Фагоцитарная активность моноцитов при описторхозе
При остром описторхозе значительная часть исследований периферической крови посвящена количественным изменениям клеточного состава (гемограмма, лейкоцитарная формула) [1; 5]. Качественные изменения форменных элементов крови при остром описторхозе не достаточно изучены. Морфологические изменения эозинофилов на интактных клетках in vitro при описторхозе констатируются как дегрануляция их цитоплазмы, с повышенной вакуолизацией ядра и цитоплазмы [8]. Изменения периферической крови включают эозинофилию и имеют характер лейкемоидной реакции [5]. Установлено, что при описторхозе нарушается состояние системы свертывания крови, обусловленное нарушением функций кровяных пластинок, однако изменение их структуры не дается [2]. Форме эритроцитов при описторхозе не уделяется должного внимания. В литературе отсутствуют подробные данные о морфологии всех форменных элементов при остром описторхозе in vivo. Модификация тинкториальных свойств форменных элементов при остром описторхозе в литературе не отмечена. Морфологические изменения периферической крови, происходящие при остром описторхозе, и их анализ в динамике ранее не описаны.
Цель: провести исследование и сравнительный анализ цитоморфологии периферической крови при остром описторхозе в разные сроки наблюдения.
Материалы и методы
Кровяные пластинки визуальных особенностей не имели. Хромомер базофильной окраски локализовался в центре, по периферии располагался светлый гиаломер. Контуры кровяных пластинок четкие, форма неправильная. Они были расположены немногочисленными группами.
Эритроциты кроликов обеих групп имели достаточно вариабельные размеры, микроциты и макроциты встречались среди нормоцитов. У кроликов обеих групп через 6 суток отмечали разницу в окраске эритроцитов – гипо- и гиперхромные формы чередовались с нормохромными. Установлено, что для кроликов полихромазия и анизоцитоз не является проявлением патологии [9; 10].
Среди обычных клеточных форм в этот срок в периферической крови были обнаружены не типичные клетки в количестве 10%. Они имели неправильную форму, очень крупные размеры, визуально были больше моноцитов крови в 2-3 раза. Ядро этих клеток лежало эксцентрично, имело овальную форму. Цитоплазма клеток была очень нежная, слабо базофильной окраски, содержала пылевидную базофильную зернистость. Клетки располагались в мазке группой. Вероятно, это гистиофагоциты моноцитарного типа. Но по сравнению с моноцитами структура их ядер была более грубая, резкой базофильной окраски. Выход в периферическую кровь тканевых фагоцитов является определенным парадоксом, поскольку моноциты крови уходят в ткани в норме и дифференцируются в макрофаги. Обратный процесс, возможно, является отображением специфического ответа на воздействие паразита, который для данного хозяина является нетипичным. Или же имеет место их образование из моноцитов непосредственно в крови, что также является парадоксальным. Появление гистиоцитов описано в начальном этапе воспалительных процессов в соединительной ткани [7].
Изменения цитоморфологии периферической крови кроликов через 32 суток после заражения включали: сегментоядерные псевдоэозинофилы имели слабоокрашенные перемычки между сегментами ядра. В цитоплазме клеток сохранялась токсическая зернистость, с более резкой азурофильной окраской. Цитоплазма базофилов была практически без специфической зернистости. В ней оставались лишь единичные гранулы, крупных размеров и резкой базофильной окраски. Их локализацию наблюдали только по периферии, тогда как в центре клетки около ядра была пустая зона, подобная светлому окну. Также можно предположить, что это молодые базофилы, так как у незрелых клеток гранулы сосредоточены только по периферии, но форма и структура их ядра больше свидетельствуют о произошедшей дегрануляции уже зрелых клеток. Эозинофилы сохраняли зернистость цитоплазмы, содержащую лишь небольшие участки без гранул. Количество сегментов ядра, как и в ранний срок наблюдения, составляло 3-4. Лимфоциты крови образовывали псевдоподии. Появились средние лимфоциты, в ядре которых присутствовала небольшая выемка. Цитоплазма многих лимфоцитов была резко гиперхромна. Подобное изменение окраски цитоплазмы можно оценить как появление лимфоцитов в переходной стадии раздражения. Ядра малых лимфоцитов типичны по строению. Количество теней Боткина-Гумпрехта-Клейна, как в ранний срок наблюдения, вновь возрастало. Гистиофагоциты не встречались.
Изменения морфологического строения клеточного ряда периферической крови через 39 суток после заражения были достаточно разнообразны. В цитоплазме псевдоэозинофилов выявляли наличие светлых участков без гранул по периферии – телец Князькова-Деле, а в остальной части сохранялась выраженная токсическая зернистость. Количество сегментов ядра клеток насчитывало 6-7. Другие, наоборот, имели по 2 сегмента, количество таких клеток составляло 4%. Цитоплазма таких клеток тоже включала тельца Князькова-Деле. Цитоплазма базофилов практически полностью не имела гранул, вследствие чего хорошо визуализировалось слабо сегментированное ядро. У эозинофилов количество сегментов ядра достигало 5. Как и в предыдущие сроки, в их цитоплазме зернистость отсутствовала в незначительном объеме. В лимфоцитах, как и через 6 суток, вновь выявлены единичные вакуоли, находящиеся в больших и средних формах. У малых лимфоцитов цитоплазма с одного края имела оксифильную окраску. Количество теней Боткина-Гумпрехта-Клейна в этом сроке вариабельно – от 1 до 9. В этом сроке выявлены клетки Ридера. Эти лимфоциты имели двудольчатое ядро и слабобазофильную цитоплазму. Количество форм Ридера составляло 3-4 клетки на 100 встречаемых лейкоцитов. Наличие клеток Ридера в периферической крови при остром описторхозе в литературе не описано. Хотя указывается их появление как следствие преждевременного созревания и неправильности деления из-за ускорения кроветворения [3]. Асимметричность деления клеток выделяется авторами как одна из форм самоподдержания клеточной популяции гемопоэтических клеток, нарушение которой определено процессами преждевременного старения [4].
Выводы
При оценке морфологического анализа периферической крови после заражения Opisthorchis felineus во всех сроках наблюдения сегментоядерные псевдоэозинофилы имели токсическую зернистость, что характеризует локально протекающее асептическое воспаление в организме, связанное с описторхозной инвазией. Вакуолизация цитоплазмы псевдоэозинофилов, а затем средних лимфоцитов также характеризует воспалительный процесс, сдвиг метаболических процессов, извращение процессов эндоцитоза. Высокая способность клеток к разрушению свидетельствует о нарушении в структурах мембраны. Различные изменения структуры ядра сегментоядерных псевдоэозинфилов, лимфоцитов являются следствием неправильной дифференцировки этих клеток в красном костном мозге вследствие общей интоксикации продуктами клеточного распада поврежденных органов и метаболитами паразита. Наличие и нарастание форм лимфолиза характеризует нарушения иммунной системы. В отличие от эозинофилов, у базофилов отсутствие специфической зернистости, возрастающее с увеличением срока наблюдения, характеризует большее участие последних в неспецифической аллергической сенсибилизации. Наличие форм Ридера, ранее не описываемое при остром описторхозе, подтверждает повреждение печени. Увеличение размера кровяных пластинок является показателем нарушения как тромбоцитопоэза, так и системы свертывания крови вследствие инвазии. Пойкилоцитоз, ранее не описываемый при описторхозе, вероятно, связан с нарушением работы кроветворных органов.
Кровь – жидкая соединительная ткань, которая наряду с лимфой и тканевой жидкостью образует внутреннюю среду организма, омывающую все его клетки и ткани.
Функции крови очень сложны и разнообразны. Через кровь происходит удаление из клеток организма и тканей продуктов обмена. Она выполняет дыхательную, питательную, регуляторную, защитную и механическую функции в организме. Наряду с нервной системой кровь обеспечивает функциональное единство всех частей организма. Как гуморальное звено регуляторных механизмов гомеостаза кровь участвует в стабилизации всех констант организма [23, 24].
Кровь состоит из плазмы и взвешенных в ней форменных элементов. Часть объема крови, которая приходится на клеточную долю, называется гематокритом (40-45%).
Жидкая часть крови – плазма – на 90-91% состоит из воды, выполняющей роль растворителя, белков (6,5-8%) и минеральных солей (1%). Помимо них, в плазме обнаруживаются около 1% других веществ: гормонов, ферментов, азотосодержащих веществ, питательных компонентов, микроэлементов и др.
Различают три вида форменных элементов крови: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.
Эритроциты составляют основную массу клеток крови. Эти клетки безъядерные, имеют форму двояковогнутых дисков, что увеличивает их дыхательную поверхность, способствуя быстрой, равномерной диффузии О2 через оболочку эритроцитов.
В норме количество эритроцитов у собак составляет 3,5-4,8х10 12 г/л, или 3,5-4,8 млн. в 1 мм 3 .
Подсчет количества эритроцитов в крови осуществляют, используя камеру Горяева (рисунок 1).
Рисунок 1. Счетная камера Горяева
Счетная камера Горяева (рисунок 1) состоит из 225 больших квадратов, 25 из которых поделено на 16 маленьких. Единицей отсчета является маленький квадрат. Его сторона равна 1/20 мм, а площадь – 1/20x1/20 = 1/400 мм 2 . Объем крови, помещающийся над маленьким квадратом, равен 1/400 мм 2 х1/10 мм = 1/4000 мм 3 (1/10 мм – высота слоя крови).
Х=
(1);
где Х – искомое число эритроцитов в 1 мкл крови (или в мм 3 );
Э – сумма эритроцитов, подсчитанных в 5 больших квадратах;
4000 – объем части камеры над одним маленьким квадратиком;
200 – разведение крови;
80 – количество маленьких квадратиков в 5 больших квадратах (5х16=80).
Эритроцит заполнен гемоглобином. В среднем, в одном эритроците находится примерно 280 млн. молекул гемоглобина. Гемоглобин представляет собой сложный глобулярный белок, полипептидные цепи которого свернуты в компактную глобулу. Состоит он из белковой части – глобина и небелковой пигментной группы – гема, соединенных между собой гистидиновым мостиком. В молекуле гемоглобина имеется 4 гема. Каждый гем построен из 4 пирроловых колец и содержит Fe 2+ . Гем является активной, или простетической, группой и обладает способностью присоединять или отдавать О2. Глобин представлен двумя α и β полипептидными цепями, образующими с СО2 карбаминовую связь.
Различают физиологические соединения гемоглобина (НвО2, НвСО2) и патологические (НвСО, метгемоглобин). Физиологические соединения способны обратимо присоединять О2 и СО2 и легко участвуют в газообмене. Патологические соединения препятствуют присоединению О2 (НвСО) или его отдаче (метгемоглобин, где железо переходит в трехвалентную форму).
В норме содержание гемоглобина в крови собак: 11-14% (110-140 г/л).
Относительное насыщение эритроцитов гемоглобином называется цветным показателем крови (ЦП). При подсчете за норму принимается количество эритроцитов, равное 5 млн. в 1 мкл крови, и гемоглобина – 166 г/л. Определяют среднее количество гемоглобина в 1 эритроците (166/5 млн. = 0,000033 мкг, или 33 пг-пикограмм).
Для определения количества гемоглобина применяют колориметрический метод Сали.
Гемометр Сали представляет собой штатив с тремя пробирками (рисунок 2). Боковые пробирки заполнены стандартным раствором солянокислого гематина и запаяны. Средняя пробирка градуирована и служит для исследования крови.
1 – корпус, 2 – запаянные пробирки со стандартом,
3 – градуированная пробирка, 4 – капиллярная пипетка для взятия крови, 5 – глазная пипетка, 6 – стеклянная палочка.
Рисунок 2. Гемометр Сали
Кровь в количестве 0,02 мл насасывают в пипетку и выдувают в среднюю пробирку гемометра, где предварительно находится 0,2 мл 0,1N НСl. Пипетку несколько раз промывают, насасывая и выдувая раствор. Под воздействием НСl гемоглобин превращается в соляно- кислый гематин коричневого цвета. Затем в этот раствор постепенно добавляют дистиллированную воду, помешивая стеклянной палочкой до тех пор, пока цвет раствора не совпадет с цветом стандартных растворов. Отмечают на шкале уровень жидкости в пробирке – это будет количество гемоглобина.
Вычисление производится по формуле:
ЦП=
:
(2);
Где,
– количество Нв и эритроцитов в анализируемой крови, а 166 и 5000000 – нормальное количество Нв в мкг/мкл и эритроцитов в 1 мкл.
Упрощенная формула для подсчета цветного показателя крови следующая:
ЦП =
(3);
В норме цветной показатель крови составляет 0,8-1. Эритроциты, имеющие такой показатель, называются нормохромными. Если ЦП>1, то эритроциты называют гиперхромными, а если 9 /л, или 5,5-12,5 тыс. в мм 3 [24].
Тромбоциты, или кровяные пластинки, представляют собой бесцветные сферические, лишённые ядер тельца. Их диаметр 2-3 мкм, в 3 раза меньше диаметра эритроцитов. Тромбоциты образуются в красном костном мозге и селезёнке. Продолжительность жизни около 4 дней. Разрушение их происходит в селезёнке. Значительная часть их депонирована в селезёнке, печени, лёгких и в случае необходимости поступает в кровь.
Число тромбоцитов в крови около 180-400*10 9 /л. Состояние, при котором количество красных кровяных пластинок снижается ниже 180 10 9 /л, называется тромбоцитопенией, а при повышении их уровня более 400 10 9 /л – тромбоцитозом.
Основная функция тромбоцитов связана с их участием в свёртывании крови. При ранении кровеносных сосудов тромбоциты разрушаются. При этом из них выходит в плазму ряд веществ, необходимых для формирования кровяного сгустка – тромба. Как правило, образование тромба сопровождается сужением кровеносных сосудов. Этому способствует выделяющееся при разрушении кровяных пластинок особое сосудосуживающее вещество [25].
Подсчет тромбоцитов также ведется с применением камеры Горяева.
Исследуемую кровь разводят в 200 раз для предотвращения свертывания и агглютинации тромбоцитов в консервирующей жидкости, например в 5-7% растворе трилона Б Для этого в сухую пробирку набирают 4 мл реактива и 0,02 мл крови. Перемешивают и оставляют на 25-30 мин для гемолиза эритроцитов. Помещают счетную камеру во влажную камеру на 5 мин для оседания тромбоцитов. Тромбоциты считают в 25 больших квадратах.
Расчет тромбоцитов проводят по формуле:
Х =
= а*2000 (5);
где Х – число тромбоцитов в 1 мкл крови;
а – число тромбоцитов, сосчитанных в 25 больших квадратах,
200 – разведение крови,
25 – число сосчитанных квадратов,
250 – объем одного большого квадрата 1/250 мкл.
Число подсчитанных тромбоцитов умножают на 2000.
Помимо камеры Горяева подсчет тромбоцитов проводят в мазках крови (по Фонио).
Подсчет количества тромбоцитов проводят по отношению к 1 тысяче эритроцитов. Сосчитав 1 тысячу эритроцитов, суммируют общее количество встретившихся тромбоцитов [28, 29].
Развитие патологических изменений в организме влияет на показатели крови. Исследование крови имеет большое значение при оценке клинического состояния животного, важнейшим диагностическим методом. Кроветворные органы чрезвычайно чувствительны к различными физиологическим, и особенно патологическим воздействиям на организм. Картина крови является отражением этих воздействий. Состав и свойства крови зависят от физиологического состояния организма. По показателям крови можно судить о тяжести, направлении и атипичности патологического процесса [26, 27].
Основными индикаторами данных сбоев организма служат гематологические показатели, для определения и изучения которых проводят общий анализ крови.
Традиционные методы подсчета клеток крови (микроскопия) вследствие присущей им неточности, особенно в области низких и высоких значений концентрации клеток, имеют ограничения при использовании в качестве средства мониторирования. Вариабельность приготовления и окрашивания мазка крови, ограниченное количество анализируемых клеток и систематические ошибки самой методики – все это приводит в конечном итоге высоким значениям коэффициента вариации (от 25 до более чем 50%).
В настоящее время используются современные методы тестирования, реализованные в гематологическом оборудовании второго поколения. Полная автоматизация процесса анализа позволяет устранить вариабельность, систематические погрешности метода, способствует высокой воспроизводимости и точности результатов [30].
Общий анализ крови – лабораторное исследование, которое включает в себя подсчет всех видов клеток крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов), определение их параметров (размеры клеток и др.), лейкоцитарную формулу, измерение уровня гемоглобина, определение соотношения клеточной массы к плазме (гематокрит), степень оседания эритроцитов (СОЭ).
Именно по показателям результатов общего анализа крови можно судить об основных изменениях гематологических показателей при гельминтозах.
Так, С.А. Труновой при изучении гематологических показателей крови собак, зараженных гельминтами видов T. canis, T. leonine, E. granulosis, было отмечено увеличение числа лейкоцитов в 1,8-1,3 раза, палочкоядерных нейтрофилов в 2,3-2,6 раза, эозинофиолов в 2,1-3,1 раза, лимфоцитов на 16,3-18,1%. Число сегментоядерных нейтрофилов уменьшилось на 20%, концентрация гемоглобина снизилась на 22,4-29,9%, эритроцитов на 12,2%, в крови постоянно присутствовали юные нейтрофилы – 0,8-1,4% [31].
И.В. Колесников и О.В. Попов изучая морфологические показатели крови собак, спонтанно инвазированных микстиинвазиями T. canis, A. caninum, D. caninum обнаружили следующие изменения.
На 15, 30, 60 и 90 сутки наблюдений концентрация гемоглобина уменьшилась соответственно на 22,4-28,7-29,9-28,7%, эритроцитов – на 12,2-12,3-15,4-14,8%, число лейкоцитов увеличилось в 2-2,3-1,7-1,8 раза по сравнению с показателями у здоровых животных.
Характерные изменения отмечались в показателях лейкоцитарной формулы. Так, у больных собак увеличилось содержание палочкоядерных нейтрофилов (в 2,3-2,6 раза), эозинофилов (в 2,1-2,7-2,9-3,1 раза), лимфоцитов (на 16,3-17,4-18,1-17,1%), но уменьшилось число сегментоядерных нейтрофилов (на 20,0-23,6-23,8 и 22,9%). В крови больных всегда присутствовали юные нейтрофилы, их число колебалось в пределах 0,8±0,01 – 1,4±0,08% [32].
А.Н. Шинкаренко рассматривая вопрос экологии паразитов собак и мер борьбы с вызываемыми ими заболеваниями в Нижнем Поволжье, изменения гематологических показателей у больных описторхозом плотоядных регистрировал уже на 15 сутки инвазии. Значения гематологических показателей постепенно нарастали и достигли своего пика на 90 сутки инвазии. Так, количество эритроцитов у больных собак на 30 сутки инвазии было меньше показателей контрольных животных на 9,45% (P 9 /л при эозинофилии до 80-90% (лейкемоидная реакция).
В иммунограмме наблюдается снижение количества Т-лимфоцитов и повышение О- и В-лимфоцитов, повышение концентрации иммуноглобулинов всех классов (в острую фазу преобладает IgM) [18].
Также наблюдается снижение количества эритроцитов и концентрации гемоглобина в крови, а также ускорение непрерывно протекающего свертывания крови.
Описторхозом называют паразитарную болезнь, которая в первую очередь сопровождается поражением печени и желчевыводящих путей. Возбудителем является плоский паразит из класса сосальщики. Инфицирование происходит при употреблении рыбы, зараженной личинками. При подозрении на патологию сдают кровь на описторхоз. Лабораторное исследование проводится несколькими методиками, позволяющими точно узнать, болен человек или нет. Рассмотрим, когда нужно это исследование, как проводится, и о чем говорят результаты.
Когда нужен анализ крови на описторхоз?
Клиника болезни обусловлена особенностями жизненного цикла гельминта, количеством личинок, проникших в организм. Также частотой вторичных заражений, исходным состоянием иммунного статуса человека.
Многие люди воспринимают симптоматику паразитарного заболевания как следствие чрезмерной физической активности, простудных болезней, общего недомогания, расстройства пищеварения. Нередко бывает, что на приеме у медицинского специалиста выявляется, что человек проживает/проживал в очаге описторхоза либо потреблял сырую или плохо термически обработанную рыбу.
Анализ крови на описторхоз необходим в тех случаях, когда пациент жалуется на следующие симптомы:
- Постоянная вялость и слабость;
- Беспричинное увеличение температуры тела;
- Повышенное потоотделение;
- Частые респираторные и простудные заболевания;
- Кожные проблемы – жжение, зуд, высыпания и пр.;
- Болят суставы и мышцы;
- Головные боли;
- Непродуктивный кашель;
- Пожелтение кожного покрова;
- Болезненные ощущения в животе;
- Нарушение пищеварения и т.д.
При выявлении такой симптоматики рекомендуется пройти исследование. Своевременная диагностика позволяет предупредить многочисленные осложнения паразитарного заболевания. В частности, флегмону желчного пузыря, хронический гепатит, язвенные патологии желудка, острый панкреатит, рак печени и желчных протоков.
К сведению, врачи рекомендуют делать анализ раз в три месяца людям, чья деятельность связана с рыбной и сельскохозяйственной промышленностью.
Способы диагностики описторхоза
Общий анализ крови и биохимия обязательно осуществляют при подозрении на описторхоз. По крови больного можно подтвердить наличие паразитарного процесса, его локализацию, стадию развития, форму.
На фоне биохимического исследования крови обращают внимание на следующие показатели:
- Концентрация эозинофилов в биологической жидкости. Эозинофилы являются молодыми иммунными клетками. Если у человека все в порядке со здоровьем, то диагностируется не высокий уровень. Увеличенное содержание иммунных клеток косвенно свидетельствует о развитии воспалительных процессов.
- Концентрация свободного/связанного билирубина – вещество, являющееся продуктом распада гемоглобина, компонент желчи. Когда закупориваются желчные протоки гельминтами, билирубин в большом количестве поступает в биологическую жидкость.
- Активность ферментов – трансаминаз и щелочной фосфатазы. В нормальном состоянии они находятся в клетках печени. Гельминты приводят к тому, что их можно обнаружить в крови пациента.
Если говорить в целом, общий анализ крови помогает определить наличие патологического процесса в организме, а биологическое исследование материала выявляет степень поражения органов. Чтобы выявить чужеродные агенты требуется провести исследование на антитела.
Если подозревается острое течение патологии, то ИФА – наиболее достоверный способ диагностики. Когда заболевание трансформировалось в хроническую форму, его используют в качестве вспомогательного варианта.
Чувствительность ИФА на паразитов в острой форме приближается к 100%, а при хроническом течении эффективность исследования не выше 70%. Однако иммуноферментный анализ в ряде клинических картин способен привести к ложноположительному либо ложноотрицательному результату.
Важно: иммуноферментный анализ может дать ложноположительный результат, если в анамнезе специфические патологии дыхательной системы, нарушение функциональности желудочно-кишечного тракта, печени, желчного пузыря и его протоков, токсоплазмоз, токсокароз. Не исключается получение ложноотрицательного результата на фоне иммунодефицита, приема некоторых лекарственных препаратов – химиопрепараты, антибактериальные таблетки.
Полимеразная цепная реакция – информативный метод, позволяющий определить генетическую составляющую гельминтов, выявить конкретную разновидность паразитов. В качестве биологического материала могут использовать урину, кровь, слюну, каловые массы.
Отличие ПЦР от других методов исследования заключается в том, что полимеразная цепная реакция не только выявляет заражение, но и показывает количество гельминтов в организме человека. После забора крови результат готов в течение 24 часов. Противопоказания у процедуры отсутствуют.
Помимо ПЦР и ИФА медицинский специалист может рекомендовать другие методы исследования на наличие паразитов в организме. К ним относят:
- Анализ фекалий на наличие/отсутствие яиц кошачьей двуустки;
- Анализ мочи;
- Ультразвуковое исследование брюшной полости;
- Дуоденальное зондирование.
Посредством исследования кала в лабораторных условиях можно найти яйца гельминтов. Для точной диагностики фекалии берутся несколько раз, поскольку яйца выделяются нерегулярно. Этот же метод применяется после медикаментозного лечения, чтобы убедиться в эффективности терапевтического курса.
Стоит знать: ультразвуковое исследование внутрибрюшной полости позволяет визуализировать уплотнение стенок желчного пузыря, протоков, расслоение слизистых стенок печени, в которых находятся паразиты.
Дуоденальное зондирование – метод диагностики, в ходе которого в двенадцатиперстную кишку вводится раздражитель, чтобы активизировать сокращение желчного пузыря. Это приводит к тому, что желчь вытекает в 12-перстную кишку, откуда она берется для дальнейшего изучения.
Подготовка к исследованию
Чтобы результаты анализа крови на описторхоз показали верный результат перед исследованием необходимо осуществить подготовительные мероприятия. Медицинские специалисты рекомендуют пациентам придерживаться следующих правил перед сдачей крови:
- Забор биологической жидкости осуществляется только на голодный желудок. Период голодания не менее восьми часов;
- За 48 часов до исследования требуется отказаться от употребления спиртных напитков;
- За 10-12 часов исключают физические нагрузки;
- За одну неделю до забора крови отказаться от применения медикаментозных препаратов; если это сделать невозможно, информировать врача с перечнем принимаемых лекарственных средств.
Диагностика другими методами – сдача кала, урины и пр., также требует определенной подготовки для исключения ложных результатов. Перед забором урины проводится тщательный туалет половых органов. Женщинам рекомендуется ввести гигиенический тампон во влагалище.
Забор каловых масс нельзя осуществлять после клизменных процедур, применения слабительных препаратов и пр. Их собирают при последнем акте опорожнения кишечника, соблюдая все правила хранения, доставляют в лабораторию.
За два-три дня до исследования рекомендуется отказаться от продуктов питания, которые провоцируют повышенное газообразование и вздутие живота. К ним относят бобы, фасоль, газированные напитки, свекла, капуста и пр.
По статистике ложные результаты обнаруживаются у 2% пациентов, которые ранее не более описторхозом.
Расшифровка анализов
Расшифровка анализа крови на описторхоз имеет определенные сложности. Например, если иммуноферментный анализ показывает положительный результат, но исследование каловых масс не обнаружило яиц, то трактовать итог можно по-разному:
- Гельминты есть, но их небольшое количество;
- Паразиты присутствуют, однако не размножаются;
- Самостоятельное излечение;
- Лабораторная ошибка.
Иногда бывает наоборот, ИФА покажет, что результат отрицательный, инфицирование отсутствует, но у пациента имеются характерные признаки заражения. Тогда для уточнения обязательно проводится исследование кала.
К сведению, при наличии IgM в крови говорят об остром течении описторхоза; при обнаружении IgG о хроническом процессе.
Диагноз ставится по результатам нескольких методов. При заражении концентрация эозинофилов свыше 90%, лейкоциты > 10 x10^9, СОЭ выше допустимых границ, уровень гемоглобина меньше ста, лимфоциты – выше референтных значений.
При выявлении заражения назначают медикаментозное лечение. Оно включает в себя противопаразитарные лекарства, антигистаминные средства, гепатопротекторы для улучшения функциональности печени, энтеросорбенты для нормализации деятельности ЖКТ. При своевременной и адекватной терапии описторхоз успешно лечится, не приводит к развитию осложнений.
Что такое моноциты и как они образуются
Стадии развития моноцита
Моноциты — это крупные и довольно красивые клетки, имеющие неправильную форму. Они как грозовые облака — пухлые, сероватые, с хорошо очерченным, но рыхлым по структуре единственным ядром. Иногда ядро может принимать довольно причудливые формы (грецкого ореха, бабочки, гриба, подковы и др.), но в норме оно похоже на боб. Расположено чаще всего не по центру и занимает половину или бо́льшую часть ядра.
Образуются моноциты в костном мозге из клеток промоноцитов. В кровоток они приходят незрелыми, циркулируют там 12 — 32 часа и затем часть из них погибает, а часть выходит в ткани. Чаще всего это лимфатические узлы, печень, лёгкие, селезёнка. В тканях они дозревают окончательно, увеличиваются в размерах, иногда сливаются друг с другом, образуя гигантские формы. Там они живут ещё до 30 суток. Способны передвигаться к очагу воспаления или внедрения чужеродных объектов. Синтезируют и секретируют различные активные вещества.
Роль моноцитов в организме
Макрофаг поглощает бактерии
По своей природе моноциты относятся к фагоцитам (способны поглощать и переваривать).
- Они способны уничтожать чужеродные микроорганизмы, вирусы, старые, завершившие свою функцию, либо патологически изменённые, опухолевые клетки, фибриновые микросгустки, частички денатурированного белка и прочие артефакты.
- Участвуют в формировании иммунитета, противоопухолевой защите организма, в аллергических реакциях.
- Способствуют восстановлению тканей, выделяя активные вещества, участвующие в биохимических процессах регенерации.
- Участвуют в свёртывании крови.
- Синтезируют и секретируют различные активные вещества.
Определение уровня моноцитов в крови
Уровень моноцитов определяется с помощью общего анализа
Чтобы определить количество моноцитов, необходимо сдать кровь на общий анализ крови либо отдельно на лейкоцитарную формулу. Для этого можно брать венозную или периферическую кровь. Забор анализа производится с утра натощак. Накануне анализа не рекомендуется есть жирную пищу и принимать алкоголь.
Общий анализ крови производится на гематологическом анализаторе. Если количество моноцитов, их размер и строение нормальные, машина выдаст достоверный результат в процентах и абсолютное число моноцитов в 1 л крови. Если есть какие-то отклонения от нормы, будет стоять флажок и потребуется подсчёт глазами под микроскопом.
Из крови готовится мазок на стекле, который фиксируется и окрашивается специальным способом. После окраски стекло помещается под микроскоп. При окраске по Романовскому-Гимзе моноцит имеет окрашенную в светлый серовато-голубой цвет цитоплазму и яркое, малиново-красное, ядро. В мазке моноциты значительно крупнее других элементов, хотя в капле крови они немногим крупнее других. Это связано с тем, что при изготовлении мазка моноциты более подвержены раздавливанию и распластыванию на стекле. Подсчитывается 200 лейкоцитов и процентное соотношение каждого вида. Если имеются атипичные формы ядра, это тоже обязательно указывается.
Норма моноцитов в крови у взрослых
Нормальными референтными значениями принято считать от 3 до 9%. В некоторых источниках указывается — до 11%. Или 0,08 — 0,6 х 10 9 /л — в абсолютных числах.
Причины увеличения моноцитов в крови
Гельминтоз как причина повышенных моноцитов
Моноцитоз бывает абсолютным, когда увеличивается именно количество клеток, и относительным, когда увеличение процентного соотношения идёт за счёт одновременного снижения количества других форм лейкоцитов.
Увеличение моноцитов в крови наблюдается при следующих заболеваниях:
- острые респираторные и другие вирусные заболевания;
- гельминтозные поражения организма (при энтеробиозе, тениозе, тениаринхозе, аскаридозе, описторхозе, фасциолёзе и т.п.);
- патологии крови — миеломная болезнь, острый миеломоноцитарный и моноцитарный лейкоз, миелобластный и монобластный лейкоз;
- злокачественные новообразования;
- отравления химическими веществами;
- аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, сахарный диабет первого типа, ревматоидный артрит, Базедова болезнь и другие);
- гранулематозные заболевания, такие как сифилис, туберкулёз, саркоидоз, бруцеллёз, энтерит и другие;
- цитомегаловирусная инфекция;
- такие заболевания, как корь, краснуха, коклюш, если человек не переболел ими в детстве;
- инфекционный мононуклеоз также характерен для детей, но изредка диагностируется и у взрослых.
У женщин во время беременности беременности и в первые дни месячных также можно наблюдать незначительное повышение моноцитов.
Причины снижения моноцитов в крови
Прием гормональных препаратов может вызывать моноцитопению
Моноцитопения, или снижение процентного сегмента моноцитов в крови ниже 1 встречается реже и наблюдается при следующих патологических состояниях:
- апластическая анемия;
- поздние стадии лейкозов;
- кожные инфекции (фурункулы, карбункулы и прочие);
- пневмония бактериального происхождения;
- сепсис;
- остеомиелит;
- острые инфекционные заболевания;
- приём цитостатиков и кортикостероидов.
При беременности и родах количество моноцитов также снижается.
Читайте также: