Дифференциальная диагностика паразитарных заболеваний

Основой диагностики паразитарных болезней, в частности гельминтозов, являются результаты лабораторных исследований, которые выявляют непосредственно возбудителей, их антигены или антитела к ним.

Гельминтозы развиваются в результате инвазии (заражения) организма окончательного хозяина (человека или животного), используемого как место обитания гельминтов и источника их питания. Часто болезни протекают без выраженных специфических клинических симптомов, что не всегда позволяет поставить диагноз по клинической картине.

Диагностика гельминтозов должна быть комплексной и основываться на данных эпидемиологического анамнеза, клиники заболевания и лабораторных исследований.

Специфика биологии каждого конкретного вида гельминта диктует необходимость различной тактики лабораторных исследований, которая направлена на обнаружение в одних случаях гельминтов или их фрагментов, а в других – их личинок, яиц или специфических иммуноглобулинов.

Материал для исследования берется в зависимости от подозрения на наличие у больного того или иного гельминтоза, так как пути выделения яиц, личинок или фрагментов паразитов из организма человека могут быть разными.

Для геогельминтов характерен кишечный (интестинальный) путь выделения яиц и личинок из организма больного человека. Большинство гельминтов, яйца которых выводятся через кишечник, паразитируют в пищеводе, желудке, кишечнике, а также попадают в кишечник при миграции через легкие, бронхи, трахеи, гортань, когда происходит заглатывание яиц и личинок со слизью при кашле. Этот путь присущ трематодам, цестодам и многим нематодам (в частности, геогельминтам). Материалом для исследования служат фекалии (кал). При исследовании проб фекалий обнаруживаются яйца и личинки многих гельминтов.

Паразитологические методы лабораторных исследований применяются:

• с диагностической целью;
• для контроля эффективности лечения;
• для оценки качества проведенного комплекса лечебно-профилактических мероприятий;
• для установления уровня пораженности населения (при профосмотрах)

Лабораторная диагностика является важным методом при паразитарных заболеваниях. В то же время качество лабораторной диагностики зависит от множества факторов, таких как надлежащая подготовка пациента к лабораторному обследованию, правильный забор материала для исследования и выбор оптимальной методики, квалификация и опыт специалиста-лаборанта.

Для верификации диагноза важно обеспечить следующее:

• сбор данных эпидемиологического анамнеза;
• определение соответствующего материала для исследования, правильно собранного и доставленного вовремя;
• выбор и применение соответствующего метода идентификации паразита;
• правильная идентификация паразита;
• правильная интерпретация результатов исследования.

Cбор материала для гельминтологических исследований включает следующие шаги:

1. Для исследования собирают фекалии из любой чистой емкости немедленно после дефекации.
2. Не допускается сбор образцов фекалий из унитаза.
3. Для детей возможен сбор образца с пеленки, подгузника или горшка.
4. Используя ложку в крышке контейнера, собрать не менее чем из трех точек стула.
5. Испражнения для анализов должны доставляться в лабораторию не позднее одних суток после дефекации, а при подозрении на стронгилоидоз – немедленно.
6. Если по каким-либо причинам доставка в лабораторию затруднена, то необходимо хранить материал при температуре +4–8 °C. Рекомендуется использование консерванта, и тогда исследование можно проводить в течение 3–10 дней после дефекации.

Методы лабораторной диагностики гельминтозов

Методы гельминтологических исследований делятся на прямые и опосредованные (косвенные).

Прямые методы: выявление самих гельминтов, их фрагментов, яиц, личинок в фекалиях, моче, дуоденальном секрете, мокроте и др.

Опосредованные (косвенные) методы: выявление вторичных изменений, возникающих в организме человека в результате жизнедеятельности паразита, путем серологических реакций, общего исследования крови, мочи.

Основным методом лабораторной диагностики глистных инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов в фекалиях. Наиболее распространенными методами исследования фекалий являются гельминтокопроскопические.

Гельминтокопроскопия – это совокупность методов взятия, обработки и исследования (макро- и микроскопического) проб фекалий человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов, их фрагментов. Она включает следующие виды исследований:

• копроовоскопия (исследование фекалий на яйца гельминтов);
• копроларвоскопия (исследование фекалий на личинки гельминтов);
• макроскопия фекалий (обнаружение фрагментов или зрелых гельминтов в фекалиях).

Микроскопические методы подразделяются на простые, сложные и специальные.

К простым относятся метод нативного мазка и метод толстого мазка под целлофаном по Като – Кац.

Сложные методы, или методы обогащения, основаны на феномене разных удельных весов яиц гельминтов и применяемых реагентов. При обработке фекалий этими растворами происходит концентрация яиц на поверхности раствора или в осадке, в результате чего увеличивается эффективность поиска.

Различают следующие методы обогащения:

• флотационные (когда используют солевые растворы, удельный вес которых выше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они всплывают в поверхностную пленку, которую и исследуют);
• седиментационные (когда используют растворы, удельный вес которых меньше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они оседают, образуя осадок).

Методом седиментации возможно определить следующие гельминтозы: описторхоз, клонорхоз, фасциолез, дикроцелиоз, метагонимоз, нанофиетоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, аскаридоз, трихоцефалез, анкилостомидозы, стронгилоидоз, трихостронгилез, некатороз, шистосомоз, кишечные протозоозы (лямблиоз,криптоспоридиоз, изоспороз)

Специальные методы чаще всего необходимы для обнаружения личинок гельминтов. Группа специальных методов направлена на диагностику конкретного геогельминтоза, применяемый метод специфичен только для данного гельминта.

Модификация эфир-формалинового метода седиментации
одноразовыми системами для проведения копрологического исследования

С развитием паразитологии в лечебную практику стали применяться одноразовые системы для копрологического исследования, предназначенные для эффективного концентрирования яиц и личинок гельминтов модифицированным эфир-формалиновым методом.

Системы для копрологического исследования являются одноразовыми и состоят из нескольких элементов:

• пробирка для образца, в которую имеется готовая смесь для фиксации образца фекалий и последующей седиментации
• пробирка с системой фильтров и шпателем для забора образца;
• коническая емкость для сбора отфильтрованного материала.

Система фильтров способствует оседанию грубых частиц непереваренной пищи и клетчатки в смесительной камере, а жидкая часть с выделившимися в нее паразитами, яйцами паразитов под давлением фильтруется и центрифугируется в конической пробирке.

После получения взвеси систему помещают в центрифугу и центрифугируют при скорости 2500–3000 об/мин в течение 1–3 минут, при скорости 1500 об/мин – 5 минут. В конической части пробирки остается жидкая часть пробы с выделившимися в нее яйцами гельминтов, цистами простейших. Отсоединяют модуль с фильтром и утилизируют после обеззараживания. Коническая часть пробирки остается для микроскопирования. Для этого из нижней части пробирки с помощью пипетки переносят на предметное стекло 2 капли пробы осадка. Микроскопируют при увеличении: окуляр x10, объективы x10, x40.

Преимущества использования одноразовых систем для копрологических исследований:

• повышает выявляемость возбудителей;
• уменьшает расход реагентов;
• снижает опасность контаминации, исключая контакт персонала с исследуемыми образцами;
• улучшает стандартизацию метода, повышает достоверность анализа;
• исключает подготовку и повторную обработку посуды, а также сокращает количество отходов в процессе проведения исследования

В настоящее время паразитарные болезни, такие как малярия, трипаносомозы, лейшманиозы, шистосомозы и филяриатозы, можно рассматривать как одну из самых частых причин заболеваемости и смертности людей на земном шаре. За последние годы в силу ряда причин технического, социального, экономического характера произошло, резкое повышение распространенности некоторых из ука­занных болезней, особенно малярии. Подъем заболеваемости малярией во многих странах мира явился результатом увеличения частоты случаев устойчивости к инсектицидам комаров — переносчиков малярийных паразитов, развития лекар­ственной устойчивости у некоторых штаммов возбудителей тропической малярии, а также сокращения ассигнований на проведение многих программ борьбы с этой инвазией. В настоящее время в эндемичных районах проживает свыше 1 млрд человек; из них инвазированы 125—200 млн. В Африке, где проводимые мероприятия по борьбе с инвазией не приносят успеха вследствие высокой интен­сивности ее передачи, малярия ежегодно уносит более 1 млн жизней детей. Общий подъем заболеваемости малярией наряду с увеличением международного туризма привел к росту количества прибывающих в США инвазированных людей. С 1969 по 1980 г. число случаев малярии у гражданских лиц, зарегистрированных в Центре по борьбе с болезнями, возросло со 151 до 1864; в последующие 4 года ежегодное число случаев составило в среднем 1000. В течение того же 15-летнего периода число инвазированных лиц среди граждан США возросло с 90 до 360.

В Африке, от Сахары на севере до пустыни Калахари на юге, штаммы трипаносом Trypanosoma brucei вызывают одно из самых тяжелых заболеваний человека — сонную болезнь. В этом же регионе наличие штаммов трипаносом, патогенных для животных, ограничивает производство продовольствия вследст­вие ущерба, наносимого ими животноводству. В Южной Америке другой вид трипаносом (Trypanosoma cruzi) поражает миллионы людей, вызывая у многих из них тяжелые заболевания сердца и желудочно-кишечного тракта (американ­ский трипаносомоз, или болезнь Шагаса).

Возбудители лейшманиозов встречаются в различных районах Европы, Азии, Африки, Южной и Центральной Америки и вызывают такие заболевания, как кала-азар (индийский висцеральный лейшманиоз) — тяжелое хроническое пора­жение ретикулоэндотелиальной системы, эспундию (бразильский кожно-слизистый лейшманиоз) — обезображивающее обширное поражение кожи и слизис­тых оболочек, а также кожную форму заболевания, характеризующуюся отсут­ствием поражения слизистых оболочек.

К числу тяжелых гельминтозов относятся шистосомозы, поражающие, по оценочным данным, 200 млн человек, проживающих между тропиками Рака и Козерога. У многих людей они вызывают заболевания мочевого пузыря, кишеч­ника и/или печени, которые в конечном счете могут привести больного к смерти. Во многих странах строительство ирригационных сооружений привело к распро­странению шистосомозов на ранее не пораженных территориях, снижая экономи­ческие выгоды от использования указанных объектов. Несмотря на отсутствие условий распространения для этих гельминтозов в США, в настоящее время там проживают почти полмиллиона инвазированных за рубежом лиц.

Близкие виды филярий, возбудители вухерериоза и бругиоза, вызывают поражение лимфатических сосудов с развитием слоновости конечностей и поло­вых органов у жителей тропических стран. Еще одна форма филяриатоза — онхоцеркоз — поражает миллионы людей в Африке, приводя многих из них к сле­поте.

В США нередко встречаются четыре протозойные инвазии — токсоплазмоз, пневмоцистоз, лямблиоз и трихомоноз. Токсоплазмозом, возможно, инвазировано около 30% населения земного шара. Как правило, эта инвазия протекает бессимптомно, но врожденный токсоплазмоз может привести к аборту, мертворождению или тяжелым неврологическим поражениям. Даже в тех случаях, когда при рождении у ребенка нет явных клинических признаков, спустя несколько лет возможны развитие хориоретинита и нарушение зрения. Бессимптомные формы токсоплазмоза и пневмоцистоза могут перейти со временем в тяжелое смертельное заболевание в случае развития у больного иммунодепрессивного состояния.

И напротив, лямблиоз и трихомоноз редко протекают в тяжелой форме и очень широко распространены среди практически здоровых людей. Частота встре­чаемости как той, так и другой инвазии возрастает, вероятно, в результате из­менений в образе жизни американцев. Лямблиоз особенно часто регистрируется среди лиц, посещающих дневные центры по уходу, туристов и отдыхающих в кемпингах в западных штатах США, а также среди мужчин-гомосексуалистов, занимающихся анилингусом, в то время как распространенность трихомоноза тесно связана с частотой беспорядочных гетеросексуальных связей.

Диагностика. Хотя для США нехарактерно широкое распространение неко­торых из указанных выше инвазий, необходимо помнить о них при дифференци­альной диагностике многих заболеваний ввиду постоянного прибывания в страну туристов и иммигрантов из эндемичных районов мира. Диагностика затруднена тем, что клинические проявления и результаты общих лабораторных исследова­ний лиц, страдающих от паразитарных инвазий, недостаточно специфичны, чтобы вызвать предположение о возможном наличии их у больного. Хотя эозинофилия давно считается наводящим признаком наличия нераспознанного паразитарного заболевания, этот феномен характерен только для гельминтозов. И даже при гельминтозах отсутствие эозинофилии не исключает этого диагноза. Полагают, что эозинофилия отражает иммунный ответ хозяина на сложные чужеродные белки гельминтов и бывает наиболее выражена на ранних стадиях инвазии и тканевой миграции возбудителей. По завершении миграции и достижении гель­минтами взрослых стадий эозинофилия может уменьшиться или исчезнуть.

Правильный диагноз может так и остаться неустановленным, если при сборе анамнеза не будут тщательно выяснены данные о маршрутах путешествий, пере­мещениях и социально-экономических условиях жизни больного. Наличие пара­зитарного заболевания легко подтвердить путем выделения и морфологической идентификации паразитов в фекалиях, моче, мокроте, крови или тканях больного.

В случае кишечных инвазий обычно достаточным бывает исследование на-тивных и/или окрашенных препаратов фекалий. Поскольку выделение некоторых паразитов происходит с интервалами, количество особей колеблется, при исследо­вании только одной пробы фекалий инвазию можно обнаружить только у 30—50% от общего числа обследованных таким образом пораженных лиц. Количе­ство выявленных инвазированных лиц существенно возрастает, если исследовать три пробы фекалий, собранных с интервалом 2—3 дня. В качестве альтернатив­ного способа можно использовать назначение слабительных солевых препаратов для эвакуации и последующего исследования содержимого илеоцекального от­резка кишечника, где концентрируются многие простейшие. В фекалиях не дол­жно быть примесей антидиарейных или контрастных препаратов, антацидов и антибиотиков, способных исказить результаты лабораторного исследования диа­гностического материала. Если пробы фекалий невозможно собрать до введения указанных препаратов, исследование необходимо провести через одну неделю, а при лечении антимикробными препаратами — спустя три недели после его окон­чания. Иногда, кроме фекалий, необходимо исследовать другие образцы материа­лов от больного. При инвазиях тонкого кишечника, таких как лямблиоз и стронгилоидоз, диагноз в некоторых случаях может быть установлен только при иссле­довании содержимого двенадцатиперстной кишки или биоптата тощей кишки. Кроме того, яйца Enterobius vermicularis (остриц) и ленточных гельминтов часто обнаруживаются в перианальных соскобах, в то время как выявить их в фекалиях не удается. Для обнаружения паразитов толстой кишки, таких как возбудители амебиаза и кишечного шистосомоза, могут потребоваться проведе­ние колоноскопии и взятие слизи и биоптатов с пораженных участков. Любой собранный для исследования материал, дуоденальное содержимое или неоформ­ленные жидкие фекалии необходимо немедленно поместить в консервант типа поливинилового алкоголя для того, чтобы предупредить разрушение хрупких вегетативных форм простейших и обеспечить возможность приготовления посто­янных окрашенных препаратов. Находящиеся в оформленных фекалиях цисты простейших и яйца гельминтов сохраняются в течение 1—2 дней при комнатной температуре и неограниченно долго при помещении их в 5% раствор формаль­дегида.

Для обнаружения малярийных паразитов, лейшманий, трипаносом и микрофилярий исследуют препараты крови. Лучше всего для этого готовить из свежей капиллярной крови тонкие и толстые мазки, а также в случае необходимости нативные препараты. Предметные стекла должны быть вымыты таким образом, чтобы на них не оставалось следов известковой соды или поташа, которые могут изменить рН красителя, что влияет на качество окраски паразитов и затрудняет их идентификацию. При отсутствии возможности приготовления мазков крови у постели больного целесообразно взять кровь из вены с помощью Вакутайнера ЭДТА и переслать ее в лабораторию. Как и в случае с кишечными паразитами, численность кровепаразитов может колебаться, что требует многократного сбора проб крови и исследования их в течение нескольких недель.

Труднее обнаружить места обитания паразитов в тканях хозяина. Некоторые паразиты, находящиеся на различных стадиях развития, выделяются с мокротой, где они могут быть обнаружены с помощью соответствующих методов обогаще­ния. Личинки других паразитов обнаруживают при биопсии в коже (онхоцерки) или в мышцах (трихинеллы). Однако возбудителей ряда инвазий выделить уда­ется весьма редко. В отношении некоторых из них разработаны надежные методы иммунодиагностики. К сожалению, серологические методы диагностики парази­тарных болезней часто не имеют той чувствительности и специфичности, которые присущи аналогичным реакциям, применяемым при диагностике вирусных и бак­териальных инфекций. Это в особенности относится к методам диагностики гельминтозов, которые дают весьма широкий диапазон перекрестных реакций. Бла­годаря использованию молекулярных технологий получены антигены с более вы­сокой специфичностью. В табл. 151-1 представлены сведения о серологических тестах, используемых в лабораториях Центра по борьбе с болезнями (ЦББ). В табл. 151-2 приведены данные о диагностических титрах, чувствительности и специфичности серологических реакций, наиболее часто .выполняемых в ЦББ.

Таблица 151-1. Паразитарные болезни, для диагностики которых используются серологические реакции

Таксономическая группа	Диагностическая ценность
Высокая	Невысокая
Протозойные инвазии	Амебиаз'	Малярия'
Бабезиоз'	Лямблиоз
Болезнь Шагаса'	Пневмоцистоз
Лейшманиозы'
Токсоплазмоз'
Гельминтозы	Цистицеркоз'	Аскаридоз
Эхинококкоз'	Клонорхоз'
Парагонимоз'	Дракункулез'
Токсокароз'	Филяриатозы'
Трихинеллез'	Шистосомозы'
Стронгилоидоз

Используются в Центре по борьбе с болезнями, Атланта, ДжА.

Растворимые антигены были обнаружены в крови, жидких средах и тканях, а также в выделениях больных при целом ряде паразитарных болезней, включая амебиаз, первичный амебный менингоэнцефалит, лямблиоз, малярию, токсоплаз­моз, филяриатозы, трихинеллез, а также шистосомозы. В настоящее время ис­следуется диагностическая ценность основанных на этом феномене серологических тестов; коммерческое производство наборов для постановки этих реакций пока еще не налажено. Описаны также методы диагностики тропической малярии и кожного лейшманиоза, в основе которых лежит использование ДНК-зонда. Благодаря высокой чувствительности и специфичности эти тесты могут в бли­жайшем будущем революционизировать диагностику паразитарных болезней, однако в настоящее время коммерческое производство такого рода тест-систем не налажено.

Таблица 151-2. Интерпретация тестов, чаще всего используемых в Центре по борьбе с болезнями

Болезнь	Тест	Диагно­стический титр	Чувстви­тельность,%	Специ­фичность,%	Примечания
Амебиаз	РИГА	> 1 : 256	70', 95 2	90 3	1. Кишечный
2. Внекишечный
3. Титры могут сохра­няться годами
Цистицер­коз	ELISA	>1 :32	50', 70 2 , 95 3	83—95 4	1. Внутримозговые кальцификаты, судорожные припадки
2. Менингит
3. Повышенное внутриче­репное давление
4. Перекрестные реакции при эхинококкозе
Эхинококкоз	РНГА	>1 : 256	10', 88 2	90—95 3 ' 4	1. Легочная локализация или обызвествленная киста
2. Локализация в печени или брюшной полости
3. Перекрестные реакции при цистицеркозе
4. Титры могут сохра­няться годами
РИЭФ	Фракция 5	Очень высо­кая	5. Фракция 5 указывает на эхинококкоз
Токсокароз	ELISA	> 1:32	92'' 2	1. Перекрестные реакции при аскаридозе, устра­нимые путем преаб-сорбции
Висце­ральный
Глазной	ELISA	>1:8	91 3	2. У детей
3. У больных с глазными болезнями
Трихинеллез	РФБ	>1:5	97'	90 2	1. Выявляется на 4-й не­деле болезни
2. Титры могут сохра­няться годами

Надстрочная цифра относится к примечаниям в правой колонке. Сокращения: РНГА — реакция непрямой гемагглютинации; ELISA — твердофазный иммуноферментный анализ; РФБ — реакция флоккуляции бентонита; РИЭФ — реакция иммуноэлектрофореза. Из: Kenneth W., Walls Ph. D., December, 1985 (с некоторыми изменениями).

Лечение. За последние 10 лет для лечения больных с паразитарными инфек­циями был предложен ряд новых химиотерапевтических препаратов. Некоторые из них, такие как празиквантель (Praziquantel) и нифуртимокс (Nifurtimox), представляют собой первые эффективные средства против ранее рефрактерных инвазий (например, клонорхоза, болезни Шагаса). Другие, например мебендазол, обладают активностью в отношении широкого спектра гельминтов, позволяя проводить лечение больных с множественными кишечными гельминтозами одним препаратом. Многие из новых антипаразитарных средств переносятся лучше, чем те, которые используются теперь и подлежат замене, и это дает возможность использовать их в программах массового лечения.

Однако, несмотря на эти достижения, результаты лечения ряда паразитар­ных болезней остаются неудовлетворительными. Не имеется достаточно эффек­тивных антипаразитарных средств против возбудителей целого ряда инвазий, включая криптоспоридиоз, цистицеркоз, эхинококкоз и трихинеллез. Лекарствен­ная устойчивость возбудителей, феномен столь широко распространенный среди бактерий, также может снизить эффективность ряда антипаразитарных препа­ратов. Это особенно касается противомалярийных средств. Длительно существо­вавшие в Юго-Восточной Азии и в Латинской Америке хлорохинустойчивые штаммы возбудителей тропической малярии в настоящее время распространи­лись в Африке, континенте, наиболее пораженном этой болезнью. У некоторых азиатских штаммов этого же возбудителя недавно появилась устойчивость к лечению комбинированным препаратом, пириметамином (хлоридином) — сульфадоксином, который с успехом применялся для лечения больных с хлорохинустойчивыми формами тропической малярии.

Существует также проблема наличия и доступности антипаразитарных препаратов в США. В табл. 151-3 приведен перечень препаратов, проходящих кли­нические испытания в центре по борьбе с болезнями. Другие средства, такие как DL-a-дифлюорометилорнитин (ДФМО), следует получать непосредственно от производителя. Если клиницист назначает подобное средство, больного необхо­димо предупредить о том, что препарат проходит клинические испытания и воз­можны его побочные действия.

Таблица 151-3. Антипаразитарные препараты, имеющиеся в распоряжении Отдела паразитарных болезней ЦББ'

Инвазия	Антипаразитарный препарат
Амебиаз	Дегидроэметин (Dehydroemetine)
Дилоксанид фуроат (Diloxanide furoate)
Болезнь Шагаса	Нифутримокс (Nifutrimox)
Дракункулез	Ниридазол (Niridazole)
Фасциолез	Битионол (Bithionol)
Лейшманиозы	Натрия стибоглюконат (Stibogluconate so­dium)
Малярия	Хлорохина гидрохлорид для парентераль­ного введения
Хинина дигидрохлорид для парентерального введения
Онхоцеркоз	Сурамин (Suramin)
Парагонимоз	Битионол
Шистосомозы	Метрифонат (Metrifonate)
Ниридазол
Сонная болезнь	Меларсопрол (Melarsoprol)
Сурамин

Таблица 151-4. Количество яиц гельминтов при различных инвазиях

Гельминтоз	Примерное количество яиц, выделяемое одной самкой гельминта в сутки	Минимальное количество яиц, обычно обнаружи­ваемое при инвазии
Некатороз	> 2000/ мл
Трихоцефалез	> 3000/ г
Шистосомоз кишечный	60—300	>200/ г

Из: D. P. Stevens, Clin. Gastroenterol., 1978, 7, 236.

И наконец, токсичность многих антипаразитарных препаратов такова, что следует тщательно взвешивать положительный эффект от их применения и воз­можные при этом побочные явления. Это особенно касается лечения больных с гельминтозами. Поскольку большинство видов гельминтов не размножается в организме человека и причиняемый ими ущерб обычно зависит от интенсивности инвазии, лечение должно быть направлено на то, чтобы уменьшить количество гельминтов у больных со средней и высокой интенсивностью инвазии. Учитывая токсичность многих антигельминтиков, нередко нецелесообразно стремиться к полной дегельминтизации. Лечение малоинтенсивных гельминтозов следует про­водить только в тех случаях, когда наличие небольшого числа гельминтов может быть опасным, как, например, при стронгилоидозе; имеется минимальная воз­можность реинвазии и/или выбранный антигельминтик не вызывает тяжелых побочных явлений. Интенсивность многих кишечных инвазий может быть опре­делена путем подсчета количества обнаруженных в фекалиях яиц (табл. 151-4). Умножив общее число яиц, обнаруженных при исследовании препарата, на 750, получают примерную оценку количества яиц на 1 г фекалий. Более точные ре­зультаты можно получить с помощью метода разведения по Столлу и различных модификаций метода толстого мазка по Като.

Дата добавления: 2015-03-17 ; просмотров: 793 ; ЗАКАЗАТЬ НАПИСАНИЕ РАБОТЫ

Комплексное лабораторное обследование для выявления основных гельминтозов и протозойных инфекций человека, включающее общеклинические и специфические тесты.

Анализы для диагностики гельминтозов и протозойных инфекций.

Синонимы английские

Laboratory diagnosis of protozoal and helminthic infections; CBC, Stool Ova and Parasites test, Cellulose tape test, Protozoal and Helminthic Serology.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал, отпечаток с перианальной области.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
• Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
• Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.
• Сбор биоматериала на исследование проводится только утром (до 10:00), до дефекации. Накануне взятия биоматериала не проводить туалет кожных покровов в области ануса и ягодиц.

Общая информация об исследовании

Гельминтозы и протозойные инфекции наблюдаются повсеместно и особенно распространены среди детей и людей, по роду деятельности контактирующих с домашними и дикими животными. Как правило, инфицирование человека является одним из этапов развития гельминтов или простейших. Многие из паразитов имеют фекально-оральный механизм передачи инфекции и по крайней мере на одном этапе жизненного цикла поражают различные отделы пищеварительного тракта. Несмотря на то что некоторые гельминтозы и паразитозы человека имеют специфические клинические признаки, в целом дифференцировать эти заболевания на основании клинической картины очень сложно. Основную роль в диагностике этих заболеваний играют лабораторные тесты. С учетом того, что у одного и того же человека может наблюдаться сочетание нескольких гельминтозов и паразитозов, рекомендуется выполнение сразу нескольких тестов или, что более удобно для врача и пациента, комплексного анализа на распространенные гельминтозы и паразитозы.

Комплексное лабораторное обследование включает общеклинические и специфические анализы на самые распространенные и важные в клиническом плане гельминтозы и протозойные инфекции. Общеклинические тесты: общий анализ крови, лейкоцитарная формула, анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших.

Общий анализ крови и лейкоцитарная формула используются для того, чтобы определить, является ли гельминтоз или паразитоз инвазивным, и также позволяет выявить возможные осложнения, связанные с инфекцией (анемию). Об инвазивности гельминтозов и паразитозов свидетельствует эозинофилия. Она характерна для амебиаза, эхинококкоза, описторхоза, токсокароза, трихинеллеза и аскаридоза (в фазу миграции личинок). Эозинофилия не характерна для кишечного аскаридоза, энтеробиоза и лямблиоза. Любая длительно текущая инфекция может приводить к развитию анемии (анемии хронического заболевания). Гельминтозы и паразитозы, протекающие с изъязвлением слизистой оболочки пищеварительного тракта (например, амебиаз), приводят к развитию железодефицитной анемии.

Анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших включают макроскопическую оценку кала (цвет, консистенция, наличие крови, избытка слизи, макроскопически определяемых паразитов), микроскопию нативного образца кала (наличие цист простейших – трофозоитов, личинок и взрослых особей гельминтов) и микроскопию окрашенного мазка кала (наличие цист и трофозоитов). Анализ кала на яйца гельминтов позволяет выявить большинство кишечных нематод, цестод и трематод. Анализ кала на цисты простейших позволяет выявить Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Balantidium coli и других простейших. Учитывая, что поступление яиц гельминтов или цист простейших в кал может носить непостоянный характер, однократное исследование кала малоинформативно - рекомендуется исследование трех образцов кала. Следует учитывать, что при некоторых гельминтозах (например, описторхоз) появление яиц в кале начинается только через 2-4 недели после возникновения симптомов заболевания. Отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

К специфическим тестам для диагностики гельминтозов и паразитозов относятся серологические тесты и анализ на энтеробоз.

Echinococcus, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю эхинококкоза (Echinococcus granulosus или Echinococcus multilocularis). Чувствительность серологических тестов в отношении E. granulosus при поражении печени (самая частая локализация) составляет около 80 %, при поражении других органов (легкие, головной мозг, кости скелета) – несколько ниже.

Opistorchis, IgG - определение специфических антител IgG к возбудителю описторхоза (Opistorchis felineus или Opistorchis viverrini). Из-за невысокой специфичности серологические тесты являются дополнительным способом диагностики описторхоза (главный тест – анализ кала на яйца гельминта).

Toxocara, IgG, титр - количественное определение специфических антител IgG к возбудителю токсокароза (Тохосаra canis). Серологические тесты обладают достаточно высокой чувствительностью (78 %) и специфичностью (92 %) и могут служить хорошим дополнением или даже альтернативой "золотому стандарту" диагностики данного заболевания - микроскопическому исследованию биопсии ткани, содержащей личинки гельминта (частая локализация – печень и легкие), учитывая, что многие пациенты с токсокарозом - маленькие дети.

Учитывая системный характер таких инфекций, как эхинококкоз, описторхоз и токсокароз, при подозрении на эти заболевания проводят дополнительные обследования, в том числе оценку функции печени.

Trichinella, IgG - определение специфических антител IgG к возбудителю трихинеллеза (Trichinella spiralis и родственные виды). Серологические тесты становятся положительными через 3 недели после инфицирования. Учитывая, что личинки гельминта поражают мышечную ткань, при данном заболевании также могут быть повышены следующие клинико-лабораторные маркеры: креатинкиназа (КК), лактатдегидрогеназа (ЛДГ) и аспартатаминотрансфераза (АСТ).

Ascaris lumbricoides, IgG - определение специфических антител IgG к возбудителю аскаридоза. Аскаридоз – это самый распространенный гельминтоз человека. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики аскаридоза (главный тест – выявление взрослых особей в области рта и ануса, а также анализ кала на яйца гельминта).

Giardia lamblia, антитела - определение специфических антител к возбудителю лямблиоза. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики лямблиоза (главный тест - анализ кала на цисты паразита). Серологический тест становится отрицательным через 1 год после перенесенной инфекции. Также может быть использован тест на антиген G. lamblia в кале.

Энтеробиоз – распространенный гельминтоз, вызываемый Enterobius vermicularis (острица). Яйца остриц не выделяются с калом, поэтому микроскопическое или любые другие исследования кала не применяются. Лабораторная диагностика энтеробиоза осуществляется с помощью специального метода - микроскопического исследования мазков-отпечатков с кожи перианальной области. Микроскопическое исследование позволяет произвести дифференциальную диагностику энтеробиоза с аскаридозом, а также другими неинфекционными заболеваниями, сопровождающимися зудом перианальной области (контактным дерматитом, сахарным диабетом). Учитывая повышенную активность самки в ночные часы, оптимально производить мазок-отпечаток с утра, до совершения утреннего туалета.

Комбинация общеклинических и специфических тестов позволяет достичь наибольшей точности при диагностике гельминтозов и паразитозов. При эффективном лечении изменения, выявленные в общеклинических тестах, нормализуются, а яйца/личинки/взрослые особи гельминтов или цисты простейших перестают определяться, но серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики кишечных гельминтозов и протозойных инфекций.

Когда назначается исследование?

• При обследовании детей и людей из группы риска заражения гельминтами и простейшими (ветеринары, фермеры, работники, занятые в санитарно-гигиентической сфере);
• при наличии признаков глистной инвазии или протозойной инфекции: хронической диареи, мальабсорбции, тошноты, потери веса, а также признаков реакции гиперчувствительности (крапивницы и других сыпей);
• при оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации.

Что означают результаты?

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

В норме яйца, личинки и взрослые особи гельминтов, цисты и вегетативные формы простейших в кале отсутствуют. Их обнаружение свидетельствует о текущей инфекции.

Серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Что может влиять на результат?

• Время, прошедшее с момента заражения: яйца гельминтов и цисты простейших могут быть обнаружены через 2-4 недели и позже после заражения.
• Характер и скорость образования яиц гельминтов и цист простейших: часто наблюдается прерывистый характер их поступления в кал, что может привести к получению ложноотрицательного результата и обуславливает необходимость исследования трех, а не одного образца кала.



• Для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту;
• результат комплексного анализа следует интерпретировать с учетом анамнестических, клинических и инструментальных данных;
• отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, педиатр, инфекционист.