Количественное определение рнк вируса иммунодефицита человека норма

ПЦР на РНК ВИЧ (Amplicor HIV-1 Monitor Test 1.5, фирма-изготовитель Roche; 800-526-1247)
Метод разветвленной ДНК (Versant HIV-1 RNA 3.0 Assay, фирма- изготовитель Bayer; 800-434-2447)
Изотермальная реакция амплификации последовательностей нуклеиновых кислот (NASBA) (NucliSens HIV-1 QT, фирма- изготовитель bioMerieux, 800-682-2666)

Как показано в таблице 2.4, у каждой тест-системы свой порог и диапазон чувствительности (J Clin Microbiol 1996; 34:3016; J Med Virol 1996; 50:293; J Clin Microbiol 1996; 34:1058; J Clin Microbiol 1998; 36:3392). Два стандартных отклонения (95% доверительный интервал) для результатов тестов составляют 0,3–0,5 log10 (т. е. результаты могут отличаться в 2–3 раза) (J Infect Dis 1997; 175:247; AIDS 1999; 13:2269). Это значит, что 95% доверительный интервал для значения 10 000 копий/мл составляет от 3 100 до 32 000 копий/мл. Значения вирусной нагрузки, полученные при использовании тест-системы Amplicor 1.5 (Roche) и методом рДНК (Versant 3.0), близки, за исключением нижнего участка линейного диапазона (

При определении вирусной нагрузки не-В-подтипов ВИЧ наблюдается значительно больший разброс показателей. Метод разветвленной ДНК (Versant 3.0) несколько превосходил остальные методики в отношении определения вирусной нагрузки ВИЧ подтипов A–D, F, G, CRF01_AE и CRF01_AG (межподтиповых рекомбинантных форм) и O; при использовании этого метода 83% результатов различались не более чем на 0,5 log10. При использовании Amplicor Monitor 1.5 этот показатель был 74%, а для NucliSens — 61% (J Clin Microbiol 2005; 43:3860). Результаты других исследований подтверждают эти данные (J Med Virol 2006; 78:883; J Acquir Immune Defic Syndr 2002; 29:330).

Таблица 2.4. Тесты на ВИЧ-1

Метаанализ 12 публикаций выявил наличие умеренных различий уровня вирусной нагрузки у мужчин и женщин: оказалось, что вирусная нагрузка у женщин в среднем на 0,23 log10 /мл (? в 2 раза) ниже, чем у мужчин (J Acquir Immune Defic Syndr 2002; 31:11). Однако эти различия исчезают при количестве лимфоцитов CD4 -1 и поэтому практически не влияют на решения относительно лечения (J Acquir Immune Defic Syndr 2000; 24:218; J Infect Dis 1999; 180:666; Clin Infect Dis 2002; 35:313; Lancet 1998; 352:1510; N Engl J Med 2001; 344:720).

Количественный метод определения РНК ВИЧ используется для диагностики острой ВИЧ-инфекции, прогноза вероятности передачи вируса, прогноза темпа прогрессирования ВИЧ-инфекции, выявления показаний к началу антиретровирусной терапии, а также для наблюдения за эффективностью лечения (Ann Intern Med 1995; 122:573; N Engl J Med 1996; 334:426; J Infect Dis 1997; 175:247; J Infect Dis 2002; 185:905).

Приведены из клинических стандартов Американского отделения Международного общества борьбы со СПИДом (IAS-USA) (JAMA 2006; 296:827) и Министерства здравоохранения и социальных служб США (DHHS) (www.aidsinfo.nih.gov/guidelines).

Гарантия качества. Вирусную нагрузку рекомендуется измерять на фоне стабильного клинического состояния, не ранее чем через 4 недели после вакцинации или перенесенной инфекции, всегда одним и тем же методом в одной и той же лаборатории.
Частота лабораторных обследований при наблюдении за эффективностью терапии. После двукратного измерения исходного уровня вирусной нагрузки контрольные измерения следует проводить регулярно, каждые 3–4 месяца (Clin Infect Dis 2001; 33:1060). В начале лечения и после его коррекции вирусную нагрузку измеряют через 1–4 недели (альфа-спад), затем через 12–16 недель и 16–24 недели. Об эффективности лечения свидетельствует снижение вирусной нагрузки на 0,75–1,0 log10 копий/мл от исходной через 1 неделю (Lancet 2001; 358:1760; J Acquir Immune Defic Syndr 2002; 30:167), снижение на 1,5–2 log10 копий/мл (до Интерпретация результатов. Значимыми считаются изменения уровня РНК ВИЧ на ?50% (на 0,3 log10 копий/мл).
На основании уровня вирусной нагрузки в крови нельзя судить о степени повреждения функции иммунной системы, способности популяции лимфоцитов CD4 к восстановлению, чувствительности вируса к антиретровирусным препаратам, вирулентных свойствах вируса, его способности к репликации и к образованию синцития из инфицированных клеток, а также о вирусной нагрузке в других тканях (например, в лимфатических узлах, в ЦНС, в ЖКТ, в выделениях из половых путей).
Факторы, повышающие вирусную нагрузку:
- смена доминирующего штамма ВИЧ, когда вирус, не способный образовывать синцитий (использующий в качестве корецептора хемокиновый рецептор CCR5), вытесняется вирусом, способным образовывать синцитий (использующим в качестве корецептора хемокиновый рецептор CXCR4);
- прогрессирование ВИЧ-инфекции;
- неудача антиретровирусного лечения из-за недостаточной противовирусной активности препаратов, недостаточных концентраций препаратов в организме, несоблюдения режима лечения и резистентности вируса;
- суперинфекция ВИЧ (J Infect Dis 2005; 192:438);
- острые инфекционные заболевания: на фоне активной формы туберкулеза вирусная нагрузка повышается в 5–160 раз (J Immunol 1996; 157:1271); на фоне пневмококковой пневмонии вирусная нагрузка повышается в 3–5 раз;
- прививки, в том числе введение противогриппозной вакцины и вакцины Pneumovax (против Streptococcus pneumoniae) (Blood 1995; 86:1082; N Engl J Med 1996; 335:817; N Engl J Med 1996; 334:1222). В этом случае повышение вирусной нагрузки небольшое и сохраняется от 2 до 4 недель.
Относительные преимущества различных тест-систем. У тестсистемы Versant 3.0 хорошая воспроизводимость результатов для вирусных нагрузок в диапазоне 75–500 000 копий/мл. Линейный диапазон для суперчувствительной тест-системы Amplicor составляет 50– 100 000 копий/мл. Эту тест-систему не следует использовать при обследовании пациентов, у которых ожидается более высокая вирусная нагрузка (J Clin Microbiol 2000; 38:2837). У метода NucliSens более широкий динамический диапазон (176–3 500 000 копий/мл), и его можно использовать для измерения количества вируса как в крови, так и в других биологических жидкостях и тканях, например, в семенной жидкости, спинномозговой жидкости, грудном молоке, слюне и вагинальных выделениях (J Clin Microbiol 2000; 38:1414).

Таблица 2.5. Сравнительная характеристика лицензированных FDA тест-систем, основанных на разных методах измерения вирусной нагрузки

Roche	Bayer	bioMerieux
Контактный телефон	800-526-1247	800-434-2447	800-682-2666
Торговое название	Amplicor HIV Monitor 1.5	Versant HIV-1 RNA 3.0	NucliSens HIV-1 QT
Техника	ОТ-ПЦР	рДНК	NASBA
Сравнение результатов	Результаты, получаемые методом ОТ-ПЦР, сопоставимы с результатами, получаемыми методом рДНК (Versant) с использованием тест-систем 2.0 и 3.0	Результаты, получаемые методом рДНК, сопоставимы с результатами, получаемыми методом ОТ-ПЦР (Amplicor)	Результаты, по-видимому, сопоставимы с результатами, получаемыми методами ОТ-ПЦР и рДНК, но пока не получено достаточно данных
Преимущества и недостатки	Меньше ложноположительных результатов у ВИЧ-отрицательных пациентов по сравнению с методом рДНК	Выполнение исследования занимает меньше времени у лаборанта. Хороший динамический диапазон, но выше порог определения вирусной нагрузки	Может применяться для обнаружения вируса в тканях и биологических жидкостях, например, выделениях половых путей. Самый большой динамический диапазон.
Динамический диапазон	Стандартный (Amplicor 1.5): 400–750 000 копий/мл Суперчувствительный (Ultra-Direct 1.5): 50–100 000 копий/мл	рДНК 3.0: 75–500 000 копий/мл*	NucliSens HIV-1 QT: 176–3 500 000 копий/мл; динамический диапазон зависит от объема
Подтип вируса	Тест-система 1.5: от A до G	от A до G	от A до G
Необходимый объем материала для исследования	Amplicor: 0,2 мл Суперчувствительный: 0,5 мл	1 мл	От 10 мкл до 2 мл
Пробирки	ЭДТА (пробирка с сиреневой крышкой)	ЭДТА (пробирка с сиреневой крышкой)	ЭДТА, гепарин, цельная кровь, любая биологическая жидкость, МКПК, семенная жидкость, ткани и т. д.
Требования	Отделить плазму не позже чем через 6 часов после забора крови, перед транспортировкой заморозить при температуре –20°С или –70°С.	Отделить плазму не позже чем через 4 часа после забора крови, перед транспортировкой заморозить при температуре –20°С или –70°С.	Отделить сыворотку или плазму не позже чем через 4 часа после забора крови, перед транспортировкой заморозить при температуре –20°С или –70°С.

* Нижнее пороговое значение вирусной нагрузки, установленное FDA, составляет 75 копий/мл. За пределами США нижнее пороговое значение вирусной нагрузки составляет 50 копий/мл.

За время, прошедшее со дня открытия вируса иммунодефицита человека, в лечении наметился серьезный прогресс. Но до сих пор инфицированных и их близких интересует вирусная нагрузка при ВИЧ, ее показатели и норма. Эти данные учитываются при подборе терапевтических методов, продлевающих годы. При отсутствии лечения, людям с ВИЧ врачи прогнозируют до 10 лет жизни, при правильно подобранном лечении – до 70. Не последнее место в таком изучении занимают не только антитела к ВИЧ-инфекции, но и количество клеток, отвечающих за иммунитет, Т-лимфоцитов, или CD-4, – именно они могут обезопасить инфицированного от сопутствующих заболеваний, ведущих к смертности, или СПИДу. Прояснить ситуацию помогает общий анализ крови, назначаемый и при ВИЧ.При низком показателе антител к вирусу достаточно проходить обследование дважды в год, при увеличенных, при беременности, приеме сменных групп антиретровирусных препаратах – раз в 2-4 недели – 3 месяца.

Анализы крови при вирусе иммунодефицит человека
Диагностика
- Полимеразная цепная реакция
- Иммуноблоттинг
Нормы
Что такое вирусная нагрузка
Что такое иммунный статус
Иммунный статус и вирус
Результаты и расшифровка анализов
Пути передачи вирусной инфекции

Анализы крови при вирусе иммунодефицит человека

Исследование биологического материала, которым выступает кровь, остается наиболее информативным методом. Перед тем как сдавать анализ ВИЧ, стараются учитывать особенности поведения вируса. Он проявляется в плазме, хотя обнаруживается и в семенной жидкости, и во влагалищной слизи. Анализ на ВИЧ – многокомпонентная диагностика. Кровь берут для различных исследований:

Анализ крови на ВИЧ. Часто впервые обнаруживают вирус именно при сдаче анализа крови на ВИЧ и гепатит.
Общий анализ крови также назначается при ВИЧ. Он покажет специфические показатели лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина, скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Но эти же нюансы иногда указывают на другие вирусные инфекции, в случае отклонения от нормы назначаются другие исследования крови.

Важно! Если вы не знаете, как делаются тесты на ВИЧ, натощак или нет, врачи ответят: забор биологического материала осуществляется на голодный желудок. Это обеспечивает достоверный результат.

Экспресс-анализы на ВИЧ. Они дают результат в течение 30 минут. Проводят изучение не только крови, но и слюны, мочи. Тест информативен в плане диагностики заражения и количества антител. Иногда случается, что тест на ВИЧ положительный, анализ отрицательный. Результат ложноотрицательный, если заражение произошло недавно. Пройти это обследование нужно будет через 6 недель.
Иммуноферментное исследование. Из крови выделяют сыворотку, где и ищут антитела к вирусу иммунодефицита человека. На вопрос пациентов, сколько делается анализ на ВИЧ, врачи отвечают: до 10 дней. Но и здесь вероятность ошибочных результатов сохраняется. На это влияют аутоиммунные заболевания, обострения хронических болезней, раковые опухоли.

Задумываясь, где можно сдать анализ на ВИЧ, вам стоит обратиться в частную лабораторию, в центры профилактики и борьбы со СПИДом и ВИЧ, но проще всего сдать кровь в государственной поликлинике по месту жительства. Положительным аспектом каждого медицинского учреждения остается анонимность.

Узнать, сколько стоит ваш анализ на СПИД, можно заранее. Цена на ВИЧ-анализ колеблется от 300 до 12 000 рублей. Более дорогими по стоимости остаются исследования в частных лабораториях и высокочувствительные тесты.

Диагностика

Условно диагностические исследования делят на 2 вида. Первая группа помогает определить факт инфицирования. Такие тесты могут установить контроль над течением инфекции, указывают на результативность лечения.

Вторая группа определяет антитела к вирусу иммунодефицита человека, антиген р24 (серологические анализы) и РНК вируса, ДНК провируса (молекулярно-генетические тесты).

Детальная диагностика назначается после того, как был проведен общий анализ крови, что при ВИЧ желательно сделать. Инфицирование ВИЧ протекает в разных стадиях: от бессимптомного состояния до острой фазы, как СПИД. Во время него организм страдает от оппортунистических болезней, в то время как иммунитет здоровых людей им может противостоять. Это продемонстрируют общие показатели кровяных телец.

Диагностика помогает определить и количество лейкоцитов. От соотношения их и антител к вирусу тоже зависит будущее лечение и качество жизни. Кроме общих методов используют и специфические приемы.

Это один из эффективнейших методов диагностики инфицирования. Его результаты правдивы на 90 – 99 %: тест выявляет не антитела к вирусу, а его РНК. Этот анализ на ВИЧ отличают короткие сроки готовности – до 3 дней.

Это высокочувствительный и не самый дешевый метод распознавания вирусной инфекции. Он заключается в разделении белков вируса, после чего их перемещают на нитроцеллюлозную мембрану. После процедуры электрофореза его антигены, разные по молекулярному весу, сравнивают с образцами на тест-полоске. Метод показывает, на какой стадии иммунодефицита находится человек.

Нормы

У здорового человека иммунный показатель CD-4 составляет 400-500 – 1600 клеток/мл. Если цифра уменьшается до 200-500, меняется каждые полгода на 45 единиц – высока вероятность инфицирования. Но учитывается и возможность заболеваний, влияющих на иммунные процессы, беременность и грудное вскармливание у женщин.

Также анализ крови на ВИЧ имеет нормы и для инфицированных людей. Если показатель клеток снизился до 350, пора начинать терапию. Благодаря этому не разовьются опасные для инфицированных людей сопутствующие заболевания.

Если цифра снизилась до 200 единиц, часто назначают высокоактивную антиретровирусную терапию. Страдающим иммунодефицитом советуют сдать анализы на ВИЧ и гепатит. Заболевания печени часто сопутствуют опасному вирусу, усугубляют состояние иммунитета.

Важно! Половина случаев инфицирования диагностируется после того, как был проведен анализ крови на гепатит, rw и ВИЧ: после постановки женщины на учет по беременности, во время профосмотров, перед сдачей донорской крови.

Что такое вирусная нагрузка

Инфицированных интересует не только значение CD-4. Важно количество частиц опасного вируса в плазме крови. Нагрузка может показывать ошибочный результат из-за нарушения условий прохождения тестов, после вакцинаций, вследствие перенесенных заболеваний. Это касается и здоровых людей. Но если через месяц показатель увеличивается в 3-5 раз, это повод задуматься.

Многое зависит от состояния здоровья инфицированного. Его характеризуют кровяные тельца, в частности – отвечающие за борьбу с чужеродными телами, среди которых и вирусные инфекции.

Что такое иммунный статус

Совокупность количественных и качественных показателей иммунитета – это иммунный статус. Его измерение лучше проводить в одно и то ж время суток, в одной лаборатории, при помощи одинаковых тестов. Различие в них иногда приводит к ложным результатам.

Иммунный статус и вирус

Состояние инфицированного человека зависит от соотношения главных показателей: количества частиц вируса и клеток CD-4, иммунный статус и вирусная нагрузка – обязательные параметры для диагностики и возможного лечения. Задача врачей – повышать иммунный статус, который борется с вирусом. Однако он способен поражать клетки CD-4, их количество может резко снизиться до критического показателя. Именно поэтому периодически проводится диагностика пациента.

Результаты и расшифровка анализов

Показатели иммуноферментного анализа могут отличаться. Они определяют разные белковые соединения, присутствующие в оболочках вируса. Наборы белков у тест-систем могут отличаться, но если обнаруживаются 3 основные – тест даст положительный результат.

Ученые выделяют следующие показатели:

До 20 тысяч копий/мл – недостаточная концентрация РНК. Для зараженного человека это хороший результат. У здорового показатель должен быть равен нулю.
От 20 тысяч до 100 тысяч – средняя стадия, характеризуется первичными или вторичными проявлениями иммунодефицита.
От 100 тысяч до 450 тысяч считается смертельно опасным показателем. Чем выше цифра, тем больше вероятность развития СПИДа.

Важно! Можно повторно сдать кровь при ложноотрицательном, ложноположительном и неверном результате. Отрицательный результат правдив, если риск инфицирования отсутствовал в течение 12 недель до забора крови.

Пути передачи вирусной инфекции

Стоимость анализа на ВИЧ делает его доступным для каждого желающего. Актуальность проблемы подтверждают распространенные способы передачи инфекции: это использование нестерильных медицинских инструментов, в частности шприцов, путь от матери к ребенку, при незащищенном половом акте, при переливании крови.

На вопрос, через сколько можно сдавать анализы на ВИЧ после возможного заражения, врачи отвечают: нужно выждать время от 3 недель до 3-5 месяц.

Что делать инфицированным и их близким:

Следить за количеством копий РНК вируса ВИЧ. Это снижает риск инфицирования матерью плода, а также увеличивает продолжительность жизни зараженного.
Своевременно сдавать анализы и ответственно проходить курсы антиретровирусной терапии.
Помнить, что не только определение вирусной нагрузки при ВИЧ –важные показатели, их соотношение с результатами на иммунный статус – главная составляющая лечения. Тесты сдаются регулярно.

Поскольку лекарство от вируса ВИЧ не изобретено, людям с вирусной нагрузкой нужно следить, что показатель вирусных частиц не выходил за пределы нормы. Даже при наличии этого диагноза вы можете продолжать полноценную жизнь.

ВИЧ
Гарднереллез
Кондиломатоз
Молочница
Сифилис
Трихомониаз
Баланопостит
Герпес
Гонорея
Микоплазмоз
Уреаплазмоз
Уретрит
Хламидиоз
ЗППП

Лабораторные тесты для назначения адекватной терапии bDNA - метод разветвленной ДНК-гибридизации

Динамичные характеристики ВИЧ-инфекции

Антитела HLA.
Наличие антител к другим ретровирусам человека (например, ВИЧ-2).
Неправильно распознанная перекрестная реакция с другими белками невирусной природы у здоровых.
Болезни соединительной ткани.
Поликлональные гаммапатии.
Гипербилирубинемия.
У доноров крови с низким риском в 4,8% раза меньше, чем при РНК-ПЦР.

Свежая ВИЧ-инфекция; тест обычно становится положительным в сроки от 6 недель до 6 месяцев.
Больные СПИДом с развернутым прогрессирующим иммунодефицитом, поскольку выработка антител уже прекращается.
Вирус имунодефицита обезьян (ВИО) в

Культура вируса ВИЧ-1

ВИЧ-1 может быть выделен из сыворотки, плазмы, моноцитов периферической крови, ЦСЖ, слюны, семенной жидкости, цервикальных выделений и грудного молока. Виремия начинается примерно на 4-11 день после заражения, достигает пика на 3-ю неделю, затем снижается до стабильного заданного значения к 3-му месяцу.

Подтверждение диагноза СПИД, если серологические тесты неубедительны (например, у новорожденных от ВИЧ-инфицированных матерей).

Заключительным этапом диагностики является именно положительный результат культуры. Могут встречаться и ложно-негативные результаты.

Метод используют в исследованиях или клинических испытаниях. Полезен в необычных случаях. Не является стандартным методом диагностики: длительный по времени, потенциально опасный и дорогой.

Новые дивергентные штаммы ВИЧ-1 группы 0, идентифицированные в Африке, в США встречаются редко и могут быть трудны в распознавании; сейчас существует только 2 диагностических комплекта, одобренных Управлением по контролю за продуктами и медикаментами (США).

Корреляция между числом СБ4-клеток и выраженностью заболевания при ВИЧ-инфекции

Количественный анализ РНК ВИЧ-1

Определяют вирусную нагрузку RT-PCR (ОТ-ПЦР), bDNA-тестом, последовательностью нуклеиновой кислоты или усилением реакции амплификации или транскрипционно-опосредованной амплификации с обнаружением в пределах 40—10000000 копий/мл.

(должен быть объединен с подсчетом CD4+; каждый тест проводят с интервалом 1—2 недели)

Превосходят подсчет CD4+. Коррелируют с подсчетом CD4+, ответом на терапию, клинической стадией, прогрессированием заболевания и прогнозом летального исхода.

Основной метод при выборе терапии

Создает основное направление для отдельных пациентов.
Наилучший критерий эффективности проводимой терапии. Критерий ответа о долгосрочных результатах на период антивирусной терапии или латентный период.
В течение 4—8 недель эффективной вирусологической терапии должно происходить снижение вирусной нагрузки более чем на 1—2 loglO копий/мл. Неудача в достижении ВИЧ ниже определяемого уровня.
Начало терапии у ВИЧ-инфицированных пациентов зависит от РНК ВИЧ и числа CD4+.
Перед началом или изменением терапии (в двух случаях) и в промежутках соответственно (например, 4 недели, 3-4 месяца).
Не используют в процессе успешной терапии или не позднее 4 недель после лечения интеркур- рентных инфекций, резолюции симптоматических болезней или иммунизации.
Изменение клинического статуса или снижение числа CD4+.
Предиктивные значения уточняют оценку улучшения, если они объединены с определением числа CD4-K
Антиретровирусная терапия пациентов с высокой вирусной нагрузкой дает более выраженный эффект.
Заместительный маркер для лекарственной резистентности.
Число CD4+ является самым важным тестом для оценки иммунного статуса, эффективности терапии ВИЧ-инфекции; обычно назначают в комплексе с анализом РНК ВИЧ-1.
Результат должен быть получен немедленно после положительного вирологического теста и затем каждые 3 месяца у детей и каждые 3—6 месяцев у взрослых.
Вакцинация или умеренные интеркуррентные заболевания могут обусловить транзиторное снижение числа и процента CD4+.
Антиретровирусная терапия рекомендована, если число CD4+
Лимфопения в значительной степени обусловлена прогрессирующим снижением CD4+ и повышением CD8+ (при флоуцитометрии).

Лимфопения выявляется у 50% пациентов с саркомой Калоши и у всех пациентов с оппортунистическими инфекциями.

Общее число В-клеток и натуральных киллеров обычно в норме

У инфицированных младенцев с числом CD4+
Число CD4+ может меняться в
Число CD4+ снижается примерно на 50-100 клеток/мкл ежегодно без лечения ВИЧ-инфекции.
Число CD4+ быстро повышается в первые 4-12 недель высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ).

Прогноз и мониторинг эффективности терапии

Начальный пик в течение первичной инфекции, затем быстрое снижение (
Вирусная нагрузка после 6-12 месяцев прогнозирует длительное прогрессирование до СПИДа. Вирусная нагрузка > 50000 копий/мл указывает на максимальный риск, кратчайшее время клинического прогрессирования и летального исхода; > 500 копий/мл — невысокий риск.
У ребенка с вирусной нагрузкой > 100000 копий/мл высокий риск смерти.

3-кратные изменения и выше (или 0,5 loglO) у взрослых и 5-кратные изменения и выше (или 0,7 loglO) в возрасте моложе 2 лет являются существенными по причине биологических вариаций у одного и того же человека.
Значения неравнозначны в разных исследованиях, может наблюдаться > 2-кратная разница; один тип исследования следует использовать для одного и того же пациента; если изменения наблюдаются от раза к разу, то нужно применить другие формы диагностики.
ВИЧ-инфицированные лица с вирусной нагрузкой ниже определяемого уровня считаются контагиозными.
Репликация ВИЧ может продолжаться в различных тканях.

Риск развития СПИДа или летального исхода в следующие после установления диагноза 10 лет

Повышенная чувствительность к контаминации обусловливает ложно-позитивные реакции.

Неподходящая коллеция образцов, неправильный подход (например, разделение плазмы в течение 4 часов с последующим замораживанием) могут обусловить острую деградацию РНК ВИЧ-1. Антикоагулянт гепарин в большей степени, чем ЭДТА, обусловливает низкое количество РНК, причем значения ниже в сыворотке, чем в плазме.

Интеркуррентные инфекции, заболевания (например, туберкулез, пневмония, HCV, Candida, Pneumocystis jiroveci или вакцинация, в том числе от столбняка, гриппа, пневмококка) обусловливают транзиторное повышение; терапевтические решения должны учитывать перспективные тенденции.

Не изменяется под воздействием антиретровирусных препаратов, триглицеридов, НЬ и т. д.

Вирус иммунодефицита человека – одно из самых страшных заболеваний прошлого и нынешнего столетия. Его изучение, поиск вакцин и препаратов приносят определенные плоды. Однако полностью победить опасный недуг на сегодняшний день специалистам в области медицины не удалось. Современные методы диагностики позволяют не только выявить вирус иммунодефицита на ранней стадии, но и контролировать течение заболевания в дальнейшем. Для того, чтобы принять решение о необходимости применять ту или иную терапию, используется РНК ВИЧ-анализ. Применяется он и для выявления данного заболевания. Здесь важно отметить, что анализ РНК ВИЧ не является повсеместным. Применяют его лишь в случае необходимости. Как проводится такое исследование, в каких случаях его применяют и какова его достоверность?

Вирус ВИЧ по РНК: суть исследования

Прежде чем говорить о том, каким образом производится определение РНК ВИЧ, следует выяснить, что обозначает эта аббревиатура, и какую роль она играет в организме. Рибонуклеиновая кислота – это молекула, содержание которой отмечается во всех живых организмах и некоторых вирусных инфекциях. Синтез этой молекулы производится на основе матрицы дезоксирибонуклеиновой кислоты. Отвечают за эти процессы определенные ферменты. Это полимеразы рибонуклеиновой кислоты.

Суть исследования такого типа заключается в проверке генного материала вируса. Для того чтобы произвести РНК анализ на ВИЧ специалисты в области медицины используют полимеразную цепную реакцию. ПЦР позволяет многократно увеличить объемы используемого для исследования биологического материала, благодаря чему он проверяется в несколько этапов с использованием сравнительного метода. Стоит отметить, что используется ПЦР на РНК не только при ВИЧ. Такая методика позволяет выявить большое количество наследственных заболеваний, некоторые вирусы и инфекции. Применяется она и для определения наследственных генетических патологий. В качестве биологического материала используется сперма, слюна и кровь. В случае с вирусом иммунодефицита предпочтительным материалом считаются сыворотка и плазма крови.

Тест РНК ВИЧ производится в несколько этапов. После того, как у пациента осуществлен забор крови, она направляется в лабораторию. Биологический материал помещают в специальный реактор, где происходит его расщепление. Для синтеза применяют специальные ферменты. Далее в искусственно созданных условиях из одной молекулы РНК синтезируют две, из двух четыре и так далее. При достижении их нужного количества, происходит сравнение с разными типами вирусов. Кстати, на выходе из одной молекулы рибонуклеиновой кислоты получается несколько сотен или тысяч молекул. РНК ВИЧ ультрачувствительный бывает нескольких видов. Здесь все зависит от цели исследования.

В современной медицине применяется два метода исследования рибонуклеиновой кислоты. Речь идет о количественном и качественном РНК ВИЧ. Оба эти способа исследования схожи, но несут они разные цели. РНК ВИЧ количественный - это определение вирусной нагрузки. Количество вирусных молекул генетической ткани может говорить о многом. В частности о том, на какой стадии находится заболевание в данный момент. Всем известно, что у вируса иммунодефицита их несколько. После наступления сероконверсии количество клеток вируса увеличивается, и его обнаружение становится возможным. На начальных этапах заболевания РНК ВИЧ количественный, норма которого устанавливается в лаборатории, позволяет не только обнаружить вирус иммунодефицита, но и принять решение о необходимости приема антиретровирусной терапии. Определив количественную вирусную нагрузку, специалист может принять решение о том, какую схему терапии необходимо использовать пациенту.

РНК ВИЧ качественный для новорожденных используется часто. Проводить его можно и у взрослых людей, например, для того, чтобы определить тип вируса. Но стоимость такого исследования не позволяет внедрить его во все медицинские учреждения. Поэтому применяют его в педиатрии и неонатологии.

Достоверность РНК ВИЧ, проводимого с чувствительностью 20 ме/мл, велика. Она составляет примерно девяносто один процент. Однако в современной медицине существуют методы, достоверность которых выше. Именно поэтому для определения наличия или отсутствия данного диагноза используется иммуноферментный анализ или иммунный блоттинг. Их достоверность несколько выше. Она составляет девяносто восемь – девяносто девять процентов.

Если говорить о самых оптимальных сроках проведения проверки, то медики назначают ее минимум через месяц после инфицирования. Если основная цель – определить, имеется ли у больного данный диагноз, проводить анализ РНК ВИЧ через 4 недели не стоит, достоверность его может быть неточной. Лучше сделать это через пять – шесть недель.

Если РНК ВИЧ не обнаружены, что это значит? Этот вопрос нередко задают специалистам в области медицины. Это может означать, что вирус иммунодефицита отсутствует, или говорит о том, что проверка была проведена слишком рано.

Предпочтительным методом проверки новорожденных на предмет наличия или отсутствия вируса иммунодефицита в том случае, если они родились у инфицированной матери, является анализ рибонуклеиновой кислоты. В этом случае РНК ВИЧ 20 ме/мл производится в первые 10 дней жизни малыша. Выявить наличие заболевания возможно и при помощи иммуноферментного анализа. Однако перед медиками стоит другая задача. Речь идет о необходимости определить, какие антитела вырабатывает организм малыша. Дело в том, что у младенца, рожденного от инфицированной матери, они будут в любом случае. Однако, иногда это всего лишь защита иммунной системы, а не факт заражения. Повторно достоверность ПЦР РНК ВИЧ проверяется через 6 месяцев.

Читайте также: