Внутривидовое типирование дизентерийных бактерий зонне
Купить бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее
Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку "Купить" и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.
Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"
Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.
- Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
- Курьерская доставка (7 дней)
- Самовывоз из московского офиса
- Почта РФ
Метод основан на определении характера действия колицинов, продуцируемых исследуемыми штаммами бактерий Зонне, на 15 индикаторных культур, из которых 13 - шигеллы Зонне, I - Sh. Dysenteriae 2 (Штуцер-Шмитца) и I - вариант E. coli K-12 Row
Оглавление
Типирование шигелл Зонне по Абботу и Шеннону
1. Набор индикаторных и типовых штаммов и схема типирования
2. Среды, применяемые при типировании
3. Техника и ход исследования
4. Учет результатов
Колицинотипирование по Фредерику
Организация и материальное обеспечение работы
Условия хранения индикаторного набора Абботта и Шеннона
Дата введения | 01.02.2020 |
---|---|
Добавлен в базу | 01.02.2017 |
Актуализация | 01.02.2020 |
- Раздел Экология
- Раздел 11 ЗДРАВООХРАНЕНИЕ
- Раздел 11.020 Медицинские науки и условия по обеспечению охраны здоровья в целом
- Раздел 11 ЗДРАВООХРАНЕНИЕ
10.03.1971 | Утвержден | Зам. Начальника Главного санитарно-эпидемиологического управления Министерства здравоохранения СССР |
---|---|---|
Издан | Министерство здравоохранения СССР | 1971 г. |
Разработан | Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии МЗ СССР |
Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:
ВНУТРИВИДОВОЕ ТИПИРОВАНИЕ ДИЗЕНТЕРИЙНЫХ БАКТЕРИЙ ЗОННЕ ПО КОЛИЦИНОГЕННОСТИ И КОЛИЦИНОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ
Для республиканских, областных и городских бактериологических лабораторий
Кандидат мед. наук
Ю. П. Солодовников М. В. Турчинская Ю. В. Толмачева
Кандидат мед. наук Кандидат мед. наук Кандидат мед. наук Кандидат мед. наук
П. И. Емельянов М. А. Смирнова-Мутушева Б. А. Годованный С. Д. Татаринова
блюдают один и тот же порядок их размещения, что позволяет, при достаточном навыке, не производить нумерацию штаммов на чашке. При использовании всех 15 индикаторных культур, как показано на рисунке 2, на одной половине чашки сеют 8 штаммов (с 31 по 38), а па другой — остальные 7 штаммов (с 39 по 44). При применении 10 индикаторных штаммов сеют, соответственно, 6 и 4 культуры. Такое распределение также позволяет не нумеровать нанесенные штаммы.
После посева индикаторных штаммов чашки помещают в термостат еще на 18—20 часов при 37° С.
4. Учет результатов.
Если исследуемая культура является колициногенной, наблюдается торможение роста индикаторных штаммов, чувствительных к продуцируемым колицинам. При этом линия роста чувствительного штамма прерывается в том месте, где она пересекает зону диффузии колицина в питательную среду. Штаммы, устойчивые к определенному колицину, растут в виде сплошных непрерывных штрихов. Такими же штрихами растут все 15 индикаторных штаммов в том случае, когда исследуемая культура не продуцирует колицинов.
Штамм E.coliRow (№ 44) чувствителен к колицинам всех известных в настоящее время колицнногенотипов шигелл Зон-не, за исключением типа 7.
Величина зоны торможения роста зависит от концентрации и степени диффузии колицина в агар и выраженности чувствительности индикаторных штаммов.
Учет результатов производят по наличию или отсутствию зон торможения роста индикаторных .культур. Культура считается чувствительной, если зона торможения составляет более 4 мм. В некоторых случаях в зоне торможения роста чувствительного штамма наблюдается рост отдельных резистентных колоний или островков индикаторной культуры. При определении размеров зоны торможения эти колонии и островки не принимают во внимание, учитывают всю ширину зоны от одного ее края до другого.
Установленный спектр действия колицинов исследуемой культуры на индикаторные штаммы сопоставляют со схемой типировання (табл. 3 или 4) и определяют колициногенотип изученного штамма шигелл Зонне.
Схема хода исследования по методу Абботта и Шеннона.
В некоторых случаях установленный тип может не совпадать ни с одним из известных типов. Такие культуры обозначают как нетипируемые. Следует учитывать также возможность обнаружения новых колициногенотипов.
Регистрацию результатов типирования наиболее удобно производить по приведенной ниже форме (табл. 5).
Форма рабочего журнала для регистрации результатов типирования шигелл Зонне по Абботту и Шеннону (пример регистрации)
Е.соП СА — 18 продуцирует колицин В;
Е. соП СА —23 продуцирует колицин Д
Е.соП СА —38 продуцирует колицин Е 4* 1
Е.соП СА — 42 продуцирует колицин F
Е.соП СА — 53 продуцирует колицин I Е.соП К — 235 продуцирует колицин К
Е.соП СА — G2 продуцирует колицин J + I
Е.соП СА — 7 продуцирует колицин V Sh. boydii Р — 1 продуцирует колицин Si
Sfi. sonnei P — 9 продуцирует полиции S3-fI В. dispar P—>14 продуцирует полиции Ss
Перечисленные колицины дают четкие зоны угнетения роста бактерии Зонне и позволяют подразделять их на определенные колншшотипы.
Накануне опыта в чашки Петри разливают по 20—25 мл 1,5%. мясопептониого агара, подкрашенного ген циан виол етом до слегка синего цвета (2—4 капли 0,1% водного раствора на 100 мл среды). Слабые растворы генцианвиолета угнетают рост воздушной микрофлоры и способствуют повышению колицииопродукции эталонных штаммов.
Чашки со средой подсушивают в термостате. Затем дно чашек делят восковым карандашом (чернилами) на 11 квадратов (по числу эталонных культур). Квадраты обозначают номерами: 1, 2, 3, 4 и т. д. При известном навыке, если ко-лицнногенные штаммы постоянно употреблять в одном и том же порядке, можно вообше ограничиться обозначением только начала посева культур. Описанным способом для каждого штамма шигелл, который подлежит испытанию на чувствительность к колицииам, готовят две чашки со средой, т. е. число чашек со средой должно быть в два раза больше, чем число штаммов исследуемых шигелл Зонне.
Эталонные колишшогеиные штаммы суточной давности, выросшие на среде Ресселя, наносят уколом петли в соответствующий квадрат чашки. После посева каждой эталонной культуры петлю прожигают на пламени горелки.
В целях экономии времени целесообразно, без ущерба для результатов опыта, производить последовательный посев соответствующего эталонного штамма одновременно на 5— 7 чашек, размещенных в ряд, при однократном заборе материала со среды Ресселя.
Чашки, засеянные колнцнногеиными культурами, помещают в термостат на 22—24 часа при 37° С, после чего выросшие колонии бактерий стерилизуют парами хлороформа. С этой целью чашки помещают на столе вверх дном и на внутреннюю поверхность крышки наносят 8—12 капель хлороформа. Через 40—50 минут бактерии погибают, а хлороформ улетучивается из чашек.
Затем в пробирку с 2,5 мм расплавленного полужидкого 0,7 %\ агара, охлажденного до 46—48 D (пробирка не должна обжигать тыльную сторону кисти .руки), вносят 2 капли 6-ти часовой бульонной культуры исследуемого штамма и после встряхивания смесь наслаивают равномерным слоем в чашку поверх агара с колониями нанесенных ранее колициноген-ных культур. Каждый штамм испытывают на двух чашках.
На крышке записывают номер исследуемого штамма. После 1G—20 часового роста при 37° вокруг колоний, к колицинам которых исследуемый штамм бактерий Зонне чувствителен, образуются зоны задержки роста,— подобно зонам задержки роста вокруг диска с антибиотиками. Культура считается чувствительной к колицину, если ширина зоны задержки роста бактерий составляет более 2 мм. Величину зоны подавления роста измеряют от края м а проколок и к эталонного коли-'циногенного штамма до наружного края зоны и оценивают в плюсах: ширина зоны до 2 мм + , 2—5 мм ++, 5—10 мм + + + и более 10 мм + + + + . Такое обозначение позволяет сравнивать степень чувствительности культур к колицинам. Однако необходимо иметь в виду, что ширина зоны угнетения роста бактерий зависит также от характера питательной среды, концентрации агара: чем плотнее среда, тем медленнее идет процесс диффузии колицнпа в агар вокруг колоний и тем уже зона торможения роста бактерий чувствительного штамма.
Необходимо подчеркнуть, что наслоение чрезмерно густой взвеси бактерий может исказить результаты исследования. В чашке должен быть равномерный, но не чрезмерно густой рост испытуемого штамма.
Результаты типнровання культур записывают в виде характеристики спектра их чувствительности к соответствующим колицинам. Например, штамм Sh. sonnei N2 1210 коли-цинотип: В, Д, F, К, V, S3 + 1; если на обеих чашках спектр чувствительности штамма однотипен, опыт можно считать законченным. При расхождении результатов чувствительности в чашках при изучении одного и того же штамма, исследование повторяют.
Необходимо также учитывать, что наиболее четкие и достоверные результаты колицинотипирования получаются при исследовании свежевыделенных культур и особенно при одновременном испытании культур, полученных из одного очага, т. к. при этом соблюдаются равные условия для всех испытываемых штаммов.
ОРГАНИЗАЦИЯ И МАТЕРИАЛЬНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ
Целесообразно, чтобы постоянное выполнение работы было поручено определенным лицам (врачу и лаборанту), поскольку такая организация исследований способствует повышению их качества и обеспечивает определенную стандартизацию учета результатов исследования, снижая вероятность технических ошибок.
При проведении коЛициногенотнпирования и коЛициноТй-пнровання не требуется специального сложного оборудования.
Помимо термостата, который является обязательным для любых бактериологических исследований, лаборатория, в которой производится колициногенотипироваине, должна иметь холодильник с обычным режимом работы и свертыватель для приготовления среды Дорсэ (см. ниже).
В зависимости от расписания работы лаборатории (пятнили шестидневная рабочая неделя) постановку опытов можно производить один или два раза в неделю в соответствии го схемой типировання, приведенной выше.
Ниже приведен примерный расчет материалов, необходимых для типировання шигелл Зонне (100 штаммов):
Количество материалов, необходимое для колицнногенотипирования 100 штаммов шигелл Зонне
1. Сухой питательный агар Д 100 г
2. Сухой питательный агар 120 г
3. Гидролизат Хоттингера для приготовления
питательного бульона 100 г
4. Хлороформ 100 мл
Условия хранения индикаторного набора Абботта и Шеннона
Индикаторные культуры следует хранить на плотной яичной среде Дорсэ или на столбиках 0,5% питательного агара на гидролизате Хоттингера с содержанием аминного азота 130—150 мг% под слоем стерильного вазелинового масла.
Среду Дорсэ готовят по следующей прописи:
3 части — цельные куриные яйца и 1 часть физиологического раствора поваренной соли смешивают до гомогенного состояния в стерильной посуде с бусами, разливают по 3—4 мл в стерильные пробирки с ватными пробками и стерилизуют в свертывателе в скошенном положении при 85° два дня
Заместитель начальника Главного санитарно-эпидемиологического Управления М3 СССР
В. ПОПОВ 10 марта 1971 г.
МЕТОДИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ Внутривидовое типирование дизентерийных бактерий Зонне по колициногенности и колициночувствительности
В этнологической структуре бактериальной дизентерии на большей части территории Советского Союза преобладают в настоящее время заболевания, вызываемые шнгеллами Зонне. В связи с отсутствием методов серологического типи-ровання данных возбудителей весьма актуальным является внедрение других методов внутривидового подразделения дизентерийных бактерий Зонне.
Возможность дифференциации возбудителя на достаточное число четко характеризующихся стабильных типов, установление типового состава шигелл Зонне в масштабах страны или на отдельных территориях могут способствовать изучению закономерностей эпидемического процесса дизентерии, углубленному проведению эпидемиологического анализа заболеваемости, уточнению данных эпидемиологического обследования очагов инфекции с целью разработки эффективных противоэпидемических мероприятий.
Согласно литературным данным (Фредерик, 1953, 1960; Аббот и Шеннон, 1958; Папависсилиу с соавт., 1964; Д. Г. Куд-лай с соавт., 1964; Д. Г. Кудлай и В. Г. Лиходед, 1966 и др.), а также результатам собственных исследований составителей настоящих методических материалов, для тнпнрования патогенных энтеробактерий, в том числе шигелл Зонне, могут быть использованы методы, основанные на феномене коли-циногении.
Явление колнциногении было впервые обнаружено Грациа в 1925 г. Колниины — это вещества белковой природы, про*
1 Разработаны Центральным научно-исследовательским институтом эпидемиологии Л\ииистерстса здравоохранения СССР.
дуцируемые некоторыми видами бактерий семейства кишечных и тормозящие рост чувствительных к ним культур того же или филогенетически родственного вида бактерий. Колицнны различаются между собой как по спектру действия на чувствительные бактерии, так и по ряду физико-химических свойств. В настоящее время известно 24 типа колнцинов. обозначаемых буквами латинского алфавита А; В1; В2; С; Д; El; Е2; ЕЗ; Е4; G; Н; I; К; L; М; N; О; Р; X; VI; V2; V3; V4; V5.
Бактериальная клетка, как правило, бывает резистентна (иммунна) к действию колицина того типа, который она сама вырабатывает.
Способностью к колицинопродукции обладают не все бактерии семейства кишечных: не все культуры являются также колициночувствительнымн. В связи с этим внутривидовое тн-пированне бактерий на основе феномена колициногенни целесообразно только для тех видов, у которых эти свойства выражены в достаточной степени. К таким видам относятся кишечные палочки, шнгеллы Зонне, Флекснера, Ньюкасл, Бойда •и др.
Колициногенность отмечается у 60—95% выделяемых штаммов шигелл Зонне; чувствительны к колнцинам— 90— 95% этих бактерий.
В процессе роста колицнногенного штамма колицин диффундирует в окружающую питательную среду. Присутствие колнцина в среде может быть выявлено с помощью так называемых универсальных индикаторных штаммов, чувствительных ко всем или подавляющему большинству известных колнцинов. Наиболее часто с этой целью употребляют индикаторные штаммы Е. coli 1
При получении коллекции колициногенных эталонных культур нх отвивают в столбики 1,5% мясо-пептонного агара и хранят под вазелиновым маслом в рефрижераторе. Одновременно субкультуры испытывают на способность к продукции колнцинов по их действию на универсальные индикаторные штаммы Е. toli 2
С целью выявления эпидемической цепочки заболевания, в т. ч. для обнаружения источника инфекции, осуществляют внутривидовую идентификацию бактерий, которая заключается в определении фаготипа (фаговара), изучении антигенных и других свойств выделенных бактерий. Определение фаготипа - фаготипирование производят при стафилококковой инфекции, брюшном тифе, паратифе В.
Фаготипирование — один из методов эпидемиологического маркирования. Применяется для выявления источника инфекции. Выделение бактерий одного фаговара от разных больных указывает на общий источник их заражения. Предварительно фаготируется.
Дно чашки Петри с МПА делят на квадраты, каждый из которых подписывают цифрами, соответствующими номерам типовых стафилофагов. На подготовленную чашку газоном засевают исследуемый штамм S.aureus и в каждый квадрат капают соответствующий типовой стафилофаг. Засеянную чашку с культурой и бактериофагами помещают в термостат. На другой день учитывают результат фаготипирования, отмечая номера типовых стафилофагов, лизировавших культуру (в соответствующих квадратах будут видны "стерильные пятна"). Фаготип - перечень типовых бактериофагов, лизировавших данную культуру. Это - один из приемов внутривидового типирования, позволяющий установить источник инфекции и пути распространения.
Титрование вируса полиомиелита в цветной пробе Солка:
В пробирках находится вируссодержащий материал в соответствующих разведениях и культура клеток в виде взвеси в поддерживающей среде.
В контрольной пробирке содержится только культура клеток в виде взвеси в поддерживающей среде.
Штатив помещают в термостат. Просматривают ежедневно. После того как в контрольной пробирке цвет среды изменится с красного на желтый, что свидетельствует о том, что культура клеток жива, штатив извлекают из термостата и учитывают результат. Титром вируса является наибольшее разведение, в которой произошла гибель клеток и цвет среды поэтому не измененился, остался красным.
7.Геном бактерий. Понятие о генотипе и фенотипе. Виды наследуемой изменчивости. Бактериальный геномсостоит из генетических элементов, способных к самостоятельной репликации, т.е.репликонов. Репликонами являютсябактериальная хромосома иплазмиды.
Наследственная информация хранится у бактерий в форме последовательности нуклеотидов ДНК, которые определяют последовательность аминокислот в белке. Каждому белку соответствует свой ген, т. е. дискретный участок на ДНК, отличающийся числом и специфичностью последовательности нуклеотидов.
Бактериальная хромосомапредставлена одной двухцепочечной молекулой ДНК кольцевой формы. Размеры бактериальной хромосомы у различных представителей царстваProcaryotae варьируют. Бактериальная хромосома формирует компактный нуклеоид бактериальной клетки. Бактериальная хромосома имеет гаплоидный набор генов. Она кодирует жизненно важные для бактериальной клетки функции.
Плазмидыбактерий представляют собой двухцепочечные молекулы ДНК. Они кодируют не основные для жизнедеятельности бактериальной клетки функции, но придающие бактерии преимущества при попадании в неблагоприятные условия существования.
Фенотиппредставляет собой результат взаимодействия между генотипом и окружающей средой, т. е. проявление генотипа в конкретных условиях обитания. Фенотип микроорганизмов хотя и зависит от окружающей среды, но контролируется генотипом, так как характер и степень возможных для данной клетки стенотипических изменений определяются набором генов, каждый из которых представлен определенным участком молекулы ДНК.
В основе изменчивостилежит либо изменение реакции генотипа на факторы окружающей среды, либо изменение самого генотипа в результате мутации генов или их рекомбинации. В связи с этим фенотипическую изменчивость подразделяют на наследственную и ненаследственную.
Ненаследственная (средовая, модификационная) изменчивостьобусловлена влиянием внутри- и внеклеточных факторов на проявление генотипа. При устранении фактора, вызвавшего модификацию, данные изменения исчезают.
Наследственная (генотипическая) изменчивость, связанная с мутациями, — мутационная изменчивость. Основу мутации составляют изменения последовательности нуклеотидов в ДНК, полная или частичная их утрата, т. е. происходит структурная перестройка генов, проявляющаяся фенотипически в виде измененного признака.
Наследственная изменчивость, связанная с рекомбинациями, называется рекомбинационной изменчивостью.
Подвижные генетические элементы.
В состав бактериального генома, как в бактериальную хромосому, так и в плазмиды, входят подвижные генетические элементы. К подвижным генетическим элементам относятся вставочные последовательности и транспозоны.
Вставочные (инсерционные) последовательности, IS-элементы— это участки ДНК, способные как целое перемещаться из одного участка репликона в другой, а также между репликонами. Они содержат лишь те гены, которые необходимы для их собственного перемещения — транспозиции: ген, кодирующий ферменттранспозазу, обеспечивающую процесс исключения IS-элемента из ДНК и его интеграцию в новый локус, и ген, детерминирующий синтез репрессора, который регулирует весь процесс перемещения.
Отличительной особенностью IS-элементов является наличие на концах вставочной последовательности инвертированных повторов. Эти инвертированные повторы узнает ферменттранспозаза. Транспозаза осуществляет одноцепочечные разрывы цепей ДНК, расположенных по обе стороны от подвижного элемента. Оригинальная копия IS-элемента остается на прежнем месте, а ее реплицированный дупликат перемещается на новый участок.
Перемещение подвижных генетических элементов принято называть репликативной или незаконной рекомбинацией. Однако в отличие от бактериальной хромосомы и плазмид подвижные генетические элементы не являются самостоятельными репликонами, так как их репликация — составной элемент репликации ДНК репликона, в составе которого они находятся.
Известно несколько разновидностей IS-элементов, которые различаются по размерам и по типам и количеству инвертированных повторов.
Транспозоны — это сегменты ДНК, обладающие теми же свойствами, что и IS-элементы, но имеющие структурные гены, т. е. гены, обеспечивающие синтез молекул, обладающих специфическим биологическим свойством, например токсичностью, или обеспечивающих устойчивость к антибиотикам.
Перемещаясь по репликону или между репликонами, подвижные генетические элементы вызывают:
1. Инактивацию генов тех участков ДНК, куда они, переместившись, встраиваются.
2. Образование повреждений генетического материала.
3. Слияние репликонов, т. е. встраивание плазмиды в хромосому.
4. Распространение генов в популяции бактерий, что может приводить к изменению биологических свойств популяции, смене возбудителей инфекционных заболеваний, а также способствует эволюционным процессам среди микробов.
Изменения бактериального генома, а, следовательно, и свойств бактерий могут происходить в результате мутаций и рекомбинаций.
Наследственная информация клетки заключена в хромосоме и генах, которые передаются из родительской клетки в дочерние. Хромосомы — нуклеопротеиды (нуклеиновые кислоты + белки), они являются носителями генов, определяющих наследственные свойства организма. Гены невидимы, но известно, что они располагаются в линейном порядке в хромосоме. При неполовом способе деления гены в процессе митоза распределяются поровну между двумя клетками. Дочерние клетки получают полный набор генов исходной клетки и являются одинаковыми.
Химическая природа генов — нуклеиновые кислоты. Порядок расположения азотистых оснований в цепи нуклеиновой кислоты определяет различный генетический вид ДНК у разных организмов.
Основной структурой, хранящей информацию о синтезе необходимых клетке разнообразных молекул белка и передающей эту информацию по наследству, является ДНК. У некоторых вирусов эту роль выполняет РНК. Информация, заключенная в молекулах нуклеиновой кислоты и характеризующая каждый вид микроорганизма, может меняться в результате генотипической изменчивости. При этом обязательно происходят изменения генов в хромосоме. Генотипическая изменчивость может возникать в результате мутаций и генетических рекомбинаций: конъюгации, трансформации и трансдукции.
Трансдукция - передача генетической информации умеренными бактериофагами. Трансформация – процесс проникновения чужеродной, донорской ДНК в клетку реципиента. Клетка реципиента должна обладать повышенной проницаемостью – высокая концентрация чужеродной ДНК. Конъюгация – процесс передачи генетической информации от клетки донора к клетке реципиента с помощью секспили. В этом случае между двумя бактериями образуется мостик и хромосома из одной клетки переходит в другую.
Бактериальная дизентерия, или шигеллез, — инфекционная болезнь с преимущественным поражением толстой кишки. Возбудителями являются бактерии рода Shigella.
Название рода связано с именем японского исследователя К.Шиги, одним из первых (1898) открывшего возбудитель дизентерии.
Таксономия и классификация. Возбудители дизентерии относятся к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Shigella. Различают 4 вида шигелл: Shigella dysenteriae (группа A), Shigella flexneri (группа В), Shigella boydii (группа С), Shigella sonnei (группа D). Каждая группа включает несколько вариантов.
Морфологические и тинкториальные свойства. Шигеллы — мелкие (длиной 2—3 и шириной 0,5—0,7 мкм) грамотрицательные палочки с закругленными концами (см. рис. 12.1). В мазке из чистой культуры располагаются беспорядочно. Они не образуют спор, не имеют жгутиков. У многих штаммов обнаруживают пили, некоторые шигеллы обладают микрокапсулой.
Культуральные свойства. Дизентерийные палочки — факультативные анаэробы. Оптимальными для их роста являются температура 37 °С и рН среды 7,2 - 7,4. Шигеллы хорошо растут на простых питательных средах, однако чаще для их культивирования используют среды обогащения, например селенитовый бульон. На плотных средах шигеллы образуют мелкие прозрачные колонии, на жидких - дают диффузное помутнение.
Биохимические свойства. Шигеллы обладают меньшей ферментативной активностью, чем другие энтеробактерии. Важным признаком, позволяющим дифференцировать шигеллы, является их отношение к манниту: S.dysenteriae (группа А) не ферментируют маннит, представители групп В, С и D маннит-позитивны. Наиболее биохимически активны S.sonnei, которые, в частности, могут медленно, в течение 2 сут, сбраживать лактозу. На основании отношения к некоторым углеводам различают биохимические варианты S.sonnei.
Антигенная структура. Шигеллы имеют О-антиген, не однородность которого позволяет выделить серовары внутри видов S.dysenteriae, S.flexneri и S.boydii. У некоторых представителей рода обнаруживают Z-антиген.
Факторы патогенности. Все шигеллы образуют эндотоксин, обладающий энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием. Кроме того, S.dysenteriae (серовар 1) выделяет экзотоксин, оказывающий энтеротоксическое, нейроток-сическое, цитотоксическое, нефротоксическое действие на организм, что приводит соответственно к нарушению водно-солевого обмена, изменениям со стороны нервной системы, к гибели клеток слизистой оболочки толстой кишки, поражению почечных канальцев. Экзотоксин могут выделять и другие виды шигелл. Образование экзотоксина обусловливает более тяжелое течение дизентерии.
К факторам патогенности шигелл относятся инвазивный белок, способствующий их проникновению внутрь эпителиальных клеток, а также пили и белки наружной мембраны, ответственные за адгезию, и микрокапсула.
Резистентность. Возбудители дизентерии обладают невысокой устойчивостью к действию химических и физических факторов, в том числе дезинфектантам. Наибольшая резистентность отмечается у S.sonnei, которые могут сохраняться на предметах и в воде до 2 мес, в почве — до 3 мес.
Эпидемиология. Дизентерия — антропонозная инфекция. Источником ее являются больные люди и бактерионосители. Механизм заражения фекально-оральный. Пути передачи могут быть различными: при дизентерии Зонне преобладает пищевой путь (чаще с молочными продуктами), при дизентерии Флек-снера — водный, для дизентерии Григорьева—Шига, вызываемой S.dysenteriae 1, характерен контактно-бытовой путь.
Дизентерия широко распространена в мире. Болеют люди всех возрастов, но наиболее подвержены дизентерии дети от 1 года до 3 лет. Заболеваемость возрастает в июле — сентябре. В европейской части России в настоящее время от больных вьщеляют преимущественно шигеллы Зонне, в южных районах преобладает дизентерия Флекснера, примерно в 1 % случаев выявляют дизентерию Григорьева - Шига.
Патогенез. Шигеллы через рот попадают в ЖКТ и достигают толстой кишки. Обладая тропизмом к ее эпителию, с помощью пилей и белков наружной мембраны возбудители прикрепляются к клеткам. Благодаря инвазивному фактору они проникают внутрь клеток, размножаются там, в результате чего клетки погибают. В стенке кишечника образуются изъязвления, на месте которых затем формируются рубцы. Эндотоксин, освобождающийся при разрушении бактерий, вызывает общую интоксикацию, усиление перистальтики кишечника, понос. Кровь из образовавшихся язвочек попадает в кал. Под действием экзотоксина наблюдаются более выраженное нарушение водно-солевого обмена, деятельности центральной нервной системы, поражение почек.
Клиника. Инкубационный период составляет 1—7 дней. Болезнь начинается остро, с повышения температуры тела (38 - 39 °С), появления болей в животе, поноса (греч. dys — нарушение, расстройство, enteron — кишка). В кале (дефекация 10 - 15 раз и более в сутки) обнаруживают примесь крови и слизь. Наиболее тяжелое течение наблюдают при дизентерии Григорьева—Шига. Нередко болезнь переходит в хроническую форму.
Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет непродолжительный и непрочный, он не только видо-, но и ва-риантоспецифичен.
Микробиологическая диагностика. Исследуемым материалом служит кал. Забор материала осуществляют либо ватным тампоном, либо в стерильную посуду. Посев лучше производить непосредственно у постели больного. Основным методом диагностики является бактериологический, позволяющий идентифицировать возбудитель, определять его чувствительность к антибиотикам, проводить внутривидовую идентификацию (определить биохимический вариант, серовар). При затяжном течении дизентерии можно использовать серологический метод (РА, РНГА).
Лечение. Больных с тяжелыми формами дизентерии лечат антибиотиками широкого спектра действия с обязательным учетом антибиотикограммы, так как среди шигелл нередко встречаются не только антибиотикоустойчивые, но и антибиотикозависимые формы. При легких формах дизентерии природные антибиотики не используют, поскольку их применение приводит к дисбактериозу, что утяжеляет патологический процесс и ведет к нарушению восстановительных процессов в слизистой оболочке толстой кишки.
Профилактика. Единственный препарат, который может быть использован в очагах инфекции для экстренной профилактики, — дизентерийный бактериофаг. Основную роль играют санитарно-гигиенические мероприятия.
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
Читайте также: