Как расшифровать количественный показатель гепатита в

Но как проводится расшифровка анализов на гепатит? Какие методы диагностики проводятся, в зависимости от типа заражения? Какова расшифровка анализа на гепатит С или В? Ответы на эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Виды анализов на гепатит

Прежде чем говорить о расшифровке анализа на гепатит В или С, следует выяснить, какие методы аналитической диагностики этого заболевания существуют в современной медицинской практике. Способ определения болезни зависит от путей заражения. Так как гепатиты В и С преимущественно передаются через кровь, для определения вирусной нагрузки и подтверждения диагноза проводится анализ этой биологической жидкости. Образец крови берется из вены пациента для дальнейшего изучения в лабораторных условиях.

Также диагноз подтверждается аппаратным способом при помощи ультразвукового обследования и эластометрии печени. Данные методы позволяют определить степень заражения и площадь пораженных вирусом тканей жизненно важного органа. Также для расшифровки анализов на гепатит большое значение имеет определение примерного срока инфицирования.

Исследования образцов биологических жидкостей, проводимые при диагностике гепатовируса, делятся на:

• Качественные — нацелены на определение наличия патогена;
• Количественные — определяют вирусную нагрузку и степень инфицирования.

В зависимости от типа вируса, для определения его наличия проводятся разные анализы. Рассмотрим их подробнее.

Вирусный гепатит В является не только опасным, но и чрезвычайно заразным вирусным заболеванием. Кроме того, эта болезнь опасна большим количеством осложнений, среди которых: цирроз, фиброз и онкологические новообразования в печени. Поэтому правильная расшифровка анализа на гепатит В очень важна. Своевременная диагностика может спасти пациенту жизнь.

С целью определения гепатовируса типа В проводятся следующие анализы:

Вирусный гепатит С также передается через кровь, однако является менее заразным. Тем не менее, это заболевание довольно распространено как в России, так и за ее пределами. Сдача анализов на обнаружение ВГС необходимо для определения самого заболевания, его стадии и подходящей для терапии схемы лечения оригинальными индийскими препаратами. При диагностике гепатита С проводятся следующие анализы:

• На анализ на антигены ВГС (аnti-HCV-total ) — качественный тест. Обнаруженные иммуноглобулины являются одними из основных маркеров заболевания;
• На антитела IgG (recomBlot HCV IgG) — качественное тестирование. Положительный результат говорит о наличии заболевания, отрицательный — о его отсутствии. Исключением является проведение диагностики у пациентов, родившихся с антителами матери либо во время инкубационного периода заболевания;
• Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — тест на выявление флававируса. Может быть как качественным, так и количественным.

В каких случаях требуется диагностика гепатовируса?

В первую очередь диагностические меры применяются к пациентам, у которых наблюдаются следующие симптомы:

• Тошнота и рвота;
• Болевые ощущения в области печени;
• Осветление (обесцвечивание) фекальных масс и потемнение мочи;
• Желтушный оттенок склер и кожных покровов;
• Общее недомогание, имеющее сходство с гриппозными проявлениями;
• Апатичное или депрессивное состояние.

Однако, ввиду бессимптомного течения хронической формы вирусных гепатитов, сдавать анализы рекомендуется и в ряде профилактических мер.

Регулярно сдавать кровь на мониторинг патогена рекомендуется:

• Лицам, ухаживающим за инфицированными;
• Медперсоналу, регулярно контактирующему с зараженной кровью и другими биологическими жидкостями;
• Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;
• Инъекционным наркоманам;
• Больным, страдающих от ВИЧ-инфекции;
• Лицам, ведущим беспорядочную половую жизнь.

Важно вовремя определить наличие гепатовируса в крови больного. Чем раньше будет диагностирована болезнь, тем быстрее ее удастся победить при помощи инновационных противовирусных препаратов.

Как подготовиться к сдаче крови?

Результаты анализа крови на выявление ВГС могут быть неточными, ложноположительными или ошибочными. Чтобы этого не случилось, нужно учитывать все нормы подготовки и проведения диагностики:

• В течение дня до сдачи крови на экспертизу нельзя употреблять продукты с большим содержанием сахара и трансжиров. За 8 часов до анализов нельзя есть вообще;
• Накануне диагностики запрещается употребление алкоголя и курение сигарет. Это создает дополнительную нагрузку на печень, из-за чего анализы могут быть неточными;
• За день до сдачи крови следует поберечь себя от стрессов и физических перенагрузок. Это также может негативно сказаться на результатах диагностики.

Являться в лабораторию для сдачи образца крови необходимо утром, примерно в 8 часов. Из вены кровь берется при помощи стерильного шприца. В рамках собственной безопасности пациенту важно следить за тем чтобы медицинский работник не применял ранее использованный шприц.

Расшифровка анализов

Расшифровка анализов проводится в лабораторных условиях компетентными медработниками. Результаты передаются лечащему врачу или напрямую пациенту в зависимости от особенностей отдельного медицинского учреждения или независимой лаборатории.

Фиксируются результаты диагностики на бумажном носителе. Период готовности расшифровки зависит от типа анализа. Чаще всего результаты готовы в период от нескольких часов до 1 суток после сдачи.

Расшифровка анализа на выявление вирусного гепатита В производится в условиях лаборатории. Ниже представлены ключевые данные, на которые опираются исследователи, изучая предоставленный пациентом образец крови:

1. При определении австралийского антигена, референсное значение составляет 0,5 МЕ/мл. При меньшей концентрации антигена результат теста можно считать отрицательным. Если же значение выше указанного, это может свидетельствовать о наличии инфекции в острой форме. Также наличие австралийского антигена может свидетельствовать о вирусоносительстве;
2. Референсное значение антител к HBs-антигену вируса гепатита B (Anti-HBs) — 10 МЕ/мл. Высокий показатель говорит об успешном иммунном ответе на вакцинацию от гепатита В. Низкий показатель свидетельствует о том, что вакцина не оказала ожидаемого действия;
3. Более 40 МЕ/лпатогенной ДНК в сыворотке крови пациента говорит о заражении гепатовирусом типа В. Если концентрация вирусного ДНК в предоставленном образце крови ниже указанного серединного предела, человек наверняка здоров, либо его болезнь находится на стадии инкубационного периода.

Одним из основных методов диагностики ВГС является определение фрагментов РНК возбудителя в плазме крови пациента. При расшифровке этого анализа на гепатит С важно учитывать, является ли он качественным или количественным. Положительный показатель качественного теста позволяет говорить о наличии заражения.

В свою очередь, при количественном РНК-анализе:

• Показатель ниже предела15 МЕ/мл — патоген не обнаружен, или его концентрация находится ниже порога чувствительности теста;
• От 15 до 100 000 000 МЕ/мл — вирусное РНК выявлено. Это говорит об инфицировании организма человека гепатовирусом типа С.

Результаты количественного теста на РНК в сыворотке крови расшифровываются следующим образом:

• Ниже 60 МЕ/мл — возбудитель вирусного гепатита С не обнаружен;
• От 60 до 108 МЕ/мл — положительный результат в пределах линейного диапазона;
• От 108 и выше — повышенная концентрация РНК возбудителя.

Еще одним немаловажным анализом, расшифровка которого требуется при диагностике гепатита С, является ПЦР. Показатели, по которым можно отследить вирусную нагрузку, колеблются в пределах 10 до 500 МЕ/мл. Если результат ниже минимального уровня, гепатит С не обнаруживается. Завышенный показатель говорит о высокой вирусной нагрузке.

Гепатит В – распространённая вирусная инфекция, передающаяся от человека к человеку. Гепатит разрушает клетки печени, что может стать причиной формирования цирроза. Присутствие в крови гепатита делает носителя потенциально опасным. Данное заболевание передаётся от матери к ребёнку, распространяется половым путём.

Лабораторные исследования крови больного вирусом гепатита имеют следующие цели: подтверждение диагноза, выявление прогресса в лечении, контроль состояния пациента, определение формы болезни.

Количественный анализ на гепатит Б проводится для определения уровня антигенов и подбора правильного курса лечения. Он позволяет диагностировать заболевание во время инкубационного периода и выявить носителя вируса.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Что такое количественный анализ на гепатит Б?

Проникая в тело человека, антигены начинают размножение на поверхности печени и попадают в кровь. Количественный анализ – современная разработка в области генной инженерии для точной диагностики инфекции в печени. С его помощью устанавливается количество ДНК гепатита Б в крови пациента. Присутствие невысокого содержания вируса допустимо, но требует контроля. Превышение этого показателя свидетельствует о необходимости врачебного вмешательства.

У ряда заражённых вирус гепатита Б не сопровождается симптомами, поэтому количественные анализы назначаются:

• женщинам во время беременности;
• работникам медицинской сферы;
• ВИЧ-инфицированным;
• при патологиях печени;
• перед переливанием крови.

Если в крови обнаружен вирус, состояние пациента необходимо отслеживать. Через установленный временной промежуток потребуется вторичная сдача количественного анализа. Контроль необходим при всех формах заболевания, включая бессимптомный латентный гепатит.

Существуют различные вариации количественного анализа: полимеразная цепная реакция, биохимия, ИФА.

Следить за уровнем инфекции в организме необходимо людям с заболеваниями печени – цирроз, рак. Причиной развития этих патологий может быть долгое время прогрессировавший вирус гепатита В.

Показания к исследованию

Количественный анализ назначается для того, чтобы определить наличие вируса гепатита. У пациентов с диагностированным гепатитом данное исследование выявляет степень поражения организма инфекцией. При хронической форме количественный анализ определяет стадию заболевания.

Проведение количественного анализа назначают людям, находящимся в группе риска, при положительных показателях предыдущих исследований. Поскольку инфекция передаётся от женщины к плоду, во время беременности назначается проведение этой процедуры. Заражение возможно при проведении операций, если использовавшиеся инструменты были нестерильны.

Подготовка и проведение количественного анализа

Подготовка пациента к сдаче количественного анализа влияет на результаты исследования. Необходимо воздержаться от употребления спиртных напитков за день до сдачи крови. Проводить забор разрешается не ранее, чем через четыре часа после еды. Следует отказаться от курения.

Перед забором биоматериала врач обязан уточнить у пациента, является ли он донором крови, узнать о перенесённых операциях, выяснить наличие контактов с заражёнными людьми.

Данную процедуру рекомендуется проводить после проведения первичного исследования. Забор крови происходит из вены. Собранный материал хранится в пробирке. Произвести изучение биоматериала требуется за 24 часа после забора.

Количественный анализ на полимеразную цепную реакцию выявляет вирус на инкубационной стадии спустя две недели после инфицирования.

Расшифровка количественного анализа на гепатит Б

Расшифровкой показателей занимается врач. Мера измерения в заключении – копии вируса на миллилитр крови. В норме этот показатель показывает отметку 105 свидетельствует о необходимости проведения медикаментозного лечения. Отказ от приёма препаратов и проведения терапии может стать причиной развития хронического гепатита.

Если в организме обнаружено >1*108 , данное заключение свидетельствует о том, что существует высокая вероятность перехода заболевания в хроническую форму. Для предотвращения развития болезни требуется многоплановое продолжительное лечение.

На результат исследования влияет проведённая ранее вакцинация или перенесённая острая форма гепатита Б.

Курс препаратов для лечения подбирается врачом-инфекционистом. Исходя из данных количественного анализа, он составляет терапевтический план. При назначении лекарств учитываются показатели биопсии. При низких значениях и незначительных отклонениях от нормы препараты назначаются гепатологом.

В ряде случаев одновременно с гепатитом Б протекают другие типы болезней печени. Это осложняет терапию и увеличивает вероятность возможных последствий. Опасное течение заболевание принимает в редких случаях и при отсутствии многопланового лечения.

Возможны ли ошибки при количественном анализе?

Заключение количественного анализа, в котором показатели в норме, не гарантирует отсутствия в крови ДНК вируса. Человек может являться носителем при малом количестве вируса.

Ошибка исследований возможна при несоблюдении подготовительных мер перед забором биоматериала. Также результаты исследований могут быть ложными из-за неправильных условий хранения пробирок с собранным биоматериалом.

Латентный гепатит, не имеющий признаков и не сказывающийся на самочувствии носителя, способен привести к проблемам с печенью и стать причиной развития цирроза. Поэтому людям, входящим в группу риска и имевшим контакты с больными, необходимо отслеживать показатели крови для предотвращения заболеваний печени.

Латентная форма заболевания потребует наблюдения у врача. Для профилактики гепатита рекомендуется провести вакцинацию и соблюдать правила личной гигиены.

Гепатит B – вирусная инфекция, поражающая печень. Сегодня около 300 млн человек по всему миру являются носителями гепатита B.

У некоторых вирус переходит в цирроз печени или гепатоцеллюлярную карциному (первая стадия рака). Новые противовирусные стратегии исследования болезни имеют две задачи:

• определить, насколько организм чувствителен к вирусной нагрузке;
• определить, насколько вирус устойчив к приему лекарств и других медицинских вмешательств.

Особенности исследований на гепатит

Серологические исследования направлены на выявление в сыворотке крови антигенов и антител, но этот метод ненадежен. Поэтому ученые разработали метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Он позволяет не только качественно определить наличие вируса (есть или нет), но и количественно (в каком количестве присутствуют антитела в сыворотке крови).

Перед сбором крови врач должен выяснить:

• 
  принимал ли пациент наркотические вещества внутривенно;
• являлся ли человек донором либо реципиентом (кому вливали кровь);
• проводились ли больному хирургические вмешательства;
• повреждался ли у пациента кожный покров;
• уверен ли человек в здоровье своего сексуального партнера;
• были ли контакты с зараженными вирусом гепатита B.

При остром гепатите положительный результат можно выявить через 1-2 недели после инкубации путем ПЦР.

Анализы крови для выявления вирусного гепатита В (ВГВ) берутся при:

• 
  Диагностике острого гепатита в:
  • период инкубации (1-2 недели);
  • интенсивный период недуга (3-4 недели);
  • период ранней стадии выздоровления.
• Диагностике ХВГ (хронического вирусного гепатита).
• При микс-гепатитах.

Также регулярно анализы берутся у людей, находящихся в группе риска, к ним относят:

• людей, нуждающихся в частых переливаниях крови;
• пациентов, проходящих постоянные процедуры очищения крови при почечной недостаточности;
• людей, больных СПИДом или ВИЧ-инфекцией;
• беременных женщин;
• медицинских работников, контактирующих с кровью;
• больных с симптомами заболевания печени.
• лечащихся от цирроза, рака и других заболеваний печени.

Подготовка к количественному анализу предполагает соблюдение таких правил:

• 
  не курить за 1 час до сдачи анализа;
• не есть за 4 часа до процедуры;
• лучше всего количественный анализ сдавать после сдачи качественного;
• не пить алкоголь за сутки до исследования.

Эффективная терапия при заболевании влияет на уменьшение количества ДНК вируса в сыворотке. Через полгода после старта лечения количество вируса должно уменьшиться на 2-3 порядка. Если результаты анализов через время не изменились, или, наоборот, стали хуже, то в обязательном порядке меняется вся терапия, и автоматически острый гепатит переименовывается в хронический.

При попадании ДНК вируса гепатита в организм инфекция может пойти 2путями:

• 
  репликативным (происходит развитие острого либо хронического гепатита, что в дальнейшем, без медицинского вмешательства, ведет к циррозу печени);
• интегративным (развитие бессимптомного, неактивного вирусоносительства, которое все-таки приведет к циррозу либо гепатоцеллюлярной карциноме).

Как происходит процедура забора крови? Врач стягивает предплечье больного жгутом и вводит иглу в вену на локтевом сгибе, после забирает кровь в шприц и переливает в специальную пробирку. Результаты будут готовы через несколько дней, срок зависит от места, где пациент сдает анализ.

Материалом служит сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты, которые помещают в пробирку с хорошо завинчивающейся крышкой. Но на результат может повлиять загрязненный материал для забора анализа, передержка материала (он хранится до 24 часов при температуре не более +4 °С).

Методы количественного анализа

Существует несколько способов количественного анализа, среди которых ПЦР, ИФА, биохимия.

Это анализ на поверхностный антиген-белок, который составляет часть внешней оболочки вируса. После того, как вирусные частицы попали внутрь организма, они начинают интенсивное размножение на поверхности печени, уничтожая здоровые клетки органа. Новые молекулы выбрасываются в кровь.

Исходя из этого, исследуют уровень концентрации в сыворотке антител и определяют, есть заражение гепатитом B или нет.

Материал для исследования берется натощак. ПЦР проводится в аппарате под названием амплификатор.

Алгоритм анализа ПЦР:

1. 
   Сначала расщепляют ДНК на 2 самостоятельные цепочки с помощью повышения температуры материала для исследования в амплификаторе.
2. Материал немного охлаждают с помощью азота. Праймеры находят нужные последовательности в молекуле ДНК и присоединяются к ним.
3. Элонгация – третий шаг, когда два праймера присоединяются к двум цепочкам ДНК. При помощи фермента ДНК-полимеразы происходит достраивание участка ДНК от присоединившегося к нему ранее праймера. Таким образом, на участке в области праймеров в каждой из цепочек ДНК образуется вторая комплементарная цепочка ДНК.

В дальнейшем эти шаги повторяются множество раз, и за несколько часов выполняется 35-45 циклов, образуются миллиарды копий искомого образца. Если такие копии есть, то высчитывается их количество на 1 мл материала для анализа.

Помимо ПЦР, существует метод ИФА (иммуноферментного анализа). Он определяет не только поверхностные антитела, но и расположенные внутри и взаимосвязанные с предыдущими антигенами, а также их количество.

Еще один метод количественного анализа. При попадании вируса из поврежденных клеток печени в организм выбрасываются ферменты, если их количество больше нормы, то можно говорить о заражении. Кроме того, нужно определить вирусную нагрузку (ДНК-HBV), сдать печеночные пробы (на билирубин с фракциями, АЛТ, АСТ, щелочную фосфатазу, гамму-ГТ). Обязательным является посещение инфекциониста, который при необходимости направляет больного на фиброэластометрию, подбирает курс лечения.

Биохимия — количественного анализ

В этом методе поиск копий происходит после каждого цикла, а не после 35-45, Метод работает так же, как и ПЦР, позволяет определять количество копий в образце для исследований. Тем самым время проведения анализа заметно сокращается, при этом гарантирован 100 % результат.

Обнаружение ДНК гепатита B

Установление количества ДНК гепатита B очень важно, так как при малом показателе прогноз болезни более благоприятный, чем при большем. Концентрацию ДНК ВГВ измеряют в копий/мл либо me/мл

1 me/мл = 2,83×10 копий/мл

Результаты данного анализа могут быть следующими:

• 
  ДНК вируса не обнаружена, если его нет в организме либо концентрация очень мала, 90 me/мл = 200 копий/мл;
• ДНК вируса обнаружена в количестве ниже нормы концентрации, 2×106 копий/мл;
• ДНК вируса находится в среднем количестве, при 2×106-2×109 копий/мл;
• ДНК вируса больше 2×109 копий/мл, концентрация антител высокая, что говорит о прогрессе заболевания.

Если результат анализа положительный, то диагностируется:

• носительство вируса гепатита B;
• заболевание хроническим гепатитом;
• заболевание острым гепатитом B.

Если результат отрицательный, то:

• 
  вируса в организме нет;
• возможно наличие гепатита B в период выздоровления (если предыдущие анализы являлись положительными).

В редких случаях отрицательный результат анализа на ДНК вируса гепатита B говорит о быстром и злокачественном течении болезни.

Решение о сдаче анализа на вирус принимает:

Количественный анализ является обязательным при диагностике заболевания и должен состояться еще до начала терапии. Но необходимо помнить о том, что гепатит B иногда тесно переплетается с гепатитом D, что может создавать дополнительные сложности при проведении такого анализа. Поэтому следует учитывать и такие варианты осложнений:

• 
  коинфекция – происходит заражение сразу двумя видами гепатита B и D. Такое заболевание протекает намного сложнее и болезненнее. Хронической формы у такого недуга нет, потому что в большинстве своем болезнь заканчивается летальным исходом;
• суперинфекция – к ранее спавшему гепатиту D присоединяется острый ВГB, в этом случае болезнь перетекает в хроническую с неблагоприятным прогнозом.

Если диагностирован вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого влияет на назначение лечебной схемы, строго обязателен. В отличие от генотипирования, подобное исследование выполняется несколько раз: непосредственно на этапе комплексной диагностики заболевания и в ходе терапии. Доктору важно знать количественное содержание вируса в крови пациента, чтобы назначить адекватное лечение.

Уже на стадии терапии анализ крови на уровень HCV предназначен для оценки эффективности принимаемых лекарств. По данным клинических исследований, на фоне подавляющего большинства противовирусных препаратов прямого действия количественный тест демонстрирует отрицательный результат уже на 21–28 день. Однако о полном выздоровлении речь идет в том случае, если негативные данные сохраняются на протяжении двух лет с последнего дня приема таргетных таблеток.

Для установления числового значения генома возбудителя гепатита С в сыворотке крови обычно пользуются молекулярной технологией ПЦР. Только таким образом можно точно посчитать уровень виремии: данный термин обозначает концентрацию копий (частиц генома) возбудителя гепатита С в определенной единице крови. Прочие методы, например, выявление core-антигена иммуноферментным тестом применяются гораздо реже из-за высоких финансовых затрат и сложностей, касающихся технического выполнения исследования.

Лабораторные исследования методом ПЦР

Полимеразная цепная реакция до недавнего времени была лишь экспериментальным методом анализа и не была широко распространена в клинической практике. Принцип методики основан на так называемой амплификации – способности определенного участка генома патогена к многократному копированию.

Это достигается при помощи обязательных компонентов выполнения ПЦР:

• праймера, структура которого практически идентична определенным участкам РНК HCV,
• фермента, обеспечивающего реакцию амплификации.

Структура праймера такова, что он может взаимодействовать только со строго определенным возбудителем. На этом принципе основана специфичность анализа методом ПЦР. Если иммуноферментные серологические исследования зависят от индивидуальных параметров иммунной системы человека, ПЦР направлена исключительно на выявление РНК возбудителя HCV.

Еще одна особенность проведения подобного исследования состоит в том, что расшифровка ПЦР гепатита С возможна как с использованием компьютерных программ (обычно используется, когда необходимо количественно установить содержание вируса в крови) и микроскопических методов. В норме у здорового в плане вирусного поражения печени человека патоген в крови отсутствует. Выявление возбудителя HCV методом ПЦР, будь то качественное либо количественное исследование, однозначно указывает на инфицирование.

При помощи постановки ПЦР можно не только определить виремию, то есть фактический уровень патогена в кровотоке, но и генотип вируса. Все доступные исследования, выполняемые по такой методике, приведены в таблице.

Перечень тестов	Краткое описание
Анализ ПЦР на гепатит С качественный	Предназначен для подтверждения результатов серологического теста (ИФА). Используемые тест-системы позволяют только выявить РНК патогена без определения его содержания
Анализ ПЦР вирусное содержание возбудителя патологии	Чувствительность исследования составляет 5–10 МЕ/мл. Для удобства расшифровки используют универсальный параметр, так как при определении количества копий могут возникать различные погрешности. Исследование проводится в обязательном порядке и не может заменить ни качественный тест методом ПЦР, ни генотипирование
Генотипирование	При исследовании определяется последовательность протеинов, что определяет разновидность возбудителя гепатита С. В настоящее время установлено 6 генотипов, и практически каждый требует индивидуального подхода в терапии

При гепатите С проводится все три исследования ПЦР. Алгоритм диагностики состоит в следующем:

Если человек желает самостоятельно обследоваться на гепатит С, рекомендуют сдавать ИФА. Дальнейшие обследования проводят в зависимости от полученных результатов. Если ИФА отрицательный и человек не предъявляет никаких жалоб, повторное тестирование проходят через год. Но при наличии симптомов патологии (в том числе и неспецифических, например, сильная слабость, утомляемость, боли в правом подреберье) следует сдать качественную ПЦР.

Характеристика количественного анализа

В целом, техника выполнения ПЦР по большому счету одинакова, как для качественного, так и количественного исследования. Образец биологического материала смешивают с тест-раствором, который содержит специальные соединения. Их роль состоит в стимуляции деления РНК патогена (причем строго специфичного генетического материала возбудителя).

В результате концентрация HCV достигает лабораторно определяемого уровня. На данном этапе возможно проведение качественного анализа. Однако после сложных подсчетов (обычно для этих целей используют компьютерные программы) устанавливают количественный показатель содержания HCV. После этого полученный результат переводят в Международные Единицы и фиксируют в лабораторном бланке.

В некоторых случаях вместо ПЦР используют другие методики – разветвленной ДНК и транскрипционной амплификации. Но из-за сложности выполнения и более низкой чувствительности большинство специалистов предпочитают выявлять количественные нормы гепатита С именно при помощи ПЦР.

Сейчас практически в любой частной лаборатории пациент может пройти обследования без каких-либо бумаг и направлений от терапевта. Количественное определение вируса гепатита С в крови не является исключением. Вопрос в том, когда целесообразна сдача теста?

Гепатологи рекомендуют проведение исследования в таких случаях:

• позитивный ИФА + положительная ПЦР;
• негативный ИФА + положительная ПЦР.

Кроме того, количественное определение HCV показано и в ходе противовирусной терапии. Врач сравнивает результаты виремии, полученные до начала курса приема медикаментов, с результатами тестирования, проведенного уже во время лечения. Нормой считается негативная ПЦР к 12 неделе применения препаратов. А предиктором 100% выздоровления считают отсутствие виремии уже через месяц терапии.

Тестирование продолжают и после окончания лечения для исключения риска рецидива. Пациент должен сдавать такой тест на протяжении еще 2 лет. При отрицательном результате говорят о выздоровлении. Больного снимают с учета у гепатолога или инфекциониста и дают общие рекомендации относительно восстановления состояния печени.

Если спустя 2 года количественный тест на HCV вновь положителен, все исследования повторяют заново. В таком случае предполагают повторное инфицирование и, возможно, другой генотип вируса. Но требуется новая схема лечения, а вероятность благополучного исхода существенно ниже.

Сроки выполнения количественного определения вирусной нагрузки при подтвержденной HCV-инфекции указаны в таблице.

Особенности течения заболевания и лечения	Этапы сдачи количественной анализа
Этап первичной диагностики	Виремия перед началом приема противовирусных средств – важный параметр определения лечения и контроля эффективности терапии
4 неделя	Анализ делают вне зависимости от схемы лечения и применяемых препаратов
12 неделя	Исследование выполняется также в любом случае
24 неделя	Тестирование делают в том случае, если курс терапии продолжается 24 недели
48 неделя	Выполняют при 48-недельном курсе лечения (как правило, при применении интерферонов) и как контрольный тест после 12-недельной терапии
После завершения курса терапии	С интервалом в 24 недели на протяжении 2 лет

Как подготовиться

Сама методика постановки ПЦР менее чувствительна к особенностям функционирования внутренних органов, иммунной системы. Однако это не исключает соблюдения правил подготовки к проведению теста. В большинстве случаев количественный тест проводится при уже подтвержденном диагнозе гепатита С.

Это подразумевает как минимум отказ от алкоголя и соблюдение строгой диеты (по столу №5 или №5а в зависимости от тяжести состояния больного). Лечащий врач уже ознакомлен с анамнезом, знает, какие лекарственные средства принимает пациент и от каких патологий страдает. Это облегчает расшифровку анализа ПЦР и снижает вероятность постановки ошибочного диагноза.

Но чтобы получить максимально точный результат необходимо:

• сдавать кровь натощак (после ужина должно пройти не менее 12 часов, завтрак противопоказан);
• посещать лабораторию следует в первой половине дня;
• до сдачи крови нельзя есть и пить что-либо кроме воды;
• нельзя курить за 8–10 часов до исследования.

Перечисленные правила нужно соблюдать перед каждой проверкой на количественное содержащие патогена. Если исследование проводят после лечения и врач разрешил ослабления в диете, за 7–10 дней до проведения тестирования необходимо вновь вернуться к строгому режиму питания. Что касается спиртного, ограничения сохраняются на протяжении всей жизни.

Расшифровка количественного анализа крови на гепатит С

Ранее отечественные специалисты делили виремию на несколько групп: очень низкую, низкую, умеренную, высокую и очень высокую. Но в настоящее время расшифровка анализа крови на гепатит С проводится в соответствии с международными нормами. Сейчас виремию делят только на 2 группы. В таблице указаны вероятные данные количественного анализа на гепатит С (окончательная расшифровка вне зависимости от показателей должна проводиться врачом).

Результаты анализов	Уровень вирусной нагрузки
7,9×105 МЕ/мл и ниже	Низкая виремия
7,9×105 МЕ/мл и выше	Высокая вирусная нагрузка
HCV не обнаружен	Уровень РНК патогена ниже определяемого тест-системой порога (как правило, 5–10 МЕ/мл) либо полностью отсутствует. Виремия отрицательна

Но только специалист может грамотно расшифровать количественное исследование на HCV и отличить показатели нормы от критических, свидетельствующих об отсутствии результата от противовирусной терапии либо о рецидиве инфекции. Все анализы должны быть подшиты в амбулаторную карту, чтобы у доктора была полная информация об активности вирусной инфекции и ответной реакции на прием таргетных медикаментов.

Показатели нормы при расшифровке количественного анализа на гепатит С бывают только тогда, когда результат ПЦР отрицателен, то есть РНК вируса во взятом образце крови отсутствует. В остальных случаях наличие патогена свидетельствует о заражении.

При подтверждении диагноза количественные показатели крови при гепатите С служат основой для оценки степени активности вирусного процесса. Высокая виремия повышает вероятность осложнений и сокращает срок наступления необратимых изменений в печени.

Вирусологическая нагрузка, превышающая 800 000 МЕ/мл служит основанием для проведения ряда инструментальных обследований:

• эластографии – диагностического метода для определения степени фиброза (разрастания и размеров очагов соединительной ткани);
• томографии – подробное рентгенологическое исследование, позволяющее исключить либо подтвердить наличие злокачественных или доброкачественных новообразований;
• биопсии печени, которая дает максимально полную информацию о структурных изменения в органе.

Низкая вирусная нагрузка говорит о медленно развивающейся вирусной инфекции. Такой процесс не исключает прогрессирования поражения печени, но вероятность возникновения тяжелого декомпенсированного цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы низка. У такой категории пациентов редко возникают внепеченочные проявления гепатита С (кардиоваскулярные расстройства, аутоиммунные нарушения), что также повышает шансы не только успешной противовирусной терапии, но и быстрого общего восстановления.

При постановке диагноза назначают несколько исследований, таким образом ошибка в проведении тестирования исключается.

Основными маркерами при гепатите С служат:

1. Положительный результат иммуноферментного анализа. Но ИФА во многом зависит от состояния иммунной системы человека, поэтому на этапе первичной диагностики не исключают ложноположительный либо ложноотрицательный результат.
2. Коэффициент позитивности при гепатите С выше 1. Рассчитывается по титру антител. Иногда референсные значения могут отличаться в зависимости от используемой тест-системы, но физиологическая норма всегда указывается в бланке с результатами.
3. Положительный результат качественного теста ПЦР. Обнаружение РНК возбудителя патологии однозначно указывает на инфицирование.
4. Определяемая виремия методом количественной ПЦР.

Косвенными лабораторными признаками гепатита С служат:

• повышение уровня печеночных ферментов, билирубина;
• изменение уровня лимфоцитов, в некоторых случаях, лейкоцитов, ускорение СОЭ.

Но при ответе на вопрос, какие показатели крови указывают на гепатит С, доктора руководствуются результатами ПЦР, так как ИФА может быть непоказательным при наличии определенных заболеваний (ВИЧ, аутоиммунных расстройств). Также неверные результаты вероятны при беременности, приеме некоторых лекарств. Не последнюю роль играет и анамнез.

При гепатите С антитела, как и РНК обнаруживаются при помощи тест-систем не сразу, а спустя как минимум 10–14 дней. ИФА может дать достоверный результат позже – через 4–6 недель после инфицирования. Поэтому если есть серьезные основания предполагать контакт с кровью больного, при негативном результате все анализы имеет смысл повторить через 1–1,5 месяца.

В современных лабораториях тестирование проводят с соблюдением всех норм (в соответствии с требованиями отечественного и зарубежного законодательства), но исключить вероятность ошибок и ложных результатов нельзя.

Если на выполнение ИФА оказывает влияние состояние иммунной системы человека, правильность выполнения ПЦР зависит от:

• соблюдения стерильности при заборе, транспортировке и работе с образцами крови пациента, чтобы исключить возможный контакт с контаминированными образцами;
• соблюдения температурного режима и других правил при хранении и перевозке пробирок с кровью;
• правильности постановки ПЦР (начиная от работы лаборанта и заканчивая функционированием автоматических диагностических систем);
• качества используемых лабораторных материалов.

Но количественный анализ проводится на основании уже выполненных исследований, которые однозначно указывают на наличие HCV (ИФА и качественная ПЦР). Поэтому при отрицательном результате на фоне подтвержденного диагноза исследование повторяют. Кроме того, обращают внимание, как обозначается гепатит С в анализах.

В некоторых клиниках могут пользоваться устаревшей системой, когда виремия указывается не в международных единицах, а в количестве копий. Иногда путаница возникает с подсчетом нулей в указанных цифрах. Именно поэтому расшифровкой обозначений в бланке результатов должен заниматься врач.

Преимущества количественного теста

Определение вирусной нагрузки возможно и с использованием других методик, включая серологические. Так, исследование на антиген core считают альтернативой количественной ПЦР.

Но большинство врачей отдают предпочтение ПЦР благодаря:

• доступности и качеству тест-систем: их производством занимаются ведущие мировые фармацевтические и медикотехнологические корпорации;
• быстроте и простоте выполнения;
• высокой чувствительности: современные методики ПЦР позволяют обнаружить РНК патогена в количестве 5 МЕ/мл;
• универсальности: количественное определение проводится одинаковыми методиками вне зависимости от генотипа HCV;
• объективности вне зависимости от состояния здоровья пациента (в отличие от ИФА), что позволяет проводить исследования на разных этапах диагностики и лечения;
• отсутствию влияния на результаты принимаемых лекарств.

Сейчас ПЦР остается основным методом количественного определения виремии. Тест используется повсеместно практически во всех лабораториях и больницах. Но во избежание ошибок, перед сдачей анализа нужно поинтересоваться, по какой технологии будет проводиться исследование, чтобы соотнести результаты дальнейших анализов.