Наборы для ифа трихинеллез

Верховский О.А., Цибезов В.В., Баландина М.В.
АНО "Научно-исследовательский институт диагностики и
профилактики болезней человека и животных", г. Москва
Шевкопляс В.Н. МГАВМиБ им. К.И.Скрябина, г. Москва
Алипер Т.И. НПО "НАРВАК", г. Москва
Черных О.Ю. Кропоткинская краевая ветеринарная
лаборатория, г. Кропоткин

Трихинеллез - зоонозная болезнь, которой подвержены различные виды млекопитающих, птиц и амфибий, представляет значительную угрозу сельскохозяйственным животным, главным образом - свиньям и человеку. Трихинеллез относят к природно-очаговым заболеваниям, так как основными носителями и источниками трихинелл являются дикие животные (медведь, барсук, кабан). Свиньи заражаются трихинеллезом при поедании термически необработанных отбросов и остатков пищи, а также от крыс, зараженных трихинеллами. В свою очередь, продукты переработки свинины в стационарных очагах трихинеллеза являются источником заражения человека, синантропных и диких животных. Поэтому инвазия в таких очагах может поддерживаться длительное время [1]. Человек может заразиться трихинеллезом после употребления в пищу сырой, плохо проваренной или прожаренной свинины, в основном в тех местах, где нет надлежащего ветеринарно-санитарного контроля. У человека трихинеллез дает осложнения на дыхательные пути, центральную нервную и сердечно-сосудистую системы. При очень тяжелом течении развиваются иммунопатологические реакции, приводящие к диффузно-очаговому миокардиту, пневмонии, менингоэнцефалиту и в отдельных случаях к летальному исходу.

Возбудителем трихинеллеза свиней в подавляющем большинстве случаев является нематода Trichinella spiralis из семейства Trichinellidae , паразитирующая как у сельскохозяйственных (лошади, свиньи), так и у контактирующих с ними (собаки, крысы, кошки) животных. Половозрелая форма нематод локализуется в тонком отделе кишечника, личинка паразитирует у тех же животных в поперечно-полосатой мускулатуре. Помимо Trichinella spiralis к видам, имеющим наибольшее значение в Европе, относятся: Trichinella britovi , в основном паразитирующая у диких животных, Trichinella pseudospiralis , встречающаяся повсеместно, в том числе у птиц, и Trichinella native , встречающаяся чаще всего у плотоядных.

Диагностика трихинеллеза животных осуществляется по стандартам Всемирной организации здоровья животных (OIE) и "Методическим указаниям по лабораторной диагностике трихинеллеза животных", согласно которым послеубойную диагностику проводят с использованием микроскопического метода (прямое обнаружение личинок нематод в мышцах), прижизненную - методом иммуноферментного анализа (ИФА) [2, 14]. При этом ИФА, относящийся к непрямым методам диагностики, имеет большое значение для выявления специфических антител, вырабатываемых иммунной системой инфицированного животного или человека, и широко используется за рубежом для эпидемиологического мониторинга трихинеллеза и подтверждения благополучия стад, а также в национальных референтных лабораториях по трихинеллезу [4, 7, 8]. Чувствительность и специфичность метода достигает 95 - 100%, однако, наличие неспецифических реакций, наблюдаемое в 2-3% случаев, не позволяет OIE рекомендовать ИФА в качестве единственного метода исследования индивидуального животного (свиней, лошадей и др.) с целью подтверждения биологической безопасности мясной продукции [14]. В нашей стране, несмотря на утвержденные "Методические указания. " и наличие на ветеринарном рынке коммерчески доступных ИФА-наборов, метод практически не применяется.

Целью настоящей работы являлась оценка эффективности ИФА, предназначенного для выявления антител к трихинеллам в сыворотке крови и мясном соке свиней, с целью прижизненной диагностики трихинеллеза свиней.

Материалы и методы исследования. Исследования проводили на базе ГБУ КК "Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория" (г. Кропоткин, Краснодарский край) в течение 2009 - 2012 годов. В качестве испытуемого набора был использован "Набор для выявления антител к возбудителям трихинеллеза (Trichinella spp.) в сыворотке крови и мясном соке свиней иммунноферментным методом" - "Трихинелла-Серотест" (разработчики АНО "НИИ ДПБ", г. Москва, Россия и фирма PRIONICS, Швейцария). Данный набор изготовлен в формате непрямого твердофазного ИФА с использованием белкового комплекса антигенов E/S, абсорбированного в лунках микропанелей. В качестве испытуемого биологического материала были использованы пробы сыворотки крови и мясного сока, полученные от домашних и диких свиней из семи районов Краснодарского края. Постановку ИФА, учет и интерпретацию полученных результатов осуществляли по разработанной методике. Дифференциацию положительных и отрицательных проб проводили по коэффициенту позитивности, определяемому как процентное отношение оптической плотности при 450 нм (А450) испытуемой пробы к оптической плотности положительного контроля.

Все исследования методом ИФА, направленные на выявление антител, сопровождались послеубойной микроскопией по обнаружению личинок трихинелл в мясе.

Результаты и обсуждение. Известно, что специфичность ИФА напрямую связана с типом и количеством антигена трихинелл, используемого для адсорбции [14]. Американскими учеными в 1988 г. был разработан метод выделения экскреторно-секреторных антигенов (E/S) из личинок трихинелл в первые 24 часа после культивирования in vitro [5]. В более поздних работах было показано, что эти антигены представляют собой смесь иммуно-доминантных секреторных гли-копротеидов, и их следует получать из личинок T. spiralis в течение 18-20 ч после культивирования [9, 14]. Данный принцип получения и применения E/S антигена лежит в основе не только набора "Трихинелла-Серотест", но и большинства аналогичных тест-систем, в том числе и прототипного набора PrioCHECK Trichinella Ab (Prionics), обладающего 100%-ной специфичностью, 98%-ной чувствительностью и использующегося в Европе для подтверждения эпидемиологического благополучия стад по трихинеллезу. Показано, что с помощью данного набора можно выявлять антитела у животных при наличии одной личинки/100 г мышц, что соответствует рекомендациям OIE [4].

Диагностическая чувствительность и специфичность набора "Трихинелла-Серотест" была определена при исследовании цельной крови и сывороток крови клинически здоровых и инфицированных свиней, а также подозрительных по заболеванию животных. После убоя туши всех тестированных в ИФА животных микроскопически исследовали на наличие личинок трихинелл в мясе, после чего сопоставляли полученные результаты двух методов (табл. 1).

Таблица 1. Сравнительные результаты ИФА и микроскопического метода при диагностических исследованиях домашних свиней на трихинеллез (n=347)

Новые наборы для экспресс-диагностики геморрагической лихорадки с почечным синдромом Ханта-IgМ-экспресс-БЕСТ и Ханта-IgG-экспресс-БЕСТ more

ID] => 2361 [TIMESTAMP_X] => 18.06.2019 09:49:14 [

TIMESTAMP_X] => 18.06.2019 09:49:14 [MODIFIED_BY] => 9321 [

MODIFIED_BY] => 9321 [DATE_CREATE] => 18.06.2019 09:49:14 [

DATE_CREATE] => 18.06.2019 09:49:14 [CREATED_BY] => 9321 [

CREATED_BY] => 9321 [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [

IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [SORT] => 4600 [

SORT] => 4600 [NAME] => Трихинеллез [

NAME] => Трихинеллез [PICTURE] => [

PICTURE] => [LEFT_MARGIN] => 89 [

LEFT_MARGIN] => 89 [RIGHT_MARGIN] => 90 [

RIGHT_MARGIN] => 90 [DEPTH_LEVEL] => 3 [

DEPTH_LEVEL] => 3 [DESCRIPTION] => [

DESCRIPTION] => [DESCRIPTION_TYPE] => text [

DESCRIPTION_TYPE] => text [SEARCHABLE_CONTENT] => ТРИХИНЕЛЛЕЗ [

SEARCHABLE_CONTENT] => ТРИХИНЕЛЛЕЗ [CODE] => [

SOCNET_GROUP_ID] => [LIST_PAGE_URL] => /prod/index.php [

LIST_PAGE_URL] => /prod/index.php [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2361 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2361 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

EXTERNAL_ID] => [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) [PATH] => Array ( [0] => Array ( [ID] => 2316 [

ID] => 2316 [CODE] => root_ifa [

CODE] => root_ifa [XML_ID] => [

EXTERNAL_ID] => [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => [

IBLOCK_SECTION_ID] => [SORT] => 100 [

SORT] => 100 [NAME] => Иммуноферментная диагностика [

NAME] => Иммуноферментная диагностика [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [DEPTH_LEVEL] => 1 [

DEPTH_LEVEL] => 1 [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2316 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2316 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) ) [1] => Array ( [ID] => 2357 [

EXTERNAL_ID] => [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => 2316 [

IBLOCK_SECTION_ID] => 2316 [SORT] => 4200 [

SORT] => 4200 [NAME] => Паразитарные инвазии [

NAME] => Паразитарные инвазии [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [DEPTH_LEVEL] => 2 [

DEPTH_LEVEL] => 2 [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2357 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2357 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) ) [2] => Array ( [ID] => 2361 [

EXTERNAL_ID] => [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [

IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [SORT] => 4600 [

SORT] => 4600 [NAME] => Трихинеллез [

NAME] => Трихинеллез [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [DEPTH_LEVEL] => 3 [

DEPTH_LEVEL] => 3 [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2361 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2361 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) ) ) ) [SECTIONS_COUNT] => 0 )

Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса М к антигенам трихинелл в сыворотке (плазме) крови.

Подготовка к анализу. Перед началом работы все компоненты набора и образцы для анализа необходимо выдержать при комнатной температуре (18-22С) в течение 30 минут.

Образцы для анализа. Для анализа используют свежеотобранную несвернувшуюся кровь, кровь стабилизированную антикоагулянтом, сыворотку крови, плазму крови, мышечный сок.

1. При помощи одноразовой пипетки во флакон с буферным раствором внесите 2 полные капли исследуемого образца (крови, сыворотки крови, плазмы кров, мышечного сока). Освободите пипетку от остатков образца и осторожно перемешайте смесь пипетированием.
2. Освободите тест-полоску от упковки и вствьте во флакон с образцом, черной линией вниз.
3. Оставьте тест-полоску на 5-10 минут.
4. Достаньте тест-полоску из флакона и проанализируйте результат. Результат анализа после 20 минут является некорректным.

Цена за один тест: 450 руб.
Территориально Уфа. Отправка в любой регион тк.

Иммунохроматографический анализ - это метод определения наличия определенных концентраций веществ в биологических материалах (моча, цельная кровь, сыворотка или плазма крови, слюна, кал и т. д.) . Данный вид анализа осуществляется при помощи индикаторных полосок, палочек, панелей или тест-кассет, которые обеспечивают быстроту проведения тестирования. ИХА - сравнительно молодой метод анализа, он часто обозначается в литературе также как метод сухой иммунохимии, стрип-тест, QuikStrip cassette, QuikStrip dipstick, экспресс-тест или экспресс анализ. Эти названия связаны с быстротой проведения этого метода анализа. 1. Растворимые моноклональные антитела к исследуемому антигену или антителу, конъюгированные ("сшитые") с коллоидным золотом - красителем, который можно легко идентифицировать даже в самых малых концентрациях. Эти антитела нанесены вблизи участка погружения тест-полоски в физиологическую жидкость (мочу, кровь) . 2. Поликлональные антитела к исследуемому антигену или антителу, жестко иммобилизованные в тест-зоне полоски. 3. Вторичные антитела к моноклональным антителам, жестко иммобилизованные в контрольной зоне тест-полоски.

Принцип работы тестов на наркотики несколько отличается от других тест-систем. Устройство ИХА-полоски отличается тем, что в тест-зоне иммобилизованы искусственные антигены, способные специфически связываться со свободными антителами. Если исследуемый антиген (наркотик) НЕ присутствует в физиологической жидкости, участки связывания антител (эпитопы) остаются свободными, и они способны связываться с искусственными антигенами в тест-зоне, образуя темную полосу за счет конъюгированного красителя. Соответственно, если исследуемый антиген присутствует в жидкости, то антитела, связавшись с ним, уже не могут взаимодействовать с антигенами в тест-зоне, и образования темной полосы там не происходит. Но в обоих случаях (если анализ проведен правильно) происходит связывание "окрашенных" антител с вторичными антителами в контрольной зоне и образование там темной полосы. Возможные варианты при проведении анализа: одна полоса - положительный результат, две полосы - отрицательный результат, нет полос - анализ проведен неправильно.

Основными преимуществами использования иммунохроматографических тест-полосок являются:
1. Простота и удобство - позволяет получить результат (анализ и первичное представление о причине заболевания) без оборудования и специальных навыков.
2. Надежность - достоверность тестов достигает 92 - 99,8%, при этом каждый тест имеет встроенный внутренний контроль.
3. Экономичность - минимальные затраты на приобретение теста и экономия времени на проведение обследования. В рознице стоимость одного ИФА-исследования в 5 - 10 раз дороже ИХА, и получение результата - минимум на следующий день.
4. Анонимность - что особенно важно при выявлении заболеваний, передаваемых половым путем, других инфекционных заболеваний, а также выявлении фактов употребления наркотических веществ.
5. Независимость - не требует предварительной медицинской консультации и рецепта врача.

Являясь эффективным средством диагностирования, экспресс-тесты позволяют визуально в течение нескольких минут определить и оценить содержание антигенов, антител, гормонов и других диагностически важных веществ в организме человека. Экспресс-тесты отличаются высокой степенью чувствительности и точности, обнаруживая более 100 видов заболеваний, включающих такие распространённые болезни, как туберкулёз, сифилис, гонорею, хламидиоз, различные виды вирусных гепатитов, и др. , а также всю гамму применяемых наркотических веществ при высокой достоверности определения. Важным преимуществом данного вида тестов является их применение в диагностике in vitro, не требующей непосредственного присутствия обследуемого пациента.

По факту, экспресс-тест более точен чем традиционный компрессионный тест.

Тест выявляет титр антител IgG против паразитических круглых червей Trichinella, которые вызывают у человека трихинеллез.

Антитела класса IgG к Trichinella, иммуноглобулины класса G к антигенам трихинелл.

Синонимы английские

Anti-Trichinella IgG, Tr. antibodies, IgG.

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Trichinella (трихинеллы) – это род паразитических круглых червей. Несколько их видов опасны для человека.

Трихинеллы паразитируют на человеке и на многих животных (свиньях, медведях, крысах, лисицах и др.). При этом в мышцах инфицированного животного присутствуют личинки трихинелл (в виде цист). Если человек съест такое мясо, то может заразиться трихинеллезом. Как правило, наиболее опасна свинина и мясо диких животных.

Чтобы предотвратить заражение, необходимо тщательно готовить мясо. При температуре кипения воды, 100 °C, трихинеллы гарантированно погибают. Однако важно следить, чтобы продукты прогревались целиком (и снаружи, и внутри).

Животные тоже инфицируются, поедая мясо. Поэтому трихинеллез в основном встречается у хищников. Свиньи часто заражаются, контактируя с крысами.

Личинки трихинелл в мясе окружены плотной капсулой, которая называется циста. Когда цисты попадают в желудок, под действием желудочного сока их оболочки растворяются. Личинки освобождаются, проникают в тонкий кишечник и через 1-2 дня превращаются во взрослых половозрелых червей.

После спаривания самки производят новое поколение личинок, которые проходят через стенку кишки и разносятся по всему организму. Внутри скелетных мышц личинки окружаются капсулой, которая потом пропитывается солями кальция и затвердевает (превращается в цисту). Тогда уже цисты сохраняются в мышцах неограниченно долго и ждут следующего хозяина.

Сами взрослые особи не живут в кишечнике постоянно. Самцы погибают после спаривания, а самки исчезают через 3-5 недель после заражения (благодаря иммунному ответу организма).

Тяжесть заболевания зависит от количества трихинелл, которые попали в организм человека. Часто, если паразитов было немного, проявляется мало симптомов.

Трихинеллез протекает в две стадии. Для первой характерны признаки кишечного расстройства: умеренные боли в животе, тошнота, диарея. Они появляются в первые дни после заражения и исчезают через 10 дней (или раньше). Именно в это время в тонком кишечнике начинается развитие личинок трихинелл.

Симптомы второй стадии появляются через 2-3 недели после заражения и сохраняются несколько недель. В это время личинки разносятся по всему телу, что нарушает работу сосудов и мышц. Это может сопровождаться мышечными болями, повышенной температурой, слабостью, отеками (на лице, в частности вокруг глаз), красными точками под ногтями или в глазах.

Иногда трихинеллы повреждают сердечную мышцу, что вызывает боли в сердце, тахикардию. Нарушение работы нервной системы возникает в редких случаях, при сильном заражении.

Со второй недели после заражения в крови увеличивается число эозинофилов (эозинофильных лейкоцитов) и повышается концентрация ферментов мышечной ткани (креатинкиназы, лактатдегидрогеназы).

В некоторых случаях для диагностики трихинеллеза используют биопсию мышц. Если трихинелл много, под микроскопом можно обнаружить их цисты.

После того как трихинеллы попадают в организм человека, он начинает с ними бороться. Один из способов борьбы – выработка антител (специальных белков иммуноглобулинов). Существует пять основных типов иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgE, IgA и IgD.

IgE – это антитела, которые участвуют в иммунном ответе против паразитических червей. Они появляются на ранней стадии после заражения трихинеллами. Однако отмечены случаи трихинеллеза, когда анализ на IgE оказывался отрицательным. Поэтому антитела этого типа не годятся для диагностики.

Самыми подходящими антителами являются IgG. Они присутствуют в крови в наибольшем количестве (по сравнению с другими типами иммуноглобулинов). При трихинеллезе IgG можно обнаружить в крови через 12-60 дней после заражения (чем сильнее заражение, тем раньше появляются антитела). Уровень IgG остается высоким долгое время (месяцы и годы).

Для чего используется исследование?

Чтобы установить, был ли человек инфицирован трихинеллами.

Когда назначается исследование?

Тест назначается, если:

• проявляются симптомы болезни,
• повышено количество эозинофилов,
• повышен уровень некоторых мышечных ферментов,
• заболевший человек употреблял в пищу полусырое мясо.

Симптомы заболевания в первые 10 дней:

Симптомы трихинеллеза через 2-3 недели после заражения:

• мышечные боли,
• повышенная температура, слабость,
• отеки (на лице, в частности вокруг глаз),
• красные точки под ногтями или на поверхности глаз.

Что означают результаты?

КП (коэффициент позитивности): 0 - 0,84.

• Трихинеллеза нет.
• Недавняя инфекция. Если заражение произошло недавно (1-2 недели назад), то уровень антител может быть еще слишком низким, так что их не удалось обнаружить. В этом случае нужно повторить анализ позднее. Если и при повторном анализе IgG отсутствуют, то диагноз "трихинеллез" следует исключить.

• Трихинеллез.
• Ложноположительный результат. К нему могут приводить другие паразитарные инфекции. При необходимости диагноз уточняют с помощью других методов (иммуноблота, биопсии мышц).

Что может влиять на результат?

Ложноположительному результату способствуют токсоплазмоз и некоторые другие инфекции.

• Скрининговое обследование на гельминтозы (Opistorchis IgG, Toxocara IgG, Trichinella IgG, Echinococcus IgG)

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, инфекционист, паразитолог.

Своевременная диагностика трихинеллеза позволяет своевременно назначить специфическое лечение, что способствует предотвращению развития грозных осложнений гельминтоза, в ряде случаев приводящих больных к инвалидности и даже летальному исходу. Помогает установить диагноз эпидемиологический и пищевой анамнез, клиническая картина заболевания, выявление специфических антител и паразитологическое исследование свинины или мяса диких животных или продуктов из них, использующиеся при трапезе. Иногда приходится исследовать биопат мышц больного.

Рис. 1. Личинка трихинеллы в мышечной ткани (фото слева). Личинка в капсуле, пропитанной солями кальция.

Эпидемиологическое расследование

При эпидемиологическом расследовании случаев гельминтоза большое значение имеют данные эпидемиологического анамнеза. На трихинеллез указывают заболевание группы людей, участвующих в совместной трапезе и пищевой анамнез (поедание свинины или мяса диких животных, добытых на охоте — медвежатины или кабанятины, не прошедшие ветеринарного контроля).

Рис. 2. Недостаточно термически обработанное мясо свиньи или диких животных может стать источником гельминтоза.

Клиническая диагностика трихинеллеза

Для трихинеллеза характерны лихорадка, мышечные боли (регистрируются в 92% случаев), эозинофилия (97% случаев), отеки век, лица и конъюнктивит (в 81% случаев), кожные высыпания (в 33% случаев), желудочно-кишечные расстройства (в 33% случаев).

Рис. 3. Отеки на лице, мышечные боли и кожные высыпания — основные симптомы трихинеллеза.

Общеклинические исследования

Общеклинические исследования помогают правильно диагностировать трихинеллез и следить за ходом лечения.

Количество эозинофилов в крови при легком течении трихинеллеза повышается до 10 — 30%, при заболевании средней тяжести — до 60%, при тяжелом течении — до 60% и более. При крайне тяжелом течении эозинофилы исчезают и не регистрируются при исследовании. В пределах 10 — 15% эозинофилия сохраняется после выздоровления в течение трех и более месяцев.

Количество лейкоцитов при легком течении остается в пределах нормы. Гиперлейкоцитоз (до 30 — 40 на 10 9 /л) регистрируется при тяжелом течении.

У больных с трихинеллезом часто регистрируется диспротеинемия: снижается уровень общего белка и альбумины, повышается уровень гамма- и альфа-2-глобулинов.

Характерным показателем при диагностике трихинеллеза является альдолаземия — повышение Ф-1, 6-Ф-альдолазы до 25 — 40 — 80 Е. Альдолаземия регистрируется у больных данным видом гельминтоза в 91% случаев.

В период лихорадки у больных трихинеллезом в моче определяется повышенное количество белка.

При развитии абдоминального синдрома в кале больных появляется слизь и кровь.

Рис. 4. На фото слева единичный эозинофил. Справа — картина эозинофилии.

Трихинеллез у охотников

Иммунологические методы диагностики трихинеллеза

При невозможности исследовать мясо, которое предположительно явилось источником паразитов, применяются серологические методы диагностика. В основе серологических исследований лежит обнаружение специфических антител к трихинеллам, вырабатывающихся в организме больного в ответ на внедрение гельминтов. Серологические реакции проводятся с трихинеллезным антигеном (диагностикумом). При заболевании специфические антитела к трихинеллам можно обнаружить через 2 недели от момента заражения. Их максимальная концентрация регистрируется на 4 — 12 неделе, поэтому исследование следует проводить в динамике.

При диагностике трихинеллеза используются:

• Реакция связывания комплемента (РСК).
• Реакция кольцепреципитации (РКП).
• Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).
• Иммуноферментный анализа (ИФА).
• Реакция флюоресцирующих антител (РФА).

При одновременном применении ИФА и РНГА выявляемость антител к трихинеллам достигает 80 — 91%, специфичность — 92 — 97%.

Нарастание титров антител указывает на заражение трихинеллами. При слабоположительной реакции исследование повторяется через 10 — 15 дней.

Рис. 5. Для диагностики трихинеллеза рекомендуется одновременное проведение ИФА и РНГА.

Аллергологический метод диагностики

Для диагностики трихинеллеза иногда применяют внутрикожную пробу с раствором трихинеллезного антигена. Положительным является результат, когда на месте укола появляется волдырь. Слабая чувствительность и дополнительная сенсибилизация организма — основные недостатки данного метода диагностики трихинеллеза. Внутрикожная проба при заражении трихинеллезом становится положительной со 2-й недели инвазии. Если при лечении больного использовались кортикостероиды, аллергическая проба будет отрицательной. Положительной проба сохраняется многие годы.

Рис. 6. Трихинеллы в мясе (микроскопия).

Паразитологические методы диагностики трихинеллеза

Паразитологические методы диагностики трихинеллеза включают в себя исследование мясных продуктов или мяса, предположительно являющихся причиной заражения и обнаружение личинок в биопатах мышц больного с помощью трихинеллоскопии.

Остатки мясных продуктов исследуются путем использования компрессорной трихинеллоскопии и/или методом искусственного переваривания.

Для исследования берутся ножки диафрагмы, обсемененность личинками которых достигает 31%, интенсивность заражения диафрагмы составляет 20%, языка — 17%, мышц гортани — 14%, брюшных мышц — 10%, межреберных мышц — 7%. Для трихинеллоскопии мышечные волокна разрезаются вдоль волокон изогнутыми ножницами и нарезаются на 24 кусочка. Далее материал помещается на компрессориум и раздавливается. Исследование производится под малым увеличением.

При количестве личинок до 200 на 1 грамм мышечной ткани говорят об умеренной инвазии, до 500 на 1 грамм — интенсивной инвазии, более 500 на 1 грамм — сверхинтенсивной инвазии.

Рис. 7. На фото слева образцы мяса, отобранные для исследования. На фото справа проведение исследования методом искусственного переваривания.

Рис. 8. Исследование мяса методом трихинеллоскопии. На фото слева трихинеллоскоп.

Рис. 9. Вид личинок трихинелл в мышечных волокнах при трихинеллоскопии.

При единичных случаях заболевания, отсутствии источника заражения и тяжелом течении болезни с целью проведения дифференциальной диагностики и назначения адекватной терапии проводят биопсию мышечной ткани больного. Кусочек ткани размером 0,5 х 3 см берется из дельтовидной, икроножной или широкой мышцы спины. Далее проводится трихинеллоскопия или исследование методом переваривания. Трихинеллоскопия используется в случаях посмертной диагностики.

Половозрелые трихинеллы в кале не обнаруживаются. Личинки паразита ввиду кратковременности пребывания в венозной крови определить невозможно.

Рис. 10. Трихинеллоскопия. На фото слева трихинеллы в мышцах на 22 день от момента инвазии. На фото справа — 60-й день.

Дополнительные методы диагностики

При помощи рентгенографии и СКТ выявляется легочная патология — эозинофильные инфильтраты, плеврит и пневмония. Нарушения в работе сердца выявляются на ЭКГ.

Рис. 11. На фото эозинофильные инфильтраты в легочной ткани при глистной инвазии.

Дифференциальная диагностика трихинеллеза

Диагностика трихинеллеза при заболевании группы людей, участвующих в совместной трапезе, трудностей не представляет. В случае единичных случаев заболевания трихинеллез диагностировать трихинеллез тяжело. У таких больных ошибочно (в 35 — 40% случаев) ставятся такие диагнозы, как брюшной тиф, острая дизентерия, пищевая токсикоинфекция, гастроэнтерит, острая респираторная инфекция, конъюнктивит, аллергический дерматит, отек Квинке, эозинофилия неясного генеза. Сходные симптомы трихинеллез имеет с описторхозом и лептоспирозом.

Наиболее часто (в 45 — 47% случаев) первоначально больным с трихинеллезом ставятся такие диагнозы, как ОРЗ, грипп или ОРВИ.

Дифференциальную диагностику трихинеллеза у детей необходимо проводить с краснухой, корью, скарлатиной, тонзиллитом и ангиной.

Важнейшее значение при диагностике трихинеллеза имеет эпидемиологический анамнез.

Рис. 12. Отек Квинке (фото слева) и отек век при трихинеллезе (фото справа).

Своевременная диагностика трихинеллеза позволяет своевременно назначить специфическое лечение, что способствует предотвращению развития грозных осложнений гельминтоза, в ряде случаев приводящих больных к инвалидности и даже летальному исходу. Помогает установить диагноз эпидемиологический и пищевой анамнез, клиническая картина заболевания, выявление специфических антител и паразитологическое исследование свинины или мяса диких животных или продуктов из них, использующиеся при трапезе. Иногда приходится исследовать биопат мышц больного.

Рис. 1. Личинка трихинеллы в мышечной ткани (фото слева). Личинка в капсуле, пропитанной солями кальция.

Эпидемиологическое расследование

При эпидемиологическом расследовании случаев гельминтоза большое значение имеют данные эпидемиологического анамнеза. На трихинеллез указывают заболевание группы людей, участвующих в совместной трапезе и пищевой анамнез (поедание свинины или мяса диких животных, добытых на охоте — медвежатины или кабанятины, не прошедшие ветеринарного контроля).

Рис. 2. Недостаточно термически обработанное мясо свиньи или диких животных может стать источником гельминтоза.

Клиническая диагностика трихинеллеза

Для трихинеллеза характерны лихорадка, мышечные боли (регистрируются в 92% случаев), эозинофилия (97% случаев), отеки век, лица и конъюнктивит (в 81% случаев), кожные высыпания (в 33% случаев), желудочно-кишечные расстройства (в 33% случаев).

Рис. 3. Отеки на лице, мышечные боли и кожные высыпания — основные симптомы трихинеллеза.

Общеклинические исследования

Общеклинические исследования помогают правильно диагностировать трихинеллез и следить за ходом лечения.

Количество эозинофилов в крови при легком течении трихинеллеза повышается до 10 — 30%, при заболевании средней тяжести — до 60%, при тяжелом течении — до 60% и более. При крайне тяжелом течении эозинофилы исчезают и не регистрируются при исследовании. В пределах 10 — 15% эозинофилия сохраняется после выздоровления в течение трех и более месяцев.

Количество лейкоцитов при легком течении остается в пределах нормы. Гиперлейкоцитоз (до 30 — 40 на 10 9 /л) регистрируется при тяжелом течении.

У больных с трихинеллезом часто регистрируется диспротеинемия: снижается уровень общего белка и альбумины, повышается уровень гамма- и альфа-2-глобулинов.

Характерным показателем при диагностике трихинеллеза является альдолаземия — повышение Ф-1, 6-Ф-альдолазы до 25 — 40 — 80 Е. Альдолаземия регистрируется у больных данным видом гельминтоза в 91% случаев.

В период лихорадки у больных трихинеллезом в моче определяется повышенное количество белка.

При развитии абдоминального синдрома в кале больных появляется слизь и кровь.

Рис. 4. На фото слева единичный эозинофил. Справа — картина эозинофилии.

Трихинеллез у охотников

Иммунологические методы диагностики трихинеллеза

При невозможности исследовать мясо, которое предположительно явилось источником паразитов, применяются серологические методы диагностика. В основе серологических исследований лежит обнаружение специфических антител к трихинеллам, вырабатывающихся в организме больного в ответ на внедрение гельминтов. Серологические реакции проводятся с трихинеллезным антигеном (диагностикумом). При заболевании специфические антитела к трихинеллам можно обнаружить через 2 недели от момента заражения. Их максимальная концентрация регистрируется на 4 — 12 неделе, поэтому исследование следует проводить в динамике.

При диагностике трихинеллеза используются:

• Реакция связывания комплемента (РСК).
• Реакция кольцепреципитации (РКП).
• Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).
• Иммуноферментный анализа (ИФА).
• Реакция флюоресцирующих антител (РФА).

При одновременном применении ИФА и РНГА выявляемость антител к трихинеллам достигает 80 — 91%, специфичность — 92 — 97%.

Нарастание титров антител указывает на заражение трихинеллами. При слабоположительной реакции исследование повторяется через 10 — 15 дней.

Рис. 5. Для диагностики трихинеллеза рекомендуется одновременное проведение ИФА и РНГА.

Аллергологический метод диагностики

Для диагностики трихинеллеза иногда применяют внутрикожную пробу с раствором трихинеллезного антигена. Положительным является результат, когда на месте укола появляется волдырь. Слабая чувствительность и дополнительная сенсибилизация организма — основные недостатки данного метода диагностики трихинеллеза. Внутрикожная проба при заражении трихинеллезом становится положительной со 2-й недели инвазии. Если при лечении больного использовались кортикостероиды, аллергическая проба будет отрицательной. Положительной проба сохраняется многие годы.

Рис. 6. Трихинеллы в мясе (микроскопия).

Паразитологические методы диагностики трихинеллеза

Паразитологические методы диагностики трихинеллеза включают в себя исследование мясных продуктов или мяса, предположительно являющихся причиной заражения и обнаружение личинок в биопатах мышц больного с помощью трихинеллоскопии.

Остатки мясных продуктов исследуются путем использования компрессорной трихинеллоскопии и/или методом искусственного переваривания.

Для исследования берутся ножки диафрагмы, обсемененность личинками которых достигает 31%, интенсивность заражения диафрагмы составляет 20%, языка — 17%, мышц гортани — 14%, брюшных мышц — 10%, межреберных мышц — 7%. Для трихинеллоскопии мышечные волокна разрезаются вдоль волокон изогнутыми ножницами и нарезаются на 24 кусочка. Далее материал помещается на компрессориум и раздавливается. Исследование производится под малым увеличением.

При количестве личинок до 200 на 1 грамм мышечной ткани говорят об умеренной инвазии, до 500 на 1 грамм — интенсивной инвазии, более 500 на 1 грамм — сверхинтенсивной инвазии.

Рис. 7. На фото слева образцы мяса, отобранные для исследования. На фото справа проведение исследования методом искусственного переваривания.

Рис. 8. Исследование мяса методом трихинеллоскопии. На фото слева трихинеллоскоп.

Рис. 9. Вид личинок трихинелл в мышечных волокнах при трихинеллоскопии.

При единичных случаях заболевания, отсутствии источника заражения и тяжелом течении болезни с целью проведения дифференциальной диагностики и назначения адекватной терапии проводят биопсию мышечной ткани больного. Кусочек ткани размером 0,5 х 3 см берется из дельтовидной, икроножной или широкой мышцы спины. Далее проводится трихинеллоскопия или исследование методом переваривания. Трихинеллоскопия используется в случаях посмертной диагностики.

Половозрелые трихинеллы в кале не обнаруживаются. Личинки паразита ввиду кратковременности пребывания в венозной крови определить невозможно.

Рис. 10. Трихинеллоскопия. На фото слева трихинеллы в мышцах на 22 день от момента инвазии. На фото справа — 60-й день.

Дополнительные методы диагностики

При помощи рентгенографии и СКТ выявляется легочная патология — эозинофильные инфильтраты, плеврит и пневмония. Нарушения в работе сердца выявляются на ЭКГ.

Рис. 11. На фото эозинофильные инфильтраты в легочной ткани при глистной инвазии.

Дифференциальная диагностика трихинеллеза

Диагностика трихинеллеза при заболевании группы людей, участвующих в совместной трапезе, трудностей не представляет. В случае единичных случаев заболевания трихинеллез диагностировать трихинеллез тяжело. У таких больных ошибочно (в 35 — 40% случаев) ставятся такие диагнозы, как брюшной тиф, острая дизентерия, пищевая токсикоинфекция, гастроэнтерит, острая респираторная инфекция, конъюнктивит, аллергический дерматит, отек Квинке, эозинофилия неясного генеза. Сходные симптомы трихинеллез имеет с описторхозом и лептоспирозом.

Наиболее часто (в 45 — 47% случаев) первоначально больным с трихинеллезом ставятся такие диагнозы, как ОРЗ, грипп или ОРВИ.

Дифференциальную диагностику трихинеллеза у детей необходимо проводить с краснухой, корью, скарлатиной, тонзиллитом и ангиной.

Важнейшее значение при диагностике трихинеллеза имеет эпидемиологический анамнез.

Рис. 12. Отек Квинке (фото слева) и отек век при трихинеллезе (фото справа).

Читайте также:

• Личинки аскариды что это
• Где сделать анализ на яйцеглист для детей
• Какие микроорганизмы являются внутриклеточными паразитами
• Могут ли лямблии вызывать отек квинке
• Ветеринарно-санитарная экспертиза при метастронгилезе

№ по каталогу	Наименование и краткое описание	Количество определений
D-3152	Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к антигенам трихинелл в сыворотке (плазме) крови.	12x8
D-3154