Количество копий днк вируса

По оценкам эпидемиологов, в России около 5 млн человек имеют HBV вирус в крови. В мире эта цифра достигает 2 миллиардов, то есть, каждый четвертый житель планеты болен или является носителем вируса.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Что такое HBV?

Строение ДНК HBV

Вирус гепатита В состоит из 3 антигенов:

Поверхностный антиген ( HBsAg ) формирует оболочку вируса.
При заболевании анализ покажет высокие значения HBsAg.
Антиген инфекциозности ( HBeAg ) обеспечивает повышенную заразность HBV.
Ядерный, или сердцевидный антиген, тесно связанный с ДНК-полимеразой вируса ( HBcAg, он же HBcorAg ).

Молекула ДНК HBV состоит из двух цепочек, замкнутых в кольцо. Одна из цепочек полная, содержит около 3200 нуклеотидов. Другая цепь укороченная , в ней 1800-2800 нуклеотидов. За синтез белков и воспроизводство вирусных частиц отвечают последовательности ДНК. Ген Р кодирует полимеразу, ген С – HBcAg, ген S отвечает за HBsAg, ген Х формирует белок, регулирующий экспрессию генов.

Размножение HBV происходит в гепатоцитах – клетках печени. Элементы вируса оказываются в крови, слюне, сперме и других биологических жидкостях человека.

Анализ крови на HBV

Для диагностики заражения HBV применяют следующие исследования:

выявление антигенов вируса;
исследование антител к компонентам вируса гепатита В;
обнаружение ДНК HBV методом ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Анализ методом ПЦР очень чувствителен. Присутствие ДНК вируса в крови измеряют качественно или количественно.

Качественный анализ определяет присутствие или отсутствие HBV DNA (ДНК) в исследуемом образце. При положительном результате проводят количественное исследование, которое показывает концентрацию ДНК вируса. На основе результатов анализа делают прогноз перехода болезни в хроническую стадию. Если после 3-6 месяцев терапии концентрация HBV DNA не снизится хотя бы в 10 раз, схему лечения меняют.

Исследование методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляет даже мутантные штаммы вируса. Анализы на антигены и антитела в этом случае не дадут полной картины. Какой-либо из антигенов при заражении мутантной инфекцией может отсутствовать, что приводит к неверному толкованию результатов.

Для исследования нужна венозная кровь. Требуется стандартная подготовка к сдаче крови из вены: накануне избегать жирной пищи и сильных нагрузок, за час до манипуляции не курить, минут 20 посидеть спокойно. Если кровь берут утром, явиться в лабораторию натощак. При сдаче анализа в другое время суток не есть хотя бы 4 часа.

Определение антител

В тех случаях, когда человек заражен немутантным вирусом HBV, анализ на выявление антител информативен. Изменения значений титров говорит не только о присутствии вируса гепатита в организме, но и о стадии заболевания или перенесенной инфекции в прошлом.

При заражении HBV для связывания антигенов вируса организм вырабатывает специфические антитела: anti-HBcor, anti-HBe, anti-HBs.

Анализ anti-HBcor сумм. включает anti-HBcor IgM и anti-HBcor IgG. Anti-HBcor IgM свидетельствуют об острой фазе болезни, anti-HBcor IgG говорят о перенесенной инфекции. Антитела к ядерному антигену (cor) классов M и G обнаруживаются при остром гепатите В ещё до желтухи или в первые дни проявлений болезни. Антитела М циркулируют в крови 3-5 месяцев, иногда сохраняются на протяжении года. Антитела G остаются на всю жизнь.

Anti-HBs-антитела появляются на этапе выздоровления. В зависимости от состояния иммунитета больного, этот период длится от месяца до года. Антитела к поверхностному антигену защищают от вируса. Их значение проверяют для оценки эффективности прививки от гепатита В.

Людям с высоким риском заражения HBV рекомендуется контроль титра Anti-HBs через 5 лет после вакцинации. Если уровень антител снижен, значит, пора ставить новую прививку.

Расшифровка результатов

Качественный анализ ПЦР имеет два возможных результата: ДНК вируса либо обнаружена, либо нет. Современные тесты выявляют инфекционный агент при концентрации от 100 МЕ/мл (международных единиц на миллилитр плазмы крови). Более низкие показатели считаются отрицательным результатом.

Чувствительность количественного теста выше. Результат представлен в МЕ/мл или количестве копий ДНК.

Как правило, при умеренной виремии после острого гепатита больной полностью выздоравливает. Концентрация ДНК HBV в пределах 2*10 4 –2*10 6 приводит к хронизации заболевания в каждом четвертом случае. При более высоких показателях гепатит переходит в хроническую форму в 98-100% случаев.

200 копий ДНК соответствуют 90 МЕ/мл. Это значение – нижний порог чувствительности большинства амплификаторов (приборов, в которых происходит подсчет ДНК методом ПЦР). Зная соотношение, можно перевести результат из одной системы в другую.

Что делать, если HBV или антитела к вирусу обнаружены?

При назначении лечения врач руководствуется не только значениями маркеров гепатита в крови. Он учитывает значения билирубина, АЛТ и АСТ, при необходимости назначает биопсию или эластографию печени. Высокие шансы на полное выздоровление у тех, кто заразился и переболел острым гепатитом В будучи взрослым. Заражение в возрасте до 5 лет наиболее опасно.

Если результаты анализов говорят о носительстве HBV, потребуется контроль каждые 3-6 месяцев. Носитель должен позаботиться о безопасности близких: возможно заражение через зубную щетку, бритву, маникюрные инструменты. Малейшие травмы кожи следует закрывать пластырем.

Больным гепатитом также необходим повтор анализа крови каждые 3 месяца. По изменению в концентрации маркеров судят об эффективности терапии. При необходимости врач изменит схему лечения.

Положительный анализ на гепатит В – основание для проведения исследования на гепатит D. Последний более опасен, но не передается без HBV.

Заразность гепатита В почти в 100 раз выше, чем ВИЧ. К тому же, вирус очень устойчив во внешней среде. От заболевания убережет вакцинация. Курс прививок обеспечивает защиту на срок от 5 до 25 лет. Заболеть гепатитом от прививки невозможно, так как в вакцине нет ДНК вируса, есть только поверхностный антиген. Помимо вакцинации, для защиты от инфицирования нужно принимать такие меры:

правильно стерилизовать многоразовые инструменты, связанные с нарушением целостности кожи;
там, где возможно, применять одноразовые инструменты и иглы, следить за целостностью упаковки;
избегать контакта с биологическими жидкостями посторонних людей;
не пользоваться чужими средствами личной гигиены, никому не давать своих.

Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых тест-системой, составляет 75,0 - 1,0*10^8 МЕ/мл.

Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.

Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

МЕ/мл (международная единица на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.

Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рождённые от матерей с ВГВ.

Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.

Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.

Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке ( 5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови, присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).

Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
При остром и хроническом вирусном гепатите В.
При микст-гепатитах.
До и во время противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено

"Не обнаружено" – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл);
1*10^8 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых тест-системой, составляет 75,0 - 1,0*10^8 МЕ/мл.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.

Кто назначает исследование?

Литература

Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. - К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 601-654.
Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.

Количественный анализ на ВГС – молекулярно-биологическое исследование, суть которого заключается в подсчете количества копий гепатита С в 1 мл крови. Проводится методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Исследование выполняется для определения уровня вирусной нагрузки, которая учитывается при подборе схемы лечения. Повторный анализ сдают во время противовирусной терапии (ПВТ) для оценки ее эффективности. Если концентрация вирусов в крови не понижается, увеличивают дозировку препаратов или полностью меняют схему лечения.

Когда нужен подсчет количества копий вируса

Количественная ПЦР (Real-time PCR) – лабораторный анализ, основанный на выявлении участков РНК или ДНК возбудителя инфекции в исследуемом биоматериале. Чтобы определить уровень виремии при заражении Hepatitis C Virus (HCV), подсчитывают число копий вируса в 1 мл крови.

Количественный анализ на гепатит С выполняется при:

обнаружении антител к вирусу гепатита;
положительном качественном анализе на HCV-инфекцию;
микст-гепатитах (заражении несколькими гепатитами);
планировании антивирусной терапии;
контроле результативности ПВТ;
прогнозировании осложнений.

Определение числа копий вируса гепатита С (ВГС) рекомендовано на всех этапах лечения. Уменьшение концентрации РНК свидетельствует о положительной динамике, высоких шансах на достижение устойчивого вирусологического ответа (УВО).

Количественный ПЦР-анализ – молекулярно-биологическое исследование, по результатам которого оценивают вирусную нагрузку и эффективность ПВТ.

Методы диагностики

При подозрении на гепатит С выполняют 3 основных типа ПЦР – качественный, генотипирование и количественный. В первом случае выявляют генетический материал возбудителя, во втором – уточняют штамм, а в третьем – подсчитывают число копий вируса.

Полимеразная цепная реакция определяет болезнетворные микроорганизмы путем обнаружения РНК или ДНК в пробах. Для подсчета копий генетического материала многократно удваивают отдельные фрагменты нуклеиновой кислоты, которая содержится в ядрах патогенов. В присутствии ДНК-полимеразы копируются строго определенные участки РНК возбудителя гепатита.

Этапы ПЦР-диагностики для подсчета числа копий ВГС:

Выделение генетического материала. Из капли крови выделяют РНК возбудителя гепатита. Для этого прибегают к центрифугированию и растворению осадка.
Копирование участков РНК. Пробирка с рибонуклеиновой кислотой помещается в термостат, в котором она подвергается многократным циклам нагрева и охлаждения. Амплификация включает несколько фаз – денатурацию, отжиг и достраивание матричной цепи. К концу второго этапа в пробирке накапливается много копий вируса гепатита, которые можно идентифицировать и посчитать.
Электрофорез. Полученный субстрат помещают в специальную форму, заполненную гелем. Через исследуемый образец пропускают ток, вследствие чего копированные фрагменты нуклеиновых кислот отталкиваются друг от друга. Они становятся хорошо различимыми в лучах ультрафиолета, поэтому лаборант может определить количество РНК.

При выполнении Real-Time ПЦР в исследуемый материал добавляют раствор с флуоресцентными метками. Это позволяет определять число копий гепатита после каждого цикла подогрева и охлаждения.

Виды ПЦР для подсчета копий HCV:

Метод разветвленной ДНК. Чувствительность тест-системы не превышает 500 МЕ/мл, поэтому подсчитать копии вируса при минимальной вирусной нагрузке невозможно. Суть метода заключается в применении 2 нуклеотидных зондов. Первый связывается одним концом с РНК патогена, а другой – с искусственно созданной разветвленной ДНК. После гибридизационной амплификации – увеличения числа копий ВГС – в среду вносится второй меченый зонд. Он связывается с разветвленной ДНК, за счет чего удается визуализировать копии РНК в ультрафиолетовом свете.
Метод транскрипционной амплификации (ТМА). Высокочувствительный анализ выявляет возбудителя гепатита С при его минимальной концентрации в крови – от 5 МЕ/мл. Перед выполнением стандартной ПЦР синтезируют комплементарную ДНК (кДНК) методом реакции обратной транскрипции. Для него применяется фермент ревертаза – обратная транскриптаза. Чтобы количество копий кДНК точно соответствовало числу исследуемой матричной РНК (мРНК), в среду вносят праймер. В 90% случаев применяют гексамеры – специальные полимеры, способные транскрибировать РНК.

Real-time PCR – высокочувствительный метод, в рамках которого удается выявить ВГС при минимальном количестве копий в крови – от 50 МЕ/мл. При сомнительных результатах серологического теста рекомендуется использовать ультра-тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл.

Расшифровка анализа на вирусную нагрузку

Результаты количественного анализа на гепатит С оцениваются гепатологом или инфекционистом путем сравнивания полученных данных с нормой. В зависимости от уровня виремии врач подбирает оптимальную дозу лекарств и продолжительность ПВТ.

Количество копий, МЕ/мл	Трактовка результата
не обнаружено	возбудитель гепатита отсутствует или его концентрация находится за порогом чувствительности тест-системы
до 3*10^4	низкая вирусная нагрузка
от 310^4 до 810^5	средний уровень виремии
выше 8*10^5 МЕ/мл	высокая вирусная нагрузка

Чем ниже вирусная нагрузка, тем благоприятнее прогноз терапии гепатита С. При высокой виремии лечение начинают как можно раньше, что связано с большим риском осложнений.

Между количеством копий ВГС и тяжестью течения гепатита С нет прямой взаимосвязи. Чтобы оценить структурные изменения в печени, требуются инструментальные и аппаратные исследования.

Что может исказить результаты анализа:

нарушение лаборантом правил антисептики;

неправильный сбор и хранение биоматериала;

употребление перед сдачей крови препаратов с гепарином;

игнорирование правил подготовки к исследованию.

Количественная ПЦР – анализ, при котором определяются копии РНК возбудителя и инфекционная нагрузка. Результаты исследования учитываются при разработке стратегии лечения, оценке ее эффективности.

Гепатит – это одно из самых опасных и трудно диагностируемых вирусных заболеваний. Чтобы с точностью поставить диагноз и выбрать метод лечения врач может назначить целый ряд анализов: от анализа крови на антитела до УЗИ печени. Но, сам гепатит диагностируется по крови, все дополнительные исследования предназначены в основном для понимания насколько вирус повредил печень.

На сеансе доктор может назначить вам метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это наиболее современный и действенный метод изучения гена вируса и его возможностей. Такая диагностика способна установить разновидность заболевания и определить его дальнейшую мутацию в организме больного гепатита.

Что такое ПЦР и его виды

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце.

Анализ проводится путем забора крови, которую в последующем помещают в специальные реактивы, в которых происходит клонирование клеток. Из одной клетки получается две, и так далее. В итоге появляются сотни ДНК, благодаря которым можно диагностировать возбудитель и выявить вирус на ранней стадии.

ПЦР делится на несколько видов:

Качественный анализ — распознает гены инфекция в крови. Если при проведении качественного анализа у пациента подтверждается заболевание, то следует провести количественный анализ, устанавливающий степень инфекции. В результате проведения данной диагностики специалисты пишут “обнаружено/ не обнаружено”. “Обнаружено” — говорит о том, что недуг присутствует в организме и выявлен уже его РНК. “Не обнаружено” — свидетельствует об отсутствии в пробе гена вируса, то есть РНК гепатита отсутствует. Но врачи рекомендуют провести повторное исследование через 10 дней.
Количественный анализ — определяет объем генетического материала инфекции в крови. Такая диагностика помогает установить тяжесть болезни и всю клиническую историю. В результате такого анализа может быть написано только: “Положительно/Отрицательно/Недействительный”. “Положительно” — изображает инфекционную нагрузку. Доктора такой метод диагностики болезни назначают для определения действенности проводимого лечения на 4, 12, 16 и 24 неделях болезни. Если показатель вируса находится в диапазоне 8х10т МЕ/мл, то лечение эффективно, если показатели выше — то нет. “Отрицательно” — ген инфекции не обнаружен. “Недействительный” — такое бывает, если ген вируса обнаружили при качественном, но при этом не выявили при количественном анализе. Встречается подобное при условии, что объем инфекции ниже уровня.

В каких случаях делают количественный анализ

Исследование делается параллельно с качественным анализом после того, как проверка крови на наличие антител к гепатиту (ИФА) показала положительный результат. Делают его несколько раз:

При первичной диагностике гепатита С до принятия решения о выборе курса лечения;
Во время лечения заболевания (обычно на 1, 4, 12 и 24 неделе) для определения клинической картины результатов терапии;
После лечения для определения рецидива.

Количественный анализ является одним из основных видов исследования, на которые врач полагается при выборе методов лечения гепатита. Он служит для того чтобы:

Понять как сильно организм заражен вирусом, количественное присутствие антигенов в теле.
Эффективности выбранной терапии.
Подобрать метод лечения и составить его прогноз.
Анализ крови, эластометрия, биопсия и другие.

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

Определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
Качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
Нахождение острого и хронического гепатита С;
Существование микст-гепатитов;
При планировании лечения;
Если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Подготовка к сдаче крови на количественный анализ

Сдача биоматериала на проведение анализа происходит из вены. Особых рекомендаций по подготовке нет, поэтому актуальны стандартные правила, которые нужно соблюдать перед сдачей крови на исследование:

Делать это лучше утром натощак (последний прием пищи должен быть не ранее 8-12 часов до сдачи).
Если забор крови происходит не утром, то на завтрак нельзя употреблять жирную пищу (интервал в 8-12 часов также должен соблюдаться).
Отказаться от алкоголя, жирной и жаренной еды за 1-2 дня до исследования.
Не приходить на анализ на следующий день после праздничного застолья.
Курение запрещено как минимум за час до сдачи биоматериала.
Перед забором крови стоит посидеть 10-15 минут в спокойствии, чтобы расслабить тело, исключить влияние на результаты напряжения, как физического, так и психологического.
Если принимаете какие-либо лекарственные средства или им подобные препараты, то анализ можно сдавать спустя 10-14 дней после последнего их приема. (об этом факте необходимо сообщить врачу, возможно он установит иное условие).
Биоматериал не сдается сразу после выполнения ректального исследования, рентгенографии, физиотерапевтических процедур.
Первоначальный и повторный анализы лучше сдавать в одной и той же лаборатории (медицинском учреждении), так они разные заведения могут использовать различные реагенты, оборудование, единицы измерения и точность.

Расшифровка результатов результатов количественного анализа на вирус гепатита с и b

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Коэффициенты перевода разные (колеблются примерно от 1 до 5) и зависит от метода, использованного для определения количественного показателя.

В основном на практике принято, что 1 МЕ/мл = 4 копиям на мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему.

При гепатите C нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки(виремии):

Цифровое обозначение числа вируса	Описание итога
Не обнаружено	Норма для здорового человека. Вирус не найден или исход ниже грани чувствительности методики.
До 1.810^2 МЕ/мл (7,5102 копий/мл)	Обнаружено в концентрации ниже линий границы.
До 810^5 МЕ/мл (2106копий/мл)	Обнаружен вирус при хорошем прогнозе болезни и эффективном лечении. Низкая вирусная нагрузка.
Больше 810^5 МЕ/мл (2106 копий/мл)	Обнаружено вирус и большая вирусная нагрузка.
Больше 2,410^7 МЕ/мл (1108 копий/мл)	Обнаружен вирус в концентрации выше линейного диапазона.

Если при повторном анализа нагрузка вируса является меньшей, чем 8*105 МЕ/мл, то можно утверждать, что терапия идёт в правильном направлении и в борьбе с заболеванием есть успех.
Говорить о раннем вирусологическом ответе можно при условии снижения количественного присутствия РНК вируса на третий день лечения. Но вероятность этого находится на уровне 85%.
Если же, показатель более 8*105 МЕ/мл, то доктор должен пересмотреть схему лечения и выбрать более подходящую. Соответственно, чем больше уровень, тем сильнее вирус поразил организм и хуже прогноз.

При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:

10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.

Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:

ДНК ВГВ 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса.

Плюсы методики

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение.
Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вирусов.
Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.

К сожалению, диагностика может быть ошибочной. Очень важно проходить ПЦР в клинике, которая хорошо себя зарекомендовала. Ведь несмотря на то, что ПЦР определяет наличие вируса с точностью до 100%, этот показатель может снизиться до 95%, если учреждение использует устаревшее оборудование или неподходящие реактивы.

Читайте также: