Что такое пцр диагностика гельминтов
Рolymerase Сhain Reaction (PCR), иначе полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это прогрессивный метод лабораторной диагностики инфекционных заболеваний обнаружения генетических патологий, выявления неопластических клеток в начальной стадии рака.
ПЦР относится к генно-молекулярным исследованиям, что обеспечивает высокую точность показателей, минимизирует риск ложноположительных результатов. Для анализа используется биологический материал – кровь, моча, мазок, экскременты, ликвор (спинномозговая жидкость).
Специфика исследования методом ПЦР
Анализ кала на ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний и дифференцирует их разновидность на генно-молекулярном уровне. В ходе исследования оцениваются макромолекулы ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) бактерий, простейших паразитов, глистов или РНК (рибонуклеиновой кислоты) вирусов. Для идентификации достаточно небольшого фрагмента патогена, обнаруженного в экскрементах.
В задачи молекулярной диагностики входит:
- обнаружение инфекционного агента;
- идентификация разновидности микроорганизма (вирус, бактерия, простейший и т. д.);
- дифференциация типа, рода, семейства и т. д.;
- определение тактики лечения, в соответствии с диагностированным заболеванием.
Образец биоматериала помещают в реактор (амплификатор), добавляют реакционную смесь. При последовательной смене температурного режима разрываются водородные цепи дезоксирибонуклеиновой кислоты, образуются комплексы матрицы с праймерами – короткими генетическими фрагментами.
Реагенты достраивают матричную цепь и в ходе реакции амплификации формируют множественные копии возбудителя. При достаточном количестве копий амплификатор дает качественно-количественную оценку обнаруженному возбудителю.
Макромолекулы РНК и ДНК являются носителями уникальной информации, характерной для определенного вида, поэтому точность результатов ПЦР-диагностики максимально приближена к 100%.
Спектр инфекций, определяемых методом PCR по образцу кала
Полимеразную цепную реакцию используют для диагностики кишечных бактериальных и вирусных инфекций, различных видов гельминтозов, заражения организма простейшими паразитами.
Бактерии | ||
Helicobacter pylori | хеликобактер пилори | язв желудка и двенадцатиперстной кишки, гастрит, дуоденит, рак желудка |
Salmonella species | сальмонелла | сальмонеллез |
Campylobacte | кампилобактерия | кампилобактериоз |
Escherichia coli | кишечная палочка (энтеротоксигенные штаммы) | коли-инфекция |
Shigella | шигелла | дизентерия |
V. cholerae, Ber | холерный вибрион | холера |
Yersinia pseudotuberculosis | иерсиния | псевдотуберкулез (кишечный иерсиниоз) |
Вирусы | ||
Rotavirus | ротавирус | ротавирусная инфекция |
Adenovirus | аденовирус | кишечный грипп |
Astrovirus | астровирус | астровирусная инфекция, гастроэнтерит |
Norovirus | норовирус | норовирусная инфекция |
Гельминты и простейшие паразиты | ||
Giardia lamblia | лямблии | лямблиоз |
Enterobius | острицы | энтеробиоз |
Ascaris lumbricoides | аскариды | аскаридоз |
Trichocephalus trichiurus | власоглав | трихоцефалез |
Opisthorchis felineus и Opisthorchis viverrini | описторхи (печеночные сосальщики) | описторхоз |
Taenia solium | свиной цепень | тениоз |
Taenia saginata | бычий цепень | тениаринхоз |
Echinococcus | эхинококки | эхинококкоз |
Entamoeba histolytica | амеба дизентерийная | амебиаз |
В большинстве случаев, анализ ПЦР кала назначают для выявления кишечных вирусов, бактерии хеликобактер пилори, лямблий и дизентерийных амеб. Определение глистной инвазии, как правило, проводят посредством обычного исследования экскрементов на яйца глистов. Бактериальные инфекции диагностируют с помощью анализа на дизгруппу.
Во многих клиниках существует стандартный ПЦР-скрининг на кишечные инфекции, вызванные бактериями и вирусами. Профиль включает определение восьми возбудителей (сальмонелла, шигелла, кампилобактерия, кишечная палочка, ротавирус, аденовирус, астровирус, норовирус).
ПЦР используют для уточнения спорных диагнозов, при получении ложноположительных и ложноотрицательных результатов других исследований. Анализ кала методом полимеразной цепной реакции могут назначить:
- гастроэнтеролог (взрослый или детский);
- инфекционист;
- гепатолог;
- педиатр;
- терапевт.
- проктолог;
- онколог;
- диетолог.
По желанию сдать анализ можно самостоятельно на возмездной основе в любом диагностическом центре Москвы и других городов РФ.
Ключевые достоинства PCR-диагностики
Метод полимеразной цепной реакции обладает значительными преимуществами, в сравнении с иными анализами:
- Подлинность идентификации возбудителей. Определение генно-молекулярной структуры патогенного микроорганизма обеспечивает высокую точность результата.
- Гиперчувствительность к инфекционным агентам. Для выявления патогена достаточно его молекулярного присутствия в образце кала.
- Оперативность проведения анализа. Исследование в условиях лаборатории занимает 1-3 дня.
- Комплексность. Одного образца кала достаточно для проведения анализа на несколько патогенных микроорганизмов.
- Универсальность. С помощью Рolymerase Сhain Reaction возможно определить практически любых инфекционных агентов. Кроме того, анализ обнаруживает не только активные патогены, но и неактивные (погибшие под воздействием лекарственных препаратов).
- Специфичность. В отличие от серологических методов, ПЦР не допускает перекрестных реакций иммуноглобулинов с близкородственными не комплементарными антигенами. Такая особенность исключает получение ложноположительных результатов анализа.
Ошибочные результаты PCR фиксируются при редком явлении генной мутации бактерий и вирусов.
Подготовка к сдаче биоматериала на анализ
Стандартные правила подготовки перед сбором экскрементов для ПЦР-диагностики включают:
При назначенной рентгенографии желудка с использованием бария обследование нельзя проходить до сдачи образца кала. Грудным детям за 3-4 дня не рекомендуется вводить новый прикорм.
Сбор биоматериала на анализ
Сбор и транспортировка биоматериала на исследование методом полимеразной цепной реакции допускается только в стерильном контейнере, который необходимо заранее приобрести в аптеке. Аптечный контейнер имеет герметичную крышку и снабжен специальной ложечкой. Сдать образец кала в лабораторию необходимо утром. Максимальный интервал доставки составляет 3 часа.
При сборе кала следует придерживаться алгоритма:
- Провести гигиену аноректальной зоны без использования мыла (геля).
- Опорожнить мочевой пузырь.
- Произвести дефекацию в судно (использовать бумагу или полиэтилен). Если собирать образец из унитаза, неизбежно попадание микробов.
- Заполнить аптечную емкость на 1/3 часть фрагментами фекалий (для этого использовать ложечку).
- Герметично закрыть крышку контейнера.
- Оперативно доставить биологический материал в лабораторию медицинского учреждения.
Если незамедлительная транспортировка кала к месту исследования невозможна, плотно закрытый контейнер нужно поместить в холодильнике не более, чем на 12 часов. Хранение экскрементов в морозильной камере или при комнатной температуре делает их непригодными к молекулярному исследованию.
При сборе каловых масс с подгузника грудного ребенка важно следить, чтобы в контейнер не попали фрагменты гигиенической ткани. Женщинам не рекомендуется собирать кал для ПЦР-диагностики в первую неделю фолликулярной фазы менструального цикла.
Возможные примеси менструальной крови помешают исследованию. При необходимости проведения экстренного анализа влагалище необходимо закрыть гигиеническим тампоном. Молекулярная диагностика чувствительна к попаданию любых примесей.
Во время процедуры сбора биоматериала нельзя касаться внутренней стороны емкости, ложечки и крышки. Реакция амплификации может создать копии ДНК, случайно попавшей с рук. Итоговые данные будут ложными.
Результаты анализа
В указанное время пациент получает бланк с качественной интерпретацией результата. Варианты могут быть:
Положительный результат при отсутствии выраженных проявлений болезни свидетельствует о латентном бессимптомном течении инфекции или пребывании возбудителя в стадии инкубации.
Итоги
ПЦР – один из самых информативных диагностических методов. Реакция амплификации базируется на определении ДНК и РНК возбудителей инфекционных заболеваний, что обеспечивает высокую точность результатов.
ПЦР анализ кала позволяет выявить вирусные и бактериальные кишечные инфекции, обнаружить инвазии простейших паразитов и гельминтов, а также на 100% идентифицировать патогенные микроорганизмы. Время выполнения исследования – 1-3 суток, в зависимости от загруженности лаборатории.
Лабораторные способы диагностики гельминтозов на сегодняшний день являются основными методами постановки диагноза и подбора эффективного лечения. Некоторые виды паразитов имеют особенности жизненного цикла, из-за чего копрологические исследования, используемые для выявления большинства гельминтозов, оказываются неэффективными. Какой анализ крови на паразитов лучше сдать, и какие гельминты выявляются подобным способом?
Современные медицинские лаборатории располагают тремя методами исследования крови на паразитов:
- ПЦР — диагностика.
- Серологические исследования, включающие РИФ, РНГА, ИФА, РСК.
- Гемосканирование.
ПЦР — диагностика
Метод ПЦР (по-другому называется метод полимеразной цепной реакции) является одним из самых точных и информативных способов исследования инфекционных заболеваний. Материалом могут выступать различные биологические жидкости организма человека: кровь, слюна, моча, спинномозговая жидкость.
Идентификация молекул ДНК и РНК возбудителя
В основе метода лежит идентификация молекул ДНК и РНК возбудителя, которая со 100% точностью показывает, какие гельминты присутствуют в организме человека. Для обследования требуется только сдать кровь из вены. Полученный материал специальным способом обрабатывается, из него выделяют фрагмент ДНК, который впоследствии многократно увеличивается в размерах, тем самым предоставляя возможность определить возбудителя.
С помощью ПЦР-метода можно определить гельминтоз на ранней стадии, когда другие способы диагностики еще неинформативны. Результаты исследования крови на паразитов бывают готовы через сутки, что позволяет начать лечение как можно скорее.
Главным недостатком ПЦР-диагностики является невозможность уточнения интенсивности инвазии, то есть можно узнать, какие паразиты есть в организме, но их точное количество останется неизвестным.
Гельминтозы, выявляемые ПЦР-диагностикой:
- Описторхоз.
- Инвазия аскарид.
- Дифиллоботриоз.
- Энтеробиоз.
- Криптоспоридиоз.
Серологические исследования
Самый доступный и эффективный анализ крови на паразитов — серологическое исследование. Этот метод позволяет выявить все виды ларвальных (личиночных) гельминтозов (в том числе вызванные аскаридами) — для этого требуется только сдать анализ крови на паразиты из вены.
ИФА (иммуноферментный анализ) — самое распространенное исследование крови на гельминты, смысл которого заключается в изучении характера ответа иммунитета в ответ на воздействие антигена, которым в данном случае выступает паразит. Согласно клиническим испытаниям, эффективность данного теста достигает 90%, что делает его одним из самых специфичных и чувствительных методов диагностики. Материалом для исследования выступает плазма или сыворотка венозной крови.
Выявление иммуноглобулинов в крови
Смысл этого анализа крови на паразитов заключается в выработке определенных видов иммуноглобулинов в ответ на внедрение антигенов в организм. Секреция этих веществ происходит в строгой последовательности, за счет чего можно судить о давности глистной инвазии:
- Иммуноглобулины M в анализе крови на гельминты бывают видны в течение первых трех суток от начала болезни, что означает начало острой фазы.
- Иммуноглобулины G начинают вырабатываться через 1-2 месяца после попадания гельминта в организм человека. Если анализ крови на паразитов показал наличие IgG, можно сделать вывод о переходе процесса в хроническую стадию, либо же человек в прошлом уже переболел этой паразитарной инфекцией.
Преимуществами метода ИФА являются малоинвазивность, быстрота получения результатов и возможность наблюдения за ходом болезни в динамике — для этого следует регулярно сдавать кровь.
Недостатками иммуноферментного анализа крови на паразитов является то, что он определяет лишь ответ иммунной системы организма человека на конкретного возбудителя, но не выявляет именно наличие самого гельминта. Это означает, что положительная реакция может свидетельствовать и о давнем заболевании, которым человек переболел в прошлом.
Какие есть критерии для оценки результатов этого исследования? Наличие иммуноглобулина М в крови может свидетельствовать об острой фазе гельминтоза или об обострении хронически протекающего заболевания.
Выявление иммуноглобулина G возможно в нескольких случаях:
- Выработался иммунитет к паразитарной инфекции.
- Обострился имеющийся хронический процесс.
- Острая фаза заболевания перешла в хроническую.
- Наступило выздоровление.
Иммуноферментный анализ крови на гельминты позволяет диагностировать многие формы гельминтозов, среди которых:
- Аскаридоз — ИФА широко применяется для выявления аскарид в крови человека.
- Трихинеллез — для выявления этого паразита следует сдать кровь на 4-11 неделю от начала заболевания.
- Тениоз, цистицеркоз — единственные из цестодозов, диагностируемые с помощью ИФА.
- Фасциолез — ИФА выявляет острую фазу гельминтоза.
- Описторхоз — при помощи ИФА диагностируются только хронические стадии.
Иммуноферментный анализ бывает неэффективен при диагностике таких гельминтозов, как энтеробиоз, трихоцефалез, эхинококкоз, альвеолококкоз, дифиллоботриоз и тениаринхоз. Неэффективность метода связана с неспецифичностью исследования для данных форм паразитов и возможностью получения ложноположительных результатов.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) используется для диагностики альвеолококкоза, эхинококкоза, тениоза и аскаридоза при нахождении аскарид в преимагинальной фазе. Смысл исследования заключается в использовании диагностикума — взвеси эритроцитов барана и сенсибилизированной массы паразитов:
- Эхинококковой жидкости при эхинококкозе и альвеолококкозе.
- Свежезамороженные цистицерки при тениозе.
- Аскаридный компонент при инвазии аскаридами.
Метод гемосканирования
Гемосканирование — это инновационный способ исследования крови при многократном увеличении (в несколько тысяч раз). Сканирование крови на гельминты проводится в реальном времени, при этом изображение выводится на монитор компьютера. Материалом для исследования выступает капля капиллярной крови, взятой из пальца и размещенной под объектив микроскопа.
Общий анализ крови при гельминтозе
Внедрение паразита в организм человека вызывает определенные изменения в картине крови, при этом характер изменений будет зависеть от видовой принадлежности гельминта.
Нематоды (аскариды, трихинеллы, возбудители энтеробиоза, стронгилоидоза и трихоцефалеза) вызывают гипохромную анемию — падение уровня гемоглобина и эритроцитов, а также повышение содержания лейкоцитов (эозинофилов) и СОЭ.
Цестоды (Дифиллоботриоз, Цистицеркоз, Эхинококкоз) провоцируют развитие гиперхромной анемии, при которой увеличивается цветовой показатель, но количество эритроцитов и гемоглобина падает.
Общий анализ крови не является специфическим методом диагностики гельминтозов, но он может натолкнуть врача на мысль о глистной инвазии. При появлении подозрительных симптомов нужно как можно скорее сдать соответствующие анализы для постановки верного диагноза. Не следует пользоваться сомнительными методами диагностики это может быть опасно.
Комплексное лабораторное обследование для выявления основных гельминтозов и протозойных инфекций человека, включающее общеклинические и специфические тесты.
Анализы для диагностики гельминтозов и протозойных инфекций.
Синонимы английские
Laboratory diagnosis of protozoal and helminthic infections; CBC, Stool Ova and Parasites test, Cellulose tape test, Protozoal and Helminthic Serology.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь, кал, отпечаток с перианальной области.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
- Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
- Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
- Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
- Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
- Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
- Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
- Сбор биоматериала на исследование проводится только утром (до 10:00), до дефекации. Накануне взятия биоматериала не проводить туалет кожных покровов в области ануса и ягодиц.
Общая информация об исследовании
Гельминтозы и протозойные инфекции наблюдаются повсеместно и особенно распространены среди детей и людей, по роду деятельности контактирующих с домашними и дикими животными. Как правило, инфицирование человека является одним из этапов развития гельминтов или простейших. Многие из паразитов имеют фекально-оральный механизм передачи инфекции и по крайней мере на одном этапе жизненного цикла поражают различные отделы пищеварительного тракта. Несмотря на то что некоторые гельминтозы и паразитозы человека имеют специфические клинические признаки, в целом дифференцировать эти заболевания на основании клинической картины очень сложно. Основную роль в диагностике этих заболеваний играют лабораторные тесты. С учетом того, что у одного и того же человека может наблюдаться сочетание нескольких гельминтозов и паразитозов, рекомендуется выполнение сразу нескольких тестов или, что более удобно для врача и пациента, комплексного анализа на распространенные гельминтозы и паразитозы.
Комплексное лабораторное обследование включает общеклинические и специфические анализы на самые распространенные и важные в клиническом плане гельминтозы и протозойные инфекции. Общеклинические тесты: общий анализ крови, лейкоцитарная формула, анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших.
Общий анализ крови и лейкоцитарная формула используются для того, чтобы определить, является ли гельминтоз или паразитоз инвазивным, и также позволяет выявить возможные осложнения, связанные с инфекцией (анемию). Об инвазивности гельминтозов и паразитозов свидетельствует эозинофилия. Она характерна для амебиаза, эхинококкоза, описторхоза, токсокароза, трихинеллеза и аскаридоза (в фазу миграции личинок). Эозинофилия не характерна для кишечного аскаридоза, энтеробиоза и лямблиоза. Любая длительно текущая инфекция может приводить к развитию анемии (анемии хронического заболевания). Гельминтозы и паразитозы, протекающие с изъязвлением слизистой оболочки пищеварительного тракта (например, амебиаз), приводят к развитию железодефицитной анемии.
Анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших включают макроскопическую оценку кала (цвет, консистенция, наличие крови, избытка слизи, макроскопически определяемых паразитов), микроскопию нативного образца кала (наличие цист простейших – трофозоитов, личинок и взрослых особей гельминтов) и микроскопию окрашенного мазка кала (наличие цист и трофозоитов). Анализ кала на яйца гельминтов позволяет выявить большинство кишечных нематод, цестод и трематод. Анализ кала на цисты простейших позволяет выявить Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Balantidium coli и других простейших. Учитывая, что поступление яиц гельминтов или цист простейших в кал может носить непостоянный характер, однократное исследование кала малоинформативно - рекомендуется исследование трех образцов кала. Следует учитывать, что при некоторых гельминтозах (например, описторхоз) появление яиц в кале начинается только через 2-4 недели после возникновения симптомов заболевания. Отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.
К специфическим тестам для диагностики гельминтозов и паразитозов относятся серологические тесты и анализ на энтеробоз.
Echinococcus, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю эхинококкоза (Echinococcus granulosus или Echinococcus multilocularis). Чувствительность серологических тестов в отношении E. granulosus при поражении печени (самая частая локализация) составляет около 80 %, при поражении других органов (легкие, головной мозг, кости скелета) – несколько ниже.
Opistorchis, IgG - определение специфических антител IgG к возбудителю описторхоза (Opistorchis felineus или Opistorchis viverrini). Из-за невысокой специфичности серологические тесты являются дополнительным способом диагностики описторхоза (главный тест – анализ кала на яйца гельминта).
Toxocara, IgG, титр - количественное определение специфических антител IgG к возбудителю токсокароза (Тохосаra canis). Серологические тесты обладают достаточно высокой чувствительностью (78 %) и специфичностью (92 %) и могут служить хорошим дополнением или даже альтернативой "золотому стандарту" диагностики данного заболевания - микроскопическому исследованию биопсии ткани, содержащей личинки гельминта (частая локализация – печень и легкие), учитывая, что многие пациенты с токсокарозом - маленькие дети.
Учитывая системный характер таких инфекций, как эхинококкоз, описторхоз и токсокароз, при подозрении на эти заболевания проводят дополнительные обследования, в том числе оценку функции печени.
Trichinella, IgG - определение специфических антител IgG к возбудителю трихинеллеза (Trichinella spiralis и родственные виды). Серологические тесты становятся положительными через 3 недели после инфицирования. Учитывая, что личинки гельминта поражают мышечную ткань, при данном заболевании также могут быть повышены следующие клинико-лабораторные маркеры: креатинкиназа (КК), лактатдегидрогеназа (ЛДГ) и аспартатаминотрансфераза (АСТ).
Ascaris lumbricoides, IgG - определение специфических антител IgG к возбудителю аскаридоза. Аскаридоз – это самый распространенный гельминтоз человека. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики аскаридоза (главный тест – выявление взрослых особей в области рта и ануса, а также анализ кала на яйца гельминта).
Giardia lamblia, антитела - определение специфических антител к возбудителю лямблиоза. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики лямблиоза (главный тест - анализ кала на цисты паразита). Серологический тест становится отрицательным через 1 год после перенесенной инфекции. Также может быть использован тест на антиген G. lamblia в кале.
Энтеробиоз – распространенный гельминтоз, вызываемый Enterobius vermicularis (острица). Яйца остриц не выделяются с калом, поэтому микроскопическое или любые другие исследования кала не применяются. Лабораторная диагностика энтеробиоза осуществляется с помощью специального метода - микроскопического исследования мазков-отпечатков с кожи перианальной области. Микроскопическое исследование позволяет произвести дифференциальную диагностику энтеробиоза с аскаридозом, а также другими неинфекционными заболеваниями, сопровождающимися зудом перианальной области (контактным дерматитом, сахарным диабетом). Учитывая повышенную активность самки в ночные часы, оптимально производить мазок-отпечаток с утра, до совершения утреннего туалета.
Комбинация общеклинических и специфических тестов позволяет достичь наибольшей точности при диагностике гельминтозов и паразитозов. При эффективном лечении изменения, выявленные в общеклинических тестах, нормализуются, а яйца/личинки/взрослые особи гельминтов или цисты простейших перестают определяться, но серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики кишечных гельминтозов и протозойных инфекций.
Когда назначается исследование?
- При обследовании детей и людей из группы риска заражения гельминтами и простейшими (ветеринары, фермеры, работники, занятые в санитарно-гигиентической сфере);
- при наличии признаков глистной инвазии или протозойной инфекции: хронической диареи, мальабсорбции, тошноты, потери веса, а также признаков реакции гиперчувствительности (крапивницы и других сыпей);
- при оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации.
Что означают результаты?
Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:
В норме яйца, личинки и взрослые особи гельминтов, цисты и вегетативные формы простейших в кале отсутствуют. Их обнаружение свидетельствует о текущей инфекции.
Серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.
Что может влиять на результат?
- Время, прошедшее с момента заражения: яйца гельминтов и цисты простейших могут быть обнаружены через 2-4 недели и позже после заражения.
- Характер и скорость образования яиц гельминтов и цист простейших: часто наблюдается прерывистый характер их поступления в кал, что может привести к получению ложноотрицательного результата и обуславливает необходимость исследования трех, а не одного образца кала.
- Для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту;
- результат комплексного анализа следует интерпретировать с учетом анамнестических, клинических и инструментальных данных;
- отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, педиатр, инфекционист.
Жизнедеятельность паразитов в организме вызывает недомогания неясной этиологии. Это могут быть кожные высыпания, метеоризм, изжога, тошнота, слабость, анемия, боли в суставах. Для уточнения диагноза, следует сделать специальные анализы на паразитов.
Как провериться на паразитов в организме человека
Классифицикация паразитов по их виду:
Для представителей некоторых профессий (для персонала предприятий общественного питания, детских учреждений) анализ на яйца глистов обязателен при оформлении санитарных книжек. Такой же анализ сдают дети при поступлении в детские сады и ясли или в спортивную секцию.
- Классическое исследование на глистов, живущих в желудочно кишечном тракте, это анализ кала и соскоб слизистой из прямой кишки.
- Но есть несколько вариантов более эффективных анализов крови на паразитов, по назначению и по методике.
Видео, какие анализы показывают наличие глистов
Классические исследования на глистов
Классическое исследование на глистов, живущих в ЖКТ (желудочно кишечном тракте), например, острицы, аскариды, это анализ кала и соскоб слизистой из прямой кишки. Но одноразовый анализ кала может не показать положительных результатов, поэтому целесообразно сделать три раза.
Видео, какими гельминтами может заразиться человек
Виды анализов крови на паразитов
Есть несколько вариантов анализов крови на паразитов: по назначению и по методике. Каждый из этих методов имеет свои достоинства и недостатки. В зависимости от применяемой методики существует следующие виды исследований крови:
- ИФА или иммуноферментный анализ крови;
- ПЦР или полимеразная цепная реакция;
- Гемосканирование;
- Серологический анализ крови.
ИФА, анализ на антитела и иммуноглобулины
Данный анализ основан на иммунном ответе организма, уровне его защитной реакции на инвазии паразитов.
- С помощью результатов ИФА можно определить наличие гельминтов в организме и их вид. Точность исследования гораздо выше, чем анализ кала.
- В основе метода – подсчёт антител в организме к тому или иному виду паразитов, определение их связи с чужеродными антигенами (иммунный ответ) и ферментной реакции тела.
- Комплексы антитела-антигены свидетельствуют о наличии заражения.
- Анализ крови методом ИФА имеет точность, по мнению разных специалистов, от 60% до 90% даже при малом уровне инвазии.
- Преимущество метода, кроме высокого уровня точности, заключается в том, что иммуноферментным анализом можно отслеживать динамику заболевания во времени.
Показатели и ммуноферментного анализа крови (ИФА)
Анализ на наличие антител выглядит как набор символов, обозначающих эти антитела или иммуноглобулины.
- Всего изучено 5 из них – IgG, IgA, IgM, IgD, IgE.
- В практической медицине значение имеют первые три иммуноглобулина.
М – первый и основной маркер острой фазы заболевания,
- появляется в крови на пятые сутки,
- выявляется анализом через 6 недель.
- Затем он начинает быстро исчезать.
Е – используется в основном в практике выявления паразитов,
- является маркером процессов, связанных с аллергиями,
- в крови циркулирует мало, базируется в слизистых, макрофагах и базофилах,
- участвует в иммунных ответах на заражение паразитами.
По разным комбинациям плюсов и минусов в анализе крови на паразитов можно сделать следующие выводы:
- отсутствие инфекции – все антитела с минусом;
- острая стадия – IgG (+/-), IgA(+\-), IgM(+);
- хроническая форма – IgG (+/-), IgA(-), IgM(-);
- наличие иммунитета – IgG (+), IgA(-), IgM(-);
- обострение хронического заболевания – IgG (+), IgA(+), IgM(+)
- Если болезнь выявлена и пролечена, то минусовые значения всех антител будут достигнуты только через полгода после курса лечения, иногда после 1-2 лет.
Достоверность анализа ИФА
Метод ИФА дает уровень достоверности 90% для диагностики заражения аскаридами, острицами (энтериобиоз), токсокарами и другими, которые вызывают образование в крови иммуноглобулина IgG в больших количествах.
- Определить лямблиоз можно по раздельному и общему (ОПд) значению уровня антител в крови.
- Значение ОПд более 1 говорит о том, что заражение есть или было,
- при значении менее 0,85 лямблий нет.
- Если значение в промежутке, то целесообразно повторить анализ через 2 недели.
Данный метод характеризуется рядом слабых мест. Анализ позволяет определить уровень антител, выработанных в организме для обезвреживания гельминтов, а не самих глистов.
- Поэтому возможно получение ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
- Происходит это и при приёме пациентами лекарств,
- нарушении обмена веществ и наличии параллельно текущих хронических заболеваний.
Видео, о глистах, школа доктора Комаровского
Общий анализ крови, изменения при заражении паразитами
Косвенно заподозрить наличие инвазии можно, сделав общий анализ крови. Так как наличии глистов поражает внутренние органы, то продукты их жизнедеятельности попадают в кровь, изменяя ее состав. Частичный перечень результатов воздействия инвазии на параметры крови:
Если нет иных причин для подобных отклонений, целесообразно включить в программу диагностики специальный анализ крови на паразитов, ИФА, ПЦР.
Видео, о грибках — паразитах
Полимеразная цепная реакция ( ПЦР анализ)
Метод ПЦР является одним из самых современных и точных для диагностики крови на присутствие паразитов в организме. Он заключается в обнаружении следов ДНК и РНК, принадлежащих паразитарным формам жизни.
- Суть полимеразной реакции состоит в обработке крови таким образом, чтобы скопировать и размножить ДНК, РНК инородных организмов до концентрации, позволяющей их определить.
Серологический анализ крови
При этом анализе используется в качестве источника информации сыворотка крови.
- Исследуются иммуногенные реакции антител на антигены паразитов.
- Анализ позволяет выявить большое количество паразитарных форм, но не позволяет определить стадию инвазии.
- Как и метод ИФА, серологический анализ являются косвенным для диагностики.
- Если значения ОПд высокое, желательно дополнительно сдать анализ кала.
Видео, гемосканирование, анализ крови на паразитов
Диагностика, методом гемосканирования крови
Как сдавать анализ крови на паразитов
Сдача крови на наличие паразитов проводится в специализированной лаборатории. Кровь на анализ забирается из локтевой вены в количестве 3-5 мл и помещается в сухую стерильную пробирку. Перед тем, как сдать анализ, рекомендуется:
- не принимать пищу в течение 8 часов;
- в вечерний приём пищи отказаться от жирных блюд и молока;
- не принимать алкоголь и газированные напитки;
- избегать излишних физических нагрузок, физиопроцедур, рентген облучения;
- отказаться от приема медикаментов.
- Обильное питьё приветствуется.
- Условия сдачи крови на ПЦР менее жёсткие, т.к. степень сытости не влияет на наличие ДНК паразитов.
Читайте также: