Стафилококковый энтеротоксин б введение интратрахеально

Энтеротоксин взаимодейству­ет с эпителием желудка и кишечника и активирует ферментные систе­мы этих клеток, в частности, гуанилциклазу и аденилциклазу.

Это при­водит к увеличению в клетках кишечного и желудочного эпителия цик­лического аденозинмонофосфата (цАМФ) и циклического гуанидин-монофосфата (цГМФ).

Также увеличивается синтез гистамина, простагландинов, кишечных гормонов и др.

Все эти вещества вызывают увеличение секреции жидкости (и соответственно солей) в просвет ЖКТ.

Вследствие этого развивается обильная рвота и диарея, приводящие к выраженной гиповолемии и нарушению электролитного баланса.

Дей­ствие токсинов прекращается после отторжения клеток кишечного эпи­телия, с этим связана кратковременность течения ПТИ.

Цитотоксины,в отличие от энтеротоксина, вызывают повреж­дение мембраны клеток кишечного эпителия.

Это приводит к уве­личению секреции жидкости в просвет ЖКТ и снижает функцию всасывания.

Кроме этого, увеличивается проницаемость кишечной стенки для токсинов, которые попадают в кровь, проникают в раз­личные органы, связываются с митохондриями клеток печени, по­чек, селезенки, легких.

Возникает повреждение эндотелия сосудов, что приводит к развитию геморрагических явлений.

Все это вызывает развитие интоксикации, нарушение микроциркуляции и местные воспалительные изменения слизистой оболочки кишки.

Иногда возбудитель проникает непосредственно в кровь, в резуль­тате чего может развиться сепсис.

Диагностика ПТИстроится на наличии характерной клиниче­ской картины, данных анамнеза (употребление пищи с просрочен­ным сроком годности, недоброкачественно приготовленной и др.), которые необходимо подтвердить бактериологическими методами исследования.

При стафилококковых отравлениях инкубационный период обычно продолжается от 2 до 4 часов (иногда сокращается до 30 минут и редко удлиняется до 6 часов).

Начало бурное — появляет­ся тошнота, многократная и болезненная рвота, редкие схваткооб­разные боли в эпигастрии, часто присоединяются боли в суставах.

В момент начала заболевания диарея может отсутствовать (в 50% случаев) или появляется позже.

Стул жидкий, не частый, без пато­логических примесей.

Температура тела нормальная или субфебрильная.

Отмечается слабость, бледность, головокружение, гипотензия, иногда судороги икроножных мышц.

Все эти явления крат­ковременные, обычно через 1—2 суток наступает улучшение и вы­здоровление. Течение болезни сравнительно легкое.

Отравления, вызванные токсинами клостридий, протекают зна­чительно тяжелее.

Заболевание начинается с болей в животе, пре­имущественно в пупочной области, нарастает общая слабость, стул учащается до 20 раз в сутки, бывает обильным, водянистым, ино­гда принимает вид рисового отвара.

Рвота и жидкий стул могут привести к выраженному обезвоживанию (судороги, заостренные черты лица, морщинистая кожа кистей, не расправляющиеся складки кожи, сгущение крови).

Может развиться картина некротического энтерита, который проявляется сильными болями в животе, тош­нотой, рвотой, жидким стулом, иногда с примесью крови.

Заболе­вание протекает крайне тяжело, летальность — свыше 30%.

Диагностика.

Распознавание стафилококкового отравления в большинстве случаев затруднений не вызывает.

Имеют значение анамнез (употребление подозрительных продуктов, групповой ха­рактер заболеваний), короткий инкубационный период, режущие боли в животе при нормальной (или субфебрильной) температуре, отсутствие выраженного поноса, быстрое выздоровление.

Обнару­жение в подозрительных продуктах, рвотных массах или промыв­ных водах энтеротоксических штаммов стафилококка служит под­тверждением диагноза.

При подозрении на отравление, вызванное клостридиями, для подтверждения диагноза необходимо бактериологическое исследо­вание.

Неотложная помощь

1. Для удаления невсосавшихся токсинов используется промыва­ние желудка водой или слабым раствором соды (2—4%) до чис­тых промывных вод.

2. Назначается солевое слабительное.

3. Для купирования изжоги показан пероральный прием 0,25% рас­твора новокаина по 10—15 мл.

4. Проводится мощная инфузионная и дегидратационная терапия с коррекцией уровня электролитов и КЩС по общепринятым методикам.

5. Симптоматическая терапия.

6. Антибиотики при ПТИне показаны.

Исключение составляют генерализованные формы сальмонеллеза (тифоидная и септиче­ская) и ПТИ,вызванные клостридиями (угроза развития ана­эробного сепсиса).

БОТУЛИЗМ

Ботулизм— отравление токсинами бактерий ботулизма, про­текающее с симптомами тяжелого поражения ЦНС.

Эпидемиология.

Резервуар инфекции — травоядные животные, выделяющие Cl. botulinum с испражнениями.

В последующем из Сl. botulinum образуются споры, а при попадании их на пищевые продукты (обязательно в анаэробных условиях) выделяется токсин.

Источником болезни чаще являются грибы (маринованные, иногда соленые), вяленая рыба, реже — мясо, колбасы, ветчина домашнего консервирования (анаэробная среда).

Больной ботулиз­мом не заразен.

Патогенез.

Ботулотоксин не разрушается ферментами пище­варительного тракта.

Его особенностью является всасываемость че­рез слизистую оболочку желудка и кишечника, после чего послед­ний разносится током крови по всему организму.

Токсин избира­тельно поражает холинергические отделы нервной системы.

Ха­рактерные для ботулизма параличи различных групп мышц связы­вают с прекращением выделения ацетилхолина в нервных синап­сах, в то время как холинэстеразная активность существенно не нарушается.

Параличи мышц гортани, глотки и дыхательных мышц приводят к нарушению глотания и дыхания, что способствует воз­никновению аспирационных пневмоний, обусловленных вторич­ной микрофлорой.

Обычно больные погибают от паралича дыха­ния или от вторичной инфекции дыхательной системы.

Клиника.

Инкубационный период колеблется в пределах 6—24 часов, но может удлиняться до 6—10 дней.

Чем он короче, тем тяже­лее протекает заболевание и хуже прогноз.

Начало болезни острое, характерны умеренные динамические расстройства, тошнота, рвота, боли в животе, нечастый понос, ис­пражнения без патологических примесей.

По характеру течения вы­деляют тяжелую, среднетяжелую и легкую формы.

Тяжелая форма.

Инкубационный период 12—36 часов.

Появ­ляется слабость, выраженные глазные симптомы: диплопия, анизокория, мидриаз, иногда страбизм (косоглазие), двусторонний птоз век, ослабление зрения, часто отмечается вертикальный нистагм.

Темпе­ратура тела повышенная.

Возникают признаки развития расстройств дыхания: ощущение нехватки воздуха, стеснение и тяжесть в гру­ди, иногда боли в области сердца, невозможность глубокого вдоха.

Затем присоединяются поперхивание (парез мягкого неба), кашель, может развиться аспирационная пневмония, возможно появление симптомов токсического миокардита.

Среднетяжелая форма.

Инкубационный период 36—48 часов.

Отличается незначительной выраженностью перечисленных выше признаков: глазная симптоматика умеренная, слабость меньше, од­нако имеются затруднения при глотании, осиплость голоса, жаж­да, метеоризм, запоры.

Температура тела нормальная или несколь­ко повышенная.

Типично более медленное нарастание патологи­ческих симптомов и более быстрое обратное их развитие.

Легкая форма.

Инкубационный период 5—6 суток.

Данная фор­ма далеко не всегда может быть учтена, вследствие позднего обра­щения больного за помощью, слабой симптоматики и длительного инкубационного периода.

Диагноз ставится на основании анамнеза, клинического об­следования и лабораторных данных.

Наиболее важна офтальмоло­гическая симптоматика, не встречающаяся при других ПТИ.

В ла­бораторной диагностике важнейшим является обнаружение ботулинического токсина.

Неотложная помощь

1. Удаление невсосавшегося токсина производится промыванием желудка 2% раствором гидрокарбоната натрия и при помощи сифонных клизм.

2. Вводится специфическая антиботулиническая сыворотка.

При лег­кой форме— в первые сутки вводят в/м 2 дозы, на следующие сутки — 1 дозу каждого из 3-х типов сыворотки А, В, С. Всего на курс лечения вводят 2—3 дозы.

При среднетяжелой форме— в первые сутки вводят 4 дозы каждого типа в/м с интервалом в 12 часов, в дальнейшем — по показаниям; на курс лечения 10 доз.

При тяжелой форме— в первые сутки 6 доз, на второй день 4—5 доз. Всего на курс лечения 12—15 доз. Сыворотка вводится в/м, при тяжелых формах в/в, с интервалом в 6—8 часов.

3. Неспецифическая детоксикация (гемодез, глюкоза), форсирован­ный диурез, коррекция водного и электролитного баланса.

Они характеризуются антигенной специфичностью, термостабильностью, устойчивостью к действию формалина и пищеварительных ферментов. Устойчивы при диапозоне pH от 4.5 до 10.0. Энтеротоксины низкомолекулярные белки с м.м. от 26 до 34 кД со свойствами суперантиенов

66.(нашла с интернета )

Плазмокоагулазу выявляют путем внесения выделенной культуры в пробирку с цитратной плазмы кролика. Ее можно приготовить в любой лаборатории. У кролика из сердца берут 8 мл крови, вносят в пробирку с 2 мл 5% лимонно-кислого натрия и ставят в холодильник. После полной осадки форменных элементов плазму отсасывают в стерильную пробирку. Она может храниться в холодильнике 8-10 дней. Перед использованием ее разводят 1:5 (1 мл плазмы и 4 мл изотонического раствора хлорида натрия) и разливают в аглютинацийни стерильные пробирки по 0,5 мл. Полную петлю культуры стафилококков эмульгируют в плазме и помещают в термостат на 3 часа, затем оставляют при комнатной температуре на 18-20 часов. Предварительный учет свертывания плазмы проводят через 3 ч, окончательный - на второй день. Очень удобно пользоваться стандартной сухой цитратной плазмы кролика. Перед употреблением в ампулу добавляют 1 мл изотонического раствора хлорида натрия и после полного растворения ее разводят 1:5. Плазма человека малопригодна для постановки реакции плазмокоагуляции, поскольку в ней могут быть консерванты, лекарственные вещества, антитела, которые могут подавлять образование плазмокоагулаза.

Если выделена культура вызывает гемолиз, коагулирует плазму и дает положительную лецитовителазну реакцию, уже на третий день можно выдать результат на наличие S. aureus. Если культура обладает только плазмокоагулаза или только вителазну активность, для окончательного установления вида стафилококка необходимо определить дополнительные критерии патогенности: ферментацию маннита в анаэробных условиях, ДНК-азную активность, продукцию лизоцима, фосфатазы, а также определить чувствительность к новобиоцин.

67. Методы определения чувствительности к антибиотикам.

Чаще всего для определения чувствительности бактерий к антибиотикам используются два метода: метод дискови метод серийных разведений.

1. Метод дисков. Бумажные диски, пропитанные определенными антибиотиками, помещают на газон исследуемой бактериальной культуры в чашке Петри. Посевы инкубируют в течение 16-24 часов, после чего учитывают результаты опыта по образованию зон задерки роста бактерий.

По диаметру зон задержки роста ориентировачно судят о степени чувствительности бакторий к антибиотикам. Зона задержки до 15 мм указывает на слабую, до 25 мм – на среднюю и свыше 25мм – на высокую чувствительность. Более точные результаты получают при использовании метода серийных разведений.

2. Метод серийных разведений. Этот метод позволяет определить минимальную задерживающую концентрацию антибиотика для данного микроорганизма (МЗК) как на жидких, так и на плотных питательных средах.

МПБ разливают по 2мл в серрию пробирок. Готовят основной раствор антибиотика, ддля чего берут навеску антибиотика и растворяют в дистиллированной воде из расчета 1мг на мл растворителя.

Левомицетин предварительно растворяют в 96* этиловом спирте из расчета 0,25мл спирта на 1мг антибиотика; после полного растворения добавляют такое количество дистиллированной воды, чтобы раствор содежрал в 1мл 1 мгантибиотика.

Тетрациклин и окситетрациклин растворяют в сантинормальном растворе соляной кислоты из расчета 1мл на 1 мг антибиотика

Этиломицин сначало растворяют в чистом этиловом спирте из расчета 1 мл на 10мг эритромицина. После приготовления добавляют такое количество дистилированной воды, чтобы получить раствор, содержащий в 1мл1мг пнтибиотика

Эритромицин сначало растворяют в чистом этилом спирте из расчета 1 мл 1 мг антибиотика

Исходный материал антибиотика в количестве 2млвносят в первую пробирку с МПБ,перемещают и получают определенную его концентрацию.

Из первой пробирки 2мл разведенного антибиотика переносят во вторуу пробирку и после перешивания переносят 2мл в третью проьирку и т.д. до предпоследней, откуда 2мл выливают. Последняя пробирка является контролем, в ней нет антибиотика и она свидетельствует о пригодности среды для роста культуры.

После разведения антибиотика во все пробирки вносят по 0,1мл испытуемной бульонной культуры.Для этого используют 3-4 –часовые или 18-часовые культуры, разведенные МПБ в 50 раз. Пробирки помещают в термостат на 12-18 часов, но предварительно результаты можно учитывать через 6-8 часов.

По истечении необходимого срока инкубации определяют максимальное разведение антибиотика, которое еще подавляет рост культуры. Концентрация антибиотика в последней пробирке с видимой задержкой роста и представляет собой минимальную задерживающую концентрацию антибиотика (МЗК).

Штамм считается чувствительным к антибиотикам, если МЗК препарата для данного штамма соответствует концентрации этого препарата, создаваемой в организме.

Последнее изменение этой страницы: 2017-01-19; Нарушение авторского права страницы

Экзотоксины шаровидных малоподвижных неспорообразующих бактерий — стафилококков представляют собой смеси биополимеров, характеризующихся цитотоксичностью. Поражающее действие обусловлено наличием в их составе энтеротоксинов (греч. enteron — кишка), провоцирующих развитие у пораженных желудочно-кишечных интоксикаций, что приводит к временному выведению живой силы из строя.

Характеристика стафилококковых энтеротоксинов

Тип	Молекулярная масса	Число аминокислотных остатков	Эффективная доза ED50, мг/кг (макаки-резус)
Внутривенно	Перорально
А	0.00012	0.002
В	0.0001	0.0002
С	0.0002	-
С2	0.00005	0.003
D	-	0.0005
Е	0.0002	-

Исследованиями зарубежных специалистов установлено, что по совокупности свойств наиболее пригодным для боевого применения является SEB. К 1975 г. техни­ческая рецептура на основе этого токсина была принята на вооружение армии США и получила шифр PG. Она относится к инкапаситантам и предназначена для временного выведения живой силы из строя.

Основными путями поступления PG в организм являются органы дыхания, желудочно-кишечный тракт и открытые, раневые поверхности. Энтеротоксин избира­тельно нарушает водопроницаемость стенок кровеносных капилляров, пронизывающих эпителий тонкого кишечника, с одновременным раздражением эметического <ответственного за рвотные рефлексы) центра головного мозга, опосредствованным через симпатические и парасимпатические нервные волокна.

Признаки поражения PG в целом носят характер пищевых отравлений, наступают неожиданно и очень бурно после периода скрытого действия со средней продолжительностью 3 ч с разбросом от 30 мин до 6 ч в зависимости от дозы и пути поступления в организм. Период скрытого действия минимален при ингаляционном поражении аэрозолем PG и составляет от нескольких минут до нескольких десятков минут. Начальными симптомами являются усиливающиеся слюнотечение, тошнота и рвота. Потом начинаются сильная резь в животе и неудержимый кровавый понос. Симптомы сопровождаются высшей степени слабостью в сочетании с падением кровяного давления, снижением температуры тела, угнетением деятельности центральной нервной системы и затихают примерно через 24 ч; все это время пораженный абсолютно небоеспособен.

Поражения со смертельным исходом крайне редки и могут быть только у нездоровых, обессиленных людей или при отравлениях очень большими дозами PG. По оценкам специалистов, смертность при отравлениях PG не превышает 5%. Только при 250 LD₅₀ и более смертность несколько увеличивается в связи с дополнительным развитием отека легких.

Для людей средневыводящая из строя токсодоза PG при пероральном поступлении в организм ID₅₀ 0,0004 мг/кг, начальные признаки поражения отмечаются при ED₅₀ 0,000015 мг/кг. В случае заражения атмосферы аэрозолем PG ICτ₅₀ 0,02 мг·мин/л, хотя уже в концентрации 0,0005 мг/л при одноминутной экспозиции возникают тошнота и рвота. Значения ICτ₅₀ и ID₅₀ в сотни раз превышают временно выводящие из строя. Так, для обезьян при внутривенном введении энтеротоксина эффективная доза, вызывающая рвоту и понос, равна 0,0001 мг/кг, а смертельная LD₅₀ — 0,025 мг/кг, т. е. в 250 раз выше.

Стафилококковый энтеротоксин типа В — это линейный одноцепочечный полипептид, вторичная структура которого описывается частично деформированной спиралью с одной внутримолекулярной дисульфидной связью. Токсин не выделен в кристаллическом виде. Вещество PG — это очищенный и высушенный аморфный SEB, имеющий вид пушистого белого порошка без вкуса и запаха. Он гигроскопичен и растворяется в воде с образованием гелей.

Вещество PG термически устойчивее XR: в сухом виде оно выдерживает нагревание до температуры 80 °С и не теряет физиологической активности даже после 30-минутного кипячения в воде. Если учесть, что токсин отличается еще большей стабильностью в пищевых продуктах, то можно сделать вывод о непригодности к употреблению зараженного им продовольствия даже после кипячения.

Под действием формальдегида PG теряет свою физиологическую активность. Вещества окислительно-хлорирующего действия могут применяться для дезактивации PG, но реагируют с ним медленно.

Для получения PG на питательной среде, основу которой составляют мясопептонный агар-агар или картофель, в аэробных условиях инкубируют культуру соответствующего штамма золотистого стафилококка. Клетки культуры отделяют на бактериальном фильтре, фильтрат очищают, замораживают и образовавшиеся мелкие кристаллы воды удаляют в глубоком вакууме.

Для защиты от аэрозолей PG пригодны противогазы и респираторы. Лечение пораженных основано на использовании методов симптоматической терапии.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Staphylococcus aureus продуцирует целый ряд экзопротеинов, которые способствуют колонизации и развитию заболевания. Почти все штаммы производят группу гемолизинов и цитотоксинов. Главная функция этих белков — превратить локальные ткани в питательные вещества, необходимые для бактериального роста. Стафилококки продуцируют энтеротоксины, которые являются факторами патогенности и играют важную роль во всех заболеваниях, вызываемых стафилококками, от фурункула до сепсиса. Первичная функция энтеротоксинов in vivo, возможно, заключается в подавлении иммунного ответа к стафилококкам.

Основными продуцентами стафилококковых энтеротоксинов (СЭ) являются штаммы S. aureus, однако в настоящее время показано, что способностью образовывать энтеротоксины обладают также штаммы S. epidermidis, S. haemolyticus, S. xylosu, S. caprae, S. intermedius и S. hyicus, встречающиеся у животных и изредка у людей.

Установлено, что приблизительно 40-50% штаммов стафилококков, выделенных от здоровых людей, продуцируют СЭ.

S. aureus образует 21 термостабильных иммунологически различных типов СЭ (SEA, SEB, SEC, SED, SEE, SEI I, SEG, SEI, SEJ, SEK, SEE, SEM, SEN, SEO, SEP, SEQ, SER, SES, SET, SEU, SEV). СЭ являются внеклеточными белками стафилококков и синтезируются в виде одной полипептидной цепи. Несмотря на то, что этот класс токсинов назван энтеротоксинами, в строгом смысле слова они ими не являются, так как не вызывают накопления жидкости в лигированной петле кишечника кролика или диарейного синдрома в экспериментах на лабораторных животных. В большей мере эти токсины вызывают рвоту.

Кроме того, они стимулируют митогенную активность и продукцию лимфокинов в Т-лимфоцитах, усиливают летальную активность эндотоксинов липополисахаридов грамотрицательных бактерий, а также вызывают повышение температуры и гипотензию. Эти последние свойства характерны для пирогенных токсинов стрептококков, с которыми СЭ имеют целый ряд общих свойств.

а) Генетическое детерминирование продукции стафилококковых энтеротоксинов. Гены СЭ находятся на плазмидах, бактериофагах и островках патогенности. Ген для SEA, SEE, SEG, SEI, SEH локализован в хромосоме бактериальной клетки, однако генетическое картирование указывает на различную локализацию гена на хромосоме. SEB, SEC, SED, SEG, SEM, SEO заключены в плазмиде, а гены SEK, SEL находятся в островках патогенности. В связи с тем, что гены СЭ содержатся в плазмидах, бактериофагах, они могут передаваться от одного штамма другому. Синтез энтерогоксина регулируется геномом, который является ответственным за синтез регуляторного белка. Экспрессия генов энтерогоксинообразования контролируется регуляторными системами (agr А и В, sar и катаболитной супрессией).

Каждый токсин продуцируется в виде белка-предшественника, содержащего аминотерминальную последовательность сигнала, которая отщепляется во время выхода из клетки. Известно, что agr контролирует транскрипты РНК II и РНК III, которые участвуют в регуляции генов в поздней логарифмической фазе роста. Показано, что agr А имеет гомологию с сигнальными бактериальными протеазами, a agrB — с про-теинкиназами. В одних случаях эти гены действуют как супрессоры, а в некоторых случаях — как позитивные регуляторы, однако каким образом они осуществляют регуляцию, не известно.

б) Факторы, влияющие на продукцию стафилококковых энтеротоксинов и условия культивирования продуцентов. Стафилококки могут расти как на селективной среде, содержащей аминокислоты и ростовые факторы, так и на сложной белковой среде, однако замечено, что продукция СЭ на селективной среде значительно снижена. Не выявлено значительной разницы в питательных потребностях между токсигенными и неэнтеротоксигенными штаммами S. aureus.

Выбор среды для получения СЭ зависит во многом от того, для какой цели готовят энтеротоксин — для очистки или для его выявления.

При получении энтеротоксинов для последующей их очистки важным фактором является использование питательной среды, простой по составу, содержащей как можно меньше белков, способной легко диализоваться и обеспечивать высокий выход энтеротоксина.

Если же целью является выявление наличия энтеротоксинов у штаммов стафилококка, то рекомендуется использовать среды с высоким содержанием белков и пептидов.

Продукция СЭ происходит в более ограниченном диапазоне физико-химических факторов, чем рост стафилококков. Количество продуцируемого СЭ зависит от многих факторов, таких как вид пищевого продукта, pH, температура, водная активность, атмосферные условия и присутствие других микроорганизмов.

Следует отметить, что SEA и SEB продуцируются на различных стадиях роста стафилококков. Синтез SEA большей частью приходится на раннюю log-фазу роста. SEA ведет себя как основной метаболит (хотя приблизительно 20% токсина продуцируется во время начальной стационарной фазы), в то время как синтез SEB на 95% происходит в поздней log-фазе и ранней стационарной фазе роста. Отсутствие SEB до конца логарифмической фазы роста, его накопление в течение стационарной фазы и после изменения pH среды означает, что он является вторичным метаболитом. Хлорамфеникол и 2,4-динитрофенол препятствуют образованию SEA, но некоторые количества токсина вырабатываются неразмножающимися клетками в присутствии стрептомицина и пенициллина G. Показано, что рост стафилококков не обязательно коррелирует с продукцией СЭ.

Минимальная величина активности воды (aw) для продукции СЭ в искусственной среде несколько выше, чем минимум для роста стафилококков. Для SEB aw составляет 0,97, а для SEA — ниже 0,90. Водная активность, при которой идет синтез СЭ, находится в диапазоне от 0,83-0,991. Оптимум активности воды для продукции СЭ более 0,99. Стафилококки способны продуцировать СЭ при концентрации хлористого натрия до 10,0% (активность воды — 0,92). Концентрация хлористого натрия 12 % уже ингибирует синтез СЭ независимо от pH среды.

Продукция стафилококковых энтеротоксинов происходит в широком диапазоне pH (4,0-9,83). Оптимальным для продукции энтеротоксинов является pH 6,5-7,3. Однако при pH 5,0 штаммы стафилококков, продуцирующие SEB, образуют мало энтеротоксина при хорошем росте клеток, в то время как продукция SEA происходит в одинаковом количестве независимо от pH.

Размножение стафилококков в пищевых продуктах и образование энтеротоксина зависит также от температуры. Диапазон температуры, при которой идет продуцирование СЭ, — от 10 до 38НС, оптимум — при 35-38°С. Чем ниже температура, тем медленнее идет накопление возбудителя и энтеротоксина, при температуре 5-7°С этот процесс прекращается. При комнатной температуре в обсемененной стафилококками пище количество энтеротоксина, способное вызвать пищевое отравление, может накопиться, например, в котлетах в течение 3 ч, а в заварном креме — за 4 ч.

S. aureus считается требовательным микроорганизмом в отношении питательных веществ. Так, при исследовании энтеротоксинообразования у пяти штаммов S. aureus, которые продуцируют SEA, SEB или SEC, было установлено, что валин необходим для роста стафилококков, а аргинин и цистин — и для роста бактерий, и для продукции СЭ. Потребности в других аминокислотах при синтезе СЭ варьируют в зависимости от штамма. Глюкоза по-разному влияет на биосинтез различных типов СЭ. Так, 5% концентрация глюкозы в среде не влияет на продукцию SEA, но ингибирует продукцию SEB и SEC. Уксусная и молочная кислоты ингибируют продукцию СЭ. Ингибирующим действием на продукцию СЭ обладают молочнокислые бактерии — лактобациллы и микрококки, а также конкурирующая микрофлора.

Бактерицидное влияние молочно-кислой закваски происходит главным образом вследствие образования молочной кислоты и понижения pH, продукции перекисного кислорода, конкуренции за питательные вещества и иногда вследствие синтеза антимикробного вещества — низина, продуцируемого молочно-кислыми бактериями. Продукция SEB ингибируется твином-80, олеиновой кислотой, дезоксихолатом натрия, пенициллином, Д-циклосерином и бацитрацином, однако эти вещества не влияют значительно на рост.

Панкреатический гидролизат казеина повышает выработку СЭ по сравнению с кислотным гидролизатом казеина. Питательными основами являются кислотные и ферментативные гидролизаты белка, сердечно-мозговой настой, иногда с добавлением экстракта дрожжей. В качестве добавок используют аминокислоты, тиамин, никотиновую кислоту, соли. Примером такой среды является среда Е.Р. Касман, модифицированная Ф.С. Флуер и др.

Показано, что аэрированные культуры образуют в большем количестве СЭ и быстрее, чем статические культуры.

Происхождение штаммов стафилококков также влияет на токсигенность. Установлено, что штаммы S. aureus, выделенные от людей, чаще продуцируют SEA, в то время как штаммы стафилококков, выделенные от коров, продуцируют SEC или SED, от овец — SEC.

Количество образуемого СЭ зависит также от штаммов, которые могут резко отличаться друг от друга, и от типа энтеротоксина. Выход большинства энтеротоксинов может быть повышен селекцией колоний. Наибольшее количество энтеротоксина продуцируют штаммы стафилококков, образующие SEB. Так, клонированные селекционные штаммы могут продуцировать до 500 мкг/мл SEB, 60 мкг/мл типа SEC и до 10 мкг/мл SEA.

в) Физико-химические свойства. Стафилококковые энтеротоксины являются простыми полипептидными цепями, состоящими из 239-296 остатков аминокислот, их молекулярная масса — от 24 000-29 000 дальтон. СЭ имеют изоэлектрические точки в пределах 5,7-8,66.

Внутри полипептидная цепь СЭ связана дисульфидным мостиком, образующим так называемую дисульфидную петлю, которая играет важную роль в проявлении рвотного действия СЭ. Однако молекулы некоторых СЭ, таких как SEI, SEK, не имеют дисульфидной петли, и поэтому обладают более слабым рвотным действием.

г) Стабильность стафилококковых энтеротоксинов. Одним из наиболее важных свойств СЭ является их термоустойчивость. Они более устойчивы к повышенной температуре, чем другие бактериальные токсины и бактериальные клетки. Большинство СЭ выдерживают нагревание до 100°С. Инактивированные СЭ под действием температуры могут быть реактивированы. Наилучшие результаты реактивации получены после деактивации при 80°С, причем реактивация токсина происходит быстрее при 25°С, чем при 4°С. Более быстрая потеря активности токсина при 80 °С, чем при 100 °С, объясняется образованием агрегатов молекул токсина.

Резистентность к теплу у СЭ зависит от продолжительности экспозиции, от типа и концентрации энтеротоксина, от растворителя, в котором нагреваются энтеротоксины. Стафилококковые энтеротоксины более стабильны в неочищенном виде, чем в очищенном. SEB и SEC более термостабильны, чем SEA.

Имеются лишь отрывочные сведения о стабильности энтеротоксинов при хранении в различных средах. Так, SEB при хранении в 0,05 М фосфатном буфере при pH 4,0-7,3 сохраняет свою активность в течение недели. Энтеротоксин SEE при хранении в фосфатном буфере при pH 7,0 и температуре 2-5°С сохраняет серологическую активность в течение 6 мес. В сыре энтеротоксины сохраняют свою активность в течение 3 лет.

Способность энтеротоксинов вступать в реакции с гомологичными антисыворотками утрачивается при pH 1,85 и 12,0.

Стафилококковые энтеротоксины проявляют устойчивость к гидролизу такими ферментами, как трипсин, химотрипсин, ренин и папаин. Пепсин способен разрушать энтеротоксины при pH 2,0, но не при более высоких значениях.

д) Иммунологические свойства. Все известные типы СЭ обладают индивидуальной антигенной специфичностью, на чем основано отнесение их к 21 серотипу. Перекрестные реакции наблюдаются между SEA и SEE и гремя подтипами SEC₁, SEC₂, SEO₃.

Специфические антитела к SEA, SEB, SEC были обнаружены в сыворотках как здоровых людей, так и лиц, перенесших пищевое отравление стафилококковой этиологии, но значения циркулирующих в сыворотке крови антител к энтеротоксинам пока неизвестно. В исследованиях, проведенных в США, было обнаружено, что у 70% населения в сыворотке содержатся гемагглютинирующие антитела, а у 30% — преципитирующие. Эти показатели несколько отличаются от таковых у жителей Южной Азии: во всех пробах сывороток содержались гемагглютинирующие антитела и в 90% — преципитирующие антитела. Однако повышенный титр антител к СЭ не может предотвратить пищевого отравления. В опытах на обезьянах показано, что у животных с более высоким титром антител к СЭ пищевые отравления протекали всего лишь в более легкой форме. При этом антитела к одному типу СЭ не всегда могут проявлять защитные свойства против СЭ других типов.

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 11.11.2019