Что означает аналитическая чувствительность к вирусу гепатита в

Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.

При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.

Виды ПЦР на вирусный гепатит В

Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.

Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:

• отрицательный результат — вируса нет;
• положительный результат — вирус обнаружен.

Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.

В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.

Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:

1. Перед назначением лечения.
2. Для оценки эффективности терапии.
3. Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
4. Для определения стадии, на которой находится заболевание.

Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:

1 МЕ/мл = 5 копий/мл

Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.

При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:

• 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.

Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:

• ДНК ВГВ 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.

Подготовка к обследованию

Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:

1. Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
2. Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
3. Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.

Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.

Подводя итоги

На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.

Hepatitis C Virus (HCV) – гепатотропный вирус из семейства Флавивирусов, провоцирующий гепатит С. Аналитическая чувствительность тест-систем, которые используются для выявления HCV-инфекции, должна быть высокой. Чем она больше, тем выше шансы на обнаружение вируса при минимальной инфекционной нагрузке. Скрининг гепатита С включает два анализа – ИФА на anti-HCV и ПЦР на РНК HCV. В случае использования диагностических систем с низкой специфичностью вероятность получения ложноотрицательных результатов увеличивается.

Что значит аналитическая чувствительность

Аналитическая чувствительность (АЧ) – показатель, отражающий наименьшую концентрацию вещества (антител, ДНК или РНК возбудителя), определяемого тест-системой. Чем она выше, тем меньше риск получения ложных результатов анализа. При подозрении гепатита С выполняют 2 теста:

• Иммуноферментный анализ (ИФА) – серологический тест, нацеленный на выявление антител к возбудителю инфекции. Они определяются в кровяном русле только через 1-1.5 месяца после заражения. В 15-30% случаев наличие специфических белков указывает на перенесенную болезнь.

• Качественный ПЦР-анализ на гепатит С – молекулярно-биологический тест, при котором обнаруживают РНК вируса гепатита С. Если генетический материал выявляется, положительный результат ИФА подтверждается.

Аналитическая чувствительность – минимальный предел измерения тест-системы, выявляющей антитела к возбудителю или его генетический материал.

Если вирусная РНК гепатита С обнаруживается, выполняют дополнительные анализы:

• Количественная ПЦР – определение вирусной нагрузки путем подсчета числа копий РНК возбудителя в 1 мл крови. От уровня виремии во многом зависит прогноз терапии и дозировка лекарств.

• Генотипирование – определение штамма возбудителя. Существует несколько генотипов и субтипов вируса гепатита С (ВГС). В каждом конкретном случае используются определенные медикаменты, повышающие шансы на достижение устойчивого вирусологического ответа (УВО).

ПЦР отличается высокой специфичностью. Поэтому анализ на РНК ВГС (RNA HCV) является золотым стандартом в диагностике вирусного заболевания. Этим методом удается выявить единичные вирусы в плазме. Поэтому в рамках скринингового обследования его назначают даже при отрицательных результатах ИФА.

Как расшифровать цифры в бланке

Точность анализа напрямую зависят от чувствительности используемых аналитических систем:

• Количественный ПЦР. В норме RNA HCV в крови отсутствует. Наличие в плазме даже нескольких копий вируса указывает на заражение HCV-инфекцией. Анализ обладает высокой чувствительностью – не ниже 15 МЕ/мл. Это значит, что вирус будет выявлен даже в случаях, если в 1 мл биоматериала будет до 60 копий ВГС. Тест-системы с чувствительностью от 10 МЕ/мл выявляют вирусное заболевание при меньших концентрациях вирионов в крови – от 40.
• Качественный ПЦР. В норме антитела к ВГС не обнаруживаются. Отрицательный результат связан либо с отсутствием RNA HCV, либо с очень низкой концентрацией антител в плазме. Для качественного анализа рекомендуется использовать тест-системы с АЧ не ниже 500 МЕ/мл.

В нескольких зарубежных диагностических центрах проводилась сравнительная оценка чувствительности разных анализов. При выполнении ИФА она достигает 70%, а при количественной ПЦР – 99%.

Уровень вирусной нагрузки, который определяется в рамках количественной ПЦР (в МЕ/мл):

1. минимальная – до 180 000;
2. низкая – 400 000;
3. высокая – более 800 000.

В некоторых лабораториях используют внесистемные единицы измерения, а иногда данные записываются в количестве копий HCV. Чтобы пересчитать значения, учитывают, что 1 МЕ/мл соответствует 4 копиям вируса на 1 мл крови. Если в бланке указан результат 5.5*10 5 МЕ/мл, это означает, что в 1 мл биоматериала содержится 2.2*10 6 копий возбудителя гепатита С.

Что дает анализ ПЦР

Из-за невысокой диагностической специфичности ИФА (anti-HCV NS IgG) иногда дает ложноотрицательные результаты. Такое происходит при сдаче анализа в период с 1 до 6 неделю после заражения. Концентрация антител к HCV находится за пределами чувствительности тест-системы, поэтому гепатит не диагностируется.

Генетический материал флавивируса выявляется в плазме уже через 7 дней после заражения. А благодаря высокой аналитической специфичности ПЦР инфекция обнаруживается, даже если в 1 мл крови циркулирует до 50 копий вирионов.

ПЦР-исследование назначается для:

1. раннего выявления HCV-инфекции;
2. дифференциальной диагностики гепатитов;
3. контроля результативности антивирусной терапии;
4. определения особенностей течения гепатита С.

Запоздалое лечение опасно хронизацией воспаления и осложнениями – жировым гепатозом, фиброзом, циррозом, раком печени.

Если ПЦР-анализ на гепатит С указывает на заражение, проводят соответствующее лечение. Для уничтожения ВГС применяют лекарства прямого противовирусного действия:

В зависимости от генотипа и осложнений продолжительность курса варьируется от 8 до 24 недель. Во время антивирусной терапии больные сдают повторный тест на количество копий РНК вируса. Если их концентрация уменьшается, это свидетельствует о положительной динамике и высоких шансах на достижение УВО.

Аналитическая чувствительность – одна из основных характеристик тест-системы, которая отражает минимальную концентрацию выявляемых в биоматериале антител, ДНК или РНК возбудителя. Она приобретает особенное значение, когда требуется исключить наличие инфекционных агентов в организме. Чем выше чувствительность анализа, тем реже он дает ложные результаты.

Но как проводится расшифровка анализов на гепатит? Какие методы диагностики проводятся, в зависимости от типа заражения? Какова расшифровка анализа на гепатит С или В? Ответы на эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Виды анализов на гепатит

Прежде чем говорить о расшифровке анализа на гепатит В или С, следует выяснить, какие методы аналитической диагностики этого заболевания существуют в современной медицинской практике. Способ определения болезни зависит от путей заражения. Так как гепатиты В и С преимущественно передаются через кровь, для определения вирусной нагрузки и подтверждения диагноза проводится анализ этой биологической жидкости. Образец крови берется из вены пациента для дальнейшего изучения в лабораторных условиях.

Также диагноз подтверждается аппаратным способом при помощи ультразвукового обследования и эластометрии печени. Данные методы позволяют определить степень заражения и площадь пораженных вирусом тканей жизненно важного органа. Также для расшифровки анализов на гепатит большое значение имеет определение примерного срока инфицирования.

Исследования образцов биологических жидкостей, проводимые при диагностике гепатовируса, делятся на:

• Качественные — нацелены на определение наличия патогена;
• Количественные — определяют вирусную нагрузку и степень инфицирования.

В зависимости от типа вируса, для определения его наличия проводятся разные анализы. Рассмотрим их подробнее.

Вирусный гепатит В является не только опасным, но и чрезвычайно заразным вирусным заболеванием. Кроме того, эта болезнь опасна большим количеством осложнений, среди которых: цирроз, фиброз и онкологические новообразования в печени. Поэтому правильная расшифровка анализа на гепатит В очень важна. Своевременная диагностика может спасти пациенту жизнь.

С целью определения гепатовируса типа В проводятся следующие анализы:

Вирусный гепатит С также передается через кровь, однако является менее заразным. Тем не менее, это заболевание довольно распространено как в России, так и за ее пределами. Сдача анализов на обнаружение ВГС необходимо для определения самого заболевания, его стадии и подходящей для терапии схемы лечения оригинальными индийскими препаратами. При диагностике гепатита С проводятся следующие анализы:

• На анализ на антигены ВГС (аnti-HCV-total ) — качественный тест. Обнаруженные иммуноглобулины являются одними из основных маркеров заболевания;
• На антитела IgG (recomBlot HCV IgG) — качественное тестирование. Положительный результат говорит о наличии заболевания, отрицательный — о его отсутствии. Исключением является проведение диагностики у пациентов, родившихся с антителами матери либо во время инкубационного периода заболевания;
• Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — тест на выявление флававируса. Может быть как качественным, так и количественным.

В каких случаях требуется диагностика гепатовируса?

В первую очередь диагностические меры применяются к пациентам, у которых наблюдаются следующие симптомы:

• Тошнота и рвота;
• Болевые ощущения в области печени;
• Осветление (обесцвечивание) фекальных масс и потемнение мочи;
• Желтушный оттенок склер и кожных покровов;
• Общее недомогание, имеющее сходство с гриппозными проявлениями;
• Апатичное или депрессивное состояние.

Однако, ввиду бессимптомного течения хронической формы вирусных гепатитов, сдавать анализы рекомендуется и в ряде профилактических мер.

Регулярно сдавать кровь на мониторинг патогена рекомендуется:

• Лицам, ухаживающим за инфицированными;
• Медперсоналу, регулярно контактирующему с зараженной кровью и другими биологическими жидкостями;
• Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;
• Инъекционным наркоманам;
• Больным, страдающих от ВИЧ-инфекции;
• Лицам, ведущим беспорядочную половую жизнь.

Важно вовремя определить наличие гепатовируса в крови больного. Чем раньше будет диагностирована болезнь, тем быстрее ее удастся победить при помощи инновационных противовирусных препаратов.

Как подготовиться к сдаче крови?

Результаты анализа крови на выявление ВГС могут быть неточными, ложноположительными или ошибочными. Чтобы этого не случилось, нужно учитывать все нормы подготовки и проведения диагностики:

• В течение дня до сдачи крови на экспертизу нельзя употреблять продукты с большим содержанием сахара и трансжиров. За 8 часов до анализов нельзя есть вообще;
• Накануне диагностики запрещается употребление алкоголя и курение сигарет. Это создает дополнительную нагрузку на печень, из-за чего анализы могут быть неточными;
• За день до сдачи крови следует поберечь себя от стрессов и физических перенагрузок. Это также может негативно сказаться на результатах диагностики.

Являться в лабораторию для сдачи образца крови необходимо утром, примерно в 8 часов. Из вены кровь берется при помощи стерильного шприца. В рамках собственной безопасности пациенту важно следить за тем чтобы медицинский работник не применял ранее использованный шприц.

Расшифровка анализов

Расшифровка анализов проводится в лабораторных условиях компетентными медработниками. Результаты передаются лечащему врачу или напрямую пациенту в зависимости от особенностей отдельного медицинского учреждения или независимой лаборатории.

Фиксируются результаты диагностики на бумажном носителе. Период готовности расшифровки зависит от типа анализа. Чаще всего результаты готовы в период от нескольких часов до 1 суток после сдачи.

Расшифровка анализа на выявление вирусного гепатита В производится в условиях лаборатории. Ниже представлены ключевые данные, на которые опираются исследователи, изучая предоставленный пациентом образец крови:

1. При определении австралийского антигена, референсное значение составляет 0,5 МЕ/мл. При меньшей концентрации антигена результат теста можно считать отрицательным. Если же значение выше указанного, это может свидетельствовать о наличии инфекции в острой форме. Также наличие австралийского антигена может свидетельствовать о вирусоносительстве;
2. Референсное значение антител к HBs-антигену вируса гепатита B (Anti-HBs) — 10 МЕ/мл. Высокий показатель говорит об успешном иммунном ответе на вакцинацию от гепатита В. Низкий показатель свидетельствует о том, что вакцина не оказала ожидаемого действия;
3. Более 40 МЕ/лпатогенной ДНК в сыворотке крови пациента говорит о заражении гепатовирусом типа В. Если концентрация вирусного ДНК в предоставленном образце крови ниже указанного серединного предела, человек наверняка здоров, либо его болезнь находится на стадии инкубационного периода.

Одним из основных методов диагностики ВГС является определение фрагментов РНК возбудителя в плазме крови пациента. При расшифровке этого анализа на гепатит С важно учитывать, является ли он качественным или количественным. Положительный показатель качественного теста позволяет говорить о наличии заражения.

В свою очередь, при количественном РНК-анализе:

• Показатель ниже предела15 МЕ/мл — патоген не обнаружен, или его концентрация находится ниже порога чувствительности теста;
• От 15 до 100 000 000 МЕ/мл — вирусное РНК выявлено. Это говорит об инфицировании организма человека гепатовирусом типа С.

Результаты количественного теста на РНК в сыворотке крови расшифровываются следующим образом:

• Ниже 60 МЕ/мл — возбудитель вирусного гепатита С не обнаружен;
• От 60 до 108 МЕ/мл — положительный результат в пределах линейного диапазона;
• От 108 и выше — повышенная концентрация РНК возбудителя.

Еще одним немаловажным анализом, расшифровка которого требуется при диагностике гепатита С, является ПЦР. Показатели, по которым можно отследить вирусную нагрузку, колеблются в пределах 10 до 500 МЕ/мл. Если результат ниже минимального уровня, гепатит С не обнаруживается. Завышенный показатель говорит о высокой вирусной нагрузке.

Гепатит Б – вирусное заболевание печени, опасное осложнениями. Возбудитель передается гематогенным и половым путем, заражение происходит в бытовых условиях, если частички инфицированной крови попадают на слизистые или в ранки. Вирус сохраняет жизнеспособность в течение недели в сухой среде, до полугода во влажной. Разрушается только при нагреве до температуры свыше 140 градусов или в дезинфицирующих растворах.

Выявить присутствие вируса визуально невозможно. Методы диагностики позволяют с высокой точностью установить инфекционную природу патологии печени. Это связано с природой ДНК-вируса. В нем содержатся особые белки, в ответ на них иммунитет вырабатывает антитела. По анализам на гепатит Б устанавливается факт заражения, стадия заболевания, динамика выздоровления, наличие иммунитета.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Что такое гепатит В?

Инфекция развивается по аутоиммунному принципу. Попадая в кровь, возбудитель достигает клеток печени, проникает в них, начинает размножаться. В период выхода из гепатоцита выделяет геном, который распознают иммунные клетки. Атакуя возбудитель, организм уничтожает собственную печень. Желтушность и другие симптомы появляются, когда секреторные функции паренхимы угасают, нарастает интоксикация организма.

Установить диагноз помогает исследование крови. Если результат на гепатит В положительный, делается оценка вирусной нагрузки. В зависимости от нее разрабатывается терапия, контролируется процесс формирования иммунитета. Повторное заражение исключено. Хроническая форма, требующая длительного лечения, возникает в 15% случаев.

Как в анализах обозначается гепатит B?

В международной классификации возбудители болезни обозначаются буквенными символами. Возбудитель гепатита вида В – HBV, на русском языке – ВГВ. Его присутствие в крови выявляют:

• по промежуточному белку HBеAg, он содержится в оболочке вируса;
• ядерному геному HBcAg, он появляется при активном делении HBV.

Эти символы встречаются в бланках.

Какие анализы крови сдают при гепатите В и их расшифровка?

Заподозрить возбудитель можно по общему и биохимическому анализу крови. Печень выполняет очистительную функцию, при нарушении ее работы концентрация компонентов крови меняется. Факт присутствия гепатита Б в крови устанавливают маркерами, выявляющим гены ДНК-Серологическая проба выявляет вид возбудителя. Расшифровка анализа на гепатит В под силу медицинским работникам. Антигены и антитела встречаются в различных комбинациях в зависимости от фазы болезни, степени ее тяжести, состояния иммунитета.

На молекулярном уровне тестированием выявляются компоненты крови, появляющиеся в ее составе при заражении вирусом. Этот анализ крови на гепатит позволяет определить тип возбудителя. Для вида В характерны особые антигены и антитела. По ним специалистами определяется фаза течения болезни. Например, наличие антител IgM говорит об острой фазе заболевания, IgG появляются в процессе формирования иммунитета. Другие маркеры выявляют антигены и антитела разных типов, все они характерны для инфекции. На бытовом уровне достаточно знать, как в анализах обозначают гепатит В:

• Anti-HBс-total или anti-НBcore-total – присутствие антител к HBV типа IgM и IgG;
• HBs или Hepatitis B surface Antigen – австралийский антиген, характерный для HBV;
• HBeAg и HBcAg – антигены HBV, свидетельствуют о делении вируса в клетках печени;
• Anti-HBе и Anti-HBs – вид антител, вырабатываемых иммунитетом при инфицировании или после вакцинации.

Анализ методом ПЦР полимеразной цепной реакции позволяет выявить возбудитель. Он виден по качественному показателю: положительный говорит об инфицировании пациента. Количественная оценка указывается в числовом значении. HBV-DNA – показатель вирусной нагрузки. По нему определяют, борется ли организм с инфекцией, правильно ли выбран противовирусный препарат.

Когда печень поражена вирусом, меняются показатели, возрастает:

• концентрация ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), они появляются после разрушения гепатоцитов;
• содержание ГГТ (гамма-глутамилтрансфераза), характерный признак интоксикации организма, вызывающей гибель гепатоцитов.
• уровень билирубина.

Непрямой билирубин вызывает желтушность. Он связывается в паренхиме ферментами энзимами, трансформируется в водорастворимую форму (прямой билирубин). В таком виде выводится по желчным протокам.

Если присутствует гепатит А, анализы выявляют снижение уровня альбумина и общего белка, это говорит об угасании функции паренхимы. Гепатоциты выделяют ферменты, участвующие в белковом обмене, альбумин нужен для связывания билирубина, чтобы он из ядовитой непрямой формы в паренхиме перешел в прямую.

При подозрении на инфекционную природу заболевания на исследование сдаются моча и кровь. По ОАК определяют содержание эритроцитов и скорость их осаждения, превышение нормы говорит о воспалительном процессе. Уровень тромбоцитов позволяет поставить ориентировочный диагноз, так как при поражении гепатоцитов снижается свертываемость. По результатам общего анализа назначаются дополнительные исследования пациента.

Результаты анализа: положительный, отрицательный и ложноположительный

После проведения тестирования возможны три версии результатов на присутствие антигенов и антител:

1. Если проба на гепатит В положительная, что это значит? В пробах присутствуют антигены HBV. Сначала возрастает концентрация HBеAg, затем появляются HBсAg. Когда начинается процесс выздоровления, появляются антитела, вырабатываемые организмом для борьбы с вирусом. При хронической форме болезни выявляется австралийский антиген. Если результат положительный, определится концентрация возбудителя. Значительное превышение нормы говорит об остром течении заболевания.
2. Если возбудитель попал в организм, но его концентрация ничтожна или антигенов вообще нет в пробах, результат отрицательный. Это говорит, что инфицирования не было. Отсутствие возбудителя при наличии антител говорит о выздоровлении (инфицирование было, но на момент взятия проб пациент здоров).
3. Ложноположительный анализ на гепатит показывает присутствие возбудителя у здорового человека. Такое возможно, если:

• пациент поставил прививку;
• женщина беременная, у нее изменен гормональный фон;
• развивается онкология;
• были погрешности при заборе проб;
• в организме присутствует другая инфекция;
• ослаблен иммунитет;
• имеются заболевания аутоиммунной природы.

Может ли быть ошибка в анализе на гепатит В?

Когда биологический материал обследуется в лицензированных лабораториях, вероятность механической ошибки мала. Она возникает при:

• несоблюдении правил забора проб, их транспортировке, хранении (биологический материал нельзя прогревать до температуры свыше 20 градусов);
• сбое в работе оборудования (отключении электроэнергии, изменение частоты, напряжения и силы тока);
• ошибке или низкой квалификации лаборанта (не исключена путаница проб).

Неправильный результат возможен, если пациент не подготовлен к анализу. Накануне сдачи нужно умерить физические нагрузки, они способны спровоцировать сбой иммунитета. Важно правильно питаться, исключить алкоголь, газировку, копчености, консервации. Нельзя сдавать анализы после лучевой диагностики (рентгена, КТ, МРТ, УЗИ). Пробы берутся на голодный желудок, через 12 часов после последнего приема пищи. Лекарственные препараты, особенно иммуностимулирующие, также способны изменить результаты.

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении - санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

• инкубационный период;
• острый период заболевания;
• ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

• персистирующем хроническом гепатите;
• циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

• больные с частыми гемотрансфузиями;
• больные с хронической почечной недостаточностью;
• больные с множественным гемодиализом;
• больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Оценка результатов исследования

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В JgG (анти- HBcAg JgG )

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;

перенесенного вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

инкубационного периода вирусного гепатита В;

продромального периода вирусного гепатита В;

острого периода вирусного гепатита В;

хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

установление начальной стадии заболевания;

острый период инфекции;

ранняя стадия реконвалесценции;

реконвалесценция;

поздняя стадия реконвалесценции.

диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;

диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

Критериями наличия хронического гепатита В являются:

бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;

постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\

морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (качественно)

Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

разрешения сомнительных результатов серологических исследований;

выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;

контроля эффективности противовирусного лечения.

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (количественно)

Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

• Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
• менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
• от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
• более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.