Пцр реал тайм герпес

Комплексное исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) цитомегаловируса, вирус Эпштейна – Барр, вируса герпеса человека 6-го типа методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Цитомегаловирус; ЦМВ; вирус Эпштейна – Барр; ЭБВ; герпес-вирус 6-го типа; ВГЧ-6; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.

Синонимы английские

Cytomegalovirus; CMV; Epstein Barr-Virus; EBV; Human Herpes Virus 6; HHV-6; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative; qRT-PCR.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюна, биоптат (биоптат лёгких, печени, ЖКТ), венозная кровь.

Общая информация об исследовании

Цитомегаловирус, вирус Эпштейна – Барр, вирус герпеса человека 6-го типа являются представителями семейства герпес-вирусов. Они обладают высокой патогенностью для человека, имеют способность к длительному латентному существованию, к персистенции в организме человека и могут вызывать заболевания с различными клиническими проявлениями.

Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.

Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме.

Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгия, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита. У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита. Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели эмбриона. При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, отмечается поражение нервной системы.

Вирус Эпштейна – Барр (EBV) относится к семейству герпес-вирусов (Herpesviridae) человека 4-й группы. Он представляет собой ДНК-содержащий лимфопролиферативный вирус. Его основной особенностью является способность реплицироваться преимущественно в В-лимфоцитах без последующего разрушения клеток.Помимо этого, вирус может инфицировать Т-лимфоциты и эпителиальные клетки.

Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса – преимущественно воздушно-капельный. У 90-95 % населения некоторых стран выявляются антитела к антигенам вируса, что свидетельствует о предшествующем инфицировании вирусом. Острая инфекция обычно протекает бессимптомно у детей с нормально функционирующей иммунной системой, клинически проявляясь в виде инфекционного мононуклеоза у 30-50 % иммунокомпетентных подростков и взрослых. При патологиях иммунной системы, иммунодефицитных состояниях, при применении иммуносупрессивных препаратов возможно развитие разнообразных патологических процессов и заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна – Барр. У таких больных присутствие вируса ассоциировано с развитием различных лимфопролиферативных нарушений и некоторых онкологических процессов, включающих лимфому Беркитта, назофарингеальную карциному, лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина), В-клеточную лимфому. Также вирус обнаруживается у пациентов при некоторых аутоиммунных заболеваниях, синдроме хронической усталости.

Инфекционный мононуклеоз – это острое вирусное заболевание, причиной которого является вирус Эпштейна – Барр. В основном заболевание регистрируется у детей и лиц молодого возраста до 35 лет. Инкубационный период заболевания составляет в среднем 5-14 дней, иногда до 30 дней. К клиническим проявлениям заболевания относятся лихорадка, головная боль, поражение зева, нёбных, глоточных миндалин, лимфатических узлов (лимфоаденопатия), увеличение печени и селезенки. Заболевание может протекать в легкой, средней тяжести и тяжелой форме. К осложнениям инфекционного мононуклеоза относятся отиты, синуситы, паратонзиллиты, пневмонии, гепатиты. Редко могут встречаться разрывы селезенки, острая печеночная недостаточность, острая гемолитическая анемия, тромбоцитопения, миокардит, неврит, менингит, менингоэнцефалит. В редких случаях развивается хроническая активная инфекция, при которой симптомы заболевания сохраняются на протяжении более чем 6 месяцев после первичного инфицирования вирусом Эпштейна – Барр.

Вирус герпеса человека типа 6 (ВГЧ-6) представляет собой ДНК-содержащий вирус, относящийся к семейству герпес-вирусов человека. Он способен к репликации в Т-лимфоцитах, но может быть обнаружен в В-лимфоцитах, моноцитах, эндотелиальных клетках, гепатоцитах и ряде других. Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса преимущественно воздушно-капельный. Возможна передача вируса вертикальным путем от матери к плоду во время беременности, при гемотрансфузиях, во время операций и при трансплантации органов.

Вирус способен проникать в лимфатическую систему и вызывать заболевания с разнообразной клинической симптоматикой. Чаще всего патологический процесс, вызванный ВГЧ-6, развивается у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, в частности при ВИЧ-инфекции, при применении иммуносупрессивной терапии, после трансплантации органов, при аутоиммунных заболеваниях.

В большинстве случаев инфекция, вызванная ВГЧ-6, протекает бессимптомно. К основным клиническим проявлениям относятся лихорадка, экзантема в виде эритематозных пятен или пятнисто-папулезной сыпи. В некоторых случаях возможно развитие осложнений со стороны центральной нервной системы: судороги, энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит. У иммунокопрометированных лиц инфекция характеризуется тяжелым течением, генерализацией процесса. Развиваются лимфаденопатии, пневмония, гепатит, энцефалит.

Диагностика вирусной инфекции, вызванной представленными вирусами, является комплексной и основана на оценке клинических проявлений заболеваний и лабораторных методов диагностики. Современные методы лабораторной диагностики играют важную роль в диагностики герпес-вирусных инфекций, особенно на ранних стадиях инфекционного процесса. К таким методам относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и подтверждения инфекционного процесса, вызванного цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа.
Для диагностики острой или текущей вирусной инфекции.
Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы инфекции в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
Для дифференциальной диагностики инфекций, вызванных герпес-вирусами.
Для дифференциальной диагностики инфекций, протекающих с развитием ангин, тонзиллитов, высыпаниями, лихорадкой.

Когда назначается исследование?

При диагностике и дифференциальной диагностике инфекций, вызванных герпес-вирусами.
При клинических проявлениях заболеваний, вызванных цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа, или при их бессимптомном, латентном течении.
При обследовании женщин, планирующих беременность, и женщин при патологиях имеющейся беременности.
При комплексном обследовании пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями и гемобластозами.
При обследовании реципиентов органов и тканей до и после трансплантации, при проведении иммуносупрессивной терапии.
При диагностике вирус-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-инфицированных и при других иммунодефицитных состояниях.
При контроле за эффективностью проведенного лечения противовирусными препаратами.

Что означают результаты?

ДНК CMV концентрация: не обнаружено.

ДНК EBV концентрация: не обнаружено.

ДНК HHV6 концентрация: не обнаружено.

* При положительном результате показатель выдается в копиях на миллилитр (копий/мл).

Причины положительного результата:

Инфицирование цитомегаловирусом или носительство вируса.
Инфицирование вирусом Эпштейна – Барр или носительство вируса.
Инфицирование вирусом герпеса человека 6-го типа или носительство вируса.

Причины отрицательного результата:

Отсутствие инфицирования цитомегаловирусом;
Отсутствие инфицирования вирусом Эпштейна – Барр;
Отсутствие инфицирования вирусом герпеса человека 6-го типа.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, инфекционист, аллерголог-иммунолог, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, оториноларинголог, гематолог, невропатолог, хирург, онколог.

Литература

Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.
Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
VanGuilder HD, Vrana KE, Freeman WM (2008). "Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis". Biotechniques 44: 619–626.

Горизонтальные табы

Генитальный герпес – представляет собой заболевание половых органов, которое развивается под воздействием вирусами простого герпеса (Herpes simplex virus). На сегодняшний день известно 8 типов вируса герпеса, при этом генитальный герпес вызывают только двумя из них. К ним относятся ВПГ-1 и ВПГ-2. Если брать в расчет все случаи инфицирования половых органов вирусом герпеса, то примерно в 80 процентах случаях выявляют именно ВПГ-2, и лишь в 20 процентах случаях ВПГ-1. Вирус первого типа чаще вызывает самый первый эпизод генитального герпеса. Повторные проявления генитального герпеса практически всегда связаны с ВПГ-2.

Установлено, что вирусом герпеса заражено около 90 процентов населения земли, но при этом лишь у не большой части из них вирус проявляет себя клинически. Попав в организм человека, не важно каким путем, вирус накапливается в нервных узлах, которые расположены вдоль позвоночника и там может находится в неактивном состоянии на протяжении всей жизни человека, если только определенные факторы не спровоцируют его и не вызовут его активацию (например выраженное снижение иммунитета) с последующей генерализацией инфекционного процесса.

Основной путь передачи генитального герпеса – половой, при этом он передается при всех видах полового контакта (вагинальный, оральный, анальный). При этом в 50 процентах случаях у полового партнера нет абсолютно никаких клинических проявлений полового герпеса.

Заражение через средства личной гигиены довольно редкое явление, шанс увеличивается, если на коже с которым соприкасается предмет инфицированный вирусом, имеется повреждение.

Во время беременности, если мать больна герпесом, то имеется шанс трансплацентарного поражения плода, в основном новорожденный заражается при прохождении по родовым путям матери. При внутриутробном заражении плода вирусом герпеса, развиваются тяжелые пороки, особенно нервной системы, многие из них являются не совместимыми с жизнью. Токсоплазмоз входит в потенциально опасную для внутриутробного развития плода группу TORCH-инфекции (токсоплазма, вирус краснухи, цитомегаловирус, герпес)

Клиническая картина.

Клиническая картина заболевания наблюдается только в периодах обострения заболевания, в период ремиссии все исчезает.

У женщин:

- на бедрах (преимущественно внутренняя поверхность), вокруг анального отверстия, на промежности, на поверхности наружных половых органов, в мочеиспускательном канале, внутри влагалища и на шейке матки появляются множественные мелкие, заполненные мутной жидкостью, пузырьки;

- мелкие эрозии (изъязвления), которые появляются на месте лопнувших пузырьков;

- в области появления пузырьков появляется зуд и жжение;

- при поражении мочеиспускательного канала появляется чувство покалывания и болезненности во время акта мочеиспускания;

- увеличенные паховые лимфатические узлы;

- в редких случаях возможна высокая температура, сопровождающаяся выраженной мышечной болью и общей слабостью.

У мужчин:

Клиническая картина зависит от того, какую часть мочеполовой системы поразил вирус герпеса

- При поражении уретры (уретрит), наблюдаются боли по типу рези при мочеиспускании.

- При поражении мочевого пузыря (цистит) – болезненные ощущения при мочеиспускании, а в самой моче может появляться кровь.

- Герпес анальной зоны чаще всего заканчивается анальной трещиной, что проявляется выраженной болезненностью в области заднего прохода.

- Герпетический простатит характеризуется болью как во время мочеиспускания, так и в полном покое, вследствие сдавления нервных волокон, воспаленной предстательной железой. При этом боль может отдавать в соседние половые органы и в поясницу.

Важно помнить, что как у мужчин, так и у женщин герпетическая инфекция может явиться причиной бесплодия.

Определение вируса герпеса I, II типа методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР) отличается высокой чувствительностью и специфичностью (98%). Принцип ПЦР заключается в идентификации уникального фрагмента ДНК, принадлежащего данному вирусу, после многократного удвоения исследуемого генетического материала в пробирке.

Исследуемым материалом является мазок с мочеиспускательного канала или влагалища. Следовательно, результат анализа свидетельствуют о наличии или отсутствии возбудителя непосредственно в месте взятия биоматериала.

Диагностика генитального герпеса;

Комплексная диагностика половой инфекции;

Незащищенный половой контакт;

Диагностика причины бесплодия;

Контроль эффективности лечения генитального герпеса.

Положительный результат анализа:

Наличие фрагмента ДНК вируса герпеса I, II типа в исследуемом материале;

Отрицательный результат анализа:

Отсутствие фрагмента ДНК вируса герпеса I, II типа в исследуемом материале;

Недостаточное количество ДНК микроорганизма в биоматериале по причине нарушение техники взятия материала.

Количество копий ДНК микроорганизма в исследуемом материале меньше уровня чувствительности анализатора.

Исследование для выявления возбудителя герпес-вирусной инфекции 1-го и 2-го типа (Herpes Simplex Virus 1/2), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) вируса простого герпеса в образце, полученном из урогенитального тракта.

Вирус герпеса, вирус простого герпеса 1-го (HSV-1) и 2-го (HSV-2) типа, определение герпеса по ДНК.

Синонимы английские

Herpes Simplex Virus, Type 1 and Type 2, HSV-1 or HSV-2 IgM or IgG, HSV-1, HSV-2, HHV1, HHV2.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок урогенитальный, первую порцию утренней мочи, мазок урогенитальный с секретом предстательной железы, эякулят, мазок ректальный.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Женщинам рекомендуется сдавать урогенитальный мазок или мочу до менструации или через 2 дня после её окончания.
Мужчинам не следует мочиться в течение 3 часов до сдачи урогенитального мазка или мочи.

Общая информация об исследовании

Методом ПЦР возможно выявить даже небольшое количество вирусных частиц в биологическом материале. Он позволяет идентифицировать вирусы герпеса вне зависимости от срока заражения даже в тот период, когда антитела в крови еще не образовались.

Наиболее распространенными являются 1-й и 2-й типы герпеса. Оба заразные и способствуют появлению на слизистых оболочках маленьких пузырьков (везикул), которые лопаются, образуя открытые ранки. При HSV-1 пузырьки появляются вокруг рта и в ротовой полости, тогда как HSV-2 обычно поражает участки в районе гениталий.

Вирус простого герпеса может передаваться через кожный контакт при наличии на коже везикул, а иногда и при отсутствии на ней видимых поражений. HSV-2 часто относят к болезням, передаваемым половым путем, однако заражение герпесом HSV-1 также может произойти, например, через оральный секс. По данным ВОЗ, от 50 % до 80 % взрослого населения развитых стран инфицировано герпесом 1-го типа и около 20 % – 2-го типа. Поскольку симптомы 2-го типа едва заметны, 90 % инфицированных им могут не подозревать о своей инфекции.

В случае первичного инфицирования на месте заражения через две недели обычно образуются болезненные пузырьки, которые, как правило, проходят через четыре недели. Они появляются на половых органах, вокруг ануса, на ягодицах либо на бедрах, после чего могут лопаться. Кроме того, возможно появление симптомов, напоминающих грипп, например озноба и болей в горле.

Однако пузырьки при герпесе образуются не всегда. Иногда проявления болезни бывают настолько слабыми, что остаются незамеченными либо ошибочно принимаются за что-то другое, например за укусы насекомых или за аллергию. После попадания инфекции в организм и ее распространения вирус герпеса находится в латентной форме. При стрессе или других заболеваниях, приводящих к снижению иммунитета, он может активизироваться заново. В большинстве случаев простой герпес не опасен для здоровья, однако он может вызывать тяжелые заболевания: неонатальный герпес (если ребенок заразится при родах от матери, инфицированной генитальным герпесом) и энцефалит. Они способны привести к серьезным неизлечимым неврологическим заболеваниям и даже к смерти. Риск заражения герпесом повышают следующие факторы:

болезни, при которых происходит подавление иммунной системы (например, ВИЧ/СПИД),
трансплантация органов.

В настоящее время излечение от герпеса не представляется возможным, тем не менее существуют противовирусные препараты, которые подавляют его распространение, а также укорачивают продолжительность острой фазы вирусной инфекции и смягчают симптомы болезни.

Для чего используется исследование?

Для выявления герпес-вирусной инфекции половых органов у мужчин и женщин и контроля за ее лечением.
Для проверки женщины на герпес до и во время беременности (если существует риск заражения).

Когда назначается исследование?

При необходимости подтвердить или опровергнуть факт инфицирования герпесом половых органов.

Вы можете добавить к заказу еще тесты в течение 7 дней

ДНК вируса простого герпеса I и II типа – лабораторный тест, позволяющий обнаружить генетический материал вируса герпеса (Herpes simplex) в биологических жидкостях ( моча, слюна) и соскобе эпителиальных клеток разных локализаций ( урогенитальный соскоб, соскоб эрозивно- язвенных элементов и др.). Простой герпес 1 и 2 типа может проявляться как недомогание с появлением болезненных пузырьков на коже и слизистых оболочках, причем в большинстве случаев имеются слабо выраженные симптомы и человек может не знать о том, что он инфицирован. При контакте с носителем вируса происходит инфицирование, при этом сам вирус остается в организме, обычно в небольшом количестве. Контакт с вирусом обычно сопровождается выработкой иммунных антител к вирусу герпеса. Здоровый иммунитет подавляет деятельность вируса, поэтому сам вирус может не определяться прямыми методами исследования, но при стрессе, ослаблении организма и падении иммунитета вирус может реактивироваться.

Чаще всего этот тест назначается при подозрении на острую герпетическую инфекцию или при признаках реактивации хронической инфекции вирусом герпеса 1 или 2 типа.

Используемая тест- система методом ПЦР real-time выявляет наличие в соскобе клеток эпителия или в биологической жидкости фрагментов ДНК, характерных для вирусов герпеса I и II типов.

Обычно результат ДНК вируса простого герпеса можно получить в течение 1-2 дней.

Подготовка зависит от способа взятия материала. Выбрать локус (место взятия соскоба клеток) и уточнить возможность сдачи анализа на дому можно, выбрав способ взятия материала.

Выберите требуемый вид биоматериала

Соскобы из урогенитального тракта не берутся в течение суток после местной терапии (свечи, мази, спринцевания), после полового контакта и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ должно пройти 48 часов. В случае наличия признаков острого воспаления необходимость взятия мазка определяется лечащим врачом. Если необходимо получить соскоб из уретры, то перед взятием материала нужно не мочиться 1,5 - 2 часа. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.