Что такое посев на дерматофитию
О грибах
Грибы присутствуют повсеместно в нашей окружающей среде. Из тысяч различных видов грибов лишь немногие обладают способностью вызывать заболевания у животных. Подавляющее большинство грибов являются либо почвенными организмами, либо патогенами растений. Однако описано более 300 видов грибов, которые могут быть патогенами. В природе существует пять царств: Monera (бактерии и сине-зеленые водоросли), Protista (простейшие), Fungus (грибы), Plantae (растения) и Animalia (животные). Грибы являются эукариотами, не содержат хлорофилл, могут расти в форме дрожжей (одноклеточных организмов), плесени (многоклеточных волокнистых организмов) или иметь смешанный тип роста. Клеточные стенки грибов состоят из хитина, хитозана, глюкана и маннана. Царство грибов включает пять подцарств: Chytridiomycota, Zygomycota, Basidiomycota, Ascomycota, а также Fungi Imperfecti или Deuteromycota.
Для обозначения разных частей грибов используют специальные термины:
- Гифа – нитевидное образование грибов, состоящее из многих клеток.
- Мицелий – это множество гифов.
- Септы – разделения между клетками внутри гифов.
- Конидии – неподвижные споры бесполого размножения у грибов (типы конидий: бластоконидии, артроконидии, аннелоконидии, фиалоконидии, пороконидии и алуриконидии).
- Конидиофор – мицелий, на котором расположены конидии.
Предполагается, что для развития инфекции важна фаза роста волоса. Инфицирование волоса начинается и продолжается в фазу анагена. В фазе телогена может произойти спонтанное излечение. Также считается, что самоизлечение может наступить ввиду развития воспалительной реакции. Именно в этой связи дерматофития считается самоизлечивающимся заболеванием. Впрочем, артроспоры могут оставаться на волосяном стержне, однако повторное инфицирование конкретно этого волосяного фолликула наступит только после того, как опять начнется фаза анагена.
Эпизоотологические данные. Когда на приеме мы видим кошку или собаку, у которой можно подозревать микроспорию, важно выяснить, не было ли предварительного контакта у животного на выставках, не находилось ли оно в передержках, например на период отпуска владельцев. Если животное подобрано либо поступает к нам из приюта или из питомника, то подозрение в отношении возможного заболевания усиливается.
ЛЮМ-диагностика. Люминесцентное свечение пораженных волосков при использовании лампы Вуда позволяет целенаправленно забрать их для прямой микроскопии и для посева. Но, к сожалению, этот метод достоверен только в 50 % случаев (фото 2, 3).
В последнее время на рынке появились коммерческие пробирки для ветеринарии со средой DTM. Это селективная среда, по изменению окраски которой с желтоватого цвета до красного в период роста дерматофитов можно предположить наличие инфекции. Окончательный диагноз можно установить только посредством микроскопии колонии при обнаружении характерных макроконидий. Достоинство этой среды состоит в том, что мы видим ее красную окраску, так как растущие дерматофиты, питаясь сначала белками, находящимися в среде, меняют ее рН. Важно не пропустить этот момент, который возникает тогда, когда мы видим начало роста колонии. Однако необходимо помнить, что и другие грибы тоже могут менять цвет среды, тем самым вводя нас в заблуждение (фото 6). В нашей практике был прецедент, когда среда DTM меняла свой цвет при росте контаминирующего кожу гриба Aspergillus.
Именно микроскопия колонии является основным диагностическим аспектом, позволяющим увидеть макроконидии. А вот поместить клейкую ленту для отпечатка колонии в баночку с маленькой крышкой (в таком виде продается среда DTM) – довольно трудная задача. Наконец, DTM в несколько раз дороже среды Сабуро. Именно последнюю среду, не содержащую индикаторов, мы и предпочитаем в нашей практике для выращивания колоний дерматофитов.
Кетоконазол – противогрибковый имидазол.
Действие: противогрибковое. Нарушает синтез эргостерола в стенках клеток грибов путем ингибирования 14-α-деметилазы, относящейся к системе цитохромов P450.
Ингибирует поглощение пурина и нарушает биосинтез триглицеридов и фосфолипидов.
Фармакокинетика: всасывание усиливается при введении вместе с жирами и небольшим количеством пищи. Высокие концентрации достигаются в печени, почках, гипофизе и надпочечниках. Выделяется с мочой, потом, кожным салом, ушной серой, слюной и молоком. Метаболизируется в печени до неактивных метаболитов, которые выделяются с желчью и фекалиями. Может потребоваться от 10 до 14 дней лечения (до достижения устойчивого уровня и эффективных терапевтических концентраций в коже).
Показания: противогрибковое средство (дерматофитоз собак, малассезиозный дерматит, локализованный или диссеминированный кандидоз, бластомикоз, гистоплазмоз, кокцидиомикоз и криптококкоз). Не рекомендуется для использования при лечении дерматофитоза кошек (предпочтительно использование гризеофульвина, итраконазола или флюконазола). Одновременно его использовали с циклоспорином для уменьшения скорости выведения и снижения требуемой дозы циклоспорина, что удешевляет стоимость лечения. Не является препаратом первого выбора для животных с заболеваниями центральной нервной системы или глаз.
Противопоказания: беременность, лактация, дисфункция печени, тромбоцитопения. Осторожно применять или не применять вообще препарат следует при приеме лекарств, метаболизирующихся ферментами P450. Следует избегать использования вместе с митотаном, рифампином и теофиллином.
Дозировка: собаки: дерматофитоз – 10 мг/кг каждые 24 ч; кошки: не рекомендуется для использования из-за высокой частоты побочных эффектов (потеря аппетита, потеря веса, гепатотоксичность).
Побочные эффекты: анорексия, рвота, диарея, потеря веса, лихорадка, депрессия, гепатотоксичность (гепатоклеточный некроз), тромбоцитопения, нерегенеративная анемия, тератогенный эффект, снижение синтеза кортизола и тестостерона у собак, снижение либидо, гинекомастия, азооспермия, импотенция, анэструс, зуд, потеря шерсти, осветление шерстного покрова, связанное с потерей остевых волос, а также катаракта после длительной терапии у собак.
Мониторинг: сывороточные уровни печеночных ферментов (аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы), билирубина, а также желчных кислот следует оценивать до начала лечения и во время терапии (каждые 2–4 недели).
Итраконазол – синтетический триазоловый противогрибковый препарат.
Действие: ингибирует 14-α-деметилазу, относящуюся к системе цитохромов P450, предотвращая синтез эргостерола в клеточной мембране гриба, слабо связывается с P450 млекопитающих.
Фармакокинетика: биологическая доступность составляет (приблизительно) 40 % натощак, повышается при введении вместе с пищей и кислом значении pH в желудке. Плохо проникает в ЦНС или ткани глаз. Метаболизируется в печени на неактивные метаболиты, которые выводятся с желчью и мочой.
Показания: дерматофиты, Malassezia, кандидоз, бластомикоз, гистоплазмоз, аспергиллез (низкая эффективность против назальной формы), криптококкоз, споротрихоз, зигомикоз, хромомикоз, онихомикоз, а также простейшие Leishmania и Trypanosoma. По сравнению с кетоконазолом обладает усиленной мощностью, сниженной токсичностью и более широким спектром действия.
Противопоказания: заболевание печени или печеночная недостаточность. Продлевает эффекты и повышает токсичность бензодиазепинов (мидазолама), циклоспорина, глюкокортикоидов, антигистаминных препаратов, хинидина, дигоксина, винкристина, варфарина, сульфонилуреазы. Противопоказан одновременно с антацидами, H2-блокаторами и антихолинергиками.
Дозировка: собаки: 5–10 мг/кг каждые 12–24 ч; кошки: 5 мг/кг каждые 12 ч или 10 мг/кг каждые 24 ч. Для кошек и мелких собак капсулы можно вскрыть и гранулы смешать с пищей. Дозировку можно сократить на 25–50 % при использовании суспензии для орального применения без пищи. Пульс-режимы дозирования можно использовать при лечении поверхностных грибковых инфекций. Так, при лечении дерматофитоза применяли дозировку 5 мг/кг в течение 7 дней через неделю, повторяя затем этот терапевтический курс с интервалами через неделю.
Побочные эффекты: рвота, диарея, боль в животе, потеря аппетита, повышение уровня печеночных ферментов в сыворотке, повышение азота мочевины в сыворотке, лихорадка, повышенное давление, кожная сыпь, периферический отек и язвы из-за кожного васкулита (наиболее часто встречается у собак, получающих более 10 мг/кг/день 2 раза в день). Может быть тератогенным, и его не следует давать беременным или кормящим животным.
Мониторинг: уровень печеночных ферментов необходимо отслеживать каждые 2 недели и прекращать введение лекарства при развитии каких-либо побочных эффектов. Можно снова попробовать начать лечение при 50%-ном снижении дозы после исчезновения побочных эффектов.
Действие: противогрибковое, ингибирует синтез стерола и цитохрома P450. Более высокая аффинность к ферментам грибов, чем у кетоконазола и итраконазола.
Фармакокинетика: высокая биологическая доступность (> 90 %), на всасывание в ЖКТ не влияют прием пищи и изменения значения рН в желудке. Хорошо проникает в ЦНС и ткани глаз, независимо от наличия воспаления
Показания: великолепный препарат против дрожжей, включая Cryptococcus, Blastomyces, Histoplasma, Coccidioides, Malassezia, Candida; обладает переменным действием против мицелиальных грибов, таких как Aspergillus и дерматофиты.
Противопоказания: дозировка снижается при почечной недостаточности, следует избегать применения препарата беременным животным. Циметидин может препятствовать всасыванию. Усиливает активность антикоагулянтов, тиазидных диуретиков, рифампина, циклоспорина, глипизида, антигистаминов, дифенилгидантоина и теофиллина.
Дозировка: собаки: 2,5–5 мг/кг каждые 12–24 ч; кошки: 5–10 мг/кг каждые 12–24 ч.
Побочные эффекты: рвота, диарея, дискомфорт в животе, кожная сыпь, гепатотоксичность (встречается реже, чем при применении кетоконазола и итраконазола). Не подавляет гормоны надпочечников или половые гормоны.
Мониторинг: оценивается уровень ферментов печени до и (ежемесячно) во время проведения лечения.
Дополнительная информация: в одном исследовании in vitro 30 изолятов M. canis было обнаружено, что все 30 являются устойчивыми к флюконазолу.
Тербинафин – аллиламин.
Действие: ингибирует биосинтез эргостерола и скваленэпоксидазы, что приводит к дефициту эргостерола в клеточной стенке гриба и внутриклеточному накоплению сквалена. Тербинафин обладает фунгистатическим и фунгицидным действием, поскольку он в основном не является ингибитором систем цитохрома P450. Является более селективным, чем азолы.
Фармакокинетика: всасывание усиливается при введении с жирной пищей. Высоколипофильный и кератинофильный. В высоких концентрациях находится в поте, кожном сале, коже, когтевых ложах и шерсти. Метаболизируется печенью и выводится с мочой. Местные препараты имеют минимальную всасываемость (
Среди возбудителей грибковых заболеваний ногтей на ногах чаще всего встречаются дерматофиты. Они способны поражать не только пластины, но и кожу стоп, а также межпальцевые складки. Подробнее рассмотрим, что собой представляет подобный вид грибка, его причины и основные проявления.
Дерматофиты поражают не только ногти, но и кожу
Дерматофиты – что это такое?
Дерматофиты (dermatophytes, dermatophiton) – плесневые грибы, которые принадлежат сразу к нескольким родам (Epidermophyton, Microsporum, Trihophiton). Патогенные микроорганизмы поражают кератиносодержащие участки тела – ногти, роговой слой эпидермиса, волосяную часть головы – и являются возбудителем инфекционного заболевания дерматофитии. Патология относится к группе дерматомикозов, которые способны травмировать кожу кистей, стоп, складок.
Грибок дерматофит под микроскопом
Грибы этого рода проникают в верхнюю прослойку ногтей на ногах и вызывают развитие онихомикоза. Дерматофитам не свойственно глубокое проникновение в ноготь, за счёт чего заболевание лучше поддаётся терапии.
Развитие dermatophyton на ногтях ног имеет несколько основных причин:
- снижение защитных сил организма;
- ушибы ногтевых пластин;
- сбои в нормальном снабжении нижних конечностей кровью;
- системные патологии в тяжёлых формах (сахарный диабет, болезни крови, нарушения работы сердца).
Дерматофития является заразным заболеванием. Грибковую инфекцию можно подхватить при посещении бассейнов, спортзалов, саун, а также, если пользоваться чужими предметами обихода (домашние тапочки, полотенца, постельное бельё). Патогенные организмы встречаются не только у человека, но и животных, в частности, dermatophytes бывает у кошек, собак. Поэтому домашние любимцы могут легко принести вирус в дом после прогулки на улице.
Онихомикоз на ногах, вызванный дерматофитами, способен развиться на фоне длительного лечения антибиотиками, кортикостероидами, иммуносупрессивными препаратами.
Дерматофиты, поражая ногтевую пластину, имеют яркие проявления:
- потеря прозрачности ногтя, его помутнение, изменение цвета;
- появление белых или желтоватых пятен и полос на ногтях;
- утолщение рогового слоя, разрастание очага поражения (ногти становятся плотнее, напоминают клюв или когти);
- развитие воспалительного процесса на околоногтевом валике, пластина крошиться, разрушается и может отделиться от ложа (поздние стадии дерматофитии ногтей).
Как выглядит поражение ногтя дерматофитами показано на фото.
При появлении грибка ноготь меняет цвет и слоится
Диагностика дерматофитии
Выявление грибковой инфекции основывается на 3 методах.
- Клинические данные. Врач осматривает повреждённые участки, опрашивает пациента с целью выявления дополнительных симптомов заболевания.
- Микроскопия. В лабораторных условиях осуществляется забор биологического материала (соскоб травмированной ткани), с помощью которого под микроскопом определяется наличием спор грибка.
- Культуральный анализ – посев патогенного материала на питательную среду, что позволяет выявить интенсивность роста и саму культуру инфекции. Метод позволяет не только определить вид грибка, но и узнать его чувствительность к определённым антибактериальным средствам.
Профессиональная диагностика нужна для исключения похожих заболеваний (псориаз, лишай) и подбора противогрибковых препаратов, пагубно влияющего на тот или иной возбудитель.
Анализ необходим, чтобы точно выявить заболевание
Лечение дерматофитов
Грибок ногтей, вызванный дерматофитами, требует комплексного и длительного лечения. Традиционная терапия может быть подкреплена народными средствами.
Для борьбы с дерматофитами врачи рекомендуют использовать как системные (таблетки, уколы), так и местные (мази, кремы, гели) противогрибковые препараты. Эффективными считаются флуконазол, тербинафин, батрафен.
Препарат имеет широкий спектр действия. Он применяется в лечении микозов различной этимологии, в том числе и дерматофитов. Дозировка определяется врачом исходя из запущенности и особенностей заболевания. Обычно достаточно 150 мл один раз в неделю. Терапия флуконазол длится до тех пор, пока грибок полностью не исчезнет и отрастёт здоровый ноготь (от 3 месяцев до 1 года).
Флуконазол это препарат широкого спектра действия
Противогрибковое средство способствует разрушению мембранной структуры клеток вируса, что ведёт к скорой гибели дерматофитов.
- распарить ногти, снять ороговевший слой, зачистить пилочкой;
- тонким слоем нанести крем на ногтевую пластину и хорошо втереть;
- процедуру повторять 1–2 раза в сутки.
Курс лечения мазью Тербинафин длится от 4 до 6 месяцев. При условии непрерывного пользования за это время грибок исчезает, отрастает здоровый ноготь.
В тяжёлых стадиях дерматомикоза врачи назначают Тербинафин в таблетках. Дозировка назначается индивидуально с учётом всех нюансов течения болезни.
Тербинафин эффективно справляется с грибком на ногтях
Действующее вещество – циклопироксоламин – эффективно борется с дерматофитами на ранних стадиях поражения ногтя, обычно в дистальной стадии (от верхнего края пластины).
- травмированные ногти на ногах хорошо распарить, обработать пилочкой и высушить;
- лекарство тонким слоем нанести на поражённые места (пластину и околоногтевой валик), тщательно втирать;
- процедуру проводить 2 раза в сутки, желательно утром и перед сном.
Батрафен содержит действенное вещество — циклопироксоламин
Дерматомикоз, в частности, дерматофития ногтей на ногах, требует комплексного подхода. С целью усиления терапевтического эффекта аптечные препараты можно подкреплять альтернативной медициной.
Небольшое количество йода развести в тазике с тёплой водой. Парить стопы в готовом растворе нужно не менее 15–20 минут. Размякшие ногти максимально обработать пемзой или пилочкой, хорошо высушить. Обработанные участки смазать 3%-й перекисью.
Йод тормозит деление спор гриба, а перекись водорода производит обеззараживающий эффект, что в совокупности создаёт неблагоприятные условия для развития патогенной среды.
Понадобится 50 г сухой травы растения и 1 л кипятка. Измельчённый чистотел залить водой и проварить на медленном огне 5–10 минут, после чего дать отвару настояться не менее 2 часов. Готовую жидкость вылить в тазик с горячей водой. Парить ноги в целебном отваре нужно 20–30 минут, затем хорошо высушить и протереть травмированные дерматофитами участки маслом чистотела (2–3 капли на каждый ноготь).
Лечить дерматофитию таким способом нужно до тех пор, пока не отрастёт здоровый ноготь (до 2–3 месяцев). Процедуру желательно осуществлять перед сном.
Быстро избавиться от грибка помогает чистотел
На 3 л тёплой воды (37–40 градусов) развести 100 г соли. В такой ванночке держать ноги не менее 20 минут, после чего максимально удалить ороговевший слой и нанести противогрибковую мазь.
Солевые процедуры помогают антимикотическим веществам глубже проникать в поражённые участки, тем самым повышают терапевтический эффект лекарств.
Соль это простое и доступное средство для лечения грибка
Профилактика грибка
Успех основного лечения грибка зависит не только от лекарственных препаратов и народных средств, но и от соблюдения профилактических мер.
- При посещении бассейнов и саун важно пользоваться личной сменной обувью, полотенцем и другими предметами обихода. После окончания процедур рекомендуется обрабатывать стопы и кисти рук противогрибковыми средствами.
- Хотя бы раз в день мыть ноги холодной водой и мылом.
- Подбирать удобную обувь. Это позволит избежать повреждений кожи (потёртостей, мозолей, микротрещин).
- Избегать опрелостей, бороться с повышенным потоотделением нижних конечностей.
- Ежедневно менять носки, колготки, чулки.
Не забывайте тщательно мыть ноги
Придерживаясь несложных правил, можно обезопасить себя от грибковой инфекции и сохранить стопы, ногти в хорошем состоянии.
Плесневые грибки дерматофиты обитают в грунте, встречаются как у людей, так и у животных. Заболевание заразно и быстро распространяется. Рекомендуется не заниматься самолечением, а при первых симптомах обратиться к специалисту. Для успешного избавления от грибка важно придерживаться рекомендаций врача, не прерывать терапию (грозит рецидивом) и соблюдать меры профилактики.
Посев на возбудителей дерматомикозов (Trichophyton spp., Microsporum spp., Epidermophyton spp.) без определения чувствительности к антимикотическим препаратам – метод микробиологической диагностики с культивированием и последующей идентификацией возбудителя поверхностных грибковых инфекций кожи и её производных без выявления его чувствительности к противогрибковым лекарственным препаратам.
Посев на возбудителя дерматофитии, культуральная диагностика дерматомикозов.
Conventional fungus culture and identification, Fungal culture (dermatophutoses).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Волосы, ногти. соскоб.
Общая информация об исследовании
Дерматомикозы (дерматофитии) - это поверхностные грибковые инфекции, при которых поражается только кожа и ее придатки (волосы, ногти). Это наиболее распространенная группа грибковых инфекций. Группу грибов – возбудителей дерматомикозов называют дерматофитами. К дерматофитам относятся три биологических рода: Trichophyton, Epidermophyton и Microsporum. Источники инфекции - больной человек (заражение через предметы обихода - это самый частый путь инфицирования), животные (обычно щенки и котята), почва и растительные остатки.
Клинические проявления зависят от вида возбудителя, локализации поражения и состояния иммунной системы человека. Грибковая инфекция, вызванная дерматофитами, может локализоваться в области волосистой части головы, бороды и усов, ногтей, туловища, кистей и стоп, промежности. Стоит отметить, что дерматофиты могут размножаться только в ороговевших слоях эпидермиса.
Виды рода Trichophyton поражают кожу, волосы и ногти.
Виды рода Microsporum поражают волосы, кожу и очень редко ногти.
Виды Epidermophyton поражают кожу и ногти, но не волосы.
Роды дерматофитов хорошо различаются по микроморфологическим и культуральным признакам, поэтому микробиологический метод занимает важное место в диагностике этих инфекций.
При появлении роста колонии гриба отмечают такие ее признаки, как время появления и скорость роста колонии, ее размеры, цвет поверхности и обратной стороны, характер поверхности и ее рельеф, форму и край колонии, ее консистенцию и наличие врастания в субстрат. Так же проводят микроскопическое исследование, оценивая особенности структурных элементов гриба. В большинстве случаев это позволяет идентифицировать вид возбудителя.
Для чего используется исследование?
- Для идентификации возбудителя грибкового поражения кожи, волос или ногтей.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на дерматомикоз, наличии характерной клинической картины. Особенно у пациентов, длительно принимавших антибактериальные препараты или стероидные гормоны.
Что означают результаты?
Референсные значения: не обнаружены.
Отрицательный результат – отсутствие роста грибов.
Положительный результат – выявление роста грибковой колонии на питательной среде, с указанием вида культивированного возбудителя.
- Исследование кожи и ногтевых пластинок на поверхностные микозы
- Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов
Кто назначает исследование?
Дерматовенеролог, инфекционист, терапевт, педиатр, врач общей практики.
Литература
- Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 1204-1208, 1220–1222.
- A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 9th Edition, by Frances Fischbach, Marshall B. Dunning III. Wolters Kluwer Health, 2015. Pages 488-492.
- Дерматовенерология. Национальное руководство / под ред. Ю. К. Скрипкина, Ю. С. Бутова, О. Л. Иванова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. С. 234-262.
- Сербин А.Г., Леонтьев Д.В., Россихин В.В. Основы медицинской микологии. Учебное пособие для студентов фармацевтических ВУЗов. – Харьков: 2010. С. 29-44.
YouTube Premium
Выполните вход, чтобы сообщить о неприемлемом контенте.
Текст видео
ВВЕДЕНИЕ
Дерматофития, которую часто называют "стригущий лишай" является кожной инфекцией, вызваемой различными видами грибов в совокупности называемых "дерматофиты", что в переводе означает "растения, которые живут на коже". Основными грибами, ответственными за дерматофитии у домашних животных являются Microsporum Canis, М. Gypseum и Trichophyton mentagrophytes. Эти патогенные грибы встречаются во всем мире и являются наиболее частой причиной кожных микозов у домашних животных, а также у людей.
Дерматофитии важны, так как являются весьма заразным зоонозом кожи. Дети, пожилые люди и люди с ослабленным иммунитетом подвержены риску. Также рискуют заразиться те, кто находится в постоянном контакте с инфицированными животными.
ПРИМЕНЕНИЕ
DERMAKIT предназначен для использования в качестве дифференциальной диагностики дерматологических заболеваний у собак, кошек, кроликов и лошадей. DERMAKIT является быстрым, простым и легким для выполнения анализом, который позволяет ветеринару не микологу диагностировать инфекцию для начала противогрибкового лечения.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
Существуют различные методы и процедуры для диагностики дерматофитий, однако, выращивание грибковой культуры является наиболее простым, точным и экономически эффективным средством диагностики. Грибковые посевы признаны золотым стандартом для постановки диагноза. Другие диагностические методы включают лампу Вуда и исследование с помощью микроскопа.
Лампа Вуда может быть использована только как инструмент скрининга. Из различных дерматофитов, лампа Вуда в состоянии идентифицировать только M. Canis но штаммы M. Canis флуоресцируют под лампой не все. По этой причине, для экспертной диагностики, лампа Вуда не подходит. Также с использованием лампы Вуда возможен ложноположительный результат исследования, если кожа животного жирная или себорейная.
Изучение кожных струпьев и/или волос с помощью микроскопа, для диагностики дерматофитии является действенным диагностическим методом. Однако могут возникнуть трудности в наблюдении грибковых элементов, или возможны путаницы с другими элементами. Это может привести к ложноотрицательным или ложноположительным результатам.
ОПИСАНИЕ
Для выявления и идентификации общих дерматофитов, Таплин и коллеги разработали культурную среду, известную как Дерматологическая Тестовая Среда (DTM). Большинство коммерческих культурных сред основаны на разработке Таплина, у всех ДЕРМАКИТОВ Дермотологическая Селективной Среда (DSM) основана на оригинальной Дерматологической Тестовой Среде. Новая DSM включает в себя:
• Специальные питательные вещества, которые способствуют росту дерматофитов.
• Выборочные антибиотики, которые подавляют рост непатогенных сапрофитных грибков и бактерий.
• рН индикатор, который подразумевает наличие дерматофитов через изменение цвета на красный в результате производства щелочных метаболитов у таких грибов как Microsporum, Tricophyton и Epidermophyton.
СОСТАВ НАБОРА
• 12 флаконов
• Этикетки
• Рабочая станция
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
Если тесты хранят при температуре от + 2 ° C до + 8 °C, стабильность гарантируется в течение 36 месяцев. Если тест хранится при комнатной температуре, стабильность гарантирована в течение около 20 месяцев.
ПРОЦЕДУРА ПРОВЕДЕНИЯ ТЕСТА
Проверьте места отбора образцов, чтобы гарантировать, что они не были обработаны лекарственными средствами, которые могли бы повлиять на результаты.
• Бактериальные или сапрофитные контаминантные области, из которой берут пробу, можно уменьшить путем мягкой очистки с использованием 70% спирта.
• Используя стерильное лезвие скальпеля, возьмите соскоб и/или волос с границы пораженного участка.
• Кошки часто бывают бессимптомными носителями дерматофитий, которые могут заразить других кошек или человека. Для проверки таких животных на наличие дерматофитов, используйте новую (или стерилизованную) зубную щетку, чтобы прочесать все тело или в подозреваемых областях и полученные волосы поместить на культуральную среду.
• Поместите образец на поверхности культуральной среды без прорезания самой среды.
• Закройте флакон, не полностью затягивая крышку, чтобы избежать образования влаги, что может привести к изменению результата.
• На протяжении испытательного периода выдерживайте при комнатной температуре (22-25 ° С). Ежедневно проверяйте образец на изменение цвета среды и процесс роста колоний.
За последние годы все больше владельцев животных обращается за помощью к ветеринарному врачу с заболеваниями кожи. Наибольшую опасность представляют собой дерматомикозы: микроспория и трихофития. Эти два заболевания отличаются высокой контагиозностью и являются общими для человека и животных. Чаще всего от больных животных заражаются женщины, дети, люди со сниженным иммунным статусом.
Дерматофитозы – болезни кожи, возникающие вследствие паразитирования патогенных грибов рода Microsporum и Trichophiton, получивших общее название дерматофитозы (дерматомикозы, лишай).
Грибковые поражения – это не только привычное для всех красноватое кольцевидное облысение. Клинические признаки весьма разнообразны. В зависимости от вида возбудителя изменения могут проявляться в виде эритемы, алопеции, чешуек, язв, фистул, свищей, узлов, масс, новообразований и разрастание тканей в объеме. И в этих случаях выделение чистой культуры – высокочувствительный и специфический метод лабораторной диагностики микозов.
Люминесцентный тест хорош как скрининговый метод при массовом обследовании животных (питомники, приюты).
При сомнительном результате исследования лампой Вуда, трихоскопии или при отсутствии ответа на лечение, осуществляют дальнейшую диагностику на основании анализа колоний, выросших при посеве клинического материала из пораженного участка кожи или шерсти.
Культуральный метод дает возможность определять род и вид возбудителя, оценить чувствительность возбудителя к противомикотическим средствам и, следовательно, проводить адекватную терапию и профилактику заболевания.
Еще одним из методов диагностики является прямая микроскопия, когда патологический материал рассматривается под микроскопом и в волосках можно обнаружить артроспоры грибов. В данном исследовании также есть свои минусы, так за споры грибов часто принимаются артефакты.
Грибы рода Candida, полученные с помощью скотч-теста на выросших колониях. Окраска по Май-Грюнвальду.
Грибы рода Aspergillus, полученные с помощью скотч-теста на выросших колониях. Окраска по Май-Грюнвальду.
Также мы производим посев на среду Asan Easy Test Yeast. Данный тест помогает выявить грибковые поражения кожи, вызванные родом Malassezia и Candida, которые часто являются причинами дерматитов у животных.
Данная процедура занимает всего несколько минут и совершенно безболезненна для животного.
Пораженный участок, из которого планируется взять материал для посева, не должен быть обработан противогрибковыми препаратами, а само животное не должно быть помыто противогрибковыми шампунями.
Место взятия образца обрабатывается 70 % раствором этанола или водой с мылом.
С помощью стерильного скальпеля собираются волосы или кожные чешуйки с периферии пораженного участка и помещают собранный материал на поверхность специальной питательной среды.
Рост грибов происходит не быстро. Это достаточно долгий процесс. Образцы культивируют в темном месте от нескольких дней до трех недель при температуре 25-30 0 C.
Учет результатов проводится ежедневно в течение всего времени исследования, отмечая изменения цвета среды и рост колоний. Изменения цвета агара начиная с 2-3 дня после высева является первым признаком роста дерматофитов. Рост колоний в среднем наблюдается на 5-10 день инкубации.
Идентификация возбудителя возможна на основании макроскопического осмотра колоний грибов и путем микроскопии мазков отпечатков с обнаружением гиф и спор.
После трех недель инкубации, если на селективных средах не отмечается рост колоний грибов, анализ считается завершенным, а результат его отрицательный.
В нашем ветеринарном центре проводят посев на дифференциально-диагностические среды в зависимости от поставленных задач: декстрозный агар Сабуро, среда Mykodermoassay DTM, Mykodermoassay TRIO и другие.
Получить подробную консультацию по вопросам диагностики дерматофитозов можно у ветеринарного врача-дерматолога в Ветеринарном центре доктора Базылевского А.А. или по телефонам.
Читайте также: