Исследование кожи и ногтевых пластинок на поверхностные микозы

Микроскопическое исследование соскобов с гладкой кожи и ногтевых пластинок, используемое для диагностики поверхностных микозов кожи и ее придатков.

Микроскопия соскобов кожи и ногтевых пластинок на грибы.

Синонимыанглийские

• Direct microscopy, Superficial mycoses
• KOH-test

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Общая информация об исследовании

Поверхностные микозы кожи – это группа заболеваний кожи и ее придатков (ногтей и волос), возбудителями которых являются грибы, способные к поверхностной инвазии эпидермиса, волос и волосяных фолликулов и ногтевого аппарата. Чаще всего поверхностные микозы обусловлены наличием грибов рода Dermatophytes (в этом случае говорят о дерматофитии), однако причиной заболевания также могут быть грибы рода Candida, Malassezia, Trichosporon и Hortaea.

Клинический осмотр позволяет заподозрить наличие микоза гладкой кожи или микоза ногтей (онихомикоза), но не используется в качестве окончательного метода диагностики, так как многие другие заболевания могут иметь схожую клиническую картину (например, псориаз ногтей может напоминать онихомикоз). Основным методом диагностики этой группы заболеваний является прямая микроскопия, при которой исследуемый материал (чешуйки кожи, полученные при поскабливании в очаге поражения, или фрагменты пораженной ногтевой пластинки) исследуют под микроскопом после обработки раствором гидроксида калия (KOH). Микроскопия позволяет выявить гифы/псевдогифы и дрожжевые клетки гриба и охарактеризовать их морфологию, на основании чего может быть подтвержден диагноз "поверхностный микоз с уточнением его природы". Так, например, грибы-дерматофиты (Trichophyton, Microsporum и Epidermophyton) представлены множественными трубкообразными структурами с истинными септами и образованием спор. Грибы рода Candida, напротив, представлены вытянутыми дрожжевыми клетками (псевдогифы), а истинных спор не образуют. Грибы рода Malassezia образуют округлые дрожжевые клетки и вытянутые псевдогифы.

Возбудители поверхностных микозов в действительности часто входят в состав нормальной микробиоты кожи или временно ее колонизируют ("здоровое носительство") и могут быть определены при микроскопии соскобов с нормальной кожи или соскобов с дистальной части ногтевых пластин у многих здоровых людей. По этой причине положительный результат исследования при отсутствии каких-либо клинических признаков микоза не имеет никакого клинического значения. Это утверждение, однако, не относится к анализу подногтевого содержимого проксимальных ногтевых пластин, которые в норме не содержат никаких микроорганизмов, в том числе и грибов.

Следует отметить, что микроскопия не позволяет уточнить вид гриба: для этих целей используют посев на питательную среду (микробиологический метод). Отрицательный результат исследования не позволяет полностью исключить поверхностный микоз.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики поверхностных микозов кожи (дерматофитии, кандидоза, разноцветного лишая и других) и онихомикоза.

Когда назначается исследование?

• При симптомах поверхностного микоза кожи (единичный или множественные очаги шелушения и гиперемии с четким краем, сопровождающиеся зудом);
• при наличии симптомов онихомикоза: изменения цвета (желтый, беловатый), толщины (подногтевой гиперкератоз) и формы ногтя (трещины, онихогрифоз).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

• дерматофития, кандидоз или другой поверхностный микоз кожи или ногтей;
• "здоровое носительство".

• Микроскопия не позволяет уточнить конкретный вид гриба.
• Грибы-дерматофиты сохраняются в чешуйках кожи в течение нескольких месяцев, грибы рода Candida – нескольких недель.

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, миколог, врач общей практики.

Грибковые заболевания занимают второе место по распространенности среди кожных болезней. Для того чтобы правильно подобрать лечение, нужно вовремя сделать анализ на грибок, определить вид микоза и его чувствительность к лекарственным препаратам. Существует несколько видов анализов на грибковые заболевания кожи, ногтей и внутренних органов. Об этих исследованиях мы подробно расскажем в статье.

Виды грибов и провоцируемые ими заболевания

Грибковые заболевания человека можно разделить на пять основных групп. Это дерматомикозы, кератомикозы, кандидозы, глубокие микозы и псевдомикозы.

К дерматомикозам относят:

• микроспорию (возбудитель — рода Microsporum);
• трихофитию (грибки рода Trichophyton);
• эпидермофитию (Epidermophyton floccosum);
• рубромикоз (Trichophyton rubrum);
• эпидермомикоз (эпидермофитию) стоп (Trichophyton mentagrophytes).

Дерматомикозы вызывают воспалительные процессы в коже, могут поражать ногти и волосы. Источниками инфекции выступают животные (при микроспории) или больные люди.

Ярким признаком дерматомикоза является очаг поражения кожи или ногтей с активно отслаивающимися чешуйками. Последние содержат высокую концентрацию грибков и являются источником инфицирования здоровых людей. Грибок активно размножается во влажной среде, поэтому микозами чаще всего заражаются в сауне, в бассейне или в спортзале.

При кератомикозах происходит повреждение рогового слоя кожи, но при этом нет воспалительной реакции. К кератомикозам относят два заболевания — узловатая трихоспория и отрубевидный лишай, который вызывает грибок Malassezia furfur (он же — Pityrosporum orbiculare). Первое заболевание характерно для жаркой местности, в частности Африки и Южной Америки, поэтому о нем мы говорить не будем.

Возбудитель отрубевидного лишая — дрожжеподобный грибок — питается выделениями сальных желез. Заболевание начинается с появления мелких желтоватых чешуек около волосяных фолликулов. Постепенно очаги заболевания сливаются, образуя покрытые мелкими чешуйками пятна от розоватого до бурого цвета Из-за того, что на коже могут одновременно находиться пятна разного цвета, это заболевание еще называют разноцветным лишаем.

На коже головы Malassezia furfur может спровоцировать себорейный дерматит.

Дрожжеподобные грибки рода Candida в небольших количествах являются частью нормальной микрофлоры. Но при снижении иммунитета Candida может начать усиленно размножаться, вызывая заболевание, известное как кандидоз . В зависимости от места поражения выделяют кандидоз кишечника, кожи, ротовой полости, мочеполовой системы. При размножении этого грибка в крови возникает системный кандидоз.

Глубокие микозы чаще всего поражают органы дыхательной системы. Болезнь развивается в основном у ослабленных людей с хроническими заболеваниями.

К числу глубоких микозов относятся:

• аспергиллез (род Aspergillius);
• мукороз (род Absidia, Mucor, Rhizopus);
• пенициллиоз (род Penicillium);

Мукороз чаще всего поражает полость носа и гортани. Аспергиллез может вызывать заболевания полости носа, гортани, легких. Грибки рода Penicillium могут вызывать отомикоз (заболевания уха), поражение легких, абсцессы.

Выделяют также псевдомикозы . Эти патологии провоцируют особые группы грамположительных бактерий: актиномицеты и нокардии, имеющие много общего в строении вегетативных и репродуктивных форм клеток с грибами.

Зачастую при грибковых поражениях всех типов не развиваются специфические симптомы и установить причину заболевания бывает трудно. Поставить достоверный диагноз можно только на основе совокупности внешних признаков и результатов лабораторных анализов.

При проведении анализа на грибки исследуют кровь, мокроту, соскоб с кожи и слизистых, волосы или ногти. Анализ может проводиться микробиологическим методом (микроскопия, посев), методами ПЦР и ИФА.

Микроскопическое исследование позволяет быстро определить, вызвано ли заболевание грибком. Биологический материал (кусочек ногтя, волосы, соскоб с поверхности кожи или другой материал) обрабатывают специальным образом, при необходимости окрашивают и рассматривают под микроскопом. При микозах в препарате обнаруживают нити мицелия, споры гриба, дрожжевые клетки.

Микроскопическое исследование назначают при подозрении на микоз кожи, волос или ногтей.

Материалом для анализа грибка ногтей является соскоб с помощью стерильного скальпеля с разных участков ногтевой пластинки. При поражении кожи делают соскоб с границы очага — здесь наибольшая концентрация возбудителя. Если поражена волосистая часть головы, то кроме чешуек кожи забирают на исследование и волосы. Их осторожно изымают с помощью пинцета.

Микроскопическое исследование обычно длится около 3–5 дней. В большинстве случаев речь идет о качественном анализе — результат будет содержать лишь информацию о наличии или отсутствии грибов. В редких случаях определяется тип возбудителя (дрожжеподобный или плесневый грибок) и его концентрация (единичные или множественные клетки), а также тип обнаруженных элементов (гифы, споры, конидии).

В норме в исследуемом материале не должно быть грибков. Единичные клетки могут говорить не о заболевании, а о бессимптомном носительстве, поэтому интерпретировать результат должен только врач.

Посев, или культуральный метод , дает более точные данные о возбудителе заболевания, хотя и занимает больше времени. Такой анализ на грибки в зависимости от их вида может занимать от 2–4 дней до 4 недель.

Материал с поверхности кожи или ногтя собирают так же, как и для микроскопии. В лаборатории биоматериал помещают в специальную питательную среду. Если в материале были грибки, то через некоторое время появляются характерные колонии. Грибки из каждой колонии исследуют под микроскопом, определяют род и вид грибка, его концентрацию. В некоторых случаях исследуется чувствительность к определенным лекарственным препаратам.

Иммуноферментный анализ крови на грибок используется для диагностики глубоких микозов, когда получить материал для посева или микроскопии сложно.

ИФА позволяет определить титр антител к конкретному грибку. Чаще всего используется определение IgG к кандидозу и аспергиллезу. Чувствительность и специфичность этих тестов около 80%. Но это исследование может выдать положительный результат и при поверхностных поражениях — ярко выраженных кандидозе влагалища или ротовой полости.

Для ИФА забирается кровь из вены. Особой подготовки к исследованию не требуется. Можно забирать кровь натощак или не ранее чем через 4 часа после еды.

Результат готовится от 1–2 до 5 дней. В зависимости от установленного оборудования и проведения подтверждающих проб. Обычно в результатах такого анализа содержится одна из трех формулировок — положительный, отрицательный или сомнительный результат.

ПЦР-исследование позволяет установить наличие грибка определенного вида. Из плюсов этого метода можно выделить его точность, скорость и достоверность (специфичность около 100%). Из минусов — узкую направленность. То есть для проведения ПЦР-анализа на грибок нужно точно знать, что именно искать.

Для исследования делают соскоб с поверхности пораженной кожи или слизистых оболочек. Также на исследование могут забирать кровь, мочу, секрет простаты.

Метод ПЦР может быть как качественным, так и количественным. В первом случае в результате будет указано только наличие или отсутствие ДНК возбудителя. Во втором — количество его клеток в исследуемом материале. Анализ занимает в среднем от 1 до 3 дней.

По результатам одного ПЦР-анализа на грибки нельзя поставить диагноз. Говорить о кандидозе можно только при наличии специфических симптомов.

Стоимость анализов на грибок зависит от типа исследования, от ценовой политики лаборатории, а также от ряда дополнительных факторов. Анализ в клинике обычно стоит дороже, чем непосредственно в лаборатории. Посев — дороже микроскопии. Количественные методы ПЦР будут дороже качественных.

В среднем исследование соскобов с кожи или ногтей под микроскопом будет стоить около 600–800 рублей. Микологический посев для определения грибков рода Candida — 400–500 рублей без определения чувствительности и 600–700 рублей с чувствительностью к противогрибковым препаратам. Анализ на грибок кожи или ногтей стоит дороже — порядка 1500 рублей. Эта стоимость уже включает взятие биоматериала.

ИФА на определение иммуноглобулинов к определенному виду грибка стоит 500–800 рублей за один анализ, плюс около 120–170 рублей за взятие крови. Анализ на грибок методом ПЦР — около 200–300 рублей за качественный анализ и около 700–800 за количественный. Также нужно заложить в бюджет около 200–250 рублей за взятие соскоба.

Не каждая лаборатория проводит микологические исследования. Работа с грибками требует особого разрешения, оборудования и квалификации персонала. Поэтому лучше заранее узнать, какие именно исследования проводятся в конкретных медицинских учреждениях.

При грибковых заболеваниях кожи и ногтей нужно выбрать лабораторию, в которой могут профессионально сделать забор материала, так как от этого во многом зависит результат. Чем меньше времени прошло с момента забора материала до начала исследования, тем лучше.

Для проведения ПЦР- и ИФА-исследований используются микропланшетки на несколько анализов. Лаборант обычно сдает материал на исследования только после того, как заполнится вся планшетка. Это может увеличить срок готовности результатов. Проблема типична для учреждений с небольшим потоком клиентов.

Некоторые клиники заключают договор с лабораториями. В этом случае забор материала осуществляется на базе лечебного учреждения, само же исследование проводится в лаборатории подрядчика. Поэтому стоит уточнить заранее, где именно будет проводиться исследование.

Также стоит обратить внимание на способ получения результатов. В некоторых лабораториях результаты можно получить не только в виде стандартного бумажного бланка, но и через интернет, в личном кабинете или письмом на электронную почту.

Найти надежную лабораторию, где можно сдать все необходимые анализы на грибки, не всегда просто. Однако потраченное на ее поиски время окупится точными результатами, правильным диагнозом и вовремя начатым лечением грибковых заболеваний.

Правильный сбор материала из пораженных ногтей - залог успешного микробиологического исследования. Забирая материал, не всегда захватывают участки ногтя, содержащие жизнеспособные грибы. Нежизнеспособные грибы в культуре, естественно, не вырастут, и их вид установить не удастся.

Участок ногтя, который надо взять, определяется формой онихомикоза.

Так, при поверхностной форме онихомикоза следует делать соскобы с поверхности ногтевой пластинки.

При самой распространенной дистальной подногтевой форме наиболее жизнеспособные грибы располагаются под ногтевой пластинкой. Материал, который направляют на исследование, должен включать не только обрезок ногтевой пластинки, но и соскоб с ногтевого ложа, из-под пластинки.

Кроме того, следует захватывать и области неизмененного ногтя, поскольку на границе между ними и пораженными участками ногтя располагаются самые активные грибы.

При проксимальной подногтевой форме брать материал трудно. В этих случаях иногда, особенно если собираются проводить гистологическое исследование или дифференциальную диагностику, предпринимают биопсию ногтя, изредка используют бормашину.

При паронихиях делают соскобы с проксимального валика и из-под него.

Во всех случаях, чтобы избежать бактериальной контаминации, перед взятием образца следует обработать ноготь этиловым спиртом.

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Микроскопическое исследование патологического материала на грибы производят в нативных и окрашенных препаратах.

Для приготовления неокрашенных препаратов полученный материал размельчают при помощи скальпеля или препаровальной иглы и помещают на середину предметного стекла. Для более четкого выявления элементов гриба производят просветление (мацерацию) материала. С этой целью прибегают к помощи различных веществ, чаще всего едкой щелочи (КОН, NaOH), которые растворяют эпидермальные чешуйки, слизь, гной, просветляют пигмент волоса и тем самым делают грибы доступными для исследования.

На размягченные чешуйки кожи или ногтя, которые помещают на середину предметного стекла, наносят 1-3 капли 20 - 30% раствора КОН (NaOH). Исследуемый материал в каплях щелочи осторожно подогревают над пламенем спиртовки до появления нежного белого ободка из кристаллов щелочи по периферии капли. Подогревать до кипячения не следует. После подогревания каплю накрывают покровным стеклом, избегая попадания пузырьков воздуха.

Р. А. Аравийский и Г. И. Горшкова (1995) рекомендуют просветленные и накрытые покровным стеклом препараты кожных чешуек и волос оставлять на 5 - 10 мин, а ногтевых пластинок – на 30 - 40 мин до микроскопирования.

Просветление препаратов можно проводить без подогревания, для этого их оставляют в 20% растворе КОН на 30 - 60 мин или используют другие методы просветления патологического материала: хлораллактофенолом по Аману; лактофенолом; раствором, содержащим по 15% диметилсульфоксида и КОН в воде. Хорошие результаты получают после просветления ногтевых пластинок, помещенных в 5% раствор КОН на 24 ч, подогревания в этом случае не требуется.

Микроскопическое исследование производят на обычном лабораторном микроскопе без иммерсии.

Конденсор микроскопа должен быть опущен, диафрагма сужена. В начале препарат находят на стекле при малом увеличении (40х), последующее исследование производят при большем увеличении (100х);

детально препарат изучают при увеличении 400х. Необходимо исследовать несколько препаратов с тем, чтобы увеличить надежность анализа и избежать ложноположительных результатов.

Ошибки в микроскопической диагностике грибов могут возникнуть в связи как с дефектами приготовления препарата, так и с недостаточной опытностью лаборанта.

Дефекты изготовления прежде всего бывают связаны:
с перегреванием препарата, что может привести к выпадению кристаллов щелочи, разрушению волоса и появлению мелкозернистого распада в патологическом материале.

Линейное расположение удлиненных ровных кристаллов щелочи весьма напоминает нити септированного мицелия даже на чистом стекле без патологического материала.

Дифференциально-диагностическими признаками являются исключительное однообразие кристаллов, их стекловидная прозрачность, многогранность краев и отсутствие неразрывной связи одного элемента с другим. В сомнительных случаях рекомендуется добавить к препарату капельки слегка подогретой дистиллированной воды, которые быстро растворяют кристаллы щелочи.

За элементы гриба ошибочно могут быть приняты:

Липиды кожных покровов, жировой распад клеток и зерна кератогиалина, особенно имеющие правильную форму, могут напоминать отдельные споры гриба. Но разнообразие формы и, главное, размеров, отсутствие внутренней структуры образований (вакуоли, оболочки) говорят против грибковой природы данных элементов. Липиды также могут попасть в препарат при взятии патологического материала с недостаточно очищенного очага поражения.

Пузырьки воздуха могут напоминать споры дрожжеподобных клеток, но в отличие от последних они окружены плотной темной оболочкой, и даже самые маленькие пузырьки воздуха всегда больше клеток гриба.

Нити от ткани носков, одежды и т. п. обычно лежат отдельно от патологического материала, они всегда больше гифов, грубее и не септированы.

В некоторых лабораториях просветление препаратов для микроскопического исследования проводят 15 - 30% раствором КОН, в который добавляют 5 - 10% коммерческих темно-синих чернил фирмы Паркер (Parker's Superchrome Blue-Black Ink).

При этой окраске гифы и споры окрашиваются в голубой цвет.

При микроскопии обнаруживают нитевидные гифы грибов или почкующиеся клетки (рис.1).

Таким образом, микроскопия дает заключение только о грибковой природе инфекции, но не о виде гриба-возбудителя.

Конечно, результативность микроскопического исследования зависит от квалификации сотрудника лаборатории.

Следует учесть, что некоторые плесневые грибы, в том числе дерматофиты, в культуре вырастают медленно, за 2-3 нед.

Даже при соблюдении всех правил сбора материала, при хорошем оборудовании лаборатории и высокой квалификации ее персонала число положительных результатов культурального исследования очень невелико.

По данным зарубежной литературы, процент положительных исследований не превышает 50.
Процент положительных результатов в лучших отечественных лабораториях едва достигает 30.

Таким образом, в 2 из каждых 3 случаев онихомикоза его этиологию установить не удается.

ЛЮМИНЕСЦЕНТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

В 1925 г. Margaret и Deveze обнаружили, что волосы, пораженные некоторыми дерматофитами, дают характерное свечение в ультрафиолетовых лучах, пропущенных через фильтр Byда. Стекло Byда состоит из сульфата бария, содержит около 9% окиси никеля; оно пропускает лучи длиной 365 нм. В качестве источника ультрафиолетовых лучей можно использовать различные приборы. Природа свечения точно не установлена. Волос продолжает светиться после гибели гриба и после попыток экстрагировать флюоресцирующий материал горячей водой или холодным раствором бромида натрия. Интенсивность и характер свечения зависят от рН раствора. Полагают, что флюоресцирующая субстанция появляется в процессе взаимодействия гриба и растущего волоса.

Свечение в ультрафиолетовых лучах, пропущенных через фильтр Вуда, характерно только для волос, пораженных грибами рода Microsporum (M. canis, M. audouinii, M. ferrugineum, M. distortium, изредка M. gypseum и M. nanum), a также Trichophyton schonleinii. Волосы, пораженные микроспорумами, особенно M. canis и M. audouinii, дают наиболее яркое свечение; волосы, пораженные Т. schonleinii, имеют тусклую зеленоватую флюоресценцию.

Свечение наблюдается только в полностью пораженных грибом волосах. Его может не быть в свежих очагах поражения. В этих случаях следует эпилировать волосы из краевой, наиболее активной зоны, и свечение можно обнаружить в корневой части волос.

Люминесцентный метод можно использовать как для диагностики и контроля за эффективностью лечения у отдельных больных, так и в эпидемиологических очагах. Компактные передвижные установки удобны для обследования контактных людей в школах, детских садах и т. п.

Люминесцентное обследование необходимо производить в затемненной комнате, очаги поражения должны быть предварительно очищены от корок, остатков мази и т. п. Люминесцентный метод можно использовать для диагностики отрубевидного лишая, особенно при локализации очагов поражения на волосистой части головы. Очаги поражения при этом заболевании имеют красновато-желтое или бурое свечение. Это свечение, однако, не является строго специфичным, так как может наблюдаться при наличии перхоти на волосистой части головы и даже у здоровых людей в области устьев волосяных фолликулов на лице и верхней части туловища. Выявленные с помощью люминесцентного метода пораженные волосы должны обязательно подвергаться микроскопическому исследованию.

ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ И БИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Иммунологические методы исследования используют для выявления специфической перестройки организма и серологической диагностики грибковых заболеваний. Для обнаружения специфических антител в сыворотке пробы проводят следующие серологические реакции: агглютинации, преципитации, связывания комплемента, иммунофлюоресценции с соответствующими антигенами.

Аллергическое состояние организма больного выявляют с помощью аллергических кожных проб. Аллергены наносят на скарифицированную кожу по Пирке или втиранием в кожу по Моро, внутрикожно по Манту, а также уколом в кожу. С помощью этих проб выявляют аллергические реакции как немедленного, так и замедленного типа, что позволяет оценить состояние гуморального и клеточного иммунитета.

Для выявления специфической сенсибилизации лимфоцитов используют реакции дегрануляции базофилов, агломерации и альтерации, тест бластной трансформации, подавления миграции макрофагов и т. п.

Сопоставление результатов серологических и аллергических реакций оказывается полезным как для диагностики, так и для прогноза течения микозов.

Биологический метод. Используется для лабораторной диагностики глубоких и особо опасных микозов. Основан на заражении животных патологическим материалом от больного или культурой исследуемого гриба. Осуществляется в специальных лабораториях.

ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Гистология микозов кожи, обусловленных дерматофитами

Патоморфологические изменения в очагах поражения обусловлены внедрением грибов в роговой слой эпидермиса, волосы и ногти и ответной воспалительной реакцией кожи, которая может быть острой, подострой или хронической. Диагноз можно считать установленным только в том случае, если в гистологических препаратах обнаруживают элементы грибов. Для этого используют различные гистологические окраски, наиболее информативной является периодическая кислотная реакция (PAS), позволяющая выявить полисахариды, имеющиеся в целлюлозе и хитине клеточной стенки большинства дерматофитов (окраска по Шифу и ее модификации). Можно также использовать реакции сульфатирования и импрегнацию гистологических срезов серебром [Хмельницкий О. К., 1973; Lewer W. F. и Schaumburg-Lewerl.,1983].

Грибы в роговом слое эпидермиса, даже при использовании специальных окрасок, выявляются в небольшом количестве в виде нитей мицелия и спор. В редких случаях, когда грибов в очагах поражения много, их можно обнаружить в срезах, окрашенных гемотоксилин-эозином, в виде нежных базофильных структур в роговом слое.

Воспалительные изменения в эпидермисе могут быть различными: от незначительного внутри- и внеклеточного отека шиповатых клеток до выраженного спонгиоза. Спонгиоз обычно развивается при дисгидротических вариантах микозов стоп и кистей, клинически в этих случаях отмечаются пузырьки. Причиной этой реакции обычно является Т. mentagrophytes var. interdigitale. Иногда в эпидермисе отмечается выраженный гиперкератоз, что чаще всего наблюдается при микозе, обусловленном Т. rubrum.

Гистологические изменения в дерме неспецифичны и соответствуют острому, подострому и хроническому воспалению.

При микозе гладкой кожи, вызванном Т. rubrum, грибы иногда выявляются в пушковых волосах и волосяных фолликулах. Вокруг фолликулов развивается воспалительная реакция, которая за счет попадания в дерму грибов может приобретать гранулематозный характер. Центральная часть инфильтрата в этих случаях может подвергаться нагноению и некрозу, а периферическая состоять из лимфоцитов, гистоцитов, эпителиоидных и многоядерных гигантских клеток, внутри которых иногда обнаруживаются споры гриба. Размеры спор здесь достигают 6 мкм в диаметре, в волосе обычно не превышают 2 мкм.

При инфильтративно-нагноительной форме микозов волосистой части головы и области роста бороды и усов элементы грибов обнаруживаются в волосяном фолликуле, внутри и вокруг волоса. В волосе они определяются чуть выше зоны начала кератинизации (примерно на уровне 30 мкм). В дерме отмечают воспалительную реакцию различной интенсив­ности, наиболее выраженную при kerion Celsii. При острой гнойной реакции в составе инфильтрата отмечают большое количество нейтрофильных лейкоцитов, элементы грибов в этом случае могут полностью исчезать. При хроническом те­чении процесса инфильтрат может приобретать гранулематозный характер, в нем появляются многоядерные гигантские клетки. Для подтверждения диагноза при отсутствии в инфильтрате грибов можно использовать иммунофлюоресцентные методы окраски. Для этих целей применяют меченную флюоресцином антисыворотку к Т. mentagrophytes, которая позволяет обнаружить антигены гриба в волосе и в перифолликулярном инфильтрате.

Формирование инфильтративно-нагноительной реакции кожи при микозе волосистой части головы (kerion Celsii) и области роста бороды и усов, обусловленных грибами М. саnis, Т. tonsurans и Т. verrucosum, представляет собой проявле­ние иммунологической реакции. Об этом свидетельствуют:

1. Склонность очагов поражения к спонтанному разрешению.

2. Отсутствие элементов гриба при очень выраженной воспалительной реакции со стороны кожи при микозе, вызванном Т. verrucosum (faviforme) и Т. tonsurans.

3. Постоянная положительная реакция в ответ на внутрикожное введение трихофитина при инфильтративно-нагноительных формах микоза, вызванного зоофильными трихофитинами (например, Т. tonsurans), и отрицательная — при поверхностных микозах, обусловленных тем же Т. tonsurans.

При фавусе в роговом слое эпидермиса обнаруживается большое количество нитей мицелия и единичные споры гриба. Скутула представлена экссудатом, паракератотическими клетками эпидермиса, клетками воспалительного инфильтрата, а также нитями мицелия и спорами гриба, которые расположены преимущественно в периферической зоне скутулы. В активной стадии болезни в дерме вокруг дегенеративных волосяных фолликулов отмечается выраженный воспалительный инфильтрат, содержащий многоядерные гигантские и плазматические клетки. В старых очагах поражения волосы и сальные железы отсутствуют, имеются явления фиброза.

Гистология микозов кожи и слизистых оболочек, обусловленных дрожжеподобными грибами

При кандидозе кожи и слизистых оболочек грибы рода Candida обнаруживаются в роговом слое эпидермиса или в поверхностных слоях эпителия слизистой оболочки. Элементов гриба обычно мало, они хорошо окрашиваются PAS-peакцией или по Граму; представлены в виде нитей септированного ветвящегося мицелия, размером 2-4 мкм в диаметре, или овоидными спорами, размером 3 - 5мкм в диаметре. Диагностическое значение имеет обнаружение мицелиальной формы гриба.

При гистологическом исследовании хронического гранулематозного кандидоза кожи и слизистых оболочек элементы гриба также преимущественно обнаруживают в роговом слое эпидермиса или в самых верхних отделах эпителия слизистой оболочки, но иногда в шиповатом слое, внутри волоса и в дерме. Отмечается также выраженный гиперкератоз и папилломатоз; в дерме – густой воспалительный инфильтрат, состоящий из лимфоидных клеток, нейтрофилов, плазматических и многоядерных гигантских клеток. Инфильтрат может распространяться в подкожную жировую клетчатку.

При отрубевидном лишае в роговом слое эпидермиса обнаруживают большое количество элементов гриба в виде нежных базофильных структур, которые хорошо видны даже при окраске препаратов гемотоксилин-эозином. Грибы представлены как нитями, так и спорами.

При фолликулярной форме отрубевидного лишая отмечается скопление роговых масс и клеток воспалительного инфильтрата в расширенных устьях волосяных фолликулов. Вокруг фолликулов также отмечают воспалительный инфильтрат. При PAS-реакции сферические или овальные споры гриба, размером 2—4 мкм в диаметре, обнаруживают внутри устья волосяных фолликулов, а иногда в перифолликулярном инфильтрате. Мицелий никогда не выявляется.

Нарушение пигментации кожи у больных отрубевидным лишаем обусловлено способностью гриба Pityrosporum вырабатывать субстанцию, которая угнетает процесс пигментообразования в эпидермисе. Электронно-микроскопическое изучение биоптатов кожи с гипопигментированных участков показало, что в меланоцитах образуются очень маленькие меланосомы, которые не способны проникать в кератиноциты. В гиперпигментированных участках кожи, наоборот, меланосомы крупные и содержат большое количество меланина.