Лазерная флюоресценция крови при туберкулезе

Лазерная терапия в последние два десятилетия получила широкое распространение практически во всех отраслях медицины.

Лазерная терапия в последние два десятилетия получила широкое распространение практически во всех отраслях медицины. Это универсальный метод, лечебное действие которого обусловлено противовоспалительным, обезболивающим, противоотечным, иммуномодулирующим эффектами, стимуляцией репаративных процессов в пораженном органе, улучшением регионарного лимфо- и кровообращения.

Туберкулез — это хроническая, тяжелая инфекция, в начальном периоде развития которой преобладают процессы экссудации и альтерации. Поэтому использование лазера у больных туберкулезом позволяет сократить экссудативную фазу и снизить силу альтеративной фазы воспаления, тем самым создав все предпосылки для более благоприятного течения туберкулеза.

Работы по лазеротерапии во фтизиопедиатрии единичны и касаются только применения лазера при туберкулезе периферических лимфатических узлов. Это связано с такими морфофункциональными и нейроэндокринными особенностями детского организма, как генерализованный ответ на малые дозы, кумуляция энергетического излучения, больший размер сечения сосудов и быстрое развитие коллатералей.

С учетом анатомо-физиологических особенностей организма подростка нами были разработаны методики внутривенного лазерного облучения крови (ВЛОК) и магнитолазеротерапии (МЛТ).

Из существующих в настоящее время источников и видов доставки лазерной энергии на первом этапе лечения подростков с остропрогрессирующим туберкулезом было выбрано ВЛОК.

Несмотря на то что при ВЛОК отсутствует прямое воздействие лазерного излучения на патологический процесс в легких, в короткие сроки достигается терапевтический эффект на системном (возникновение ответных компенсаторных адаптационных нервнорефлекторных и нейрогуморальных реакций с активацией симпатоадреналовой и иммунной систем) и организменном уровнях (нормализация функций различных органов).

Учитывая вышеизложенное, ВЛОК назначали больным подросткам с выраженными симптомами туберкулезной интоксикации, с деструктивными формами туберкулеза, с массивным бактериовыделением, с нарушением показателей иммунитета и реологических показателей крови.

Эффективность такого комплексного лечения, включающего лазерное облучение крови в сочетании с химиотерапией, оценивали через 2-3 недели после окончания лазеротерапии (соответственно через 1,5-2 месяца от начала общего лечения туберкулеза).

Эффективность терапии туберкулеза обычно определяют по скорости исчезновения симптомов интоксикации, прекращению бактериовыделения, получению значительной положительной динамики рассасывания инфильтративных, очаговых изменений в легких, а также по закрытию полостей распада.

Нами было замечено, что положительная динамика по основным клинико-рентгенологическим показателям у больных, в комплексном лечении которых было использовано ВЛОК, наблюдалась на 1,5-2 месяца раньше, чем у аналогичных больных, которые не получали лазеротерапии.

При лечении глубоко расположенных очагов более эффективным является лазерное излучение (длина волны 0,8-1,1 мкм) в сочетании с постоянным магнитным полем (10-60 мТс). Таким образом достигается увеличение проникновения и повышение поглощения лазерного излучения.

Метод магнитолазеротерапии был применен на втором этапе лечения, то есть через 4-5 недель после окончания курса ВЛОК, у тех больных, у которых к тому моменту уже преобладал продуктивный характер специфического воспаления в легких. МЛТ использовали для предупреждения развития фиброза и пневмосклероза в легочной ткани и соответственно для усиления процессов репарации и регенерации в пораженном органе.

Включение МЛТ в комплексное лечение туберкулеза ускоряет на 1-1,5 месяца динамику основных клинико-рентгенологических показателей течения туберкулеза. Наиболее выраженный эффект от применения магнитолазеротерапии был выявлен при оценке скорости закрытия полостей распада в легких. В среднем полости распада закрылись через 3,5-4,5 месяца лечения, что на 1,5-2,5 месяца быстрее, чем у больных, которым не проводилась лазеротерапия.

В современных условиях терапия легочного туберкулеза проводится с одномоментным приемом четырех-пяти химиопрепаратов, а из-за наличия у 20% больных туберкулезом сопутствующих заболеваний печени и органов желудочно-кишечного тракта в 20% случаев развиваются побочные реакции токсического характера на прием специфических химиопрепаратов.

Имеются литературные данные об успешном использовании лазеротерапии для лечения патологии печени различного генеза. Это навело нас на мысль о возможности воздействия МЛТ на область печени у больных подростков с целью коррекции токсического действия химиопрепаратов.

Коррекцию функции печени проводили без отмены химиопрепаратов.

Воздействие МЛТ на область печени позволило у 2/3 пациентов нейтрализовать гепатотоксический эффект от приема химиопрепаратов и проводить химиотерапию, не изменяя ее режима.

Таким образом, дифференцированный подход к применению различных методов лазерного излучения в комплексной терапии тяжелых форм легочного туберкулеза у подростков позволяет повысить эффективность проводимого лечения.

Ознакомиться подробнее с представленными в публикации, а также другими методами лазеротерапии можно в подростковом отделении Центрального института туберкулеза РАМН.

В результате интоксикации, изменения реактивности организма и тканевых повреждений у больных туберкулезом наступают различные по характеру сдвиги в кроветворной системе. Существенную роль играют при этом не столько форма, сколько фаза и динамика процесса. При ограниченных и малоактивных его формах количество эритроцитов обычно находится в пределах нормы и отсутствуют признаки анемии. При массивных инфильтратах или творожистой пневмонии, при распространенном казеозном лимфадените, специфическом поражении кишечника, вовлечении в процесс печени, селезенки, костного мозга, а также после больших легочных или послеоперационных кровотечений отмечаются падение количества эритроцитов и изменение их морфологии (олиго- и полихромазия), а иногда мегалобластическая, апластическая или анемия смешанного типа (мегалобластическая и железодефицитная). При этом увеличивается содержание не вполне созревших эритроцитов — ретикулоцитов (свыше 0,5—1 % ) и количество кровяных пластинок (более 250 000—300 000). Подобным образом изменяется и эритропоэтическая функция костного мозга.

Чаще и в большей мере при туберкулезе, но главным образом при выраженных, прогрессирующих и осложненных его формах изменяется лейкограмма. В части случаев может отмечаться умеренный лейкоцитоз (до 10000—15 000 лейкоцитов), реже лейкопения. Так, Е. Л. Кан (1972) наблюдала лейкопению у 20,7% больных с ограниченными и легко протекавшими формами процесса и у 12,5% — при деструктивном и прогрессирующем туберкулезе легких.

Наиболее часто сдвиги наступают в лейкоцитарной формуле. Увеличивается количество нейтрофилов как в абсолютном, так и в относительном выражении за счет палочкоядерных форм (до 15—20%). Одновременно уменьшается содержание лимфоцитов (до 8—15%). При выраженном и затянувшемся инфильтративном процессе и обширном бронхогенном обсеменении появляется патологическая зернистость нейтрофилов. При диссеминации, по наблюдениям Н. Н. Боброва (1950) и Н. А. Шмелева (1959), нарастает моноцитоз (до 10—18%).

Заслуживает внимания указание на увеличение абсолютного количества базофилов при активном туберкулезном процессе. Тромбоцитарный профиль периферической крови характеризуется увеличением удельного веса форм раздражения и дегенеративных элементов, что обусловлено степенью активности процесса и интоксикации.
Таким образом, отдельные фазы туберкулеза легких характеризуются следующими гематологическими синдромами.

Фаза инфильтрации: умеренный или значительный лейкоцитоз, выраженный сдвиг пейтрофилов влево, нормальное или повышенное содержание нейтрофилов с патологической зернистостью, умеренное или значительное ускорение РОЭ, смещение тромбоцитограммы вправо за счет повышения содержания форм раздражения и дегенеративных элементов.

Фаза распада: небольшой лейкоцитоз или нормальное количество лейкоцитов, увеличение процента нейтрофилов с патологической зернистостью и сдвигом влево, иногда с появлением миелоцитов, уменьшение количества эозинофилов и лимфоцитов, значительное ускорение РОЭ.
Фаза гематогенной диссеминации: нормальное количество лейкоцитов, абсолютный и относительный моноцитоз.
Фаза рассасывания: увеличение количества эозинофилов и лимфоцитов, отсутствие ядерного сдвига влево.
Фаза уплотнения: нормальные показатели гемограммы, иногда лимфоцитоз.

Гемограмма у больных туберкулезом изменяется в процессе лечения. В благоприятных случаях нормализуется количественный и качественный состав кровяных клеток. Такие положительные сдвиги наступают обычно спустя 2—3 мес, т. е. через более длительный срок после исчезновения лихорадки и других симптомов интоксикации. Гематологические сдвиги исчезают тем быстрее, чем успешнее терапевтическое вмешательство, т. е. чем скорее прекращается интоксикация, рассасываются очаги и зоны инфильтрации, закрываются каверны, прекращается бацилловыделение.
Вместе с тем следует иметь в виду воздействие на гемопоэз различных антибактериальных препаратов. Они нередко вызывают эозинофилию, в отдельных случаях — лейкоцитоз, а чаще лейкопению; иногда при этом угнетается образование нейтрофилов вплоть до аграпулоцитоза и может стимулироваться лимфоидно-ретикулярная реакция. Эти изменения наступают в результате аллергизирующего или токсического действия препаратов на костный мозг.

При развитии агранулоцитоза необходимо прекратить прием вызвавшего его медикамента. Аллергизация к препарату определяется лабораторными пробами (тест Шелли, реакция Уанье). Назначение нуклеината натрия или пентоксила, кортикостероидных гормонов, поливитаминов, гемотрансфузии способствует восстановлению костно-мозгового кроветворения.
Таким образом, систематический гематологический контроль и правильный анализ полученных при этом результатов имеют существенное значение для оценки клинического состояния больного, динамики процесса и эффективности применяемого лечения. Гематологические данные приобретают определенное значение и при дифференциальной диагностике туберкулеза и других заболеваний органов дыхания.

  Лазер против туберкулеза

Туберкулез будут выжигать лазером
Охватившая Россию волна туберкулеза, причем в одной из его наиболее опасных, устойчивых к химиотерапии форм, заставляет специалистов искать новые подходы к лечению. В Москве начинаются клинические испытания лазерной установки, способной подавлять инфекцию внутри тканей легкого. Излучение ультрафиолетового лазера передается по тончайшему световоду, который вводится в легкое с помощью иглы. Установка не имеет зарубежных аналогов.

Нынешняя эпидемия туберкулеза в России отличается высокой устойчивостью возбудителя туберкулеза к антибиотикам. Туберкулезные бактерии удивительно стойки и живучи не только в организме, но и "на улице": в пыли они живут до десяти дней, в воде — до пяти месяцев. Единственный мощный разрушитель туберкулезных бактерий — ультрафиолет: облучение убивает бактерии в течение двух-трех минут. Это разрушительное свойство ультрафиолета и используют медики в свой установке для "дезинфекции организма изнутри". Мишенью для ультрафиолетового лазера являются каверны ("дырки" размером до нескольких сантиметров), которые возникают в ткани легкого при туберкулезе и являются не только центром заболевания, но и очагом дальнейшего заражения.
Новая процедура лазерной терапии состоит в следующем: под местным обезболиванием врач прокалывает грудную клетку больного и вводит иглу прямо в каверну в легком. После откачки гнойного содержимого внутрь каверны врач вводит тончайший световод и включает ультрафиолетовый лазер. Рассеиватель на конце световода обеспечивает равномерное облучение стенок каверны ультрафиолетом. Излучение разрушает структуру ДНК всех живых клеток, в том числе и туберкулезных бактерий. Одновременно с облучением врач вводит в каверну антибиотики. Диаметр такой иглы 2,0 мм, диаметр световода — 0,6-0,8 мм.
Обычный курс лечения состоит из 10-15 сеансов по 15 минут каждый. Облучение повторяется через два-три дня. Если есть возможность, то на месте первого прокола врач оставляет пластмассовый катетер, чтобы не травмировать больного и не делать каждый раз новый прокол. Внешне лазерная установка напоминает чемодан, из которого торчит оптическое волокно. Питается аппарат от бытовой сети, а в качестве рабочего тела лазера используется азот атмосферного воздуха.
Автор нового метода профессор Вадим Добкин (руководитель отделения ЦНИИ туберкулеза РАМН) пояснил Ъ лечебный эффект процедуры: "Во-первых, убиваем бактерии в полости каверны, снимаем интоксикацию, улучшаем состояние больного. Во-вторых, можем быстро подготовить больного к будущей тяжелой операции. Иногда нам удается приостановить прогресс заболевания и удаления легкого вообще не требуется".
"Нужно понимать,— добавил Вадим Добкин,— что хронический туберкулез вылечить лекарствами нельзя. Можно только приостановить болезнь, чего мы и добиваемся. Но количество хроников растет постоянно. Статистика приблизительно такая: из всех первичных больных 15% станут хрониками, а 25% (их этих 15%) потребуется хирургическое лечение. Вот это и есть контингент для нашей лазерной установки. Применять лазер имеет смысл, если у больного одна-две большие каверны и ясно, что именно они — главный очаг болезни. Если кавернами поражено все легкое, то наш прибор уже не поможет и хирургической операции не избежать".
Процедура требует подготовленного хирурга, поскольку врачи районного туберкулезного диспансера боятся делать прокол легкого. Лазерные установки имеет смысл ставить в хирургических отделениях легочного профиля. Обычно это уровень областного тубдиспансера.
Коллеги Вадима Добкина в Московском институте туберкулеза Минздрава (не путать с ЦНИИ туберкулеза РАМН) прокомментировали работы над лазерной установкой так: "Лазерная, а также хирургическая терапия — важная часть комплекса мер по борьбе с туберкулезом, и если лазер войдет в практику — это можно только приветствовать. Для очень тяжелых больных нужно именно лазерное или хирургическое лечение. Именно таких больных сейчас в России много. Раньше, в условиях принудительной диспансеризации, поздние, запущенные случаи болезни были очень редки, а сегодня — это норма. Вот типичная картина появления нового больного: сначала врач районной поликлиники ставит диагноз 'воспаление легких' и пациента лечат от пневмонии. Недели через две-три выясняется, что никакого результата от лечения нет, и тогда больного начинают обследовать уже серьезно. Вот тут и обнаруживается уже развившийся туберкулез. С 'малой' формой можно ходить несколько месяцев и ничего не чувствовать. А через год — уже запущенное заболевание. В то же время не следует смотреть на лазер как на средство, на котором должна сосредоточиться борьба с сегодняшним всплеском туберкулеза в России. Большинство больных (не столь тяжелых) все же поддаются длительному лечению антибиотиками, и именно так их и надо лечить".
ВЛАДИМИР Ъ-ЕРМАКОВ

Рост заболеваемости туберкулезом просто пугает. Так, в Центральном федеральном округе РФ заболеваемость всеми формами туберкулеза выросла с 23,3 (1992 г.) до 70,0 (2000 г.) на 100 тыс.населения. Причем заболеваемость бациллярными формами, представляющими наибольшую эпидемическую опасность - с 8,9 до 23,9 на 100 тыс. населения (1).

Лазерная терапия во фтизиатрии

Между тем, успехи лазерной терапии в области фтизиатрии позволяют значительно сократить сроки лечения и снизить стоимость лечения больных туберкулезом. Исследования эффективности низкоинтенсивного лазерного излучения (НИЛИ) в этой области проводились сначала 80-х годов. В те годы излучатели в аппаратах лазерной терапии были оснащены только источником лазерного излучения. С развитием лазерной медицины аппараты лазерной терапии стали более совершенны. Современная лазерная терапия характеризуется полифакторным воздействием на очаги патологии.

Современная лазерная терапия больных туберкулезом проводится полифакторными аппаратами к которым относятся и аппараты серии РИКТА. Так, в Липецком областном туберкулезном диспансере за период с 1995 по 1998 гг. комплексное лечение с включением лазерной терапии было проведено 416 больным различными формами туберкулеза (6). Наряду с химиотерапией проводилась лазерная терапия полифакторными аппаратами РИКТА. Все больные закончили лечение с хорошим эффектом. Отмечено рассасывание инфильтратов, экссудата, прекращение бацилловыделения и закрытие полостей распада.

Результаты использования

У больных экссудативным плевритом наблюдался лучший эффект. У них было меньше остаточных изменений в виде плевральных наслоений, сращений, деформаций купола диафрагмы, чем у больных, пролеченных без лазерной терапии. У больных туберкулезом органов дыхания, срок стационарного лечения сократился в среднем на 3 – 4 недели, по сравнению с больными контрольной группы.

Больные саркоидозом закончили курс стационарного лечения с полным рассасыванием во внутри грудных лимфоузлах и легких (46%), значительное улучшение наблюдалось у 43% больных, клиническое улучшение без рентгенологически определяемой динамики было у одного больного.

У больных туберкулезом легких, страдающих различными сопутствующими заболеваниями костей и суставов, на фоне лазерной терапии клинический эффект был получен в виде снятия отека пораженных суставов, уменьшения и снятие болей, восстановление функции.

Исследователи (6) отмечают,что проведенный анализ пролеченных больных, дает основание считать, что лазерная терапия не дает побочных эффектов, хорошо переносится и может применяться как при лечении основного заболевания, так и для терапии сопутствующей патологии.

Аналогичные результаты,подтверждающие факт эффективности лазерной терапии при лечении туберкулеза легких получены и другими исследователями (1, 3, 4, 5, 11, 14).

В Московском противотуберкулезном клиническом диспансере №12, в 1999г. сочетанное лечение, включающее лазерную терапию, было проведено 16 больных с различными формами туберкулеза органов дыхания (3). Бактериовыделение было у 11 человек, у 14 имелись деструктивные процессы. Лазерная терапия проводилась аппаратом РИКТА методом контактного чрескожного воздействия, с наложением излучателя аппарата на область проекции зон поражения на грудную клетку. Продолжительность ежедневных процедур – 10 минут.

Курс лечения состоял из 15 сеансов. Клиническую эффективность лазерной терапии оценивали по срокам прекращения бактериовыделения, ликвидации деструктивных изменений. Через 1 –1,5 месяца от начала лечения, стойкое прекращение бактериовыделения отмечалось у 100% больных. Закрытие полостей распада произошло на 2-3 месяц лечения у 70% больных, через 5 месяцев лечения у 30%.

В контрольной группе больных не получавших лазерную терапию прекращение бактериовыделения наступило у 83,9%, закрытие полостей распада наступило у 66,6% больных. Причем у 33,3% оно наступило через 4-5 месяцев, у 66,7% больных – позднее 5 месяцев. Авторы отмечают, что применение лазерной терапии в сочетании с противотуберкулезными препаратами повышает эффективность лечения больных туберкулезом и сокращает сроки пребывания в стационаре на 1-1,5 месяца.

Опыт работы

Одной из методик разработанной в ЦНИИТ РАМН является сочетание лазерной терапии с небулайзерной аэрозольтерапией у больных туберкулезом легких. Эта методика позволила повысить эффективность лечения больных впервые выявленным инфильтративным туберкулезом легких по сравнению с традиционными методами противотуберкулезной терапии.

Сроки прекращения бацилловыделения сократились в 1,7 раза, сроки закрытия полостей распада в 1,5 раза, а срок стационарного лечения в 1,5 раза.Положительная рентгенологическая динамика у этих больных отмечена в 1,8 раз чаще, чем в группе больных получавших химиотерапию, а ремиссия эндобронхита достигнута в 2,7 раза чаще.

Практически аналогичные результаты получены фтизиатрами Российского Университета Дружбы Народов и Якутского НИИ туберкулеза. Разработанная ими методика лечения больных деструктивными формами распространенного туберкулеза легких заключается во внутримышечном введении изониазида межреберно в рентгенологической проекции каверны на фоне традиционной химиотерапии.

На область введенного в/м изониазида проводилась лазерная терапия для осуществления направленной фармакокинетики, последняя достигалась путем увлечения вглубь неэлиминированных молекул препарата из межреберного пространства. В результате такого лечения были получены следующие результаты. В 80,8% случаев отмечено прекращение бактериовыделения через 3-5 месяцев. В контрольной группе это достигалось через 6-8 месяцев. Авторы констатируют, что разработанный метод лечения сокращает сроки бактериовыделения на 1,5 месяца и повышает эффективность химиотерапии туберкулеза легких на 18%.

Высокая эффективность лазерной терапии отмечена и у больных туберкулезом мочеполовой системы (7). Так, в основе туберкулеза почек лежит расстройство микроциркуляции, нарушение уродинамики, локальный дисбаланс иммунокомпетентных клеток,нарушение биоэнергетики клетки, уменьшение окислительно-восстановительного потенциала.

Все эти факторы обеспечивают благоприятные условия для размножения и существования микобактерий туберкулеза (13) в почке, что приводит к нарастанию деструкции ее паренхимы. Это, в свою очередь, ведет к формированию казеозного некроза, нарушению микроциркуляции и избыточному фиброзу. Все эти факторы снижают эффективность традиционного медикаментозного лечения (10, 13).

Исследование эффективности лазерной терапии при лечении туберкулеза почек было проведено в клинике внелегочных форм туберкулеза Новосибирского НИИТ в период 1984 – 1997 гг. Для проведения лазерной терапии использовали полупроводниковый инфракрасный лазер с длиной волны 0,89 мкм. Базисным методом лечения являлась интермиттирующая бактерицидная химиотерапия, которую проводили 62 больным контрольной группы. Больным основной группы (88 человек) дополнительно проводилась лазерная терапия. Результаты лечения приводятся ниже.

Болевой синдром в контрольной группе сохранялся в течение 3-4 месяцев. В основной группе болевой синдром купировался в течение первого месяца после проведенной лазерной терапии.

К окончанию стационарного этапа лечения нормализация анализов мочи была достигнута у 40% больных контрольной группы, и, у 76% больных основной группы.

В основной группе больных прекращение бактериовыделения наступило на этапе консервативного лечения у 98,9% больных, в контрольной группе – у 80,7%.

Эффективность комплексной терапии составила 76,5%, что на 36,1% выше сравнительно с контрольной группой. Исследователи отмечают, что различия в частоте нормализации анализов мочи, прекращения бактериовыделения и детоксикации к окончанию стационарного этапа лечения статистически достоверны (13).

Помимо туберкулеза почек, эффективность лазерной терапии доказана при лечении других различных внелегочных форм туберкулеза: мочевого пузыря, мочеточника, мужских половых органов, гениталий (2, 8, 9, 12).

В заключение следует сказать, что лазерная доказала свою эффективность при лечении различных форм туберкулеза. Наиболее эффективными лазерными аппаратами применяемыми при лечении данной патологии оказались полупроводниковые инфракрасные, с длиной волны 0,89 мкм. Значительно ускорились сроки прекращения бактериовыделения,сокращались сроки лечения, снижалась стоимость лечения больных туберкулезом различных форм и локализаций.

Литература

Дитятков А. Е., Митина Л. М., Красноперов А. Н. Применение квантовой терапии в лечении туберкулезаорганов дыхания // VI международная научно- практическая конференция по квантовой медицине.- М.- 2000 г., 119 с.

Жилин Ю. Н. Квантовая терапия в сочетании с аэрозольтерапией у больных туберкулезом легких // Х международная научно - практическая конференция по квантовой медицине.-М.- 2003 г.,113-115 с.

Илларионова Т. С.,Гаврильев С. С., Чибисов С. М., Стуров Н. В. Метод глубокого фотофореза вхимиотерапии туберкулеза легких // ХI международная научно- практическая конференция по квантовой медицине.- М.- 2005 г., 140-141 с.

Касторная В. А., Королева М. А. Применение МИЛ-терапии в комплексном лечении туберкулеза // III Всероссийская научно-практическая конференция по квантовой терапии.- М.-1998.- 70-71 с.

Козин Ю. И. Возможности иммунодиагностики и иммунокоррекции у больных кавернозным нефротуберкулезом// Матер. 4-го Всесоюзного съезда урологов.- М., 1990.- С.231-232

Мокрицкая Д. Е.Использование низкочастотного лазера при лечении больных туберкулезом гениталий // 2-й (XII) съезд фтизиатров: Сб. рез.- Саратов.- 1994.- С.203-204

Фролов В. А., Авдошин В. П.,Габлия М. Д. Морфологические изменения под воздействием лазеротерапии при остром пиелонефрите // Пленум правления Всероссийского об-ва урологов.- М.1996.- С. 92-93

Хоменко А. Г., Омаров Т. О.,Каминская Г. О., Блонская Г. Ю. Эффективность применения наружного лазерного облучения в комплексном лечении больных туберкулезом легких с сопутствующим бронхообструктивным синдромом // Пробл. туб.- 1991.-№8.- с.32-35

Хомяков В. Т. Низкоинтенсивное лазерное излучение в комплексном лечении полового туберкулеза у мужчин: Автореф. дис. канд. мед. наук.- Новосибирск.- 1995.-С.20

Москвин С. В., Буйлин В. А. Низкоинтенсивная лазерная терапия // М.- Техника.- 2000.- С. 423-451

Зарбуев А. Н. Чрезкожное применение низкоинтенсивного гранатового лазерного излучения в комплексном лечении больных туберкулезом легких- дис. канд. мед. наук, 1993 ЦНМБ; Шифр Д93-804; ЗД; Формат Дата получения: 93.01.01; Инв. номер Д-128305

Начиная с открытия Коха, длительное время основным и наиболее распространенным методом выявления микобактерий туберкулеза являлась бактериоскопия.

В настоящее время метод бактериоскопии считается недостаточным для диагностики туберкулеза. В практической работе противотуберкулезных учреждений необходимо чаще применять посев исследуемого материала на питательную среду, т. е. бактериологический метод.

Кроме бактериоскопии и метода посева, необходимо в ряде случаев использовать и прививки лабораторным животным, т. е. биологический метод.

Микобактерии туберкулеза можно обнаружить в различном материале, полученном от больного. Таким материалом является прежде всего мокрота. С усовершенствованием лабораторных методов удается обнаружить микобактерии туберкулеза в мокроте при незначительных изменениях в легких, а в ряде случаев — и без видимых на рентгенограмме туберкулезных поражений в легких. При отсутствии мокроты или невозможности ее получения исследуют промывные воды желудка. Этот способ после работ Арман-Делилля [Armand-Delill, 1927] имеет широкое применение в практике противотуберкулезных учреждений. Предполагали, что микобактерии туберкулеза попадают с мокротой в желудок как у взрослых, так и особенно у детей, страдающих легочным туберкулезом. Исследования и клинические наблюдения, проведенные в СССР и за рубежом, показали, что микобактерии туберкулеза в промывных водах желудка можно обнаружить не только при легочном, но и при внелегочном туберкулезе (кожи, костей, глаз, лимфатических узлов). Эти наблюдения доказывают возможность поступления микобактерии туберкулеза в желудок лимфогематогенным путем независимо от локализации туберкулезного процесса.

При отсутствии мокроты можно исследовать, кроме промывных вод желудка, слизь из гортани, а также промывные воды бронхов. Для этого больному натощак после предварительной анестезии дыхательных путей 1 % раствором дикаина орошают гортань подогретым изотоническим раствором хлорида натрия (10—15 мл) с помощью гортанного шприца. При этом необходимо создать такое положение больного, которое способствовало бы попаданию раствора в бронхи пораженного легкого. Изотонический раствор хлорида натрия, раздражая слизистую оболочку бронха, вызывает усиленное отделение слизи. Выделяемые при откашливании больным промывные воды бронха собирают в стерильный сосуд и подвергают дальнейшему исследованию.

Можно исследовать микобактерии туберкулеза, выделенные в фекальных массах, но при обнаружении в них микобактерий туберкулеза трудно решить вопрос, из каких органов последние выделяются.

Исследовать можно также мочу, спинномозговую жидкость, другие биологические жидкости и патологический материал.

Бактериоскопические методы выявления микобактерий туберкулеза

Бактериоскопические методы выявления микобактерий включают: обычную бактериоскопию мазков, окрашенных по Цилю — Нильсену, флотацию и люминесцентную микроскопию.

Обычная бактериоскопия. В мазках, окрашенных по Цилю — Нильсену, микобактерии туберкулеза могут быть обнаружены только при наличии не менее 50 000 бактериальных клеток в 1 мл патологического материала (предел чувствительности метода), причем тогда, когда микобактерии не изменены тинкториально или морфологически под влиянием антибактериальных препаратов (при лечении больного).

Для приготовления мазков мокроту выливают в чашку Петри и заостренными деревянными палочками из 5—6 участков выбирают гнойные комочки на два предметных стекла для приготовления мазков. Один препарат используют для исследования на эластические волокна. На другом стекле комочки мокроты растирают третьим стеклом и получают таким образом два препарата, один из которых окрашивают по Цилю — Нильсену, а второй, например, флюорохромными красками, если имеется возможность произвести люминесцентную микроскопию.

При окраске по Цилю — Нильсену на препарат наливают карболовый фуксин, подогревают до появления паров, обесцвечивают 6% раствором серной кислоты или 3% солянокислым алкоголем и докрашивают 0,25% раствором метиленового синего.

Окрашенные мазки микроскопируют с иммерсионной системой. При этом микобактерии туберкулеза выглядят красными на синем фоне. Типичные микобактерии имеют вид тонких, прямых или слегка изогнутых зернистых палочек.

Количество микобактерий туберкулеза, обнаруживаемых методом бактериоскопии в мокроте больного, зависит от многих причин и может колебаться в различных пределах. Учитывая возможные случайности и затруднения для определения количества микобактерий туберкулеза, мокроту больного рекомендуется исследовать повторно.

С введением в практику бактериостатических средств, препятствующих росту и размножению микобактерий туберкулеза в организме больного, определение количества их в мокроте в период лечения может быть относительным критерием эффективности антибактериальной терапии, учитывать который необходимо в комплексе с клиническими, рентгенологическими и другими лабораторными исследованиями. При отрицательных результатах бактериоскопии мокроты больных туберкулезом или лиц, подозрительных на туберкулез, рекомендуется производить повторные исследования мокроты 4—5 дней подряд или гомогенизировать мокроту при помощи химических веществ, т. е. превращать в однородную массу, и центрифугировать ее с целью концентрации микобактерий туберкулеза в небольшом объеме.

В мокроте могут быть различные форменные элементы: лейкоциты, эритроциты, эпителий, альвеолярные клетки, пылевые клетки, цилиндрический мерцательный эпителий, эластические волокна, известковые соли, кристаллы холестерина. Плоский эпителий может исходить из полости рта, глотки, гортани. У лиц, вдыхающих угольную пыль и дым, в мокроте обнаруживаются пылевые клетки. Цилиндрический эпителий может включаться в мокроту при прохождении последней через бронхи и трахею. Эритроциты, единичные и неизмененные, могут попадать в мокроту из поврежденных десен и носоглотки, но наличие эритроцитов в мокроте может быть и вследствие кровохарканья.

В мокроте могут быть, кроме описанных, эластические волокна Коплена — Джонса, или коралловидные. Они представляются толстыми, шероховатыми образованиями, заканчивающимися колбасообразно. Можно обнаружить и обызвествленные эластические волокна.

Наличие эластических волокон в мокроте указывает на разрушение легочной ткани. При свежем распаде пучки волокон сохраняют альвеолярное строение, при пролиферативных формах туберкулеза эластические волокна выделяются в виде пучков без сохранения альвеолярного строения. Волокна могут выделяться при всех формах туберкулеза; волокна Коппена — Джонса появляются преимущественно в случаях старого туберкулеза. Обызвествленные волокна можно видеть при распаде обызвествленных очагов во время обострения процесса.

Необходимо иметь в виду, что эластические волокна также можно обнаружить и при ряде нетуберкулезных заболеваний легких, например при абсцессе легких.

В мокроте больных туберкулезом можно обнаруживать известковые соли (карбонаты и сульфаты), имеющие под микроскопом вид темных зерен разной величины. Попадают они в мокроту чаще всего из старых, распадающихся обезвествленных очагов. Известковые соли от прибавления разведенной азотной кислоты растворяются.

Кристаллы холестерина в мокроте имеют вид нежных пластинок разной величины, большей частью с обломанными краями. Эти кристаллы обнаруживаются при наличии в легких старых каверн.

Метод флотации. Этот метод применяется в случаях скудного содержания микобактерий туберкулеза в исследуемом материале и при отрицательном результате бактериоскопии. По сравнению с обычной бактериоскопией микобактерии туберкулеза обнаруживаются методом флотации в патологическом материале примерно на 10—15% чаще. Для исследования методом флотации мокроту в количестве 12—15 мл помещают в колбу емкостью 250 мл, добавляют примерно равное количество 0,5% раствора едкого натра или кали и для лучшей гомогенизации встряхивают в течение 5—10 мин, затем до половины емкости колбы наливают дистиллированную воду с добавлением 0,5 мл ксилола или бензина. Все содержимое встряхивают 5—10 мин, после чего доливают дистиллированную воду до окончательного объема — 250 мл. Спустя 30—60 мин капельки бензина (ксилола) всплывают на поверхность, увлекая за собой микобактерии туберкулеза, концентрируя их в небольшом объеме образовавшегося на поверхности кольца. Полученное флотационное кольцо пипеткой переносят на два предметных стекла. Один препарат окрашивают по Цилю — Нильсену.

При флотации промывных вод, гноя, экссудата, спинномозговой жидкости и другого материала, не требующих гомогенизации, к ним добавляют меньшее количество раствора щелочи (от 1—2 капель до 1—2 мл в зависимости от количества материала). В дальнейшем поступают так же, как при флотации мокроты.

Люминесцентная микроскопия. Метод люминесцентной микроскопии основан на способности микобактерий туберкулеза, окрашенных флюорохромами, светиться под воздействием сине-фиолетовых лучей.

Этот метод позволяет дополнительно выявлять микобактерии туберкулеза на 17% чаще по сравнению с обычной бактериоскопией и на 8% чаще по сравнению с методом флотации. При люминесцентной микроскопии исследование производится при малом увеличении, что расширяет поле зрения и способствует обнаружению микобактерий туберкулеза, содержащихся в исследуемом материале в небольшом количестве.

Для люминесцентного исследования пользуются либо специальным микроскопом (МЛ-1 и МЛ-2), либо обычным микроскопом типа МБИ-1 с добавочным осветителем. Ко всем комплектам осветительной аппаратуры прилагаются наборы необходимых светофильтров.

Люминесцентным методом исследуют различный патологический материал. Фиксированные над пламенем препараты

окрашивают при легком подогревании в течение 15 мин специальной смесью: аурамин 00—0,5 г, радомин С — 0,05 г на 1000 мл дистиллированной воды. Затем мазок промывают водой и в течение полминуты обесцвечивают 3% солянокислым спиртом, снова промывают водой и докрашивают для гашения фона 0,25% раствором метиленового синего. При люминесцентной микроскопии микобактерии флюоресцируют золотисто-желтым цветом на темном нефлюоресцирующем фоне. Этот метод в настоящее время находит широкое применение.

Бактериологические методы

Больной туберкулезом в процессе антибактериального лечения может выделять микобактерии туберкулеза, измененные морфологически и в небольшом количестве, что не позволяет обнаружить их бактериоскопическими методами (обычная бактериоскопия, метод флотации, люминесцентная микроскопия). Поэтому в комплекс исследований, направленных на обнаружение микобактерий туберкулеза, в настоящее время обязательно включается посев патологического материала. Выделение культур микобактерий туберкулеза позволяет определить жизнеспособность возбудителя, его лекарственную чувствительность, ферментативную активность и вирулентность.

Для бактериологического исследования может быть использован любой патологический материал.

Поскольку обычно в посевном материале содержится и неспецифическая микрофлора, требуется его так обработать, чтобы уничтожить сопутствующую микрофлору и сохранить при этом жизнеспособность микобактерий туберкулеза.

В последние годы в связи с широким применением противотуберкулезных препаратов в 19—20% случаев наблюдается диссоциация между обнаружением микобактерий туберкулеза при бактериоскопическом исследовании и ростом их при посеве патологического материала. Это явление заключается в том, что видимые под микроскопом, они не растут на питательных средах. Такая диссоциация обусловлена воздействием на микобактерии туберкулеза лекарственных препаратов.

Биологическая проба. Наиболее чувствительным методом обнаружения микобактерий туберкулеза является заражение морских свинок. Однако не всегда удается получить развитие генерализованного туберкулеза в тех случаях, когда в патологическом материале содержатся микобактерии туберкулеза, устойчивые к препаратам гидразида изоникотиновой кислоты. В таких случаях микобактерии оказываются невирулентными для этих животных, и тогда при положительном результате посева патологического материала имеет место отрицательный исход заражения.

При развитии туберкулезного процесса после подкожного заражения в области введения материала к концу месяца прощупываются увеличенные лимфатические узлы. Аллергические реакции определяются при внутрикожном введении 0,1 мл ATK 1 : 10. При положительной биологической пробе у морских свинок развивается генерализованный туберкулез.