Факторы патогенности вируса гриппа

Патогенные свойства вирусов складываются из следующих компонентов:

1.способности ви­руса проникать в организм и адсорбироваться на клеточных мембранах,

2.проникать в чувс­твительные к ним клетки;

3.способности этих клеток депротеинизировать вирусный геном и делать его функционально активным;

4.пермиссивности клеток или возможности этих клеток обеспечить транскрипцию и репликацию гене­тического материала, полноценную сборку вирионов;

5.возможности воспроизведения в клет­ках нескольких циклов репродукции вирусов, цитопатического действия вируса;

6.способнос­ти вирусов распространяться на новые клетки, расположенные рядом с пораженными; распро­странения вирусов за пределы первичного очага поражения по всему организму;

7.способности вызывать местные и общие патологические цроцессы, лежащие в основе клинических про­явлений вызываемых ими заболеваний;

8.спо­собности вйируса к переходу в новый организм и обеспечение его эстафетной передачи.

Все эти свойства необходимы, но в то же время сами по себе они могут быть недо­статочными для патогенного действия виру­са. Некоторые из этих свойств обусловлены клетками, в которых они размножаются, что получило название хозяйского ограничения клеткой.

Многие вирусы проникают в организм не­посредственно через слизистые оболочки, ко­торые служат входными воротами инфекции и защищены целым рядом неспецифических факторов резистентности, поэтому вирусы должны быть устойчивы к действию данных неблагоприятных факторов, что детермини­руется генами вирусов. Например, кишечные вирусы обычно устойчивы к кислым значени­ям рН, детергентному действию солей желч­ных кислот и к разрушающему их действию протеолитических ферментов.

Способность вирусов адсорбироваться на мембранах чувствительных к вирусам кле­ток является специфическим процессом для вирусов. Этот процесс протекает при учас­тии прикрепительных белков (антирецепторов) у вирусов и чувствительных к ним клеточ­ных рецепторов. Простые вирусы содержат прикрепительные белки в составе капсида, а сложноустроенные вирусы — в составе супер-капсида. Такие сложные вирусы, как вирус осповакцины и вирус простого герпеса, мо­гут иметь прикрепительные белки нескольких видов. Способность вирусов адаптироваться к новому хозяину обус­ловлена изменением первичной структуры в области участка прикрепительного белка, узнающего клеточный рецептор. Эти участки консервативны по своему строению и рас­положены в углублениях-каньонах, которые чрезвычайно малы по своим размерам, благо­даря чему недоступны для активных центров антител, реагирующих лишь с окружающими эти углубления гипервариабельными участка­ми, что позволяет вирусам избежать иммуно­логического пресса. Мутации в генах, коди­рующих антирецепторы, иногда приводят к полной потере способности вирусов взаимо­действовать с клеточными рецепторами.

В отличие от парамиксовирусов, у вирусов гриппа белком слияния является гемагглютинин, обуславливающий также адсорбцию вирусов к клетке. Однако функции прикреп­ления и слияния разделены между разными его участками большой (НА1) и малой (НА2) субъединицами соответственно. Важным фак­тором патогенности у вирусов гриппа является нейраминидаза, которая, удаляя остатки сиаловой кислоты с вирусного гемагглютинина, делает его доступным для протеолитического расщепления, необходимого для проявления инфекционности вирусов.

Очевидно, что сходный по функции с бел­ками слияния сложных вирусов белок сущес­твует в составе капсида простых вирусов, и один из поверхностно расположенных белков капсида вызывает дестабилизацию клеточной мембраны, что способствует проникновению модифицированного капсида из эндоцитарной вакуоли в цитоплазму.

Взаимодействие вируса и клетки — это всег­да взаимодействие вирусного и клеточного генома. В результате адсорбции вируса, его проникновения в клетку и раздевания проис­ходит освобождение генетического материала вирусов, который становится функционально активным, так как освобождается от внешних защитных оболочек, препятствующих его экспрессии. Степень активности генома обус­ловлена разной степенью депротеинизации у вирусов разных семейств. Депротеинизация

клетки приспособлен для трансляции только моноцистронных мРНК, так как он не рас­познает внутренних участков инициации в мРНК. В результате вирусы вынуждены син­тезировать либо отдельные мРНК для каждо­го гена, либо мРНК, включающие несколько генов и кодирующие большой полипротеин, который затем разрезается на индивидуаль­ные белки. Транскрипция вирусного генома строго регулируется на протяжении инфекци­онного процесса многочисленными вирусо-специфическими и клеточными факторами. Со степенью транскрипции нередко связан характер инфекции, ее тип (от продуктивной до абортивной инфекции).

Важную роль в регуляции процессов транс­крипции играют гены усилители и трансак­тиваторы. Они расположены в специальной области генома вирусов и содержат гены, усиливающие и активирующие экспрессию структурных генов. Усилители— это генети­ческие элементы, усиливающие транскрип­цию. Структура вирусных усилителей не от­личается от структуры клеточных. Факторы транскрипции, связывающиеся с промото­ром и усилителем, выполняют одну и ту же функцию и могут представлять собой как клеточные, так и вирусные белки. Усилители, контролирующие уровень экспрессии генов, обнаружены у паповавирусов, гепаднавиру-сов, герпесвирусов, ретровирусов и ряда дру­гих вирусов.

Белки трансактиваторыне обладают спе­цифичностью действия. Они связываются с регуляторными областями генов и одновре­менно активируют усиленную транскрипцию всех генов, в том числе и других вирусов, что сопровождается взрывной продукцией вирус­ных частиц, а также включают экспрессию бактериальных генов и клеточных онкогенов. Они действуют не только на стадии транс­крипции, но и на посттранскрипционном уровне. Взаимодействие вирусных и клеточ­ных трансактиваторов может приводить к пе­реходу латентной инфекции в литическую, а также к онкогенной трансформации зара­женных клеток. Как и усилители, трансакти­ваторы содержат две важные для их функции области. Одна из них определяет транспорт и связывание белка с мишенью, а другая пред-

Усилители и трансактиваторы являются не­обходимым атрибутом вирусов как генетичес­ких паразитов, конкурирующих с клеточным геномом. Неравные шансы небольших по раз­мерам вирусов на победу уравновешиваются возникшими в ходе эволюции генетическими элементами, позволяющими гораздо мень­шей по величине молекуле вирусного генома успешно завершить экспрессию своих генов и создать вирусное потомство. При этом вирусы широко используют механизмы клеточного происхождения, которые теперь обращены против клетки хозяина.

Важную роль в формировании патогенное -ти сложных вирусов, помимо посттрансляци­онной модификации вирусных белков,.играет синтез М-белка (матриксного белка), участву­ющего в сборке вирусной частицы. Включение М-белка в плазматическую мембрану являет­ся лимитирующим событием, определяющим возможность почкования вирусных частиц. Синтез М-белка жестко регулируется как ви-русоспецифическими, так и клеточными меха­низмами. Количество М-белка в зараженных клетках во многом определяет особенности репродукции вируса в данной клеточной сис­теме. Аберрантный синтез М-белка и его нару­шенный внутриклеточный транспорт служат одной из частых причин абортивных и персис-тентных вирусных инфекций. Экспрессия ге­на М значительно варьирует в клетках разного происхождения.

Патогенность вирусов обусловлена также их белковыми продуктами, блокирующими апоптоз клетки и изменяющими защитные реакции в макроорганизме, подавляя про­дукцию цитокинов, что способствует реп­родукции вирусов и их распространению по макроорганизму. Например, вирусы натуральной оспы образуют TNF-связывающий белок, белки, подавляющие созревание ан­тигенов МНС 1 класса и аналог рецепто­ров у-интерферона. Вирус иммунодефици­та человека, наоборот, усиливает продукцию цитокинов пораженными им клетками, что ведет к усилению воспалительной реакции и развитию нейротоксического действия. Как и другие микробы, вирусы, благодаря наличию внешней липидсодержащей оболочке, обра­зованной из мембраны клетки хозяина, ва­риабельности структуры поверхностных ан­тигенов, интеграции в геном клетки, гибели Т-лимфоцитов и т. д., обладают способностью уходить от воздействия иммунной системы макроорганизма.

Заражение восприимчивых клеток вовсе не означает, что в клетках неизбежно будет про­исходить размножение вируса, так как вос­приимчивость не идентична пермиссивнос-ти клеточной системы. Это одна из главных концепций в вирусологии. Многие стадии взаимодействия вируса с клеткой имеют не столько вирусоспецифическую, сколько опос­редованную клеткой природу (эндоцитоз, де-протеинизация, синтез вирусоспецифических белков и т.д.). Клетка принимает активное участие в формировании патогенных вирусов лишь в пермиссивной клеточной системе, со­держащей весь набор необходимых факторов, используемых вирусами на разных стадиях инфекционного процесса, а репликативный цикл завершается и приводит к образованию инфекционного потомства, что не будет про­исходить в полупермиссивных и непермис-сивных клеточных системах (хозяинная или хозяйская рестрикция).

Тканевой тропизм определяется не толь­ко наличием на клетках рецепторов, но и возможностью осуществления в клетках ви-русоспецифических синтезов. В зависимости от пермиссивности клеточной системы ин­фекция восприимчивых клеток может быть продуктивной, ограниченной и абортивной.Продуктивная инфекция происходит в пер-миссивных клетках и характеризуется полным циклом репродукции, который заканчивается формированием инфекционного потомства. Пермиссивность клеточной системы обуслав­ливает и многократную цикличность размно­жения в ней вирусов.

Абортивной называется инфекция, которая не завершается образованием инфекционных вирусных частиц или при которой они обра­зуются в гораздо меньшем количестве, чем при продуктивной инфекции. Абортивная инфекция может наступить в силу двух об­стоятельств. Во-первых, несмотря на вос­приимчивость к заражению, клетки могут оказаться непермиссивными, так как в них могут экспрессироватся не все, а лишь не­которые гены вирусов. В основе механизмов генетически обусловленной непермиссивнос-ти клеток лежит либо отсутствие клеточных факторов, необходимых для репродукции, ли­бо наличие факторов, нарушающих процессы репродукции вирусов. Во-вторых, абортив­ная инфекция может быть результатом зара­жения как пермиссивных, так и непермиссив-ных клеток дефектными вирусами,у которых отсутствует полный набор вирусных генов, необходимых для репродукции. Дефектные вирусы представляют собой крайнюю форму паразитизма, так как они используют генные продукты, образованные другими, часто не родственными им, не гомологичными ви­русами. Примером таких вирусов являются аденоассоциированные вирусы и вирус гепа­тита D, помощником которого служит вирус гепатита В. Абортивную инфекцию вызывают также дефектные интерферирующие вирусные

частицы,которые тоже лишены части генети­ческого материала. В отличие от дефектных вирусов, в ходе репликации они интерфери­руют с гомологичными инфекционными ви­русами, в связи с чем их назвали дефектными интерферирующими вирусными частицами (ДИ-частицами). Образование ДИ-частиц иг­рает важную роль в ослаблении летального действия полноценных вирусов в силу ин­терференции и предрасполагает некоторые клетки к формированию в них длительной персистентной инфекции.

Наконец, клетки могут быть только вре­менно пермиссивными, вследствие чего ви­рус либо сохраняется в клетках до момента, когда они становятся пермиссивными, либо в любой данный момент вирусное потомство образуется только в немногих клетках попу­ляции. Этот вид инфекции одними иссле­дователями был определен как рестриктив-ный (restrictive), другими — как ограниченный (restringent). В ряде случаев цитолитические вирусы могут только лишь изменять функ­циональную активность клеток, не вызывая их морфологических повреждений (изменять синтез гормонов, холестерина и т. д.), или вы­зывать опухолевую трансформацию клеток. Дополнительным следствием как ограничен­ной, так и абортивной инфекции является сохранение в клетке вирусного генома.

Если геном вируса реплицируется незави­симо от клеточного генома, такая инфекция называется автономной. Если вирусный ге­ном интегрирует в состав генома клетки и реплицируется вместе с ним, то такая инфек­ция называется интегративной (вирогения). Интегрировать может как полный геном, так и часть его. Например, при гепатите В воз­можна интеграция полного генома, при аде­новирусной или герпесвирусной инфекциях обычно интегрирует часть генома, при зара­жении онковирусами может интегрировать как полный геном, так и часть его. Вирусные последовательности, входящие в состав гено­ма клетки, называются провирусом или про-вирусной ДНК. Интеграционный тип инфек­ционного процесса возможен при заражении адено-, папиллома-, герпесвирусами, вирусом гепатита В и обязателен для ретровирусов, имеющих фермент — обратную транскриптазу. Возникшая интеграция может явиться причиной ряда хронических и автоиммунных заболеваний.

По исходу взаимодействия с клеткойин­фекция может быть

Грипп – острое инфекционное респираторное заболевание дыхательных путей, характеризующееся поражением слизистых оболочек верхних дыхательных путей, лихорадкой, симптомами общей интоксикации, нарушением деятельности сердечно-сосудистой и нервной систем..

В промежутках между пандемиями возникают локальные эпидемии, повторяющиеся каждый год или два, обычно зимой.

Ежегодно острыми заболеваниями дыхательных путей болеет 10 до 25% населения земного шара, а в годы крупных эпидемий и пандемий до 50%. Отсюда становится очевидным огромный экономический ущерб, причиняемый респираторными вирусными инфекциями и, прежде всего, гриппом.

Грипп. Токсономия, классификация.

РНК – содержащие вирусы относятся к семейству Orthomyxoviridae. Семейство включает два рода: род Influenzavirus объединяет вирусы гриппа типов А и В, род Influenza C представлен вирусом гриппа типа С.

Грипп. Этиология.

Возбудитель гриппа – вирус, впервые был выделен у человека в 1933 г. (тип А); вирус гриппа В – в 1940; С – в 1949 г. Вирус гриппа относится к семейству Ortomyxoviridae, включающее 3 вида (типа):

вирус гриппа А
вирус гриппа В
вирус гриппа С

Последовательность открытия вирусов А В и С совпадает с положением этих вирусов в ряду их вирулентности для человека и животных, степени и частоты их антигенных применений, их эпидемиологического значения.

Вирусы гриппа А отличаются от вирусов гриппа В и С тем, что могут циркулировать среди животных, а также вызывать пандемии.

В настоящее время имеется мало информации о свойствах вирусов гриппа С по сравнению с вирусами гриппа А и В. В частности, отсутствуют сведения о наличии у вируса гриппа С нейраминидазы. Кроме этого, вирусы гриппа С отличаются от других типов вируса гриппа тем, что репликация их наиболее интенсивно происходит при температуре ниже средней температуры человеческого тела – при 32°C.

Грипп. Морфология и химический состав.

Вирионы вируса гриппа представляют собой либо сферические частицы диаметром 80-120 нм, либо филаментозные образования (палочковидная и нитевидная форма) того же диаметра с различной длиной (до 4 мкм).

Химический состав вирионов гриппа не может быть определен абсолютно точно, т.к. вирусная популяция гетерогенна. Кроме этого, состав вирусной частицы в некоторой степени определяется клеткой – хозяином. Однако приблизительный химический состав был определен: 0,8 – 1,1% РНК, 10-15% белка, 20-24% липидов, 5-8% углеводов.

Поверхность вириона покрыта выступами или шипами двух типов, представляющих собой гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA).

Вирусная мембрана состоит из двойного липидного слоя, на внутренней стороне которого находится слой М-белка (определяет форму вирусной частицы).

Внутри вирусной оболочки содержится рибонуклеопротеид (фрагментированный однонитчатый РНК-геном, состоит из фрагментов):

1. НА – гликопротеид:
– вызывает гемагглютинацию;
– обеспечивает адсорбцию вируса на клетках.

2. NА – фермент:
– участвует в удалении нейраминовой кислоты муцинов, которые являются ингибиторами;
– играет определенную роль при освобождении вновь синтезируемого вируса из клетки;
– предотвращает агрегацию образовавшихся вирусных частиц.

Антигенные свойства HА и NA варьируют, причем на основании характеристик этих двух антигенов вирусы гриппа разделяются на подтипы и варианты.

Внутренние компоненты вириона (рибонуклеопротеид, мембранный [матричный] белок) – антигенно стабильны и типоспецифичны. С рибонуклеопротеидом связана РНК – зависимая РНК-полимераза.

Грипп. Антигенная изменчивость.

Грипп называют заболеванием с неизменяющейся симптоматикой, которое вызывается изменяющимся вирусом. В самом деле, симптоматика типичного гриппа была сходной за последние 400 лет. Но лишь после 1947 года стало ясно, что несмотря на одинаковые внешние проявления грипп вызывается вирусом, уникальным по своей антигенной изменчивости. В связи с такой изменчивостью вируса грипп продолжает оставаться одним из основных эпидемических заболеваний человека.

Изменчивость поверхностных антигенов связана с фрагментарным строением РНК вируса. У вирусов гриппа обнаружено два типа антигенной изменчивости: антигенный дрейф и антигенный скачок (шифт) или, как его еще называют, значительный антигенный сдвиг.

Дрейф – постоянно осуществляющиеся незначительные изменения Н- и N-антигенов в результате точечных мутаций, приводящие к возникновению новых антигенных вариантов вируса. Шифт (скачок) – редко встречающиеся значительные изменения Н- и N-антигенов в результате рекомбинаций, приводящие к появлению новых подтипов вируса.

Грипп. Антигенная структура.

Вирусы гриппа имеют внутренние и поверхностные антигены. Внутренние сердцевидные антигены являются типоспецифическими, на основании чего вирусы гриппа подразделяются на типы А, В и СЧ, поверхностные представлены гемагглютинином (Н) и нейраминидазой (N). Гемаглютинин – основной специфический антиген, вызывающий образование вируснейтрализующих антител и обеспечивающий адсорбцию вируса на клетках, в том числе эритроцитах человека и животных, в результате чего происходит их склеивание. Нейраминидаза вызывает образование антител, частично нейтрализующих вирусы; являясь ферментом, участвует в освобождении вирусов от клетки.

Грипп. Устойчивость во внешней среде.

Вирусы гриппа термолабильны. При 56-60С теряют инфекционность в течении нескольких минут. Хорошо сохраняются при – 10С. Чувствительны к УФ-облучению, к эфиру, дезинфицирующим средствам.

Грипп. Культивирование.

Вирус гриппа легко культивируется в амниотической полости куриных эмбрионов (при выделении от больных). В последующих пассажах вирус обычно культивируют в аллантоисной полости. Вирус накапливается в максимальном количестве через 48-72 часа. Для культивирования также используют культуры клеток, иногда лабораторных животных.

Грипп. Патогенность.

Из лабораторных животных к вирусу гриппа воспроиимчивы хорьки, белые и домовые мыши, хомяки, из домашних наиболее чувствительны свиньи и лошади.

В 1976 г. в США (Форт – Дикс) наблюдалась вспышка гриппа, вызванная свиным вирусом. Вирус инфицировал в общей сложности примерно 500 военнослужащих – новобранцев, не имевших антител к данному вирусу. Клинически выраженное заболевание имело место у 12 человек, один умер. Среди гражданского населения вирус не получил распространения, т.к. значительная часть людей старше 40 лет имела антитела к этому вирусу.

Грипп. Патогенез и клиника.

Заражение происходит воздушно-капельным путем. Вирус гриппа оседает на слизистой оболочке дыхательных путей или непосредственно в альвеолах. Связывание вируса слизью защищает клетки эпителия от инфекции. Однако вирус может нарушить эту связь с помощью нейраминидазы. Локально экскретируемые специфические IgA и неспецифические ингибиторы осуществляют свое действие до прикрепления вируса к клетке. Если ни один из этих механизмов не помешает вирусу, он прикрепляется к поверхности клетки дыхательного эпителия, и начинается внутриклеточный цикл репликации. Следует отметить, что вирусы обладают выраженными токсическими свойствами.

При инфекции, вызываемой вирусом криппа А, инкубационный период как правило равен 2 дням, но может колебаться от 1 до 4 дней. В большинстве случаев симптомы появляются внезапно, и больные могут точно указать час начала заболевания. Вначале преобладают общие симптомы: жар, озноб, головная боль, боли в мышцах, недомогание. Отсутствие аппетита. Почти всегда в начале заболевания наблюдаются и респираторные проявления, особенно сухой кашель и насморк. Заложенность носа, охриплость, боль в горле приливаются в ходе заболевания. Могут быть и глазные симптомы – светобоязнь. Слезотечение, жжение и боль при движениях глаз.

Лихорадка (38-40°С) обычно продолжается в течение 3 дней, но может быть от одного до 5 дней и более. По мере снижения температуры исчезают и общие жалобы. Кашель, слабость, плохое самочувствие могут сохраняться в течение 1 – 2 недель после исчезновения других проявлений болезни.

При гриппе вирус может проникать в кровь (виремия), но явление это кратковременное, встречается, по-видимому, не часто. Эта клиническая картина остается постоянной при гриппе А, несмотря на то, что поверхностные антигены вириона значительно изменяются.

Клиническая картина заболевания вызываемого вирусом гриппа В, характеризуется трехдневной лихорадкой и жалобами преимущественно общего характера. Картина очень сходна с той, которая наблюдается при гриппе А.

В противоположность этому, инфекция, вызванная вирусом гриппа С, протекает у людей виде заболевания верхних дыхательных путей без лихорадки встречается не часто.

Гриппозная инфекция чаще всего встречается у детей. Симптомы, наблюдаемые у детей, сходны с клиническими проявлениями гриппа у взрослых, но у детей чаще наблюдается тошнота и рвота. В целом, у детей заболевание протекает мягче. Грипп снижает защитные силы организма, обостряет латентные и хронические заболевания. Может развиться гриппозная пневмония, особенно у лиц, страдающих сопутствующими заболеваниями. Гриппозная пневмония может быть первичной или вторичной, бактериальной или смешанной этиологии. Осложнения чаще встречаются в раннем или пожилом возрасте (со стороны ЦНС, ССС и др. систем).

Грипп. Иммунитет.

Долгое время считали, что после перенесенного гриппа формируется строго типовой иммунитет, который сохраняется в течение 1-3 лет. Сейчас эти взгляды пересмотрены. Во время эпидемии 1977-78 гг., вызванной вирусом гриппа А (H1N1), болело преимущественно молодое население (люди, родившиеся после 1957 года). Таким образом, согласно современным представлениям, иммунитет после гриппа длительный, вероятно пожизненный, вариантоспецифический. Поэтому при появлении новых вариантов вируса он не обеспечивает защиту.

В иммунитете при гриппе важную роль играют антитела, однако они должны находиться в воротах инфекции. Люди, у которых в носовом секрете имеется IgAs в высокой концентрации, хотя и инфицируются, но не заболевают. Напротив, те, у кого низкий уровень IgAs перед заражением, легко заражаются и заболевают.

Во время эпидемии болеет не все население. Среди детей около 25%, среди взрослых 10-23%, однако инфицируется значительно больше людей (примерно 85% всего населения). Часть людей (2-3%) не болеют вследствии генетически обусловленной невосприимчивости, большая часть, по-видимому, за счет антител к неизмененным антигенам или детерминантом нового вируса, общим с предыдущим. Если появляется совершенно новый вирус, значительно отличающийся от предыдущего, как это было в 1956 г., болеет большая часть населения.

Тяжесть заболевания находится в обратном соотношении с уровнем коллективного иммунитета. Эти данные явились основанием для разработки противогриппозных вакцин.

Грипп. Эпидемиология.

Единственный источник гриппозной инфекции – больной человек с клинически выраженной или бессимптомной формой. Основную роль играют лица со стертой, легко протекающей формой гриппа, переносящие заболевание на ногах.

Основной путь передачи – воздушно-капельный (высокая концентрация вируса в верхних дыхательных путях, рассеивание его при кашле, чихании, разговоре). Быстрому распространению гриппа способствует короткий инкубационный период, аэрогенный механизм передачи, высокая восприимчивость населения.

Грипп возникает волнообразно с пиком заболевания в зимний период. Эпидемии гриппа А повторяются через 2-3 года. Вирус гриппа В не распространяется у людей также быстро, как грипп типа А. Его межэпидемический период колеблется от 3 до 6 лет. Основная причина возникновения эпидемий – накопление достаточно большого числа восприимчивых лиц, у которых вирус сохраняется в ходе субклинических или легко протекающих инфекций на протяжении года. Эпидемия может начаться, когда вирус после мутации получает возможность распространения, поскольку у населения имеется низкий уровень антител к новым поверхностным антигенам вируса.

Надзор за вспышками гриппа осуществляется интенсивнее, чем при любой другой инфекции. Цель – выявить как можно раньше появление новых вариантов, чтобы успеть приготовить соответствующую вакцину до начала эпидемии. Надзор распространяется так же на популяции животных, особенно птиц, свиней, лошадей.

Грипп. Лабораторная диагностика.

Когда грипп появляется в форме эпидемии, клинические данные весьма отчетливы, что позволяет в большинстве случаев диагностировать болезнь. Спорадические заболевания по клиническим признакам диагностировать не удается. Могут существовать легкие и бессимптомные инфекции. В связи с этим используют вирусологический и серологический методы диагностики.

При выделении вируса исследуют: мазки-отпечатки и смывы со слизистой оболочки носовой полости, отделяемое носоглотки, при летальных исходах – кусочки легочной ткани или мозга. Полученным материалом заражают 9-10 дневные куриные эмбрионы. Заражение обычно производят в амниотическую полость. Через 48-72 часа эмбрионы вскрывают, амниотическую жидкость исследуют с помощью реакции гемагглютинации (РГА) с целью обнаружения вируса, поскольку вирус гриппа не вызывает видимых изменений в тканях куриных эмбрионов. Если вирус не обнаруживается, проводят не менее 3-х “слепых” пассажей (амниотической жидкостью из первой партии эмбрионов заражают новую партию эмбрионов и так не менее 3-х раз). Выделенный вирус идентифицируют по антигенной структуре с помощью диагностических иммунных сывороток.

С целью серодиагностики гриппа исследуют парные сыворотки крови (первую берут не позднее 5-го дня болезни, вторую – через 10-14 дней после первой). Обе сыворотки испытывают одновременно с помощью РТГА, РСК, РНГА, РН в культуре клеток, реакции преципитации в геле, ИФА.

Из ускоренных методов диагностики наиболее широко применяется люминесцентно-серологический. Экспресс-диагностика основана на выявлении вирусного антигена с помощью РИФ; разработана тест-система для ИФА.

Грипп. Химиотерапия и химиопрофилактика.

В настоящее время для профилактики и лечения гриппа используется ремантадин. Эффективен для профилактики лечения заболеваний, вызванных вирусом гриппа А. Среди контактных ремантадин снижает заболеваемость в 5-7 раз. Назначается этот препарат с 16 летнего возраста. Ремантадин блокирует процесс проникновения вируса гриппа А в клетки. Ремантадин применяется и для лечения гриппа. Он оказывает выраженный терапевтический эффект, если начинает применяться в первые часы заболевания. Ремантадин почти полностью предотвращает осложнения, сокращает продолжительность нетрудоспособности в каждом случае примерно на два дня. Опоздание с началом лечения резко снижает эффективность. После первого дня болезни начинать лечение ремантадином уже бесполезно.

При превышении дозы ремантадин может оказывать побочное действие на ЦНС. Такое превышение весьма вероятно, когда речь идет об использовании общедоступного препарата, принимаемого при обычных простудных заболеваниях.

Кроме того, с профилактической и лечебной целью применяется оксолиновая мазь, лейкоцитарный интерферон; для защиты детей (до 2-х летнего возраста) можно использовать противогриппозный иммуноглобули (готовят из сыворотки крови доноров, иммунизированных гриппозной вакциной.

Грипп. Специфическая профилактика.

В разных странах и в разное время было предложено немало вакцин для профилактики гриппа. Это отражает несовершенство противогриппозных вакцин.

Расчеты показывают, что при 70% охвате населения прививками эпидемия гриппа не могла бы разразиться, если бы каждая вакцина снижала заболеваемость среди привитых в три раза. Существующие типы вакцин пока не обеспечивают такой защиты – лучшие из них снижают заболеваемость в 2-2,5 раза. Причины недостаточно высокой эффективности хорошо известны, но все еще трудноустранимы. Главная из них – постоянная быстрая изменчивость вируса гриппа. В нашей стране применяются два типа живых вакцин – интраназальная и пероральная. Пероральная вакцина предназначена для иммунизации детей от 1 до 14 лет (трехкратно с интервалом в 10-15 дней). Применяются два типа инактивированных вакцин – вирионная (из цельных вирусных частиц, вирионов) и расщепленная (из очищенных вирусных белков).

Цельновирионные вакцины содержат, помимо гемагглютинина и нейраминидазы, также липиды, обусловливающие пирогенные, токсические реактогенные реакции при введении вакцин.

Вакцина из расщепленных вирионов содержит осколки разрушенных вирусных частиц со всеми антигенами, включая балластные примеси. Липиды в основном удалены, поэтому сплитвакцина (т.е. из расщепленных вирионов) менее реактогенна.

Наиболее перспективна субъединичная вакцина наивысшей степени очистки. В отличии от сплитвакцин субъединичная вакцина содержит только два безусловно необходимых для иммунизации антигена – гемагглютинин и нейраминидазу. Основным преимуществом субъединичной вакцины является возможность в 3-5 раз увеличить количество специфических антигенов в минимальном объеме препарата (0,25 – 0,5 мл ), что позволяет создать более прочный иммунитет против гриппа.