Диагностикумы гриппозные для ртга

Современные препараты для лабораторной диагностики гриппа и ОРВИ

И. В. Амосова, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ НИИ гриппа МЗ РФ, “Научно-исследовательский институт гриппа” Минздрава России (ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ), ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”), Санкт-Петербург, Россия

На сегодняшний день грипп и другие острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) остаются серьезной медицинской и социальной проблемой, о чём свидетельствуют высокие показатели заболеваемости и смертности, особенно среди детей, пожилых людей и пациентов с хроническими заболеваниями. Для организации эффективных процессов лечения, профилактики и надзора за гриппом необходимо своевременное проведение лабораторной диагностики, позволяющей выявить возбудителя инфекции. Всемирная организации здравоохранения (ВОЗ) рекомендует использовать для идентификации возбудителей ОРВИ методы иммунофлуоресценции (ИФ) и реакции торможения гемагглютинации (РТГА) наряду с выделением вирусов в культуре клеток или полимеразной цепной реакцией (ПЦР)1.

ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”) организовано в 2013 году с целью обеспечения учреждений здравоохранения препаратами для диагностики вирусов гриппа А, В и других ОРВИ: вирусов парагриппа 1, 2 и 3 типов, РС-вируса

и аденовирусов. Основной учредитель Предприятия – ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России, выполняющий в качестве Федерального центра по гриппу одну из ключевых функций в системе надзора за заболеваемостью гриппом в России и являющийся признанным Национальным центром по гриппу ВОЗ в рамках глобального контроля этой инфекции.

В основе производства – научные разработки и многолетний опыт лаборатории биотехнологии диагностических препаратов НИИ гриппа, а также современные методы накопления, очистки и концентрации вирусов, иммунохроматографии, иммуноблоттинга, иммуноферментного и ИФ- анализа и методы гибридомной технологии, позволяющие создавать новые препараты моноклонального типа.

Предприятие выпускает и реализует следующие диагностические препараты:

Наименование препарата

Ед. изм.

Кол-во анализов

Назначение

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие гриппозные сухие (ИФ-Г):

грипп А (Н1N1)pdm 09

грипп В

анализов

Ранняя диагностика ОРВИ по выявлению антигенов: вирусов гриппа А или В; адено- или РС-вирусов; вирусов парагриппа 1, 2 или 3 типа, вирусов герпеса 1 или 2 типов в клетках цилиндрического эпителия носа от больных с симптомами ОРВИ; обнаружение вирусных антигенов в препаратах клеточных культур, инфицированных материалами от больных.

Материалом для исследования служат мазки из носа, взятые от больных ОРВИ, содержащие клетки цилиндрического эпителия слизистой оболочки глубоких отделов носовой полости.

Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновыйсухой (ИДФАГ)

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие парагриппозные сухие (ИФ-ПГ):

парагрипп 1 типа

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие

РС-вирусные сухие (ИФ-РС)

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие герпетические сухие (ИФ-Герпес):

герпес 2 типа

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИГ):

грипп А (Н1N1)pdm09

грипп В (Викторианская линия)

грипп В (Ямагатская линия)

50
анализов

Диагностика гриппозной инфекции по выявлению прироста антител в сыворотках реконвалесцентов, оценка коллективного иммунитета, оценка иммуногенности гриппозных вакцин, научные исследования.

Диагностикумы парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИ-ПГ):

парагрипп 1 типa

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Наименование препарата

Ед. изм.

Кол-во анализов

Назначение

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СДГ):

грипп А(Н1N1)pdm 09

грипп В (Викторианская линия)

грипп В (Ямагатская линия)

50
анализов

Идентификация типов/ субтипов вирусов гриппа А и В, выделенных из материалов от больных, изучение антигенной структуры вирусного гемагглютинина, контроль специфичности штаммов вирусов гриппа.

Сыворотка диагностическая парагриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СД-ПГ):

парагрипп 1 типа

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Иммуноферментная тест-система для определения антител класса IgG

к вирусу гриппа А (H1N1)pdm 09

к вирусу гриппа А (H3N2)

к вирусу гриппа B

к вирусу парагриппа 1 типа

к вирусу парагриппа 3 типа

набор

90
анализов

Определение антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРВИ по приросту уровня специфических антител (IgG).

Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятые в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.

Набор реагентов для культивирования клеток и выделения вирусов гриппа в культуре клеток

набор

Выделение вирусов гриппа, надзор и быстрая расшифровки эпидемий гриппа.

Флуоресцирующие иммуноглобулины обеспечивают быструю (в течение 1,5-2-х часов) возможность непосредственной детекции вирусных антигенов в клинических материалах или в клеточных культурах, инфицированных материалами от больных.

Препараты зарегистрированы в Росздравнадзоре и допущены к обращению на территории РФ

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие гриппозные сухие

РУ № ФСР 2009/05255 от 09.07.2009 г.

Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновый сухой

РУ № ФСР 2008/03940 от 26.12.2008 г.

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие парагриппозные сухие

РУ № ФСР 2009/05254 от 09.07.2009 г.

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие РС-вирусные сухие

РУ № ФСР 2009/05256 от 09.07.2009 г.

В лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ разработаны и широко используются в практике здравоохранения Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие сухие, которые представляют собой коньюгат очищенных противовирусных антител с флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ). Препараты имеют красящий титр не ниже 1:16, содержат консервант – мертиолат 1:10000, лиофилизированы, выпускаются во флаконах по 0,5 или 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5.В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Диагностикумы гриппозные/парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие

Гриппозные диагностикумы для реакции торможения гемагглютинации (РТГА) используют в качестве подтверждающего теста при поступлении больных в стационар на 6-10 сутки заболевания, когда другие тесты (ИФЛ, ПЦР, выделение вируса) оказываются уже мало чувствительными.

Диагностикумы предназначены для субтиповой серодиагностики гриппа (по 4-х кратному приросту титров антител в сыворотках реконвалесцентов); контроля популяционного иммунитета населения; оценки иммуногенности живых и инактивированных гриппозных вакцин.

Препараты готовятся по оригинальным технологиям из антигенно актуальных штаммов, в соответствии с рекомендациями ВОЗ, не содержат инфекционного вируса, включают наполнитель, препятствующий сорбции антигенов на полистироловых планшетах. 1 мл препарата достаточно для тестирования 100 сывороток микрометодом РТГА.

Диагностикумы выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие зарегистрированы в Росздравнадзоре и допущены к обращению на территории РФ

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие РУ № ФСР 2009/05253 от 09.07.2009 г.

Специфические сыворотки для идентификации возбудителей ОРВИ

Высокоспецифичные диагностические сыворотки предназначены для идентификации вирусов гриппа А (субтипов H1, H2, H3, H5, Н7, H9) и В (обеих современных эволюционных ветвей), а также других возбудителей ОРВИ в ИФА, реакциях торможения гемагглютинации и микронейтрализации.

Сыворотки выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая зарегистрирована в Росздравнадзоре и допущена к обращению на территории РФ

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая РУ № ФСР 2009/05257 от 09.07.2009 г.

Иммуноферментные тест-системы (ИФТС) для определения антител класса IgG к ОРВИ и гриппу

Современные методы иммунодиагностики с определением классов и субклассов IgG открывают новые возможности в исследовании структуры иммунитета и формирования иммунопатологических состояний.

Характерными особенностями разработанных ИФТС являются:

• высокая чувствительность анализа;

• возможность использования микроколичеств сывороток (0,5 – 1 мкл);

• снижение трудоемкости анализа за счет исключения операций титрования сывороток;

• возможность индикации класс-специфических противовирусных антител;

• сокращение сроков проведения анализов.

Иммуноферментные тест-системы представляет собой 13-компонентный набор, основными реагентами которого являются очищенные вирусные антигены, позитивные и негативные контрольные образцы сывороток, а также конъюгаты моноклональных антител к IgG человека.

Тест-системы предназначены для детекции антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРЗ, рассчитаны на проведение 96 анализов, включая контрольные пробы. Предназначены для серодиагностики инфекций по определению достоверного прироста уровня специфических IgG.

Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятыми в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.

Парные сыворотки от одного больного исследуют одновременно, в одной постановке реакции. Постановку реакций осуществляют в соответствии с прилагаемыми Инструкциями по применению. Срок годности ИФТС – 6 месяцев.

Предприятие является единственным в России производителем препаратов для иммунодиагностики ОРВИ и полностью обеспечивает организации здравоохранениявсем необходимым для осуществления лабораторного надзора за гриппом и ОРВИ на территории России и стран СНГ. Штаммовый состав выпускаемых препаратов постоянно обновляется в соответствии с рекомендациями ВОЗ. Диагностические препараты, выпускаемые ООО “ППДП”, зарегистрированы в федеральной службе по надзору в сфере здравоохранения (Росздравнадзор).

ООО “ППДП” оказывает информационную поддержку и консультационные услуги по всему ассортименту своей продукции, а также принимает участие в организации и проведении конференций, семинаров, и других научно-практических мероприятий на базе ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России.

ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ППДП)

197376, Санкт-Петербург, ул. профессора Попова, д. 15/17

ДИАГНОСТИКУМЫ (греч, diagnostikos способный распознавать) — взвеси обезвреженных микроорганизмов, используемые в качестве антигенов для серологических реакций. Опасность работы с живыми культурами, их способность к изменчивости и наличие широких антигенных связей делают целесообразным применение Д.— более стандартных и гомогенных препаратов, содержащих определенные антигенные компоненты.

С помощью Д. в реакциях агглютинации, пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА) и др. выявляют специфические антитела в сыворотках людей и животных с целью постановки диагноза и изучения иммунного состояния организма.

Особенно широко используют Д. в лабораторных исследованиях при кишечных инфекциях. Однако общность антигенной структуры кишечных бактерий обусловливает наличие перекрестных реакций и требует дифференцированного выявления антител. С этой целью проводят избирательное подавление отдельных антигенов: с помощью фенола или формалина подавляют О-агглютинабельность, как предложили Феликс и Олицкий (A. Felix, L. Olitzki, 1928). Воздействуя спиртом по способу Вина и Зонтага или прогреванием по Кауффманну, получают O-диагностикумы с инактивированным жгутиковым антигеном. Еще более перспективно применение моно диагностикумов, принцип создания которых разработан Ф. Г. Бернгофом (1944). В этих препаратах содержится лишь один антигенный компонент, и они взаимодействуют только с определенными специфическими антителами.

Показана возможность сохранения свойств бактериальных Д. путем их лиофилизации (см.).

Д., применяемые для серодиагностики различных инфекций, принципиально сходны, однако отдельные виды этих препаратов имеют определенную специфику.

Общепризнано, что РПГА более чувствительна и специфична, чем бактериальная агглютинация. В качестве антигенов в РПГА применяют формалинизированные эритроциты, сенсибилизированные антигенами, полученными по методам Буавена и Вестфаля.

Вирусные Д. применяют в основном в реакции связывания комплемента (РСК), РТГА и реакции нейтрализации. Готовят их из вируссодержащих культуральных жидкостей, обработанных (инактивированных) различными способами.

Краткая характеристика основных Д. и сфера их применения представлены в таблице.

Имеются также экспериментальные препараты, используемые в научной работе: эритроцитарные колидиагностикумы, дифтерийные эритроцитарные Д., гемагглютинирующие антигены вирусов паротита, коревой Гемагглютинирующий антиген и др.

Таблица. Краткая характеристика основных диагностикумов и цель их применения

Цель применения (используется сыворотка обследуемого)

Диагностикумы из бактерий семейства кишечных: шигелл Флекснера, Зонне, Ньюкасла; сальмонелл тифа (ОН, О), паратифа А и В, холеры су ис, тифимуриум, энтеритидис

Микробная взвесь (3 млрд. микробных тел в 1 мл), инактивированная 0,4—0,5% р-ром формалина

Постановка реакции агглютинации для уточнения клин, диагноза заболевания

Сальмонеллезные О-диагностикумы (2, 4, 7, 8, 9 и 3, 10)

Микробная взвесь, содержащая парциальный О-антиген (3 млрд. микробных тел в 1 мл),полученная из селекционированных штаммов, инактивированная 15% р-ром глицерина

Постановка реакции агглютинации для выявления О-антител при сальмонеллезах

Сальмонеллезные Н-монодиагностикумы (а, b, с, d, eh, с, k, lv, gm, p, st и антигены второй фазы — 1, 2, 5, 6, 7)

Микробная взвесь, содержащая компоненты жгутикового антигена 1-й и 2-й фаз (3 млрд. микробных тел в 1 мл), полученная из селекционированных штаммов, инактивированная 0,5% р-ром формалина

Постановка реакции агглютинации для выявления Н-антител с диагностической целью и для установления заболевания в анамнезе

Микробная взвесь (3 млрд. микробных тел в 1 мл) из штаммов, содержащих Vi-фактор, обработанная 0,4% р-ром формалина и 0,6% р-ром хлорида кальция

Постановка реакции агглютинации для выявления брюшнотифозного бактерионосительства

Бруцеллезный единый диагностикум

Взвесь бруцелл в 12% р-ре поваренной соли, окрашенная в синий цвет и инактивированная 0,5% р-ром фенола

Постановка реакции агглютинации (реакция Райта и реакция Хаддлсона для выявления инфицированных людей и животных— см.Бруцеллез, методы исследования)

Микробная взвесь (25 млрд. микробных тел в 1 мл) вакцинного штамма, инактивированная 0,5% р-ром формалина

Постановка объёмно-капельной реакция агглютинации на стекле для серодиагностики и изучения иммунного состояния привитых

Лиофилизированная микробная взвесь 11 штаммов наиболее распространенных серотипов

Постановка РСК для подтверждения клин, диагноза заболевания

Корпускулярные антигены — взвесь риккетсий, выращенная в желточных мешках куриных эмбрионов или легочнориккетсиозный материал от зараженных грызунов, обработанный эфиром, целитом или при дифференциальном центрифугировании

Постановка реакции агглютинации для дифференциальной диагностики риккетсиозов

Эритроцитарные диагностикумы из шигелл Флекснера — Зонне

Формалинизированные эритроциты, сенсибилизированные антигенами Буавена, Вестфаля и др.

Эритроцитарный сальмонеллезный Vi-диагностикум

Формалинизированные эритроциты, сенсибилизированные очищенным Vi-антигеном

Постановка РПГА для выявления брюшнотифозного бактерионосительства

Эритроцитарные сальмонеллезные О-диагностикумы (1, 2, 12; 1, 4, 12; 6, 7; 6, 8; 1, 9, 12; 3, 10 и комплексный)

1% взвесь формалинизированных эритроцитов, сенсибилизированных антигенами Буавена, Вестфаля и др.

Лиофилизированный туляремийный эритроцитарный диагностикум

Формалинизированные лиофилизированные эритроциты, сенсибилизированные туляремийным антигеном

Постановка РПГА для уточнения клин., диагноза туляремии, а также реакции нейтрализации антител для обнаружения: антигена

Антиген вируса осповакцины

Сухой препарат живого вируса осповакцины, культивированного на хорион-аллантоисной оболочке куриных эмбрионов

Постановка РПГА для выявления антигемагглютининов у больных и привитых

Аденовирусный специфический антиген

Готовят культивированием вируса 6 типа в культуре перевиваемых клеток А-1 (антиген, общий для всех аденовирусов)

Постановка РСК для выявления комплементсвязывающих антител в сыворотке больных

Диагностикумы клещевого энцефалита и этиологически сходных с ним заболеваний

Вируссодержащая суспензия мозга белых мышей, осветленная путем центрифугирования и инактивирования бета-пропилактоном

Постановка РСК и РТГА для уточнения клин, диагноза заболевания

Сухой препарат из кипяченых вируссодержащих желточных мешков куриных эмбрионов, экстрагированных эфиром, осажденных ацетоном и инактивированных мертиолатом

Постановка РСК для диагностики орни-тоза людей, птиц и животных

Гриппозный диагностикум сухой

Аллантоисная жидкость развивающихся куриных эмбрионов, инфицированных одним из штаммов вируса гриппа типа А, В или С, инактивированная формалином, мертиолатом. В связи с изменчивостью антигенной структуры вируса гриппа предусмотрена частая смена производственных штаммов

Постановка РТГА для уточнения клин., диагноза заболевания

Парагриппозный диагностикум типа 1, 2, 3 для РТГА, сухой

Культуральная жидкость (почки эмбриона человека), содержащая один из штаммов вируса парагриппа, обработанная твином-80, эфиром и мертиолатом

Постановка РТГА для уточнения клин, диагноза заболевания

Библиография: Зуев А. С. Бактериальный vi-диагностикум для выявления хронических носителей брюшнотифозных бактерий, Журн, микр., эпид, и иммун., № 2, с. 51, 1959, библиогр.; Зуев А. С., Новоселова А. И. и Ликина И. В. Разработка методики производственного изготовления О-диагностикумов и Н-монодиагностикумов и применение их при серодиагностике салмонеллезов, там же, № 3, с. 42, 1956; Иммунология и профилактика кишечных инфекций, под ред. С. И. Диденко, с. 180, М., 1962; Каральник Б. В. Эритроцитарные диагностикумы, М., 1976; Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, с. 172, М., 1973; Субботина Ю. Л. и д р. Серологическая диагностика сальмонеллезов и антигенные связи в реакциях с эритроцитарными и бактериальными О-диагностикумами, Журн, микр., эпид, и иммун., № 3, с. 19, 1970, библиогр.

Для экспресс-диагностики могут быть использованы:
а) реакция иммунофлюоресценции с использованием флюоресцирующих антител для диагностики респираторных вирусных инфекций (гриппа, парагриппа, РС- и аденовирусной инфекций). Метод основан на взаимодействии вирусного антигена в материале от больного с антителами, меченными флюоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ). Образующийся специфический комплекс обнаруживают в виде ярко люминесцирующих изумрудно-зеленым цветом конгломератов в ядре и цитоплазме зараженных клеток. Что очень важно — результат может быть получен в течение 1,5 часов от момента получения материала.
Рекомендуемые сроки взятия материала: для гриппа — 1-4-й дни, для парагриппа — 1-6-й дни, для РС- и аденовирусной инфекции — 1-7-й дни. Чувствительность и специфичность метода при параллельном исследовании образцов культуральным методом с использованием реакции нейтрализации составляет 85-96%.
Хорошо зарекомендовали себя сыворотки, предлагаемые НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера(С-П), которые предлагаются как для диагностики отдельных возбудителей, так и для комплексной диагностики.
На рис.1 представлены наборы люминесцирующих сывороток к вирусам гриппа А,В, парагриппа 1-3 типов, РС и аденовирусу PathoDx Respiratory Virus Panel, производства DPC, США.

б) Иммунохроматографические экспресс-методы предназначены для быстрого качественного определения антигенов (нуклеопротеинов) вирусов гриппа типа А и В, в материале из дыхательных путей. Данные тесты могут определять различные подтипы вируса гриппа А, включая cвиной подтип Н1N1 и птичьи подтипы Н5N3, H5N1, H7N3, Н9N2. К тестам придается экстракционный буфер, в который помещается стерильный тампон с материалом от пациента. Готовая смесь наносится в лунки специальных картриджей, результат считывается через 10-15 минут.
Чувствительность и специфичность метода по сравнению с культуральным методом составила 76% и 92%, с референсным иммунохроматографическим методом — 99,1% и 98,4% соответственно.
В наличии имеются иммунохроматографические тесты Rapid Influenza A/B Test Panel, производства DFI, Южная Корея.
в) Метод полимеразной цепной реакции, предназначен для выявления нуклеиновых кислот возбудителя и является наиболее чувствительным и достоверным методом диагностики, позволяет очень быстро и точно установить диагноз. На сегодняшний день существуют наборы тестов для диагностики гриппа и ОРЗ как методом обычной ПЦР, так и для ПЦР в реальном времени.
Немецкая фирма-производитель Genekam Technology предлагает тест-системы, позволяющие определить нуклеиновые кислоты различных штаммов вируса гриппа А H1N1 (сезонных штаммов, штаммов свиного эпидемического гриппа, таких как California, Mexico, New York, Italy, Regensburg, Canada, Brandenburg, Texas, Hamburg, а также штаммов, циркулирующие в популяции свиней), гриппа А (H3N2) и многих других подтипов гриппа А, например, H5N1, H9 и др. Возможно также приобрести тесты, предназначенные для выявления какого-либо определенного подтипа гемагглютинина в комбинации с различными вариантами нейраминидазы, либо определенного подтипа нейраминидазы в комбинации с различными вариантами гемагглютинина.
Длительность исследования составляет от 4 до 6 часов.
г) Метод биочипов (microarray analysis)
Испанская компания Genomica предлагает к использованию качественно новую методику CLART (Clinical Array Technology) (рисунок 2). Методика заключается в возможности одномоментного определения нуклеиновых кислот нескольких возбудителей, могущих вызвать грипп или другие ОРЗ. При получении от пациента патогенсодержащего материала, из него экстрагируют нуклеиновые кислоты и проводят амплификацию с несколькими праймерами, в зависимости от тест-системы: в тест-системе FluAVir определяются грипп А (Н1N1 свиной и сезонный, H3N2), в тест-системе PneumoVir возможно провести детекцию 17 вирусов, вызывающих респираторные инфекции (гриппа А,B,С, парагриппа 1, 2, 3, 4a и 4b подтипов, РС вируса А и B, риновирусов, аденовирусов, ECHO-вирусов, коронавирусов, бокавирусов, метапневмовирусов А и В). Амплификация проводится в специальных пробирках (рис.3) с нанесенными на дно микрочипами, содержащими нуклеиновые кислоты 17 вирусов.

При получении специфического продукта и при его комплементарном соответствии нуклеиновой кислоте на чипе, происходит их взаимодействие и срабатывает прикрепленная метка, которую можно учесть в специальном ридере. Компьютерная программа расшифровывает результат и печатает его для пациента. Чувствительность и специфичность теста аналогична ПЦР, время проведения теста 8 часов.

Контактные телефоны: (0482) 37-56-96, 37-39-12, 34-39-47

Исследуемый материал: сыворотка крови больного Диагностический препарат: диагностикумы сухие содержащие антигены вирусов (см. таблицу)

Дополнительные ингредиенты реакции: физиологический раствор, 1% суспензия эритроцитов кур

1-я сыворотка (взята в острый период заболевания)

Диагностикумы	Разведения сыворотки	Контроли
1/10	1/20	1/40	1/80	1/160	1/320	сывор	диагностикума
Н1N1
Н2N2
Н3N2
B

2-я сыворотка (взята в период реконвалесценции)

Диагностикумы	Разведения сыворотки	Контроли
1/10	1/20	1/40	1/80	1/160	1/320	сыворотки	диагностикума
Н1N1
Н2N2
Н3N2
B

Результат: титр антител к вирусу гриппа В и H1N1 первой сыворотки 1/20, второй - к вирусу гриппа В увеличился до 1/80, к H1N1=1/20 и не изменился

Вывод: увеличение титра антител в 4 раза к свидетельствует о том , что обследуемый пациент переболел гриппом серотипа В

ДНК ГЕРПЕСВИРУСЫ (воздушно – капельный путь)

Таксономия и классификация: (смотри таблицу ниже)

Форма, размер вириона Крупные сложные вирусы сферической формы диаметром 100-200 нм, нуклеокапсид кубический Наличие суперкапсида имеется Тип НК двухнитевая линейная ДНК

Лабораторная диагностика герпесвирусных инфекций

Диагностика инфекций, вызываемых вирусом простого герпеса, вирусом цитомегалии

Исследуемый материал: содержимое пузырьков и герпетических везикул, соскобы роговой оболочки глаз, кровь, ликвор, носоглоточный смыв, моча , сперма, при летальном исходе - мозговая ткань.

Цитоскопия (окраска, характер изменений клеток при заражении ВПГ) Вирусы вызывают слияния пораженных клеток с образованием гигантских много ядерных клеток (синцитиев) с внутриядерными ацидофильными включениями Каудри (окраска по Романовскому-Гимзе)-

Вирусологический метод

Серодиагностика (реакции, особенность постановки) ИФА или РСК в парных сыворотках. Серодиагностика ввиду значительной инфицированности популяции не представляет существенной диагностической ценности.

Общая характеристика семейства Herpesviridae

Подсемейство	Вирусы, обозначения, серотип	Основные заболевания, вызываемые данным типом вируса
Alpha-herpesvirinae имеют короткий цикл репродукции. Вирусы размножаются в эпителиальных клетках, вызывая цитолитическое действие, в нейронах - персистирующую инфекцию.	ГВЧ-1 (Герпес вирусы человека 1) или вирус простого герпеса 1 типа - ВПГ1	1.Поражение слизистых оболочек 2.Поражения кожи 3.Герпетическая экзема 4.Поражения глаз 5. Поражения ЦНС 6.Висцеральный герпес
ГВЧ- 2,(Вирус простого герпеса 2 типа - ВПГ 2)	Генитальный герпес. Герпес новорожденных.
ГВЧ- 3 Вирус ветряной оспы и опоясывающего герпеса (лишая) –herpes zoster	Ветряная оспа. Опоясывающий лишай. Диссеминированная ветрянка
Beta-herpesvirinae Характерна латентная инфекция в клетках эпителия слюнных желез, миндалинах, почках, лимфоцитах. Вирусы оказывают цитомегалическое и лимфопролиферативное действие.	ГВЧ-5 Цитомегаловирус — ЦМВ	Врожденные аномалии. Ретинопатии, гепатиты, пневмонии при иммунодефиците (после пересадки органов и при СПИДе также колит и нейроинфекции .
ГВЧ-6	Внезапная экзантема ( у новорожденных и детей до 3-х лет)
ГВЧ-7	Синдром хронической усталости.
Gamma-herpesvirinae. Вызывают латентную инфекцию в лимфоидной ткани, лимфоцитах, эпителиальных клетках рта и глотки, слюнных желез. ВЭБ вызывает размножение В-лимфоцитов и персистирует в них.	ГВЧ-4 Вирус Эпштейна—Барра	1. Инфекционный мононуклеоз. 2. Лимфома Беркитта. 3. Назофарингеальная карцинома. 4. Лимфомы при иммунодифиците.
ГВЧ-8	Саркома Капоши, ассоциированная с ВИЧ- СПИД.

ДЕМОНСТРАЦИИ

Диагностические, профилактические и лечебные препараты: а)типоспецифические гриппозные и парагриппозные сыворотки; б)люминесцирующие сыворотки к вирусам гриппа А, В, С; в)люминесцирующие сыворотки к аденовирусам; г)гриппозный и парагриппозный диагностикумы; д) диагностикумы аденовирусные живые; е) живая гриппозная вакцина; ж) очищенная инактивированная вакцина для профилактики гриппа - ВАКСИГРИПП; з) живая, аттенуированная вакцина для профилактики эпидемического паротита - ИМОВАКС ОРЕЙОН; и) живая коревая вакцина; к) вакцина для профилактики кори, паротита и краснухи – ТРИМОВАКС.