Яйца гельминтов в песке
Песочница — не только пространство для детских игр, но и многоквартирный дом, в котором проживает огромное количество паразитов. Несмотря на то, что заразиться всякой гадостью от песка сложно, это всё-таки возможно, и родителям лучше заранее знать, что за зверинец обитает на детской площадке у дома.
1. Энтеробиоз
Самое распространённое среди детей гельминтное заболевание — энтеробиоз, который вызывает червь острица. Яйца глиста попадают в организм орально: ребёнок облизывает перепачканные руки. Ночью острицы-самки выползают из анального отверстия носителя и откладывают яйца. Из-за зуда ребёнок начинает чесаться и разносит яйца по всем поверхностям.
Собственно, симптом энтеробиоза — зуд в районе заднего прохода в ночное время. Возможны боли в животе, плаксивость и капризность, снижение аппетита, редко — недержание мочи.
Излечивается энтеробиоз антигельминтными препаратами после анализа кала.
2. Токсоплазмоз
Токсоплазмоз протекает остро и хронически, причём острая форма, характеризуемая лихорадкой, сыпью, увеличением печени и селезёнки, встречается достаточно редко. Но она опасна, потому что может привести к серьёзным осложнениям, вплоть до энцефалита, эпилепсии и гидроцефалии.
Хроническая форма обычно никак себя не показывает. В редких случаях ребёнок страдает от повышенной утомляемости, нарушений зрения, тошноты, болей в мышцах и сердце.
Токсоплазмоз лечится противомикробными и антигистаминными препаратами, а также повышением иммунитета.
3. Лямблиоз
Одноклеточные паразиты лямблии тоже попадают в песок с кошками и собаками, и способ заражения такой же, как в случае с острицами и токсоплазмами: ребёнок облизывает руки или игрушки, паразиты проникают в его организм и начинают активно размножаться. В кишечнике они прикрепляются к стенкам и вызывают дисбактериоз.
Лямблиоз может никак не проявляться, а может выглядеть как типичное расстройство кишечника со вздутиями, диареей, болью. Острая форма переходит в хроническую. Изредка возможны осложнения, среди которых панкреатит и дискинезия желчных путей.
4. Токсокароз
А вот носителем токсокар — крупных червей длиной до 18 см — является собака. Токсокар-самка в сутки откладывает до 200 000 яиц, которые покидают тело носителя-собаки вместе с фекалиями. В зоне повышенного риска — дети 3–5 лет, которые активно тянут грязные предметы в рот.
Дальше токсокару некуда деваться. Он размножается в человеческом кишечнике, личинки разносятся по всему телу и поселяются в органах. Там они не могут расти и развиваться, покрываются оболочкой и постепенно разрушаются.
Лечится токсокароз противогельминтными препаратами.
5. Аскаридоз
Аскарида человека — длинный червь, который может достигать в размерах 40 см. В песочницах черви аскариды встречаются редко, но всё-таки встречаются.
Из тонкой кишки личинки попадают в кровеносную систему, а потом разносятся по всему организму. Если они оказываются в носоглотке, человек их сглатывает, они вновь оказываются в желудке и заканчивают там свой рост — превращаются во взрослых особей.
После заражения аскаридами наступает аллергический ответ. Симптомы — плаксивость, повышение температуры, апатичность и вялость, возможны боли, сыпи, зуд, отёки. Затем поражается пищеварительная система, могут возникнуть диарея, аппендицит, закупорка кишечника. Иногда избавиться от аскарид можно только хирургическим путём.
Как защитить ребёнка от паразитов из песочницы?
Первое, что вам наверняка захочется сделать после прочтения этой статьи, — запретить ребёнку подходить к песочнице в принципе. Но это не выход. А выход — защитить песок от собак и кошек, которые могут использовать его в качестве уборной.
Для этого достаточно купить плотную крышку. Если детская площадка находится в общедомовой собственности, можно скинуться всем домом. И не забыть произвести замену песка на чистый.
Если у вас есть собственные животные, ежеквартально давайте им глистогонные препараты по инструкции. И следите за собственной гигиеной и гигиеной ребёнка, ведь с немытыми руками можно занести в организм что-нибудь пострашнее глистов.
Самым распространенным способом заражения гельминтами является употребление пищи, содержащей яйца и личинки паразитов. Обычно это происходит из-за недостаточной термической обработки блюд. При какой температуре погибают глисты — тема нашей сегодняшней статьи.
Условия для жизни и гибели паразитов
Чтобы понять, при какой температуре погибают яйца глистов, необходимо, в первую очередь, выяснить, какие условия для паразитов считаются благоприятными для жизнедеятельности. Итак, чтобы выжить, гельминты нуждаются в трех, оптимальных для себя факторах:
Что касается стадии развития, то вполне очевидно, что яйца глистов наиболее устойчивы к внешним факторам, по сравнению с половозрелыми особями. Они могут сохранить жизнеспособность с последующим инфицированием человека или животного в тех неблагоприятных условиях, при которых половозрелые паразиты просто гибнут.
Рассмотрим эти факторы на следующем примере:
- Гибель взрослых особей аскарид наступает при 25°C тепла в грунте и при влажности от 10%.
- Гибель остриц наступает, если температура грунта не соответствует температурным значениям 25–35°C тепла и влажности больше 70%.
- Яйца этих же круглых червей уничтожаются в течение трех суток при температуре от +40°C и влажности менее 60%.
Чаще всего инфицирование гельминтозами случается при потреблении в пищу недостаточно обработанных термически рыбной и мясной продукции. Яйца гельминтов при этом остаются жизнеспособными в мясе инфицированных животных, в рыбе и птице.
При этом, проникнув в организм, гельминты достаточно легко начинают паразитировать в организме человека, быстро адаптируясь к благоприятным условиям. Основным методом профилактики возможного инфицирования является полноценная термическая обработка пищевых продуктов и соблюдение гигиенических правил.
Существует мнение, что гельминты, а также их личинки и яйца, гибнут и не могут впоследствии заразить человека, если продержать продукт не менее трех часов в условиях морозильной камеры. Но, морозильная камера бытового холодильника не может гарантировать этого результата, так как температурные показатели в ней не опускаются ниже положенной для результата температуры.
Глисты погибают в течение трех часов только при температуре –40°C. Рассмотрим в небольшой таблице закономерность гибели паразитов, их личинок и яиц.
Покупая рыбную или мясную продукцию в сети современных супермаркетов, риск заражения гельминтозами значительно ниже. Это объясняется тем, что на крупных продуктовых складах продукты всегда хранятся при низких температурных значениях до того момента, как они поступят в розничную торговлю. То есть, при таких условиях, паразиты погибают.
Не только низкая температура, но и высокая может вызвать уничтожение гельминтов. В процессе приготовления пищи, во время обжаривания и отваривания блюд, создаются необходимые условия для гибели гельминтов и их яиц.
При какой температуре погибают яйца гельминтов и половозрелые особи в случае термической обработки? Большинство паразитов уничтожается, а их яйца становятся нежизнеспособными, при ориентировочно одинаковых температурных значениях — 50–70°С выше нуля. Это значит, что в хорошо приготовленной рыбной или мясной продукции не будет глистов.
Основные критерии термической обработки, влекущие за собой гибель паразитов, выглядят следующим образом:
- при 100°С через 20 минут гибнут как яйца описторха содержащиеся в рыбе, так и личинки других паразитов
- 60°С — через 5 минут погибают зрелые черви;
Как обеззаразить предметы быта?
Постельное и нательное белье рекомендуется подвергать кипячению, и только после этого стирке. После того как оно высохнет, обязательному проглаживанию с помощью утюга как с лицевой, так и с изнаночной стороны.
В процессе стирки с поверхности белья механическим способом удаляется огромное количество яиц паразитов. Остальные гибнут во время кипячения или проглаживания.
Подушки и одеяла, игрушки и ковры обрабатывают пылесосом, после чего содержимое, находящееся в мешке для сбора мусора, незамедлительно уничтожается путем сжигания. Большинство яиц гельминтов гибнет исключительно от воздействия высоких температур, поэтому эти же предметы быта — игрушки, ковры, мягкую мебель и прочие поверхности с тканным материалом подвергаются дополнительной обработке отпаривателем. Желательно делать это каждые 2 недели, чтобы предупредить развитие глистных инвазий в кругу семьи.
Полы и прочие твердые поверхности рекомендуется мыть с помощью горячей воды.
Еще нюансы…
Многие люди интересуются, при какой температуре тела умирают глисты, если у человека жар? Даже, если температура тела во время лихорадки у больного будет приближена к +40°С, гибели паразитирующих в организме червей не произойдет, хотя им подобное повышение температуры также не понравится. Избавиться от гельминтоза можно только с помощью специального лечения, которое подбирается врачом после необходимого обследования.
Каждый человек самостоятельно решает для себя, как ему действовать в сложившейся ситуации: предотвращать возможное инфицирование глистами или лечиться от паразитов с помощью лекарственных средств. Многие люди предпочитают второй вариант в качестве лечения и профилактики, практически не задумываясь над тем, какую токсическую нагрузку на здоровье оказывают противогельминтные препараты, иногда вызывая серьезные последствия после такой терапии. Более дешевой и безопасной является бытовая профилактика гельминтоза, например, термическая обработка и замораживание пищевых продуктов и предметов быта, что, безусловно, сложнее, но лучше для здоровья.
Изобретение относится к области профилактической медицины и санитарной паразитологии, экологии человека и может быть использовано как экспресс-способ для обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы.
Геогельминты - гельминты, передающиеся через почву, являются наиболее распространенными паразитами в мире. Заболеваемость геогельминтозами, по оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), более одного миллиарда жителей нашей планеты (Acceleratingworktoovercometheg-lobalimpactofneglectedtropicaldiseases. A roadmap for implementation. Executive summary. \\WorldHealthOrganization, 2012, p. 12). Геогельминты -Ascaris lumbricoides, Ascaris suum, Toxocara canis встречаются практически повсеместно не только в местностях, характеризующихся плохими санитарными условиями, но и очень часто в благополучных мегаполисах в песке на детских площадках и в песочницах. Наиболее подверженная группа риска заражения геогельминтами - дети. В современных условиях необходимы быстрые - экспресс способы обнаружения яиц геогельминтов для проведения профилактических мероприятий и постоянного мониторинга за очагами геогельминтозов и факторами риска распространения инвазий и эпидемиологически значимыми объектами мегаполисов, растениеводческих хозяйств и пищевой промышленности, а также за объектами питьевого и хозяйственного водоснабжения (SingerBH, CastroMC (2007) Bridgestosustainabletropicalhealth. \\ProcNatlAcadSciUSA 104: 16038-16043).
Существующие на сегодняшний день способы санитарно-гельминтологического исследования почвы трудоемки и требуют значительного времени (3-3,5 часа, включая пробоподготовку) для проведения исследований, кроме того, проведение таких исследований возможно только в специализированных лабораториях.
Все известные способы основаны на применении различных флотационных растворов. Для обнаружения яиц гельминтов в почве используется комбинированный способ Романенко, где в качестве флотационного раствора используется насыщенный раствор нитрата натрия (Романенко НА., Падченко И.К., Чебышев Н.В. Санитарная паразитология. - М.: Медицина, 2000, стр. 231 -275). Для исследования по способу Романенко отбирают 25 г почвы, помещают в центрифужную пробирку вместимостью 250 мл и заливают 150 мл воды. Смесь тщательно размешивают стеклянной палочкой в течение 5 мин или с помощью электромешалки 1 мин.
Всплывшие крупные частицы сразу же удаляют. После центрифугирования в течение 3 мин при 800-1000 об/мин воду сливают, а в пробирки добавляют 150 мл насыщенного раствора нитрата натрия. Перемешивают палочкой и вновь центрифугируют 3 мин.
Пробирки устанавливают в штатив, доливают тем же раствором до образования выпуклого мениска, накрывают обезжиренным предметным стеклом так, чтобы оно касалось слоя жидкости. Через 15 мин предметное стекло снимают, на влажную поверхность добавляют несколько капель 50% водного раствора глицерина и микроскопируют. С целью повышения эффективности выявления яиц рекомендуется снятие препарата повторить 2-3 раза.
Основными недостатками данного метода являются:
- насыщенный раствор нитрата натрия, а также другие альтернативные растворы, такие как растворы тиосульфата натрия и натриевой селитры, очень быстро кристаллизуются, что затрудняет просмотр проб и снижает вероятность выявление яиц гельминтов;
- применение нескольких последовательных промывок приводит к потери исследуемого материала, что в свою очередь влияет на точность определения количества яиц геогельминтов в пробе почвы;
- значительное время на подготовку флотационного раствора и проведение исследования образца почвы на наличие гельминтов 3-3,5 часа.
Способ выявления яиц гельминтов, клещей и ооцист простейших в пробах почвы заключается в том, что пробу почвы весом 25 г помещают в центрифужную пробирку вместимостью 250 мл и заливают 150 мл воды, смесь тщательно размешивают стеклянной палочкой в течение 5 мин или с помощью электромешалки 1 мин и центрифугируют в течение 3 мин при 800-1000 об/мин, воду сливают, а в пробирки добавляют 150 мл трехкомпонентной флотационной системы, состоящей из насыщенных растворов цинка хлорида (2 кг ZnCl2 на 1 л), натрия хлорида (0,42 кг NaCl на 1 л) и глицерина, взятых в соотношении 1:1:1, в пробирку доливают тот же раствор до образования выпуклого мениска, пробирку накрывают обезжиренным предметным стеклом так, чтобы оно касалось слоя жидкости, через 20-30 мин стекло снимают и микроскопируют, снятие препарата рекомендуется повторить 2-3 раза.
Основными недостатками данного способа являются:
- использование сложного флотационного раствора;
- быстрая кристаллизация флотационного раствора;
- потеря исследуемого материала при центрифугировании и удаления раствора;
- значительное (2-2,5 часа) время на исследование.
Задача изобретения - повышение точности определения яиц гельминтов в пробах почвы (за счет избавления от кристаллизации флотационного раствора и уменьшения потери исследуемого материала путем исключения последовательных промывок), снижение трудоемкости процесса и значительное уменьшение (до 30-35 мин) времени обнаружения яиц гельминтов в исследуемых образцах почвы.
Поставленная задача решается способом обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы, включающим смешивание исследуемого образца почвы с флотационным раствором и последующее микроскопирование, отличающимся тем, что в качестве флотационного раствора используют 25 мл 1,4-1,6% раствора перекиси водорода на 25 г пробы почвы.
Практически способ осуществляют следующим образом. К 25 г образца почвы, помещенного в большую центрифужную пробирку, добавляют 25 мл 1,4-1,6% перекиси водорода. Содержимое перемешивают маленькими стеклянными палочками и отстаивают в течение 4-6 минут. Перемешивание повторяют дважды. Затем пробирку оставляют отстаиваться на 20-25 минут. В процессе реагирования почвы и перекиси водорода почва поднимается выше уровня жидкости и оседает на стенках пробирки. Ее смывают небольшим количеством раствора перекиси водорода, также смывают частички почвы с палочки, которую используют для перемешивания образца, с целью недопущения возможных потерь в пробе. В процессе отстаивания на линии соприкосновения перекиси водорода с верхней границей образца почвы формируется зона, отличающаяся по цвету от основной массы исследуемого образца, из которой пипеткой забирается материал для микроскопирования на предметном стекле. Для обнаружения яиц геогельминтов, которые могут находиться в образце, необходимо микроскопировать не более трех предметных стекол. Полученные препараты просматривают под увеличением ×40, для удобства просмотра можно добавить раствор Люголя.
Предлагаемый способ обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы позволяет в 98% случаев в 2-2,5 раза быстрее по сравнению с используемыми на сегодняшний день способами обнаружить яйца геогельминтов.
Основой предлагаемого способа является способность перекиси водорода в определенной концентрации взаимодействовать с частичками почвы исследуемого образца и поднимать вверх яйца гельминтов. Подбор концентрации раствора перекиси водорода был определен экспериментальным способом. Его результаты представлены в табл. 1.
|
Были проведены по 100 испытаний с образцами почвы и песка. Авторами проведены сравнительные исследования заявленного способа со способом Романенко (табл. 2).
|
Пример 1. Проба песка общей массой 300 г. Забор пробы осуществлялся в соответствии со способом Романенко.
При исследовании способом Романенко яиц гельминтов не было выявлено.
Применение заявленного способа позволило выявить яйца Тохосаrasp.и Trichuristrichiura.
Пример 2. Проба почвы общей массой 200 г. Забор пробы осуществлялся в соответствии со способом Романенко.
При исследовании методом Романенко яиц гельминтов не выявлено.
По предлагаемому способу при исследования почвы выявлено яйцо Toxocarasp.
|
Из представленных данных следует, что предлагаемый способ обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы позволяет повысить точность определения яиц гельминтов в пробах почвы, снизить трудоёмкость процесса и значительно уменьшить (до 30-35 мин) время обнаружения яиц гельминтов в исследуемых образцах почвы.
Это позволяет использовать предлагаемый способ как для проведения санитарно-паразитологических исследований, так и для проведения научных исследований.
Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Долбин Д.А., Лутфуллин М.Х., Соколина Ф.М.
Предложен метод исследования проб почвы на яйца гельминтов , который превосходит по своей эффективности предложенный ранее метод Романенко и может быть использован на практике и при проведении научных исследований. Данный метод был применен для обследования объектов внешней среды города Казани и позволил выявить большую загрязненность яйцами геогельминтов. Разработанный метод позволил дополнительно выявить приблизительно 36 % яиц аскарид, чем по методу Романенко, что обусловлено применением нескольких компонентов в флотационной жидкости: растворов хлорида цинка, хлорида натрия и глицерина. Компоненты предлагаемой флотационной системы не нарушают морфологию яиц паразитов и не создают затруднений с морфологической идентификацией возбудителя
Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Долбин Д.А., Лутфуллин М.Х., Соколина Ф.М.
Examination of soil for the presence of helminths eggs
The method of research of tests of the soil on eggs of helminths which surpasses the method of Romanenko offered earlier in the efficiency is offered and can be used in practice and when carrying out scientific researches. This method was applied to inspection of objects of environment of Kazan city and allowed to reveal big impurity eggs of geohelminths. The developed method allowed to reveal in addition about 36 % of eggs of ascarids than on Romanenko's method that is caused by application of several components in flotation liquid: solutions of chloride of zinc and sodium chloride and glycerin. Components of the flotation liquid don't break morphology of eggs of parasites and don't create difficulties with morphological identification of the helminths
Биохимия, биотехнология и диагностика
ОБСЛЕДОВАНИЯ ПОЧВЫ НА ЯЙЦА ГЕЛЬМИНТОВ
Д.А. ДОЛБИН1 кандидат биологических наук М.Х. ЛУТФУЛЛИН 2 доктор ветеринарных наук Ф.М. СОКОЛИНА3 доктор биологических наук
1 Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии, 420015, Казань, Большая красная, 67, e-mail: dda [email protected]
2 Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, 420029, Казань, Сибирский тракт, 35, e-mail: [email protected]
3 Казанский (Приволжский) Федеральный университет, 42008, Казань, ул. Кремлевская, 18, e-mail: [email protected]
Предложен метод исследования проб почвы на яйца гельминтов, который превосходит по своей эффективности предложенный ранее метод Романенко и может быть использован на практике и при проведении научных исследований. Данный метод был применен для обследования объектов внешней среды города Казани и позволил выявить большую загрязненность яйцами геогельминтов. Разработанный метод позволил дополнительно выявить приблизительно 36 % яиц аскарид, чем по методу Романенко, что обусловлено применением нескольких компонентов в флотационной жидкости: растворов хлорида цинка, хлорида натрия и глицерина. Компоненты предлагаемой флотационной системы не нарушают морфологию яиц паразитов и не создают затруднений с морфологической идентификацией возбудителя.
Ключевые слова: яйца, гельминты, почва, контаминация, Республика Татарстан.
При изучении эпидемиологии и эпизоотологии токсокароза слабо уделяется внимание обследованию резервуарных хозяев токсокар: свиней, грызунов и птицы, которые могут заглатывать инвазионные яйца [5].
Освободившиеся личинки второй стадии паразитируют в организме резервуарного хозяина до тех пор, пока его не съест окончательный, в пищеварительном тракте которого происходит дальнейшее развитие личинки. Имеются данные о роли тараканов и мух как механических переносчиков яиц токсокар [7].
Согласно последним данным, у сук в поздний период щенности и во время лактации может происходить реинвазия, которая приводит к трансмиссивному заражению щенков-сосунов, а при клиническом проявлении заболевания - к контаминации окружающей среды яйцами гельминтов. Минимальный инкубационный срок составляет: при прямом заражении 4-5 нед, а при пренатальном - 3 нед [10].
Данные о зараженности токсокарами населения довольно противоречивы. Пораженность сельского населения значительно выше, чем городского,
также как и обсемененность почвы яйцами токсокар. Например, в Еврейской автономной области обсемененность почвы яйцами токсокар в городских условий была в четыре раза выше. Причем, наибольший процент обсемененных проб приходится на почву теплиц [11].
Однако, в Тульской области корреляционной связи между заболеваемостью, благоустройством жилья и наличием собак не выявлено [4].
Высокую зараженность детей токсокарами отмечают большинство авторов [11].
При обследовании населения в Свердловской области доля инвазирован-ных взрослых по результатам серологических исследований была в два раза выше, чем детей [8].
В 1996-2004 гг. зараженность людей токсокарами по Республике Татарстан составила 0,0005-0,003 % на 100 тыс. человек [9]. С 2000 г. число больных токсокорозом увеличилось, в среднем, в 7 раз, что, вероятно, обусловлено внедрением более эффективных лабораторно-диагностических методов. Токсокороз зарегистрирован у 4 % населения республики [9]. Загрязненность почвы яйцами Toxocara spp. почвы достигает 10 % [10].
Загрязненность почвы и пораженность людей токсокарами зависят от климатических, гидрологических и гигиенических условий в конкретной местности.
Из других факторов окружающей среды в передаче яиц токсокар можно назвать воду, овощи, зелень, волосяной покров собак.
В Хабаровском крае установлено, что 8,6 % проб воды в г. Николаевск-на-Амуре и 15,4 % проб воды в г. Хабаровске содержат яйца токсокар. Наиболее часто положительные пробы регистрировали в водах акватории речного порта р. Амур, в местах стока ливневых и паводковых вод, районах неорганизованных пляжей, т. е. в местах скопления населения, бродячих собак и выгула домашних животных. В питьевой воде яйца гельминтов не обнаружены. На шерсти 16,4 % собак найдены яйца нематод. Наиболее интенсивные показатели обсемененности характерны у щенков в области ануса -30-40 %, крупа - 18-20 и живота - 10-12 %. Обсемененность яйцами токсо-кар столовой зелени из индивидуальных огородов, рынков городов составила 6,4 % овощей. Яйца паразита находили также на моркови, свекле, луке, картофеле [1].
Анализ результатов гельминтоовоскопических исследований показал высокую зараженность щенков. Инвазированность взрослых собак составила 19,2 %, щенков 47,8 %. На контаминацию окружающей среды яйцами токсо-кар влияет численность бродячих животных. Собаки в сельской местности более поражены токсокарами, чем в городских условиях [1].
Наиболее актуальна оценка загрязненности почвы детских площадок яйцами Toxocara canis, T. cati и Ascaris lumbricoides.
Наиболее часто используемым методом исследования почвы с целью выявления яиц гельминтов является комбинированный метод Романенко. Для этого в качестве флотационной жидкости используют насыщенный раствор нитрата натрия [3].
При планировании и организации мероприятий по искоренению гельминто-зов необходимо выявление новых случаев заболевания с целью контроля эпидемиологической ситуации, совершенствование методов обследования.
С этой целью нами усовершенствован метод гельминтоовоскопии и был разработан новый метод выявления яиц гельминтов и цист простейших в пробах почвы [12, 13].
Материалы и методы
Пробы почвы берут с поверхности и на глубине 10-20 см. На однотипном участке собирают в 5-10 различных местах по 10-20 г, объединяя пробы в одну, общей массой не менее 100-200 г.
На территории одного объекта (усадьба, детская площадка и т. д.) берут 10 проб. Пробу помещают в закрытую стеклянную посуду или полиэтиленовый пакет. Внутрь вкладывают этикетку с указанием места и условий отбора пробы. Пробы, доставленные в лабораторию, желательно исследовать немедленно, так как яйца ряда гельминтов или личинки могут погибнуть и разрушиться. Хранить пробы рекомендуется в холодильнике (5 °С) не более месяца.
Для исследования по методу Романенко [3] из общей пробы отбирают 25 г почвы, помещают в центрифужную пробирку вместимостью 250 мл и заливают 150 мл воды. Смесь тщательно размешивают стеклянной палочкой в течение 5 мин или с помощью электромешалки 1 мин.
Всплывшие крупные частицы сразу же удаляют. После центрифугирования в течение 3 мин при 800-1000 об./мин воду сливают, а в пробирки добавляют 150 мл насыщенного раствора нитрата натрия. Перемешивают и вновь центрифугируют 3 мин.
Пробирки устанавливают в штатив, доливают тем же раствором до образования выпуклого мениска, накрывают обезжиренным стеклом (размер 6 х 12 см) так, чтобы оно касалось слоя жидкости. Через 15 мин стекло снимают, на влажную поверхность добавляют несколько капель 50%-ного водного раствора глицерина и микроскопируют.
Выявление яиц гельминтов в пробах почвы авторским способом проводят по следующей схеме. Вначале готовят комбинированную флотационную смесь из трех ингредиентов: насыщенный раствор хлорида цинка (2 кг ZnCl2 на 1 л воды); насыщенный раствор хлорида натрия (0,42 кг NaCl на 1 л воды); глицерин. Компоненты смешивают в равном соотношении. Всплывшие крупные частицы сразу же удаляют. После центрифугирования в течение 3 мин при 800-1000 об./мин воду сливают, а в пробирки добавляют 150 мл трехкомпонентной флотационной системы. Перемешивают и вновь центрифугируют 3 мин.
Пробирки устанавливают в штатив, доливают тот же раствор до образования выпуклого мениска, накрывают обезжиренным стеклом (размер 6 х 12 см) так, чтобы оно касалось слоя жидкости. Через 20-30 мин стекло снимают и микроскопируют. С целью повышения эффективности выявления яиц рекомендуется снятие препарата повторить 2-3 раза.
Результаты и обсуждение
При использовании разработанной методики был проведён сравнительный анализ методов исследования почвы: Романенко и разработанного метода выявления яиц гельминтов. В пробу песка искусственно вносили яйца As-caris suum, Toxocara canis и Ascaris lumbricoides в количестве 100 яиц на 1 г песка. Яйца были получены из матки самок аскарид. Результаты сравнительного анализа с использованием яиц A. suum и T. canis приведены в таблицах 1 и 2.
1. Сравнение эффективности метода выявления яиц в пробах почвы с искусственным внесением яиц A. suum по Романенко и авторского способа
Читайте также: