекомендован сбор из унитаза;
судно промыть с мылом под проточной водой, ошпарить кипятком и высушить;
для забора использовать специальную ложечку. Контейнер достаточно наполнить на 1/3.

Требования к сбору грудного молока:

перед сцеживанием вымыть руки с мылом. Область сосков обработать 70%-ным спиртом. Для каждой железы — отдельный тампон;
первые 5–10 мл сцедить в отдельную посуду — они не подходят для анализа. Дальше сцеживают молоко в контейнер, не касаясь стенок руками или грудью;
молоко из разных желез поместить в разные контейнеры.

Требования к сбору мочи:

наружные половые органы следует предварительно ополоснуть водой. Женщинам — использовать 4 ватных шарика, смоченных в мыльном растворе, каждым проводя только один раз.
первую струю мочи для анализа не использовать. В процессе сбора не прикасаться контейнером к телу. Емкость следует наполнять до середины.

Прочие виды анализов проводят непосредственно в лаборатории. Для определения стафилококка часто исследуют ротовую полость и носоглотку. Анализ из зева на стафилококк проводят при помощи мазка. Его берут натощак или через 3 часа после еды. Язык аккуратно прижимают шпателем, стерильным тампоном проводят между дужками миндалин по язычку и задней стенке глотки, не затрагивая губы и щеки. Затем тампон погружают в транспортную среду и отправляют в лабораторию. Аналогичны действия врача и при заборе материала для анализа из носа на стафилококк. Тампон вводят в носовой ход на глубину 2–3 см на уровне носовой раковины, прижимают к перегородке и несколько раз вращают.

Перед мазком не следует предварительно промывать рот или носоглотку. Если на слизистых оболочках имеются гнойники и язвенные образования, материал берут с области на стыке зараженной и здоровой ткани, поскольку там концентрируется наибольшее количество бактерий. Далее в лабораторных условиях производят посев. Частичку слизи переносят на подготовленную среду, в которой микробы быстро размножаются и образуют колонии. Это позволяет врачам определить разновидность бактерий, а также установить чувствительность к антибактериальным препаратам, что является решающим фактором при назначении лечения.

Бактериологический посев занимает в среднем 7 дней. В результатах анализов представлены данные о наличии или отсутствии роста бактерий. Отрицательный результат говорит об отсутствии стафилококковой инфекции. Положительный — о ее наличии или бессимптомном носительстве. В норме золотистого стафилококка ( S. aureus ) у человека быть не должно. Сапрофитный и эпидермальный могут присутствовать до определенных отметок. К примеру, количество бактерий при анализе кала на стафилококк у детей не должно превышать 10 4 степени КОЕ/г.

Итоговый диагноз пациенту ставят на основании общей картины заболевания, совокупности симптомов и положительного анализа на стафилококк. Недооценивать важность своевременной диагностики нельзя. Инфекция способна быстро распространяться, создавая необратимые проблемы для здоровья. Кроме того, с каждым годом растет число штаммов, имеющих устойчивость к препаратам, которые еще недавно использовали для лечения, поэтому при каждом новом симптоме анализы необходимо сдавать заново.

Для определения стафилококковой инфекции, в зависимости от предполагаемых мест ее локализации, могут потребоваться различные биоматериалы — кровь, слизь из носоглотки или половых органов, моча, кал. Независимо от того, какое конкретно лабораторное исследование вам назначили, во избежание ложных или неточных результатов, следует со всей ответственностью отнестись к процессу подготовки и сдачи биоматериала на анализ, запросив инструкцию в лаборатории.

Читайте также: