Дифференциальная диагностика яиц гельминтов
Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Логинова Ольга Александровна, Белова Лариса Михайловна
В настоящей статье авторы делятся опытом гельминтоовоскопии препаратов из фекалий крупного рогатого скота хозяйств Северо-Западного федерального округа, проведенной в период с июня 2014 по июнь 2015 г., подчеркивая вероятность обнаружения в препаратах не только яиц гельминтов , но и различных объектов, визуально их имитирующих, которые могут ввести в заблуждение начинающего специалиста. Предложено разделение этих объектов на две основные группы: абиотические (пузырьки, капли и кристаллы) и биотические. Объекты второй группы (споры и пыльцевые зерна растений, споры грибов, яйца членистоногих) предложено подразделить на подгруппы в зависимости от их происхождения (царство: животные / растения / грибы). Проанализированы причины обнаружения этих объектов в препаратах (состав кормов и их обсеменение, обсеменение фекалий, отклонения от нормативов при проведении исследований). Указаны меры, направленные на уменьшение вероятности обнаружения посторонних объектов при гельминтоовоскопии . Описаны способы дифференциальной диагностики яиц гельминтов и имитирующих их объектов.
Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Логинова Ольга Александровна, Белова Лариса Михайловна
Helminthoovoscopy: Experience of Differentiation Between Eggs of Helminths and Simulative Objects
The paper presents the experience of helminthoovoscopy of faecal specimens of cattle from North-West Federal District farms. The research covered the period from June 2014 to June 2015. The authors emphasize the possibility to confuse helminth eggs with various objects that visually imitate helminth eggs . That may mislead a novice professional. It is suggested to divide these objects into two main groups: abiotic (bubbles, drops and crystals) and biotic. The objects of the second group (plant spores and pollen grains, fungal spores, arthropods eggs ) are suggested to divide into subgroups according to their origin, i. e. the kingdom (Animalia/ Plantae/ Fungi). The authors analyze the reasons of the detection of these objects in preparations which could be feed composition and contamination, feces contamination, violation of the standards of the research. They report the measures to reduce the probability of detection of foreign objects during the gelminthoovoscopy and describe the methods of differential diagnosis of helminth eggs and simulating objects.
Ключевые слова: гельминтоовоскопия, гельминты, яйца
Key words: helminthoovoscopy, helminths, eggs
Логинова О. А., Белова Л. М.
ГЕЛЬМИНТООВОСКОПИЯ: ОПЫТ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ И ИМИТИРУЮЩИХ ИХ ОБЪЕКТОВ
HELMINTHOOVOSCOPY: EXPERIENCE OF DIFFERENTIATION BETWEEN EGGS OF HELMINTHS AND SIMULATIVE OBJECTS
Saint-Petersburg State Academy of Veterinary Medicine Address: 196084, Russia, Saint-Petersburg, Chernigovskaya str., 5
Логинова Ольга Александровна, аспирант каф. паразитологии им. В. Л. Якимова
Loginova Olga A., Postgraduate of the Dept. of Parasitology n. a. V. L. Yakimov Белова Лариса Михайловна, д. б. н., проф., зав. каф. паразитологии им. В. Л. Якимова
Belova Larisa M., Doctor of Biological Science, Professor, Head of the Dept. of Parasitology n. a. V. L. Yakimov
Аннотация. В настоящей статье авторы делятся опытом гельминтоовоскопии препаратов из фекалий крупного рогатого скота хозяйств Северо-Западного федерального округа, проведенной в период с июня 2014 по июнь 2015 г., подчеркивая вероятность обнаружения в препаратах не только яиц гельминтов, но и различных объектов, визуально их имитирующих, которые могут ввести в заблуждение начинающего специалиста. Предложено разделение этих объектов на две основные группы: абиотические (пузырьки, капли и кристаллы) и биотические. Объекты второй группы (споры и пыльцевые зерна растений, споры грибов, яйца членистоногих) предложено подразделить на подгруппы в зависимости от их происхождения (царство: животные / растения / грибы). Проанализированы причины обнаружения этих объектов в препаратах (состав кормов и их обсеменение, обсеменение фекалий, отклонения от нормативов при проведении исследований). Указаны меры, направленные на уменьшение вероятности обнаружения посторонних объектов при гельминтоовоскопии. Описаны способы дифференциальной диагностики яиц гельминтов и имитирующих их объектов.
Summary. The paper presents the experience of helminthoovoscopy offaecal specimens of cattle from North-West Federal District farms. The research covered the period from June 2014 to June 2015. The authors emphasize the possibility to confuse helminth eggs with various objects that visually imitate helminth eggs. That may mislead a novice professional. It is suggested to divide these objects into two main groups: abiotic (bubbles, drops and crystals) and biotic. The objects of the second group (plant spores and pollen grains, fungal spores, arthropods eggs) are suggested to divide into subgroups according to their origin, i. e. the kingdom (Animalia/ Plantae/ Fungi). The authors analyze the reasons of the detection of these objects in preparations which could be feed composition and contamination, feces contamination, violation of the standards of the research. They report the measures to reduce the probability of detection of foreign objects during the gelminthoovoscopy and describe the methods of differential diagnosis of helminth eggs and simulating objects.
Стабильное получение высококачественной российской животноводческой продукции для удовлетворения потребностей населения нашей страны в последние годы приобретает стратегически важное значение. Усилия ветеринарных специалистов должны быть направлены на поддержание здоровья животных, повышение их продуктивности и минимизацию убытков от возможных болезней, в том числе паразитарной этиологии. В комплексе лечебно-профилактических мероприятий важное место занимает борьба с гельминтными инвазиями. Ее эффектив-
ность определяется квалифицированной диагностикой гельминтозов. Гельминтоовоско-пия как средство прижизненной диагностики позволяет понять, гельминты каких видов и в каком количестве паразитируют у исследуемых животных. Однако гельминтолог, особенно начинающий врач, должен помнить, что при микроскопии препаратов фекалий, помимо яиц гельминтов, можно обнаружить множество сходных объектов различной природы. Важно уметь дифференцировать эти объекты во избежание постановки ложных диагнозов и, как следствие, необоснованного применения антигельминтных препаратов.
Материалы и методы
В фекалиях исследуемых животных были обнаружены яйца гельминтов различных видов, относящиеся к трем классам (Cestoda, Nematoda, Trematoda). Однако за период исследования встречалось немало иных объектов, в большей или меньшей степени похожих на яйца гельминтов, которые могут ввести в заблуждение начинающего гельминтолога.
Указанные объекты целесообразно разделить на две большие группы: абиотические и биотические. К первой группе относятся такие элементы, отличить которые не составит большого труда. Образования правильно-круглой или правильно-овальной формы
Рис. 1. Капли жира (слева) и пузырьки воздуха (справа). Увеличение: х40.
абиотического происхождения зачастую представляют собой всевозможные капли и пузырьки (рис. 1). Например, при микроскопии препарата из фекалий телят с расстройствами пищеварения можно обнаружить капли жира. Пузырьки воздуха могут образовываться при подготовке препарата или изначально содержаться в материале. Кроме того, пузырьки могут являться дефектом предметного стекла.
Аморфные или угловатые объекты могут представлять определенную сложность при идентификации, если речь идет о яйцах гельминтов рода Moniezia, известных своими гексагональными, пирамидальными и им подобными формами. Это могут быть песчинки или кристаллы, например глицерина (рис. 2). Впрочем, хорошо окатанные песчинки могут иметь и эллиптическую форму, характерную для большинства яиц.
Объекты биотической группы, в свою очередь, можно подразделить на подгруппы в зависимости от того, принадлежат ли они к царству растений, грибов или животных.
Основную массу сходных с яйцами гельминтов объектов составляют именно растительные элементы. К ним относятся споры и пыльцевые зерна (рис. 3, 4). Помимо того, что представлено на иллюстрациях, нами были обнаружены пыльцевые зерна покрытосеменных (Convolvulus arvensis - вьюнка полевого, Acer platanoides - клена остролистного, Betula pendula - березы повислой и др.) и голосеменных (Pinus sylvestris - сосны обыкновенной, Larix sibirica - лиственницы сибирской) растений.
Споры грибов также могут иметь сходство с яйцами гельминтов (рис.5).
Эллиптические объекты, относящиеся к животному царству, представляют собой
Рис. 2. Кристалл глицерина (слева) и яйцо гельминта M. expansa (справа). Увеличение: х40.
Рис. 3. Пыльцевое зерно ОпоЬгусЫ&' sibirica - эспарцета сибирского (слева) и яйцо гельминта Ostertagia ostertagi (справа). Увеличение: х40.
Рис. 5. Споры гриба МогокеШ евеиЫШа - сморчка съедобного (слева) и яйца гельминта Triокostrongylus axei (справа). Увеличение: х40.
Рис. 7. Яйцо чесоточного клеща Chorioptes bovis (слева) и яйцо гельминта Oesophagostomum radiatum (справа). Увеличение: х40.
ооцисты кокцидий (рис. 6) либо яйца членистоногих: насекомых (например блох) или клещей (рис. 7).
Представленные в статье объекты, имитирующие яйца гельминтов, могут оказываться в поле зрения в силу ряда причин. Соответственно, для исключения их при дифференциальной диагностике целесообразно использовать комплексный подход.
К примеру, следует обращать внимание на плоскость, в которой встречаются эти объекты. При 40-кратном увеличении требуется достаточное количество оборотов микровинта, чтобы переместиться из плоскости препарата в плоскость предметного стекла,
Рис. 4. Пыльцевое зерно Dactylis glomerata - ежи сборной (слева) и яйцо гельминта Toxocara vitilorum (справа). Увеличение: х40.
Рис. 6. Ооциста кокцидии (слева) и яйцо гельминта Trichocephalus skrjabini (справа). Увеличение: х40.
так как глубина резкости видимого пространства очень мала. Таким образом можно исключить пузырьки - дефекты стекла.
Важно исследовать содержимое объекта. В яйцах гельминтов, как правило, просматриваются личинки или клеточные образования, в то время как капли или пузырьки однородны.
Споры грибов и растений, а также пыльцевые зерна могут попадать в препараты: а) в случае содержания их в кормах; б) в случае обсеменения кормов до их поедания; в) при обсеменении фекалий. Спороносящие растения традиционно не используются для кормления скота, поэтому важно следить за составом травостоя. Корма из подходящих трав снижают вероятность появления спор в фекалиях. Однако даже если учитывать сезонность спороношения и цветения, сложно застраховаться от обнаружения подобных объектов, т. к., во-первых, технологии кормления КРС предполагают приготовление кормов (сено, силос), что удлинняет интервал от сбора трав до их скармливания, во-вторых, корма могут быть закуплены хозяйством в другой местности, так что в фекалиях животных могут встречаться остатки растений, не характерных для географических условий
конкретной фермы. Кроме того, обсеменение кормов может происходить в процесе их хранения или скармливания, если в это время поблизости от хозяйства происходит цветение или спороношение. Обсеменение же фекалий возможно в случае взятия их для анализа не ректально, а с пола/земли.
По той же причине в экскрементах могут встречаться яйца блох, власоедов, клещей и пр. Вероятность обнаружения яиц членистоногих повышается, если на ферме находятся посторонние животные (кошки, собаки, крысы).
Такие объекты, как кристаллы глицерина, солей или иных компонентов, используемых для приготовления рабочих растворов при проведении гельминтоовоскопии, образуются, как правило, в случае затянувшегося исследования или при использовании застоявшихся реагентов.
Соответственно, чем строже соблюдаются нормы содержания, кормления животных, технологии отбора проб и проведения исследований, тем меньше шансов обнаружить в препарате посторонний объект, напоминающий яйцо гельминта.
Однако поскольку полностью исключить такую вероятность невозможно, мы рекомендуем использовать все доступные справочные материалы и пособия. Речь идет как об определителях яиц гельминтов (всевозможных атласах, таблицах, микроскопических препаратах [3,4]), так и об аналогичных источниках, касающихся растений (палиноло-
гические справочники [2]), грибов, простейших и членистоногих и пр.
Перечень объектов, имеющих внешнее сходство с искомыми яйцами гельминтов довольно велик, чему способствует и немалое разнообразие форм самих яиц. Соблюдение правил и процедур как в отношении содержания и кормления животных, так и при отборе материала и гельминтоовоскопии позволит минимизировать число таких объектов. Ветеринарному специалисту важно уметь дифференцировать одно от другого, используя все доступные способы, чтобы в основу противогельминтозных мероприятий в каждом конкретном случае ложилась корректная информация.
1. Белова, Л. М. Новая универсальная флотационная жидкость для комплексных лабораторных исследований / Л. М Белова, Н. А.Гаврилова, Д. Н. Пудовкин // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2012. - № 4/1. - С.15-17.
2. Палинология: учебное пособие / Р. Г. Курманов, А. Р. Ишбирдин. - Уфа : РИЦ БашГУ, 2012. - 92 с. : ил.
3. Черепанов, А. А. Атлас: Дифференциальная диагностика гельминтозов по морфологической структуре яиц и личинок возбудителей / А. А. Черепанов, А. С. Москвин, Г. А. Котельников, В. М. Хренов. -М. : Мысль, 1999. - 76 с. : ил.
4. Шустрова, М. В. Прижизненная диагностика гельминтозов животных / М. В. Шустрова, Л. М. Белова, В. И. Лоскот, Н. А. Гаврилова, А. Н. Токарев, Ю. Е. Кузнецов. - СПб. : Издательство СПбГАВМ, 2010. - 57 с. : ил.
Все о «и*рмм*рии для врвч^й и вмдмьцев жимтмы*
последние новости подборка статей справочники
каталог лекарственных средств адреса ветклиник и зоомагазинов информация о выставках и конференциях анонсы ветеринарных журналов
Приглашаем к сотрудничеству ветеринарных врачей и организации.
Информация об исследовании
Гельминтозы – группа болезней вызываемых паразитическими червями – гельминтами (глистами). Гельминты представляют собой многоклеточные животные, организмы паразитического образа жизни. Они обитают внутри другого организма и питаются за счёт пищи и тканей хозяина. Локализация гельминтов отличается большим разнообразием, они могут паразитировать во всех органах и тканях человека. Наиболее частым местом локализации считается желудочно-кишечный тракт. Лёгкие являются местом временной локализации личинок при токсокарозе. В центральной нервной системе паразитирует эхинококк, также поражая печень и лёгкие, описторхис (возбудитель описторхоза) живёт в желчных ходах печени и протоках поджелудочной железы, трихинелла (возбудитель трихинеллеза) - в мышечной ткани.
У человека зарегистрировано паразитирование свыше 250 видов гельминтов. С током крови они могут попасть в любой уголок организма и обосноваться там. Для гельминтозов характерно сравнительно медленное развитие болезни, хроническое течение, нередко с длительной компенсацией. Основными факторами передачи гельминтов являются: фекалии людей, почва, содержащая яйца и личинки, любые продукты питания и вода, загрязнённые яйцами гельминтов. Конечными факторами передачи биогельминтов являются мясо крупного рогатого скота и свиней (трихинеллёз), многие виды пресноводных рыб, крабов и раков (описторхоз). При попадании возбудителя в организм человека у него начинаются вырабатываться специфические антитела для защиты и связывания возбудителя. С целью диагностики и подтверждения диагноза гельминтоза используют выявление специфических антител с помощью серологических реакций, учитывая длительность заболевания рекомендуется сдавать антитела класса G, повышение титра в 3-4 раза свидетельствует об активной инфекции (подробнее смотри токсокароз, описторхоз, трихинеллёз, эхинококкоз).
IgG вырабатываются через несколько недель после заражения и служат достоверным диагностическим признаком инфицирования.
Заболевание преобладает в регионах, в которых одним из основных продуктов в рационе человека является рыба семейства карповых - основной дополнительный хозяин червей. В случае легкой формы заболевания около 80% инфицированных не замечают никакой симптоматики, единственным проявлением может быть эозинофилия (повышение уровня эозинофилов в крови). Если в фекалиях больного содержатся от 10 тысяч и более яиц описторхов, то инфекция протекает тяжело. В таких случаях заболевание сопровождается болью в животе, отсутствием аппетита, повышением температуры, усталостью, пожелтением кожных покровов и белков глаз. Дальнейшее прогрессирование процесса приводит к отекам, увеличению желчного пузыря, поражению печени. Описторхоз ассоциируется с раком желчных протоков.
Показания к назначению исследования
- При обследовании пациентов с указанием на употребление в пищу сырой речной рыбы (описторхоз), сырого мяса (трихинеллёз), а также контактирующих по роду деятельности с зараженными животными, почвой и водой (ветеринары, работники коммунальных служб, садоводы – токсокароз и эхинококкоз);
- При оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации;
- При устройстве на работу декретированных групп населения.
Подготовка к исследованию
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи.
За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.
С этим исследованием сдают
- 20.7. Лямблиоз (сумм. АТ, п/кол)
- 20.106. Амебиаз IgG (п/кол)
Результаты исследования
1. Аутоиммунные заболевания.
2. Иммунодефицитные состояния.
3. Возможен перекрест иммунологических реакций при заболеваниях описторхозом, аскаридозом, трихинеллёзом и эхинококкозом.
Положительный результат:
1)Описторхоз, токсокароз, трихинеллёз или эхинококкоз, текущая инфекция;
2)Описторхоз, токсокароз, трихинеллёз или эхинококкоз, инфекция в анамнезе;
3)Ложноположительный результат (другие гельминтозы).
Отрицательный результат:
1)Норма.
Гельминтозы и протозоозы наносят значительный ущерб здоровью человека. Заболевание может проявляться абдоминальным, аллергическим, анемическим синдромом, хроническим токсикозом, глисты и простейшие могут поражать ткани печени, легких, желчевыводящих путей, головного мозга, глаза.
Гельминтозы не имеют специфических симптомов, поэтому присутствие паразита можно подтвердить только лабораторными и инструментальными методами. Диагностика гельминтозов может включать гельминтоовоскопию, гельминтоларвоскопию, серологические методы, а также рентген, эндоскопию, УЗИ.
Методы диагностики гельминтозов
Исследование на гельминтозы назначается при появлении характерных клинических симптомов и на основании эпидемиологического анамнеза (содержание в доме животных, посещение зараженных мест, возможное употребление зараженного мяса или воды). Лабораторная диагностика гельминтозов может проводиться в течение нескольких часов или дней, что зависит от вида паразита, который предположительно провоцирует возникновение симптомов.
Паразитологические методы могут быть прямыми, то есть заключаются в обнаружении паразита, его фрагмента или личинки, или же применяются иммунологические методы, которые позволяют обнаружить гельминта в личиночной стадии развития, в фазе миграции, при паразитировании только самца, несильной инвазии, а также если у червя угасла или еще не развилась репродуктивная функция.
В диагностике гельминтов большое значение имеет копрологическое исследование, поскольку большинство глистов паразитируют в кишечнике, а их яйца выделяются вместе с калом. Каловые массы исследуют макроскопическим и микроскопическим способом.
С помощью макроскопического метода в фекалиях обнаруживают гельминтов или их части. В чашке Петри или небольшой плоской емкости кал смешивают с водой и рассматривают через лупу. При достаточном количестве света на темном фоне удается обнаружить белые фрагменты глиста. Все подозрительные вкрапления перекладывают на предметное стекло с глицерином для дальнейшего рассмотрения под увеличением.
Для обнаружения части гельминта может использоваться и метод отстаивания. Фекалии смешивают с водой и позволяют отстояться, после этого сливают воду. После нескольких отстаиваний, когда вода уже будет прозрачной, жидкость выливают, а осадок рассматривают в чашке Петри. При микроскопии испражнений за яйца глиста могут приниматься пузырьки воздуха, растительные клетки, споры и пыльца растений, частички непереваренной пищи.
В сомнительных случаях необходимо проводить повторные анализы. Методические указания (МУК), разработанные в 2013 году, устанавливают порядок применения метода отбора проб и описывают методы лабораторных исследований биоматериала, что позволяет применять наиболее современные методы для лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов и корректно расшифровывать их результаты.
Микроскопический метод помогает выявить личинки паразитов или их яиц. Наиболее применяемым и доступным считается нативный мазок, который позволяет увидеть яйца и личинки всех глистов. Небольшое количество перемешенного кала наносят на предметное стекло, смазанное глицерином, и рассматривают при небольшом увеличении.
В методах используется то, что имея различный вес личинки паразитов всплывают на поверхность физиологического раствора или, наоборот, оседают на дно. Если яйца тяжелее жидкости, то они скапливаются в осадке (метод седиментации позволяет выявить яйца трематод), а если легче, то яйца всплывают (метод флотации позволяет увидеть яйца власоглава, карликового цепня, анкилостомид).
В стеклянную банку помещают 2–5 г кала и заливают физиологическим раствором (400 грамм соли на литр воды), затем размешивают и дают отстояться. Спустя 45 минут, образовавшуюся пленку помещают на предметное стекло с глицерином. Другой способ поместить пленку на стекло: долить в сосуд воды до краев и накрыть предметным стеклом.
В соленой воде яйца всплывают и их можно увидеть в микроскоп, но у различных гельминтов яйца поднимаются на поверхность жидкости с различной скоростью (карликового цепня спустя четверть часа, аскарид через полтора–два часа, власоглава только через 2–3 часа). Помимо образовавшейся поверхностной пленки, обязательно нужно исследовать и осадок, так как яйца тениид, трематод, аскарид тонут при данной концентрации солевого раствора.
Преимуществами данного метода является его доступность, низкая стоимость и высокая эффективность, поэтому его часто сочетают с нативным мазком. Среди недостатков данного способа диагностики гельминтоза можно выделить необходимость исследования поверхностного слоя и осадка, а также продолжительное время для отстаивания.
Также предполагает использование насыщенного раствора натрия, но только меньшей относительной плотностью (килограмм соли нитрата натрия на литр воды), что приводит к всплытию большинства яиц гельминтов, а значит рассматривать осадок не требуется.
К недостаткам данного метода диагностики гельминтозов относят необходимость использования большого количества соли натрия и азотистой кислоты, кроме того, онкосферы тениид и яйца трематод не поднимаются на поверхность. Если раствор стоит дольше 1–2 часов, то яйца некоторых глистов набухают и уходят в осадок.
Предполагает осаждение яиц. В емкость переливают раствор изотонический. В отдельной банке смешивают фекалии с водой, отфильтровывают через марлю, и наливают поверх солевого раствора, так чтобы получилось два слоя. Спустя 2–3 часа, слой с калом убирают при помощи пипетки, а второй слой оставляют еще на 12–20 часов или помещают в центрифугу.
Осадок переливают на предметное стекло и рассматривают в микроскоп. Данный метод был предложен для поиска возбудителя описторхоза и оказался более информативным, чем микроскопия нативного мазка или метод Фюллеборна, однако, он почти не используются, поскольку технически сложен.
ПАВы, которые входят в состав стиральных порошков, освобождают яйца глистов от кала, и тем самым способствуют выпадению их в осадок. Десять грамм моющего средства растворяют в литре воды. Наливают раствор в стеклянную банку, добавляют туда испражнения и перемешивают.
За сутки в растворе образуется осадок из нескольких слоев. На дне оседают крупные частицы, в среднем слое концентрируются яйца гельминтов, вверх всплывают сероватые хлопья. Для исследования берут пипеткой 2–3 капли жидкости из второго слоя.
Дает возможность выявить даже мелкие яйца трематод, кишечных глистов и цисты простейших, он также применяется, чтобы определить интенсивность инвазии. Фекалии помещают в емкости с уксусной кислотой и перемешивают до однородности, затем процеживают, переливают во вторую пробирку и доливают эфир. Все взбалтывают и помещают в центрифугу. Образовавшийся верхний слой снимают, а осадок наносят на предметное стекло и изучают под микроскопом.
Закручивания по Шульману позволяет обнаружить в каловых массах живых личинок глистов (в частности, стронгилоида). Для анализа берется только свежий кал. Его опускают в стеклянную банку с физиологическим раствором, и размешивают круговыми движениями, не дотрагиваясь до стенок. Яйца и личинки паразитов концентрируются в центре. После перемешивания стеклянной палочкой (которой мешали) делают мазки на предметном стекле.
Использует то, что личинка двигается по направлению к теплу. С помощью данного диагностического метода можно выявить сгронгилоидоз. Так, 20–50 грамм фекалий кладут на металлическую сетку и ставят ее в воронку, в которую наливают теплую воду (40–50 ⁰С). Личинки перемещаются из кала в воду. Их оставляют отстаиваться в течение 3–4 часов. Отстоявшуюся жидкость помещают в центрифугу, а затем исследуют.
Данный метод советует ВОЗ для обнаружения анкилостомидоза у людей и проводится при необходимости дифференцировать анкилостомоз от некатороза. В центр фильтрованной бумаги наносят полграмма кала. Затем бумагу опускают в пробирку таким образом, что чистый конец оказывается в воде, а верхняя часть закрепляется пробкой, при этом фекалии не касаются воды. Пробирку помещают в термостат на 5–6 суток. За это время филяриевидные личинки оседают и их можно увидеть через лупу.
Данный метод применяется для обнаружения яиц остриц и бычьего цепня. Он предполагает проверку перианального смыва или соскоба. Сбор материала проводится утром до акта дефекации (у девушек и до мочеиспускания) или вечером, спустя 2–3 часа после того, как пациент заснул. У детей образец может быть взят после дневного сна.
Для соскоба может использоваться ватный тампон или палочка, а также клейкая лента. Ватным тампоном проводят в области перианальных складок и возле ануса. Палочку с тампоном опускают в пробирку и отправляют в лабораторию. Лаборант делает мазки на предметных стеклах и микроскопирует их.
Также является эффективным, поскольку позволяет диагностировать аскаридоз и обнаружить онкосферы тениид. Для сбора материала используется прозрачная клейкая лента длиной в 4–5 см. Ее липкой стороной прикасаются к перианальным складкам, быстро снимают и клеят на предметное стекло. Преимущество метода в том, что можно долго хранить образец.
Дополнительные способы
Лабораторная диагностика гельминтозов может включать:
- исследование содержимого кишечника . Личинки и яйца глистов, заселяющих печень, желчный пузырь, поджелудочную железу и двенадцатиперстную кишку, можно разглядеть в желчи и содержимом кишечника. Образцы для исследования берут во время дуоденального зондирования. С помощью полученных материалов можно диагностировать описторхоз, фасциолез, клонорхоз, дикроцелиоз, анкилостомидозы, стронгилоидозы;
- исследование мочи . Метод позволяет обнаружить яйца шистосом. Для проведения теста необходимо 50 мл мочи, собранной в середине дня, перелить в конический стакан и дать отстояться полчаса. Затем мочу сливают, а осадок помещают в центрифугу;
- исследование мокроты . При рассматривании образца мокроты через микроскоп можно увидеть яйца легочного сосальщика (парагонима), личинки аскариды, некатора и стронгилоида, фрагменты эхинококкового пузыря;
- исследование крови . При окрашивании биоматериала по Романовскому можно выявить личинки нематод, паразитирующих в подкожной клетчатке. Кровь нужно брать и в ночное время, поскольку личинки при некоторых тропических филяриозах заметны, только когда человек отдыхает. Анализ крови на гельминтозы информативен еще и потому что показывает пониженное количество эозинофилов, что косвенно указывает на присутствие в организме червей.
Серологические методы
Иммунологическое исследование проводится при подозрении на тяжелые тканевые гельминтозы и трематодозы. С помощью ИФА выявляют эхинококкоз, трихинеллез, альвеококкоз, токсокароз, цистицеркоз, описторхоз, фасциолез, клонорхоз. При гельминтозе в крови повышается сначала уровень титра IgM, а затем и титр IgG, что указывает на активное инфицирование.
Дифференциальная диагностика гельминтозов IgG (кач), эффективна не только при обнаружении аскарид, но и для выявления протозоозов (простейших), которые в той же мере способны навредить организму. Метод реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) позволяет обнаружить описторхоз, эхинококкоз, альвеококкоз, трихинеллез.
Эхинококкоз и альвеококкоз также можно обнаружить при использовании реакции латекс-агглютинации (РЛА), а цистицеркоз и трихинеллез подтвердит реакция кольцепреципитации (РПК). Эти методы применяются в том случае, если другими более простыми способами не удается доказать присутствие глиста в организме.
Инструментальные методы
Для выявления некоторых гельминтозов у человека, поражающих отдельные органы, проводятся инструментальные исследования:
- рентген;
- УЗИ;
- компьютерная томография;
- магнитно-резонансная томография;
- эндоскопия.
Данные методы диагностики могут применяться и для оценки тяжести поражения гельминтами внутренних органов. В редких случаях удается увидеть самих червей, чаще исследование проводится для обнаружения неспецифических признаков заражения (увеличение пораженного органа, нарушение сокращение желчного пузыря, появление кист).
Анализ крови на гельминтозы является менее информативным, поскольку указывает только на развитие иммунного ответа организма, а это значит, что инвазия была, но когда именно не известно.
Как сдавать анализ на определение того или иного вида гельминта, подскажет лечащий врач.
Как правило, специальной подготовки не требуется (венозная кровь сдается натощак, материал для исследования кала берется из трех разный мест и хранится не дольше 8 часов). Если в испражнениях не выявлены глисты, то это не говорит о том, что они отсутствуют в кишечнике и, скорее всего, будут проведены повторные анализы кала.
Читайте также: