Современные методы исследования лямблий

Материалом для исследований служат фекалии и дуоденальное содержимое. В дуоденальном содержимом обнаруживаются только трофозоиты L. intestinalis, в оформленных фекалиях - только цисты, в жидких и полуоформленных испражнениях - трофозоиты и цисты.

Классическим методом лабораторной диагностики лямблиоза являются протозоологические исследования.

· Микроскопическое исследование нативных и окрашенных раствором Люголя мазков из свежевыделенных фекалий.

Подготовка к исследованию.

1. Предварительно нанести на предметные стекла 1-2 капли физиологического раствора, раствора Люголя и метиленового синего.
2. Из пробы кала выбрать обычную порцию и порцию с патологическими признаками (слизь, кровь), смешать с каплей подготовленных на предметном стекле растворов, накрыть покровным стеклом.

Учитывая циклическое выделение цист и трофозоитов с фекалиями, незначительные сроки жизни вегетативных форм во внешней среде, необходимо применять консервирующие жидкости для сохранения паразита в фекалиях и проводить многократные исследования (от 2 - 3 до 6 - 7 раз с интервалами 1-2 дня), а также использовать метод формалин-эфирного обогащения, метод флотации. В большинстве случаев цисты L. intestinalis в кале обнаруживаются уже при первом исследовании. Отрицательные периоды в выделении L. intestinalis могут колебаться от 2 - 3 суток до 2 - 3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз можно также рекомендовать проводить протозоологическое исследование кала в течение 4-5 недель с интервалом в одну неделю.

В дуоденальном содержимом трофозоиты L. intestinalis обнаруживаются с большим постоянством, чем в фекалиях. Однако при паразитировании L. intestinalis в средних и дистальных отделах тонкой кишки результаты исследования дуоденального содержимого могут быть отрицательными, поэтому необходимо проводить исследование кала. Исследование секрета двенадцатиперстной кишки, полученного с помощью трехканального зонда в условиях вакуума, более эффективно для обнаружения паразита, чем микроскопия дуоденального содержимого, полученного с помощью обычных зондов. В настоящее время всё реже используется этот метод, т.к. он очень болезненный для пациента и требуется специально подготовленные сотрудники.

· Метод иммунохроматографического выявления антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноХА - Лямблия - Экспресс).

Набор ИммуноХА - Лямблия - Экспресс предназначен для быстрого, качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммунохроматографического анализа при диагностике лямблиоза и мониторинге лечения.

В основе определения лежит принцип иммунохроматографического анализа. Исследуемый образец всасывается поглощающим участком индикаторной полоски; при наличии в образце антигена лямблий последний вступает в реакцию с моноклональными антителами к антигену лямблий, связанными с частицами коллоидного золота, образуя окрашенный комплекс антиген–антитело. Этот комплекс движется с фронтом жидкости и связывается с другими антителами, иммобилизованными на мембране в виде линии, окрашивая ее в розово-фиолетовый цвет. Не связавшиеся реагенты продолжают двигаться по мембране дальше и образуют розово-фиолетовую линию в зоне контроля. Результаты реакции оценивают визуально(см.Рис. 1).

Положительный результат	Отрицательный результат	Ошибочный результат

Рисунок 1-Индикаторные полоски тест-системы

Выявление в рабочей зоне двух линий (тест и контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. в анализируемом образце фекалий содержится антиген лямблий, что свидетельствует о наличии в кишечнике самих паразитов.

Выявление в рабочей зоне только одной линии (контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. в анализируемом образце антигена лямблий нет или же его концентрация ниже порогового значения.

Если линия контроля не появилась, анализ признается недействительным, и определение необходимо повторить с использованием другой индикаторной полоски.

· Иммуноферментный анализ для определения антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноФА – Лямблия - Ar)

Набор ИммуноФА-Лямблия-Аг предназначен для качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммуноферментного анализа (ИФА) при диагностике лямблиоза и мониторинге его лечения. Набор рассчитан на проведение анализа 94 неизвестных образцов и 2 контрольных проб (всего 96 определений).

Оптическая плотность отрицательного контроля при правильно проведенном анализе должна находиться в пределах 0,050 - 0,100 ед. ОП, а положительного - в пределах 1,0 - 2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Иммуноферментный анализ для определения антител
к антигенам лямблий в сыворотке крови.

Тест-система предназначена для выявления IgM и IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови обследуемых лиц при диагностике острого лямблиоза в комплексе с другими методами, при изучении патогенеза и иммуногенеза лямблиоза в клинических и научно-исследовательских лабораториях.

При правильно проведенном анализе оптическая плотность отрицательного контроля (ОП К¯) должна находиться в пределах 0,050–0,100 ед. ОП, а положительного – в пределах 1,0–2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей ОП К¯на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, ОП К¯ контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Лямблии обитают в начальном отделе тонкой кишки, поэтому для него характерно развитие местных иммунологических реакций. Однако и в сыворотках крови зараженных лямблиями людей выявляются антитела к их антигенам, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов. При воспалении слизистой оболочки кишечника ее проницаемость возрастает, и попадание антигенов лямблий в периферическую кровь увеличивается в результате резорбции. Выявление IgМ к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии острого лямблиоза, диагностика которого возможна на 10 - 14 день от начала инвазии. Выявление IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии хронического лямблиоза.

Анализ на антитела нельзя назвать точным методом диагностики данного заболевания. Обычно полностью антитела к L. intestinalis исчезают из крови через 2-6 месяцев. К тому же иммуноглобулины класса G и M могут появиться в ответ на проникновение иных видов паразитов и бактерий.

В результате сравнительной характеристики лабораторных методов исследования был сделан вывод, что копрологический метод исследования на лямблиоз является наиболее точным и оптимальным, однако требует высокой подготовки и знаний медицинского лабораторного техника при проведении этого исследования. Метод ИФА в основном используется в совокупности с другими методами, поэтому он чаще используется для профилактики.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Лямблиоз — паразитарное заболевание, относящееся к группе кишечных инфекций. Возбудитель, проникая в организм человека, вызывает поражение органов пищеварения (кишечника, двенадцатиперстной кишки, печени). Болезнь распространена как среди взрослых, так и в детских коллективах.

По сведениям статистики, лямблиоз обнаруживают при обследовании у 3–15% взрослого населения и у 30–40% организованных детей, включая школьников. Показатель выше в слаборазвитых странах. Своевременная диагностика лямблиоза позволяется вовремя провести противопаразитарное лечение и избавить людей от развития хронической патологии желудочно-кишечного тракта.

Какие свойства возбудителя необходимо учитывать в способах диагностики?

Лямблия является простейшим одноклеточным жгутиковым микроорганизмом. Паразитирует в основном в начальных отделах тонкого кишечника человека (двенадцатиперстной и тощей кишке). Может существовать в двух формах: вегетативной (трофозоит) и спорах (цисты). Под микроскопом их несложно распознать по характерной грушевидной форме, присоскам и четырем парам жгутиков.

Лямблии питаются через оболочку путем всасывания из кишечника нужных веществ, отнимая их у организма зараженного человека. Размножение осуществляется быстро делением, удвоение численности происходит каждые 10–12 часов. Цисты лямблий снабжены двухконтурной капсулой, овальные по форме.

Находятся только в толстой кишке, выделяются с калом больного во внешнюю среду, где длительно сохраняют жизнеспособность. Эта особенность позволяет сравнительно просто организовать диагностику лямблиоза по исследованию испражнений. Человек заражается через немытые руки, овощи с грядки, воду, загрязненные пищевые продукты, в быту фекально-оральным путем. Возможными переносчиками цист служат домашние животные, мухи, тараканы.

По какой симптоматике можно заподозрить лямблиоз?

Чтобы обнаружить лямблиоз, необходимо знать симптомы заболевания и учитывать возможные формы течения. Предполагаемый диагноз возникает у врача при анализе жалоб пациента, осмотре. Заболевание имеет острую и хроническую форму. Важной особенностью считается практически бессимптомное носительство у ¼ пациентов, слабовыраженные проявления — в половине случаев (субклиническое течение).

Только у 25% зараженных выявляются типичные симптомы лямблиоза (манифестное течение). В зависимости от превалирования признаков поражения органов и систем принято различать 4 формы болезни:

• кишечную — проявляется расстройством функционирования тонкого и толстого кишечника по типу дуоденита, энтерита и гастроэнтерита, вызывает дуодено-гастральный рефлюкс;
• билиарно-панкреатическую — симптомы лямблиоза у взрослых и детей похожи на клинику воспаления и дискинезии желчного пузыря, выводящих путей, панкреатита;
• внекишечную — отличается токсическими и аллергическими признаками, сопровождается неспецифичным астено-невротическим синдромом, вегетососудистой дистонией;
• смешанную — по симптомам сложно в диагнозе определить вариант поражения, для подтверждения необходим анализ на лямблиоз.

Симптомы лямблиоза обычно появляются спустя 1–3 недели после заражения. Такова продолжительность инкубации цист до превращения в вегетативную форму. В острой фазе воспаления пациенты жалуются:

• на неинтенсивные боли вокруг пупка, в подреберье справа;
• снижение аппетита;
• тошноту;
• тяжесть в зоне эпигастрия;
• отрыжку;
• усиленное газообразование в животе;
• склонность к диарее (стул до 5 раз за сутки, водянистый, пенистый, затем приобретает жирный блеск), понос может чередоваться с запором.

Если лямблиоз переходит в хроническую стадию, то пациенты заметно худеют, становятся раздражительными, страдают от повышенной усталости, слабости, непостоянных признаков гастродуоденита, дискинезии кишечника, еюнита (воспаление тощей кишки). Выраженность интоксикации зависит от массивности попадания цист в организм человека, длительности болезни.

Возможно повышение температуры, воспаление региональных лимфоузлов, аденоидов. Действием токсинов при лямблиозе на нервную систему объясняется резкая смена настроения, раздражительность, головокружение, снижение артериального давления.

В детском возрасте при обследовании неврологи обнаруживают нервные тики, навязчивые движения (гиперкинез), склонность к обморокам. Изменения кожи заключаются в повышенной сухости с шелушением, зудящих высыпаниях в виде пузырьков, кератозе, крапивнице, других видах дерматита.

Заподозрить лямблиоз у пациента необходимо при упорном блефарите и конъюнктивите (воспалении век и оболочек глаза). Аллергические проявления иногда доходят до астматического бронхита и бронхиальной астмы.

Как выявляют лямблиоз лабораторными способами?

Из приведенных клинических симптомов лямблиоза видно, что пациенты с подобными проявлениями могут длительно лечиться у гастроэнтеролога, невролога, окулиста, дерматолога, аллерголога-иммунолога. УЗИ, холецистография только подтвердят наличие повреждения гепатобилиарной системы, но не помогут в выявлении причины.

Общие лабораторные методы мало специфичны для лямблиоза, но показывают уровень нарушений:

• В общем анализе крови обычно настораживает моноцитоз и эозинофилия.
• Среди биохимических тестов выявляется снижение белка крови (как альбуминов, так и глобулинов), рост фермента щелочной фосфатазы.
• В анализе кала обнаруживаются копрологические признаки воспаления и нарушения переваривания: много жировых включений, непереваренные волокна, слизь, лейкоциты, эритроциты.

Современный уровень диагностики требует обязательного проведения паразитологического анализа на лямблиоз. Учитывая этапность развития микроорганизма диагноз должен подтверждаться выявлением в кале цист лямблий, в содержимом двенадцатиперстной кишки — вегетативных форм. Для этого проводят микроскопию мазков взятого материала.

Начиная с подросткового возраста, микроскопическим способом можно выявить лямблии в желчи, ее исследуют после дуоденального зондирования. Эта процедура у детей невозможна. Микроорганизмы обнаруживаются на стекле (инвитро) по характерным признакам, для улучшения выявляемости лямблиоза используется специальная окраска.

Инфекционисты рекомендуют для более точной выявляемости учитывать цикличность размножения и выделения форм паразита с испражнениями. Для этого лучше сдать анализ повторно за месяц от трех до пяти раз с перерывами в 1–2 недели.

Метод прост в проведении не требует больших затрат. Забор кала производится в специальную стерильную емкость. Необходимо взять подозрительные скопления слизи, частицы с измененным цветом. Цисты обнаруживают при доставке в течение суток. Обнаружить вегетативную форму лямблий значительно сложнее, поскольку они погибают через 60 минут после дефекации. Значит, материал должен быть доставлен как можно быстрее или забор следует производить в лечебном учреждении.

Косвенное значение имеет исследование кала на кишечную флору. Подсчет показывает способность лямблий снижать долю бифидо- и лактобактерий, стимулировать рост прочих микроорганизмов, активизировать появление патогенных стафилококков, стрептококков, грибков.

Лямблиоз – одна из наиболее распространенных глистных инвазий. Ее диагностируют у 5% взрослого населения. Среди детей болезнь встречается у каждого второго ребенка, который посещает дошкольные и школьные учебные заведения. Диагностика лямблиоза происходит различными методами, чаще всего материалом исследований служат кровь и кал.

Симптомы и диагностика

Лямблиоз – глистная инвазия, при которой поражаются ткани тонкой кишки, что приводит к расстройству пищеварения, появлению аллергических и неврологических патологий.

Основные симптомы заболевания:

• длительное расстройство стула с невыясненной этиологией, тошнота;
• субфебрильная температура, которая держится долгое время;
• дерматологические проблемы – экзема, крапивница, дерматит;
• депрессивное состояние.

Дети, зараженные лямблиями, начинают терять вес, возможны отклонения в физическом и умственном развитии.

Важно! Практически у 70% людей с сильными аллергическими реакциями при обследовании выявляют наличие лямблий.

Обязательную диагностику на наличие паразитов проходят младшие школьники после летних каникул, дети всех возрастов при оформлении в лагерь, санаторий, анализ на лямблиоз необходим для получения справки в бассейн. Регулярно сдают анализы на лямблиоз работники общепита, дошкольных и школьных учебных заведений.

Также исследование показано людям с хроническими заболеваниями желудка и кишечника, иммунодефицитными состояниями.

Важно! Ни один метод диагностики не может гарантировать 100% отсутствие или наличие лямблий в организме.

Какие методы наиболее информативны

При проявлении клинических симптомов глистной инвазии необходимо посетить терапевта и инфекциониста, пройти комплексное обследование, которое включает анализ определенных биоматериалов.

Основные методы диагностики лямблиоза:

• копрограмма – специальные реагенты позволяют обнаружить цист в кале;
• лабораторная диагностика лямблиоза – исследование направлено на обнаружение вегетативных форм червей в двенадцатиперстной кишке и ее содержимом;
• биопсия – исследование тканей тонкой кишки.

Биопсия – наиболее ценный вид диагностики лямблиоза у взрослых. Недостаток метода – высокая стоимость. Его назначают при невозможности установить точный диагноз при помощи других методов диагностики, при подозрении на наличие опухоли в кишечнике.

ПЦР – эффективный метод, достоверность которого составляет не менее 92%. С его помощью можно выявить в ДНК гены лямблий даже при отсутствии цист. Метод дорогостоящий, сделать анализ можно не в каждом крупном городе.

Энтеротест – один из наиболее современных видов диагностики, основанный на использовании нити из нейлона. Пациенту следует проглотить желатиновую капсулу, внутри которой находится нить – оболочка растворяется под воздействием желудочного сока, гельминты налипают на нить. Через несколько часов нить выходит из организма естественным путем, а каловые массы отправляют на микроскопическое исследование. Этот вид используют для диагностики лямблиоза у детей.

Дополнительно врач для диагностики лямблиоза у взрослых и детей может назначить исследования желчи для выявления нарушений и патологий обмена желчных кислот. УЗИ назначают для выявления патогенных изменений в желчевыводящей системе, печени и поджелудочной железе.

Важно! Все люди, у которых выявлены лямблии, должны пройти полный медикаментозный курс лечения, даже если отсутствуют клинические проявления инфицирования.

Как диагностировать микроскопическим методом

Микроскопический метод чаще всего используют для выявления наличия в организме лямблий. Метод несовершенен, поскольку лямблии откладывают цисты неравномерно, часто диагностика показывает ложноотрицательный результат. Исследованию подлежит кал или желчь, полученные после дуоденального зондирования.

Важно! Дуоденальное исследование желчи назначают ребенку старше 10 лет – для маленьких детей эта процедура довольно сложная.

Диагностика по калу предназначена для выявления личинок лямблий. Для точного диагноза нужно сделать 3 анализа с интервалом в 7–12 дней. Кал на выявление паразитов лучше сдавать в полнолуние, или за 2–3 дня до и после него – в эти моменты гельминты более активны. При помощи, развернутой копрограммы определяют наличие патологического копрологического синдрома.

Для анализа нужно собрать примерно 5–10 г каловых масс, брать нужно подозрительные фрагменты, в которых присутствуют вкрапления слизи, наблюдается изменение цвета и консистенции. Материал для исследования нужно поместить в чистую емкость из стекла или пластмассы, отправить в лабораторию в течение 24 часов.

В жидком стуле можно обнаружить и вегетативную форму гельминтов, но в этом случае каловые массы нужно доставить в лабораторию в течение четверти часа – вегетативные формы гибнут через час после дефекации.

Когда будет готов результат? Скорость обработки биоматериала зависит от лаборатории. В частных медицинских заведениях результат можно узнать через 2 дня. При сдаче кала в государственную лабораторию результаты можно узнать через 2–3 недели.

Дополнительно делают анализ каловых масс на дисбактериоз. Лямблии разрушают нормальную микрофлору, что приводит к снижению количества кишечных палочек, бифидумбактерий. У детей на фоне дисбактериоза появляются условно-патогенные микроорганизмы – протеи, грибы рода кандида, стафилококк.

Современные методы диагностики позволяют обнаружить в кале специфические антитела. Иммуноэлектрофорез, иммунодиффузия. ELISA – наиболее достоверные методики иммунной диагностики каловых масс.

Диагностика по крови

Диагностика лямблиоза у взрослых и детей по анализу крови происходит путем серологических исследований. Достоверность результата – до 80%. Через 2–4 недели после инфицирования паразитами в крови появляются специфические антитела (иммуноглобулины), которые призваны бороться с чужеродными микроорганизмами. За 8 часов до сдачи крови нужно полностью исключить еду, разрешается пить негазированную воду.

Что показывает диагностика:

• антитела IgM – патология находится в острой фазе;
• иммуноглобулины IgG – глистная инвазия носит хронический характер;
• повышенная концентрация антител двух видов – обострение хронического лямблиоза.

Этот метод для диагностики лямблиоза используют все реже, поскольку иммуноглобулины M и G могут свидетельствовать о наличии многих видов паразитов.

Важно! При сильном снижении иммунитета антитела к лямблиям могут не обнаруживаться. Это бывает при лимфатико-гипопластическом диатезе у детей или при часто рецидивирующем лямблиозе у взрослых.

Клинический анализ крови при заражении лямблиями показывает повышенное содержание эозинофилов, лейкоцитов, лимфоцитов, высокую СОЭ. При лямблиозе снижается уровень гемоглобина.

Лямблии в печени

Попадая в организм, лямблии нарушают работу органов пищеварительного тракта и проникают в печень. Первичная диагностика лямблиоза печени происходит на основе осмотра и сбора анамнеза пациента.

Признаки присутствия лямблий в печени:

• печень увеличена в размерах;
• урчание, отрыжка и метеоризм;
• язычная мышца обложена желтым налетом;
• вздутие брюшной полости.

При лямблиозе печени возникают частые боли в области возле пупка и правого подреберья.

Помимо анализа крови и кала, при подозрении на лямблиоз необходимо сделать печеночные пробы, УЗИ печени.

При помощи биохимической гепатограммы (печеночных проб) выявляют признаки дискинезии желчевыводящих путей, которая сопровождается холестазом. При этом результат анализа показывает повышенное содержание щелочной фосфатазы.

Лямблиоз предается контактно-бытовым путем, источником заражения могут быть инфицированные люди, некоторые домашние животные. Заразиться можно при купании в грязных водоемах, после употребления неочищенной воды. При обнаружении лямблий у одного из членов семьи диагностике и лечению подлежат все домочадцы и домашние питомцы.

Диагностика лямблиоза — задача трудная. Патогомоничные симптомы у заболевания отсутствуют. Зачастую клиническая картина лямблиоза наслаивается на таковую других заболеваний желудочно-кишечного тракта. Не всегда удается по целому ряду причин выявить антитела в сыворотке крови. У микроскопического метода также имеются свои ограничения — неспособность отличать близко родственные виды лямблий, а периодичность выделения цист делает копрологический метод диагностики менее информативным.

Анализ на лямблии включает в себя анализ кала, крови и дуоденального содержимого:

1. Микроскопия нативного (неокрашенного) и окрашенного раствором Люголя мазка на предмет обнаружения цистных форм в оформленных и прецистных форм паразита в жидких испражнениях. При поносе и в дуоденальном содержимом выявляются вегетативные формы возбудителей.
2. Обнаружение вегетативных форм лямблий при дуоденальном зондировании. Дуоденальная биопсия является наиболее надежным методом диагностики.
3. Выявление антител к возбудителю в сыворотке крови с применением ИФА и РНИФ является более чувствительным методом. В некоторых лабораториях производятся анализы на выявление антигенов паразитов в кале. Данная методика при диагностике лямблиоза является более предпочтительной, чем поиск цист в фекалиях больного.
4. Высокочувствительным считается молекулярно-генетический метод.
5. Лямблии культивируются на искусственных питательных средах, но данная методика на практике не применяется.

В связи с отсутствием 100% чувствительности каждого из вышеперечисленных методов диагностика лямблиоза должна проводиться комплексно.

Рис. 1. На фото лямблии (вегетативная форма паразита, трофозоиты).

Паразитологическое исследование

При подозрении на заболевание сдаются анализы на лямблии: исследуются фекалии и дуоденальное содержимое. В фекальных массах выявляются цисты, при поносе (в жидких фекальных массах) выявляются и цисты и трофозоиты, в дуоденальном содержимом выявляются только трофозоиты (подвижные вегетативные формы паразитов).

Рис. 2. Лямблии под микроскопом.

Рис. 3. На фото подвижные вегетативные формы лямблий (на фото вверху) и циста паразита (фото внизу).

Копрологический метод исследования (анализ кала на лямблии) является наиболее доступным, но менее информативным. С его помощью выявляются цисты паразитов, выделяемые больным с фекальными массами с 5 — 7 дня заболевания прерывисто, через каждые 2 — 21 день (в среднем через 8 — 14 дней).

Анализ на лямблии должны сдавать больные с заболеваниями желудочно-кишечного тракта со склонностью к хроническому течению, с сопутствующей нейроциркуляторной дисфункцией, с длительной эозинофилией и аллергическими заболеваниями.

Оптимизация копрологического исследования может быть достигнута следующим путем:

• проведение 4 — 5 кратного анализа кала на лямблии с интервалами 7 — 8 дней;
• исключение на 5 — 7 дней приема противопаразитарных препаратов;
• при невозможности доставить в лабораторию свежесобранный кал рекомендуется применение консервантов с расчета на одну часть кала три части консерванта;
• при запорах необходимо накануне проведения анализа кала на лямблии принять слабительное средство (гуталакс, сенаде и др.) и/или желчегонные препараты.

Рис. 4. На фото вегетативные формы паразитов — трофозоиты (электронная сканирующая микроскопия).

Рис. 5. Трофозоит (фото А) и цисты лямблий (фото В).

В дуоденальном содержимом при лямблиозе выявляются подвижные формы лямблий (вегетативные формы, трофозоиды) с большей частотой, чем в фекалиях. Однако если лямблии паразитируют в более низких отделах тонкого кишечника, получаются отрицательные результаты исследования. Исследования дуоденального содержимого должно проводиться одновременно с исследованием кала. В последнее время данный вид исследования применяется редко.

Рис. 6. На фото вегетативные формы (трофозоиты) Lamblia intestinalis, меченные антителами (флуоресцентное окрашивание, непрямая РИФ).

Иммунологические методы исследования

Анализ крови на лямблии сдается с целью выявления специфических иммуноглобулинов. Считается, что основным фактором патогенности Lamblia intestinalis (основным иммуногеном) является антиген Аг GSA-65, на основе которого созданы современные тест-системы, которые применяются для диагностики данного заболевания.

Методы иммуноферментного анализа (ИФА) и иммунофлуоресценции (РНИФ) являются перспективными в лабораторной диагностике лямблиоза. С их помощью выявляются сывороточные иммуноглобулины классов G и M больных и носителей и антигены в пробах фекалий. Чувствительность и специфичность данных методов диагностики лямблиоза составляет более 90%.

• Иммуноглобулины IgM и IgG появляются в крови с 12 — 14 дня заболевания. Наличие одновременно иммуноглобулинов IgM и IgG говорит о наличии у больного лямблиоза. После санации IgM исчезают, а IgG сохраняются до двух месяцев.
• УровеньIgM (при отсутствии IgG) говорит о наличии острого лямблиоза у больных, инвазия у которых произошла не более 3-х месяцев назад.
• Уровень IgG (в сочетании или без IgM) указывает на хроническое течение лямблиоза или на начальную стадию реконвалесценции острого лямблиоза.

Чем выше уровень антител в сыворотке крови больного, тем чаще наблюдается отрицательное цистовыделение.

Антитела не определяются у детей с лимфатико-гипопластическим диатезом и у больных с неэффективными механизмами гуморальной защиты, что способствует хронизации инфекционного процесса. Лечение лямблиоза в данном случае проводится по индивидуальным схемам.

Анализ на лямблии с одновременным использованием серологических и копрологических методов дает возможность более качественно выявлять заболевание. Диагностика лямблиоза только на основании результатов копрологических методов исследования считается неоправданной.

Рис. 7. На фото цисты Lamblia intestinalis.

Биопсия кишечника

Биопсия тонкого кишечника является ценным диагностическим методом исследования, позволяющая выявит и оценить степень повреждения слизистой оболочки и обнаружить паразитов. Методика используется в крайних случаях.

Рис. 8. При лямблиозе повреждаются ворсинки слизистой оболочки тонкого кишечника. На фото слева микроскопия биопсийного материала больного лямблиозом. На фото справа лямблии продвигаются к ворсинкам кишечника.

Дополнительные методы диагностики лямблиоза

При заболевании у больного проводится общий анализ крови.

Рис. 9. Эозинофилия говорит о развитии аллергических реакций у больного лямблиозом (фото слева). При длительном и тяжелом течении заболевания развивается анемия (фото справа).

Дифференциальная диагностика лямблиоза

Лямблиоз следует отличать от бактериальных и вирусных гастроэнтеритов. Схожую картину дают кишечные гельминтозы, бактериальная и амебная дизентерия.