Что такое неструктурный белок гепатита с

Антитела гепатита С бывают двух классов — G и M, что в анализах пишется, как IgG и IgM (Ig – immunoglobulin (иммуноглобулин) — это латинское название антител). Anti-HCV total (anti-НСV, анти-hcv ) — суммарные антитела (классов IgG и IgM) к антигенам вируса гепатита C. Тест на определение этих маркеров проводится всем пациентам, когда хотят проверить, есть ли у них гепатит С. Anti-HCV присутствуют как при остром (они могут обнаруживаться уже с 4 - 6 недели после инфицирования), так и при хроническом гепатите. Anti-HCV tota l также встречаются у тех, кто переболел гепатитом С и выздоровел самостоятельно. У таких людей данный маркер может обнаруживаться в течение 4 - 8 и более лет после выздоровления. Поэтому положительный анализ на anti-HCV не является достаточным для того, чтобы установить диагноз. На фоне хронической инфекции суммарные антитела выявляются постоянно, а после успешного лечения сохраняются длительное время (прежде всего за счет anti-HCV core IgG. о них написано ниже), при этом их титры постепенно снижаются.«

Важно знать, что антитела к гепатиту С не защищают от развития HCV-инфекции и не обеспечивают надежного иммунитета против повторного инфицирования.

Спектр anti-НСV (core, NS3, NS4, NS5) — это специфические антитела к отдельным структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С. Их определяют для суждения о вирусной нагрузке, активности инфекции, риске хронизации, разграничении острого и хронического гепатита, степени поражения печени. Обнаружение антител к каждому из антигенов имеет самостоятельное диагностическое значение. Anti-HCV состоят их структурных (core) и неструктурных (NS3. NS4. NS5 ) белков (протеинов).

Anti-HCV IgM —антитела класса IgM к антигенам вируса гепатита C. Anti-HCV IgM могут определяться в крови уже через 4-6 недель после инфицирования, их концентрация быстро достигает максимума. После завершения острого процесса уровень IgM падает и может повышается вновь во время реактивации инфекции, поэтому принято считать, что эти антитела являются признаком острой инфекции или хронической с признаками реактивации. При остром гепатите С длительное обнаружение антител класса М, является фактором, прогнозирующим переход заболевания в хроническую форму. Считается, что обнаружение anti-HCV IgM может отражать уровень виремии и активность гепатита С, однако не всегда при реактивации ХВГС anti-HCV IgM выявляются. Также есть случаи, когда при хроническом гепатите С в отсутствии реактивации обнаруживаются anti-HCV IgM .

В большинстве случаев, наличие anti-HCV IgM указывает на текущую инфекцию. При хроническом гепатите С антитела класса М могут свидетельствовать об обострении процесса. При проведении терапии интерфероном наблюдение за anti-HCV IgM в динамике позволяет оценивать эффективность лечения.

Неструктурные (NS3, NS4, NS5) белки.

NS3, NS4, NS5 относятся к неструктурным (NS — nonstructural ) белкам. На самом деле, этих белков больше — NS2, NS3, NS4a, NS4b, NS5a, NS5b, однако в большинстве клинико-диагностических лабораторий определяют антитела к белкам NS3, NS4 и NS5.

Anti-NS3 выявляются на самых ранних этапах сероконверсии. Высокие титры anti-NS3 характерны при остром гепатите С и могут являться самостоятельным диагностическим маркером острого процесса. При остром процессе высокая концентрация anti-NS3 обычно свидетельствует о значительной вирусной нагрузке, а длительное сохранение их в острой фазе связано с высоким риском хронизации инфекционного процесса.

Anti -NS4 и anti-NS5, как правило, появляются в более поздние сроки. При ХВГС определение anti-NS4 в высоких титрах может свидетельствовать о длительности инфекционного процесса и, по некоторым данным, имеет связь со степенью поражения печени. Выявление anti-NS5 в высоких титрах часто свидетельствует о присутствии вирусной РНК, а в острой стадии является предиктором хронизации инфекционного процесса. Снижение титров NS4 и NS5 в динамике может являться благоприятным признаком, указывающим на формирование клинико-биохимической ремиссии. Титры anti-NS5 могут отражать эффективность ПВТ, причем их повышенные значения характерны для лиц, не отвечающих на терапию. После выздоровления титры anti-NS4 и anti-NS5 снижаются с течением времени. Результаты одного из исследований показали, что почти у половины пациентов через 10 лет после успешного лечения интерферонами, anti-NS4 и anti-NS5 не определялись. В следующей таблице приведены наиболее вероятные варианты трактовки сочетания маркеров гепатита С.

База знаний: Anti-HCV, антитела

Суммарные антитела к вирусу гепатита С, анти-HCV.

Antibodies to Hepatitis C Virus, IgM, IgG; HCVAb, Total.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (ВГС) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает клетки печени и вызывает гепатит. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и ассоциирован с развитием криоглобулинемии, болезни Шегрена и В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний. Среди всех возбудителей вирусных гепатитов у ВГС наибольшее количество вариаций, а благодаря высокой мутационной активности он способен избегать защитных механизмов иммунной системы человека. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (при переливании элементов крови и плазмы, пересадке донорских органов, через нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятна передача вируса при половом контакте и от матери ребенку во время родов, но это происходит реже.

Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро, с тошнотой. ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса, редко оно сопровождается желтухой. У 60-85 % зараженных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Для хронического вирусного гепатита С характерна волнообразность с повышением печеночных ферментов и слабовыраженными симптомами. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Специфические иммуноглобулины вырабатываются к ядру вируса (нуклеокапсидному белку core), оболочке вируса (нуклеопротеинам Е1-Е2) и фрагментам генома вируса гепатита С (неструктурным белкам NS). У большинства больных ВГС первые антитела появляются через 1-3 месяца после инфицирования, но иногда могут отсутствовать в крови больше года. В 5 % случаев антитела к вирусу так никогда и не обнаруживаются. При этом о ВГC будет свидетельствовать выявление суммарных антител к антигенам вируса гепатита С.

В острый период болезни образуются антитела классов IgM и IgG к нуклеокапсидному белку core. В период латентного течения инфекции и при ее реактивации в крови присутствуют антитела класса IgG к неструктурным белкам NS и нуклеокапсидному белку core.

После перенесенной инфекции специфические иммуноглобулины циркулируют в крови 8-10 лет с постепенным снижением концентрации или сохраняются пожизненно в очень низких титрах. Они не защищают от вирусной инфекции и не снижают риска повторного заражения и развития заболевания.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики вирусного гепатита С.
• Для дифференциальной диагностики гепатитов.
• Для выявления ранее перенесенного вирусного гепатита С.

Когда назначается исследование?

• При симптомах вирусного гепатита и повышении уровня печеночных трансаминаз.
• Если известно о перенесенном гепатите неуточненной этиологии.
• При обследовании людей из группы риска по заражению вирусным гепатитом С.
• При скрининговых обследованиях.

Что означают результаты?

Референсные значения (норма анализа на гепатит С)

Отношение S/CO (signal/cutoff): 0 - 1.

Причины anti-HCV положительного результата:

• острый или хронический вирусный гепатит С;
• ранее перенесенный вирусный гепатит С.

Причины anti-HCV отрицательного результата:

• отсутствие вируса гепатита С в организме;
• ранний период после инфицирования;
• отсутствие антител при вирусном гепатите С (серонегативный вариант, около 5 % случаев).

Что может влиять на результат?

• При неправильном взятии и хранении материала для анализа на гепатит С может быть получен недостоверный результат.
• Ревматоидный фактор в крови способствует ложноположительному результату.

• При положительном результате anti-HCV для подтверждения диагноза вирусный гепатит С выполняется тест с определением структурных и неструктурных белков вируса (NS, Core).
• При имеющихся факторах риска заражения и подозрении на вирусный гепатит С рекомендовано определение РНК вируса в крови методом ПЦР даже при отсутствии специфических антител.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог, гастроэнтеролог, терапевт.

• Возианова Ж. И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3 т. - К. Здоровье, 2000. – Т.1. 600-690.
• Кишкун А. А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. – М. ООО МИА , 2006. – 471-476 с.
• Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
• Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
• Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

Как расшифровать анализ на антитела к вирусному гепатиту С?

Сначала о медицинских обозначениях, которые вам незнакомы. При попадании вируса гепатита С (HCV) в организм человека иммунная система вырабатывает особые иммуноглобулины - антитела к вирусу, которые обозначаются anti-HCV. В составе антител имеются структурные (core) и неструктурные (NS3, NS4, NS5) белки. Анализ, который вы сдавали, дает информацию о том, когда произошло заражение, какова форма заболевания на данный момент и насколько вирус активен.

Структурные белки core IgG появляются через 6 недель после заражения гепатитом С. Своего пика они достигают через 6 месяцев после инфицирования. Наличие иммуноглобулинов класса G, как в вашем случае, типично для хронической формы гепатита С, т.е. они всегда будут присутствовать в результатах анализов на гепатит С после перенесенного вами заболевания, в отличие от антител IgM, проявляющихся только через полгода после инфицирования и свойственных для острой формы вирусного гепатита С.

Антитела NS3 выявляются в анализе на ранних стадиях образования антител. Высокие титры этих антител свидетельствуют о том, что гепатит С находится в острой стадии. Антитела NS4 и NS5 проявляются на поздних стадиях болезни, примерно через 11 - 12 недель после инфицирования. Титр антител этого класса снижается после выздоровления. Высокие титры NS4 свидетельствуют о вероятных повреждениях печени и о дальнейшей развитии инфекции. Повышенный уровень NS5 говорит о наличии РНК вируса и о его переходе в хроническую форму.

Если говорить о трактовке анализа в целом, то гепатит С у вас обнаружен, однако стадию и активность заболевания необходимо уточнить с помощью дополнительных анализов. В целом, предоставленные сведения могут говорить о том, что вы либо выздоровели после острой формы гепатита С, либо у вас латентная фаза хронического гепатита С. Однако для того чтобы определить, какова вирусная нагрузка и имеется ли риск реактивации вируса, этих данных недостаточно. Вам необходимо также сдать анализ крови на антитела класса IgM, РНК вируса, а также дополнительно провести диагностику вирусного гепатита С методом ПЦР. Он дает расширенную важную информацию об активности инфекционного процесса на данный момент времени.

Нужна также клинико-лабораторная диагностика признаков заболевания. Вам необходимо сдать биохимический анализ крови. Функцию печени определяют по результатам анализа на уровень АЛТ, АСТ, ЩФ, ГГТП. Также вам следует пройти УЗ-исследование и эластометрию печени для выявления возможных очагов поражения тканей фиброзом. Отсутствие симптомов заболевания, снижение антител класса core IgG до уровня 1:80 и ниже, нормальные показатели уровня трансаминаз (АЛТ и АСТ) и постепенное исчезновение антител NS IgG в течение нескольких лет будут свидетельствовать о том, что наступила латентная фаза заболевания, т.е. этап, при котором вирус был подавлен иммунной системой и дремлет , не оказывая пагубного воздействия на организм.

Это лишь примерная картина диагностики заболевания по имеющимся у вас данным. Для подтверждения ситуации и планирования ваших дальнейших действий вам необходима консультация врача-инфекциониста.

Сегодня известно минимум 10 структурных и неструктурных белков, кодируемых геномом HCV. К структурным белкам относят core, envelop 1 и envelop 2. Белок core является белком нуклеокапсида, тогда как envelop 1 и envelop 2 — гликопротеины внешней оболочки вируса. В структурной зоне кодируется также белок р7, функция которого не ясна, однако аналогия с другими представителями семейства Flaviviridae позволяет предположить, что его функция связана с высвобождением вириона из инфицированной клетки.
Этот белок отщепляется клеточной пептидазой от envelop 2, но не во всех случаях, что обусловливает существование envelop 2 в виде двух форм более и менее протяженной.

Неструктурная область генома HCV кодирует 6 белков — NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B. Белок NS2 является вирусной металлозависимой протеиназой. Белок NS4A действует как эффектор или кофактор для NSЗ-протеолитической активности в NS4A/NS4B, NS4B/NS5A, NS5A/NS5B сайтах нарезания полипротеина вируса.

В настоящее время фрагменты структурных и неструктурных белков, полученных генноинженерным путем (рекомбинантные белки) или с помощью химического синтеза, используют в качестве антигенов при конструировании иммуноферментных тест-систем. Первое поколение иммуноферментных тест-систем появилось на рынке в 1989 году и было основано на прямом ИФА. В качестве иммуносорбента были использованы фрагменты двух белков, NS3 и NS4, обозначаемых как 5-1-1 и С100-3.

Одновременно были разработаны и подтверждающие тесты на основе иммуноблота с рекомбинантными белками (RIBA). Чувствительность этих тест-систем первого поколения составляла только 64% для ИФА и 55% для иммуноблота. Тест-системы второго поколения появились на рынке в 1991 году. В качестве антигенов, сорбированных на твердой фазе, в этих тест-системах использовали капсидные белки (фрагмент с22-3) и антигены неструктурных регионов NS3 (фрагменты с200 и сЗЗс) и NS4, что позволило повысить чувствительность и специфичность исследований. Поскольку гуморальный иммунный ответ на капсидные антигены (структурные белки) нагинается быстрее, гем на неструктурные белки, период от инфицирования до выявляемой сероконверсии удалось уменьшить до двух месяцев.

Подтверждающие тест-системы на основе иммуноблота позволяли идентифицировать участвующие в реакции антигены. Результаты, полученные при помощи этих тест-систем, интерпретировали как положительные лишь при реакции антител, находящихся в исследуемом субстрате, по крайней мере, с двумя антигенами, тогда как при наличии реакции лишь с одним из антигенов результат считали неопределенным. Было установлено, что специфичность второго поколения тест-систем зависела от источника антигенов. В 1993 году на рынке появилось третье поколение тест-систем. В дополнение к вышеупомянутым антигенам в этих тест-системах используются также антигены, аминокислотная последовательность которых соответствует иммунодоминантным участкам NS5 белков.

В тест-системах первого, второго и третьего поколений в качестве антигенов использовались или рекомбинантные, или синтетические пептиды. В настоящее время можно выделить также тест-системы четвертого поколения, в которых в качестве иммуносорбента используют сочетания рекомбинантных и синтетических пептидов.

Опыт применения тест-систем различных поколений в мире очень большой. Было установлено, что если с помощью тест-систем первого или второго поколения у больных с острым вирусным гепатитом С антитела выявляли на 10-16, а в ряде случаев и 25-30 неделе от начала заболевания, то диагностикумы третьего поколения позволяли сократить этот срок до 2-3 недель. Согласно обобщенным данным чувствительность тест-систем первого, второго и третьего поколений составляет соответственно 70-80%, 92-95% и 97%.

В то же время, по данным С. Colin, 2001, чувствительность тест-систем третьего поколения составила 98,9% у пациентов с хроническими заболеваниями печени и 97,2% на специальных контрольных панелях сывороток. Достижение высокой чувствительности иммуноферментных тест-систем 3 и 4 поколения сопряжено с некоторыми проблемами в обеспечении специфичности исследований, что в ряде случаев может приводить к появлению ложноположительных результатов. В литературе имеются данные о возможных погрешностях в специфичности ELISA 3 тест-систем. Они являются общими для всех ELISA тест-систем, включая тест-системы для диагностики СПИДа.

Ложнопозитивные результаты могут быть следствием повышенного содержания в образцах гамма-глобулинов (сыворотки пациентов африканской расы, миеломная болезнь, ревматоидные факторы), заболеваний печени (цирроз, рак), аутоиммунных заболеваний (коллагенозы, аутоиммунные гепатиты), других вирусных инфекций (ВИЧ, гепатит В) и длительного хранения сывороток в меняющихся температурных условиях. Проведение какой-либо иммунизации также может сопровождаться повышением частоты ложнопозитивных реакций. Рекомендуемые в настоящее время меры по устранению этой проблемы следующие: а) повторная постановка образца в этой же ИФТС; б) повторная детекция anti-HCV в другой ИФТС; в) использование подтверждающих тестов на основе ИФА и иммуноблота.

Однако использование предлагаемых способов подтверждения результатов зачастую приводят к расхождениям в их итоговой трактовке, что показано исследованиями российских и зарубежных исследователей.

В настоящее время производители ИФТС для детекции anti-HCV достигают высокой чувствительности или за счет более полного выявления антител к NS3 или антител к антигенам core. Сравнительные исследования, выполненные на различных группах риска и специальных контрольных панелях показали, что тест-системы, лучше выявлявшие антитела к NS3, оказались несколько более чувствительными, чем тест-системы, лучше выявлявшие антитела к антигенам core. Их чувствительность составляла, соответственно 99,9% и 98,6%.

Определение в крови иммуноглобулинов IgG к белкам вируса гепатита С, которое используется для диагностики этого заболевания.

Антитела к белкам гепатита С;

Antibodies to structural and non-structural proteins of HCV;

Antibodies to HCV.

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования;
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Гепатит С – вирусное заболевание печени, отличительной чертой которого является бессимптомное течение и высокая частота прогрессии в хронический гепатит, цирроз печени и гепатоцеллюлярную карциному. Основной путь передачи гепатита С – через кровь и ее компоненты. Группы риска по заражению ВГС:

• Медицинские работники;
• Люди, использующие инъекционные наркотики;
• Пациенты с ВИЧ;
• Люди, которым были сделаны татуировки с помощью нестерильных инструментов;
• Пациенты, получившие переливание крови или ее компонентов до 1992 г.;
• Пациенты, получившие трансфузию факторов свертывания крови до 1987 г.;
• Пациенты, получающие лечение гемодиализом в течение длительного времени;
• Дети, рождённые от матерей с ВГС.

Следует отметить, что по крайней мере в 20 % случаев источник заражения установить не удается. В России наблюдается рост заболеваемости гепатитом С: в период с 1999 по 2011 гг. заболеваемость хроническим ВГС выросла в 3 раза. Как правило, пациенты с ВГС не догадываются о своем заболевании.

Вирус гепатита С (ВГС) – РНК-вирус, принадлежащий семейству Flaviviridae. При транскрипции его генома образуется единый белок длиной около 3000 аминокислот, который затем разрезается с помощью пептидаз клетки-хозяина и вирусных пептидаз с образованием структурных и неструктурных белков:

• Структурные белки (коровый белок, Е1 и Е2, от англ. envelope glycoproteins – гликопротеины оболочки) необходимы для формирования вирусного капсида;
• Неструктурные белки (p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B, от англ. non-structural – неструктурные) выполняют различные регуляторные функции.

В ответ на заражение вирусом гепатита С в организме человека начинают вырабатываться антитела – иммуноглобулины M и G, которые можно исследовать для диагностики гепатита. Следует отметить, что при гепатите С синтез иммуноглобулинов М может наблюдаться на разных стадиях заболевания, как при остром, так и при хроническом гепатите, и поэтому не имеет никакого диагностического значения. Это важное отличие диагностики гепатита С от гепатита В (выявление иммуноглобулинов М при гепатите В наблюдается только в острую стадию). Таким образом, все серологические тесты для диагностики гепатита С основаны на выявлении иммуноглобулинов G к белкам этого вируса.

Структурные и неструктурные белки иммуногенны в разной степени. Показано, что наиболее выраженными иммуногенными свойствами обладают следующие белки (в скобках указан процент пациентов с хроническим гепатитом С, у которых в крови обнаруживаются антитела к указанному белку):

Менее иммуногенны белки E2 (31 %), NS4A(28 %) и E1 (22 %). NS2 и NS5B имеют очень слабые иммуногенные свойства, и антитела к ним у пациентов с ВГС выявляются редко.

Антитела к ВПС могут быть определены в крови приблизительно через 8 недель после первичного заражения. Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться у людей с иммунодефицитом (например, ВИЧ-инфицированных), почечной недостаточностью и эссенциальной смешанной криоглобулинемией. Ложноположительные результаты также встречаются.

Вирусы гепатита С неоднородны по генетическому составу. На этом основании выделяют 6 генотипов ВПГ, геномы которых различаются на 30-35 %, и множество подтипов, различающихся на 20-25 %. В восточной Европе и США чаще встречаются генотипы 1a и 1b, тогда как для других стран характерны другие генотипы (например, Египет – генотип 4, Южная Африка – генотип 5). Показано, что иммунный ответ пациентов, инфицированных разными генотипами ВГС, различается. Это особенно справедливо в отношении антител к белкам E1, E2, NS3, NS4A и NS5A.

Качественный и количественный состав антител к ВГС у пациента остается достаточно постоянным в течение заболевания, в том числе и после проведенного лечения.

Антитела к гепатиту С – чувствительный, но недостаточно специфичный метод диагностики этого заболевания. Поэтому серологические тесты – это скрининговые тесты диагностики гепатита. При получении положительного результата исследования антител на гепатит С обязательно проводят подтверждающее исследование – анализ на РНК вируса с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР). Кроме того, при подтверждении диагноза "гепатит С" может понадобиться генотипирование ВГС и гистологическое исследование печени или неинвазивные методы определения состояния печени (такие как ФиброМакс).

Для чего используется исследование?

• Для диагностики гепатита С.

Когда назначается исследование?

• При профилактическом обследовании, особенно если пациент принадлежит к группе риска по гепатиту С;
• в некоторых случаях при устройстве на работу.

Что означают результаты?

Выдается по компонентам:

IgG к антигену core

IgG к антигену NS3

IgG к антигену NS4

IgG к антигену NS5

• гепатит С;
• ложноположительный результат (чаще у пациентов, не относящихся к группам риска, например доноров крови).

• норма;
• ложноотрицательный результат (сопутствующая ВИЧ-инфекция, почечная недостаточность, эссенциальная смешанная криоглобулинемия).

Что может влиять на результат?

• Время, прошедшее с момента заражения;
• Состояние иммунной системы;
• Сопутствующие заболевания почек;
• Генотип вируса гепатита С.



• Это скрининговый тест. При получении положительного результата необходим дополнительный, подтверждающий тест (определение РНК вируса с помощью ПЦР);
• результаты анализа следует интерпретировать с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

13 Гистологическое исследование гепатобиоптата (биоптата печени) с использованием стандартных методик

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, врач общей практики.

Anti-HCV к гепатиту С (NS5, NS4, NS3) – иммуноглобулины, которые вырабатываются к неструктурным белкам вируса, провоцирующего воспалительное заболевание печени. Антитела к возбудителю инфекции определяются в рамках иммуноферментного анализа (ИФА). Наличие в крови иммуноглобулинов класса IgM и IgG свидетельствует о перенесенном заболевании или недавнем заражении вирусом. Для подтверждения диагноза проводят реал-тайм ПЦР. Если в плазме выявляется РНК HCV, положительный результат ИФА подтверждается.

Антигены вируса гепатита

Антигены – потенциально опасные чужеродные вещества, структура которых зависит от типа возбудителя инфекции. При их попадании в организм возникает иммунный ответ, характеризующийся формированием антител. С точки зрения биохимии, антигеном называется любая молекула, провоцирующая выработку специфических иммуноглобулинов.

Вирус гепатита С (ВГС) – одноцепочечный РНК-содержащий вирус, который относится к семейству Flaviviridae. Во время самокопирования (репликации) его геном преобразуется в белок, состоящий из 3000 аминокислот. Под действием специальных ферментов он разрезается, вследствие чего появляются:

1. неструктурные белки (NS2, NS3, NS4, NS5, p7) – при репликации вируса гепатита С выполняют регуляторные функции;
2. структурные белки (core, E1, E2) – участвуют в образовании капсида, то есть внешней оболочки вируса гепатита.

Неструктурных белков вируса много, но в лабораторных условиях чаще всего определяются антитела только к трем из них – NS3, NS4, NS5.

Особенности антигенов HCV:

• NS3 – антиген, к которому быстрее всего возникает иммунный ответ. Высокое содержание anti-NS3 указывает на острое течение гепатита С.
• NS4 – белок, антитела к которому возникают преимущественно после хронизации воспаления в печени. Высокие титры anti-NS4 в острой фазе – признак скорого перехода гепатита в вялотекущую форму.
• NS5 – маркер хронического гепатита С. Уменьшение титров anti-NS5 во время противовирусной терапии (ПВТ) указывает на положительную динамику, скорое достижение устойчивого вирусологического ответа.

После выздоровления иммуноглобулины к антигенам NS4 и NS5 циркулируют в крови еще много лет. В случае полной эрадикации (уничтожения) вируса они исчезают у 90% пациентов спустя 10 лет.

На чем основан анализ на антитела

Иммуноферментный анализ (ИФА) – высокоточный метод определения антител к возбудителю инфекции. Серологическое исследование основано на реакции антиген-антитело, которая происходит при попадании в кровь вируса Hepatitis C Virus. Чтобы выявить сформировавшийся комплекс из неструктурных белков HCV и иммуноглобулинов, в образцы крови вносят ферменты, посредством которых регистрируются сигналы.

Теория серологического исследования базируется на:

1. знаниях физико-химических закономерностей;
2. принципах химической энзимологии и иммунохимии;
3. законах аналитической химии.

При заражении гепатитом С выявляются антитела двух типов – IgG и IgM, что указывает на контакт организма с белками вируса.

Гепатит С – болезнь с малосимптомным течением. Поэтому ИФА назначается всем людям из группы риска – хирургам, инъекционным наркоманам, реципиентам и донорам крови.

Серологический тест входит в скрининговое обследование, при котором выявляются маркеры инфицирования вирусом HCV:

• Anti-HCV IgM – иммуноглобулины класса M, которые обнаруживаются в плазме через месяц после инфицирования. При переходе гепатита С в вялотекущую форму их содержание резко уменьшается.
• Anti-HCV core IgG – иммуноглобулины, которые возникают к структурным белкам ВГС. Обнаруживаются только через 10-12 недель после заражения гепатитом. Пиковая концентрация антител IgG приходится на 5-6 месяц перед хронизацией воспаления.
• Anti-HCV Total – суммарные антитела классов M и G к антигенам возбудителя гепатита.

Если иммуноглобулины к антигенам ВГС обнаруживаются, это еще не значит, что пациент болен гепатитом. В 15-30% случаев организм справляется с инфекцией без ПВТ, поэтому при выявлении IgM и IgG потребуются дополнительные исследования.

Что делать при положительном результате анализа

Вне зависимости от данных серологического теста, пациентам назначают полимеразную цепную реакцию. Анализ ПЦР на гепатит С – быстрый способ подтверждения результатов ИФА. Основная цель исследования – выявление РНК возбудителя.

Реал-тайм ПЦР – золотой стандарт в диагностике вирусного гепатита С. Чувствительность и специфичность метода достигает 98-100%.

Для исследования берут кровь из локтевой вены. В отличие от антител, РНК вируса обнаруживается в плазме уже через 10 суток после заражения. Если генетический материал ВГС выявляется, диагноз подтверждают.

Чтобы составить подходящую схему ПВТ, нужно дополнительное обследование:

1. УЗИ печени;
2. печеночные пробы;
3. клинический анализ крови;
4. генотипирование;
5. количественную ПЦР;
6. биопсию печени;
7. фибросканирование.

Раньше гепатит С лечили исключительно интерферонами, эффективность которых иногда не превышала 45-60%. Сейчас применяют безынтерфероновые схемы, основу которых составляют ингибиторы неструктурных белков ВГС – Ледипасвир, Элбасвир, Софосбувир, Нарлапревир, Омбитасвир, Даклатасвир и т.д. Результативность терапии даже при хроническом воспалении превышает 97%.

Гепатит С – опасная болезнь, исходом которой является цирроз и рак печени. Она протекает малосимптомно, поэтому при малейших подозрениях обращайтесь к врачу. Своевременная терапия предупреждает необратимые изменения в печени.