Иммуноферментный анализ крови на паразитов хеликс
Вторжение паразитов в организм (инвазия) вызывает ряд болезней под общим названием паразитоз. В большинстве случаев заболевания характеризуются острой симптоматикой, обусловленной двумя факторами: механическими повреждениями слизистой ткани органов пищеварения, причиняемыми паразитами, и отравлением организма ядовитыми отходами их жизнедеятельности. Анализ крови на паразитов позволяет диагностировать разновидности паразитоза, и выбрать оптимальную тактику лечения.
Основные понятия о паразитах
Паразитами являются патогенные микроорганизмы, обеспечивающие собственную жизнеспособность за счет поглощения питательных веществ из организма другого биологического вида. Протозойные инфекции у человека провоцируют два основных типа паразитов:
- простейшие или одноклеточные;
- гельминты или глисты (нематоды, цистоды, трематоды).
Способы проникновение патогенов в человеческий организм:
- бытовой – через инфицированные предметы быта, гигиены, гаджеты и т. д.;
- фекально-оральный – при несоблюдении правил гигиены рук;
- алиментарный (иначе пищевой) – вместе с зараженными продуктами, грязной водой;
- контактный – заражение от носителей паразитов (людей, птиц и животных)
- перекутанный – через слизистые и кожные поры;
- трансмиссионый – через кровь (в том числе внутриутробный, от матери – к ребенку).
В некоторых случаях фиксируется воздушно-капельное заражение. Гельминты отличаются высокой выживаемостью, которую обеспечивают:
- адаптационные способности;
- повышенная плодовитость;
- длинный цикл жизни;
- производство антиферментных веществ;
- устойчивости к внешнему воздействию (яйца гельминтов могут сохраняться долгое время).
Кроме того, некоторые виды глистов способны мутировать, то есть обманывать иммунную систему человека, вырабатывающую антитела к паразитам. Основной причиной заражения протозойными инфекциями является несоблюдение санитарно-гигиенических норм и правил индивидуальной гигиены.
Показания к проведению анализа
Анализ крови на гельминты, прежде всего, назначается по симптоматическим жалобам пациента:
- интенсивное опорожнение кишечника (диарея);
- рефлекторный выброс содержимого желудка (рвота);
- снижение массы тела без изменения рациона;
- болезненное пищеварение (диспепсия);
- субфебрильная (37–38°С) и фебрильная (38–39°С) температура тела;
- метеоризм и отрыжка;
- боли в области брюшной полости;
- полифагия (повышенный аппетит);
- аллергические кожные проявления;
- гипоактивность на фоне нестабильного психоэмоционального состояния.
Исследование входит в список анализов, результаты которых необходимо представить при поступлении ребенка в школу и дошкольное воспитательное учреждение. Анализ на глисты в обязательном порядке сдают:
- медицинский персонал;
- воспитатели и нянечки детсадов;
- работники предприятий торговли и общественного питания;
- животноводы.
Проверка на гельминтоз проводится у детей при эпидемических вспышках паразитоза в детских садах, образовательных учреждениях.
Врач может назначить исследование на возможное заражение паразитами по результатам общего клинического анализа (ОКА) крови, в котором показатели эозинофилов и лейкоцитов значительно превышают установленные нормы.
Гельминтоз чаще фиксируется у детей, чем у взрослых, поэтому в профилактических целях рекомендуется исследовать кровь на наличие паразитов у ребенка после летнего отдыха.
Разновидности исследования крови
Для диагностики гельминтоза используются следующие методы лабораторной микроскопии крови:
- ИФА;
- ПЦР;
- РИФ;
- вегетативный резонансный тест (метод Фолля).
Антитела, иначе иммуноглобулины (Ig) представляют собой специфические соединения белков, предназначенных для дифференциации антигена, и его эрадикации (уничтожения). Антигенами являются чужеродные микроорганизмы, вызывающие заболевания. При внедрении в организм чужеродного агента начинается активное производство иммуноглобулинов.
В случае диагностики протозойной инфекции, антигенами выступают гельминты или одноклеточные паразиты. Иммуноферментный анализ – это двухэтапное исследования поведения антител, относительно антигенов. Первично чужеродный микроорганизм (лабораторный экземпляр) помещается на исследовательскую поверхность, и к нему добавляется биологический материал пациента (кровь).
На данном этапе идентифицируются иммуноглобулины, задействованные в реакции, позволяющие выявить возбудителя инфекции. И также оценивается интенсивность их выработки, и скорость образования иммунных комплексов. На втором этапе к образованному комплексу присоединяют специальный фермент, и наблюдают за ферментной реакцией изменения окраски.
Реакция оценивается посредством колориметра (анализатора) ИФА, который показывает интенсивность окрашивания. Чем ярче, тем более насыщенная концентрация паразитов фиксируется в организме. В ходе исследования определяются три основных иммуноглобулина (IgA, IgM, IgG), и два дополнительных (IgD и IgE).
Расшифровка анализа на антитела к гельминтам проводится по трем критериям:
По трем основным иммуноглобулинам итоговые показатели ИФА могут иметь следующую интерпретацию:
Антитела | Диагноз | ||
IgM | IgG | IgA | |
- | - | - | отрицательный результат (отсутствие антител) |
- | + | - | наличие иммунитета после перенесенной инфекции |
+ | +/- | +/- | острый паразитоз |
+ | + | + | обострение хронического паразитоза |
- | +/- | +/- | хронический паразитоз в латентной форме |
- | выздоровление |
Иммуноглобулины появляются в крови с разным временным интервалом, относительно времени проникновения паразитов в организм. Первым на протозойную инфекцию реагирует IgM, его присутствие можно обнаружить на седьмой день с момента заражения. Данный вид антител сохраняется в крови около 60 дней.
IgA появляется на 14–28 сутки. После курса противогельминтной терапии сохраняется на протяжении месяца. Повторное выявление IgA указывает на хронический паразитоз. IgG анализ покажет не раньше, чем через месяц с момента инвазии. Антитела сохраняются в организме около шести месяцев.
ИФА обладает высокой точностью диагностики, является доступным и достаточно комфортным для пациента. Микроскопию проводят для выявления одной или нескольких инфекций. К недостаткам исследования можно отнести высокую стоимость комплексного (на все виды паразитов) анализа.
С помощью иммуноферментного анализа можно определить значительное количество паразитарных инвазий. В таблице приведены названия основных протозойных инфекций, их возбудителей, и области локации в организме.
Паразит | Заболевание | Локализация |
эхинококк | эхинококкоз | печень, легкие |
печеночные сосальщики | описторхоз | органы гепатобилиарной системы |
печеночная или гигантская двуустка | фасциолез | желчный пузырь, печень, желчные протоки |
лейшмании | лейшманиоз | легкие, печень, кожные покровы, селезенка |
аскариды | аскаридоз | кишечник, поджелудочная железа, печень |
трихинеллы | трихинеллез | кишечник, мышцы |
лямблии | лямблиоз | кишечник, печень желчный пузырь |
свиной цепень | тениоз | тонкий кишечник |
токсокара | токсокароз | сердце, легкие, головной мозг, мышцы, гепатобилиарная система, органы зрения |
Анализ на антитела к гельминтам сдается поле предварительной подготовки. Чтобы получить объективные результаты, пациенту необходимо соблюдать следующие условия:
- за три дня до забора крови устранить из рациона жирную пищу, острые и соленые блюда, спиртные напитки, сладкие продукты, кофе и газировку.
- за 2–3 дня исключить прием лекарственных препаратов (в случае жизненно необходимых медикаментов, об их применении нужно уведомить врача);
- накануне процедуры ограничить спортивные тренировки, и иные физические нагрузки;
- соблюдать режим голодания 8–12 часов перед анализом (сдавать кровь следует только натощак);
- минимум за час до процедуры отказаться от никотина (не курить).
За сутки до исследования и в день забора крови нельзя проходить рентгенологическое и флюорографическое обследование, посещать сеансы физиотерапии. Пренебрежение условиями подготовки приводит к получению малоинформативных и неточных результатов микроскопии крови на наличие паразитов.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – диагностическая методика, позволяющая обнаружить паразита, и определить его генную структуру. Основу исследования составляет многоступенчатое копирование фрагмента РНК (амплификация). Кровь помещается в специализированный реактор (амплификатор), где под действие температуры происходит расщепление ДНК и РНК.
Для выявления нужных участков ДНК и РНК добавляют специальные реагенты, присоединение которых к молекуле ДНК и РНК позволяет достроить копию антигена. В ходе исследования формируются множественные копии генетической структуры паразита, что определяет его наличие и разновидность.
Реакция иммунофлюоресценции для определения гельминтозов является экспресс-методом диагностики. РИФ базируется на образовании и оценке иммунных комплексов, сформированных иммуноглобулинами крови пациента и лабораторными антигенами, обработанными флюорохромами.
Под воздействием ультрафиолетовых лучей образованные комплексы начинают светиться, что позволяет легко их обнаружить под люминесцентным микроскопом. Недостатком метода является его способность точно диагностировать заболевание только при большом скоплении гельминтов. Подготовительные мероприятия схожи с иммуноферментным анализом.
Метод Фолля является альтернативной электропунктурной диагностикой, и в обычных клиниках, практически, не применяется. Для определения патологии используются результаты измерения электрического сопротивления кожи на пальцах верхних и нижних конечностей. Достоверность информации в результатах может быть сомнительной.
Какой анализ крови назначит врач, зависит от возможностей лаборатории или финансовой состоятельности пациента. Сдать кровь на паразитарные инфекции можно в диагностических центрах Хеликс, Инвитро, Ситилаб, расположенных в Москве и других крупных городах, а также в областных и краевых больницах. Итоги исследования выдаются пациенту на руки либо высылаются на электронную почту.
В случае получения неудовлетворительных результатов, необходимо обратиться к врачу-паразитологу, который подберет индивидуальную схему лечения, и дозировку противопротозойных препаратов. После курсовой противопаразитарной терапии иммуноферментный анализ на глисты и простейшие необходимо повторить.
Итоги
Паразиты – простейшие одноклеточные микроорганизмы и гельминты, проникают в человеческий организм, и вызывают острые и хронические протозойные заболевания. Инфицирование может происходить через немытые руки, зараженные продукты, предметы быта и гигиены, от человека – к человеку.
Факторами, провоцирующими возникновение паразитарных инфекции, являются пренебрежение санитарно-гигиеническими нормами в питании и несоблюдение правил личной гигиены. При паразитах, обосновавшихся в организме, может развиваться тяжелая интоксикация с характерной симптоматикой (диарея, рвота, гипертермия, кишечные боли, сыпь и т. п.).
Качественное лечение протозойных инфекций обеспечивает своевременная диагностика. Основной метод исследования крови на наличие паразитов – иммуноферментный анализ (ИФА). С его помощью определяются качественно-количественные характеристики присутствия в организме гельминтов и простейших.
Определение специфических антител к гельминтам Opistorchis, Toxocara, Trichinella и Echinococcus, используемое для скрининга паразитических заболеваний человека.
Скрининговое обследование на возбудителей описторхоза, токсокароза, трихинеллеза и эхинококкоза.
Синонимы английские
Gastrointestinal parasites screening test;
Screening for Opisthorchiasis, Toxocariasis, Trichinosis, and Echinococcosis.
Иммуноферментный анализ (ИФА)
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Opistorchis, Toxocara, Trichinella и Echinococcus – это паразитические черви, являющиеся возбудителями гельминтозов. Описторхоз возникает при попадании в организм плоских червей рода Opistorchis при употреблении зараженной речной рыбы. При этом заболевании преимущественно поражаются желчевыводящие пути и протоки поджелудочной железы. Возбудителями токсокароза являются круглые черви рода Toxocara. При токсокарозе могут вовлекаться самые разнообразные органы, в том числе легкие, глаза, головной мозг и кишечник. Трихинеллез возникает при употреблении мяса, содержащего цисты круглых червей рода Trichinella, и протекает с преимущественным поражением скелетной мускулатуры. Возбудителями эхинококкоза являются ленточные черви Echinococcus granulosus. При этом заболевании может поражаться практически любой орган, в том числе головной мозг, костная ткань, печень, глаза. В этой группе гельминтозов наиболее часто в России встречается описторхоз.
Несмотря на наличие особенностей течения разных гельминтозов, дифференциальная диагностика этой группы заболеваний не может быть осуществлена на основании клинической картины. Кроме того, часто гельминтозы протекают в стертой форме или бессимптомно. Поэтому в основе скрининга гельминтозов лежит лабораторное обследование. Скринингу этой группы гельминтозов подлежат пациенты с наличием в анамнезе указаний на употребление в пищу сырой речной рыбы (описторхоз), сырого мяса (трихинеллёз), а также контактирующие по роду деятельности с зараженными животными, почвой и водой (ветеринары, работники коммунальных служб, садоводы – токсокароз и эхинококкоз). Для идентификации возбудителей используют разные методы, в том числе микроскопический анализ кала на наличие яиц паразитов, микроскопический анализ аспирата дуоденального содержимого и мокроты на наличие личиночных форм, методы молекулярной диагностики, а также серологические тесты. Одним из наиболее точных методов диагностики гельминтозов является иммуноферментный анализ (ИФА), позволяющий определять специфические антитела к разным возбудителям.
Метод ИФА имеет несколько преимуществ по сравнению с анализом кала. С помощью анализа кала паразитов удается выявить только при достаточном их количестве. Напротив, если инфекция носит ограниченный характер, можно получить ложноотрицательный результат. С другой стороны, если гельминтоз протекает тяжело и сопровождается поражением и обструкцией желчевыводящих путей, яйца или личинки паразита могут вовсе не попадать в кишечник и поэтому не определяться в кале. Метод ИФА основан на определении в крови специфических антител к паразитам, что обуславливает его более высокую по сравнению с микроскопией кала чувствительность, которая составляет 91-92 %.
Следует отметить некоторые ограничения метода ИФА. Так, положительный результат исследования не позволяет дифференцировать текущую инфекцию и инфекцию в прошлом. По этой причине исследование не предназначено для оценки эффективности проведенного лечения. Также исследование не позволяет уточнить локализацию процесса. Результат исследования антител к эхинококку будет положительным как при изолированном поражении печени, так и при диссеминированном эхинококкозе. Следует помнить, что титр антител не всегда отражает объем поражения.
Специфичность исследования несколько уступает его чувствительности. Из-за наличия сходств в антигенной структуре этих и других гельминтов иногда могут наблюдаться ложноположительные реакции. По этой причине интерпретацию результата следует производить с учетом дополнительных клинических и лабораторных данных, в том числе результата микроскопии кала.
Так как в исследовании определяют уровень антител, результат анализа в значительной степени зависит от состояния иммунной системы организма. При наличии у пациента иммуносупрессии (ВИЧ-инфекция, прием глюкокортикоидов и других иммуносупрессантов, старческий возраст) возможен ложноотрицательный результат. Следует помнить, что иммуноглобулины класса IgG могут быть определены через 2-4 недели от начала инфекции.
Для этой группы гельминтозов характерна эозинофилия, типичная для всех инвазивных гельминтозов. Также при длительно текущей инфекции могут наблюдаться нарушения показателей общеклинических тестов (признаки мальабсорбции, анемия), поэтому при обследовании пациента с подозрением на гельминтозы из этой группы проводят дополнительные лабораторные тесты.
Для чего используется исследование?
- Для скрининга описторхоза, токсокароза, трихинеллёза и эхинококкоза.
Когда назначается исследование?
- При обследовании пациентов с указанием на употребление в пищу сырой речной рыбы (описторхоз), сырого мяса (трихинеллёз), а также контактирующих по роду деятельности с зараженными животными, почвой и водой (ветеринары, работники коммунальных служб, садоводы – токсокароз и эхинококкоз);
- при оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации;
- при устройстве на работу декретированных групп населения.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
- описторхоз, токсокароз, трихинеллёз или эхинококкоз, текущая инфекция;
- описторхоз, токсокароз, трихинеллёз или эхинококкоз, инфекция в анамнезе;
- ложноположительный результат (другие гельминтозы).
Что может влиять на результат?
- Состояние иммунной системы организма;
- время, прошедшее с момента заражения.
- Результат анализа следует оценивать вместе с данными дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных исследований;
- исследование не позволяет дифференцировать текущую инфекцию и гельминтоз в анамнезе и не предназначено для оценки эффективности лечения;
- исследование не позволяет определить локализацию и объем поражения.
2 Общий анализ крови
8 Анализ кала на цисты простейших
61 Аскаридозы, ДНК [ПЦР] (кал, мокрота)
83 Ascaris lumbricoides, IgG, титр
10 Anisakis, IgG
15 Гистологическое исследование биоптатов органов и тканей (за исключением печени, почек, предстательной железы, лимфатических узлов)
Кто назначает исследование?
Инфекционист, врач общей практики, педиатр.
Комплексное лабораторное обследование для выявления основных гельминтозов и протозойных инфекций человека, включающее общеклинические и специфические тесты.
Подробное описание анализа в Базе медицинских знаний Хеликс
Цена услуги | 6190 руб. * Скачать пример результата Заказать |
Услуги по взятию (сбору) биоматериала |
|
Срок выполнения | до 5 суток |
В комплекс входят |
|
Синонимы (rus) | Анализы для диагностики гельминтозов и протозойных инфекций |
Синонимы (eng) | Cellulose tape test, Protozoal and Helminthic Serology, CBC, Stool Ova and Parasites test, Laboratory diagnosis of protozoal and helminthic infections |
Подготовка к исследованию |
|
Тип биоматериала и способы взятия |
На дому: возможно взятие биоматериала сотрудником мобильной службы. В Диагностическом центре: взятие, либо самостоятельный сбор биоматериала осуществляется в Диагностическом центре. Самостоятельно: сбор биоматериала осуществляется самим пациентом (моча, кал, мокрота и т.п.). Другой вариант – образцы биоматериала предоставляет пациенту врач (например, операционный материал, ликвор, биоптаты и т.п.). После получения образцов пациент может как самостоятельно доставить их в Диагностический центр, так и вызвать мобильную службу на дом для передачи их в лабораторию. * Цена указана без учёта стоимости взятия биоматериала. Услуги по взятию биоматериала добавляются в предварительный заказ автоматически. При единовременном заказе нескольких услуг услуга по сбору биоматериала оплачивается только один раз. Диагностика – первый и важный этап медицинской помощи, от успешности которого зависит эффективность назначаемой терапии при любом заболевании. Это утверждение справедливо и для паразитарных болезней, большинство из которых не вызывают специфических симптомов, поэтому поиски причин полностью сводятся к назначаемым анализам. Из самых современных и высокоинформативных следует выделить иммуноферментный анализ. Он даёт представление не только о наличии антител к определённому виду паразитов, но выявляет количественную характеристику этих антител, которая даёт информацию о стадии заболевания или о ходе лечения. Преимущества и недостаткиИммуноферментный анализ крови (ИФА) на паразитов произвёл настоящую революцию в лабораторной аналитике паразитологии, на что есть целый ряд причин:
У метода есть и определённые недостатки:
Иммуноферментный анализ крови на паразитов выполняют только по направлению от специалиста, в котором указано, на какой тип гельминтов или группу необходимо проверить пациента. Без направления пробу крови в лаборатории попросту не возьмут. Принцип действияОсновной принцип заключается в образовании комплекса антигенов с антителами. Процесс зависит от двух составляющих:
Такой подход обеспечивает очень высокую результативность – около 99,97%. Биоматериал для анализаДля проведения иммуноферментного анализа на паразитов у пациента берут пробу венозной крови в объёме 3-5 см 3 . Дальше в лаборатории все форменные элементы (эритроциты, гемоглобин и пр.) отделяют, а для теста оставляют только сыворотку желтоватого цвета, в которой содержатся необходимые антигены. Биоматериал отбирают из локтевой вены. Чтобы избежать ложных результатов, кровь сдаётся натощак. За две недели до анализа для достоверности результатов нужно отказаться от любых антибиотиков и алкоголя. Также просят перед исследованием не пить газированную воду. В тех случаях, когда исследование проводят для новорожденных детей, биоматериалом может быть плацента или пуповинная кровь. Как проводитсяКровь помещают в стерильную лабораторную пробирку. К имеющемуся образцу добавляют лабораторные заготовки с антителами к тем паразитам, которые пытаются определить у пациента. На образование комплекса уходит несколько суток. В сложных случаях, когда для начала лечения нужны срочные данные, применяют лабораторные методы катализа процесса для ускорения реакции. Цена таких методик ещё выше, но они немного уступают классическим в точности. Зато эти экспресс-методики позволяют получить ответ уже через 2-3 часа после отбора биологического материала. Расшифровка полученных данныхЗаниматься интерпретацией результатов ИФА может только специалист, направивший пациента на тестирование. Иногда для того, чтобы получить реальную картину, необходим сравнительный анализ свежих данных с теми, которые были получены раньше. Иммуноферментная методика предоставляет данные о трёх типах иммуноглобулинов (антител):
Адекватно оценить все эти показатели, их взаимодействие и реальную картину может далеко не каждый врач, а только высококвалифицированный специалист. Поэтому категория врача в этом отношении играет не меньшую роль, чем уровень лаборатории, где проводят исследования. Результаты пациенту предоставляют на стандартном бланке лаборатории в виде таблицы, в которой перечислены все антитела, а напротив них указаны плюсы (в случае обнаружения) или минусы (если элементы не выявлены). Также указываются данные в количественном выражении, свидетельствующие о концентрации найденных веществ в условных единицах. СтоимостьИммуноферментный анализ входит в категорию дорогостоящих, но его цена отличается в зависимости от региона и уровня лаборатории. Читайте также:
|