Стафилококковая инфекция микробиологическая диагностика

Методы микробиологической диагностики стафилококковых заболеваний отражены в схеме 1. Выполняется следующий комплекс методов исследования.

Бактериоскопический метод – микроскопия мазков из материала от больного, окрашенных по Граму. Выявление в мазках кокков, располагающихся небольшими группами по 2-3 бактерии; типичное расположение в виде гроздьев винограда характерно для чистых культур стафилококка (рис. 1 – цветная вкладка).

Бактериологический метод.Исследуемыйматериал засевают на чашки с желточно-солевым (ЖСА) и кровяным МПА, инкубируют при 37 0 С сутки. На 2 день учитывают характер

роста колоний на обеих средах. На желточно-солевом агаре колонии стафилококка имеют ровные края, гладкую поверхность, вокруг колонии образуется радужный венчик в результате расщепления лецитина яичного желтка ферментом лецитовителлазой; цвет пигмента колоний варьирует от золотистого до белого. На кровяном МПА вокруг колоний образуются зоны

гемолиза. Из типичных для стафилококка колоний делают мазок, окрашивают его по Граму, микроскопируют. Оставшуюся часть колонии пересевают на скошенный МПА для получения чистой культуры. На 3 день проводят идентификацию выделенной культуры стафилококка с дифференциацией основных видов в соответствии с таблицей 2, определяют чувствительность к антибиотикам методом бумажных дисков и фаговар (набор для фаготипирования состоит из фагов 21 типа, разделенных на 4 группы; при внутрибольничных инфекциях наиболее часто встречаются фаговары 77 и 80).

Таблица 1.Этиология бактериальных раневых и гнойно-воспалительных инфекций

Аэробы

Анаэробы

Грамположительные бактерии Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Erysipelotrix rhusiopathiae Грамотрицательные бактерии Burkholderia cepacia, Citrobacter koseri, Edwardsiella tarda, Eikenella corrodens, Enterobacter spp, Escherichia coli, Haemophylus influence, Klebsiella spp, Listeria monocytogenes, Moraxella catarrhalis, Proteus spp, Pseudomonas spp, Salmonella enterica, Serratia spp, Spirillum minus, Streptobacillus moniliformis, Vibrio vulnificus

Неспорообразующие грамположительные бактерии Bacteroides spp, Prevotella spp, Porphiromonas spp, Fusobacterium spp, Veilonella spp Неспорообразующие грамотрицательные бактерии Peptostreptococcus spp, Propionibacterium spp Cпорообразующие грамположительные бактерии Clostridium perfringens, Clostridium novy, Clostridium oedematiens, Clostridium septicum, Clostridium sordelli, Clostridium histolyticum, Clostridium sporogenes, Clostridium ramosum

Схема 1. Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций
Материал: гной, раневое отделяемое, пунктаты из полостей и абсцессов, кровь, мокрота, моча, ликвор, рвотные массы, испражнения, остатки пищи.
Микроскопический метод Выявление грамположительных кокков (группами по 2-3 клетки) в мазках из материала от больного, окрашенных по Граму Серологический метод РНГА или РН для определения α-антитоксина в сыворотке крови больных хроническими стафилококковыми инфекциями. ИФА для определения антител к стафилококку. Имеет вспомогательное значение Бактериологический метод 1 день. Посев материала на чашки с желточно-солевым (ЖСА), кровяным МПА, сахарным МПБ. 2 день -учет характера роста колоний. На ЖСА колонии стафилококка с ровными краями, гладкой поверхностью, радужным венчиком вокруг, цвет - от золотистого до белого.	На кровяном МПА - зоны гемолиза, в МПБ –равномерное помутнение. В мазке из колоний в окраске по Граму – кокки в виде гроздьев винограда. Пересев оставшейся части колонии на скошенный МПА для получения чистой культуры, а с сахарного МПБ на кровяной МПА и ЖСА для получения изолированных колоний. 3 день - идентификация выделенной культуры стафилококка, дифференциация видов по биохимическим свойствам, определение чувствительности к антибиотикам и фаговара. Выделение чистой культуры с ЖСА и кровяного МПА. 4 день.Заключение о виде стафилококка. Идентификация культуры, выделенной из сахарного МПБ 5 день.Заключение о виде стафилококка, выделенного из сахарного МПБ.

Таблица 2. Дифференциация основных видов стафилококка

Признаки	Виды стафилококков
S. aureus	S. epidermidis	S. saprophyticus
Плазмокоагулаза	+	-	-
Лецитиназа	+	-	-
Альфа-токсин	+	-	-
Анаэробная ферментация глюкозы	+	+	-
Анаэробная ферментация маннита	+	-	-
Чувствительность к новобиоцину	S	S	R

Обозначения: (+) – наличие признака; (-) – отсутствие признака; S - чувствительный; R – резистентный.

Для выявления плазмокоагулазы цитратную плазму крови кролика разводят в 2 раза, разливают по 0,4 мл в пробирки, куда вносят петлей культуру стафилококков. Результаты регистрируют через 2, 4, 24 часа. При наличии плазмокоагулазы образуется сгусток.

В некоторых случаях у выделенных чистых культур стафилококка определяют наличие ДНК-азы, каталазы, лизоцимной активности, фибринолизина, гиалуронидазы.

Лизоцимную активность выявляют по зонам просветления вокруг колоний стафилококка при его посеве на МПА в чашках Петри с культурой Micrococcus luteus.

Определение ДНК-азы. Суточную агаровую культуру стафилококка засевают на МПА в чашке Петри, содержащий ДНК. После инкубации посевов при температуре 37 0 С в течение 18-24 часов поверхность МПА заливают 1 N раствором соляной кислоты. Наличие ДНК-азы характеризуется появлением зоны просветления вокруг колоний.

Каталазный тест. Чистую культуру стафилококка вносят в каплю 3%-10%-го раствора перекиси водорода на стекле и растирают круговыми движениями. При наличии каталазы перекись водорода разлагается с образованием пузырьков кислорода.

Cерологический методв диагностике стафилококковых инфекций имеет вспомогательное значение, используясь, в основном, для диагностики хронических процессов (остеомиелит, септикопиемия и др.). Для определения антител к токсину стафилококка применяют РНГА с эритроцитарным диагностикумом, нагруженным α-токсином стафилококка или РН (реакция нейтрализации гемолитической активности стафилококкового токсина антитоксинами сыворотки крови больного в присутствии эритроцитов кролика). У здоровых лиц титр стафилококкового антитоксина составляет 0,5-4 АЕ. Разработан также ИФА.

Клинически значимые виды стафилококка Коагулазоположительные: S. aureus, S. hyicus Коагулазоотрицательные: S. epidermidis, S. saprophyticus, S. haemolyticus, S.hominis

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Бактериоскопический метод– микроскопия мазков из материала от больного, окрашенных по Граму. Выявление в мазках кокков, располагающихся небольшими группами по 2-3 бактерии; типичное расположение в виде гроздьев винограда характерно для чистых культур стафилококка (рис. 1 – цветная вкладка).

Бактериологический метод. Исследуемый материал засевают на чашки с желточно-солевым (ЖСА) и кровяным МПА, инкубируют при 37 0 С сутки. На 2 день учитывают характер

Таблица 1. Этиология бактериальных раневых и гнойно-воспалительных инфекций

Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Erysipelotrix rhusiopathiae

Неспорообразующие грамположительные бактерии

Неспорообразующие грамотрицательные бактерии

Peptostreptococcus spp, Propionibacterium spp

Cпорообразующие грамположительные бактерии

Clostridium perfringens, Clostridium novy, Clostridium oedematiens, Clostridium septicum, Clostridium sordelli, Clostridium histolyticum, Clostridium sporogenes, Clostridium ramosum

Схема 1. Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций

Материал: гной, раневое отделяемое, пунктаты из полостей и абсцессов, кровь, мокрота, моча, ликвор, рвотные массы, испражнения, остатки пищи.

Выявление грамположительных кокков (группами по 2-3 клетки) в мазках из материала от больного, окрашенных по Граму

РНГА или РН для определения α-антитоксина в сыворотке крови больных хроническими стафилококковыми инфекциями. ИФА для определения антител к стафилококку. Имеет вспомогательное значение

1 день. Посев материала на чашки с желточно-солевым (ЖСА), кровяным МПА, сахарным МПБ.

2 день - учет характера роста колоний. На ЖСА колонии стафилококка с ровными краями, гладкой поверхностью, радужным венчиком вокруг, цвет - от золотистого до белого.

На кровяном МПА - зоны гемолиза, в МПБ –равномерное помутнение. В мазке из колоний в окраске по Граму – кокки в виде гроздьев винограда. Пересев оставшейся части колонии на скошенный МПА для получения чистой культуры, а с сахарного МПБ на кровяной МПА и ЖСА для получения изолированных колоний.

3 день - идентификация выделенной культуры стафилококка, дифференциация видов по биохимическим свойствам, определение чувствительности к антибиотикам и фаговара. Выделение чистой культуры с ЖСА и кровяного МПА.

4 день. Заключение о виде стафилококка. Идентификация культуры, выделенной из сахарного МПБ

5 день. Заключение о виде стафилококка, выделенного из сахарного МПБ.

Таблица 2.Дифференциация основных видов стафилококка

Анаэробная ферментация глюкозы

Анаэробная ферментация маннита

Чувствительность к новобиоцину

Обозначения: (+) – наличие признака; (-) – отсутствие признака; S- чувствительный;R– резистентный.

Для выявления плазмокоагулазыцитратную плазму крови кролика разводят в 2 раза, разливают по 0,4 мл в пробирки, куда вносят петлей культуру стафилококков. Результаты регистрируют через 2, 4, 24 часа. При наличии плазмокоагулазы образуется сгусток.

Лизоцимную активностьвыявляют по зонам просветления вокруг колоний стафилококка при его посеве на МПА в чашках Петри с культуройMicrococcus luteus.

Определение ДНК-азы.Суточную агаровую культуру стафилококка засевают на МПА в чашке Петри, содержащий ДНК. После инкубации посевов при температуре 37 0 С в течение 18-24 часов поверхность МПА заливают 1Nраствором соляной кислоты. Наличие ДНК-азы характеризуется появлением зоны просветления вокруг колоний.

Каталазный тест.Чистую культуру стафилококка вносят в каплю 3%-10%-го раствора перекиси водорода на стекле и растирают круговыми движениями. При наличии каталазы перекись водорода разлагается с образованием пузырьков кислорода.

Cерологический метод в диагностике стафилококковых инфекций имеет вспомогательное значение, используясь, в основном, для диагностики хронических процессов (остеомиелит, септикопиемия и др.). Для определения антител к токсину стафилококка применяют РНГА с эритроцитарным диагностикумом, нагруженным α-токсином стафилококка или РН (реакция нейтрализации гемолитической активности стафилококкового токсина антитоксинами сыворотки крови больного в присутствии эритроцитов кролика). У здоровых лиц титр стафилококкового антитоксина составляет 0,5-4 АЕ. Разработан также ИФА.

Организация профилактики стафилококковых инфекций и изучение путей их распространения не мыслятся без микробиологических исследований и во многом зависят от высокого качества работы лабораторий. Вместе с тем целый ряд инструкций устарел, а рекомендации носят разрозненный характер и не удовлетворяют практических работников.

Мы попытались кратко описать методы основных микробиологических исследований, оправдавших себя в практической и научной работе ряда лечебных и санитарных учреждений.

Исследования для обнаружения патогенных стафилококков производятся с целью:

диагностики заболевания;
выявления бактерионосителей среди работников детских, лечебных учреждений и пищевых объектов;
выявления источника заболевания;
установления факторов передачи инфекций — исследование пищевых продуктов, (воздуха, зараженных предметов и т. д.

Получение положительного результата должно быть правильно истолковано в зависимости от обстоятельств: наличия заболевания у обследуемого или в окружении, характера материала, доставленного для исследования, профилактических и диагностических целей исследования и т. д.

В практической работе при определении возбудителя, помимо характерных признаков стафилококков, очень важно знать и правильно оценить отклонения от типичных свойств, возникающие в результате целого ряда причин. Они могут касаться всех свойств возбудителя, а именно: морфологических, культур альноферментативных и серологических.Наиболее часто встречающиеся отклонения от характерных свойств стафилококков Грани между патогенными и непатогенными для человека стафилококками в…

Проводя идентификацию стафилококка, патогенные свойства необходимо изучать не только у колоний, имеющих зону гемолиза, но и у культур, лишенных гемолитических свойств на кровяном агаре, так как лишенные гемолитических свойств, они могут обладать всеми остальными признаками патогенности и могут быть болезнетворными. Определяя патогенность выделенной культуры, следует учитывать, что утрата коагулазы не всегда совпадает с потерей патогенности.…

В оценке результатов посевов крови могут возникать трудности при выделении непатогенных коагулазоотрицательных стафилококков. В таких случаях речь идет чаще всего о внешнем загрязнении посевов микробами из воздуха, с кожи больных и т. д. Но могут встречаться исключения: у новорожденных, ослабленных детей септический процесс иногда вызывается сапрофитной флорой; у септических больных (при повторных посевах крови), подвергающихся…

При лечении заболеваний, вызванных стафилококками, необходимо учитывать, что в результате широкого применения антибиотиков (с лечебными и профилактическими целями) появились устойчивые к антибиотикам разновидности и возникли в связи с этим большие затруднения в лечении больных. Поэтому перед началом лечения очень важно установить чувствительность выделенного микроба к антибиотикам, а при необходимости — к сульфаниламидам и препаратам нитрофуранового…

Логическим выводом из вышеперечисленных фактов является необходимость использования комплексного метода лабораторной диагностики стафилококкового заболевания, а также творческий подход к проведению бактериологического исследования, оценке результатов и формулировке ответов. При оформлении ответа надо указывать основные свойства выделенных стафилококков. В качестве примера можно рекомендовать следующие формулировки ответов. Положительный результат выдается при получении положительных (не менее четырех) признаков патогенности…

При диагностических исследованиях с целью быстрейшего установления диагноза и назначения соответствующего лечения допускается выдача предварительного положительного ответа. Такой ответ выдают на третий день исследования в том случае, если выделенная культура имеет типичную морфологию, и например, обладает лецитиназой, гемолизином, вырабатывает золотистый пигмент. Ответ формулируют следующим образом: «Выделена стафилококковая культура, обладающая гемолитической, лецитиназной активностью, дающая золотистый пигмент,…

В том случае, когда результаты какой-либо из проб выражены неясно (сомнительная реакция гемолиза, задержка реакции коагуляции), целесообразно, особенно при проведении диагностических анализов, ответ выдавать по выделяемой микрофлоре независимо от наличия, всех или части, признаков патогенности стафилококка. Ответ формулируют следующим образом: «Выделена стафилококковая культура, обладающая дермо-некротоксином, гемолитической и лецитиназной активностью, но не дающая коагуляцию плазмы. Выделенная…

1й день. Бактериоскопия доставленного материала. Посев материала на чашки Петри с желточно-солевым агаром для выявления лецитиназного признака; с молочно-солевым агаром для изучения пигментообразования и с кровяным агаром изучения гемолитических свойств, а также в пробирки с бульоном, содержащим 6,5 и 10% поваренной соли. Засевают не более 1/10 объема питательной среды. Посевы помещают в термостат при 37°…

Фаготипирование проводится по эпидпоказаниям, для чего можно использовать стафилококковую культуру, выросшую за 3 часа в третьей пробирке с бульоном.Бактериоскопия Вторичный просмотр и учет колоний на чашках. Учет результатов плазмокоагуляции, лецитовителазной, гемотоксической реакции, а также пигментообразования, ферментации сред Гисеа, чувствительности к антибиотикам и фаготипирования. Просмотр колоний на чашках с кровяным и солевым агаром после высева из…

Род Staphylococcus включает 19 видов, патогенны для человека только некоторые: S.aureus, S.epidermidis и S.saprophyticus. Заболевания вызывают золотистые, реже – эпидермальные и еще реже – сапрофитные стафилококки.

Морфология, физиология. Отдельные ## имеют форму правильного шара, при размножении образуют скопления в виде гроздьев винограда (slaphyle–виноградная гроздь). В препаратах из пат материала (из гноя) располагаются поодиночке, парами или небольшими скоплениями. Золотистые стафилококки имеют способность образовывать нежную капсулу.

Стафилококки – факультативные анаэробы, но лучше развиваются в аэробных условиях, гр+. На поверхности плотных пит сред образуют круглые, выпуклые, пигментированные (золотистые, палевые, лимонно-желтые, белые) КОЛОНИИ с ровными краями; в жидких – равномерное помутнение. В лабораториях используют способность стафилококков размножаться в средах с большим количеством (6 -10 %) NaCl (ЖСА). Такую концентрацию соли др б!! не переносят Þ солевые среды являются элективными для стафилококков. Штаммы золотистых стафилококков, продуцирующие гемолизины, дают на кровяном агаре колонии, окруженные зоной гемолиза.

Имеют ФЕРМЕНТЫ – расщепляющие мн у/ды, белки. Диф-диагностич значение имеет тест на сбраживание глюк в анаэр усл-ях. Из ферментов, участвующих в патогенезе стафилококковых инфекций, только плазмокоагулаза и частично ДНКаза характерны для S.aureus. Другие ферменты (гиалуронидаза, протеиназа, фосфатаза, муромидаза) непостоянны (но чаще продуцируются S.aureus). Стафилококки ситезируют бактериоцины. Устойчивы к пенициллину (пенициллиназа).

Антигены. В-ва # стенки: пептидогликан, тейхоевые кислоты, белок А, типоспецифические агглютиногены, а также капсула, имеющая ПС прир. Пептидогликан имеет общ АГ с пептидогликанами микрококков и стрептококков. Антигенность тейхоевых кислот связана с аминосахарами. Белок А золотистого стафилококка способен к неспецифическому соединению с Fc-фрагментом IgG, в связи с чем он агглютинируется нормальной человеческой сывороткой. У стафилококков есть 30 белковых типоспецифических антигенов. Но внутривидовая дифференциация по Аг структуре в практике не используется.

Патогенность. Повреждающее действие на ## и ткани Ò чка оказывают ТОКСИНЫ И ФЕРМЕНТЫ. Также к факторам патогенности можно отнести КАПСУЛУ, препятствующую фагоцитозу и связывающую комплемент, а также белок А, инактивирующий комплемент и тормозящий опсонизацию при взаимодействии с Fc-фрагментом IgG.

S.aureus способен выделять ряд токсинов, в частности ЛЕЙКОЦИДИН, который оказывает губительное действие на фагоцитирующие ##, главным образом ПМЯ и МКфаги. Гемолизины (α,β,дельта,γ) оказывают лизирующее действие на эр чка и ж!! (кролика, лошади, барана). Основным из них является α-токсин, продуцируемый S.aureus. Помимо гемолитического, этот яд обладает кардиотоксическим д-ем, вызывает спазм коронарных сосудов и остановку Y в систоле, он поражает нервные ## и нейроны, лизирует мембраны и лизосомы ##, что приводит к освобождению лизосомальных ферментов.

Возникновение пищевых отравлений стафилококковой природы связано с действием ЭНТЕРОТОКСИНОВ, продуцируемых золотистыми стафилококками. Известно 6 антигенно различных энтеротоксинов (АВСDЕF).

ЭКСФОЛИАТИВНЫЕ токсины вызывают у новорожденных пузырчатку, локальное буллезное импетиго, генерализованную скарлатиноподобную сыпь. Заболевания сопровождаются внутриэпидермальной отслойкой эпителия кожи, образованием сливающихся пузырей, жидкость в которых стерильна. Фокус стафилококковой инфекции находится чаще всего при этом в пупочной ранке.

ЭКЗОФЕРМЕНТЫ: плазмокоагулаза осуществляет свертывание плазмы (Б!! как бы одеваются в фиброзный чехол, защищающий их от фагоцитоза). Большие концентрации коагулазы, в организме больного, приводят к ↓ свертываемости периферической крови, нарушению гемодинамики, прогрессирующему кислородному голоданию тканей.

Гиалуронидаза способствует распространению стафилококков в тканях. Лецитиназа разрушает лецитин, входящий в состав оболочек клеток, вызывает лейкопению. Фибринолизин растворяет фибрин, отграничивающий местный воспалительный очаг, чем способствует генерализации патологического процесса. Патогенетические свойства других экзоферментов стафилококков (ДНКаза, мурамидаза, протеиназа, фосфатаза), часто сопровождающих коагулазную активность, еще не определены.

Экология и распространение. В первые дни жизни человека стафилококки поселяются на слизистых оболочках рта, носа, в кишечнике, а также на коже, входят в состав формирующейся НОРМАЛЬНОЙ МКФ ТЕЛА ЧКА.

Стафилококки постоянно поступают в окр среду от человека. Они присутствуют на предметах обихода, в воздухе, в воде, в почве, на растениях. Но их болезнетворная активность различна, особое внимание уделяется золотистым стафилококкам как потенциально патогенным для человека. При контакте с источником инфекции носителями S.aureus становятся не все люди. Формированию БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА способствуют низкое содержание SIgA в носовом секрете и другие проявления функциональной недостаточности иммунной системы. У таких лиц формируется резидентное носительство, т. е. постоянным местом обитания стафилококков становится слизистая оболочка носа, на которой мкÒ интенсивно размножаются и выделяются в окружающую среду массивными дозами. В ЛЕЧЕБНЫХ УЧРЕЖДЕНИЯХ их источником явл больные с открытыми гнойно-воспалительными процессами (инфекция передается контактным путем). Этому способствует длительность выживания стафилококков на окружающих предметах.

Хорошо ПЕРЕНОСЯТ высушивание, пигмент защищает их от губительного действия солнечного света (прямые солнечные лучи убивают их только через несколько часов). При комн t° они остаются жизнеспособными на предметах ухода за больным в течение 35–50 дней, на предметах твердого инвентаря – десятки дней. При кипячении гибнут мгновенно, чувствительны к дезинфектантам, к БРИЛЛИАНТОВОЙ ЗЕЛЕНИ, что позволяет широко применять её для лечения поверхностных воспалительных заболеваний кожи.

Патогенез заболеваний человека. Способны поражать любую тк чского Ò. Это местные гнойно-воспалительные процессы (фурункулы, карбункулы, нагноения ран, бронхиты, пневмонии, отит, ангина, конъюнктивит, менингит, эндокардит, энтероколит, пищ отравления, остеомиелит). ГЕНЕРАЛИЗАЦИЯ любой формы местного процесса завершается сепсисом или септикопиемией. У лиц с иммунодефицитными состояниями стафилококковые инфекции развиваются чаще.

Иммунитет. Взрослые устойчивы, т.к. имеют естественные защитные механизмы и специфические Ат, которые приобретаются в течение жизни при контакте с больными и носителями. В процессе стафилококковой инфекции возникает сенсибилизация организма.

В формировании им-та имеют значение как антимикробные, так антитоксические и антиферментные АТ. Степень защиты определяется их титром и местом действия. Большую роль играют секреторные IgA, обеспечивающие местный иммунитет слизистых оболочек. Ат к тейхоевым кислотам определяются в сыворотках кр взрослых и детей с тяжелыми стафилококковыми инфекциями: эндокардитом, остеомиелитом, сепсисом.

Лаб диагностика. Материал (гной) подвергают БАКТЕРИОСКОПИИ и высевают на пит среды. Кровь, мокроту, фекалии исследуют БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИМ методом. После выделения чистой культуры по ряду признаков определяют видовую принадлежность. В случае выделения S.aureus определяют плазмокоагулазу, гемолизин, А-протеин.

СЕРОДИАГНОСТИКА: РП(альфа-токсин), РНГА, ИФА.

Для установления источника и путей распространения инфекции, выделенные культуры ФАГОТИПИРУЮТ. Лабораторный анализ непременно включает определение чувствительности выделенной культуры или культур к антибиотикам.

Профилактика и лечение. Профилактика направлена на выявление носителей S.aureus, гл образом среди персонала мед учреждений, с целью их санации. Особое внимание уделяется профилактике стафилококковых инфекций у новорожденных.

Для лечения острых стафилококковых заболеваний назначаются антибиотики, выбор которых определяется чувствительностью выделенной культуры к набору препаратов. При септических процессах вводят противостафилококковый иммуноглобулин или антистафилококковую плазму. Для лечения хронических стафилококковых инфекций (хрониосепсис, фурункулез и др.) применяют стафилококковый анатоксин, аутовакцину, которые стимулируют синтез антитоксических и антимикробных антител.

Дата публикования: 2015-01-26 ; Прочитано: 620 | Нарушение авторского права страницы

studopedia.org - Студопедия.Орг - 2014-2020 год. Студопедия не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования (0.002 с) .

Род Staphylococcus включает в себя более 20 видов, которые подразделяются на две группы – коагулазоположительные (S.aureus ) и коагулазоотрецательные (S.saprophyticus). Патогенными для человека являются коагулазоположительные стафилококки , но многие коагулазоотрецательные также способны вызывать заболевание, особенно у новорожденных (коньюктивит, сепсис, заболевание мочевыводящих путей и др.)

Морфология и тинкториальные свойства.

Гр+ палочки, шаровидные клетки, располагающиеся обычно в виде гроздьев, не имеют жгутиков, не образуют спор. Стафилококки – факультативные аэробы, лишь один вид S.saccharolyticus – строгий анаэроб.

Стафилококки не требовательны к питательным средам, хорошо растут на обычных средах, температурный оптимум для роста 35-37С, рН 6,2-8,4.

· На твёрдых средах колонии округлые, с ровными краями, выпуклые, непрозрачные, окрашены в цвет образуемого пигмента.

· Рост в жидкой культуре сопровождается помутнением, со временем выпадает рыхлый осадок.

Каталазопозитивны, активно гидролизуют белки и жиры. Ферментируют с выделением кислоты (без газа) глицерин, глюкозу, мальтозу, лактозу, сахарозу, маннит. Образуют различные ферменты – фибринолизин, лизоцим, ДНК-азу, желатиназу и др. Указанные ферменты во многом определяют их патогенность

У стафилококков более 50 типов антигенов. По специфичности антигены подразделяются на:

· Родовые (общие для всего рода Staphylococcus)

· Перекрестно реагирующие- антигены общие с изоантигенами эритроцитов, кожи и почек человека (с ними связанны аутоиммунные заболевания)

К числу видоспецифических относят белок А, который образует S.aureus. Белок А особенно активно синтезируется в логарифмической фазе роста, при температуре 41С, термолабилен, не разрушается трипсином. Уникальным его со-вом является способность связываться с Fc-фрагментом иммуноглобулинов IgG, в меньшей степени IgM и IgA.

Они хорошо переносят высыхание и остаются жизнеспособными неделями и месяцами в сухой, мельчайшей пыли, являясь источником пылевой инфекции. Прямой солнечный свет убивает их в течении многих часов, а рассеянный действует очень слабо. Устойчивы к высокой температуре, низкие температуры переносят хорошо. 3%-раствор фенола убивает их в теч. 15-30 мин., а 1%-раствор хлорамина за 1-2 мин.

Стафилококки могут поражать любую ткань и любой орган, это св-во стафилококков обусловлено наличием у них большого комплекса факторов патогенности.

Факторы адгезии - прикрепление стафилококков к клеткам тканей обусловлено их гидрофобностью

Комплекс секретируемых экзотоксинов:

· мембраноповреждающие токсины – альфа, бета, гамма и дельта. Они различаются по ряду свойств. Альфа токсин чаще обнаруживается у стафилококков, выделенных от человека.

· эксфолиативные токсины А и В различают по антигенным свойствам, отношению к температуре (А – термостабилен, В – термолабилен).

· истинный лейкоцедин – избирательно действует на лейкоциты, разрушая их.

· экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока.

Сильные алергирующие свойства. Стафилококковые аллергены способны вызывать реакции гиперчувствительности (как замедленного, так и немедленного типа). Стафилококки явл. главными виновниками кожных и распироторных аллергий.

Факторы, угнетающие фагоцитоз. Фагоцитоз угнетают капсула, белок А, токсины.

Энтеротоксины А, В, С1, С2, С3, D, E.

Стафилококки явл. постоянными обитателями кожи и слизистых оболочек и заболевания вызванные ими., могут иметь характер либо аутоинфекции (повреждение кожи и слизистых оболочек), либо экзогенной инфекции обусловленной контактно-бытовым, воздушно-капельным, воздушно-пылевым или алиментарным путём заражения.

Особое значение имеет носительство патогенных стафилококков, т.к. носители могут стать причиной стафилококковой инфекции. Носительство может быть временным, но особую опасность представляют лица, у которых оно является постоянным.

Патогенез и клиника.

Стафилококки проникают в организм через мельчайшие повреждения кожи и слизистых оболочек, вызывая различные заболевания – от юношеских угрей, до сепсиса. Стафилококки играют ведущую роль в гнойной хирургии. При сепсисе имеется гнойный очаг, из которого в кровь периодически поступает возбудитель, разносится по организму и поражает ретикулоэндотелиальную систему, в клетках которой он размножается, выделяя токсины и аллергены.

Существует, но обусловлен как гуморальными, так и клеточными факторами.

Основной метод – бактериологический; разработаны и внедрены серологические реакции. В случае необходимости прибегают к бактериологической пробе.

Материалом для бактериологического исследования служат кровь, гной, слизь из зева, носа, отделяемое ран, мокрота.

Материал засевают на кровяной агар (гемолиз), на молочно-солевой (молочно-желточно-солевой) агар. Выделенную культуру идентифицируют по видовым признакам, определяют у неё наличие основных признаков и факторов патогенности ( золотистый пигмент, гемолиз, плазмокоагулаза), обязательно проверяют чувствительность к антибиотикам, в случае необходимости проводят фаготипирование.

Из числа серологических реакций для диагностики применяют РПГА и ИФМ, в частности для определения антител.

Для определения энтеротоксигенности стафилококков используют 3 метода:

· серологический - с помощью специфических антитоксических сывороток в реакции преципитации в геле обнаруживают энтеротоксин и устанавливают его тип.

· биологический – внутривенное введение фильтра бульонной культуры стафилококка кошкам в дозе 2-3 мл. на 1 кг. Токсин вызывает у кошек рвоту и понос.

· непрямой бактериологический метод – выделение из подозрительного продукта чистой культуры стафилококка и определение у него факторов патогенности.

Наиболее простым и чувствительным является серологический метод обнаружения энтеротоксина.

Используют главным образом бета-лактамные антибиотики. При тяжёлых и хронических инфекциях – положительный эффект даёт специфическая терапия – применение аутовакцины, анатоксина, противостафилококового иммуноглобулина, антистафилококковой плазмы.

Для создания искусственного иммунитета применяют стафилакоковый анатоксин.

Читайте также: