Техника препарирования гельминтов биология
Посмертная диагностика гельминтозов осуществляется при вскрытии трупов и исследовании туш сельскохозяйственных животных и обнаружении гельминтов и характерных патологоанатомических изменений в органах и тканях. Некоторые гельминтозы (аскаридоз, фасциолез, диктиокаулез, метастронгилез и др.), возбудителями которых являются крупные гельминты, могут быть диагностированы при патологоанатомическом вскрытии.
Однако многие гельминтозы, вызванные мелкими паразитическими червями, можно точно диагностировать только путем гельминтологических вскрытий. Различают несколько модификаций гельминтологических вскрытий животных: 1) метод полных гельминтологических вскрытий животных по К. И. Скрябину - предусматривает обследование всех без исключения органов и тканей хозяина с целью обнаружения и сбора всех паразитических червей в имагинальной стадии; 2) метод полных гельминтологических вскрытий отдельных органов по К. И. Скрябину - позволяет установить степень инвазированности отдельных органов определенными видами паразитических червей (при диктиокаулезе тщательно исследуют трахею и бронхи, при простогонимозе - яйцевод и фабрициеву сумку птиц и т.д.); 3) метод неполных гельминтологических вскрытий - обычный патологоанатомический метод вскрытий, при котором выявляют только наиболее крупных гельминтов (аскарид, мониезий и т.д.); 4) метод парциальных гельминтологических вскрытий (по Шульцу и Шахназаровой) - предусматривает исследование (макроскопическое или с помощью лупы) только части содержимого органов вместе с гельминтами (матриксов).
Метод полного гельминтологического вскрытия по К.И. Скрябину
Исследование отдельных органов методом последовательного промывания требует большого количества воды и посуды (ведер, тазов и др.). Этим методом всегда исследуют органы пищеварительного аппарата, печень и легкие сельскохозяйственных животных, взрослых птиц путем многократного промывания водой их полостей с последующим просмотром матриксов поочередно на черном и белом фоне.
Исследование органов и тканей компрессорным методом применяют реже предыдущего метода. Он заключается в нарастающем раздавливании мелкого органа, или его отдельной части, или соскоба со слизистой оболочки кишечника между компрессорными или другими стеклами до прозрачности. Приготовленный таким образом препарат просматривают под лупой или под малым увеличением микроскопа. Обнаруженных гельминтов осторожно извлекают после разъединения стеклянных пластинок. Используют при гельминтологических вскрытиях цыплят, утят, гусят, моллюсков и других мелких животных. Иногда при вскрытии животных эти методы целесообразно комбинировать.
Органы пищеварения осторожно изолируют и кладут в отдельные кюветы пищевод, желудок (отдельно преджелудки у жвачных), тонкие кишки, толстые кишки, печень и поджелудочную железу. После разделения органов приступают к их вскрытию.
Желудок вскрывают по большой кривизне; содержимое его помещают в цилиндр. Опорожненный желудок смывают водой в этот же сосуд, доливают водой, размешивают деревянной палкой и оставляют в покое на 10-15 минут. Со слизистой желудка берут соскоб и исследуют компрессорным методом. После отстаивания верхний слой жидкости осторожно сливают (чтобы не выбросить паразитов), а сосуд с осадком вновь наполняют водой, размешивают содержимое и опять отстаивают. Периодическое промывание осадка в цилиндре повторяют до просветления жидкости. После очередного сливания жидкости (последнего) осадок просматривают макроскопически и под лупой.
У птиц два желудка: железистый и мышечный. Вскрытый железистый желудок ополаскивают в кювете (для последовательного промывания в дальнейшем). Расправленный желудок рассматривают против источника света. В железах можно обнаружить округлых самок тетрамер красного цвета. На границе мышечного и железистого желудков нередко находят узлы, заключающие в себе нематод (эхинурий). Со стороны серозной оболочки железистого желудка уток иногда обнаруживают утолщения величиной до грецкого ореха, в которых находятся нематоды (гистрихи), у которых головной и хвостовой концы выдвинуты в просвет желудка. Мышечный желудок разрезают ножницами вдоль одной из его боковых сторон, развертывают его, ополаскивают в кювете. Содержимое желудка исследуют методом последовательного промывания. Затем отделяют кутикулу от слизистой оболочки, где часто обнаруживают у водоплавающих птиц стрептокар и амидостом. Иногда внутреннюю оболочку кутикулы исследуют под лупой.
Тонкие и толстые кишки вскрывают отдельно в кюветах с водой. Вначале тонкие кишки освобождают от брыжейки (расправляют) и жира. Затем разрезают по стороне, противоположной прикреплению брыжейки. Содержимое кишечника помещают в один цилиндр, а глубокий соскоб со всей слизистой оболочки - в другой цилиндр и после промывания (до просветления) осадок исследуют макроскопически и под лупой. Таким же образом вскрывают и толстые кишки. У птиц следует вскрывать отдельно 12-перстную кишку от тонких кишок и прямую кишку от слепых кишок с целью обнаружения цестод и трематод некоторых видов, приспособившихся к паразитированию в этих органах.
Печень кладут в эмалированную кювету белого цвета, отделяют желчный пузырь, который помещают в отдельную небольшую посуду, где его разрезают и заливают водой и несколько раз промывают. Печень в сосуде с водой значале разрезают ножницами по ходу желчных ходов, затем разрывают руками на мелкие кусочки, доливают в сосуд воды. Дальнейшее исследование измельченного содержимого проводят методом последовательного промывания. После этого осадок просматривают.
Поджелудочную железу исследуют методом последовательного промывания после предварительного измельчения руками.
Органы дыхания. Гортань, трахею, бронхи разрезают и осматривают; делают соскобы со слизистой, исследуют компрессорным способом. Паренхиму легких заливают водой, раздробляют на мелкие части и исследуют методом последовательного промывания. Для пораженных участков (осевших на дно) также применяют компрессорный метод.
Половые органы исследуют методом соскоба, последовательного промывания и компрессорно.
Мочевые органы. В почках макроскопически осматривают почечную лоханку (после предварительного разреза), а паренхиму исследуют компрессорным способом под лупой. Мочевой пузырь и мочеточники вскрывают, осматривают; со слизистой оболочки делают глубокий соскоб. Мочу исследуют методом последовательного промывания.
Глаза вскрывают, просматривают внутренние сферы, веки конъюнктивальный мешок и исследуют методом последовательного промывания.
Мозг (головной и спинной) разрезают на ломтики и исследуют компрессорным методом под лупой.
Сердце и крупные кровеносные сосуды вскрывают в физиологическом растворе и исследуют методом последовательного промывания, контролируя осадок на черном и белом фоне, с последующим проведением через лупу.
Содержимое брюшной и грудной полостей можно исследовать также методом последовательного промывания.
Сбор, консервирование, этикетирование и пересылка гельминтов
Обнаруженных паразитических червей в органе или его содержимом извлекают препаровальной иглой, кисточкой (крупных паразитов - пинцетом) и переносят в отдельные пробирки с консервирующей жидкостью; нематод сразу помещают в жидкость Барбагалло (3%-ный раствор формалина на физиологическом растворе), а трематод, цестод и скребней вначале помещают в воду, где они погибают, затем прессуют и переносят в пробирки с 70°-ным спиртом. Цистицерков, ценуров, эхинококков консервируют в жидкости Барбагалло. Внутрь каждой пробирки кладут бумажную этикетку, где простым карандашом или тушью отмечают вид и пол животного (от которого собраны гельминты), номер вскрытия (как это записано в журнале вскрытия), орган, где обнаружены гельминты, какие паразиты и их число; на обороте этикетки отмечают место, где произведено вскрытие, дату вскрытия и фамилию вскрывавшего. Результаты полных и неполных гельминтологических вскрытий регистрируют в специальном журнале.
Собранный, законсервированный и заэтикетированный гельминтологический материал необходимо предохранить от высыхания. Для этого пробирки с гельминтами помещают в банку с притертой пробкой или навинчивающейся пластмассовой крышкой. На дно банки настилают вату, затем устанавливают вертикально два-три яруса пробирок и заливают жидкостью, которая находится в пробирках. Незаполненное пробирками пространство плотно тампонируют ватой. При транспортировке (с нарочным) банку снаружи обкладывают упаковочным материалом (ватой, стружками).
При сборе небольшого количества гельминтов их можно помещать в небольшие флаконы (из-под пенициллина), а также в баночки с навинчивающейся крышкой, которые перед закупоркой заливают консервирующей жидкостью. Иногда собранный материал посылают в хорошо упакованном виде почтовой посылкой.
Собранные во время гельминтологических вскрытий гельминты определяют до вида после предварительного их просветления и окраски. Просветляют нематод, акантоцефал, а также сколексы (головки) цестод в молочной кислоте, 50%-ном глицерине или смеси равных частей молочной кислоты и глицерина, для чего готовят временные препараты. Сложнее определять трематод и цестод ввиду необходимости их окраски и приготовления из них постоянных препаратов. Для окраски этих гельминтов предложено значительное число красок и методов. В практических условиях чаще используют квасцовый кармин.
Как правило, используется метод К.И.Скрябина, позволяющий получить достаточно полные представления об экстенсивности и интенсивности инвазии животного половозрелыми гельминтами.
Полное вскрытиенаиболее трудоемкое, его цель заключается в скрупулезном анализе гельминтофауны животного, этот метод дает самые надежные результаты.
Неполное вскрытиеболее упрощенное и направлено на сбор отдельных крупных форм, применяется при патологоанатомических обследованиях для выяснения причин гибели животного и установления видового состава массовых паразитов.
Полное вскрытие отдельных органов.Используется для решения специальных проблем (изучение распространенности отдельных видов гельминтов). При этом вскрытию подвергаются один или несколько органов, в которых локализуются наиболее важные паразиты.
Неполное вскрытие отдельных органовчаще всего применяется при вспомогательных зоологических исследованиях (определение пола животного, препарирование и т.д.).
Указание метода вскрытия в отчетах строго обязательно, т.к. позволяет дать оценку общей зараженности животного.
Методика гельминтологических вскрытий млекопитающих.
Этап 1. Разделка животного и сортировка органов.Включает измерение и взвешивание (для определения возраста), тщательный наружный осмотр (для выявления нематод - паразитов подкожной клетчатки, повреждающих кожные покровы), затем следует снятие кожи и осмотр подкожной клетчатки. Для проведения вскрытий необходим набор посуды для раскладки органов. При этом ванночки используют для мелких органов, а ведра и тазы для крупных. Нужен полный набор инструментов: он включает ножницы, скальпели, пинцеты различных размеров, топорик для вскрытия грудной полости и ножовку для вскрытия черепа. Разделка проводится следующим образом. Скальпелем или топориком по медианной линии вскрывают грудную клетку, делаются надрезы чуть выше глотки и гортани, а также вдоль трахеи, по ее наружной части. Трахея и легкие препарируют и помещают в отдельную посуду, но сердце пока оставляют на месте. Затем вскрывают и осматривают брюшную полость, а пищевод, желудок и кишечник с брыжейкой размещают в отдельной посуде. Вместе с кишечником вынимают печень, поджелудочную железу и селезенку и заливают их водой (если животное крупное, то сразу же проводят сортировку). После вычленения пищеварительного тракта от глотки до ануса извлекают сердце с крупными венозными и артериальными сосудами, а затем препарируют диафрагму, почки, мочевой пузырь, половые органы, раскладывая по отдельным эмалированным или пластмассовым ванночкам, кюветам, чашкам или тазикам. После этого в специально подготовленную посуду производится смыв полости тела для извлечения гельминтов, обитающих там или попавших случайно во время вскрытия. После изъятия всех органов следует внимательный осмотр грудной и брюшной серозных полостей, извлечение спинного мозга, вскрытие полостей суставов, отбор образцов мышц различных групп (межреберных, жевательных и т.д.) для обследования на трихинеллез. После этого отделяют голову для обследования глаз, полостей, головного мозга. У самок обследованию подлежат молочные железы.
Этап 2. Подготовка смывов и соскобов к просмотру и вскрытие отдельных органов.При вскрытии мелких объектов, а также отдельных органов используют сухой (компрессорный) способ. В остальных случаях применяют мокрый способ: из различных органов и тканей делаются последовательные смывы водой или физиологическим раствором. Смыв сливают в стеклянный цилиндр (или банку): гельминты при этом оседают на дно. Процедуру повторяют до полной очистки от крови и слизи и отстоя взвеси.
При вскрытии головы внимательно обследуются носовые полости (круглые черви - паразиты органов дыхания), лобная пазуха (трематоды и нематоды ярко-красного цвета), глаза, особенно слезные каналы, где могут встречаться нематоды, головной и спинной мозг (личиночные формы цестод и половозрелые нематоды). Обследование пищеварительного тракта включает работу с пищеводом (гельминты локализуются в слизистой – их выявляют при сдавливании стенок стеклами компрессория и прямыми соскобами слизистой), разрез, соскобы и промывание желудка. Кишечник медленно вскрывается по всей длине, по стороне, противоположной прикреплению брыжейки, причем ножницы не вводят глубоко в просвет кишечной трубки: вскрытие больше напоминает скольжение. Содержимое кишки удаляют прополаскиванием, для обследования используют просматривание между стеклами и соскобы. Желчный пузырь заливают водой и вскрывают ножницами, а затем ведут поиск гельминтов под лупой. Печень и поджелудочную железу просматривают между стеклами, делают соскобы, а при вскрытии крупных животных прибегают к последовательному промыванию. Во время обследования органов дыхания в первую очередь извлекаются гельминты из просветов дыхательных путей. Затем трахею отделяют от легких, разрезают ножницами, делают в воде соскоб скальпелем и просматривают под лупой. Крупные и средние бронхи вскрывают ножницами, промывают струйкой воды, а собранную жидкость просматривают под бинокуляром. Паренхиму легких тщательно прощупывают пальцами, т.к. вокруг трематод или некоторых нематод образуются узелки (капсулы). Затем легкие рвут на мелкие части и заливают водой, а осадок просматривают под лупой. Кусочки легочной паренхимы исследуют компрессорно. Сердце и крупные кровеносные сосуды осматривают, а затем вскрывают в физиологическом растворе, промывают от крови и исследуют осадок. Почки разрезают и изучают почечную паренхиму (компрессорно или путем промывания). Мочевой пузырь вскрывают, мочу обследуют способом промывания, а стенки пузыря и мочеточников компрессорно и путем глубоких соскобов. Половые органы исследуют у самок методом соскоба, а у самцов компрессорно. Особо нужно рассмотреть приемы обследования мышц на трихинеллез. Делают это следующим образом. Производится отбор мышц ножек диафрагмы, межреберных, жевательных мышц и мышц языка. Их изучение проводят при помощи специального компрессория, который снабжен механическим приспособлением для сжатия проб. Исследованию подвергают 24 маленьких кусочка мышц; их просматривают под микроскопом или бинокуляром при 24-кратном увеличении. Более точные данные можно получить ускоренным методом переваривания по П.А.Владимировой. Для этого 10 г тонко измельченных мышц помещают в колбу Эрленмейера и заливают искусственным желудочным соком (1,0 мл соляной кислоты и 3,0 пепсина на 100,0 мл воды). Отношение веса мышц к объему сока должно быть 1:25. Колбу помещают в термостат на 3-4 ч. при температуре 42-47°. После окончания переваривания верхний слой (это почти половина) осторожно сливается, а остальная часть разливается по пробиркам емкостью 50 мл на 20-30 мин. для отстаивания. Затем верхний слой сливают, а осадок (10-15 мл) переносят в часовое стекло или чашку Петри.
Этап 3. Просмотр смывов и соскобов и выборка гельминтов.Проводят в чашках Петри небольшими порциями под бинокуляром (8-16-кратное увеличение) или дорожным микроскопом. Для выборки гельминтов используют пинцет (для крупных форм) или препаровальную иглу или глазную пипетку (для мелких). Для обследования тканей используют ветеринарный компрессорий, или стекла толщиной 3-4 мм размером 15х8 см. Извлеченных червей помещают в чашки Петри или часовые стекла и заливают водой или физиологическим раствором. Виды с нежной кутикулой, лопающейся в воде, - например, нематоды из тканей, полостей тела, кровеносных сосудов, легких - могут находиться только в физиологическом растворе. Для очистки гельминтов от слизи или фрагментов тканей пользуются кисточкой.
Этап 4. Фиксация. Трематод, цестод и скребней сохраняют в 70° спирте (1000 мл 95° спирта-ректификата на 390 мл воды). Нематод фиксируют в жидкости Барбагалло - 3% раствор формалина (40% формальдегида) на физиологическом растворе (т.е. 0,8% растворе поваренной соли), предохраняющей их от деформации. Крайне желательно, по возможности, фиксировать гельминтов живыми. Каждая проба снабжается этикетками.
Диагностика (от греч. diagnostikos — способный распознавать) — методы исследования животных для распознавания болезней и состояния организма с целью назначения необходимого лечения и проведения профилактических мероприятий.
Диагностика гельминтозов имеет свои особенности, и точный диагноз может быть установлен в случае выявления возбудителей болезни. С этой целью применяют методы прижизненной и посмертной диагностики. В зависимости от цели диагностику гельминтозов проводят для научно-исследовательских или профилактических работ, для установления экстенсивности и интенсивности инвазии, а также для дифференциации возбудителей.
Прижизненная диагностика базируется на изучении эпизоотологических данных (зональные особенности болезни, видовой состав возбудителей, порода и возраст животных, время года, источник инвазии), клинических симптомов болезни и результатов лабораторных исследований.
Основное значение придают гельминтокопроскопическим и специальным исследованиям крови, мочи, молока, кожи, мышц, сухожилий, истечений из глаз, содержимого желудка. При положительных результатах обнаруживают яйца, личинки, половозрелых гельминтов или их фрагменты, эозинофилию.
Гельминтокопроскопические исследования разделяют на гельминтоскопические (обнаружение половозрелых гельминтов или их фрагментов), гельминтоовоскопические (от лат. ovum — яйцо) и гельминтоларвоскопические (от лат. larva — личинка), во время которых находят яйца или личинки паразитических червей.
Для исследований рукой в резиновой перчатке берут 4-10 г фекалий из прямой кишки или с пола, если они свежие и известно, какому животному принадлежат. От свиней, телят, овец, коз фекалии следует брать средним и указательным пальцами в перчатках. У кроликов фекалии (несколько шариков) получают нажатием на брюшную стенку в участке прямой кишки. От птиц, пушных зверей, плотоядных животных, диких хищников (в зоопарках) фекалии собирают с пола клеток (групповые пробы).
Гельминтоскопические методы диагностики. Гельминтоскопию применяют для обнаружения половозрелых и молодых паразитических червей ил и их фрагментов в фекалиях, а также в полостях и органах больных животных.
Гельминтоовоскопические методы диагностики. Гельминтоовоскопия охватывает большое количество исследовательских приемов, которые используют для обнаружения яиц паразитических червей. Следует помнить, что интенсивность выделения яиц гельминтами зависит от многих факторов. Например, в период лактации у овец значительно повышается выделение яиц кишечных нематод. Наоборот, осенью со снижением температуры воздуха у возбудителей диктиокаулеза наступает половая депрессия.
Яйца гельминтов нужно дифференцировать от спор грибов, яиц клещей и т. п. Основными признаками яиц паразитических червей является определенная структура их оболочек (гладкая или с выемками, наличие крышечки, бугорков, пробочек) и внутренняя организация (зародыш на разных стадиях развития). Размеры яиц возбудителей очень колеблются. В зависимости от размеров их разделяют на: очень большие — длиной 0,15 мм и больше (Nematodirus spathiger); большие — 0,1 — 0,14 мм (Paramphistomum ichikawai); средние — 0,06 — 0,09 мм (Dioctophyme renale); мелкие — 0,03 — 0,05 мм (Tetrameres fissispina) и очень мелкие — 0,02 мм и меньше (Opisthorchis felineus). Яйца разных видов гельминтов отличаются друг от друга по величине, форме, строению и цвету оболочек и состоянию развития зародыша.
Гельминтоларвоскопические методы применяют для обнаружения личинок паразитических червей в фекалиях (диктиокаулез), молоке (стронгилоидоз, неоаскароз), выделениях из глаз (телязиоз), на коже (онхоцеркоз). Они дифференцируются по размеру, строению, форме.
Специальные диагностические исследования проводят сравнительно реже. Для этого исследуют мочу (диоктофимоз), кровь (сетариоз, дирофиляриоз) и т. п.
Иммунобиологические методы диагностики приобретают все более широкое применение при эхинококкозе, ценурозе, мониезиозе, диктиокаулезе, трихинеллезе и некоторых других гельминтозах. По чувствительности иммуноферментный метод диагностики (ELISA) значительно превосходит РИГА, РИД, РГА и прочие серологические реакции. Все чаще применяют методы молекулярно-биологической диагностики инвазионных болезней (полимеразная цепная реакция — ПЦР).
Перспективными могут оказаться серологические исследования, при которых антигенами являются живые личинки трематод, цестод и нематод. Их вносят в сыворотку крови больных животных. На этой основе ставят реакции микропреципитации и сколекспреципитации. Преципитины в течение 24ч концентрируются вокруг ротового (на хоботке или сколексе) и полового отверстий личинок паразитических червей.
Диагностическая дегельминтизация. С целью ранней диагностики гельминтозов, если возбудители еще не достигли половой зрелости, больным животным назначают антгельминтики. Этот метод часто применяют при кишечных цестодозах и аскаридатозах. У плотоядных животных и птиц паразитические черви выделяются с фекалиями во внешнюю среду уже через 5 — 6 ч, у жвачных животных — через 12 — 18 ч.
Методы посмертной диагностики дают возможность обнаружить возбудителей на разных стадиях развития в организме животных после их вскрытия. К. И. Скрябин предложил методику полного и неполного гельминтологического вскрытия трупов. При полном гельминтологическом вскрытии тщательно исследуют все органы и ткани с целью обнаружения в них гельминтов. Этот метод применяют преимущественно во время выполнения научно-исследовательских работ. Неполное гельминтологическое вскрытие используют для установления диагноза. При этом исследуют только отдельные органы с целью выявления в них паразитических червей.
Обязательно нужно исследовать мясные туши свиней и крупного рогатого скота на наличие в них гельминтов или их личинок (цистицеркоз, трихинеллез у свиней).
Исследование промежуточных и резервуарных хозяев гельминтов. Возбудителями многих болезней животных являются биогельминты, поэтому исследования промежуточных, дополнительных, резервуарных хозяев паразитических червей дают возможность выяснить гельминтологическую ситуацию, прогнозировать появление паразитозов в конкретных населенных пунктах, районах, областях.
Промежуточными хозяевами биогельминтов могут быть пресноводные и сухопутные моллюски, ракообразные (бокоплавы, циклопы, дафнии, водяные ослики), насекомые (муравьи, стрекозы, мухи, комары, мошки, мокрецы, жуки), орибатидные клещи, дождевые черви. Их исследуют под бинокулярной лупой или при малом увеличении микроскопа. Личинки гельминтов локализуются в разных органах и тканях промежуточных хозяев.
Моллюски в естественных условиях нередко заражаются личинками трематод и некоторых видов нематод. Местом локализации личинок является преимущественно печень. Она размещена в верхушке ракушки. Личинок исследуют компрессорным методом под микроскопом. По форме церкарии трематод напоминают головастиков лягушек.
Орибатидные клещи — промежуточные хозяева мониезий и других лентецовых червей семейства Anoplocephalidae. Они мелких размеров (до 1 мм длиной), живут в верхних слоях почвы. Цистицеркоиды цестод диаметром 0,15-0,19 мм имеют четыре присоски и хвостовой придаток. Личинки развиваются в брюшной полости клещей.
Промежуточными и дополнительными хозяевами гельминтов могут быть насекомые: муравьи — Dicrocoelium dendriticum, стрекозы — Prosthogonimus ovatus, мухи-коровницы — Thelazia sp., комары — Dirofilaria sp., мошки и мокрецы — Onchocerca sp., жуки — Macracanthorhynchus hirudinaceus.
Бокоплавы живут в морских и пресных водоемах. Они достигают в длину 2 см и являются промежуточными хозяевами возбудителей тетрамероза, стрептокароза и полиморфоза птиц. Личинок гельминтов обнаруживают при компрессорном исследовании этих ракообразных.
Циклопы являются промежуточными хозяевами возбудителей гименолепидозов водоплавающих птиц. Живут в стоячих водоемах, даже в лужах.
Дафнии зарегистрированы промежуточными хозяевами возбудителей эхинуриоза и тетрамероза водоплавающих птиц. Живут преимущественно в прудах.
Водяные ослики — промежуточные хозяева возбудителей филиколлеза водоплавающих птиц. Распространены в пресноводных водоемах.
Дождевые черви, живущие в почве и навозе (олигохеты), являются промежуточными хозяевами Metastrongylus sp. В их теле спиралевидные личинки локализуются в тканях пищевода и кровеносных сосудах. Некоторые виды дождевых червей, живущих в водоемах, являются промежуточными хозяевами возбудителей гистрихоза и пороцекоза уток. Личинки Hystrichis tricolor до 3 см длиной, беловатого цвета, просвечиваются через кожные покровы червя. Личинки Porrocaecum crassum намного меньших размеров (до 3 мм). Их находят в заднем отделе кишок промежуточных хозяев.
Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.
Источник: под ред. В.Ф. Галата и А.И. Ятусевича. Руководство по ветеринарной паразитологии. Минск: ИВЦ Минфина, 2015. — 496 с.
Наиболее точно гельминтозы диагностируются посмертно. Поэтому в практике нередко используют метод диагностических вскрытий, для чего мелких животных, подозрительных в заболевании, подвергают обычным методам патологоанатомических вскрытий. На трупах животных гельминтозы, вызываемые визуально заметными гельминтами соответствующего вида, особенно при высокой интенсивности инвазии, без особых затруднений диагностируются и при обычных методах паталогоанатомических вскрытий. Но гельминтозы, вызываемые мелкими гельминтами и при том рассеянными в различных органах и тканях животных, обычными методами патологоанатомических вскрытий не всегда могут быть точно диагностированы. Для этого необходимо сочетать метод патологоанатомических вскрытий со специальными гельминтологическими методами вскрытий трупов и органов животных, предложенными впервые академиком К.И. Скрябиным.
Известны следующие модификации гельминтологических вскрытий трупов и органов животных — метод:
- 1) полных гельминтологических вскрытий трупов, органов и тканей животных;
- 2) парциальный — полных гельминтологических вскрытий трупов, органов и тканей животных;
- 3) полных гельминтологических вскрытий отдельных органов;
- 4) неполных гельминтологических вскрытий.
- 1. Метод полных гельминтологических вскрытий трупов, органов и тканей животных. Этот метод применяется только в научно-исследовательской работе. Он довольно трудоемкий, требует затрат времени и трудно применим в условиях производства. Сущность этого метода заключается в следующем. После снятия кожи тщательно осматривают ее и подкожную клетчатку. Обнаруженных при этом гельминтов собирают в отдельную посуду, заполненную физиологическим раствором поваренной соли, а затем, по окончании вскрытия, фиксируют соответствующей жидкостью (жидкостью Барбагалло — нематод, 70° спиртом — гельминтов других классов) и хранят в ней для последующего диагностирования. Затем труп животного вскрывают согласно патологоанатомической методике, извлеченные из грудной и брюшной полостей органы, не нарушая их целостности, помещают каждый в отдельную посуду, этикетируют, а затем вскрывают.
Трубчатые органы, находящиеся в отдельных емкостях (тазики, баки, кюветы и т.п. с водой), разрезают по всей длине ножницами.
Содержимое органов смывают в ту же емкость, внутреннюю поверхность органа хорошо промывают в нем же, делают со слизистой оболочки соскоб тупым краем ножа и выбрасывают с последующей утилизацией. Оставшееся содержимое емкости сливают в новую емкость, но уже цилиндрической формы, доливают воды и оставляют отстаиваться в течение не менее 20 минут. Затем верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют новую порцию воды, вновь отстаивают, сливают и повторяют такие процедуры до тех пор, пока надосадочная вода не будет прозрачной.
Трубчатые части паренхиматозных органов (желчные ходы печени, бронхи легких) тоже вскрывают ножницами в емкостях с водой или физиологическим раствором, а паренхиму органов разрывают руками на мелкие кусочки. Полученную массу сливают для отстаивания в цилиндрической формы посуду, отстаивают и подвергают обработке также способом последовательных сливов.
Хорошо отмытые осадки (матриксы) исследуют затем малыми порциями последовательно в черных и белых кюветах или чашках Петри на черном и белом фоне, обнаруживаемых гельминтов собирают в банки или пробирки с водой для отмывания. Матрикс, осмотренный сначала невооруженным глазом, исследуют затем при 10-кратном увеличении лупы. Обнаруживаемых при этом гельминтов помещают в ту же посуду для отмывания в воде. По окончании исследования всего матрикса какого-то органа обнаруженных гельминтов определяют до класса, сосчитывают, помещают в отдельные пузырьки или пробирки, фиксируют и этикетируют.
Органы от мелких животных исследуют компрессионным или сухим способом. Для этого весь орган (например, глаз мышки) или кусочек, отрезанный от какого-то органа (кусочек легкого), помещают на стеклянную пластинку, покрывают другой такой же пластиной, раздавливают между ними исследуемую ткань и в сдавленном состоянии просматривают под препаровальной лупой или микроскопом при малом увеличении. При обнаружении гельминтов верхнее стекло снимается, паразит извлекается из ткани, омывается в воде, а затем, как обычно, фиксируется.
По окончании исследований всех органов результаты вскрытия записывают в журнал вскрытий, обнаруженные гельминты фиксируются, на флаконы с паразитами помещаются этикетки, на которых простым карандашом обозначаются: вид животного, подвергшегося вскрытию, номер, под которым произведено вскрытие, орган, в котором обнаружены гельминты, название класса (или вида), к которому они отнесены, и число экземпляров гельминтов. На тыльной стороне этикетки обозначают дату, место и фамилию лица, произведшего вскрытие.
2. Парциальный метод полных гельминтологических вскрытий.
Техника вскрытий этим методом такая же, как и методом полных гельминтологических вскрытий, но исследованию подвергается не весь матрикс, полученный от вскрытия того или иного органа, а лишь его часть (1/4, 1/10), что значительно ускоряет процесс исследования и сокращает время на его производство.
Читайте также: