Антитела к вирусу денге

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Код исследования: 1133

Определение антител к вирусу Денге.

Лихорадка Денге — это острое вирусное заболевание, протекающее на фоне высокого подъема температуры тела, мышечных и суставных болей, увеличения лимфатических узлов, а в некоторых случаях с развитием геморрагического синдрома (сыпь в виде точечных кровоизлияний, кровотечений различной степени выраженности и локализации). Возбудителем лихорадки Денге является вирус семейства Togaviridae рода Flavivirus. При первичной инфекции вирусом Денге IgM появляются на 3 - 5 день после заражения. Эти IgM-антитела сохраняются в течение 1-2 месяцев после заражения. IgG появляются в конце первой недели болезни и в последующем сохраняются у большинства пожизненно.

IgG антитела имеют высокую степень перекрестной реактивности между четырьмя типами вируса Денге и антигенами гетерологичных флавивирусов. В связи с относительно поздним ростом уровня антител до концентрации, которая может быть обнаружена, отрицательный результат определения антител на ранних стадиях заболевания не имеет решающего значения. Образцы необходимо собрать, по крайней мере, через 7 дней после начала симптомов для того, чтобы исключить возможность острой инфекции вирусом Денге. Результат выдается суммарный

• Острая симптоматика лихорадочного заболевания после посещения эндемических территорий;
• При обнаружении у пациента с лихорадкой лабораторных признаков инфицирования комаром: лейкопения, тромбоцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.)

слабая иммунная реакция пациента;

низкий уровень антител.

Лихорадка Денге — это острое вирусное заболевание, протекающее на фоне высокого подъема температуры тела, мышечных и суставных болей, увеличения лимфатических узлов, а в некоторых случаях с развитием геморрагического синдрома (сыпь в виде точечных кровоизлияний, кровотечений различной степени выраженности и локализации). Возбудителем лихорадки Денге является вирус семейства Togaviridae рода Flavivirus. При первичной инфекции вирусом Денге IgM появляются на 3 - 5 день после заражения. Эти IgM-антитела сохраняются в течение 1-2 месяцев после заражения. IgG появляются в конце первой недели болезни и в последующем сохраняются у большинства пожизненно.

IgG антитела имеют высокую степень перекрестной реактивности между четырьмя типами вируса Денге и антигенами гетерологичных флавивирусов. В связи с относительно поздним ростом уровня антител до концентрации, которая может быть обнаружена, отрицательный результат определения антител на ранних стадиях заболевания не имеет решающего значения. Образцы необходимо собрать, по крайней мере, через 7 дней после начала симптомов для того, чтобы исключить возможность острой инфекции вирусом Денге. Результат выдается суммарный.

• Острая симптоматика лихорадочного заболевания после посещения эндемических территорий;
• При обнаружении у пациента с лихорадкой лабораторных признаков инфицирования комаром: лейкопения, тромбоцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.)

30 мин. при комнатной температуре, затем поместить в холодильник при tº +4 +8 ºС.

Транспортировка в вертикальном положении в термоконтейнерах при tº +4 +8 ºС.

Лихорадка Денге — это острое вирусное заболевание, протекающее на фоне высокого подъема температуры тела, мышечных и суставных болей, увеличения лимфатических узлов, а в некоторых случаях с развитием геморрагического синдрома (сыпь в виде точечных кровоизлияний, кровотечений различной степени выраженности и локализации). Возбудителем лихорадки Денге является вирус семейства Togaviridae рода Flavivirus. При первичной инфекции вирусом Денге IgM появляются на 3 - 5 день после заражения. Эти IgM-антитела сохраняются в течение 1-2 месяцев после заражения. IgG появляются в конце первой недели болезни и в последующем сохраняются у большинства пожизненно.

IgG антитела имеют высокую степень перекрестной реактивности между четырьмя типами вируса Денге и антигенами гетерологичных флавивирусов. В связи с относительно поздним ростом уровня антител до концентрации, которая может быть обнаружена, отрицательный результат определения антител на ранних стадиях заболевания не имеет решающего значения. Образцы необходимо собрать, по крайней мере, через 7 дней после начала симптомов для того, чтобы исключить возможность острой инфекции вирусом Денге. Результат выдается суммарный.

• Острая симптоматика лихорадочного заболевания после посещения эндемических территорий;
• При обнаружении у пациента с лихорадкой лабораторных признаков инфицирования комаром: лейкопения, тромбоцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.)

30 мин. при комнатной температуре, затем поместить в холодильник при tº +4 +8 ºС.

Транспортировка в вертикальном положении в термоконтейнерах при tº +4 +8 ºС.

реакция связывания комплемента

реакция торможения гемагглютинации

1. Область применения

1.1. Методические рекомендации (далее - MP) определяют порядок организации и проведения лабораторной диагностики лихорадки денге (далее - ЛД) и носят рекомендательный характер.

1.2. Настоящие MP предназначены для специалистов лабораторий, осуществляющих диагностические, мониторинговые и научные исследования с возбудителями опасных инфекционных болезней.

2. Нормативные ссылки

3. Общие положения

Лихорадка денге относится к острым природно-очаговым арбовирусным инфекционным заболеваниям с трансмиссивным механизмом передачи возбудителя, характеризующимся лихорадкой, общей интоксикацией, миалгией, артралгией, лимфоаденопатией, экзантемой, иногда геморрагическим синдромом.

Возбудитель ЛД - вирус денге (Dengue virus), входящий в семейство Flaviviridae, род Flavivirus, серогруппу вируса денге (Dengue virus group), относится ко II группе патогенности (опасности) по классификации патогенности, действующей на территории Российской Федерации. Существует 4 субтипа вируса денге, различающихся серологически и генетически. Все четыре разновидности вируса денге способны вызвать ЛД, в том числе ее геморрагическую форму. Как правило, эта тяжелая форма возникает при повторном инфицировании другим субтипом вируса.

Ареал ЛД охватывает территории более чем 100 тропических и субтропических стран Африки, Америки, Южной и Юго-Восточной Азии, Океании и Австралии. Имеется информация об эпидемиях и вспышках этого заболевания в южных регионах Европы. В Российской Федерации существует вероятность формирования аутохтонных очагов ЛД на территории Черноморского побережья (Сочи и Сочинский район, Крым).

В последнее время в связи с развитием массового туризма, интенсификацией миграционных процессов и деловых связей возникла проблема завозных случаев этих заболеваний из тропических и субтропических стран в неэндемичные районы. Известны данные об импортированных случаях ЛД в Швеции, Финляндии, других европейских странах, в США, лихорадки Чикунгунья в Японии, Германии, Италии и других государствах Европы, Китае, Израиле, москитной лихорадки Тоскана (эндемичной в Средиземноморском регионе) в США, Германии и Швеции. Имеется информация о завозных случаях других арбовирусных инфекций. В течение шести лет (2009-2014 гг.) сотрудниками Инфекционной больницы N 1 г. Москвы и НИИ вирусологии им.Д.И.Ивановского Минздрава России было диагностировано в общей сложности 178 лабораторно верифицированных случаев: лихорадки денге (152), лихорадки Чикунгунья (16), лихорадки Западного Нила (6), москитных лихорадок (3) и японского энцефалита (1) среди лиц, госпитализированных после возвращения из поездок в тропические страны.

По данным Роспотребнадзора в Российской Федерации наблюдалась следующая динамика регистрации завозных случаев ЛД: в 2012 г. - 63, в 2013 г. - 170, за 8 месяцев 2014 г. - 77, за 10 месяцев 2015 года - 100.

В эндемичных странах мира ежегодно регистрируются до 100 млн случаев ЛД в классической форме и примерно 500000 в виде геморрагической лихорадки, летальность при которой достигает 15-20%. Источником инфекции являются больные люди, обезьяны, возможно летучие мыши. Известны 2 эпидемиологические формы ЛД: джунглевая и городская. Переносчиками вируса при джунглевой форме являются комары Aedes niveus (нападающие как на обезьян, так и на людей), при городской эпидемиологической форме лихорадки - синантропные комары преимущественно Aedes aegypti и Aedes albopictus. Вирус способен размножаться в комарах при температуре воздуха не ниже 22°С.

Вирусный геном представлен одноцепочечной РНК положительной полярности длиной около 11 тыс. нуклеотидов. РНК кодирует три структурных (С, prM/М, Е) и семь неструктурных (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B, NS5) белков.

Основным иммуногенным белком вириона является белок Е, который играет доминирующую роль в генерации нейтрализующих антител и индукции иммунного ответа. На поверхности инфицированных клеток экспрессируется неструктурный гликопротеин NS1, который может секретироваться, инициирует активацию системы комплемента и играет важную роль в развитии шока при геморрагической ЛД.

Инкубационный период ЛД составляет от 2 до 15 дней после укуса инфицированного комара (чаще 5-7 дней), после чего развивается лихорадка, продолжающаяся 6-7 дней и иногда носящая двухфазный характер. Заболевание начинается внезапно с повышения температуры до 39-40°С, появления озноба, болей в костях и мышцах поясничного отдела позвоночника, прямых мышцах живота, крестце, коленных суставах. Отмечается резкая слабость, головная боль, боли в глазных яблоках, светобоязнь, головокружение, потеря аппетита, возможна тошнота и рвота, бессонница, ощущение сухости во рту и сухости губ. У большинства больных увеличиваются периферические лимфатические узлы. Часто появляется экзантема, для которой характерен полиморфизм. Могут быть геморрагические проявления различной степени выраженности (от петехий до органных кровотечений). Лихорадка продолжается 2-7 дней, иногда она носит двухфазный характер и, как правило, закачивается выздоровлением. Заболевание сопровождается ретроорбитальными болями, миалгией и артралгией. Отмечается покраснение кожи лица и груди с выраженной дерматографией. Примерно в 50% случаев регистрируется макулопапулезная сыпь. В крови регистрируется лейкопения и тромбоцитопения, повышение уровня трансаминаз. По клиническому течению различают 2 формы ЛД: лихорадочную форму (классическую) и геморрагическую (протекает более тяжело, возможно развитие шокового состояния). В Международной классификации болезней 10-го пересмотра классическая ЛД имеет код А90, геморрагическая ЛД - А91.

Особенностью иммунопатогенеза геморрагической ЛД является то, что специфические антитела могут опосредовать феномен антителозависимого усиления инфекции. Антителозависимое усиление включает повышение связывания вируса с клетками, экспрессирующими рецепторы к Fc фрагментам иммуноглобулинов, после опсонизации антителами. Этот механизм может способствовать утяжелению течения заболевания, часто наблюдаемому при повторном инфицировании гетерологичным вирусом денге.

При геморрагической ЛД летальность достигает 5%, а среди детей - до 15-20%. ЛД является ведущей причиной госпитализации и смерти детей в Юго-Восточной Азии.

У реконвалесцентов, перенесших ЛД, типоспецифический иммунитет сохраняется в течение примерно 2 лет. Перекрестная устойчивость к инфицированию другим типом вируса непродолжительна и редко превышает 12 недель, поэтому уже через 2-3 месяца возможно повторное заболевание за счет заражения гетерологичным типом вируса. В течение жизни человек может последовательно переболеть ЛД, вызванной всеми типами вируса.

4. Методы лабораторной диагностики лихорадки денге

4.1 Для специфической диагностики ЛД используют иммунологические, молекулярно-генетические и вирусологические методы исследований.

4.2 С начала клинических проявлений и до 7 дня болезни вирус денге может быть обнаружен методом ОТ-ПЦР в сгустке крови, цельной крови, сыворотке крови, плазме, а также в аутопсийном материале (печень, легкие, лимфатические узлы, тимус, красный костный мозг). Список коммерческих наборов для проведения ОТ-ПЦР приведен в прилож.4. При получении положительного результата ОТ-ПЦР проводят определение нуклеотидной последовательности амплифицированного фрагмента к ДНК методом секвенирования.

4.3 Для выделения вируса денге используют новорождённых белых мышей и культуры клеток (Vero, ВНК-21), а также комариные культуры, например, С6/36. Процесс выделения и идентификации вируса денге довольно длительный и проводится в специализированных лабораториях с высоким уровнем защиты (BSL-3). Для выделения вируса используют пробы крови, сыворотки крови, плазмы, обогащенной лейкоцитами, полученные в острый период заболевания (первые 7-10 дней болезни), суспензии органов, взятых при аутопсии.

4.4 Основным методом серодиагностики ЛД является иммуноферментный анализ (ИФА-lgM). Специфические антитела класса IgM выявляются у 50% пациентов, начиная с 3-5 суток после начала заболевания, а к 10 дню уже у 99%. Максимальные титры IgM наблюдаются через 2 недели после появления симптомов, постепенное снижение происходит в последующие 2-3 месяца. Возможна циркуляция IgM-антител в крови до полугода. Помимо ИФА-lgM антитела к вирусам денге можно выявлять в сыворотке или плазме больных непрямым методом МФА и методом иммунохроматографии (в сыворотке, плазме или цельной крови). Иммуноглобулины класса G (IgG) в низких титрах обычно обнаруживаются к концу первой недели заболевания, значительно нарастают в последующий период и, вероятно, персистируют в течение всей жизни. Для выявления сероконверсии IgG вторая проба сыворотки обследуется с интервалом в 10-14 дней. Пик IgG антител приходится на 3-4 неделю заболевания, затем их концентрация снижается и остается, как правило, на определяемом уровне в течение длительного времени.

При вторичном инфицировании гетерологичным вирусом денге титры антител нарастают быстрее в основном за счет иммуноглобулинов класса G. Титр IgM во время инфекции, вызванной гетерологичным типом вируса, значительно ниже, чем при первой встрече с возбудителем. Обнаружение IgG-антител имеет значение при ретроспективной диагностике заболевания и дифференциации первичной и вторичной инфекции, вызванной вирусами денге разных типов. Количественное определение IgM и IgG к вирусу денге позволяет определить первичное или вторичное инфицирование, что особенно важно для прогноза исхода заболевания.

4.5. Белок NS1 (NS1-антиген) вируса денге детектируют методом ИФА (в сыворотке крови пациентов и в аутопсийном материале) и методом иммунохроматографии (в сыворотке, плазме, цельной крови) в течение примерно 10 дней с момента появления клинических признаков заболевания, что объясняется высокой концентрацией и продолжительной персистенцией вируса в крови, достигающей 10 -10 инфекционных вирусных частиц на мл. Обнаружение NS1-антигена указывает на присутствие вируса денге в организме больного.

4.6 Другие серологические методы диагностики ЛД, такие как реакция нейтрализации (РН), реакция торможения гемагглютинации (РТГА), реакция связывания комплемента (РСК) в настоящее время используются редко. РН хотя и обладает высокой специфичностью (при ее использовании возможна идентификация серотипа вируса денге и дифференциация от других флавивирусных инфекций), однако является трудоемким неэкспрессным методом и может использоваться лишь в специализированной вирусологической лаборатории. РТГА также достаточно специфична, но, как и РСК, обладает низкой чувствительностью. РСК эффективна на поздних этапах заболевания, однако при ее использовании, как и в случае применения ИФА и МФА, возникают сложности по дифференциации ЛД от других родственных флавивирусных инфекций.

4.7 В настоящее время в Российской Федерации для серологической диагностики ЛД используются ИФА- и ПЦР-тест-системы. Перечень наборов реагентов и тест-систем для использования при лабораторной диагностике ЛД приведен в прилож.4. Импортные наборы для выявления NS1-антигена вируса денге и антител классов IgM и IgG на основе метода иммунохроматографии могут быть скомбинированы в один тест, что удобно в использовании. Однако зарубежные тест-системы для постановки ИФА, МФА и иммунохроматографии пока не нашли применения в диагностических лабораториях России.

4.8 Для постановки точного дифференциального диагноза ЛД серологическое обследование крови больных с подозрением на эту инфекцию необходимо проводить наиболее специфичным методом ИФА-IgM в четырех тест-системах: ИФА-IgM-денге, ИФА-IgМ-лихорадка Западного Нила (ЗН), ИФА-IgM-желтая лихорадка (ЖЛ), ИФА-IgМ-японский энцефалит (ЯЭ). Эти заболевания имеют часто сходные ареалы распространения, этиологически связаны с родственными флавивирусами, перекрестно реагирующими в серологических реакциях. Кроме того, ЛД целесообразно дифференцировать от близкой по клинической картине лихорадки Чикунгунья, распространенной как и ЛД в Африке, Южной Азии, а в последнее время - в Южной Америке и Европе.

4.9 Лабораторное подтверждение диагноза ЛД основывается на наличии как минимум одного положительного результата на следующие тесты:

обнаружение РНК вирусов денге методом ОТ-ПЦР;

наличие NS1-антигена в одном образце сыворотки;

наличие IgM в одном образце сыворотки;

нарастание титра IgG в парных сыворотках, взятых с интервалом 2-3 недели, в четыре раза и более.

11 марта 2020 года Всемирная организация здравоохранения объявила о пандемии коронавируса SARS-CoV-2. На данный момент о выявлении у себя инфицированных людей объявили 114 стран мира, а число погибших превысило 4 тысячи человек.

О том, как должен выглядеть человек с ОРВИ, вызванной SARS-CoV-2, сегодня знают все. У него высокая температура и кашель. Однако в начале марта появилось сообщение о двух случаях заражения уханьским коронавирусом, замаскировавшихся под другое тяжелое инфекционное заболевание. Врачи и ученые озадачены: лабораторные анализы указывали на одну болезнь, а потом вместо нее обнаружилась другая. MedAboutMe разбирается в ожидаемых и неожиданных проявлениях нового коронавируса.

Известные симптомы заражения SARS-CoV-2

Уточним, что у человека, заразившегося SARS-CoV-2, есть несколько вариантов развития событий:

За последние пару месяцев у врачей и ученых набралось достаточно данных наблюдений, чтобы вычленить основные симптомы, развивающиеся у людей, зараженных SARS-CoV-2. Главными из них являются высокая температура и кашель. Эти проявления болезни наблюдаются у 80-90% пациентов.

Одышка развивалась у трети пациентов с подтвержденным SARS-CoV-2. Но надо отметить, что чаще всего в этих случаях речь уже шла о COVID-19, то есть, у человека имелось повреждение легких. При появлении этого симптома после нескольких дней кашля и температуры следует незамедлительно обратиться к врачу.

Среди других проявлений болезни – миалгия (мышечная боль, 11% случаев), ринорея (насморк, 4%) и редкие случаи болей в груди, диареи, тошноты и рвоты.

Отдельно следует сказать про результаты анализов крови:

• У 38% пациентов наблюдалась нейтрофилия – повышенное количество нейтрофилов в крови.
• Лейкоциты у 9% больных были ниже нормы, а у 24% – выше.
• Тромбоциты у 12% – ниже, а у 4% – выше нормы.
• С-реактивный белок в большинстве случаев также был повышен.
• У почти половины больных наблюдались нарушения функции печени, в 7% – нарушения функции почек.
• Наблюдались повышенные значения некоторых ферментов сердечной мышцы.

Несостоявшаяся лихорадка денге

Сингапурские ученые из National University Health System в начале марта опубликовали сообщение о двух необычных случаях заражения коронавирусом SARS-CoV-2.

В первом случае речь шла о 57-летнем мужчине, поступившем в больницу 2 февраля 2020 года. У него не было в анамнезе контактов с больными людьми и поездок в зараженные страны. Но имелись три дня высокой температуры и кашля. Пациент был отправлен на рентген, который ничего выдающегося не показал. А, согласно результатам анализа крови, у него была тромбоцитопения – падение количества тромбоцитов ниже 150 млрд клеток на 1 л.

Пациенту также были проведены экспресс-тесты на наличие в крови антигена NS1 и специфических IgG и IgM антител к вирусу денге, вызывающего одноименную лихорадку.

Для Сингапура это заболевание является достаточно распространенным. Инфекцию разносят комары Aedes aegypti. Только в прошлом году она стала причиной гибели 9 человек.

Тест на вирусный белок NS1 и антитела к вирусу оказался отрицательным, и пациент был выписан на амбулаторное лечение. Повторно он обратился к врачам с неснижаемой температурой, усилившейся тромбоцитопенией, к которой присоединилась лимфопения – патологическое снижение количества лимфоцитов в крови. И в этот раз повторный тест на лихорадку денге показал наличие специфических IgG и IgM антител, то есть был положительным.

Через 2 дня она вернулась в больницу с неснижаемой температурой, еще более выраженной тромбоцитопенией и появившейся лимфопенией, а также нарушением функции печени. Рентгенограмма грудной клетки была нормальной, поэтому ее положили на лечение с тем же диагнозом – лихорадка денге. Но через 3 дня после поступления в клинику у больной развилась одышка, а температура все это время продолжала держаться, несмотря на нормализацию показателей крови. ПЦР-анализ мазка из носоглотки показал наличие коронавируса, а повторный тест на вирус денге дал отрицательный результат. И в этом случае первоначальный результат теста на лихорадку денге был признан ложноположительным.

Как узнать точно: коронавирус или нет?

Врачи не знают ответа на вопрос: почему тесты на лихорадку денге оказались ложноположительными. Даже если предположить, что человек успел ею переболеть, это должно было бы оставить след в его крови в виде антител, повторный анализ не был бы отрицательным. Возможно, это проблема конкретных экспресс-тестов, которые использовались в Сингапуре, а может быть есть что-то такое в коронавирусе, о чем мы еще не знаем. Пока.

По внешним симптомам тоже невозможно точно сказать: коронавирус ли это, или сезонный грипп, или еще какой-то из многочисленных вирусов, с которыми мы сталкиваемся каждый год. Причем совершенно не обязательно, что человек заражен одним-единственным вирусом. В его организм могут попасть несколько патогенных микроорганизмов, и каждый будет давать свою симптоматику — достаточно редкие случаи насморка, тошноты и рвоты, диареи вполне могут объясняться таким образом. И даже присоединение грозного симптома в виде одышки может оказаться обычной пневмонией, не требующей госпитализации.

Только тест на коронавирус может дать достаточно точный ответ. Причем речь идет о ПЦР-РТ — методе полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, для проведения которого требуется несколько часов и достаточно сложное оборудование.

Следует добавить, что первые экспресс-тесты, которые сегодня в спешке разрабатывают в лабораториях всех стран мира, неизбежно с определенной частотой будут давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Так, экспресс-тесты, которые в США в экстренном режиме месяц назад были одобрены FDA и распространялись по всем филиалам CDC, оказались неточными. Качество других экспресс-тестов пока неизвестно.

Читайте также:

• Не удалился один вирус
• Можно ли пить энергетики при гепатите с
• Нарушение обмена железа при гепатитах
• Новости будет грипп или нет
• Убивает ли солнце вирусы