Что такое ртга на вирус гриппа

РИГА применяют в двух вариантах: с известными АГ для обнаружения АТ с известными АТ для выявления АГ. Эта реакция специфична, и применяют ее для диагностики заболеваний, вызванных бактериями и риккетсиями. Для проведения РИГА используют эритроцитарные диагностикумы, приготовленные путем адсорбции на эритроцитах АГ или АТ — в зависимости от цели исследования (рис. 10.3). В положительных случаях степень агглютинации эритроцитов отмечают плюсами. Четырьмя плюсами оценивают реакцию, имеющую вид тонкой пленки из склеивающихся эритроцитов (зонтик), покрывающей дно пробирки; наличие пленки с фестончатыми кружевными краями обозначают двумя плюсами. За титр принимают предельное разведение исследуемого материала, вызывавшее агглютинацию эритроцитов на два плюса.

Рис. 10.3. РИГА (по Бургасовой, Безденежных,1969):

1 — эритроциты, 2 — АГ эритроцита, 3 — конъюгированный АГ, 4—АТ

Как уже отмечалось, в основе РГА лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных АГ. В качестве исследуемого материала при гемагглютинации используют аллантоисную, амниотическую жидкость, суспензию хорион-аллантоисных оболочек куриных эмбрионов, взвеси и экстракты из культур или органов животных, зараженных вирусами, нативный инфекционный материал. РГА не является серологической реакцией, поскольку происходит без участия иммунной сыворотки и используется для выбора рабочего разведения АГ для постановки РТГА или наличия АГ (вируса) в исследуемом материале (например, при гриппе). В реакции используются эритроциты животных, птиц, человека с I (0) группой крови. Для постановки ориентировочной РГА на предметное стекло наносят каплю 5%-й взвеси эритроцитов и каплю испытуемого материала, тщательно смешивают. При положительном результате через 1—2 мин макроскопически наблюдают появление хлопьевидной агглютинации эритроцитов. Для постановки РГА в развернутом ряду в лунках полистироловых планшетов готовят двукратно возрастающие разведения исследуемого материала на физиологическом растворе в объеме 0,5 мл. Во все пробирки вносят по 0,5 мл 0,25—1%-й взвеси эритроцитов. Результаты учитывают после полного оседания эритроцитов в контроле (эритроциты + физиологический раствор). Реакцию учитывают по характеру осадка эритроцитов. В положительных случаях степень агглютинации отмечают плюсами. Четырьмя плюсами оценивают реакцию, имеющую вид тонкой пленки из склеившихся эритроцитов, покрывающей дно пробирки (зонтик), реакцию с просветами в пленке отмечают тремя плюсами, наличие пленки с фестончатыми кружевными краями из склеившихся эритроцитов обозначают двумя плюсами, хлопьевидный осадок эритроцитов, окруженный зоной комочков агглютинированных эритроцитов, соответствует одному плюсу. Резко очерченный осадок эритроцитов, неотличимый от контроля, показывает отсутствие агглютинации. За титр принимают предельное разведение исследуемого материала, вызвавшее агглютинацию эритроцитов на два плюса. При положительном результате РГА исследование продолжают, определяя тип выделенного вируса с помощью РТ ГА типоспецифическими сыворотками. РТГА основана на свойстве антисыворотки подавлять вирусную гемагглютинацию, так как нейтрализованный специфичными АТ вирус утрачивает способность агглютинировать эритроциты. При ориентировочном типировании вирусов используют капельный метод на стекле. Для окончательного установления типовой принадлежности выделенного вируса и титрования АТ в сыворотках ставят развернутую РТГА в пробирках или в лунках. С этой целью готовят двукратные разведения сывороток на физиологическом растворе и разливают по 0,25 мл. К разведениям сыворотки прибавляют по одной капле материала, содержащего вирус, и по одной капле 1%-й взвеси эритроцитов. При использовании РТГА для определения типа вируса используют типоспецифические сыворотки, которые добавляют к равному объему рабочего разведения АГ. Типовую принадлежность выделенного вируса устанавливают по специфической иммунной сыворотке, показавшей наивысший титр АТ к этому вирусу. РГА и РТГА широко применяются для диагностики вирусных инфекций (клещевого энцефалита, гриппа и др.) в целях обнаружения специфических АТ и для идентификации многих вирусов по их АГ.

Одной из разновидностей метода непрямого иммунологического анализа, используемого для диагностики гриппа, является РИГА. Принцип РИГА основан на способности эритроцитов, адсорбировавших вирусы, агглютинироваться в присутствии антител иммунной сыворотки [Исаченко В. А., Соковых Л. А., 1964; Авророва Р. И., 1966]. Установлено, что использование танина для приготовления эритроцитарного диагностикума из вируссодержащей аллантоисной жидкости снижает специфичность РИГА, а сенсибилизированные таким образом эритроциты неустойчивы при длительном хранении. Э. П. Корнеева, Я. С. Шварцман (1972) разработали микрометодику РИГА, успешно используемую для диагностики гриппа.

Действующим началом диагностикума служит вирус гриппа, очищенный сорбцией — элюцией и ультрацентрифугированием. Для прочной фиксации вируса на эритроцитах барана, обработанных формалином, авторы использовали бидиазотированный бензидин (БДБ).

Лиофилизация комплекса вирус — эритроцит обеспечивала получение препарата с неограниченным сроком годности, что сделало возможным централизованное изготовление диагностикума для РИГА. В Центральной серологической лаборатории ВНИИ гриппа МЗ СНГ А. Н. Найхин (под руководством А. А. Смородинцева и Л. Ю. Тарос) сравнил чувствительность и специфичность РИГА с РТГА, РСК и РН для диагностики гриппозной инфекции с сыворотками:

При этом наиболее высокие диагностические показатели сероконверсий отмечались в РИГА и РН у больных гриппом и иммунизированных добровольцев. Наименьшее число сероконверсий выявляла РТГА. Диагностические показатели РНГА приближались к результатам РСК при естественной гриппозной инфекции. Отмечалось значительное отставание РСК при иммунизации умеренно аттенуированным вирусом гриппа и после прививок живой вакциной. Наибольшее число совпадений положительных результатов диагностики гриппозной инфекции у реконвалесцентов и у привитых умеренно аттенуированным вирусом волонтеров было отмечено по данным РНГА и РН. По сравнению с РТГА у 27,3 % волонтеров РНГА дополнительно диагностировала достоверное нарастание уровня антител, а по сравнению с РСК — у 36,4 %.

Диагностическое обследование больных детей в эпидемию 1972 — 1973 гг., вызванную вирусом гриппа А разновидности А/Виктория/35/72, показало наибольшее превосходство РНГА и РСК перед РТГА по сравнению с результатами обследования сывороток взрослых. Наблюдалось отсутствие различий в диагностических показателях РНГА В эпидемический и межэпидемический периоды, что было характерно также для РСК, в противоположность указанному выше резкому отставанию по данным РТГА. Исследование парных сывороток волонтеров, получивших вирус гриппа А, в РНГА, РН, РТГА и РСК с гомологичным вирусом и с гетерологичным вирусом гриппа В показало весьма высокую специфичность РНГА, не уступающую аналогичным показателям РН и РТГА. Это подтверждается также наличием корреляций между исходным уровнем антител в сыворотках волонтеров по данным РНГА и степенью клинических реакций на введение им умеренно аттенуированного вируса А/Гонконг/68. В связи с высокой чувствительностью, простотой постановки, отсутствием влияния неспецифических ингибиторов, а также стабильностью лиофилизированных эритроцитарных препаратов при длительном хранении РНГА используют для серологической диагностики гриппа.

Не менее важно для диагностики гриппа и определение уровня антител ко второму по важности антигенному компоненту вируса гриппа — нейраминидазе (NA), что позволяет более полно оценить состояние противогриппозного иммунитета. Наряду с рекомендованным ВОЗ более сложным способом определения антинейраминидазных антител, пригодны и более простые методики определения сывороточных антител к нейраминидазе [Holston Г., Dowdle W., 1973]. Один из таких приемов, основанный на РНГА, выполняется с ипользованием бараньих эритроцитов, обработанных танином и сенсибилизированных нейраминидазой, изолированной электрофоретически из высокоочищенного рекомбинантного вируса гриппа. При исследовании сывороток от реконвалесцентов и людей, привитых против гриппа, этот диагностикум выявил высокий процент положительных результатов по сравнению с реакцией ингибиции нейраминидазы (РИНА). Указанный способ прост в выполнении и более чувствителен, чем другие реакции титрования антинейраминидазных антител. Более простой способ титрования антинейраминидазных антител основан на принципе ингибиции элюции (РИЭ) [Арpleyard L., Oran G., 1977]. Для проведения реакции необходимы антигенные рекомбинанты с гетерологичным неактуальным гемагглютинином и гомологичной нейраминидазой. Сравнительное изучение в РИНА и РИЭ 160 сывороток здоровых людей в возрасте 16 — 18 лет показало более высокую чувствительность РИЭ, чем РИНА [Топурия Н. В. и др., 1980; Найхин А. Н. и др., 1980].

Пандемии инфекций поражали человечество с незапамятных времен, но по летописям первую гриппозную датируют 1580 годом, после чего эпидемии уже регулярно упоминались летописцами с интервалом от двух до 13 лет. И ежегодно 15% населения Земли вовлекаются в грипп, и каждый тысячный заболевший погибает от осложнений заболевания.

Как долго болеют гриппом?

От 5 дней до двух недель, всё определяется возбудителем инфекции.

При возникновении заболевания необходимо сразу обратиться к доктору-инфекционисту, который ведёт приём без выходных и праздников в клинике "Медицина 24/7". Ранее начало терапии позволит избежать непоправимых последствий.

Как обычно начинается грипп?

От инфицирования до появления первых симптомов может пройти всего несколько часов, но в большинстве случаев - от 2 дней до недели, это время носит название инкубационный период.

Инфекция В штаммом может начинаться постепенно, но симптомы выражены довольно значительно.

Когда появляются симптомы гриппа со стороны органов дыхания?

В отличие от ОРВИ при гриппе насморк появляются не ранее вторых суток болезни, и по интенсивности катар верхних дыхательных путей сильно уступает симптомам интоксикации. Обильного отделяемого из носа нет, выражена заложенность носа, превалирует сухой кашель, першение и заложенность за грудиной.

Для гриппа характерно сочетание трёх признаков:

Внезапное начало;
Выраженная интоксикация;
Лихорадка с кашлем из-за развития трахеита.

Клиническая симптоматика гриппа В чаще проявляется ознобом и светобоязнью со слезотечением, насморком и першением в горле.

При неосложненном течении симптоматика гриппа у взрослого присутствует не более 5 суток.

В клинике "Медицина 24/7" проводится круглосуточное обследование на высокоточном оборудовании, что позволяет быстро поставить правильный диагноз и безотлагательно начать лечение вируса гриппа.

Как выглядит больной при гриппе?

Очень неважно, от слабости он не способен ни стоять, ни сидеть. Лицо покрасневшее, одутловатое. Губы синюшные или просто бледные. Глаза красные и видны расширенные мелкие сосудики. Возможны носовые кровотечения, легко образуются синяки, а когда после измерения давления снимается манжета тонометра, то на этом месте образуются сосудистые звездочки – петехии.

Когда состояние больного должно вызывать серьезное беспокойство?

Признаки прогрессирующего течения гриппа у взрослых, когда развиваются опасные для жизни симптомы и требуется стационарное лечение:

Развитие легочно-сердечной недостаточности с ухудшением оксигенации крови, когда снижается артериальное давление, появляется одышка в покое или при незначительном движении, болит грудь и выделяется мокрота с прожилками крови.
Поражение центральной нервно системы, что отражается на психическом состоянии и изменяет сознание вплоть до спутанности, всё на фоне усиливающейся слабости и, возможно, судорог.
Признаки обезвоживания в виде снижения давления, малое количество мочи, нарастающая вялость при сухости кожи и слизистых оболочек.
Более трёх суток высокой температура могут говорить о присоединении бактериальной инфекции.

При возникновении вышеописанных симптомов ухудшения течения заболевания необходимо сразу обратиться к врачу-инфекционисту, который ведёт приём без выходных и праздников в клинике "Медицина 24/7", запись осуществляется круглосуточно по телефону +7 (495) 230-00-01 . Ранее начало терапии позволит избежать непоправимых последствий.

Часто ли возникают осложнения?

Возможность развития симптоматики осложнений гриппа зависит от агрессивности вирусного штамма и исходного состояния здоровья человека. В среднем, у каждого седьмого-десятого больного, как правило, это отягощенные хроническими болезнями пожилые пациенты и беременные.

Вирусная пневмония начинается в первые три дня болезни, к концу недели развивается вирусно-бактериальная пневмония, а третичная бактериальная пневмония возникает на второй неделе гриппа.

Для В гриппа характерны осложнение со стороны ЛОР-органов.

Когда происходит выздоровление?

Не раньше, чем исчезнут все симптомы интоксикации, нет ни одного признака воспаления верхних дыхательных путей, нормальная температура держится уже трое суток. Слабость ещё может оставаться, но с каждым днём она будет всё меньше, а самочувствие лучше.

Весь спектр диагностических мероприятий в клинике "Медицина 24/7" выполняется на гарантированно высоком профессиональном уровне, используются самые эффективные отечественные и зарубежные методики терапии, что позволяет существенно улучшить качество жизни наших пациентов и сохранить их активность.

Самоуверенность при нездоровье обходится очень дорого, получите помощь инфекциониста в клинике инфекционных заболеваний, позвонив по телефону: +7 (495) 230-00-01 .

Эпидемия гриппа, как правило, движется с востока на запад. Заболеваемость населения сопровождается тремя всплесками – пиками, первый происходит в конце осени и начале зимы, потом в новогодние каникулы и третий - на границе зимы и весны.

Какие возбудители гриппа вызывают эпидемии?

Причина гриппа - три вируса: А, В и С. Только штамм А способен существовать в организме человека, животных и птиц, и все они время от времени болеют гриппом. Штаммы В и С – чисто человеческие обитатели и больше ни у кого из мира зверей не встречаются.

Сегодня инфекционные агенты могут циркулировать одновременно, и в одной семье или учреждении одни больны гриппом А, другие В, а третьи – ОРВИ. После выздоровления от одной инфекции, можно перенести заболевания, вызываемые другими штаммами.

При возникновении вирусного заболевания необходимо сразу обратиться к инфекционисту, который ведёт приём без выходных и праздников в клинике "Медицина 24/7", запись осуществляется круглосуточно.

Как расшифровывается название вируса?

В 2016 году циркулировал вирус А(H1N1), ставший причиной высокой заболеваемости людей среднего возраста. Понятно, что А обозначает штамм, а что такое H1N1?

Для облегчения внедрения в клетки на поверхностной мембране возбудителя штамма А расположены белковые отростки. Одни отростки состоят из гемагглютинина (HA), всего найдено 18 вариантов этого белка, который помогает внедряться внутрь эритроцита. Другие отростки представлены 11 видами фермента нейраминидазы (NA), помогающей вирусной частице выбираться из клетки наружу.

По тому, из какого белка сделаны отростки, и стали обозначать подтипы вируса. Так имя А(H1N1) обозначает, что на вирусе А штамма располагаются шипики из 1 подтипа гемагглютинина и 1 подтипа нейраминидазы.

Не надейтесь, что уже много раз переносили вирусную инфекцию и при очередной эпидемии Вас минуют осложнения. Организм не становится новее, поэтому грипп в молодости совсем не то, что инфекцию в зрелости.

Как вирус гриппа повреждает клетки?

Вирус выделяется с микроскопическими капельками влаги при дыхании, с потом и слюной. Причина заболевания – попадание вирусной частицы в верхние дыхательные пути здорового человека. С помощью отростков HA инфекционный агент пробирается внутрь клетки, где запускает процесс своего деления. Новые народившиеся частицы уже при посредстве отростков NA выбираются из клетки наружу.

Оставьте свой номер телефона

Что может стать причиной гибели вируса гриппа?

Вирус не очень живучий, в зависимости от микроклимата он сохраняет жизнеспособность не более 8 часов, мороз и жара могут стать причиной его ранней гибели.

Причина безусловной вирусной смерти – обработка рук и поверхностей спиртом или перекисью водорода, обычным мылом и облучением ультрафиолетом. А вот йодные растворы антисептиков работают не очень активно, требуется долгий контакт и концентрация.

Защита от вируса гриппа

Причина заболевания – получение вируса с капельками слюны инфицированного. При больном члене семьи или в транспорте вероятна не только воздушно-капельная передача, но и контактный способ с переносом инфекционной частицы запачканными руками на лицо. Самый лучший способ обезопасить себя от тяжелого гриппа и его осложнений – сделать прививку от гриппа.

Вести здоровый образ жизни, то есть не переедать, нормально спать, быть физически активным.
Если у Вас есть хронические заболевания, необходимо наблюдаться врачом, потому что обострения снижают иммунную защиту организма.
В эпидемический период возможна и лекарственная профилактика, особенно, при контакте с больным. Разработана лекарственная экстренная и сезонная противовирусная профилактика, что повышает устойчивость организма человека к респираторным вирусам.

Если Вы имеете хроническую причину для снижения сопротивляемости организма, имели контакт с больным или просто хотите повысить устойчивость организма к инфекционному агенту, специалисты "Медицина 24/7" подберут индивидуальную профилактическую программу. Обратитесь к инфекционисту в нашу клинику инфекционных заболеваний за помощью, позвоните по телефону: +7 (495) 230-00-01 .

В клинике "Медицина 24/7" не только в кратчайший срок и с минимальными затратами установят правильный диагноз, но и проведут оптимальное лечение вируса гриппа по мировым клиническим стандартам с учетом индивидуальности Вашего организма.

Лабораторная диагностика при гриппе

Диагностика вирусного заболевания у взрослых несложна, довольно бывает врачебного осмотра, без анализа по выявлению конкретного возбудителя. В эпидемический сезон циркулируют определённые штаммы – виды гриппозных вирусов, а по большому счёту любому пациенту достаточно провести адекватное лечение и поставить его на ноги, и ему неважно, какой штамм нанес урон его здоровью.

В пользу гриппозной инфекции говорит:

специфическая клиническая картина;
повышенная заболеваемость окружающего населения вирусными респираторными инфекциями и гриппом;
заболевание в эпидемический сезон по инфекции;
заблаговременно рассчитанный Всемирной организацией здравоохранения возбудитель заболевания.

Когда врач назначает диагностику?

Диагностика возбудителя проводится при госпитализации в случае тяжелого течения инфекции и при развитии осложнений. Вирус ищут сложными лабораторными методами:

В любом секрете – выделении больного, не важно, в крови или слюне, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) обнаруживают частицу генетического аппарата вируса – РНК.
Кровь берут для проведения реакции торможения гемагглютинации (РТГА), при которой обнаруживаются антитела к вирусу.
Иммуноферментный анализ (ИФА) и метод иммунофлюоресцентной микроскопии выявляют признаки присутствия вируса – антигены в смыве со слизистой оболочки.

Если у Вас появились признаки респираторной вирусной инфекции, не пытайтесь самостоятельно поставить диагноз. Множество серьезных заболеваний в начале развития протекает под гриппозной маской.

Эффективная профилактика гриппа

Ежегодно к началу осени ВОЗ объявляет, какие штаммы возбудителя будут вызывать заболевание зимой и фармацевтические производители начинают готовить определенные вакцины. Вакцинация требуется не всем, а тем, кто по работе связан с больными, или трудится в детских коллективах, может способствовать распространению инфекции в среде ослабленных пожилых людей. Исследованиями доказано, что вакцинация – лучшая профилактика тяжелого заболевания и его осложнений, реально снижает смертность населения.

Вакцинация проводится либо целым вирусом, либо его частицами, и вызывает в организме образование иммунных защитников. Живые вакцины самые эффективные, но и осложнений вызывают больше. Препараты с ослабленным – инактивированным вирусом вызывают ограниченную защитную реакцию, но лучше переносятся. Вакцинальный иммунитет возникает к концу второй недели и держится несколько месяцев.

Только врач из всего многообразия вакцин может подобрать лучший для Вас препарат с учетом возможных осложнений, и спрогнозировать оптимальный иммунный ответ. Это не займёт много времени, но оградит Вас от осложнений инфекции. Обратитесь к врачу Центра инфекционных заболеваний. Запишитесь на прием инфекциониста: +7 (495) 230-00-01

Как проводить профилактику гриппа и простуды, если заболел один из членов семьи?

Если в семье появился больной гриппом или ОРВИ, необходимо:

Отделить его в комнате или хотя бы за ширмой, чтобы в окружении метра не находились здоровые члены семьи;
Проветривать и ежедневно мыть полы и протирать мебель;
После мытья обдавать кипятком посуду больного;
Руки мыть почти по локоть после каждого прикосновения к больному;
Маску выбрасывать после 2-часовой носки.

Члены семьи могут начать профилактику лекарствами, которыми лечат грипп.

Ваш врач может порекомендовать препараты для профилактики. Их подбирают индивидуально. Некоторые из этих лекарств обладают серьезными побочными эффектами, поэтому ни в коем случае не стоит заниматься самолечением.

Правильная диагностика позволяет назначить оптимальное лечение и держать болезнь под контролем, в клинике инфекций "Медицина 24/7" выполняется весь спектр сложных исследований. Запишитесь на прием инфекциониста в удобное для вас время, позвонив по телефону +7 (495) 230-00-01 .

Лечение взрослых больных гриппом состоит из соблюдения режима и питания, медикаментозной терапии.

Каждый год в преддверии эпидемии ВОЗ извещает, какие будут циркулировать вирусы, какие вакцины эффективны и что следует принимать. Для результата вне зависимости от вида штамма следует принимать:

В клинике Медицина 24/7 проводится круглосуточное обследование на высокоточном оборудовании, что позволяет быстро поставить правильный диагноз и безотлагательно начать лечение. Обратитесь в Центр инфекционных заболеваний за помощью, позвоните по телефону: +7 (495) 230-00-01

Грипп птиц (классическая чума птиц, экссудативный тиф, браун-швегейская болезнь кур и др.) — острая контагиозная вирусная болезнь, характеризующаяся общим угнетением, отеками, поражением органов дыхания и пищеварения.

Болезнь регистрируется в различных странах мира. В форме классической чумы птиц встречается редко. Чаше проявляется эпизоотическими вспышками в респираторной форме или с преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта.

Вирусы гриппа птиц выделены от кур, индюков, уток, перепелок, фазанов, глухарей, попугаев, цесарок и птиц других видов.

Характеристика возбудителя. Вирус относится к семейству Orthomyxoviridae, роду Influenzavirus А. Вирионы плеоморфной (различной), чаще округлой формы, диаметром 80—120 нм. Состоят из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки, которая образует выступы. Геном представлен односпиральной линейной молекулой минус-РНК, состоящей из восьми фрагментов.

Устойчивость к физико-химическим воздействиям. При низких температурах и в лиофилизированном состоянии вирус сохраняется до двух лет. При температуре 55 °С инактивируется за 1 ч, при 60 °С — за 10 мин, при 65—75 °С — за 2—5 мин. Вирус утрачивает инфекционную активность под воздействием формальдегида, едких щелочей, слабых кислот, хлорсодержащих соединений.

Антигенная структура и активность. Вирионы вируса гриппа кур содержат внутренние антигены — NP, белки М, P1, Р2, Р3 и наружные антигены — гемагглютинин (Н) и нейраминидазу (N). Внутренние антигены индуцируют образование комплементсвязывающих и преципитирующих антител. Наружные антигены обладают гемагглютинирующей активностью и индуцируют нейтрализующие антитела, которые отвечают за напряженность противовирусного иммунитета.

Антигенная вариабельность и родство. Идентифицированы 15 субтипов гемагглютинина и 9 субтипов нейроминидазы с минимальной перекрестной активностью (между субтипами) в серологических реакциях. Внутри субтипа также могут быть вариации.

Антигенное родство изолятов устанавливают в РТГА (для определения сходства по гемагглютинину), в РТНА (для определения сходства по нейроминидазе), в РИД (для определения сходства по гемагглютинину и нейроминидазе).

Культивирование вируса. Все штаммы вируса гриппа птиц в лабораторных условиях размножаются в куриных эмбрионах при заражении в аллантоисную или амниотическую полость. Некоторые штаммы после адаптации размножаются в культурах клеток фибробластов куриного эмбриона, почки обезьян, легких эмбриона человека и других первичных культурах клеток (WI-38, миелобластоза цыплят). Некоторые штаммы образуют бляшки в первичной культуре клеток куриных фибробластов.

Гемагтлютинирующие и гемадсорбирующие свойства. Все вирусы гриппа птиц агглютинируют эритроциты кур, морских свинок, кроликов, лошадей, овец и других животных. В отличие от вируса ньюкаслской болезни штаммы вируса гриппа птиц агглютинируют эритроциты лошади и овцы, что используется для дифференциации выделенных на эмбрионах штаммов вируса гриппа птиц от болезни Ньюкасла,

Гемадсорбирующие свойства проявляются с эритроцитами кур при культивировании вируса в культуре фибробластов куриных эмбрионов.

Экспериментальная инфекция. Она воспроизводится на курах и цыплятах при любом способе заражения субтипами вируса гриппа A (H7N1 и H5N3). Белые мыши заболевают при интраназальном и интрацеребральном заражениях. Экспериментальное заражение вирусами протекает бессимптомно. Экспериментальная инфекция у естественно-восприимчивой птицы зависит от вирулентности вируса, степени адаптации к биологической системе и сопутствующих инфекций.

Клинические признаки. Различные по вирулентности штаммы вируса вызывают разные формы клинического течения болезни. Для классической чумы птиц характерны депрессия, потеря чувствительности, синюшность слизистых и кожных покровов, отек подкожной клетчатки. Летальность может достигать 80 % и выше. При респираторной форме наблюдают сонливость, чихание, хрипы, одышку, выделения из носа и глаз, взъерошенность, отставание в развитии, снижение яйценоскости у взрослой птицы. Летальность в зависимости от вирулентности штамма, восприимчивости птицы, условий содержания может варьировать от 1 до 80 %. При желудочно-кишечной форме болезни основной клинический признак на фоне угнетения, отказа от корма и снижения яйценоскости — диарея. Гибель не превышает 5 %.

Встречается и бессимптомное течение (особенно среди домашних уток).

Патологоанатомические изменения. При вскрытии у птицы в зависимости от форм течения болезни могут наблюдаться кровоизлияния в паренхиматозных органах, скелетных мышцах, пищеварительном тракте, очаги некроза во внутренних органах и ЦНС. Штаммы, обладающие пневмотропным действием, вызывают катаральные воспаления в носовых ходах, синусах, трахеи, легких. В некоторых случаях обнаруживают катарально-геморрагические энтериты, нефриты.

Локализация вируса. Входными воротами для вируса служат в основном верхние дыхательные пути, где вирус проходит первичную репродукцию. Накапливаясь, проникает в кровеносную и лимфоидную системы, откуда вторично попадает в эпителиальные клетки дыхательных путей, паренхиматозные органы, головной мозг, кишечник, эндотелий сосудов (вторичная репродукция).

Источник инфекции — больная птица, которая передает вирус воздушно-капельным путем, а также алиментарным при инфицировании воды и корма фекалиями. Распространять вирус на большие расстояния могут дикие перелетные птицы (лебеди, утки, чайки и др.). В естественных условиях спектр патогенности не однороден и зависит от субтипа. Так, субтип H7N1 вызывает классическую чуму птиц чаще среди семейства куриных, и к нему менее восприимчивы водоплавающие птицы. Дикие утки являются не только переносчиками, но и резервуарами инфекции, вызывая сезонные заболевания среди болотных птиц. Штаммы вируса гриппа индейки патогенны для индеек и кур. Штаммы вируса гриппа кур патогенны для кур и перепелов.

Проблема межвидовой передачи между вирусами гриппа птиц, свиней и человека еще окончательно не разрешена. Дикие водоплавающие птицы являются резервуарами различных субтипов вируса. И в тех популяциях, где они находятся в тесном контакте с людьми, свиньями, могут образовываться за счет генной рекомбинации новые более патогенные штаммы вируса гриппа. Вирус гриппа с формулой H2N2 не выделяется от человека с 1968 г., но изолируется от птиц и в случае реверсии может стать эпидемическим.

Диагностика. Поставить диагноз на грипп птиц можно на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований, имеющих решающее значение.

Взятие и подготовка материала. В лабораторию отправляют патологический материал от больной птицы, взятый в первые 2—3 дня болезни при выраженной клинической картине, или от павшей птицы, или убитой с диагностической целью в острой стадии заболевания.

От больной птицы берут мазки из трахеи и клоаки стерильным ватно-марлевым или поролоновым тампоном, который помещают во флакон с 2 мл физиологического раствора (pH 7,0—7,2) или раствора Хенкса с антибиотиками (пенициллин и стрептомицин по 500—1000 ЕД/мл) и доставляют в термосе со льдом. Для ретроспективной серодиагностики в начале болезни и в период выздоровления от больной птицы берут кровь на парные сыворотки. При этом сгусток крови, который остается от первой пробы крови, также отправляют для исследования в качестве вируссодержащего материала.

От павшей или убитой птицы берут кусочки селезенки, головного мозга, трахеи, легких, воздухоносные мешки, синусы, участки кишечника или отправляют свежие трупы (не менее двух-трех).

Лабораторная диагностика. Включает индикацию и выделение вируса, его идентификацию, а также ретроспективную диагностику.

Индикацию вируса проводят экспресс-методами, к которым относятся методы цитоскопии и простого флюрохромирования.

При цитоскопии в мазках-отпечатках со слизистых дыхательных путей, окрашенных одним из методов (по Романовскому, Пигаревскому, Быковскому), в цитоплазме клеток обнаруживают тельца-включения фиолетового (окраска по Романовскому) или ярко-красного (окраска по Пигаревскому, Быковскому) цвета.

Метод простого флюрохромирования позволяет обнаруживать в мазках-отпечатках, содержащих вирус гриппа (с применением раствора акридинового оранжевого 1:10 000), в люминесцентном микроскопе четко очерченные гранулы красного или оранжевого цвета, расположенные в цитоплазме клеток.

Выделение вируса проводят путем заражения куриных эмбрионов, культуры клеток, а также ставят биопробу на цыплятах.

Заражают 9—10-дневные куриные эмбрионы (не менее пяти на одну пробу), которым инокулируют исследуемую суспензию в амниотическую или аллантоисную полость общепринятым методом. Инкубируют яйца в течение 72 ч. Экстраэмбриональную жидкость каждого эмбриона на обнаружение вирусного гемагглютинина исследуют раздельно в капельной РГА с 1%-ной взвесью эритроците кур. При отрицательной РГА проводят еще 3—5 слепых пассажей, используя для заражения КЭ эмбриональную жидкость предыдущего пассажа. Проба считается отрицательной, если в 3—5 слепых пассажах не будет положительной РГА и патогенного действия вируса (гибель КЭ).

Культуру клеток заражают реже, чем КЭ. Для этого используют первичную культуру клеток куриных фибробластов. ЦПД обычно обнаруживают через 24—48 ч, хотя наибольший инфекционный титр вируса (10 5 —10 7 ЭИД₅₀/мл) наблюдается после 2—5 пассажей. Культуральную вируссодержащую жидкость исследуют в РГА и РГАд.

Биопробу на цыплятах проводят, если первые два метода выделения вируса требуют подтверждения. Инокулируют испытуемую суспензию 2—3-месячным цыплятам любым способом (подкожно, внутримышечно, на конъюнктиву и т. д.). Гибель наступает в зависимости от вирулентности и дозы вируса через 36—72 ч.

Идентификация вируса. РТГА — наиболее простой и высокодостоверный метод идентификации вируса. Реакцию проводят с диагностическим набором, содержащим 15 эталонных штаммспецифических сывороток. Для дифференциальной диагностики с болезнью Ньюкасла параллельно ставят реакцию с эталонной специфической сывороткой против болезни Ньюкасла.

РТГА ставят микро — или макрометодом по общепринятой методике. Сыворотки, используемые в реакции, освобождают от термолабильных ингибиторов, прогревая при 60 °С в течение 30 мин, от термостабильных ингибиторов, пропуская через специфическую сыворотку, CO₂ или добавляя кусочки сухого льда. РТГА считают положительной, если сыворотка полностью тормозит гемагглютинирующую активность выделенного вируса.

РТГАд ставят по общепринятой методике в культуре клеток куриных фибробластов. Используют набор эталонных штаммспецифических сывороток (предварительно освобожденных от ингибиторов) и эритроциты кур. Исследуемый вирус считается идентифицированным в РТГАд, если эталонная сыворотка блокирует гемадсорбцию.

РСК используют для определения родоспецифичности выделенного вируса, когда в РТГА не удается установить родственных связей между выделенным (эпизоотическим) и эталонным штаммами вируса гриппа по специфическим сывороткам к ним. В этом случае РСК ставят с эталонными специфическими сыворотками против вирусов гриппа родов А, В, С и устанавливают родовую принадлежность штамма.

PH применяют при некоторых неясных и спорных случаях, поэтому в диагностике используются редко.

РИФ относится к экспресс-методам диагностики. Используют прямой и непрямой варианты, для которых мазки-отпечатки готовят ex tempore от убитой больной или свежепавшей птицы и далее применяют соответственный вариант реакции по общепринятой методике.

К наиболее современным методам идентификации вируса гриппа птиц относится ИФА на основе моноклональных антител к гемагглютинину и внутренним вирусным белкам NP и М, а также ПЦР с двумя типами праймеров на основе неструктурного белка и гемагглютинина.

Ретроспективная диагностика. Основывается на обнаружении антигемагглютинирующих и комплементсвязывающих антител в парных сыворотках. Для этой цели используют серологические реакции.

РТГА. Парные сыворотки исследуют одновременно. Первую пробу хранят при 4 °С или в замороженном виде. Перед реакцией сыворотки освобождают от термолабильных и термостабильных ингибиторов. Реакцию проводят с диагностическим набором, содержащим 15 эталонных штаммов вируса.

Реакцию считают положительной, если титр антител во второй пробе не менее чем в 4 раза превышает титр антител к тому же субтипу вируса в первой пробе.

РСК ставят или с нативной внруссодержащей аллантоисной жидкостью, которую предварительно осветляют центрифугированием, или с диагностическим набором, содержащим эталонные вирусные антигены. Используют как классическую методику, так и микрометод в модификации В. В. Ритовой.

РРГ (реакцию радиального гемолиза) широко используют в настоящее время для иммунологического мониторинга в целях изучения иммунного фона и оценки поствакцинального иммунитета. При использовании эталонных вирусных антигенов удается получить четкие зоны радиального гемолиза с гомологичными антителами в исследуемых сыворотках.

ИФА проводят по твердофазному варианту, и в качестве антигена для сенсибилизации лунок диагностических планшет используют внутренний белок (NP) вируса гриппа А. Титры антител в ИФА в 5 и более раз выше, чем в РСК.

Дифференциальная диагностика. Грипп следует дифференцировать от ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита и ларинготрахеита, а также гемофилеза и миксоплазмоза.

Иммунитет и специфическая профилактика. Основная трудность профилактики гриппа заключается в изменчивости наружных белков вирусов, что приводит к ежегодному появлению новых циркулирующих эпизоотических штаммов, отличных от вакцинных. Поэтому ранняя, своевременная и эффективная диагностика новых штаммов — актуальная задача ветеринарии. Для этого используется радиоиммунный анализ (РИА).

Для профилактики гриппа птиц, вызываемого вирусом H7N1 (классическая чума птиц), применяют отечественные живые вакцины из аттенуированных штаммов Ру и Р5; для профилактики болезни, вызываемой подтипами H1—Н8, отечественные биофабрики выпускают инактивированную β-пропиолактоновую гидроокисьалюминиевую вакцину. За рубежом применяют живую нейраминидазо-N-специфическую вакцину (Англия), масляноэмульсионную вакцину для цыплят-броллеров и кур-несушек (США). Разработан метод получения рекомбинантного вируса гриппа птиц, экспрессирующего вирусные белки, что может использоваться в качестве живой вакцины для домашней птицы.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Читайте также: