Лабораторная диагностика микозов атлас

27 апреля 2017, 11:38 Эксперт статьи: Блинова Дарья Дмитриевна 0 5,260

При поражении организма грибками крайне сложно вовремя обнаружить заболевание и выявить возбудителя. Довольно проблематична диагностика микозов, по той причине, что заболевание не проявляется никакими признаками либо имеет очень разнообразную симптоматику. В зависимости от того какой участок заражен паразитами для диагностики берут волосы, зараженные ногти, часть кожи, мокроту, кровь, небольшую часть внутреннего органа или лимфоузлов. Микоз — довольно серьезное поражение паразитами кожных покровов и внутренних органов, которое способно значительно навредить здоровью человека. Крайне важно своевременно провести качественную диагностику, которая заключается в лабораторных исследованиях.

Важность своевременной диагностики микоза

Микоз — достаточно серьезное поражение паразитами кожных покровов и внутренних органов. Заболевание способно нанести непоправимый вред здоровью, а порой и привести к летальному исходу. Поэтому крайне важно своевременно выявить патологию и предупредить развитие осложнений. В противном случае на коже возникают пятна, которые имеют свойство загнаиваться и лопаться с последующим вытеканием гноя. Возникает неприятный запах, который сложно устранить. С помощью ранних диагностических процедур у больных можно провести своевременное противогрибковое лечение с применением антифунгальных средств широкого спектра действия. Такая терапия позволит предотвратить распространение микоза по всему организму.

Первый прием

При подозрении на микоз кожи или внутренних органов следует незамедлительно обратиться к дерматологу, а если есть возможность, к микологу. Эти специалисты в первую очередь проводят опрос больного, чтобы выяснить возможные пути инфицирования. Врач уточняет, не работал ли больной последнее время с животными или птицами, которые переносят паразитов. Крайне важно выяснить, в каких жилищных условиях обитает человек, не был ли он в неблагоприятных регионах. Затем проводится осмотр, в результате которого выявляются поврежденные кожные покровы, и определяется масштабность поражения. В процессе осмотра врач обращается внимание на иммунодефицитные состояния больного. Для диагностики микозов производится забор материала, который затем отправляют на лабораторное исследование.

Лабораторная диагностика

Самыми эффективными методами диагностирования микозов кожи являются различные лабораторные исследования, которые способны выявить возбудителя и помочь в подборе схемы терапии. Для выявления возбудителя микоза назначают такие лабораторные исследования:

гистологический анализ;
бактериологический посев;
иммунологическое исследование;
ПЦР-диагностирование;
культуральное обследование;
микробиологические исследования.

Вернуться к оглавлению

Микробиологическая диагностика является наиболее распространенным и самым простым методом выявления микоза в крови и на коже. Для выявления точного диагноза, следует знать, как правильно собирать материал, который необходим при исследовании. Пораженные волосы следует собирать при помощи пинцета. Если инфицирована кожа, то для микроскопии следует соскоблить с поврежденного участка кожный покров. Весь забранный материал помещают в 30% раствор гидроксида калия, а затем на предметное стекло. Микробиологическая диагностика способна выявить, где именно расположен грибок (внутри или снаружи волоса, кожи) и его размеры.

Чтобы предотвратить ошибочный диагноз микоза, следует правильно и грамотно забирать материал для микробиологического обследования.

В медицине существуют такие методы микробиологической диагностики:

Микроскопия с применением нативных или неокрашенных препаратов. Для этого материал осветляют с помощью 10—30% растворов гидроксида калия или натрия. Затем обработанный материал кладут на лабораторное стеклышко, куда предварительно накапали немного глицерины. Сверху прикрывают стеклянной пластинкой и проводят анализ.
Микроскопию окрашенных препаратов проводят несколькими способами, которые идентифицируют бактерии, дифференцируют различные бактерии и выявляют разные грибы.

Вернуться к оглавлению

Сбор бактериологического посева на питательную среду является точным способом диагностики микоза. Учитывая внешний вид и характеристики выросшей колонии грибка, дерматолог устанавливает тип возбудителя, вызвавшего микоз. Единственный минус обследования в том, что требуется много времени, чтобы вырастить колонию. В среднем необходимо около 3-х недель, чтобы выяснить штамм возбудителя. В некоторых случаях метод не приносит ожидаемых результатов.

Метод ПЦР-диагностирования предполагает выявление возбудителя микоза с применением полимеразной цепной реакции. При обследовании увеличивается чувствительность гибридизации, что повышает содержимое вирусного ДНК в исследуемом материале. Этот метод обследования является новым и требует нескольких анализов от пациента. Считается, что такой вид диагностики достаточно затратный, но дает точные результаты.

Культуральные диагностические мероприятия рекомендуются на финальном этапе постановки диагноза. Метод заключается в получении культуры грибка, которая потом отправляется на обследование с помощью микроскопа. Полученный материал кладут на искусственно созданную питательную среду и выявляют род возбудителя, внешний вид, размеры. После чего показано специальное лечение, которое направлено на борьбу с конкретным видом возбудителя микоза.

Иммунологический анализ часто применяется при подозрении на микозы крови. Этот метод предполагает обследование крови, спинномозговой жидкости или урины на наличие возбудителя. При иммунологической диагностике используют коммерческие тест-системы, которые выявляют специфические антигены в биоматериале. С помощью этих методов можно выявить специфичные антитела в сыворотке крови.

Гистологический анализ способен выявить грибки в тканях, волосах, ногтях. При обследовании применяются гистологические окрасы. Чаще всего применяют периодическую кислотную реакцию, поскольку она является максимально информативной. При диагностике грибы проявляются в незначительном количестве и имеют вид спор или нитей мицелия.

Дифференциальный анализ

В связи с тем, что при разных видах микоза проявляются различные симптомы. Это затрудняет постановку точного диагноза. В таком случае медики прибегают к методу дифференциальной диагностики и сравнивают микоз с другими дерматологическими болезнями. Нередко симптомы псориаза путают с микозом, но важно знать, что при микозе соскабливаемые чешуйки не будут кровоточить, в отличие от псориатических бляшек.

Часто микоз путают с парапсориазом, который имеет похожую симптоматику, но не отмечается шелушением кожи.

Важно дифференцировать микоз от нуммулярной экземы. Такое заболевание является особым видом экземы, но выявить это можно лишь при лабораторной диагностике. Часто признаки микоза принимают за проявления полиморфного фотодерматоза, который свойствен только для взрослых. Он никогда не диагностируется у детей.

Проведение лабораторной и дифференциальной диагностики — важная мера при постановке точного диагноза и назначения необходимого лечения. Чтобы устранить до конца признаки микоза, требуется достоверно выявить возбудителя. При несвоевременном проведении диагностических процедур, патология прогрессирует и поражает все большую часть кожи и внутренних органов, вызывая осложнения.

При поверхностных микозах (кератомикозах) патологический процесс локализуется преимущественно в поверхностных слоях эпидермиса, не вызывая при этом видимой воспалительной реакции в дерме. В эту группу входят следующие микозы.

Разноцветный лишай (отрубевидный лишай).Возбудителем является дрожжеподобный гриб Pityrosporum orbicutare (Malasseria furfur). Заболевание чаще возникает у лиц молодого возраста при чрезмерной потливости, при сахарном диабете, ожирении, длительной лихорадке. Очаги поражения локализуются на коже груди, спины, живота, шеи, плечах, проявляясь в виде коричнево-красных пятен, сопровождающихся шелушением.

Диагностика проводится микроскопическим методом. В нативных препаратах соскоба кожи элементы гриба в чешуйках рогового слоя выглядят в виде коротких нитей мицелия, а также скоплений округлых почкующихся клеток с толстой стенкой, размером до 8мкм в диаметре. При посеве материала от больного на среду Сабуро при на 4-8-й день культивирования при температуре 37 0 С появляются белые или кремовые колонии с блестящей поверхностью, состоящие из почкующихся дрожжеподобных клеток.

Черный микоз (кладоспориоз).Возбудитель - Cladosporium werneckii вызывает появление на коже ладоней или подошв светло-коричневых или черных пятен, шелушение отсутствует. При микроскопии нативных препаратов элементы гриба обнаруживаются в роговом слое эпидермиса в виде коричневого ветвящегося септированного мицелия и почкующихся клеток.

Пьедра.Заболевание кутикулы волоса, характеризующееся образованием на волосе узелков белого или черного цвета.

Белая пьедра (трихоспороз),встречаетсяв виде спорадических случаев в странах с умеренным климатом, возбудителем является Trichosporon beigelii (Trichosporon cutaneum).При микроскопии пораженных волос находят мицелий и артроспоры, прямоугольной, овальной или круглой формы, а также скопления спор. Узелки локализуются на волосах подмышечной и паховой областей, на бороде и волосистой части головы.

Черная пьедра,наоборот, встречается в странах с жарким климатом. Возбудитель — Piedraia hortai — имеет аски, в которых находятся от 2 до 8 аскоспор размером от 5 до 80мкм.

Лабораторная диагностика микозов, вызываемых условно-патогенными грибами

(оппортунистические микозы)

Условно-патогенные грибы обычно являются сапрофитами, обитающими во внешней среде, а также на коже и слизистых оболочках человека. Оппортунистические микозы возникают при длительном контакте человека с возбудителем, на фоне иммунодефицита, нерациональной антибиотико- и химиотерапии, приводящей к дисбактериозу и т. д. Некоторые грибы в благоприятных для них условиях способны размножаться в пищевых продуктах (например, в злаках) и накапливать сильнодействующие микотоксины, вызывающие тяжелые пищевые отравления (алиментарные микотоксикозы).

Кандидоз (кандидамикоз)

Возбудителями кандидоза – повсеместно распространенного заболевания являются дрожжеподобные грибы рода Candida (наиболее часто встречается видCandida albicans, реже - Candida tropicalis, Candida pseudotropicalis, Candida krusei, Candida glabrata и т.д.). Кандидоз относится к типичным аутоинфекциям, проявляясь избыточным ростом дрожжеподобных грибов, заселяющих кожу, ногти, слизистые оболочки, внутренние органы. Обычно это заболевание возникает при патологии, связанной с формированием иммунодефицита (сахарный диабет, другие эндокринные болезни, гипо- и авитаминозы, иммунодепрессивная и лучевая терапия, СПИД и т.д.), при дисбактериозе, обусловленном длительным приемом антибиотиков. Наиболее подвержены кандидозу дети и старики.

Выделяют поверхностный кандидоз слизистых оболочек, кожи, ногтевых валиков и ногтей. Кандидоз слизистых оболочек полости рта или влагалища (молочница) характеризуется появлением белого налета, напоминающего свернутое молоко

Хронический генерализованный кандидоз обычно развивается у детей с иммунодефицитными состояниями, имеет медленно прогрессирующее течение с возникновением пневмоний, гастритов, гепатитов и др.

При висцеральном кандидозе поражаются желудочно-кишечный тракт, органы дыхания, мочевыделительная система, ЦНС.

Аллергические формы кандидоза развиваются на фоне имеющегося первичного очага кандидомикоза в результате сенсибилизация организма, при этом могут возникать новые очаги воспаления, в которых возбудитель отсутствует.

Материалом для исследования при кандидозе являются чешуйки кожи и соскоб с ногтей, отделяемое и пленки со слизистой оболочки губ, полости рта, влагалища, мочеиспускательного канала, наружного слухового прохода, а также с конъюнктивы. При висцеральном кандидозе исследуют кровь, спинномозговую жидкость, мокроту, испражнения, мочу, желчь, мазки со слизистых оболочек, биоптаты тканей, пунктаты абсцессов, секционный материал.

Лабораторная диагностика кандидоза включает микроскопию нативных препаратов, выделение чистой культуры гриба, обнаружение в материалах антигенов или нуклеиновых кислот, постановку серологических реакций, аллергических проб.

Микроскопический метод -изучение неокрашенных и окрашенных по Граму, Романовскому-Гимзе, Цилю-Нильсену препаратов из исследуемого материала, в которых обнаруживают круглые или овальные почкующиеся дрожжеподобные клетки, размером от 3-6 мкм, и псевдомицелий в виде цепочек удлиненных клеток (рис. 37). Некоторые виды дрожжеподобных грибов (C.albicans) образуют терминальные хламидоспоры.

По Граму грибы рода Candidaокрашиваются в темно-фиолетовый цвет, по Цилю-Нильсену - в синий с розово-желтыми включениями липидов, по Романовскому-Гимзе — в розовато-желтый цвет с темно-фиолетовыми включениями волютина и красным хроматиновым веществом.

Микологическое исследование.Выделение чистой культуры дрожжеподобных грибов производят на плотных средах (обычно среде Сабуро, сусло-агаре, Кандида-агаре или др.) с добавлением антибиотиков (пенициллин, стрептомицин и т.д.) для подавления роста сопутствующих бактерий. Через 2-3 дня культивирования при 30-37 0 С образуются круглые, диаметром до 1 см, выпуклые сметанообразные гладкие колонии белого цвета с ровными краями и глубоким врастанием в среду ветвистого древовидного псевдомицелия.

Выделенную чистую культуру пересевают в жидкие среды ( картофельную, кукурузную среды, морковно-картофельный отвар и др.) для выявления псевдомицелия, появляющегося обычно на 3-5 день культивирования (реже на 10-15 день и позже) В жидких питательных средах Candida образуют равномерное помутнение, осадок или пленку на поверхности среды. Наряду с псевдомицелием, у этих грибов можно найти истинный мицелий и хламидоспоры (крупные двухконтурные споры с зернистым содержимым) при посеве на рисовый или Хламидоспор-агар с последующим культивированием гриба в условиях пониженной температуры и концентрации кислорода..

Рис. 37. Возбудитель кандидамикоза(Candida albicans) в исследуемом материале

Бластоспоры (почки) у дрожжеподобных грибов рода Candida располагаются нерегулярно по обеим сторонам мицелия, хламидоспоры круглые, крупные (10-20мкм), двухконтурные. C.albicans сбраживает глюкозу, мальтозу, левулезу и частично галактозу; молоко не изменяет.

Идентификация дрожжеподобных грибов рода Candidaдо уровня вида основывается на определении типа филаментации, наличия хламидоспор, ферментативной активности (табл. 24).

Таблица 24. Сахаролитические свойства дрожжеподобных грибов рода Candida.

Вид гриба	Сахара
глюкоза	мальтоза	лактоза	галактоза	сахароза
Candida albicans	кг	кн	-	кг	-
Candida tropicalis	кг	кг	-	кг	кг
Candida pseudotropicalis	кг	-	кг	кг	кг
Candida krusei	кг	-	кг	-	-

Обозначения: кг – расщепление субстрата с образованием кислоты и газа

Характерным дифференциальным признаком, отличающим вид С.Albicans от других видов дрожжеподобных грибов рода Candida, является их способность образовывать ростовые трубки - трубкообразные выросты бластоспор (признак РТ). Для этого часть колонии грибов переносят в 0,5 мл стерильной сыворотки теленка, пробирки помещают в термостат при 37 0 С на 2,5-3,0 часа, после чего готовят препарат раздавленной капли и микроскопируют под большим увеличением микроскопа (объектив х40). У ростовых трубок отсутствует перемычка или сужение на месте соединения с бластоспорой, они тоньше, чем удлиненная бластоспора или псевдомицелий у С. tropicalis.

Для дифференциации с другими грибами у культур дрожжеподобных грибов определяют наличие капсулы и уреазы (у кандид они отсутствуют), определяют способность ассимилировать и ферментировать углеводы (глюкозу, мальтозу, сахарозу, галактозу и др.).

Для быстрой идентификации С. albicansразработаныспециальные диски с хромогенными субстратами, позволяющие выявить специфичные для этого вида грибов ферменты L-пролинаминопептидазу и 3-галактозамидазу. На диск наносят суточную культуру гриба, инкубируют 30 мин при 35 °С, затем добавляют 1 каплю 0,3%-го раствора гидроксида натрия. Появление желтого окрашивания свидетельствует об активности L-пролинаминопептидазы. Затем добавляют 1 каплю коричного альдегида; развитие в течение 1 мин розово-красного окрашивания свидетельствует о наличии 3-галактозамидазы. Положительный тест на оба фермента в сочетании с наличием ростовых трубок считаются достаточными для идентификации С. albicans.

Серологический метод(постановкаРСК, РА, ИФА. РНГА, ВИЭФ и др. с парными сыворотками крови больных с целью определения специфических антител) обычно проводится при висцеральных формах кандидоза. Результаты исследования считают положительными при нарастании титра антител более чем в 4 раза в динамике заболевания. Для РА используются корпускулярные антигены, для РСК очищенные полисахариды, лизаты или ультразвуковые дезинтеграты дрожжеподобных грибов.

Аллергологический метод(преимущественно у больных висцеральным кандидозом)- постановка внутрикожной аллергической пробы со стандартным кандидозным аллергеном, представляющим взвесь клеток грибов, прогретую при 80 0 С в течение 2 ч. Результаты реакции (гиперемия, папула) учитывают через 24 — 48 ч. В связи с широким распространением сенсибилизации к антигенам грибов аллергопроба имеет ограниченное диагностическое значение.

Генодиагностика - разработана ПЦР для инидикации видоспецифического фрагмента ДНК С. albicans.

Выявить поражение и определить возбудителя при поражении грибка на первых этапах крайне сложно. Диагностирование осложнено тем, что патология сразу никак не проявляется или имеет разнообразную симптоматику. Для определения возбудителя берут биоматериал с того участка, который поразила патогенная микрофлора: мокроту, часть кожи, зараженный ноготь, кровь, биопсию лимфоузлов или внутренних органов.

Что такое грибковые заболевания

Причиной обращения к дерматологу становятся, как правило, первые патологические проявления болезни. Клинические признаки будут отличаться в зависимости от места заражения, возбудителя грибкового заболевания. Выделяют следующие типы патогенных микроорганизмов:

грибок Кандида (Candida) – вызывает кандидозные инфекции;
Трихофитии (Trichophyton) – провоцирует инфекционные патологии ногтей, кожи, слизистых оболочек;
Криптококкоз – атакует внутренние органы, легкие;
Аспергиллез – грибковое заболевание, вызванное снижением иммунитета.

При диагностике может быть определена одна из 2 групп инфекции по локализации:

Поверхностное. Выявляется поражение кожи, слизистых, распространение на внутренние органы не происходит (инфекции, которые вызваны грибками рода трихофитии, кандида).
Системное. Определяется при поражении внутренних органов, диссеминации паразитов с кровью (аспергиллез, криптококкоз).

Проникает патогенная микрофлора через ранки на поверхности эпидермиса, микротравмы, причиной заболевания может стать любая царапина, которая спровоцирует микоз гладкой кожи. Не справляется организм с атакой возбудителя при снижении защитных функций. При диагностике часто определяют заражение родом трихофитон или Кандида. Последние вызывают такие заболевания:

молочница;
кандидоз у мужчин;
кандидоз ротовой полости.

Существует более нескольких десятков возбудителей, их делят по методу поражения тканей. При диагностике могут выявить следующие виды грибковых микроорганизмов:

глубокие системные микозы провоцирует Histoplasma capsulatum;
субкутанные подкожные микозы вызывает Sportrichum schenckii;
эпидермомикозы развиваются из-за Epidermophyton floccosum;
отрубевидный лишай, поверхностный микоз - Malassezia furfur;
оппортунистические грибковые заболевания - Candida albicans.

Классификация микозов

Общее название всех болезней этого типа скрывает под собой разные виды поражения организма человека грибами. При диагностике врачи разделяют заболевания кожи на 4 группы:

Кератомикозы. Местом локализации становится роговой слой эпидермиса, в других слоях кожи воспалительные явления отсутствуют (пьедра, разноцветный лишай, парша, споротрихоз). Вызывают эту разновидность патологии следующие грибы: Sporotrichium, Trichosporon, Piedraia, Exophiala, Pityrosporum.
Дерматомикозы. Характеризуются выраженным воспалительным процессом, локализуются на коже, волосистой части головы, на ногтях (фаус, трихофития, эпидермофития, микроспория). Провоцируют патологии следующие штаммы грибов: Epidermophyton, Microsporum, Trichophyton.
Кандидамикозы. Затрагивает этот вид грибков слизистые оболочки, кожу и ее придатки. Часто объектом атаки грибков рода Кандида становятся внутренние органы.
Глубокие микозы. Провоцируют тяжелые заражения всех слоев кожи, внутренних органов, слизистых оболочек, костей, мышц (мукороз, пенициллиоз, аспергиллез).

Выделяют отдельно псевдомикозы (актиномикоз, эритразма), которые не являются заболеваниями грибкового типа, но по симптомам схожи с истинными микозами. В этих случаях обязательно нужна дифференциальная диагностика. Диагностика в таких случаях очень важна, потому что помогает определить тип грибкового поражения или исключить его. От этого зависит назначения схемы лечения, ее длительность и эффективность.

Грибки-дерматофиты глубокого проникаются в кожу, провоцируют дерматомикозы, к примеру, следующие известные патологии:

Относят этот вид патологии к разным болезням, которые создают рубцовые изменения, деформацию кистей рук, ногтей стоп, изменение структуры и выпадение волос. Поражают возбудители верхние, глубокие слои кожи, что приводит к появлению фурункулоподобных узлов, пустулезных высыпаний, обширных очагов воспаления. Для развития благоприятным условием становится нарушение гигиены стоп. Сначала грибок растет на коже ног, в межпальцевых промежутках, затем переходит на ногти.

Патогенные микроорганизмы поражают глубокие и поверхностные слои кожи, распространяются на ногти, волосы, внутренние органы. Вызывают болезни грибы рода Кандида, болезни относятся к группе кандидамикозов. Выделяют следующие типы этих недугов:

генерализованные;
поверхностные;
висцеральные.

Относятся грибы Candida к условно-патогенным. Дрожжеподобные возбудители можно обнаружить при диагностике в кишечнике, ротовой полости и у здорового человека. Сдерживает распространение патогенных микроорганизмов сильный иммунитет, а при его ослаблении начинается активное размножение кандид, что приводит к поражению кожного покрова туловища, ступней, головы, кистей. Клинические изменения отмечаются при всех типах кандидамикозов. Лечение зависит от тяжести течения, вида поражения.

Это вид заболеваний, которые затрагивают глубокие слои кожи, внутренние органы. Болезни развиваются при сильном снижении защитных сил организма, изменении гормонального фона, нарушении обмена веществ. Относят следующие патологии к глубоким микозам:

кокцидиоидоз;
хромомикоз;
риноспоридиоз;
гистоплазмоз;
споротрихоз;
бластомикоз;
мукороз;
цефалоспориоз;
мицетома;
кладоспориоз;
мадурская стопа;
аспергиллез.

Это группа патологий, которые локализуются только на кутикулах волос, роговом, поверхностном слое кожи. Характерным признаком кератомикоза становится отсутствие воспалительных явлений. Возбудителями болезни являются плесневелые, дрожжеподобные грибы, дерматофиты (около 70 видов патогенов). Провоцируют они следующие заболевания:

шимбери;
белый лишай;
черный лишай;
черепицеобразный микоз;
тропический белый и желтый лишай;
узловатая трихоспория;
пьедра;
разноцветный (отрубевидный) лишай.

Как диагностировать грибок

При подозрении на развитие микоза нужно сразу же обратиться за медицинской помощью. Вам понадобится врач дерматолог или миколог. Диагностика грибка ногтей начинается с опроса пациента, чтобы выявить возможные пути заражения. Специалист спрашивает про контакт больного с птицами, животными, которые могут переносить паразитов. Важно уточнить не был ли человек в неблагоприятных регионах других стран, в каких условиях он живет.

Далее начинается визуальный осмотр, который помогает определить масштабность поражения, какие участки поверглись воздействию грибков. Врач должен обратить внимание на наличие иммунодефицитного состояния пациента. Для определения типа возбудителя необходимо сделать забор материала, который отправляют на лабораторное исследование. Опытный врач может при первичном осмотре поставить диагноз, но для составления схемы терапии нужно все равно провести изучение биоматериала. Для диагностики грибковых заболеваний применяют следующие методы:

микроскопия – исследование под микроскопом биоматериала, распространенный и простой метод диагностики;
исследование под лампой Вуда – специальный спектр ультрафиолетового освещения (люминесценция) помогает заметить грибковые поражения;
бактериологический посев – точный способ диагностики, но проведение его занимает 2-3 недели, пока не вырастет колония на питательной среде;
ПЦР-диагностика – самый точный способ определения вида патогенной микрофлоры, но для точного диагноза может потребоваться проведение нескольких анализов, что требует траты денег.

Только своевременный точно поставленный диагноз поможет назначить эффективную схему терапии и сократить длительность курса. Лабораторная диагностика грибковых заболеваний является самым эффективным методом для определения типа возбудителя. Для выявления используют такие варианты исследования:

бактериологический посев;
гистологический анализ;
ПЦР-диагностирование;
иммунологическое исследование;
микробиологические исследования;
культкуральное исследование.

Постановку точного диагноза затрудняет то, что при разных видах микоза появляются различные симптомы. В таких случаях используют дифференциальный метод диагностики, сравнивают с другими дерматологическими патологиями микоз. Часто признаки микоза путают с псориазом, но при соскабливании чешуек грибковая патология не будет кровоточить. Схожая симптоматика наблюдается и с парапсориазом.

Врач должен исключить вероятность развития нуммулярной экземы. Это особый вид патологии, который можно выявить только при лабораторной диагностике. Часто признаки грибка принимают за полиморфный фотодерматоз, который может развиваться только у взрослого человека и никогда не встречается у ребенка. Лабораторная и дифференциальная диагностика обязательна для постановки точного диагноза, назначения грамотного лечения.

Микробиологическая диагностика микозов

Это самый простой и распространенный метод выявления микоза на коже и в крови. Для точного диагноза необходимо собрать материал для исследования. При поражении волосистой части головы нужно при помощи пинцета собрать пораженные волосы, а с кожи сделать соскоб поврежденного участка. Лабораторные исследования при грибковых заболеваниях по микробиологическому методу проводятся при помещении биоматериала в раствор гидроксида калия 30%, потом на предметное стекло.

Анализ поможет вывить, где расположен грибок (снаружи или внутри кожи, волоса), его размеры. Если забор материала провести неверно, то анализ может дать ошибочный результат. Используют для диагностики следующие методы микробиологической диагностики:

микроскопия с нативными и неокрашенными препаратами;
микроскопия с окрашенными препаратами.

При диагностике специалист должен учитывать структуру мицелия (строение гиф, их септированность, цвет), особенности строения спор, кондиев, учитывается их цвет, форма и размер, строение клеточной стенки и т.д. Для исследования готовят нативные, окрашенные препараты. Последние требуют обработки материала разными способами:

PAS-окрашивание. Окраска такого типа помогает определить в стенках микроорганизмов нейтральные полисахариды. К ним относится глюкан-маннановый комплекс, который находится в клеточной стенке многих эумицетов. Он и провоцирует процесс окрашивания.
PAS-реакция. Используется для диагностики грибковой инфекции тканевой формы. В лаборатории применяют для этого исследования разные модификации, к примеру, окраска по Гридли или реакция Бауэра.
Метод Грама. Окраска этим способом помогает выявить наличие сопутствующих микрорганизмов.
Окраска по Циль-Нильсону. Помогает определить кислотоустойчивые микроорганизмы. Если биоматериал жидкий, то готовят специальный неокрашенный мазок в просветляющих жидкостях для микроскопии: в равных пропорциях смешивают глицерин и спирт.

Культуральное исследование на грибы

Помещают посев биоматериала на питательную среду (выращивание), чтобы выделить чистую культуру при комнатной температуре. Диморфные грибы в таких условиях образуют мицелий, при росте до 37 градусов начинают формироваться дрожжеподобные клетки. Среда Сабуро применяется для дерматофитов и грибов Candida, для плесневелых (гифальных) необходима среда Чапека. Часто добавляют в состав антибиотик. Глубокие микозы могут определить только в клинико-лабораторных центрах из-за высокой контагиозности.

Люминесцентная диагностика грибковых заболеваний

Для определения пораженных участков кожи патогенной микрофлорой рода Микроспорум используют ультрафиолетовую лампу. Это вариант экспресс-диагностики, которая применяется при необходимости подтвердить наличие кожной инфекции, симптомы лишайных заболеваний. Ультрафиолетовое излучение не является главным способом определения грибка, это вспомогательный метод, поэтому выполнять его не обязательно.

Для осмотра больного используют лампу Вуда, они испускает УФ излучения, под их действием продукты жизнедеятельности грибка светятся ярким светом. Цвет зависит от того, какой вид возбудителя поразил пациента:

зеленоватый – лишай волосистой части головы;
голубой – красная волчанка на губах;
желтоватый – плоские лишайные образования.

Иммунологический ферментный анализ крови на грибок

Для обнаружения микозов, поразивших кожные покровы, внутренние органы (гистоплазмоз, кокцидиоидоз) используют иммунологический ферментный анализ крови на грибковые заболевания. Часто используют эту методику в случае, если взять биопсию тканей для изучения по определенным причинам не получается. Основывается методика на поиск титра антител к конкретному типу грибкового заболевания.

Для этих целей используют определение IgG к аспергиллезу, кандидозу. Точность анализа составляет около 80%, в редких случаях можно получить ложноположительный результат при отсутствии глубоких микозов. Случается это при наличии у больного грибка слизистой оболочки рта или запущенной формы молочницы. Для ИФА требуется забор венозной крови, берут его утром рано или, спустя 4 часа после последнего приема пищи. Другой подготовки для проведения анализа не требуется.

Ответ на анализ будет через несколько суток после забора биоматериала. Редко длительность ожидания превышает 5 дней. Влияет на скорость проведения исследования качество оборудования в лаборатории, если есть причины провести дополнительное изучение образцов крови. Пациенту выдают по завершении процедуры заключение, где будет указано одно из значений:

ПЦР-диагностика грибковых заболеваний

Самым точным и достоверным способом диагностики грибка и других инфекционных заболеваний является полиразмерная цепная реакция. Обладает метод диагностики следующими преимуществами:

низкая стоимость анализа;
высокая точность;
исследование биоматериала проводится быстро;
для анализа можно собрать любой образец тканей (частичку кожи, слизистой, соскоб с подошвы стоп, пальцев рук, поверхности ногтей, волосы, кровь).

Главный недостаток этого исследования – узкая направленность. Чтобы диагностировать микоз, нужно точно знать, где он поразил организм человека. ПЦР определяет тип возбудителя, концентрацию в организме больного. Результаты будут известны через сутки, в некоторых случаях (при отсутствии неблагоприятных условий), ответы приходят в день сдачи (через 5-6 часов). Скорость выполнения исследования зависит от правильности забора образца, опытности медперсонала, загруженности работой лаборатории.

Как определить грибок в домашних условиях

При умении распознать симптоматику микозных патологий и применении домашних методов диагностирования, можно определить вид патогена. Пациент должен правильно оценить течение болезни, можно на первых этапах грибковое заболевание спутать с псориазом или лишаем. Чтобы этого избежать, нужно знать основные признаки микоза, которые отличают его от других недугов. Симптомы поражения грибком:

ногти становятся желтого цвета, начинают слоиться;
изменение формы ногтевой пластины;
нет периодов ремиссии и обострения, начинается полное отслоение пластины, что не происходит при кожных патологиях и псориазе;
место поражения имеет неприятный запах, болит при прикосновенно, появляется зуд, шелушение, могут образовываться бляшки на поверхности кожи;
поражает грибок, как правило, межпальцевые промежутки на одной или обеих ногах, затем недуг распространяется на ноготь и остальную ступню.

Если вы заметили, что ногти на руках, ногах начали видоизменяться, появился неприятный запах, то можно прямо дома проверить наличие или отсутствие инфекции. Вам понадобится для проведения анализа марганец, теплая вода и емкость. Процедура проводится следующим образом:

Сделайте слабый раствор марганцовки.
Погрузите руки или ноги (пораженные конечности) на 2-3 минуты в емкость.
Если ногтевая пластина окрасилась в желтый цвет – вы здоровы. Если же окраска их не изменилась, значит есть инфекция.

Это средство легко найти в аптеке и есть у большинства людей дома. Определить сам грибок йод не поможет, но может помочь определить наличие кожных патологий на начальном этапе развития. К примеру, средство помогает выявить отрубевидный лишай, которые поражает кожу на руках и ногах. Проводится исследование следующим образом:

при наличии признаков кожного заболевания нанести тонким слоем йод на этот участок;
подождите 2 минуты;
если проблема есть, то очаги поражения примут насыщенный окрас;
здоровые участки кожи выделять не будут.

Сколько стоит диагностика грибковых заболеваний в клиниках Москвы

Микроскопическое исследование проб ногтей

Микроскопия и посев (кожа/ногти)

Посев на дрожжеподобные грибы

Микроскопическое исследование соскоб ногтей

Читайте также: