Профилактика паразитарных заболеваний мук 4 2 735-99
Принципы организации и проведения лабораторных исследований на паразитарные болезни
Ежегодно на территории Российской Федерации регистрируется свыше одного миллиона человек больных гельминтозами и кишечными протозоозами. Свыше 270 видов паразитов (гельминтов, одноклеточных простейших) могут вызывать заражение людей паразитарными болезнями. Важность качественной лабораторной диагностики паразитарных болезней определяется во многом разнообразностью их клинической картины, а также нередки случаи латентного, субклинического течения.
Медицинским учреждениям, вне зависимости от подчиненности и форм собственности, осуществляющих на базе клинико-диагностических лабораторий и других испытательных лабораторных центров обследование населения на паразитарные болезни для правильной и эффективной диагностики необходимо организовывать эти исследования в соответствии с действующими нормативно-методическими документами:
Качество и уровень выявляемости возбудителей паразитарных болезней при лабораторной диагностике зависят от профессиональной подготовки и опыта врачей и лаборантов лабораторного звена, а также от правильного забора материала и выполнения соответствующих методов исследования.
Для выявления возбудителей паразитарных болезней применяются: - прямые паразитологические методы, когда возбудитель (гельминты, их фрагменты, яйца и личинки гельминтов, цистные и вегетативные формы простейших) выявляются непосредственно в исследуемом биоматериале (кал, дуоденальное содержимое, моча, кровь, послеоперационный материал, содержимое язв и т.п.), и непрямые паразитологические методы к которым относятся серологические (иммунологические) методы исследования, когда определяют выработку специфических антител организмом инвазированного человека в ответ на внедрение того или иного антигена (паразита).
Очень большое значение для организации достоверной диагностики имеетправильно организованный забор материала на исследование.
Забор и доставка крови на серологические исследования для опредения антител к антигенам паразитов.
Кровь у пациента забирается в процедурном кабинетелечебного учреждения из вены, натощак, объемом 3-5 мл (у ребенка до 2 мл) в стерильную пробирку без добавления консервантов. Доставляется кровь на исследование в день забора крови, в стерильной пробирке закрытой крышкой, в вертикальном положении. Нельзя перегревать и замораживать. Допускается доставка сыворотки крови (если есть возможность получения сыворотки крови в лабораторных условиях) без добавления консервантов. Сыворотка доставляется в день забора крови из вены у пациента или на следующий день после забора крови при условии хранения сыворотки не более 1 суток в холодильнике при температуре + 2 0 - +4 0 С. Замораживание крови допускается только в лабораторных условиях и однократно.
Забор и доставка биологического материла в лабораторию для исследования на кишечные гельминтозы и протозоозы
Утренний кал без примеси мочи собирается в чистую, сухую стеклянную или пластиковую посуду (посуду можно вымыть и ополоснуть горячей водой в домашних условиях), объемом не менее одной чайной ложки. При этом объем должен быть взят из разных частей кала (начальных, средних и последние вышедших из прямой кишки).
Доставляют также в лабораторию подозрительные включения из кала (подвижные и неподвижные). Вечерний кал также можно собрать в чистую, сухую стеклянную или пластиковую посуду, но при условии хранения, до доставки в лабораторию, в холодильнике при температуре + 2 0 - +4 0 С не более 6-8 часов. Для исследования на простейшие (лямблии) кал должен быть доставлен утренний и в день дефекации.
Более длительное хранение кала после дефекации – до 2-х суток допускается при условии забора материала в консервант.При диагностике на простейшие лучше поместить кал в консервант Турдыева (1 часть кала размешать в 2-3 частях консерванта); для диагностики только на яйца, личинки гельминтов можно использовать консервант - раствор Барбагалло в тех же соотношениях. Хранить кал в консерванте до доставки в лабораторию необходимо в сухом, тёмном, прохладном месте.
Кал, для диагностики кишечного амебиаза должен быть доставлен в лабораторию на исследование в стерильной посуде не позднее 15-20 минут после дефекации. При невозможности быстрой доставки - свежий кал (сразу после дефекации) должен быть помещен в стерильную посуду, в консервант Турдыева (1 часть кала размешать в 3 частях консерванта) и доставлен в лабораторию.
Перианальный соскоб(отпечаток) – заранее подготовленными глазными палочками с нанесенным липким клеевым слоем у пациента с перианальных складок вокруг ануса делается отпечаток, при этом пациент не должен подмываться вечером и утром перед забором перианального соскоба (отпечатка). Палочки помещают в пронумерованные пробирки или специальные штативы и доставляют в лабораторию на исследование
Мокрота после откашливания (не слюна и не слизь из носоглотки!) доставляется в стерильной посуде и исследуется только свежевыделенная.
Моча утреннего сбора (все порции до обеда) доставляется в чистых сухих банках с крышками, не хранится, исследуется сразу после доставки.
Дуоденальное содержимое (желчь) – доставляется в химических или центрифужных пробирках закрытых крышками. Порции А и В исследуются на простейших (лямблии) и личинок (стронгилоид), порция С на яйца печеночных гельминтов (описторх, клонорх, фасциола).
О каждом случае заболевания человека дирофиляриозом, пентастомозами, спарганозом, стронгилоидозом, фасциолезом, церкариозом, анизакидозом, диоктофимозом, дикроцелиозом, дальневосточными трематодозами и др. все организации здравоохранения, независимо от организационно-правовых форм и форм собственности, а также лица, занимающиеся частной медицинской практикой, сообщают в территориальный центр Госсанэпиднадзора в течение 2 ч по телефону, а затем в течение 12 ч в письменной форме экстренным извещением установленной формы.
На каждый случай заболевания заполняют карту эпидемиологического обследования очага инфекционного заболевания и копию карты направляют в вышестоящий центр Госсанэпиднадзора. Областные, краевые и республиканские центры Госсанэпиднадзора карту эпидобследования направляют в текущем месяце в федеральный орган исполнительной власти в области санэпидблагополучия населения.
Профилактику дирофиляриоза осуществляют в соответствии с методическими указаниями МУ 3.2.1880-04 "Профилактика дирофиляриоза".
Пентастомозы (лингватулез, армиллифериоз).
При нахождении на неблагополучных территориях по лингватулезу (и армиллифериозу) не допускается: пить воду из открытых источников (ее следует хорошо кипятить и фильтровать), использовать в пищу сырое или недостаточно термически обработанное мясо убитых на охоте или отловленных животных. При работе с инвазированными рептилиями и амфибиями используют перчатки.
В неблагополучной местности по лингватулезу, армиллифериозу и другим пентастомозам, опасным для человека, необходимо:
- проводить мероприятия по снижению численности популяций бродячих собак и кошек;
- мясо кабанов, жвачных и других животных, пораженное личинками лингватул, армиллиферов и других видов пентастом, как и пораженные части органов (при поражении пентастомами более 2/3 внутреннего органа), направлять на утилизацию или сжигание в установленном порядке;
- пораженные личинками лингватул, армиллиферов внутренние органы и трупы животных уничтожать сжиганием или ямах Беккери.
На территориях, неблагополучных по спарганозу, не рекомендуется:
- пить сырую воду из открытых водоемов (ее следует хорошо кипятить или фильтровать);
- использовать в пищу сырое или недостаточно термически обработанное мясо на охоте или отловленных животных;
- нанесение на слизистые глаз и других участков тела, а так же на открытые раны мяса лягушек, змей и других животных, инвазированных плероцеркоидами спирометр, которые могут проникнуть через указанные поверхности и будут продолжать свое развитие в организме человека.
В меры общей профилактики в стационарно неблагополучных регионах включают мероприятия, направленные на снижение численности популяций бродячих собак и кошек.
Мясо животных, пораженное плероцеркоидами - спарганумами спирометр, уничтожают (сжигают) или направляют в промышленную переработку на мясокостную муку в установленном порядке.
Возбудитель стронгилоидоза - мелкая нематода Strongyloides stercoralis (кишечная угрица). Паразитические самки локализуются в слизистой двенадцатиперстной и верхнем отделе тощей кишок. Самки откладывают в сутки до 50 яиц, из которых вскоре вылупляются рабдитовидные (неинвазионные) личинки. Личинки с фекалиями выделяются в окружающую среду, где развиваются или прямым путем, когда рабдетовидные личинки через 1 - 3 суток превращаются в филяриевидные (инвазионные), или непрямым, когда указанные выше личинки превращаются в свободноживущих самцов и самок, которые в почве дают новые генерации рабдитовидных личинок. Развитие может идти и по смешанному типу.
Филяриевидные личинки способны проникать в кожу или слизистые ротовой полости и пищевода, откуда они мигрируют через сердце, легкие, дыхательные пути, глотку и попадают в кишечник. В процессе миграции личинки достигают половой зрелости.
Существует также внутрикишечный тип развития кишечной угрицы. При этом создаются условия для самозаражения (аутосуперинвазия).
Основным источником инвазии является больной человек. Рассеивание личинок стронгилоидоза в окружающей среде происходит при загрязнении почвы фекалиями больного, заражение здоровых людей - при соприкосновении открытых участков тела с почвой (ходьба босиком, выполнение земляных работ и т.д.), а также при питье воды и употреблении пищевых продуктов (овощи, фрукты, столовая зелень), содержащих инвазионные личинки.
Период развития кишечной угрицы от проникновения в организм человека до выявления рабдитовидных личинок занимает около 2 недель.
Стронгилоидоз чаще выявляется у жителей сельской местности. Инвазия обычно выявляется у лиц, имеющих по роду своей деятельности контакт с почвой (сельскохозяйственные работники, шахтеры и др.). Интенсивные очаги стронгилоидоза зарегистрированы в психиатрических больницах, интернатах для умственно отсталых и престарелых лиц. Из этих очагов инвазия может распространяться в пределах миграции указанных контингентов и связей местного населения с очагом.
Стронгилоидоз широко распространен в странах с жарким и влажным климатом тропического и субтропического поясов. На территории России - в субъектах Южного федерального округа, Хабаровском и Приморском краях. Наблюдается завоз стронгилоидоза иностранными гражданами и российскими гражданами, прибывшими из тропиков.
Диагноз стронгилоидоза устанавливают при обнаружении личинок возбудителя в фекалиях, дуоденальном содержимом, иногда в мокроте. В качестве унифицированного метода лабораторной диагностики рекомендуется метод Бермана, изложенный в методических указаниях МУК 4.2.735-99 "Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов". Копроовоскопическое исследование целесообразно сочетать с зондированием двенадцатиперстной кишки и исследованием осадка после предварительного центрифугирования. Рекомендуется исследовать свежие фекалии. При подозрении на стронгилоидоз в случае отрицательного результата при однократном исследовании необходимо проводить повторные анализы фекалий до 5 раз с промежутками 5 - 7 дней.
Мероприятия по борьбе со стронгилоидозом включают:
- выявление и лечение больных стронгилоидозом;
- противоэпидемические мероприятия в очагах инвазии;
- санитарно-гигиеническое воспитание и обучение населения;
- подготовка медицинских работников.
Выявление больных стронгилоидозом проводят активно. Объем исследований населения на стронгилоидоз зависит от распространения инвазии на данной территории. В районах распространения инвазии обследованию подвергают лиц с клиническими симптомами. Особое внимание уделяют выявлению стронгилоидоза у пациентов психиатрических больниц, а также у детей детских домов. Эти контингенты обследуют не реже 1 раза в год, включая и обслуживающий персонал. Подлежат обследованию лица, вновь поступающие в эти учреждения, подземные горнорабочие на шахтах, работники кирпичных заводов, лица, занимающиеся прокладкой тоннелей.
Противоэпидемические мероприятия включают в себя лечение инвазированного в стационаре, эпидемиологическое обследование очага с заполнением карты эпидемиологического обследования очага инфекционного заболевания; обследование контактных с которыми инвазированный имел эпидемиологические связи. В сезон заражения стронгилоидозом, т.е. в теплое время года, проводят обеззараживание окружающей среды от возбудителей инвазии в соответствии с методическими указаниями МУ 3.2.1022-01 "Мероприятия по снижению риска заражения населения возбудителями паразитозов".
При выявлении очага в коллективе (психиатрическая больница) проводят 3-х кратное обследование всех членов коллектива, в том числе и обслуживающий персонал; обследуют всех членов семьи тех лиц, у которых выявлен стронгилоидоз. Дегельминтизацию проводят одномоментно в условиях учреждения под врачебным контролем. В течение 3-х месяцев проводят ежемесячное обследование пролеченных лиц. Вновь поступающие в оздоровленный коллектив лица подлежат обязательному обследованию на стронгилоидоз.
Возбудителями фасциолеза человека являются крупные трематоды - Fasciola hepatica и Fasciola gigantika, паразитирующие в желчных протоках печени и желчном пузыре.
Заражение фасциолезом человека происходит при заглатывании жизнеспособных личинок (адолескарии) с пищей, приготовленной из дикорастущих листьев салата (кресса водяного, кресс-салата), а также при употреблении сырой воды из поверхностных водоемов. Фактором передачи может служить и огородная зелень, если для ее полива или промывания используют воду из открытых водоемов.
Основным источником загрязнения внешней среды яйцами фоциол являются сельскохозяйственные животные (корова, овца, коза, лошадь, верблюд, осел, кролики и др.) и дикие травоядные (белка, бобр, серна, олень, косуля и др.).
На территории России единичные случаи фасциолеза встречаются повсеместно. Помимо этих двух видов фасциол у человека (а также плотоядных и свиней) на Дальнем Востоке паразитирует Fasciolopsis busci. Личинки (адолескарии) паразита инцистируются на стеблях и плодах водного ореха, водного каштана, дикорастущего водного риса.
В дельте Волги, Астраханской области и Краснодарском крае на растениях и плодах водного ореха чилима встречаются личинки (адолескарии) Gastrodis coides hominis, способные заражать человека и плотоядных. Помимо указанных видов трематод человек и животные могут заражаться паразитами из подотряда Paramphistomatida, семейства фасциолид - Parafasciolopsis fasciolaemorpha, a также некоторыми видами семейства Notocotylidae и паразитами кишечника птиц. Заражение этими паразитами происходит с растительностью и водой, содержащими личинки паразитов.
Диагноз фасциолеза ставят на основании обнаружения яиц в фекалиях и дуоденальном содержимом. Для обнаружения яиц этого гельминта применяют методы исследования, изложенные в методических указаниях МУК 4.2.735-99 "Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов". Следует учитывать возможность наличия в фекалиях человека транзитных яиц, попавших в кишечник в результате употребления в пищу печени животного, инвазированной фасциолами. В таких случаях необходимо провести повторное исследование через 7 - 10 дней, исключив на это время из пищи печень.
Борьба с фасциолезом складывается из мер личной и общественной профилактики. Необходимо проводить активное выявление больных фасциолезом среди населения в местах регистрации инвазированных сельскохозяйственных животных, подвергать дегельминтизации инвазированных животных, осуществлять дезинвазию навоза. В целях предупреждения заражения фасциолезом людей воду для питья и хозяйственных нужд рекомендуется обязательно кипятить или фильтровать, тщательно мыть овощи и зелень, произрастающие в болотистой местности.
Личная профилактика дикроцелиоза состоит в отказе от употребления в пищу растительности из мест, которые неблагополучны по дикроцелиозу животных. Заражение человека происходит при случайном проглатывании инвазированных муравьев вместе с травой. Дикроцелии паразитируют в желчных ходах печени крупного и мелкого рогатого скота. У человека встречается редко.
Меры общественной профилактики дикроцелиоза должны быть направлены на защиту и предохранение территории от фекального и навозного загрязнения, заселения наземными моллюсками, дегельминтизацию сельскохозяйственных животных и человека.
Диагноз дикроцелиоза устанавливает на основании обнаружения только зрелых яиц коричневого цвета в фекалиях или дуоденальном содержимом. В случае, если человек за несколько дней до обследования употреблял в пищу печень инвазированных животных, в фекалиях могут быть обнаружены яйца разной степени зрелости, называемые "транзиторными". Наличие транзиторных яиц не свидетельствует о заражении, которое происходит только при случайном поедании промежуточных хозяев-муравьев. Для полной уверенности в диагнозе необходимы повторные анализы с промежутком в несколько дней, причем из диеты обследуемого должно быть исключено на этот период употребление печени скота.
Все выявленные больные подлежат специфическому лечению.
В отчет об инфекционных и паразитарных заболеваниях (ф. 2) включают больных с впервые установленным диагнозом.
Выявленные инвазированные подлежат учету в инфекционных или гельминтологических кабинетах инфекционных заболеваний.
Контроль эффективности лечения проводят через 3 месяца после дегельминтизации. Кратность исследования - 3 анализа кала (интервал 7 - 10 дней) или 1 анализ желчи.
Основными причинами распространения церкариозов являются:
- неудовлетворительное санитарное состояние городских водных объектов, что ведет к загрязнению и зарастанию водных объектов, способствуя росту численности моллюсков - промежуточных хозяев шистосоматид;
- рост численности утиных птиц (прежде всего - кряквы) на городских водных объектах;
- использование населением в рекреационных целях внутренних городских водных объектов, не предназначенных для целей рекреации;
- отсутствие на водных объектах, представляющих опасность в отношении церкариозов, указателей, запрещающих купание и игры в воде.
Санитарно-эпидемиологический (паразитологический) надзор за водными объектами осуществляют специалисты центров Госсанэпиднадзора субъектов Российской Федерации в соответствии с методическими указаниями МУК 4.2.796-99 "Методы санитарно-паразитологических исследований".
В целях личной профилактики церкариозов при контактах с водой водных объектов (при купании, стирке белья, играх в воде, рыбной ловле и т.д.) выполняют следующее:
- не рекомендуется купание в заросших растительностью участках водных объектов, где постоянно обитают утки (более безопасны открытые, без растительности, прибрежные зоны);
- при необходимости длительного пребывания в воде применяют защитную одежду и обувь (сапоги, брюки, рубашку), предохраняющие от нападения церкарий шистосоматид;
- после контакта с водой в "подозрительной" зоне водного объекта тщательно вытирают кожу жестким полотенцем или сухой тканью и быстро меняют промокшую одежду.
В меры общей профилактики включают:
- оснащение внутренних городских водных объектов, где имеется риск заражения людей церкариями, указателями, запрещающими купание и игры в воде;
- регулирование (снижение) численности кряквы в городских водных объектах, используемых в рекреационных целях;
- регулярную очистку водных объектов (или наиболее посещаемых населением участков водных объектов) от водной растительности;
- ликвидацию малых бессточных сильно загрязненных городских водных объектов.
УТВЕРЖДАЮ |
санитарный врач Российской Федерации -
Первый заместитель Министра
здравоохранения Российской Федерации
25 февраля 1999 г.
Дата введения: 25 апреля 1999 г.
ГОСУДАРСТВЕННАЯ СИСТЕМА САНИТАРНО - ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО
НОРМИРОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
3.2. ПРОФИЛАКТИКА ПАРАЗИТАРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГЕЛЬМИНТОЗОВ И ПРОТОЗООЗОВ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.2.735-99
1. Подготовлены сотрудниками Федерального центра государственного санитарно - эпидемиологического надзора Минздрава России: к.б.н. Цыбиной Т.Н., Сысковой Т.Г. и сотрудниками Института медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского Минздрава России: к.м.н. Плющевой Г.Л., к.б.н. Гордеевой Л.М., к.м.н. Чернышенко А.И., д.м.н. Сергеевым В.П., д.м.н. Романенко Н.А., к.м.н. Продеус Т.В.
2. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем министра здравоохранения Российской Федерации.
3. Введены впервые.
1. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ И НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ
Лабораторные исследования на гельминтозы и протозоозы проводятся клинико - диагностическими лабораториями лечебно - профилактических учреждений, ведомственными лабораториями (НИИ, вузов, военных госпиталей, частных клиник и т.п.), а также другими лабораториями, имеющими лицензии или аккредитованными в системе Госстандарта и госсанэпиднадзора для проведения данных исследований в независимости от формы собственности.
На центры госсанэпиднадзора возлагается организация работы по обследованию населения на гельминтозы и протозоозы, методическое руководство, контроль за качеством работы, проводимой клинико - диагностическими лабораториями лечебно - профилактических учреждений и ведомственных лабораторий, обследование населения по эпидемиологическим показаниям и с консультативной целью.
Издание официальное Настоящие методические указания не могут
быть полностью или частично
воспроизведены, тиражированы и
распространены без разрешения
Департамента госсанэпиднадзора Минздрава
России.
В настоящих методических указаниях использованы ссылки на:
- Санитарные правила и нормы СанПиН 3.2.569-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации". Госкомсанэпиднадзор России. - М., 1988;
КонсультантПлюс: примечание.
СанПиН 3.2.569-96 утратили силу с 30 июня 2003 года в связи с изданием Постановления Главного государственного санитарного врача РФ от 30.05.2003 N 106. Действующие СанПиН 3.2.1333-03 утверждены Постановлением Главного государственного санитарного врача от 30.05.2003 N 105.
- Санитарные правила СП 3.1/3.2.558-96 "Общие требования по профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний". Госкомсанэпиднадзор России. - М., 1997;
- Инструкция по проектированию санитарно - эпидемиологических станций. СН 535-81. Госгражданстрой. - М., 1982;
- Система аккредитации испытательных лабораторий (центров) государственной санитарно - эпидемиологической службы Российской Федерации. Минздрав России и Госстандарт России, Федеральный центр госсанэпиднадзора России. - М., 1997;
- Санитарные правила СП 1.2.731-99 "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами". Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России. - М., 1999.
Настоящие методические указания являются обязательными при выполнении лабораторных исследований биологического материала от людей с целью обнаружения паразитирующих в организме гельминтов и простейших.
Насчитывается свыше 250 видов паразитирующих у человека гельминтов, вызывающих заболевания - гельминтозы. На территории нашей страны обнаружено около 100 видов гельминтов, из них более 20 имеют широкое, практически повсеместное распространение. К паразитарным заболеваниям относятся также протозойные инвазии, возбудителями которых являются простейшие одноклеточные организмы. В настоящее время известно около 50 видов простейших, способных вызывать у человека заболевания.
Важность качественной лабораторной диагностики паразитарных заболеваний определяется во многих случаях трудностью их клинической и эпидемиологической диагностики. Многие инвазии у людей, в т.ч. у детей, нередко протекают субклинически, латентно.
В связи с этим грамотная лабораторная диагностика инвазий приобретает неоценимое значение. Качество лабораторной диагностики и уровень выявляемости зависят от тщательного выполнения всех требований любой методики, правильного выбора материала для исследования, знания циклов развития гельминтов, простейших, а также путей выделения из организма человека, морфологического строения яиц гельминтов и различных форм простейших. На результат анализа также влияет: неправильный забор материала или длительное его хранение, а также отсутствие подготовки больного лечащим врачом перед лабораторным обследованием.
Разнообразие возбудителей, форм паразитирования, и способов выделения диагностических стадий определяет достаточно широкий спектр методов диагностики.
Методы лабораторной диагностики паразитарных заболеваний применяются:
- с диагностической целью;
- для контроля эффективности лечения паразитарных заболеваний;
- для оценки качества проведения комплекса противопаразитарных мероприятий;
- с целью выявления источников заражения;
- для установления уровня пораженности населения.
Данный документ включает паразитологические методы лабораторной диагностики наиболее распространенных паразитарных заболеваний.
2. ОТБОР ПРОБ И УСЛОВИЯ ДОСТАВКИ МАТЕРИАЛА В
ЛАБОРАТОРИЮ ДЛЯ ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом для лабораторных паразитологических исследований на гельминтозы и протозоозы служит различный биологический материал от человека: дуоденальное содержимое, кал, ректальная слизь, моча, мокрота, отделяемое бронхов, кровь, биопсийные ткани и др.
2.1. Отбор проб и доставка фекалий (кала)
- Фекалии после дефекации отбирают из разных участков в количестве не менее 50 г (объем примерно от чайной до столовой ложки).
- Помещают в чистую (прокипяченную), сухую, стеклянную или пластмассовую посуду с крышками.
- Стерильная стеклянная (пластиковая) посуда требуется при заборе кала для исследования на амебиаз.
- Кал должен быть доставлен в лабораторию и исследован в день дефекации, поэтому, как правило, доставляется утренний кал.
- Для обнаружения яиц стронгилоидеса кал доставляется и исследуется не позднее 1 ч после дефекации.
- Для обнаружения личинок стронгилоидеса, яиц анкилостомид и трихостронгилоид исследуется кал не позднее 4 ч после дефекации.
- Для обнаружения вегетативных (подвижных) форм дизентерийной амебы необходимо кал доставить и провести исследование не позднее 20 мин после дефекации или 40 мин, если это время кал сохранялся при температуре 4 град. С.
- Для обнаружения вегетативных форм кишечных простейших (лямблий, диэнтамебы и др.) в жидком и полуоформленном "стуле" время от дефекации до исследования должно быть по возможности сокращено до минимума (не более 1-1,5 ч).
2.1.1. Отбор проб фекалий в консерванты
Используется:
- при невозможности исследования кала сразу же после дефекации или в день поступления материала в лабораторию.
Физический способ хранения фекалий:
- при низкой температуре от 0 до 4 град. С не более суток. Химические консерванты
1. Жидкость Барбагалло: раствор формалина на физиологическом растворе (3 мл формалина 40% + 97 мл физраствора или 1 л дистиллированной воды + 30 мл формалина 40% + 8,5 г хлорида натрия).
2. Раствор формалина 4%-ный.
3. Смесь 4%-ного раствора формалина с равным количеством глицерина.
4. Раствор уксусной кислоты от 3 до 10%.
5. Растворы детергентов 1-1,5%-ные - моющие средства типа "Лотос", "Экстра" (кроме биоактивных); перед приготовлением раствора из порошка удаляют влагу, выдерживая в сухожаровом шкафу при 100 град. С в течение 2 ч.
Заливается кал одним из приготовленных консервантов в объеме 1:1 или 1 часть фекалий и 2 части раствора консерванта, при этом тщательно перемешивается индивидуальной палочкой.
Хранить фекалии в растворах консервантов можно от нескольких месяцев до года, при более длительном хранении возможно разрушение яиц гельминтов.
6. Для консервации простейших кишечника фекалии можно поместить в консервант Турдыева: 80,0 мл 0,2%-ного раствора азотистокислого натрия (0,16 г NaNO2 + 80,0 мл воды дистиллированной) + 2,0 мл глицерина + 10 мл концентрированного формалина (аптечного) + 8,0 мл концентрированного раствора Люголя (см. п. 4.2.4.1.).
Смешивать в соотношении: 1 часть кала и 3 части консерванта.
7. Химические консерванты для консервации и хранения взрослых гельминтов или их фрагментов:
8. Для консервации мышц с личинками трихинелл используется концентрированный раствор хлористого натрия (на 100 мл воды 40-50 г NaCl).
2.1.2. Отбор соскобов с перианальных складок
- Соскоб с перианальных складок можно забирать у обследуемого в лаборатории, или заранее выдавать пробирки с ватными тампонами, смоченными в глицерине, на шпателях или флаконы с глазными палочками, покрытыми специальным клеевым слоем (п. 4.2.3.), предварительно проинструктировав обследуемого (если обследуется ребенок, то родителей ребенка) о способе забора материала и доставке его в лабораторию.
- Утром (вечером и утром обследуемому не подмываться) собрать соскоб с перианальных складок вокруг ануса методом "смыва" или "отпечатка" приготовленным ватным тампоном, смоченным в глицерине, или липкой лентой, или глазными стеклянными палочками со специальным клеевым слоем, как описано в п. 4.2.3.
- После забора соскоба шпатели вкладываются обратно в пробирку, липкая лента наклеивается на предметное стекло, а глазные палочки вкладываются в соответствующий флакон или специальный контейнер с штативами. Пробирки, флаконы, предметные стекла предварительно маркируются (при массовых "обследованиях маркируются цифрами согласно списку обследуемых).
2.2. Отбор дуоденального содержимого (желчь)
- Материал доставляется в лабораторию в чистых химических или центрифужных пробирках сразу после зондирования пациента натощак.
- Доставляют все три фракции (порции "А", "В", "С") и исследуют сразу после поступления в лабораторию.
- Порцию "А" доставляют для исследования на патогенные простейшие двенадцатиперстной кишки (лямблии), личинки стронгилоидеса, трихостронгилид, анкилостомид.
- Порции "В" и "С" доставляют для исследования на яйца гельминтов, паразитирующих в протоках печени и поджелудочной железы.
2.3. Отбор проб мокроты
- Доставляется в лабораторию мокрота, выделенная при откашливании (не слюна и не слизь с носоглотки), в стерильной посуде с крышками (можно в чашках Петри).
- Исследуется сразу после поступления.
2.4. Отбор проб мочи
- Доставляется в лабораторию моча утреннего сбора в чистых стеклянных банках с крышками.
- Исследуется сразу после поступления в лабораторию.
- На шистосомоз - доставляется моча, собранная между 10 ч утра и 14 ч дня, или все порции суточной мочи; желательно собрать мочу после физической нагрузки (например, 20-30 приседаний).
2.5. Отбор проб эпидермиса кожи
- С участков кожи (где изменения кожи или зуд) делают несколько срезов.
- Поверхностные срезы кожи диаметром 2-3 мм делают бескровно, с соблюдением асептики, стерильным лезвием бритвы или глазным скальпелем, предварительно приподняв кожу кончиком стерильной иглы.
- Помещают кусочки кожи в стерильную стеклянную посуду (можно чашки Петри) с физраствором.
- Исследуют сразу после забора материала.
2.6. Биопсия мышечной ткани
(поперечно - полосатой мускулатуры)
- Хирургическим путем получают биопсированные кусочки двуглавой или икроножной мышц (ближе к сухожилию).
- Помещают в стерильную стеклянную посуду с физраствором.
- Исследуют сразу после биопсии.
- Если лабораторное исследование откладывается на какой-то срок, пробы мышц помещают в консервант или замораживают. Консервантом может служить концентрированный раствор хлорида натрия (30-50%).
2.7. Отбор проб для контроля эффективности лечения
кишечных, печеночных гельминтозов и протозоозов
- После лечения геогельминтозов кишечника кал отбирается (п. 2.1.) через месяц после проведенного лечения, а после лечения протозоозов кишечника кал отбирается (п. 2.1. и 2.1.1.) в зависимости от выявленного заболевания: при амебиазе, балантидиазе - сразу после лечения, при лямблиозе - через неделю.
- После лечения контактных гельминтозов: при гименолепидозе кал отбирается (п. 2.1.) через 1 и 6 месяцев после лечения; при энтеробиозе перианальный соскоб отбирается (п. 2.1.2.) через 4-6 дней после лечения.
Читайте также: