Гепатит в это вирус днк или рнк

Из-за использования специфических методов диагностики часть людей ошибочно считает гепатит С ДНК-содержащим вирусом. На самом деле в состав возбудителя входит рибонуклеиновая кислота (РНК). Она наделена специфическими особенностями, затрудняющими лечение болезни. ДНК содержится в составе вирусов гепатитов B и D. В то же время A, E, G, как и С-тип, содержат только РНК.

ДНК или РНК у гепатита С

Вирус гепатита С содержит рибонуклеиновую кислоту (РНК, RNA). Именно ее присутствие в крови больного провоцирует выработку антител. Помимо HCV-RNA, антигенный комплекс вируса содержит пять неструктурных белков HCV-NS. Три из них обнаруживают при взятии печеночных тканей на биопсию при хроническом течении болезни (NS3, NS4 и NS5).

Действие современных противовирусных препаратов-ингибиторов направлено на разрушение одного из структурных белков (чаще всего HCV-NS5). После его уничтожения вирус не может размножаться.

РНК гепатита С очень изменчива, что проявляется частыми мутациями вируса. Из-за них невозможна разработка вакцины от гепатита С, а также насчитывается более 11 его генотипов.

У каких вирусов гепатита есть ДНК

К ДНК-содержащим вирусам относятся возбудители гепатитов B и D. Второй тип (дельта-вирус) никогда не выявляется в одиночку. Заражение им происходит только у носителей Б-инфекции.

Гепатит В не подвержен мутациям, поэтому от него разработана вакцина. Первую вакцинацию человек проходит в течение года после рождения (три прививки по схеме 0-6-12) – она дает иммунитет к гепатиту Б до 20-25 лет. В дальнейшем необходима ревакцинация.

Как выявляют вирусные нуклеиновые кислоты

При подозрении на острый и хронический гепатит человека направляют на два анализа – ПЦР и ИФА, выявляющий антитела. Первый анализ – метод полимеразной цепной реакции – направлен на обнаружение в крови частичек вирусной РНК. По этому методу определяют:

1. Наличие или отсутствие гепатита. Для точного результата кровь нужно сдавать дважды с интервалом в 2 недели. Современное оборудование выявляет вирус в крови при условии, что его уровень превышает 10-50 МЕ/мл (международных единиц в 1 миллилитре крови).
2. Степень активности гепатита – так называемая вирусная нагрузка. При низкой активности болезни количество вирусных частиц меньше 180 тыс. МЕ/мл. У пациентов с высокой нагрузкой эта цифра может достигать 25 млн. МЕ/мл.
3. Генотип. От разновидности вируса зависит специфика лечения. Например, 3 генотип болезни устойчив к стандартной противовирусной терапии интерфероном. Для его лечения требуются ингибиторы прямого действия – Даклатасвир, Софосбувир, Ледипасвир.

Также с помощью полимеразной цепной реакции выявляются неструктурные вирусные белки HCV-NS. Только для этого анализа потребуется не кровь, а несколько клеток печени, взятые с помощью биопсии.

Перед сдачей крови на полимеразно-цепную реакцию человек должен за 3 дня до назначенного анализа отказаться от алкоголя, не употреблять жирную и жареную пищу, избегать физического и нервного напряжения. Рекомендуется исключить употребление любых лекарственных препаратов. Если их отмена невозможна, обязательно уведомить врача об этих препаратах. Женщинам лучше не сдавать кровь для анализа во время менструации, поскольку изменившийся гормональный баланс может повлиять на уровень вирусной нагрузки.

Гепатит С провоцируется специфическим РНК-содержащим вирусом, который можно обнаружить при лабораторной диагностике. Определить болезнь иными способами нельзя из-за скрытого протекания, поэтому профилактические осмотры – единственная возможная мера выявления HCV на ранних стадиях. При несвоевременном лечении процесс становится хроническим, избавиться от гепатита после хронизации невозможно.

Навигация по статье:

Что такое ДНК вируса гепатита B, качественное определение?

ВГВ является сложноорганизованным ДНК-содержащим вирусом и относится к семейству Hepadnaviridae роду Orthohepadnavirus.

Гепатит В - антропонозная инфекция, преимущественно с парентеральным механизмом заражения, которая может протекать в форме вирусного носительства, острой и хронической форм и характеризуется поражением печени с возможным развитием острой печеночной недостаточности, хронического гепатита, цирроза печени и первичного рака печени (гепатоцеллюлярной карциномы).

Инфицирование организма человека происходит при непосредственном проникновении HBV в кровь (при каких либо инвазивных вмешательствах и при переливании крови и ее препаратов), или через слизистые и кожные покровы во время родов, при половых и тесных бытовых контактах. Попав в печень, HBV проникает в гепатоцит, где начинает интенсивно размножаться.

Серологическая диагностика и прогноз HBV-инфекции основан на выявлении антигенов вируса и антител к нему. Но, как оказалось, в популяции вируса гепатита В встречается достаточно мутантных штаммов (HBеAg-негативных), которые не улавливаются обычными серологическими тестами. Поэтому метод ПЦР для диагностики HBV-инфекции является крайне важным.

Почему важно делать ДНК вируса гепатита B, качественного определения?

ПЦР позволяет определять в исследуемом материале ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Качественное определение вируса гепатита В в материале (цельная кровь, сыворотка, плазма, биоптаты печени) подтверждает наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает патогенез заболевания. Количественный метод определения содержания ДНК вируса в плазме дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. ПЦР при ВГВ безусловно необходим для суждения о вирусной репликации. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBеAg. Выявление ДНК HBV в крови имеет большое значение для прогноза острого ВГВ. Установлено, что персистирование ДНК HBV более 8 недель после дебюта заболевания указывает на хронизацию процесса, тогда как элиминация ДНК вируса в течение первых 2 недель болезни коррелирует с полным выздоровлением.

Качественное определение ДНК вируса гепатита В методом ПЦР.

Аналитические показатели: выявление ДНК вируса гепатита В (hepatitis В virus) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в плазме крови.

Определяемый фрагмент-уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В. Специфичность определения - 98%. Чувствительность определения - не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл прошедшей обработку (выделение ДНК) пробы.

Таким образом, определение ДНК HBV в материале является важнейшим анализом, который в совокупности с другими лабораторными исследованиями позволяет диагностировать инфекцию, определять характер инфекционного процесса, выступать в качестве критерия в проведении терапии и оценки ее эффективности.

При каких заболеваниях делается ДНК вируса гепатита B, качественное определение?

Показания к назначению анализа:

Профилактические скрининговые исследования (ДНК вируса гепатита В - самый ранний маркер при острой инфекции).

Исследования при HBsAg-негативной инфекции.

Обследования контактных лиц.

Диагностика гепатитов смешанной этиологии - выявление ведущего вируса.

Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.

Контроль проводимой терапии.

Слабость, недомогание, быстрая утомляемость, снижение аппетита, тошнота, тяжесть в правом подреберье, увеличение печени, а также боли в мышцах, суставах.

Желтуха, кожный зуд, увеличение селезенки, сосудистые "паучки", в некоторых случаях покраснение ладоней и стоп.

Для проверки/улучшения работоспособности каких органов нужно делать ДНК вируса гепатита B, качественного определения?

Как подготовиться к сдаче ДНК вируса гепатита B, качественного определения?

Взятие крови желательно производить натощак.

Материал для сдачи ДНК вируса гепатита B, качественного определения

Венозная кровь (с ЭДТА).

Хранение материала - не больше 24 часов при +4°С.

Открытие вирусов

В 1892 году Д.И. Ивановский (см. Рис. 1), изучая мозаичную болезнь табака (см. Рис. 2), установил, что причиной заболевания является некое инфекционное начало, содержащееся в листьях больных растений, которое проходит через фильтр, задерживающий обыкновенные бактерии. Если профильтрованный сок внести в листья здоровых растений, то они также заболевают мозаичной болезнью.

Рис. 1. Д.И. Ивановский

Рис. 2. Мозаичная болезнь табака

В 1898 году независимо от Ивановского аналогичные результаты получил голландский микробиолог М. Бейеринк. Однако он предположил, что мозаичную болезнь табака вызывают не мельчайшие бактерии, а некое жидкое заразное начало, которое он назвал фильтрующим вирусом.

Размеры вирусов определяются нанометрами (20-200 нм), поэтому их изучение началось после открытия электронного микроскопа. В настоящее время описаны вирусы практически всех групп живых организмов.

Строение вирусов

Вирусы – неклеточные формы жизни. Они состоят (см. Рис. 3) из фрагмента генетического материала (РНК или ДНК), составляющего сердцевину вируса, и защитной оболочки, которая называется капсид. У некоторых вирусов (герпес, грипп) есть дополнительная липопротеидная оболочка – суперкапсид, которая возникает из плазматической мембраны клетки-хозяина.

Рис. 3. Строение вируса

Вирусы не способны к самостоятельной жизнедеятельности. Они могут проявлять свойства живого, только попав в клетку-хозяина. Они используют потенциал и энергию этой клетки для создания своих новых вирусных частиц, следовательно, вирусы являются внутриклеточными паразитами.

Размножение вирусов

Обычно вирус связывается с поверхностью клетки-хозяина и проникает внутрь. Каждый вирус ищет своего хозяина, то есть клетки строго определенного вида. Например, вирус – возбудитель гепатита (желтуха) проникает и размножается только в клетках печени, а вирус эпидемического паротита (свинка) – только в клетках околоушных слюнных желез человека.

Проникнув внутрь клетки-хозяина, вирусная ДНК или РНК начинает взаимодействовать с ее генетическим аппаратом таким образом, что клетка начинает синтезировать белки, свойственные вирусу (см. Рис. 4).

Рис. 4. Схема репродукции вируса

При заражении ретровирусом (например, вирус иммунодефицита человека (ВИЧ)), у которого в качестве генетического материала используется молекула РНК, наблюдается другая картина. При попадании ретровируса в клетку-хозяина происходит обратная транскрипция. То есть на основе вирусной РНК синтезируется вирусная ДНК, которая встраивается в ДНК человека. Такой тип взаимодействия вируса с клеткой называется интегративным, а встроенная в состав хромосомы клетки ДНК вируса называется провирусом. Далее провирус реплицируется (удваивается) в составе хромосомы и переходит в геном дочерних клеток. Однако под влиянием некоторых физических и химических факторов провирус может выщепляться из хромосомы клетки и переходить к продуктивному типу взаимодействия, то есть синтезировать новые вирусные частицы.

При заражении ВИЧ человек чувствует себя здоровым, пока вирусный генетический материал встроен в хромосому человека. Однако при выщеплении этого вирусного генетического материала из клетки она начинает образовывать новые вирусные частицы, вследствие чего развивается смертельное заболевание – синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Вирусы являются возбудителями большого количества заболеваний человека: корь, грипп, оспа, краснуха, энцефалит, свинка, гепатиты, СПИД. Известен также целый ряд заболеваний растений, вызываемых вирусами, например мозаичная болезнь табака, томатов, огурцов или скручивание листьев картофеля. Всего описано около 500 видов вирусов, поражающих клетки позвоночных животных, и около 300 вирусов растений. Некоторые вирусы участвуют в злокачественном перерождении клеток и тем самым провоцируют онкологические заболевания.

ДНК- и РНК-содержащие вирусы

В зависимости от содержащегося генетического материала вирусы подразделяются на ДНК-содержащие и РНК-содержащие.

Одноцепочные РНК-содержащие вирусы подразделяются на:

1. Плюс-нитевые (положительные). Плюс-нить РНК этих вирусов вы­полняет наследственную (геномную) функцию и функцию информационной РНК (иРНК).

2. Минус-нитевые (отрицательные). Минус-нить РНК этих вирусов выпол­няет только наследственную функцию.

К РНК-содержащим вирусам относятся более
вирусов, вызывающих респираторные заболевания, а также вирус гриппа, кори, краснухи, свинки, ВИЧ. Также существует специфическая группа вирусов – арбовирусы, которые переносятся членистоногими.

Двухцепочные ДНК-содержащие вирусы вызывают такие заболевания, как папиллома человека или герпес, гепатит В (гепатит А и гепатит С вызывается РНК-содержащими вирусами).

ДНК-содержащие вирусы поражают также растения. Они вызывают, например, золотую мозаику бобов или полосатость у кукурузы.

Вирус гепатита С

По своему строению вирус гепатита С – это РНК-содержащий вирус, имеющий сферическую форму, сложно устроенный (см. Рис. 5).

В качестве генетического материала такой вирус содержит линейную однонитчатую молекулу РНК.

Рис. 5. Гепатит С

Вопреки бытующим предрассудкам, подцепить вирус гепатита C невозможно через социальные контакты (поцелуи, объятия), через продукты или воду, через грудное молоко. Вы ничем не рискнете, если разделите с носителем вируса трапезу или напитки. Заразиться гепатитом C можно при контакте с кровью инфицированного человека либо половым путем.

В настоящее время для лечения гепатита С используют два препарата: Интерферон альфа и Рибавирин.

Бактериофаги

Рис. 6. Бактериофаг (Источник)

Особую группу вирусов составляют бактериофаги (или просто фаги), которые заражают бактериальные клетки (см. Рис. 6). Фаг укрепляется на поверхности бактерии при помощи специальных ножек и вводит в ее цитоплазму полый стержень, через который проталкивает внутрь клетки свою ДНК или РНК. Таким образом, генетический материал фага попадает внутрь бактериальной клетки, а капсид остается снаружи. В цитоплазме начинается репликация генетического материала фага, синтез его белков, построение капсида и сборка новых фагов. Уже через 10 мин после заражения в бактерии формируются новые фаги, а через полчаса бактериальная клетка разрушается, и из нее выходят около 200 заново сформированных вирусов – фагов, способных заражать другие бактериальные клетки (см. Рис. 7). Некоторые фаги используются человеком для борьбы с болезнетворными бактериями, вызывающими холеру, дизентерию, брюшной тиф.

Рис. 7. Схема размножения бактериофага (Источник)

Список литературы

1. Каменский А.А., Криксунов Е.А., Пасечник В.В. Общая биология 10-11 класс Дрофа, 2005.
2. Биология. 10 класс. Общая биология. Базовый уровень / П.В. Ижевский, О.А. Корнилова, Т.Е. Лощилина и др. – 2-е изд., переработанное. – Вентана-Граф, 2010. – 224 стр.
3. Беляев Д.К. Биология 10-11 класс. Общая биология. Базовый уровень. – 11-е изд., стереотип. – М.: Просвещение, 2012. – 304 с.
4. Агафонова И.Б., Захарова Е.Т., Сивоглазов В.И. Биология 10-11 класс. Общая биология. Базовый уровень. – 6-е изд., доп. – Дрофа, 2010. – 384 с.

Дополнительные рекомендованные ссылки на ресурсы сети Интернет

Домашнее задание

Если вы нашли ошибку или неработающую ссылку, пожалуйста, сообщите нам – сделайте свой вклад в развитие проекта.

Вирусный гепатит B встречается не очень часто, так как существует вакцина, которая предупреждает инфицирование вирусом-возбудителем недуга. Детей прививают сразу же после рождения, а в дальнейшем вакцинация происходит по достижению совершеннолетия.

Тем не менее, распространенность гепатита B высокая. Распознать данное заболевание достаточно просто. Нужно лишь пройти ПЦР-исследование (полимеразная цепная реакция). При помощи анализа можно выявить ДНК вируса гепатита B. Для постановки более точного диагноза производится количественное исследование.

Лечат ВРВ сугубо консервативно. Пациенту назначаются интерфероны, поливитаминные комплексы, гепатопротекторы, противовирусные ЛС. Рассмотрим подробнее патогенез болезни и выясним, в каких случаях нужно сдавать ПЦР-исследование, и как его правильно расшифровать.

Патогенез и особенности вирусного гепатита Б

Гепатит Б (сокращенно ВРВ) – вирусное заболевание, при котором наблюдается воспалительный процесс в клетках печени. Недуг может привести к увеличению печени и изменению ее структуры. При отсутствии своевременной терапии гепатит перестает в цирроз или жировой гепатоз.

Возбудитель ВРВ – ДНК-содержащий вирус из семейства гепаднавирусов (сокращенно называют вирус ГВ или HBV). Антиген к инфекционном агенту был открыт только в 1964 году. Отличительная особенность вируса состоит в том, что он чрезвычайно стойкий к химическим и физическим факторам.

Так, инфекционный агент не погибает при резких перепадах температур, под воздействием заморозки, а также при длительном воздействии кислой среды. Более того, врачи утверждают, что HBV может сохраняться при комнатной температуре до нескольких недель. К примеру, инфекционный агент может сохраняться на бритве зараженного человека, в пятнах крови, на различных медицинских инструментах. По различным оценкам, ВРВ страдают порядка 300 тысяч людей.

Выделяют 4 пути передачи инфекционного агента:

1. Половой. При незащищенном половом контакте происходит травматизации слизистых оболочек половых органов, вследствие чего вирусу в разы легче попасть в кровоток, а оттуда в воротную вену и печень. HBV при защищенном половом акте не передается. Кстати, инфицирование при поцелуях и объятьях считается невозможным.
2. Вертикальный путь. Инфекционный агент может поникнуть через плаценту. Также возможно инфицирование при прохождении ребенка через родовые пути. А вот через грудное молоко заразиться практически нереально.
3. Бытовой. Заразиться можно, если здоровый человек использует одни и те же средства личной гигиены с носителем вируса.
4. Парентеральный, то есть через кровь. Так, HBV можно заразиться при посещении стоматологических клиник, студий тату, косметологических салонов, маникюрных, педикюрных, кабинетов пирсинга. Возможно инфицирование при переливании крови, при трансплантации органов, во время гемодиализа, при оперативных вмешательствах.

Гепатит Б не передается воздушно-капельным путем. А при контакте с биологическими жидкостями человека (спермой, слюной, секретом внутренних органов, менструальными и влагалищными выделениями) вероятность инфицирования сохраняется.

ПЦР-исследование на ДНК вируса

Выше уже отмечалось, что для постановки диагноза нужно сдать ПЦР гепатита B. Чтобы исследование было точным, пациенту нужно соблюсти ряд несложных правил. Первое и самое главное – сдавать анализ натощак. Только так можно получить точный результат. Пить воду в день исследования можно.

Также накануне исследования крайне не рекомендуется принимать алкогольные напитки. В идеале – воздерживаться от приема спиртного хотя бы за 3-5 дней до проведения забора крови. Известны случаи, когда вследствие употребления алкоголя человек получал ложноположительный или ложноотрицательный результат. Хотя на сегодняшний день это считается практически невозможным, так как ПЦР – высокоточный анализ.

• В день исследования не курить.
• Накануне сдачи соблюдать диету.
• По рекомендации врача прервать прием препаратов, которые в той или иной степени способны оказывать влияние на полученный результат.
• Избегать физических нагрузок.

Если человек уже проходит противовирусную терапию, то прерывать прием ЛС накануне ПЦР не нужно. Цена комплексного ПЦР-исследования в частных лабораториях (Синево, Гемотест и пр.) стартует от 2000 рублей.

Обнаруживать ДНК ВРВ помогает качественный ПЦР-анализ. Он назначается не только при подозрении на гепатит Б. Проходить качественное исследование рекомендуется тем людям, которые проходят или закончили прохождение противовирусной терапии. ПЦР может назначаться людям, которые проживают с инфицированным человеком.

Цель качественного ПЦР – обнаружить ДНК вирусного агента. Расшифровка проводится очень просто. Качественный анализ дает либо положительный, либо отрицательный результат. В первом случае вирус обнаружен, во втором – нет.

Но есть один нюанс. Несмотря на то, что ПЦР достаточно точный анализ, получить ложноположительный или ложноотрицательный результат можно. По словам гепатологов, лучше сдать исследование два раза в разных лабораториях.

Количественный анализ на гепатит B проводится тоже в обязательном порядке при подозрении на наличие ВРВ в организме. Что такое количественное исследование и зачем оно нужно? Как понятно из названия, анализ помогает определить количество инфекционного агента в организме. При помощи исследования врач может оценить степень тяжести патологии.

Также количественный анализ нужно сдавать тем людям, которые уже проходят лечение. При помощи него можно определить эффективность терапевтических мероприятий, и по необходимости внести коррективы.

Единица измерения вируса – МЕ/мл. Иногда используется ДНК/мл (количество копий). Усредненное значение – 1 МЕ/мл = 5 копий/мл. Если результат анализа меньше 75 МЕ/мл, то ВРВ у пациента отсутствует.

Расшифровка количественного исследования следующая:

1. До 2 * 10 5 копий/мл. Означает, что вирус ведет себя не очень активно. В таких случаях вылечить ВРВ относительно нетяжело.
2. От 2 * 10 5 до 2 * 10 6 копий/мл. Означает, что активность вируса средняя. Инфекционный агент достаточно активен, и вероятность хронизации воспалительного процесса достаточно высокая.
3. От 2 * 10 6 до 2 * 10 7 . Виремия большая. Активность вируса очень высокая, воспалительный процесс протекает реактивно.

Дополнительные исследования при подозрении на гепатит Б

Помимо ПЦР, в обязательном порядке пациенту нужно сдать ИФА (иммуноферментный анализ). С его помощью можно обнаружить антитела к ВРВ. Если антитела есть, значит, с высокой долей вероятности вирусное заболевание у пациента присутствует. Рассмотрим основные антитела, единица их измерения – индекс.

Один из самых главных – HbsAb. Под этой аббревиатурой скрываются антитела к поверхностному белку вируса. При контакте иммунной системы с протеином ВРВ происходит выработка специфических антител, которые прикрепляются к вирусу и мешают ему проникнуть в клетки печени.

Еще есть анти-HBc (total) (HBcAb). Они представляют собой антитела к ядерному белку вируса гепатита Б. Но тут не все так просто. Наличие данных антител может свидетельствовать о том, что гепатит был в прошлом. То есть наличие этого маркера не говорит о том, что воспалительный процесс имеется именно сейчас.

Также могут обнаруживаться IgM анти-HBc (HBcAb IgM). Они формируются на начальных этапах развития недуга.

Если иммуноферментный анализ выявил, что у человека имеются IgM анти-НВс (НВсАb IgM) и анти-НВе (HBeAb), то это говорит о том, что воспалительный процесс протекает остро и заразность крови больного очень высокая. В норме данные антитела должны отсутствовать.

Чтобы оценить общую клиническую картину, помимо ПЦР и ИФА, пациенту могут быть назначены:

• Общий анализ крови.
• Биохимический анализ крови. Исследуется уровень печеночных ферментов (АСТ, АЛТ, щелочная фосфатаза, прямой и непрямой билирубин, ГГТ). При гепатите Б уровень ПФ повышается.
• УЗИ печени. Воспалительный процесс приводит к тому, что орган становится отечным, несколько изменяется его структура, возможно наличие участков фиброза.
• Биопсия печени. Предусматривает забор печеночных клеток и их дальнейшее гистологическое исследование. Обязательно используется в составе дифференциальной диагностики.

По необходимости может быть рекомендована сдача ПЦР-исследование на РНК вируса гепатита C, так как случаи одновременного инфицирования гепатитом Б и гепатитом Ц весьма нередки. Причем оба заболевания передаются парентерально.

Что делать при наличии вируса в организме?

Уничтожить вирус и купировать воспалительный процесс помогают специализированные противовирусные медикаменты. Препаратами выбора являются . Чтобы укрепить сопротивляемость организма инфекционным агентам, назначаются интерфероны, в числе которых Интераль-П, Интрон А, Пегасис, Пегинтрон.

1. Назначаются гепатопротекторы. Они помогают стабилизировать липидный и белковый обмен, снизить активность печеночных трансаминаз, купировать воспалительный процесс в паренхиме печени. Также под воздействием гепатопротекторов происходит нормализация детоксикационной функции печени, увеличивается синтез желчи и стабилизируется ее пассаж. При гепатите Б препаратами выбора являются Урдокса, Урсофальк, Лив 52, Карсил Форте, Эссенциале Форте Н, Резалют Про.
2. Корректируется рацион. Больному нужно отказаться от продуктов, перегружающих печень. Таковыми являются сладости, жирные блюда, полуфабрикаты, острые овощи, кислые фрукты, свежая выпечка.
3. Показан отказ от алкогольных напитков, так как они усугубляют течение воспалительного процесса и плохо сочетаются с противовирусными препаратами.

ВРВ вылечить полностью возможно. Хронизация воспалительного процесса происходит лишь у 10-20% пациентов.

Прогноз и профилактика заболевания

Лучшая профилактика гепатита Б – своевременное вакцинирование. Оно делается сразу после рождения, а затем по достижению совершеннолетнего возраста. Сколько длится послепрививочный иммунитет, сказать сложно.

Первоначально считалось, что человек остается устойчивым к воздействию ВРВ в течение 5-7 лет после прививки. Но исследования, проведенные еще в 80-х годах XX века, опровергли это. Медики выяснили, что иммунитет может сохраняться и до 25 лет. Но медработникам и людям, чья работа предусматривает контакт с кровью и другими биологическими жидкостями, все равно рекомендуется вакцинироваться каждые 5 лет.

Прогноз при вирусном гепатите Б благоприятный. Хронизация воспалительного процесса происходит достаточно редко, особенно если человек обратился за помощью своевременно. Если же воспалительный процесс запущенный, то вероятность перехода патологии в хроническую форму достаточно высокая.

Несвоевременное лечение может привести к различным последствиям. Так, хронический ВРВ часто приводит к развитию фиброза, который со временем перестает в цирроз.

Также на фоне воспалительного процесса могут развиться рак печени, дискинезия желчевыводящих путей, жировой гепатоз, острый холецистит, холангит. Есть еще одна особенность. При ВРВ пациент может заразиться гепатитом D. Репликация последнего возможна только при наличии HBV.

Исследования ДНК и ПЦР вируса гепатита В являются самыми чувствительными анализами, которые позволяют обнаружить в тканях печени молекулярные следы ДНК, идентифицирующие наличие вируса. Суть метода заключается в многократном копировании фрагмента ДНК, принадлежащего возбудителю болезни.

ПЦР гепатита типа В — это полимеразная цепная реакция внешнего химического реагента с исследуемым биологическим материалом, направленная на выявление молекул вирусного ДНК в крови и их количественных показателей на единицу объёма. Анализ назначается в следующих случаях:

• при возникновении признаков гепатита В у пациента;
• во время диагностических мероприятий при микст-гепатитах;
• для уточнения эффективности терапии.

Для ПЦР анализа делается забор венозной крови. Перед исследованием необходимо воздержаться от приёма пищи примерно 8 часов.

Для ПЦР-анализа делается забор венозной крови

Метод ПЦР даёт возможность выявить ДНК возбудителя даже при минимальном его присутствии в отобранной пробе крови. Кроме того, анализ позволяет обнаружить антигены, которые уже выработались на вирус. Каждый из антигенов свидетельствует об определённой стадии болезни:

• HBsAg — вирус присутствует в данный момент.
• Анти-HBcor — возбудитель в настоящее время отсутствует, но имелся в прошлом.
• Анти-HBs — в крови имеются антитела к гепатиту B (как вариант — герпесу, ВИЧ, хламидиозу, микоплазмозу, кандидозу, туберкулёзу, клещевому энцефалиту и многим другим болезням).

Патология и её признаки

Гепатит B или HBV — это вирусная инфекция, поражающая клетки печени. Она опасна не только непосредственным воздействием на паренхиму органа, ослабляющим барьерную функцию и общий иммунитет. Возможны и более тяжёлые последствия, такие как цирроз печени и возникновение злокачественных новообразований.

HBV передаётся через кровь человека, инфицированного гепатитом, его экскременты, через контакты со слизистыми оболочками, особенно при половом акте, повреждениями кожи, через нестерильные шприцы при переливании крови или при полостных операциях. Возможно заражение новорожденного его больной матерью при прикосновении к трещинам на её сосках.

Для гепатита B характерны следующие симптомы:

Непривычная утомляемость

• нарастающая усталость при небольших нагрузках;
• непривычная утомляемость;
• тяжесть в области правого подреберья;
• пониженный аппетит, тошнота;
• желтушность кожных покровов, склер глаз;
• светлый кал;
• тёмная моча;
• болезненные ощущения в суставах.

Инкубационный период, после которого начинают проявляться эти признаки, составляет от месяца до полугода. Это срок накопления клеток вируса в печёночном кровотоке. Когда их концентрация доходит до критической массы, вирус прорывает мембраны гепатоцитов и продолжает размножаться уже внутри клеток. В результате клетки печени гибнут, развивается цирроз, который, при отсутствии должных терапевтических мер, приводит пациента к летальному исходу. Своевременный анализ крови на ПЦР и ДНК гепатита B позволяет избежать негативных.

Показаниями к ПЦР являются:

• положительный тест на ДНК, подтверждающий диагноз — гепатит B;
• острый и хронический гепатит;
• микст-гепатиты;
• количественное определение вируса в кровяной сыворотке;
• разработка тактики эффективной терапии.

Подготовка к анализу

Подготовка к диагностике с помощью ПЦР определяется видом биоматериала. Так кровь и мочу сдают только в первой половине дня, натощак. Также берутся мазки и соскобы из урогенитальной области. Ограничением для женщин является только менструация. Для обоих полов ограничиваются половые контакты накануне исследований.

Результаты ПЦР можно будет считать достоверными только при правильной подготовке пациента к процедуре. Это исследование подразумевает соблюдение следующих условий:

• полный душевный комфорт, отсутствие всяких волнений. Для обеспечения этого анализ можно сдать даже дома. Нужно только вызвать к себе врача с соответствующим оборудованием;
• воздержание от пищи, алкоголя, курения, физической активности минимум за 8-12 часов перед анализом, иначе данные исследования будут искажены;
• 15-20 минут полной релаксации перед забором крови;
• прекращение приёма лекарственных препаратов (если это не представляется возможным, лаборатория должна быть предупреждена);
• детям в возрасте до пяти лет в течение получаса перед анализом необходимо давать пить кипячёную воду маленькими порциями.

Как проходит исследование

В основе анализа ПЦР лежат принципы, которыми пользуется молекулярная биология. Они заключаются в использовании специальных ферментов, расщепляющих и копирующих участки ДНК и РНК возбудителя инфекции, который обнаружен в крови. После проведения этой операции, полученные образцы идентифицируются по базе данных, имеющихся в лаборатории. Одновременно выявляется вид инфекции и концентрация в крови возбудителя.

Амплификатор

Для проведения исследования используется амплификатор — термостат, способный нагревать и охлаждать пробирки с биоматериалом. Это необходимо для активации репликационных процессов. От точности температурных параметров зависит достоверность анализа.

Расшифровка результатов

Расшифровка других итогов анализа позволяет поставить следующие диагнозы:

Определение количественных показателей содержания ДНК гепатита B при проведении ПЦР является основой для выбора лечебного курса. Через три или шесть месяцев анализы проводятся снова, чтобы проверить эффективность противовирусной терапии.

Особенность полимеразной цепной реакции

В методике ПЦР используется два подхода к определению ДНК, принадлежащего вирусу: качественный и количественный.

Качественный подход подтверждает или отрицает наличие гепатита B. ПЦР назначается по просьбе пациента, подозревающего, что он заражён HBV-инфекцией или в том случае, когда ранняя диагностика иным способом не даёт однозначных результатов.

Если вирус гепатита B удаётся выявить не позже, чем через две недели после его проникновения в организм, положительный прогноз при лечении наиболее вероятен. В дальнейшем болезнь начнёт прогрессировать. Приблизительно через два месяца она перейдёт в хроническую фазу. Полное излечение в таком случае станет невозможным.

Количественный подход в ПЦР применяется только при обнаружении вируса. Он оценивает:

• конкретную вирусную нагрузку на печень;
• интенсивность прогрессирования заболевания;
• устойчивость к препаратам противовирусной группы;
• результативность лечения.

Эти показатели имеют прямое практическое значение. Особенно количественный показатель ДНК. От концентрации вируса в кровотоке печени зависит прогноз в острой фазе гепатита B. Так низкая концентрация вирусных клеток почти полностью исключает переход острого гепатита в хронический. Такие больные не представляют опасности для окружающих. Высокая вирусная нагрузка способствует хронизации патологического процесса и возможности заражения гепатитом людей, контактирующих с больным.

Существует также связь между концентрацией в крови генов вируса и цирротическим перерождением печени, и возникновением рака её паренхимы.

Анализы ПЦР помогают врачу обнаружить носители вируса

Результативность терапии противовирусными препаратами определяется по степени снижения концентрации ДНК гепатита B в печёночном кровотоке. Достаточным результатом считается уменьшение вирусной нагрузки в 1-2 раза при интенсивном лечении в течение от трёх месяцев до полугода. Более низкие показатели требуют изменения лечебного курса.

Прогноз развития патологии и назначения соответствующей терапии исходит из:

• количественного объёма ДНК печёночного вируса в кровяной сыворотке;
• сопутствующих биохимических показателей (например, уровня лейкоцитов в крови и содержания там билирубина);
• маркеров вирусной инфекции;
• результатов биопсии печени.

Общие цели ПЦР

Анализы с помощью полимеразной цепной реакции помогают врачу:

• обнаружить носители вируса;
• прогнозировать процесс развития гепатита типа B;
• убедиться в переходе болезни в хроническую форму;
• мониторить активность вируса на всех фазах развития;
• выявить мутантные и скрытые штаммы гепатита B;
• оценить эффективность лечения вируса при выборе определённой тактики и изменить её в случае недостаточной успешности.

Преимущества метода

В отличие от других анализов, которые применяются для диагностики гепатита B, ПЦР обладает:

Анализ ПЦР обладает исключительной чувствительностью

1. Исключительной чувствительностью. Методика даёт возможность исследователю обнаружить возбудителя заболевания, даже если концентрация молекул его ДНК в крови минимальна. Это позволяет принять профилактические и лечебные меры на ранней стадии болезни, когда внешне она ещё не выражена никакими симптомами.
2. Широким охватом возможностей. ПЦР способен выявить не только возбудителя вирусного гепатита B, но и ряд других патологий.
3. Универсальностью подходов. Биоматериалом для исследований может быть кровь, слюна, клетки слизистых и кожных покровов.
4. Оперативностью. Заключение будет готово ровно через день после забора крови (сам результат анализа получают не позже чем через 7 часов).
5. Достоверностью. При соблюдении всех условий проведения ПЦР-методика никогда не показывает ложных данных.
6. Ценовой доступностью исследования. По стоимости ПЦР лишь слегка превышает обычные анализы, использующие кровь как биоматериал.

Единственной издержкой исследования является его технологическая сложность. Для качественного выполнения ПЦР требуется исключительно чистый биоматериал, современное оборудование и хорошо подготовленный персонал. Обращаться за диагностикой по этому методу предпочтительней в специализированные лаборатории.

Вирусный гепатит B относится к заболеваниям, полное излечение от которых представляется возможным только на самых ранних стадиях развития. Выявить болезнь именно в этой фазе помогает сверхчувствительная диагностика по методу ПЦР. Первые симптомы, вызывающие подозрение на поражение печени вирусом, должны быть поводом для обращения к специалисту. Если диагноз подтвердится, лечение следует начинать немедленно. Это улучшит прогноз и повысит вероятность поддержки печени в здоровом состоянии на долгие годы.