Стафилококки дифференциация патогенных и непатогенных стафилококков

Основные признаки	Название вида
S. aureus	S. epidermidis	S.saprophyticus
Наличие:
плазмокоагулазы	+	-	-
фосфатазы	+	+	-
аргининдегидролазы	+	+	-
нитратредуктазы	+	+	-
белка А в поверхностном антигене	+	-	-
Окисление:
маннита трегалозы галактозы рибозы	+ + + +	- - + -	+ + - -
Образование a-токсина	+	-	-
Устойчивость к новобиоцину	S	S	R

Примечание: S -чувствительный, R - резистентный.

Патогенность. К стафилококкам чувствительны лошади, крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, из экспери­ментальных животных - кролики, белые мыши, котята.

Главный патогенный представитель рода, Staphylococcus aureus, является причиной широкого диапазона больших и малых инфекций человека и животных (табл. 2).

Коагулазо-негативные стафилококки являются комменсалами кожи, но они в настоящее время признаются в качестве важных условно-патогенных возбудителей. Они могут вызвать инфекции, сопутствующие протезам, катетерам и имплантатам (Staph. epidermidis), а также инфекции мочевыводящих путей

Обычно стафилококки также встречаются и у домашних животных, включая животных на фермах, которые используются для производства молока, например - у рогатого скота, овец и коз. Маститы, вызванные Staph. aureus - общее и дорогостоящее осложнение доения. Человек и животные могут заражать пищевые продукты, что нередко приводит к стафилококковым пищевым отравлениям.

Табл.2. стафилококковые инфекции

Коагулазо-позитивные стафилококки (Staph. aureus)	Коагулазо-негативные стафилококки
ГНОЙНЫЕ инфекции	ТОКСИКО- ИНФЕКЦИИ
Фурункулы, карбункулы Раневые инфекции Абсцессы Импетиго Маститы Септицемия Остеомиелит Пневмония	Синдром обваренной кожи Пемфигус (пузырчатка новорожденных) Синдром токсического шока Пищевое отравление	Инфицированные протезы Инфицированные имплантаты Вентрикулиты * Перитониты ** Септицемия Эндокардит

** - при постоянном амбулаторном перитонеальном диализе

Стафилококки проникают в организм человека через кожные покровы и слизистые оболоч­ки воздушно-капельным и воздушно-пылевым путями. Зараже­ние происходит обычно не одним, а двумя и более разновидно­стями.

В патогенезе заболеваний, вызываемых стафилококками, определенную роль играют как экзотоксин, так и бактериаль­ные клетки.

В развитии стафилококковых заболеваний имеет значение и состояние аллергии, которая в ряде случаев является причиной очень тяжелых, не поддающихся лечению клинических форм стафилококковой инфекции. Практически все органы и ткани человеческого организма могут быть поражены воспалительны­ми процессами, обусловленными стафилококками.

Патогенные стафилококки у человека вызывают гидроадени­ты, абсцессы, панариции, блефариты, фурункулез, карбунку­лез, периоститы, остеомиелиты, фолликулиты, сикозы, дерма­титы, экземы, хронические пиодермии, перитониты, менинги­ты, аппендициты, холециститы, пневмонии, энтероколиты, пиомиозиты, конъюнктивиты и стафилодермию у новорожден­ных.

Развитию гнойничковых поражений кожи и фурункулеза способствуют сахарный диабет, фенилкетонурия, авитаминозы, алиментарная дистрофия, потливость, мелкие травмы кожи профессионального характера, раздражение ее химическими веществами.

В ряде случаев стафилококки обусловливают вторичные заболевания при оспе, гриппе, раневых инфекциях, а также послеоперационные нагноения. Особенно грозными заболевани­ями являются стафилококковый сепсис и стафилококковые пневмонии у детей.

При употреблении пищевых продуктов (сыр, творог, молоко, торты, пирожные, мороженое и др.), обсемененных патогенны­ми стафилококками, возникают токсикоинфекции. Наиболее быстро токсинообразование происходит в молоке, молочной смеси, заварном креме, мясном фарше, рыбных консервах и других продуктах.

Стафилококки играют большую роль при смешанных инфек­циях: их обнаруживают вместе со стрептококками при раневых инфекциях, дифтерии, туберкулезе, актиномикозе, ангинах, гриппе, парагриппозных и других острых респираторных забо­леваниях.

В связи с широким использованием антибактериальных пре­паратов и особенно антибиотиков, обусловивших селекцию резистентных штаммов, произошли значительные изменения тяжести и степени распространенности стафилококковых пора­жений. Во всех странах мира отмечается рост числа этих заболева­ний, внутрибольничных заражений в акушерских, хирургиче­ских и детских стационарах, увеличение носительства стафилококков среди медицинского персонала и населения. Регистрируются случаи заражения стафилококками детей с развитием у них везикуло-пустулезной стафилодермии, пемфигуса, инфильтратов, абсцес­сов, конъюнктивитов, назофарингитов, отитов, пневмоний и других заболеваний.

Установлено быстрое образование резистентности стафилококков к химиопрепаратам и антибиотикам, обусловленной распространением среди стафилококков R-плазмид, облада­ющих трансмиссивностью. Высокая концентрация лекарствен­ных препаратов в организме людей привела к существенному нарушению микрофлоры и формированию устойчивых штам­мов, обладающих более выраженной вирулентностью, а также L-форм стафилококков.

Здоровое носительство. Staph. aureus вегетирует на слизистой носа у 30-40 % здоровых людей; обычно колонизирована промежность. Микробы распространяются из этих участков в окружающую среду руками, носовыми платками, одеждой и пылью, состоящей из чешуек кожи и ворсинок одежды. Некоторые носители диссеминируют исключительно большое количество кокков, сопоставимое с количеством, распространяемым больными с большими поверхностными повреждениями или инфекциями дыхательных путей. В течение первого-второго дней жизни большинство младенцев колонизируется стафилококками, приобретенными от их матерей, медсестер или окружающей среды. У младенцев, рожденных в больнице, нос, пупочная культя и влажные области кожи обычно колонизованы Staph. aureus. Микробоносительство в полости носа у младенцев, как и у взрослых, является обычно очень длительным. Когда определенный штамм Staph. aureus колонизирует места носительства, он может персистировать в этих участках в течение многих месяцев или нескольких лет. Довольно часто происходит передача стафилококков от младенцев кормящим матерям, у которых в этих случаях развиваются маститы.

Иммунитет. Невосприимчивость при стафилококковых забо­леваниях связана с фагоцитозом, наличием антител (антитокси­ны, преципитины, опсонины, агглютинины).

Воспалительный процесс обусловливает задержку стафило­кокков на месте внедрения и затрудняет их распространение по всему организму. В очаге воспаления стафилококки подвергаются фагоцитозу. Нейтрализация стафилококкового токсина антитоксином является важным моментом в общем комплексе иммунитета. Вследствие проницаемости капилляров антитоксин из крови проникает в зону воспаления и нейтрализует образу­емый стафилококками токсин. Таким образом, фагоцитарный и гуморальный факторы находятся в тесном единстве их защит­ного действия.

Характерным для стафилококковых заболеваний считают склонность их к вялому хроническому течению и рецидивированию. Эта особенность позволяет утверждать, что постинфекци­онный иммунитет при стафилококковых поражениях характери­зуется слабой напряженностью и непродолжительностью

Одной из причин низкого уровня иммунитета является нали­чие в органах и тканях людей общих со стафилококками антигенов (антигены мимикрии). Это обусловливает состояние иммунологической толерантности к стафилококкам и их токси­нам, что благоприятствует размножению возбудителя в орга­низме больных.

Лечение. При стафилококковых поражениях применяют анти­биотики и сульфаниламидные препараты, противостафилококковый иммуноглобулин или противостафилококовую плазму.

При лечении больных стафилококковыми инфекциями следу­ет учитывать необходимость устранения интоксикации и повы­шения иммунобиологических защитных сил организма (введе­ние глюкозы, плазмы, переливание крови, сердечные сред­ства).

При хронических нагноительных стафилококковых процессах показана специфическая терапия: стафилококковая поливален­тная вакцина, стафилоккковый антифагин, стафилококковый анатоксин, аутовакцина, а также дифаг, содержащий стафилококковый и стрептококковый фаги.

Профилактика. К общим мероприятиям относятся: оздоровление условий труда и быта, устранение витаминной недостаточности, предупреждение травматизма, потливости, строгое соблюдение санитарно-гигиенических требований в родильных домах, хирургических отделениях, детских учреждениях, на производстве, особенно на консервных заводах, содержание в чистоте тела, частое мытье рук теплой водой с мылом.

В больничных помещениях (хирургические отделения, родильные дома) необходимо систематически производить дезинфекцию и бактериологическое обследование персонала на носительство стафилококков.

На промышленных предприятиях для профилактики пиодермии применяют защитные мази и пасты. Для обработки микротравм, кроме спиртовых растворов йода и анилиновые красителей, широко используют жидкости, высыхающие в течение 1-2 мин и образующие эластическую пленку, предох­раняющую раневую поверхность от загрязнения и инфицирования. При ожогах больных содержат в мягких (пластических) изоляторах, защищающих поврежденные участки кожи от проникновения в нее микрофлоры внешней среды

В некоторых случаях рекомендуют специфическую профи­лактику путем иммунизации стафилококковым анатоксином лиц, подвергающихся риску травматизма или инфицированию стафилококками, например, иммунизацию женщин перед родами.

Для дифференциации условно-патогенных стафилококков от сапрофитных используют чувствительность их к новобиоцину. Золотистый и эпидермальный стафилококки не растут на среде с концентрацией новобиоцина

При флегмонах и абсцессах материал забирают во время вскрытия очага ватным тампоном или стерильным шприцем. Материал помещают в транспортную среду и доставляют в бактериологическую лабораторию.

Занятие № 4

Тема. Возбудители туберкулеза и микобактериозов, менингококковой инфекции

Актуальность темы занятия

В настоящее время, несмотря на успехи в деле профилактики, лечения и диагностики туберкулеза, отмечается значительный рост этого заболевания, в особенности в нашей стране. Клиническая диагностика туберкулеза и микобактериозов сопровождается микробиологическими исследованиями, где врач должен четко представлять их место в каждом конкретном случае.

Патогенные нейссерии – возбудители менингококковых инфекций, в последние годы регистрируются довольно часто. Среди этиологических агентов гнойных менингитов в нашей стране до 80 % составляют менингококки. Диагностика менингококковых инфекций целиком основана на микробиологических исследованиях.

Вопросы для подготовки

1. Характеристика возбудителей туберкулеза и микробактериозов, их классификация, факторы патогенности.

2. Особенности патогенеза и эпидемиологии туберкулеза, иммунитет при туберкулезе. Особенности поражения слизистой полости рта при туберкулезе.

3. Методы и цели микробиологической диагностики туберкулеза: микроскопический, бактериологический, биологический, аллергический, собственно иммунологический.

4.Биопрепараты, применяемые для специфической профилактики и диагностики туберкулеза.

5.Характеристика возбудителей менингококковой инфекции, классификация, факторы патогенности, отличие от непатогенных нейссерий.

6. Эпидемиология и патогенез менингококковой инфекции. Опасность инфицирования в стоматологическом кабинете. Методы микробиологической диагностики разных форм менингококковой инфекции. Специфическая профилактика менингококковой инфекции

Практическая работа

Задание № 1

Клинический диагноз: Туберкулезная волчанка? Промикроскопировать мазок, приготовленный из отделяемого язвы, расположенной на щечной поверхности слизистой полости рта. Мазок окрашен по Цилю-Нильсену. Определить наличие кислотоустойчивых бактерий.

1. Какой использован метод диагностики?

2.Является ли обнаружение кислотоустойчивых палочек основанием для постановки диагноза?

3. Что нужно предпринять дальше?

Задание № 2

1. Какой применен метод диагностики?

2. Описать культуральные свойства выделенной культуры. Являются ли они характерными для микобактерий туберкулеза?

3. Закончено ли бактериологическое исследование?

4. Можно ли на основании полученных данных подтвердить диагноз «Туберкулезный остеомиелит?

Задание № 3

Определить чувствительность туберкулезных бактерий, выделенных от 2-х больных, к химиотерапевтическим препаратам. Соответствующие препараты в разных концентрациях были внесены в питательную среду, после чего был произведен посев выделенной культуры. Учет результатов производится спустя 3-4 недели при наличии роста в контрольных пробирках. Определить чувствительность культуры, результаты внести в таблицу:

Название препарата	1	2
Стрептомицин 5 ЕД -//-10 ЕД
ПАСК 5 ЕД -//- 10ЕД
Циклосерин 30 ЕД
Канамицин 30 ЕД

Задание № 4

Учесть результаты иммуноферментного анализа, проведенного с патологическим материалом /отделяемое язвы красной каймы губ/ от двух больных с диагнозом: Туберкулезная волчанка?

Этапы постановки реакции:.

1. Антитела к возбудителю туберкулеза в лунке

2. Патологический материал.

3. Антитела к возбудителю туберкулеза, меченные ферментом.

4. Субстрат, изменяющий окраску при воздействии на него фермента. Появление желто-коричневого окрашивания свидетельствует о положительной реакции.

1. Какой использован метод диагностики?

2. С какой целью проведено исследование?

3. Можно ли по результатам исследования подтвердить или снять клинический диагноз?

Задание № 5

Больной С., заболел остро, заболевание началось с назофарингита. Затем произошло ухудшение состояния и больной был госпитализирован в инфекционное отделение с диагнозом: Менингококковый менингит. Промикроскопируйте мазок, приготовленный из спинномозговой жидкости больного и окрашенный метиленовым синим, зарисуйте.

1. Какой метод диагностики применен?

2. Можно ли на основании микроскопии подтвердить диагноз?

3. Являются ли обнаруженные характерные микробы менингококками?

Задание № 6

В отделении челюстно-лицевой хирургии возник случай генерализованной менингококковой инфекции /менингококкцемия/. При обследовании персонала у 2-х человек /медицинской сестры и врача отделения/ из носоглотки выделены нейссерии. Определите по готовым посевам, являются ли медсестра /А/ и врач /Б/ носителями менингококка, или это непатогенные нейссерии – представители нормальной микрофлоры носоглотки. Результаты бактериологического исследования внесите в таблицу.

Обследуемый	Среда с с ристомицином	Сывороточный агар 22 градуса	Сывороточный агар 37 градусов	МПА 37 градусов
А
Б

Результат: + - наличие роста, - - отсутствие роста.

Как можно интерпретировать полученные результаты?

Задание № 7

Изучить биопрепараты, применяемые для диагностики и специфической профилактики туберкулеза и менингококкового менингита. Данные занести в таблицу (таблицу см. в занятиях выше).

Занятие № 5

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.

Роды: Staphylococcys (типовой),

Род Staphylococcys включает около 30 видов. Доминируют 3 вида:

Морфология и биологические свойства

Staphyle— виноградная гроздь. Шарообразной формы, диаметр 0,6-1 мкм, неподвижный, спор не имеет, капсула формируется лишь в условиях организма (индуцибельный фактор). Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, грамположительны.

Хемоорганотроф, по типу дыхания — факультативный анаэроб, не прихотлив к питательным средам и условиям культивирования. Растет на простых питательных средах: МПБ — диффузное помутнение, МПА — колонии диаметром 2-4 мм, пигментированные (золотистого, лимонно-желтого или белого цвета). Пигмент — каротиноид, не растворим в воде, растворим в спирту, бензине, хлороформе. Синтезируется лучше на свету, при комнатной температуре, дополнительной аэрации на плотных питательных средах с молоком, картофелем или глицерином.

Пигментообразование: у S. aureus пигмент золотистый, у S. saprophyticus — лимонно-желтый, S. epidermidis — лимонно-желтый или белый.

Температурный диапазон роста 6-46° С, оптимальная 35-37°С, рН 4,2-9,3, оптимум 7,2.

Галотолерантный(устойчив к высоким концентрациям солей), большинство штаммов растет в присутствии 15% NaCl, сахарозы — до 40%, желчных кислот — до 40%.

Питательные среды для культивирования стафилококков:

2. Кровяной МПА с 5% бараньих или кроличьих эритроцитов — альфа-гемолиз;

3. Солевой МПБ — накопительная среда ( МПБ+ 7-10 % NaCl);

4. Желточно-солевой агар (ЖСА) — дополнительно содержит суспензию желтка куриного яйца (для определения лецитовителазы).

Семейство Micrococcaceae оксидаза(-), каталаза(+) — признак дифференциации от семейства Streptococcaceae; последнее оксидаза(-), каталаза(-).

Сахаролитические гидролазы: лактоза, глюкоза, маннит, мальтоза, сахароза — ферментация до кислоты без газа.

Примечание: стафилококк глюкозу и маннит ферментирует как в аэробных, так и в анаэробных условиях (отличие от стрептококка); NH3+, H2S-, индол +, восстанавливает нитраты в нитриты, разжижает желатин воронкообразно.

Липолитические ферменты: фосфотаза, лецитовителаза.

Факторы вирулентности стафилококков

1. Структурные компоненты: микрокапсула, компоненты клеточной стенки — протеин А, тейхоевые кислоты, пептидогликан.

2. Ферменты агрессии: плазмокоагулаза, лецитиназа, гиалуронидаза, муромидаза, фибринолизин и др.

3. Токсины: гемолизины, лейкоцидин, эксфолиативный токсин, токсин синдрома токсического шока, энтеротоксин.

Возникновение пищевых отравлений стафилококковой природы связано с действием термостабильных энтеротоксинов (100°С — 30 мин.), продуцируемых золотистыми стафилококками.

Экология и распространение

Стафилококки являются представителями микрофлоры кожи, слизистых полости рта, носоглотки, кишечника. Они постоянно выделяются из организма человека и могут быть обнаружены на предметах обихода, в воде, воздухе, почве. Особую опасность представляет S. aureus как потенциально патогенный для человека микроорганизм.

Источник стафилококковой инфекции: больной человек, носитель.

Механизмы и пути передачи: воздушно-капельный, контактный, алиментарный, инъекционный.

Стафилококки способны поражать практически все ткани организма и вызывать гнойно-воспалительные процессы различной локализации, раневую инфекцию, пищевые интоксикации.

При генерализации местных процессов возникает сепсис, септицемия (септикопиемия).

S. aureus может быть возбудителем внутрибольничных инфекций.

Исследуемый материал: гной, слизь, мокрота, кровь, моча, ликвор и др.

I. Бактериоскопический метод.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму — грамположительные кокки, в виде виноградных гроздей.

II. Бактериологический метод.

1. Посев на солевой бульон (среда накопления).

2. Посев на кровяной МПА — золотистые колонии с зоной α-гемолиза; ЖСА — колонии с радужным ореолом (положительная проба на лецитовиттеллазу).

3. Откол подозрительных колоний на косячок МПА с целью выделения чистой культуры.

4. Проверка чистоты выделенной культуры — микроскопия мазков, окрашенных по Граму (однородная популяция грамположительных гроздевидных кокков).

5. Постановка диагностических тестов: оксидаза (-), каталаза (+) — семейство Micrococcaceae; аэробное и анаэробное сбраживание глюкозы — род Staphylococcus; реакция на плазмокоагулазу (+/-), лецитовиттеллазу (+) — только у S. aureus.

6. Дифференцировка видов

Дифференцировка видов стафилоккоков

Признак	виды
S. aureus	S. epidermidis	S. saprophyticus
Плазмокоагулаза	+	-	-
Анаэробное сбраживание маннита	+	-	-
Окисление маннита	+	-	+
Чувствительность к новобиоцину	чувств.	нет	нет

7. Внутривидовая дифференцировка. Определение антибиотикограммы и фаготипирование.

Иммунитет.Антимикробный, антитоксический, ненапряженный, непродолжительный, связан как с клеточными, так и гуморальными факторами.

Специфическая профилактика и терапия.Профилактика стафилоккоковых инфекций направлена на выявление микробоносителей золотистых стафилоккоков, главным образом, среди персонала хирургических отделений больниц и родовспомогательных учреждений и их санации. Для профилактики стафилоккоковых осложнений проводят активную иммунизацию стафилоккоковым анатоксином больных, накануне плановых хирургических операций, или беременных в конце беременности.

Для специфической терапии септических инфекци используют донорский антистафилоккоковый иммуноглобулин или антистафилоккоковую плазму.

При хронических инфекциях применяют стафилоккоковый анатоксин и/или стафилоккоковую аутовакцину с целью создания антитоксического и антимикробного иммунета.

Антибиотикотерапия стафилоккоковых инфекций проводится под контролем антибиотикограммы.

|	следующая лекция ==>
ОСНОВНЫЕ ВОЗБУДИТЕЛИ ГСИ	|	СТРЕПТОКОККИ

Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет

Род Staphylococcus:S.aureus,S.epidermidis,S.saprophyticus семейство Micrococceae

Аэробы или факультативные анаэробы. Вызывают: абсцессы, экземы, отиты, маститы, эндометриты, циститы, пневмонии.

В лабораторию отправляют: раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделения из половых органов при эндометрите, кровь из яремной вены при септицемии.

Морфология: Гр +, Споры-, Капсула-, Подвижность. Кокки в форме грозди винограда

Рост: солелюбивые – желточно-солевой агар Чистовича, МПБ – обильное помутнение и слизистый осадок. МПА – крупные S-колонии лимонно-желтого цвета за счет каротиноидного пигмента, Кровяной агар – зона β-гемолиза

Биохимические свойства: ферментирует лактозу, сахарозу; выделяет NH4, H2, лецитиназа+(посев на желточную среду), ДНК-зная акт.+, плазмокоагуляция

Биопроба: 1)Дерматонектротическая– кроликам в ухо внутрикожно 0,2мл – 24-48 часов – гибель; 2)На котятах - спаивают 10-15мл фильтрата с молоком – рвота, понос, гибель; 3)Летальная проба-кроликам в/в гибель; 4)Вирулентность для мышей-подкожно, абсцесс, гибель.

Непатогенные: лецитиназа-, плазмокоагуляция-, гемолиз-, манит-, пробы-, фаготипирование-, ДНК-аза-, пигментирование-, у ПАТОГЕННЫХ ВСЕ ЭТИ пункты +

54) Бактериологическая диагностика рожи свиней. Специфическая профилактика заболевания.

Болеют свиньи(3месяца-год), ягнята(3нед и) +человек. Острая септическая форма – сине-красные пятна на коже, при хронической форме – в суставах, на клапанах сердце. Молниеносная форма – удушье, отек легких, гибель через сутки.

В лабораторию: кусочки паренхиматозных органов, трубчатая кость, сердце, сыворотка крови.

Морфология: Гр +, Споры-, Капсула- Подвижность-. Прямые или слегка изогнутые палочки располагаются попарно, одиночно и в виде скоплений. Микроаэрофил.

Рост: МПБ – слабое помутнение, пылевидный осадок “муаровые волны”; МПЖ – ершик, МПА – S-колонии, росинчатые, прозрачные, иногда с сероватым оттенком. Элективная среда – Сент-Иваньи.

Биохимические свойства: глюкозу, лактозу, галактозу – до газа и к-ты, H2S+, Каталаза-, Индол-

Биопроба – мышам в/м 0,1-0,2мл, голубям в/м 0,2-0,3мл, смотрим 6 суток

Серодиагностика: 1)РА на стекле (противорожистая рожистая сыворотка + центрифугированная культура с 1% формальдегида) 2)МФА для выявления возбудителя в мазках из патматериала с люминесцирующей сывороткой.

Профилактика: живая вакцина из штамма (не образующего H2S) ВР-2, ассоциированная вакцина против рожи и чумы свиней.

55) Лабораторная диагностика листериоза: бактериологическая и серологическая. Специфическая профилактика заболевания.

Listeriamonocytogenes.Поражения ЦНС, слепота, вертячка у овец и коз , заболевания половых органов, маститы, аборты, наблюдаются признаки септицемии, протекает остро и хронически.

В лабораторию: труп целиком, голова (для исследования мозга), паренх органы, аборт-плод, плод оболочки, молоко при маститах, истечение из половых органов, кровь.

Морфология: Гр +, Споры-, Капсула-, Подвижность-(+тольков молодой культуре при 20C). Палочки - поодиночке, парами, в виде палисада //// или V. Психрофил

Рост: Жидкие– едва заметное помутнение, слизистый осадок, плотные – S-колонии, росинчатой формы. Печеночные среды, глюкозные, Элективная среда с теллуритом калия и глицерином. Кровяной агар – зона β-гемолиза.

Биохимические свойства: МПЖ не разжижает, Молоко не изменяет, H2S-, Каталаза+, Салицин+, обесцвечивает краски

Биопроба: 1)конъюктивальная проба на морских свинках-развивается кератоконъюктивит; 2)дерматонекротическая проба-кроликам или морским свинкам внутрикожно в ухо-развивается очаговый некроз; 3)На мышатах сосунках-п/к гибел

Серодиагностика: РСК и РА с АГ 1 и 2 серогрупп, идентификация –РА на стекле. Экспресс-МФА

Профилактика – сухая живая вакцина из штамма АУФ (авирулентная ослабленная УФ)

Тесты	Патогенные стафилококки	Непатогенные стафилококки
Лецитиназная активность на ЖСА Чистовича	+	-
Коагуляция цитратной плазмы кролика	+	-
Гемолиз на кровяном агаре	+	-
Наличие фермента ДНК-азы	+	-
Пигментообразование	+	-
Ферментация маннита	+	-
Дермонекротическая проба на кролике	+	-
Летальная проба на кролике	+	-
Вирулентность для мышей	+	-
Фаготипирование	+	-

ПАТОГЕННЫЕ СТРЕПТОКОККИ.

Патогенные стрептококки – возбудители гнойно-воспалительных процессов различной локализации (ангина и скарлатина у человека, мыт лошадей, маститы у животных, стрептококковая септицемия птиц, кроликов, стрептококковый полиартрит), а также смешанных и вторичных инфекций (абсцесс, фурункул, нефрит, пиемия, сепсис и др.). Фекальные стрептококки могут вызвать воспаление кишечника и мочеполовых путей. При накоплении в пищевых продуктах стрептококки вызывают пищевые токсикозы (токсикоинфекции).

Важнейшие виды:

· гр. А. Str.pyogenes (гнойно-воспалительные процессы, ангина)

· гр. B. Str. agalactiiae (мастит коров);

· гр.С. Str. equi (мыт у лошадей).

· гр.D Enterococcus faecalis(энтероколиты, циститы),

· без группы Str. pneumoniae (диплококковая септицемия, пневмонии)

Патогенез и факторы вирулентности:

Многие патогенные стрептококки относятся к нормальной микрофлоре кожи и слизистых оболочек и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности. Образуют экзотоксины – гемолизин, лейкоцидин, летальный некротоксин; продуцируют ферменты вирулентности – гиалуронидазу, фибринолизин, ДНК-азу, РНК-азу, нейрамидазу и др. Образуют термостабильные эндотоксины.

Методы диагностики:

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

Материал для исследования:

при жизни – гной, молоко, слизь, соскобы эпителия, раневой экссудат, моча, кровь, кал; посмертно – пораженные органы.

Культивирование:посев на обогащенные питательные среды: МПА и МПБ с сывороткой крови, с сахаром, с кровью; особенности выделения возбудителя:факультативные анаэробы; оптимальная t 37 o С; предпочтительна атмосфера с 10% СО_2.18-24 ч.

Биохимические свойства:Стрептококки ферментируют углеводы – глюкозу, сахарозу, маннит и др. (образуют кислоту без газа); не обладают протеолитическими свойствами; на кровяном МПА вызывают бета-гемолиз (прозрачная зона) или альфа-гемолиз (зеленоватая зона).

ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИЕ ТЕСТЫ:

Применяются особые биохимические тесты для дифференциации отдельных видов стрептококков:

· для Str.pyogenes – гидролиз гиппурата натрия;

· для Str.agalactiae – свёртывание молока и CAMP-тест на скрытую гемолитическую активность;

· для Str. equi – отсутствие роста на среде с добавлением мытного анатоксина;

· для Str. pneumoniae – лизис 10%-й желчью;

· для патогенных энтерококков– редукция(обесцвечивание)метиленового молока, рост после прогревания при 60 о С и т.д.

БИОПРОБА:заражают подкожно или в/б белых мышей, кроликов, наблюдают гибель. Биопроба не всегда показательна.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ:Реакция преципитации в капиллярах для определения серологической группы по Лендсфилд. РА.

БИОПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ:

Мытный антивирус для лошадей;

Полужидкая формолвакцина против стрептококкоза;

Поливалентная ассоциированная формолвакцина против сальмонеллёза, пастереллёза и диплококковой септицемии молодняка.

СИНЕГНОЙНАЯ ПАЛОЧКА

КЛАССИФИКАЦИЯ: сем. Pseudomonadaceae,род Pseudomonas,

• вид Pseudomonas aeruginоsa

Методы диагностики:

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

Материал для исследования: гной и экссудат из очагов поражения, моча,сперма,молоко,паренхим.органы,трубчатая кость,трупы мелк.ж.

Микроскопия:Мелкая полиморфная, Гр - палочка, располагается одиночно, беспорядочно, споры -, капсула -, очень подвижная.

Культивирование. Аэроб.Растёт при температуре от 20 до 44 о С на простых пита-тельных средах. Очень неприхотлива, растёт даже при пересеве на физраствор NaCl.

Культуральные свойства.При росте выделяет водорастворим. пигменты: сине-зелёный - пиоцианин; флуоресцирующий желтый - пиовердин; красный - пиорубин; чёрно-коричневый - пиомеланин.Выделяет запах жасмина или земляничного мыла.

На МПБ интенсивное помутнение, постепенное окрашивание среды в зеленовытый цвет. На дне слизистый осадок, при встряхивании он поднимается в виде косички. На поверхности может быть пленка.

На МПА средние и крупные, серые, плоские колонии с матовой поверхностью, неровными краями. Колонии и среда прокрашиваются в зелёный цвет,иногда с радужным отблеском.

Биохимические свойства. Синегнойная палочка обладает оксидазной активностью. Имеет протеолитическую активность (вызывает порчу пищевых продуктов). Выделяет аммиак. МПЖ – разжижает воронкой. Молоко – свертывает и пептонизирует. На кровяном агаре часто гемолиз.

ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИЕ ТЕСТЫ:

• рост при 44 о С;
• тест с хлороформом (в МПБ хлороформ растворяет пиоцианин и опускается на дно в виде голубой жидкости);
• положительный тест на окисление глюкозы при отсутствии анаэробной ферментации (О/Ф тест) .

БИОПРОБА: заражение белых мышей (п/к, в дозе 0,2 мл) смывом с МПА.

СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА: РА на стекле с поли- и моновалентными сыворотками и живой культурой.

БИОПРЕПАРАТЫ:Псевдомонозная формолвакцина для норок; Диагностические сыворотки. Псевдомонозный лечебный бактериофаг, пиобактериофаг.

ПРОТЕЙ

КЛАССИФИКАЦИЯ: Сем. Enterobacteriaceae, Род. Proteus, виды:

• Proteus vulgaris(протей обыкновенный)
• Proteus mirabilis(протей удивительный)

Методы диагностики:

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

Материал для исследования: раневой экссудат, моча, истеч. из влагалища, фекалии, содержимое кишечника, паренхиматозные органы, аборт. плод. Пищевые продукты – при исследовании на свежесть. Корма. Смывы с поверхностей.

Морфология:Полиформные (разной длины) палочки, Гр.-, располагаются в мазке беспорядочно, одиночно, иногда образуют нити. Споры -, капсула -, подвижность ++ ( перитрих)- протей феноменально подвижен!!

Биохимические свойства.Обладает ярко выраженнымипротеолитическими свойствами:Выделяет Н₂S, индол, разжижает желатину; расщепляет мочевину, пептонизирует молоко. Расщепляет аминокислоту фенилаланин, что важно для диагностики. Расщепляет многие сахара на средах Гисса, но не изменяет лактозу и маннит.

Для ограничения ползучего роста протея поверхность питательных сред обрабатывают этиловым спиртом, подсушивают, а также используют элективные среды с желчью и желчными солями (среда Плоскирева).

ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИЕ ТЕСТЫ:

· Посев по Щукевичу в конденсационную воду скошенного агара (ползучий рост)

· Рост на трёхсахарном агаре Олькеницкого (скос малиновый, столбик чёрный)

· Расщепление фенилаланина; зелёное окрашивание при нанесении реактива хлорида железа на агар с фенилаланином.

БИОПРОБА:Б.мышам п/кож или в/брюшинно 0,5 мл бульонной культуры–гибель.

СЕРОДИАГНОСТИКА– РСК; РА со специфическими сыворотками

БИОПРЕПАРАТЫДиагностические сыворотки. Аг-диагностикумы для РА. Потейные лечебные бактериофаги. Пиобактериофаг.

ООИ СИБИРСКАЯ ЯЗВА

КЛАССИФИКАЦИЯ: семейство Bacillaceae,род Bacillus,

· вид Bacillus anthracis

Факторы вирулентности:образование капсулы и экзотоксина.

Методы диагностики:

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД.

Материал для исследования:Вскрывать трупы при подозрении на сибирскую язву запрещено: опасность распространения спорообразующего возбудителя во внешней среде!!

2. От трупа – ухо, отрезанное с той стороны, на которой лежит труп; пред-варительно его туго перевязывают у основания в 2-х местах, подкладывают снизу поддон, отрезают между лигатурами, место отреза прижигают; ухо заворачивают в слегка увлажнённую дезинфектантом ткань и помещают в герметичную тару. + мазки крови из надреза уха.

3. От трупов и туш свиней – участки отёчной соединительной ткани гортани, миндалин, заглоточные и подчелюстные лимфоузлы.

4. При подозрении на с.я. в ходе вскрытия трупа – вскрытие прекращают, берут для исслед. кусочки селезёнки, печени, изменённые лимфоузлы, кровь.

Посуду с материалом помещ. во влагонепрониц. тару, опечатывают, отпр. в лабораторию с нарочным с сопроводительным документом. + звонок. В лаборатории такой материал исследуют вне очереди, любой степени свежести.

Микроскопия:Окраска по Граму, на капсулу по Ребигеру и на спору. Морфология Bacillus anthracisзависит от материала, из которого деланы мазки.

4. В старых культурах при доступе О₂ образуются округлые эндоспоры, затем вегетативные части микробных клеток отмирают, остаются споры.

Культуральные свойства:B.anthracis–факультативный анаэроб, t оптимум 35-36 о С, неприхотливый к питательн.средам, время роста 18-24 ч.

Для выявления способности образовывать капсулы – посев на специальные кровяные среды типа среды ГКИ. На них образ. гладкие колонии в S-форме + капсула.

Фосфатазная активность (-). Тест на фосфатазную активность: посев на среду с фенолфталеин-фосфатом (ФФФ-агар). После получения колоний на этой среде под крышку вносят каплю нашатырного cпирта. Фосфатазаположительные колонии розовеют, а колонии B.anthracis остаются белыми.

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД(B.anthracis вирулентна, антракоиды–нет)

Одновременно с посевом материала на пит.среды суспензию исслед. материала в физ. растворе вводят 2-м белым мышам п/к в спину(0,2-0,5 мл)или морским свинкам п/к в живот(0,5-1,0 мл),гибель через 1-3 суток от септицемии. Наблюдение за живыми до10 сут. Так же проводят заражение выделенной культурой возбудителя.

Фагодиагностика: используются фаги К-ВИЭВ, Гамма МВА.При нанесении специфического фага на зону посева культуры–отсутствие роста.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

1. Прямой МФА и ИФАдля исследования материала из очага поражения.

2. РДискП с полученной чистой культурой для её идентификации.

3. РП по Асколи для исследования кож.сырья и пат.материала (ухо).

Если материал несвежий, культуру возбудителя сибирской язвы бывает выделить невозможно из-за произошедшего лизиса микроорганизмов. В этом случае также применяют РП по Асколи.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МЕТОД: ПЦР – обнаружение генов, кодирующих синтез токсина и капсулы.

АЛЛЕРГИЧЕСКИЙ МЕТОД:Применяется только у людей: аллерген – антраксин п/к в предплечье (как реакция Манту). У больных, переболевших и привитых – зона воспаления > 15 мм.

БИОПРЕПАРАТЫ:

1. Живая вакцина из бескапсульного эталонного штамма СТИ.

2. Живая вакцина из штамма 55.

4. Ассоциированная живая жидкая вакцина против сибирской язвы и эмкара КРС.

Гипериммунная лечебно-профилактическая сыворотка и гамма-глобулин.

Диагностические биопрепараты: преципитирующая сыворотка и стандартный Аг для РП, люминесцирующие сыворотки для МФА, диагностические бактериофаги.

Последнее изменение этой страницы: 2016-09-20; Нарушение авторского права страницы