Мисс корана вирус 15 ого марта

Последние новости о коронавирусе в России и Мире. Мы перепроверяем каждую новость перед публикацией. Каждое утро и вечер мы обновляем статистику заболеваний. У нас вы найдете актуальные статьи, которые будут вам полезны.

"Что делать при обнаружении Симптомов? Профилактика!", ознакомится подробнее можно в разделе "Обсуждения".

Наша команда работает над улучшением сервиса, если у вас возникли вопросы или пожелания, пожалуйста, напишите нам в "Сообщения сообщества".

Подпишись, будь в центре событий!

За последние сутки в России подтверждены 6411 случаев новой коронавирусной инфекции в 83 регионах, из них 2609 (40,7%) выявлены активно у контактных лиц и не имели клинических проявлений болезни. При этом выписано по выздоровлению 1110 человек

Россия по числу зараженных (93 558) обошла Иран (91 472)

Всего в стране зарегистрировано 93 558 заболевших в 85 регионах, а число выздоровевших пациентов увеличилось до 8456 человек.

• Записи сообщества
• Поиск

Российские разработчики создали сайт, на котором можно отслеживать статистику по коронавирусу.

Главная особенность этого проекта заключается в том, что посетителям предлагается более обширная информация по статистике, например, % зараженных от населения регионов или стран, удобная интерактивная карта зараженных по миру и регионам России и другие уникальные функции.

США являются абсолютным лидером по числу заболевших, COVID-19 диагностировали более чем у миллиона человек. Из-за отсутствия жилья, плохую гигиену и питания в США бездомные массово болеют коронавирусной инфекцией.

Текущая статистика по коронавирусу на 28.04.2020

Всего заражений – 3 065 176
Смертельные случаи – 211 636 (6,9%)
Выздоровевшие – 922 862 (30,1%)
Показать полностью…
Сейчас болеют – 1 930 678 (63,0%)

Коронавирус. Последние новости. 28 Апреля:

✹ Количество случаев заражения в США перевалило за 1 000 000;

✹ Глава Роспотребнадзора Анна Попова сообщила, что после снятия ограничений на полеты пассажиры должны будут носить в самолетах перчатки и маски;
Показать полностью…

✹ В Вашингтоне обвинили Китай в поставке некачественных тестов на антитела к COVID-19;

✹ ООН прогнозирует исторические уровни безработицы и бедности из-за пандемии;

✹ Службы занятости и биржи труда в российских регионах отмечают повышенный спрос на временную и низкоквалифицированную работу;

✹ Apple отложила массовое производство флагманских iPhone на месяц из-за проблем в связи с распространением коронавируса;

✹ Washington Post: американские спецслужбы предупреждали Трампа об опасности COVID-19 в январе и феврале

Да уж, видимо COVID-19 с нами на долго.

Пожалуйста, соблюдайте дистанцию 1,5 метра.

Актуальные новости. 27 Апреля.

Самая известная фигурантка громкого шпионского скандала прошлого года Анна Чапман, выступив в роли телеведущей передачи на РЕН-ТВ, глубоко обидела дагестанскую семью, в которой растет "чудо-ребенок". Чапман в передаче из документального цикла "Тайны мира" о паранормальных явлениях, посвященной исследованию феномена стигматов и вышедшей в эфир 21 января, усомнилась, что изречения из Корана, которые с рождения появляются на теле мальчика, имеют божественное происхождение.

О необычном мальчике Али Якубове из дагестанского поселка Краснооктябрьск Кизлярского района прессе стало известно в октябре 2009 года. Тогда сообщалось, что на коже 10-месячного ребенка таинственным образом проявляются Хадисы (предания о словах и деяниях Пророка Мухаммеда, почитаемые наряду с Кораном). Строки призывали людей покаяться и повернуться к Аллаху. По словам матери ребенка Мадины, стихи из Корана появляются по ночам, они держатся несколько суток, а затем исчезают.

Как пишет американская газета The New York Times, вскоре маленький Али стал для многих символом надежды на возвращение мира на Северном Кавказе. В Краснооктябрьск хлынули паломники, мечтающие, прикоснувшись к мальчику, избавиться от болезней. О чудесном феномене стали рассуждать представители местного мусульманского духовенства, а бизнесмены делали щедрые пожертвования семье.

Как писали СМИ, с семьей встречался глава Чеченской Республики Рамзан Кадыров. Он якобы предложил Якубовым переехать в Чечню, обещая новый дом и прочие блага. Но глава Кизлярского района Сагид Муртазалиев этому воспротивился, пообещав Якубовым свое покровительство. Он подарил семье автомобиль Lada Priora. Другой знаменитый выходец из Дагестана, член Совета Федерации Сулейман Керимов, по словам деда маленького Али пообещал построить для них новый дом. И, вероятно, сдержал свое обещание - в передаче Чапман этот дом показали, его строительство уже подходит к концу.

По данным газеты, последние несколько недель родители, бабушка и дедушка мальчика отказываются показывать его незнакомым людям, пишет InoPressa. И причина - в Анне Чапман, отмечает The New York Times, поясняя, что передача сексапильной разведчицы о маленьком Али глубоко обидела его семью, "живущую на немощеной дороге среди пастбищ в этом бедном и нестабильном регионе России". Между тем в самой передаче рассказывалось, что еще до встречи со съемочной группой, по крайней мере в течение года, семья вела затворнический образ жизни и никому не показывала Али.

В октябре 2009 года сообщалось, что семья вынуждена скрывать малыша, так как за семьей охотятся ваххабиты. Как тогда рассказали журналистам в семье Якубовых, ваххабиты уже не раз обещали сжечь их дом. Однажды вооруженные люди вошли в дом и потребовали показать мальчика. Как пояснили родственники Али, для ваххабитов противоестественно, что Аллах может подавать божественные знаки через ребенка, родившегося в семье милиционера. Отец Али работает в патрульно-постовой службе местной ГИБДД. Ваххабиты считают членов семейства мальчика кяфирами (неверующими), объясняли в семье Али.

Хотя мальчика не показывали незнакомым людям уже давно, Анна Чапман заявила, что она "договорилась" о встрече. В Кизлярский район отправился корреспондент программы. В передаче приводились многие факты о появлении стигматов - кровоточащих ран, открывающиеся на теле верующих людей и соответствующие ранам распятого Иисуса Христа.

Задавшись целью доказать, что надписи на теле Али могут быть нанесены человеком, авторы передачи с ней с успехом справились. Профессиональный иллюзионист Роман Лутошкин перед камерой нанес себе на руки надписи, похожие на те, которые появляются на коже Али, при помощи состава на основе хны, смешанной с красным вином.

В Дагестане шокированы - Али поклялись никогда больше не показывать журналистам

Бабушка Али Зулихата Якубова в интервью The New York Times категорически отвергла утверждения, прозвучавшие в передаче Чапман, что таинственные письмена могли быть подделаны. Как уверена бабушка, их семья избрана Аллахом. "Мы поклялись больше никогда не показывать Али журналистам", - добавила бабушка. В передаче Чапман сообщалось, что никто из семьи не умеет ни читать, ни писать по-арабски. Эту тему подняла и бабушка Али, подчеркнув, что она вообще не умеет читать и писать, а только молится "пять раз в день".

Как отмечает газета, скептическое отношение к "чудо-ребенку", прозвучавшее в передаче Чапман, стало шоком, так как в Дагестане местные чиновники и журналисты описывают семью Али намного уважительнее. Между тем, добавляет издание, семье и без того "живется тяжело" - ведь отец Али, Шамиль Якубов, служит в милиции в Дагестане, где сотрудники правоохранительных органов регулярно гибнут от рук боевиков.

Выводы передачи Чапман могут оказаться неприятным сюрпризом и для властей Дагестана, хотя пока реакция официальных органов на программу неизвестна. Государственные СМИ активно поощряют веру в народные исламские традиции и поддерживают традиционный для региона суфизм - мистическое течение ислама - в противовес исламскому фундаментализму, который, по мнению российских властей, вдохновляет бандподполье, пишет издание.

Мадина Якубова родила сына 3 января 2009 года в роддоме дагестанского города Кизляр, где в 1996 году боевики Салмана Радуева взяли заложников. Несмотря на то, что мать утверждает, что малышу сразу после рождения был поставлен страшный диагноз – церебральный паралич, врачи ее слова не подтверждают.

По словам медиков, так как ребенок родился чуть раньше срока, у него на лице было подкожное кровоизлияние. Мать же говорит, что в роддоме на подбородке мальчика якобы появилось слово "Аллах". Из-за того, что малыш был ослаблен, он пролежал в медицинском центре больше обычного срока - 23 дня. Его выписали абсолютно здоровым. Об этом говорит и Мадина, но, по ее версии, мальчик избавился от ДЦП после того, как на его лице появилось божественная надпись.

В медицинской карте Али Якубова написано, что у него была церебральная ишемия - замедлены двигательные рефлексы. По словам врачей, это явление, часто встречающееся у младенцев и быстро проходящее. По всей видимости, мать перепутала ишемию с ДЦП, услышав слово "церебральная".

Как рассказали Якубовы, впервые они обратились к помощи врачей через два месяца, когда у ребенка резко повысилась температура. Медики никаких недугов не обнаружили, но на его коже в районе сердца появилось пятнышко, затем пятна стали проявляться на руках и ногах. Вскоре уже были видны четкие надписи на арабском языке, утверждает семья.

Сегодня, 22 апреля, — 133-й день с момента обнаружения коронавируса и 43-й — с объявления пандемии.

За минувшую ночь, по статистике сервиса coronavirus-monitor, количество зараженных коронавирусом в мире выросло на 1,1% — до 2 559 541 (+29 205 человек). Число выздоровевших увеличилось на 3,3% — до 692 643 (+22 734), погибших — на 1,6% (+2 915). Всего жертвами COVID-19 стали 177 736 человек.

Особенно тяжелой ситуация остается в США, где только в одном штате Нью-Йорк заболевших больше, чем в любой другой стране мира — 258 484 человека. 19 114 из них умерли. Всего в Соединенных Штатах зарегистрировано 819 805 случаев заражения, 44 999 смертей и 75 204 выздоровления. Приблизительный уровень смертности составляет 5,53%.

По какому сценарию распространяется COVID-19 в РФ

Число инфицированных в России за ночь не изменилось — 52 763, но жертв COVID-19 стало больше. В Москве скончались еще 28 пациентов в возрасте от 30 до 93 лет. У большинства из них были сопутствующие заболевания. В частности, самый молодой умерший мужчина страдал системной красной волчанкой. Всего в России за время пандемии скончались 456 человек. Примерный уровень смертности — 0,88%. Выздороветь удалось уже 3 906 пациентам.

В лидерах по числу зараженных — Москва (29433), Московская область (5959), Санкт-Петербург (1973), Нижегородская область (860). Республику Коми (507) уже обогнала Мурманская область. В ночь на 22 апреля стало известно, что в регионе за последние сутки диагноз подтвердился еще у 71 человека. Теперь в регионе 509 инфицированных.

В целом картина заболеваемости по стране отличается от других. Если в той же Европе считается, что больше всего риску подвержены пожилые люди, то в России средний возраст заболевших составляет для женщин 47,9 года, для мужчин — 44,7 года. Вирусолог Александр Семенов, недавно вернувшийся из Италии, объясняет этот феномен тем, что молодые россияне хуже пожилых соблюдают режим самоизоляции.

Коронавирус в России

Представитель Всемирной организации здравоохранения в РФ Мелита Вуйнович дала положительную оценку мерам, которые власти страны приняли в борьбе с COVID-19, но в то же время предупредила о нескольких важных моментах:

• Уровень летальности от коронавируса в РФ пока один из самых низких в мире , но эпидемия еще находится в стадии роста.
• Россия успела подготовить систему здравоохранения к большому наплыву пациентов. Все тяжелобольные будут обеспечены лечением.
• ВОЗ изменила подход к подсчету смертности . Теперь смерть от COVID-19 фиксируется даже в том случае, если у пациента были сопутствующие заболевания.
• Сейчас существует 67 прототипов вакцин , по трем уже начались клинические испытания .

Нехватку антисептиков в России могут решить с помощью конфискованного алкоголя , из которого предлагают производить санитайзеры. С такой инициативой к премьер-министру Михаилу Мишустину обратился сенатор Сергей Рябухин.

Глава Минэкономразвития страны Максим Решетников заявил, что россиянам не стоит ожидать V-образную форму выхода из кризиса — восстановление будет поэтапным, и какое-то время бизнесу придется работать в ограниченных условиях. Правительство России тем временем сообщило, что работает над новыми мерами поддержки экономики. Подробностей пока нет, но глава Минстроя Владимир Якушев допустил вероятность корректировки тарифов ЖКХ. Напрямую цены снижать не получится, но можно убрать какие-либо услуги из тарифов.

Чтобы смягчить последствия пандемии для экономики, Россия в числе других стран направила ходатайство в адрес верховного комиссара ООН по правам человека Мишель Бачелет и попросила включить в пакет мер борьбы с COVID-19 необходимость отмены односторонних санкций .

Коронавирус в мире

Президент США Дональд Трамп решил приостановить на 60 дней прием иммигрантов , а также выдачу грин-карт из-за негативных экономических последствий пандемии. Из-за вируса многие американцы остались без работы, поэтому американский лидер решил оставить рабочие места для граждан страны.

Министр здравоохранения Великобритании Мэтт Хэнкок объявил, что уже с 23 апреля разрабатываемая в Оксфорде вакцина от коронавируса начнет испытываться на людях . На эти цели власти страны выделят ученым 20 миллионов фунтов стерлингов.

ВОЗ считает, что коронавирусная инфекция имеет животное происхождение. Наиболее вероятно, что вирус пошел от летучих мышей, а как он передался человеку еще предстоит выяснить.

Подпишитесь на нашу рассылку, чтобы быть в курсе всех событий. У нас также есть telegram-канал @uranews, где мы оперативно публикуем самое важное.

Появление тяжелого острого респираторного синдрома коронавируса (SARS-CoV) и ближневосточного респираторного синдрома (MERS) -CoV подчеркивает угрозу межвидовых трансмиссивных событий, ведущих к вспышкам среди людей. Здесь мы изучаем потенциал заболевания SARS-подобным вирусом, SHC014-CoV, который в настоящее время циркулирует в популяциях китайских подковообразных летучих мышей 1 . Использование системы обратной генетики SARS-CoV 2Авторы создали и охарактеризовали химерный вирус, экспрессирующий пик коронавируса летучей мыши SHC014 в адаптированном для мыши остове SARS-CoV. Результаты показывают, что вирусы группы 2b, кодирующие спайк SHC014 в позвоночнике дикого типа, могут эффективно использовать несколько ортологов человеческого ангиотензин-превращающего фермента II рецептора SARS (ACE2), эффективно реплицироваться в первичных клетках дыхательных путей человека и достигать титров in vitro, эквивалентных эпидемическим. штаммы SARS-CoV. Кроме того, в естественных условияхэксперименты демонстрируют репликацию химерного вируса в легких мыши с заметным патогенезом. Оценка доступных иммунотерапевтических и профилактических методов на основе атипичной пневмонии показала низкую эффективность; подходы как к моноклональным антителам, так и к вакцинам не смогли нейтрализовать и защитить от инфицирования CoV с использованием нового белка с шипами. На основании этих результатов мы синтетически воспроизвели инфекционный полноразмерный рекомбинантный вирус SHC014 и продемонстрировали надежную репликацию вируса как in vitro, так и in vivo . Наша работа предполагает потенциальный риск повторного появления SARS-CoV из вирусов, циркулирующих в настоящее время в популяциях летучих мышей.

Появление SARS-CoV ознаменовало новую эру в межвидовой передаче тяжелых респираторных заболеваний с глобализацией, ведущей к быстрому распространению по всему миру и огромному экономическому воздействию 3 , 4 . С тех пор несколько штаммов, в том числе штаммы гриппа A H5N1, H1N1 и H7N9 и MERS-CoV, появились в популяциях животных, вызывая значительные заболевания, смертность и экономические трудности для пострадавших регионов 5 . Хотя меры общественного здравоохранения смогли остановить вспышку SARS-CoV 4 , недавние исследования в области метагеномики позволили выявить последовательности близкородственных SARS-подобных вирусов, циркулирующих в популяциях китайских летучих мышей, которые могут представлять угрозу в будущем 1 , 6., Однако одни только данные о последовательностях обеспечивают минимальную информацию для идентификации и подготовки к будущим препандемическим вирусам. Поэтому, чтобы изучить потенциал появления (то есть возможность заражать людей) циркулирующих CoV у летучих мышей, мы создали химерный вирус, кодирующий новый, зоонозный белок-шип CoV - из последовательности RsSHC014-CoV, которая была выделена из китайских подковообразных летучих мышей 1 - в контексте SARS-CoV, адаптированной к мышам основной цепи. Гибридный вирус позволил нам оценить способность нового белка шипа вызывать заболевание независимо от других необходимых адаптивных мутаций в его естественном скелете. Используя этот подход, мы охарактеризовали CoV-инфекцию, опосредованную спайком белка SHC014 в первичных клетках дыхательных путей человека и in vivo.и проверили эффективность доступных иммунных терапевтических средств против SHC014-CoV. Вместе эта стратегия переводит данные метагеномики, чтобы помочь предсказать и подготовиться к будущим возникающим вирусам.

Последовательности SHC014 и родственных RsWIV1-CoV показывают, что эти CoVs являются ближайшими родственниками эпидемических штаммов SARS-CoV ( Fig. 1a, b ); однако существуют важные различия в 14 остатках, которые связывают человеческий ACE2, рецептор SARS-CoV, включая пять, которые являются критическими для диапазона хозяев: Y442, L472, N479, T487 и Y491 (ссылка 7 ). В WIV1 три из этих остатков отличаются от эпидемического штамма SARS-CoV Urbani, но не ожидалось, что они изменят связывание с ACE2 ( дополнительная рис. 1a, b и дополнительная таблица 1 ). Этот факт подтверждается обоими экспериментами с псевдотипированием, в которых измерялась способность лентивирусов, кодирующих белки спайка WIV1, проникать в клетки, экспрессирующие ACE2 человека ( дополнительная фиг. 1).) и анализом репликации in vitro WIV1-CoV (ссылка 1 ). Напротив, 7 из 14 остатков взаимодействия ACE2 в SHC014 отличаются от остатков в SARS-CoV, включая все пять остатков, критических для диапазона хозяев ( дополнительная рис. 1c и дополнительная таблица 1 ). Эти изменения в сочетании с неспособностью псевдотипированных лентивирусов, экспрессирующих пик SHC014, проникать в клетки ( дополнительный рисунок 1d ), позволяют предположить, что пик SHC014 не способен связывать человеческий ACE2. Однако сообщалось, что аналогичные изменения в родственных штаммах SARS-CoV позволяют связывать ACE2 7 , 8., предполагая, что для проверки требуется дополнительное функциональное тестирование. Таким образом, мы синтезировали шип SHC014 в контексте компетентного к репликации адаптированного к мышам скелета SARS-CoV (далее мы будем называть химерный CoV как SHC014-MA15), чтобы максимизировать возможность патогенеза и исследования вакцин на мышах ( дополнительная фиг.8). 2а ). Несмотря на предсказания как из структурного моделирования, так и из экспериментов с псевдотипированием, SHC014-MA15 был жизнеспособным и реплицировался до высоких титров в клетках Vero ( дополнительная фиг. 2b ). Подобно SARS, SHC014-MA15 также требовал функциональной молекулы ACE2 для входа и мог использовать ортологов ACE2 человека, циветты и летучей мыши ( дополнительная Рис. 2c, d). Чтобы проверить способность шипа SHC014 опосредовать инфекцию дыхательных путей человека, мы исследовали чувствительность клеточной линии эпителия дыхательных путей человека Calu-3 2B4 (ссылка 9 ) к инфекции и обнаружили надежную репликацию SHC014-MA15, сравнимую с таковой у SARS-CoV Urbani ( рис. 1в ). Чтобы расширить эти результаты, первичные эпителиальные культуры дыхательных путей человека (HAE) были инфицированы и показали устойчивую репликацию обоих вирусов ( Fig. 1d ). Вместе данные подтверждают способность вирусов с шипом SHC014 инфицировать клетки дыхательных путей человека и подчеркивают потенциальную угрозу межвидовой передачи SHC014-CoV.

Фигура 1: SARS-подобные вирусы реплицируются в клетках дыхательных путей человека и вызывают патогенез in vivo

( a ) Полноменные последовательности генома репрезентативных CoV были выровнены и филогенетически картированы, как описано в Online Methods . Масштабная линейка представляет нуклеотидные замены, причем только поддержка бутстрапа выше 70% помечена. Дерево показывает CoV, разделенные на три отдельные филогенетические группы, определяемые как α-CoV, β-CoV и γ-CoV. Классические кластеры подгрупп отмечены как 2a, 2b, 2c и 2d для β-CoV и как 1a и 1b для α-CoV. ( b ) Аминокислотные последовательности доменов S1 спайков репрезентативных β-CoV группы 2b, включая SARS-CoV, были выровнены и филогенетически картированы. Шкала представляет аминокислотные замены. ( с , д) Вирусная репликация SARS-CoV Urbani (черный) и SHC014-MA15 (зеленый) после инфицирования клеток Calu-3 2B4 ( c ) или хорошо дифференцированных первичных воздух-жидкостных интерфейсных культур клеток HAE ( d ) при множественной инфекции (МВД) 0,01 для обоих типов клеток. Образцы собирали в отдельные моменты времени с биологическими повторностями ( n = 3) для экспериментов Calu-3 и HAE. ( e , f ) Потеря веса ( n = 9 для SARS-CoV MA15; n = 16 для SHC014-MA15) ( e ) и репликация вируса в легких ( n = 3 для SARS-CoV MA15; n = 4 для SHC014- MA15) ( ф) 10-недельных мышей BALB / c, инфицированных 1 × 10 4 БОЕ адаптированных к мыши SARS-CoV MA15 (черный) или SHC014-MA15 (зеленый) через интраназальный (in) путь. ( g, h ) Представлены репрезентативные изображения срезов легких, окрашенных на антиген SARS-CoV N от мышей, инфицированных SARS-CoV MA15 ( n = 3 мыши) ( g ) или SHC014-MA15 ( n = 4 мыши) ( h ). Для каждого графика значение в центре представляет среднее по группе, а столбцы ошибок определяют столбцы шкалы полусферы, 1 мм.

Чтобы оценить роль шипа SHC014 в опосредовании инфекции in vivo , мы заразили 10-недельных мышей BALB / c 10 4 блоками, образующими бляшки (pfu), либо SARS-MA15, либо SHC014-MA15 ( рис. 1e – h). ). Животные, инфицированные SARS-MA15, испытывали быструю потерю веса и летальность к 4 дню после заражения (dpi); в отличие от этого, инфекция SHC014-MA15 приводила к значительной потере веса (10%), но без летальности у мышей ( Fig. 1e ). Изучение репликации вируса выявило почти эквивалентные титры вируса в легких мышей, инфицированных SARS-MA15 или SHC014-MA15 ( рис. 1f ). Принимая во внимание, что легкие от мышей, инфицированных SARS-MA15, показали сильное окрашивание как в терминальных бронхиолах, так и в паренхиме легких 2 dpi ( Fig. 1g).), у мышей, инфицированных SHC014-MA15, наблюдалось снижение окрашивания антигена дыхательных путей ( рис. 1h ); напротив, в паренхиме или в общем гистологическом балансе не наблюдалось дефицита окрашивания антигена, что свидетельствует о дифференциальной инфекции легочной ткани для SHC014-MA15 ( дополнительная таблица 2 ). Затем мы проанализировали инфекцию у более восприимчивых, старых (12-месячных) животных. Животные, инфицированные SARS-MA15, быстро теряли вес и умирали от инфекции ( дополнительная рис. 3а, б ). Инфекция SHC014-MA15 вызывала устойчивую и устойчивую потерю веса, но имела минимальную летальность. Тенденции в гистологии и картинах окрашивания антигенов, которые мы наблюдали у молодых мышей, были сохранены у более старых животных ( дополнительная таблица 3). Мы исключили возможность того, что SHC014-MA15 опосредовал инфекцию через альтернативный рецептор, на основании экспериментов с мышами Ace2 - / - , у которых не наблюдалось потери веса или окрашивания антигена после инфекции SHC014-MA15 ( дополнительная фиг. 4a, b и дополнительная). Таблица 2 ). Вместе данные указывают на то, что вирусы с шипом SHC014 способны вызывать потерю веса у мышей в контексте вирулентного остова CoV.

Учитывая доклиническую эффективность терапии моноклональными антителами против вируса Эбола, такой как ZMApp 10 , мы затем попытались определить эффективность моноклональных антител против SARS-CoV против инфекции SHC014-MA15. Ранее сообщалось о четырех широко нейтрализующих человеческих моноклональных антителах, нацеленных на остроконечный белок SARS-CoV, и они являются вероятными реагентами для иммунотерапии 11 , 12 , 13 . Мы исследовали влияние этих антител на вирусную репликацию (выраженную в процентах ингибирования вирусной репликации) и обнаружили, что тогда как SARS-CoV Urbani дикого типа был сильно нейтрализован всеми четырьмя антителами при относительно низких концентрациях антител ( рис. 2a-d)), нейтрализация варьировалась для SHC014-MA15. Fm6, антитело, генерируемое с помощью фагового дисплея и избегания мутантов 11 , 12 , достигало только фоновых уровней ингибирования репликации SHC014-MA15 ( Fig. 2a ). Аналогично, антитела 230.15 и 227.14, которые были получены из В-клеток памяти пациентов, инфицированных SARS-CoV 13 , также не смогли блокировать репликацию SHC014-MA15 ( Fig. 2b, c).). Для всех трех антител различия между аминокислотными последовательностями спайков SARS и SHC014 соответствовали прямым или смежным изменениям остатков, обнаруженным у побежавших мутантов SARS-CoV (fm6 N479R; 230,15 L443V; 227,14 K390Q / E), что, вероятно, объясняет отсутствие антител нейтрализующая активность против SHC014. Наконец, моноклональное антитело 109.8 смогло достичь 50% нейтрализации SHC014-MA15, но только при высоких концентрациях (10 мкг / мл) ( рис. 2d ). Вместе результаты показывают, что широко нейтрализующие антитела против SARS-CoV могут иметь только незначительную эффективность против возникающих SARS-подобных штаммов CoV, таких как SHC014.

Фигура 2: моноклональные антитела против SARS-CoV имеют предельную эффективность против SARS-подобных CoV.

( a - d ) Нейтрализационные анализы, оценивающие эффективность (измеренную как уменьшение количества бляшек) панели моноклональных антител, которые все первоначально были созданы против эпидемии SARS-CoV, против инфекции клеток Vero SARS-CoV Urbani (черный) или SHC014-MA15 (зеленый). Проверенные антитела были fm6 ( n = 3 для Urbani; n = 5 для SHC014-MA15) 11 , 12 ( a ), 230,15 ( n = 3 для Urbani; n = 2 для SHC014-MA15) ( b ), 227,15 ( n = 3 для Урбани; n = 5 для SHC014-MA15) ( с ) и 109,8 ( n= 3 для Урбани; n = 2 для SHC014-MA15) 13 ( d ). Каждая точка данных представляет среднее значение для группы, а столбцы ошибок определяют sem. Обратите внимание, что столбцы ошибок в ячейках Vero, инфицированных SARS-CoV Urbani в b , c , перекрываются символами и не видны.

Чтобы оценить эффективность существующих вакцин против инфекции SHC014-MA15, мы вакцинировали старых мышей двойной инактивированной цельной SARS-CoV (DIV). Предыдущая работа показала, что DIV может нейтрализовать и защитить молодых мышей от заражения гомологичным вирусом 14 ; однако вакцина не защищала старых животных, у которых также наблюдалась патология усиленного иммунитета, что указывает на возможность нанесения вреда животным из-за вакцинации 15 . Здесь мы обнаружили, что DIV не обеспечивает защиту от заражения SHC014-MA15 в отношении потери веса или вирусного титра ( дополнительная фиг. 5a, b ). В соответствии с предыдущим отчетом с другими гетерологичными группами 2b CoVs 15сыворотка от мышей, вакцинированных DIV, в возрасте мышей также не смогла нейтрализовать SHC014-MA15 ( дополнительная фигура 5c ). Примечательно, что вакцинация DIV привела к сильной иммунной патологии ( дополнительная таблица 4 ) и эозинофилии ( дополнительная фиг. 5d – f ). Вместе эти результаты подтверждают, что вакцина DIV не будет защищать от заражения SHC014 и может усиливать заболевание в возрасте вакцинированной группы.

В отличие от вакцинации мышей DIV, использование SHC014-MA15 в качестве живой аттенуированной вакцины показало потенциальную перекрестную защиту от заражения SARS-CoV, но результаты имеют важные предостережения. Мы заразили молодых мышей 10 4 БОЕ SHC014-MA15 и наблюдали их в течение 28 дней. Затем мы заражали мышей SARS-MA15 на 29 день ( дополнительная фиг. 6a ). Предшествующее заражение мышей высокой дозой SHC014-MA15 обеспечивало защиту от заражения летальной дозой SARS-MA15, хотя был только минимальный ответ нейтрализации SARS-CoV от антисыворотки, вызванный через 28 дней после инфекции SHC014-MA15 ( Дополнительный рис. 6б1: 200). В отсутствие вторичного усиления антигена 28 dpi представляет ожидаемый пик титров антител и подразумевает, что со временем будет снижена защита от SARS-CoV 16 , 17 . Аналогичные результаты, демонстрирующие защиту от заражения летальной дозой SARS-CoV, наблюдались у старых мышей BALB / c в отношении потери веса и репликации вируса ( дополнительная фиг. 6c, d ). Тем не менее, доза инфекции SHC014-MA15 10 4 БОЕ вызвала> 10% потерю веса и летальность у некоторых пожилых животных ( рис. 1 и дополнительная рис. 3).). Мы обнаружили, что вакцинация более низкой дозой SHC014-MA15 (100 БОЕ) не вызывала потерю веса, но она также не защищала пожилых животных от заражения SARS-MA15 смертельной дозой ( дополнительная фиг. 6e, f ). В совокупности данные свидетельствуют о том, что заражение SHC014-MA15 может обеспечивать перекрестную защиту от SARS-CoV посредством консервативных эпитопов, но необходимая доза вызывает патогенез и исключает использование в качестве ослабленной вакцины.

Установив, что шип SHC014 обладает способностью опосредовать инфицирование клеток человека и вызывать заболевание у мышей, мы затем синтезировали инфекционный клон SHC014-CoV во всю длину на основе подхода, использованного для SARS-CoV ( рис. 3а ) 2 . Репликация в клетках Vero не выявила дефицита для SHC014-CoV относительно дефицита для SARS-CoV ( Fig. 3b ); однако SHC014-CoV значительно ( P