Патологический материал при ящуре

При возникновении афт в производящем слое эпидермиса копытец или вследствие перехода афтозного процесса с кожи межкопытцевой щели и мякишей часто отмечают пододерматит: гиперемию основы кожи, скопление серозного экссудата между основой кожи и роговой подошвой с отслоением последней, а в тяжелых случаях и спадение рогового башмака. Афтозный процесс на молочной железе нередко сочетается с серозно-катаральным, а при осложнении вторичной микрофлорой — с гнойным маститом. Из других органов более закономерны поражения сычуга и кишечника. В них находят катаральное и геморрагическое воспаление.

Ящур может протекать злокачественно со смертельным исходом, особенно у молодняка. Основные изменения при этом развиваются в сердечной и скелетных мышцах, в то время как афтозные поражения слабо выражены. Смертность при злокачественном ящуре может достигать среди молодняка 100% и является следствием сильных изменений и паралича сердца. Нередко взрослые животные при этом гибнут при кажущемся выздоровлении.

Изменения в сердечной и скелетных мышцах обычно очаговые, протекают по одному типу. Из мышц скелета чаще и больше поражается активная и массивная мускулатура: тазобедренная, плечевая, спины, межреберная, массеторы, мышцы языка, ножки диафрагмы. Измененные участки имеют вид рыбьего мяса. При попадании секундарной микрофлоры в этих местах возникают абсцессы, флегмоны, ихорозный распад тканей.

В сердце при внешнем осмотре и особенно на разрезе видны множественные сероватые или желтоватые очажки различной величины и формы. Наличие их в ряде случаев придает сердцу своеобразную полосчатую окраску, напоминающую шкуру тигра ("тигровое сердце"), Наиболее часто очаговые изменения находят в стенках левого и правого желудочка, в межжелудочковой перегородке и папиллярных мышцах.

При гистологическом исследовании в миокарде обнаруживают белковую и жировую дистрофии, зернисто-глыбчатый распад, восковидный некроз и лизис миоцитов в сочетании с клеточной пролиферацией со стороны интерстиция или без нее.

У переболевших животных длительное время сохраняются очаговые признаки частичной регенерации миоцитов, клеточные инфильтраты, очаги склероза и отложения солей извести на месте погибших миоцитов. Изменения в скелетных мышцах напоминают таковые в сердце.

Нередко при злокачественном ящуре, кроме поражения сердца и скелетных мышц, находят различные тяжелые изменения в паренхиматозных органах, железах внутренней секреции и нервной системе. В печени, почках и надпочечниках обнаруживают дистрофические процессы с гибелью клеток и их замещением соединительной тканью. В гипофизе могут быть клеточные пролифераты, а в щитовидной железе — признаки гипофункционального состояния.

В головном и спинном мозге при вскрытии отмечают гиперемию сосудов, кровоизлияния, отечность вещества и оболочек, при гистологическом исследовании — дистрофические изменения нервных клеток, а иногда и картину негнойного лимфоцитарного энцефаломиелита. Из других изменений возможны гиперплазия лимфатических узлов, особенно регионарных местам ящурных поражений, гиперемия, отек и воспаление легких, кровоизлияния на серозных и в слизистых оболочках.

При осложнении афтозного процесса вторичной микрофлорой возможно развитие сепсиса и септикопиемии. В литературе немало сообщений о наслоении или провоцировании вследствие заболевания ящуром различных инфекций: некробактериоза, колибактериоза, пастереллеза, стрептококкозов, гемоспоридиозов, микозов и т. п. В таких случаях смешанная болезнь, как правило, протекает в более тяжелой форме, сопровождается высокой смертностью и нередко затрудняет своевременную постановку правильного диагноза.

Афта на слизистых оболочках представляет собой пузырек различной формы и величины. Гистогенез ее начинается с дегенеративных поражения клеток шиповидного слоя. Клетки набухают, округляются, а ядра пикнотизируются. В сосочковом слое подлежащей соединительной ткани в ответ на дистрофию клеток происходит расширение капилляров, отек и клеточная инфильтрация. Проникновение в толщу пораженных клеток и возникновению мелких внутриэпителиальных пузырьков.

По мере продолжения репродукции вируса в клетках шиповидного слоя и накопления серозного экссудата отмечают более обширные разрушения клеток и их дискомплексацию, слияние мелких пузырьков в один крупный и формирование афты. В связи с нарастающими воспалительными явлениями в сосочковом слое афта заполняется нейтрофильными лейкоцитами. Экссудат становится серозно-гнойным, а затем гнойным. Из-за механических причин и воспалительных процессов стенки афты надрываются и обнаруживается эрозия.

Очищение дефекта эпителия от продуктов некротического распада происходит на 5-7-е сут, а эрозионная поверхность полностью покрывается эпителием на 12-е сут. Восстанавливается дефект за счет размножения клеток базального слоя.

При осложнении пролиферативных процессов в местах эрозии вторичной микрофлорой развивается гнойное воспаление подлежащих тканей с образованием язвенных поражений. Они заживают посредством натяжения с формированием соединительнотканного рубца.

Афтозно-эрозионные поражения на коже протекают по тому же типу, что и на слизистых оболочках. Из-за более частых осложнений вторичной микрофлорой на конечностях в области межкопытной щели нередко развивается пододерматит с последующим отпадением рогового башмака, а в молочной железе - серозно-катаральный или гнойный мастит.

При злокачественном течении наряду с афтозно-эрозионными поражениями обнаруживают тяжелые дегенеративные изменения в сердечной и скелетной мускулатуре. Они развиваются одновременно с появлением афтозно-эрозионных поражений на слизистых оболочках. В пораженных участках миокарда гистологически отмечают дистрофическо-некрогические процессы в мышечных волокнах (белковая дистрофия, восковидный некроз, лизис, зернисто-глыбчатый распад), клеточно-пролиферативную реакцию со стороны интерстициальной ткани и явления расстройства кровообращения. Часто наблюдают отложение солей извести в пораженных мышечных волокнах. В начале развития воспалительного процесса в миокарде более выражен альтернативный, а в дальнейшем - пролиферативный компонент. Очаги некроза мышечных волокон сочетаются с участками частичного или полного замещения пораженных волокон клеточным инфильтратом и грануляционной тканью.

В скелетной мускулатуре встречаются дистрофические и некротические изменения мышечных волокон с реактивно-клеточными процессами в интерстиции. Поражения носят обычно очаговый характер.

Глубокие изменения при злокачественном течении могут развиваться в паренхиматозных органах, железах внутренней секреции и в нервной системе. В печени выявляют белковую дистрофию паренхиматозных клеток, а в почках - серозный гломерулонефрит. Поражения в надпочечниках характеризуются дистрофией клеток коркового слоя, некрозом хромафинных клеток и развитием клеточного пролиферата в местах дегенеративных явлений. В гипофизе выявляют клеточные пролифераты, в щитовидной железе - гипофункциональное состояние. В различных отделах головного и спинного мозга иногда развивается негнойный энцефаломиелит. В летальных случаях встречается острый десквамативный гастроэнтерит. Органы иммунной системы (селезенка, тимус, лимфоузлы) гипертрофированы.

В местах первичного проникновения и размножения вируса в чувствительных клетках слизистых оболочек кутанного типа и безволосых местах кожи формируются первичные афты. В этих очагах беспрерывно протекает процесс репродукции вируса, сопровождающийся расширением участка пораженных клеток. Из первичных мест ВЯ проникает в кровь и лимфу, разносится по органам, тканям и фиксируется в чувствительных клетках, размножается в них, вызывая образование вторичных афт. Вирус размножается в цитоплазме клеток шиповидного слоя эпителия слизистых оболочек и эпидермиса кожи. В клетках прекращается митотическая активность, т.е. необратимо приостановлены процессы синтеза клеточной ДНК. Некоторые штаммы вируса наряду с эпителиотропными могут проявлять и миотропные свойства, размножаясь в саркоплазме мышечных волокон миокарда и скелетной мускулатуры. В мышечных волокнах, так же как и в клетках шиповидного слоя эпителия, не проявляется митотическая активность ядер и отсутствуют процессы синтеза клеточной ДНК. По-видимому, субстрат цитоплазмы клеток шиповидного слоя эпителия и саркоплазмы мышечных волокон однотипен в биохимическом отношении, что обусловливает возможность размножения вируса в данных органах.

Дифференциальную диагностику ящура необходимо проводить от везикулярного стоматита (возбудитель — везикуловирус, болеют те же виды животных и лошади, нет поражений сердечной и скелетных мышц), от злокачественной катаральной горячки, инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи и чумы крупного рогатого скота, от стоматитов неинфекционной природы.

Значительные трудности в связи со сходным клинико-анатомическим проявлением представляет дифференциальная диагностика ящура у свиней от везикулярной экзантемы (ВЭС) и везикулярной болезни (ВБС). Возбудителем ВБС является энтеровирус. Болезнь характеризуется лихорадкой, нервными явлениями и появлением на конечностях (венчике, мякише, коже межкопытцевой щели), пятачке, языке и сосках пузырьков (везикул), сходных с ящурными афтами. При гистоисследовании часто обнаруживают острый негнойный менингоэнцефаломиелит лимфоцитарного типа. При ВБС по сравнению с ящуром гораздо ниже смертность животных, в частности поросят, отсутствуют поражения сердца и скелетных мышц. Возбудитель ВЭС — калицивирус, который происходит от морских млекопитающих (ластоногих) и рыб. При использовании рыбы и мясопродуктов от морских млекопитающих в корм свиньям калицивирус таким путем может быть занесен на свинофермы. В клинико-анатомическом проявлении ВЭС напоминает ВБС, но не характерных для ВБС поражений нервной системы. Окончательный диагноз на ВБС и ВЭС ставят на основании лабораторных исследований.

Ящур - острое вирусное заболевание из группы антропозоонозов (инфекционных болезней животных, которыми болеет также и человек), характеризующееся интоксикацией и везикулезно-эрозивным (пузырьково-язвенным) поражением слизистых оболочек ротовой и носовой полостей, а также кожи межпальцевых складок и околоногтевого ложа, а у животных- межкопытной щели.

Ящур довольно широко распространен среди животных. В ряде стран заболевание носит характер эпизоотии (эпидемий среди животных), повторяющихся через определенные промежутки времени. Наиболее подвержены инфекции молодые парнокопытные сельскохозяйственные животные (крупный рогатый скот, свиньи, козы, овцы, олени). От неё могут страдать также лошади, верблюды, собаки, кошки и грызуны. У животных, перенесших заболевание, и некоторых птиц установлено вирусоносительство, проявляющееся выделением возбудителя с испражнениями. ящур патологический инфекционный

Инфекционный процесс у парнокопытных характеризуется тяжелым течением с вирусемией, афтозными высыпаниями и изъязвлениями в области слизистых оболочекполости рта, языка, носоглотки, носа, губ, на коже в межкопытных щелях, на вымени, иногда около рогов. Общая продолжительность болезни у животных - от 10 до 15 дней, продолжительность инкубационного периода - 2-- 4 дня. При злокачественном течении ящура, особенно у коров, более чем у 50 % заболевших животных наступает смертельный исход в течение 2--3 суток.

Взятие патологического материала.

Основной путь инфицирования людей - через сырое молоко больных животных и продукты его переработки, реже через мясо. У лиц, непосредственно контактирующих с больными животными, возможна прямая передача инфекции (при доении, уходе, лечении, убое), воздушно-капельный путь заражения (при дыхании, кашле животных), а также через предметы, загрязненные их выделениями. Описаны случаи внутрилабораторного инфицирования.

Отбор материала для прижизненной диагностике. В зависимости от вида инфекции у клинически больных животных берут соответствующий, специфический для данной болезни материал, соблюдая меры личной безопасности.

Моча чаще всего служит объектом исследования при подозрении на лептоспироз. У коров и свиноматок мочу можно брать непосредственно из мочевого пузыря с помощью катетера или собирать при естественном мочеиспускании в чистые пробирки, банки. Легче всего мочу получать после утреннего подъема животных, а у свиней - в любое время дня после 1 . 2-часового лежания.

Кал берут из прямой кишки в стерильную посуду, которую закрывают плотной крышкой. При обнаружении на стенке прямой кишки слизи, утолщений или других патологических изменений дополнительно делают соскобы; их помещают в отдельную посуду.

Выделения из верхних дыхательных путей и ротовой полости собирают в посуду при естественном истечении или поступают так:

Крылья носа и переднюю часть носовых ходов обмывают водой, после чего выделения собирают стерильными тампонами из глубоких частей носа. Тампоны помещают в стерильные пробирки, содержащие по 0,5 мл стерильного физиологического раствора.

Материал из язв и ран получают методом соскоба на границе пораженной и здоровой тканей.

Отбор материала для посмертной диагностики. Патологический материал необходимо взять как можно раньше: не позднее 12ч после гибели животного зимой и 6 ч - в теплое время года, законсервировать или отправить в свежем виде. Аутолизированный пат-материал для выделения возбудителя непригоден.

Для вирусологического исследования материалом могут служить:

Кровь или ее сыворотка, смывы из носоглотки и другие жидкости организма, стенки и содержимое афт, папулы (узелки), везикулы (серозные пузырьки), пустулы (гнойные пузырьки), кусочки головного мозга, печени, легких, селезенки или кусочки других органов и тканей, в которых вирус предполагаемого заболевания содержится в наибольшем количестве.

Для гистологического исследования патматериал берут только от свежих трупов. В лабораторию отправляют кусочки площадью 3. 4 см 2, толщиной не более 1 см, при этом следят, чтобы в них вошли пораженные и граничащие с ними неизмененные участки ткани.

Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем виде направляют для исследования в лабораторию только нарочным. Посылаемый материал тщательно упаковывают в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить рассеивание возбудителя по пути следования.

Консервирование патологического материала. Полученные пробы отправляют в лабораторию в свежем виде; если невозможно отправить в течение ближайших 24. 30 ч, то их фиксируют в консерванте.

Для вирусологического исследования материал консервируют 50% - м глицерином на стерильном физиологическом растворе Наилучший и простой метод сохранения биологических свойств вирусов в патматериале - охлаждение. Надежно закрытые (флаконы заворачивают в вату или упаковочную бумагу и плотно укладывают в термос, заполненный на 1/3 снегом или льдом. При этом в термосе в течение 12. 24 ч удерживается температура 2 6 "С, при которой вирусы сохраняются практически без изменений.

Выделение вируса. Эффективность выделения вируса из патологического материала повышается при использовании методов очистки и концентрирования вируссодержащих суспензий. Благодаря удобству выполнения, экономичности, а главное, возможности быстрого получения результатов, позволяющих одновременно определить типовую и вариантную принадлежность эпизоотического вируса, чаще всего применяют РСК или РДСК. Однако, когда доставленное количество вирусного материала недостаточно для исследования или РСК дает отрицательный результат или неспецифическую задержку гемолиза, то ставят биопробу на КРС (не менее 2 голов) в возрасте 18 мес, вводя 0,1 мл суспензии полученного материала в несколько точек слизистой оболочки языка и мякишей конечностей; общий объем испытуемого материала 2-3 мл. Появление афт на месте введения материала с последующим подтверждением в РСК свидетельствует о наличии ВЯ. Однако метод дорог и связан с опасностью выноса вируса за пределы учреждения. Поэтому в диагностической практике он применяется очень редко. Чаще для биопробы используют мышат-сосунков 4-6-дн возраста, морских свинок массой не менее 500 г и первичную культуру клеток почек телят, поросят, ягнят, щитовидной железы КРС и перевиваемые клетки - ВНК-21, IB-RS-2. Биопроба на мышах удобна и экономична. ИД 50 испытуемого штамма на мышатах-сосунах и крупном рогатом скоте одинаковы. Мышата-сосуны более чувствительны к вирусу ящура, чем морские свинки. Однако необходимо иметь в виду, что оценка результатов титрования на мышатах-сосунках нередко затруднительна.

Морские свинки легко заражаются при интрадермальном введении вируссодержащего материала в плантарную поверхность задних лапок методом тунелирования в дозе 0,2-0,5 мл. Заражают не менее 5 голов. Первичные поражения обычно появляются через 2-5 дн (по мере созревания). Вторичные поражения - везикулы в ротовой полости - обычно развиваются при заражении штаммами, адаптированными к морским свинкам.

Для выделения вируса чаще всего используют культуру первично-трипсинизированных клеток почек свиней или телят. Наблюдение за инфицированными культурами клеток ведут 7 дн, микроскопируя их ежедневно. Специфическая дегенерация клеток при подтверждении её специфичности в РСК свидетельствует о наличии ВЯ в испытуемом материале.

Индикация и идентификация вируса

В качестве экспресс-метода в настоящее время широко применяется ПЦР. Эго быстрый и чувствительный метод обнаружения ВЯ в тканях путем энзиматической амплификации РНК гена полимеразы.

РСК по 100%-ному гемолизу. Применяется для определения типов и подтипов (вариантов) ВЯ, вызвавших заболевание животных, а также для проверки производственных штаммов ВЯ при изготовлении вакцин и лабораторных штаммов в научно- исследовательской работе.

Антигенное родство (R) более 70% свидетельствует о том, что штаммы по антигенным свойствам идентичны друг другу и относятся к одному и тому же варианту, от 10 до 70% - к различным вариантам (подтипам) и менее 10%- к различным типам.

РСК по 50%-ному гемолизу. Успешно применяют в работе научно-исследовательских лабораторий и учреждений биологической промышленности. Разработан способ изучения иммунного статуса вакцинированных против ящура животных в РСК. Он позволяет специалистам на уровне областных ветлабораторий проводить мониторинг за иммунным состоянием стад в простой и достоверной реакции.

РПГА. Это простой, ускоренный, чувствительный метод идентификации ВЯ. По чувствительности реакция превосходит общепринятый метод типировання ВЯ в РСК в 8-16 раз. Сущность её заключается в том, что нагруженные АТ эритроциты агглютинируются при контакте с ящурным АГ гомологичного типа.

Определение типа ВЯ методом перекрестного иммунитета. Испытание перекрестного иммунитета на КРС с целью определения типовой принадлежности полевого штамма ВЯ проводится лишь в том случае, если по лабораторным тестам обнаруживается новый тип ВЯ, ранее не встречавшийся в стране. Определение типа ВЯ методом перекрестного иммунитета возможно и на морских свинках.

Штаммы считают идентичными, если вакцина предохраняет животных от развития генерализованного процесса при заражении используемыми штаммами. В случае иммунологического отличия штаммов вакцинированные животные, инфицированные гетерологичным штаммом, заболевают генерализованной формой ящура.

При определении в культуре леток типа ВЯ его относят к тому типу, сыворотка против которого предотвращает ЦПД. Разработан вариант универсальный эритроиммуноадсорбции (УЭИА), позволяющий определять АГ ВЯ в более высоких титрах, чем в РСК и РПГА.

ИФА. Высокоэффективен для выявления как 146S-, так и 12Б-компонентов ВЯ. Этот метод в 500 раз чувствительнее РСК при исследовании проб афтозного эпителия. Установлена высокая степень специфичности и чувствительности ELISA для идентификации и ти- пирования ВЯ всех 7 серотипов в эпителиальных тканях. Установлена высокая чувствительность сэндвич-варианта ИФА (на основе щелочной фосфатазы), который по эффективности превосходит в 207-219 раз, а с хромогенными субстратами - в 4-64 раза.

ИФА может быть пригодной в системе лабораторной диагностики ящура при исследовании диагностических штаммов. Для выявления АТ к ВЯ в ИФА можно использовать пробы крови, высушенной на фильтровальной бумаге. Первоначальный объем гепаринизиро- ванной крови равен 7,65 мкл.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика

Ретроспективная диагностика с целью определения типа и варианта ВЯ, вызвавшего в прошлом заболевание животных, основана на идентификации АТ в РПСК, РДП и РРИД, НРИФ, реакции серозащиты на мышатах и PH в культуре клеток.

Для достоверного выявления АТ и определения их типовой специфичности пробы сыворотки крови должны быть взяты не ранее 7 дн с момента появления у животных признаков везикулярного заболевания или проведения вакцинации. На исследование следует направлять 5-10 проб сыворотки от каждой возрастной группы. На партию проб сыворотки, направляемой для исследования, оформляют сопроводительный документ.

Выявление, идентификация типовой специфичности и количественное определение АТ к ВЯ в РРИД, РПСК, РНСК и НИФ могут проводиться в условиях обычных ветеринарнодиагностических лабораторий и не требует создания более строгого санитарного режима, поскольку проводятся с неинфекционными материалами.

Для обнаружения ингибиторных (неполных) АТ применяют РНСК (или РПСК). Эти АТ отличаются высокой авидностью. Они формируют комплекс АГ-АТ, не адсорбирующий комплемент. Связываясь с АГ быстрее полных АТ, они блокируют его, но не связанный при этом комплемент в присутствии гемолитической сыворотки вызывает лизис эритроцитов. Ингибиторные АТ обнаружены сейчас при многих инфекциях, в том числе при ящуре. Данная реакция применяется для определения типов ВЯ по сывороткам переболевших животных, а также для обнаружения постинфекционных и поствакцинальных АТ.

Типироваиие ВЯ по сывороткам переболевших животных в РДП. В реакции используют: АГ из очищенного и концентрированного лапинизированного В Я типов 0, А, С и др.; сыворотки от переболевших ящуром животных (не пригодны для исследования в РДП сыворотки крови животных, дважды переболевших ВЯ различных типов), типоспецифические сыворотки; агаровая среда.

Постановка реакции: в центральные лунки 7-ми 6-угольных систем на агаровых пластинках помещают соответствующие АГ типов 0, А, С и др. В периферические лунки помещают пробы испытуемых и контрольных сывороток. Затем пластинки выдерживают во влажной камере при 37°С. Реакцию учитывают через 16, 24, 48 и 72 ч после постановки. Положительная реакция характеризуется образованием одной или двух четких линий преципитации между лункой с АГ и сывороткой. ВЯ относят к тому типу, с АГ которого испытуемая сыворотка дает положительную реакцию. В случае обнаружения в сыворотках пре- ципитирующих АТ к 2 и более типам вирус относят к тому типу, с АГ которого испытуемые сыворотки дают наибольший процент положительных реакций.

РРИД. Сущность её заключается в формировании зоны специфической преципитации вирусных антигенов антителами, включенными в состав агарового геля. Реакция является типоспецифичной, позволяет провести исследования по типированию и количественному определению постинфекционных и поствакцинальных АТ.

Компоненты реакции: 1) антигены эталонные 7 типов ВЯ и других везикулярных болезней (ВБС 0-72 и Т-75, ВЭС А-48 и С-72, ВС Индиана и Нью-Джерси); 2) сыворотки эталонные 7 типов ВЯ и других везикулярных болезней (ВБС 0-72 и Т-75, ВЭС А-48 и С-72, ВС Индиана и Нью-Джерси); 3) агар белый или импортный фирм "Серва" или "Дифко", азид натрия или кислота карболовая, вода дистиллированная, БФР с pH 7,2-7,4. АТ, обнаруженные в испытуемой пробе сыворотки, относят к тому серотипу, с АГ которого они дали положительную реакцию. Их предельным титром считают максимальное разведение испытуемой сыворотки, с которым наблюдается положительная реакция. Титры сыворотки, полученные от вакцинированных животных, зависят от активности использованной вакцины, кратности и сроков ее применения и физиологических характеристик животного (возраст, вид). У 1- кратно вакцинированного против ящура взрослого КРС обычно титры через 30-90 дн после введения вакцины находятся в диапазоне 1:20-1:80, а после 2-кратной иммунизации в эти же сроки титр возрастает до 1:80-1:160. Титр у молодняка, как правило, в 2-3 раза ниже, чем у взрослых животных. У свиней и овец титры ниже, чем у КРС. После переболевания животных титры значительно выше, чем после вакцинации, и обычно превышают 1:160.

Встречный ИЭФ. Может быть с успехом использован для серотипирования ВЯ. Чувствительность его такая же, как и РДП, но учет результатов производится через 1,5 ч, тогда как реакция иммунодиффузии требует не менее 24 ч.

НИФ. При ящуре позволяет проводить дифференциацию АТ переболевших животных от вакцинированных. В справочнике "Диагностика вирусных болезней животных", 1992 г. приводится подробная методика постановки данной реакции при яшуре. Выявление в НИФ специфического свечения свидетельствует о наличии в испытуемой сыворотке постинфекци- онных антител, т.е. о переболевании животного ящуром.

С помощью РНГ А определяют напряженность поствакцин ального иммунитета у КРС. Установлена корреляция результатов, полученных при РПГА и PH. С помощью монАТ в PH или ELISA определяют не нейтрализуемые варианты ВЯ. В зависимости от чувствительности к монАТ все варианты ВЯ разделены на 3 группы. Варианты 1-й группы имели мутации преимущественно в области 140-160 VP1; варианты 2-й и 3-й групп мутируют в области 204 VP1 и 70, 139, 195 VP3 соответственно. Определены две большие АГ зоны вируса: чувствительная и нечувствительная к трипсину (VP1 140-160 и VP3 соответственно).

Реакция серозащиты на мышатах-сосунах. Используется для определения типа ВЯ по сывороткам животных-реконвалесцентов. Для постановки реакции используют эталонные (адаптированные к организму 4-7-дн мышат-сосунов) штаммы ВЯ различных типов. Штаммы должны быть типоспецифическими и иметь титр на мышатах-сосунах не ниже 7 lg в 1 г.

ВЯ, вызвавший заболевание животных, относят к тому типу, при заражении которым привитые сывороткой мышата остались живы. Необходимым условием достоверной оценки реакции серозащиты является обязательная гибель контрольных мышат, которым введен вирус, в то время как контрольные мышата, которым вводили только испытуемую сыворотку, должны выжить.

PH в культуре клеток. Для постановки PH необходимо иметь 24 пробирки культур клеток. Отсутствие ЦПД в пробирках, в которые внесена смесь вируса с сывороткой, при четко выраженном ЦПД в контрольных пробирках, указывает на наличие в исследуемой сыворотке АТ против данного типа ВЯ. Специфичность ЦПД можно установить путем исследования в РСК культуральной жидкости, полученной из пробирок с выраженным ЦПД.

Дифференциальная диагностика. При дифференциальной диагностике ящура необходимо исключить ВС, ВБС, ВЭС, катаральную лихорадку овец. Для дифференциальной диагностики в лабораториях используют диагностические наборы, выпускаемые биологической промышленностью, для ящура и ВБС.

Иногда в материале от людей, подозреваемых в заболевании яшуром, выделяли возбудителя энтеровирусной инфекции человека - вирус Коксаки серотипа В. Вирус вызывал видимое ЦПД в перевиваемых культурах клеток в течение 24 ч, имея икосаэдрическую форму, размером 20-30 нм и вызывал гибель мышат при интрацеребральном заражении.

ЯЩУР (Aphthae epizoolicae)

ЯЩУР (Aphthae epizoolicae) - остро протекающие, высококонтагиозное инфекционное заболевание парнокопытных, характеризующееся лихорадкой и наличием афтозных поражений на слизистой оболочке языка и ротовой полости, пятачке и на коже конечностей.

Этиология. Вирус ящура относится к риновирусам - представителям группы наимельчайших РНК-содержащих, чувствительных к кислой среде пикорнавирусов. Константа седиментации РНК вирусной частицы составляет 37 S, а молекулярная масса З*10 6 . Диаметр вируса - 220-250° А. Под электронным микроскопом обнаруживают кубическую форму строения. Состоит вирус из 32 капсомеров, образующих ромбический триконтаэдр.

Установлено семь иммунологических типов вируса ящура: О, А, С, SAT-1, SAT-2, SAT-3 и Asia-1. Внутри каждого из них имеется большое количество вариантов.

Вирусы и варианты различаются по антигенной структуре. Переболевание ящуром одного типа и варианта не создает у животных иммунитета к другим.

Вирус хорошо репродуцируется в тканевых культурах. К нему чувствительны первично трипсинизированные культуры клеток почек свиней, крупного рогатого скота, кроликов, почек эмбрионов свиней, клеток щитовидной железы поросят и телят и др., а также перевиваемые линии клеток ВНК, почек поросенка, почки эмбриона свиней. Для промышленного культивирования вируса используют культуру переживающей ткани эксплантатов эпителия языка крупного рогатогоскота по методу Френкеля.

Вирус устойчив к эфиру, хлороформу, этиловому спирту, ацетону и мертиолату. Оптимальной средой для переживания вируса в мясе является рН 7,5-7,8. При рН ниже 6,0 и выше 9,0 он быстро инактивируется. Под воздействием бетапропиолактона, 2-3-процентных растворов гидроокиси натрия, 1-процентной молочной кислоты и 1-процентного раствора формальдегида быстро погибает.

Вирус длительно и хорошо сохраняется при низких температурах - от-40° до -70° С, несколько хуже при -15° С. Высокие температуры (30° С и выше) оказывают разрушительное действие. В естественных условиях в стенках афт и лимфе при отсутствии солнечного света сохраняется 26 дней, в проточной воде - 38, а в жидких стоках - до 100 дней. В резервуарах с высокой концентрацией аммиака разрушается за 2 дня. В мясе, молоке, мясных и молочных продуктах в зависимости от рН и температуры сохраняется от нескольких дней до нескольких месяцев.

Эпизоотология. К вирусу ящура, кроме свиней, восприимчивы многие виды сельскохозяйственных животных (крупный рогатый скот, овцы, козы, яки, буйволы, олени), а также дикие парнокопытные (лоси, косули, сайгаки и др.). Из лабораторных животных при искусственном заражении к нему восприимчивы взрослые морские свинки, мышата-сосунки и крольчата в первые дни жизни.

В естественных условиях свиньи заражаются алиментарным путем, через слизистую ротовой полости и глотки, а также поврежденные кожные покровы. Не исключен и аэрогенный путь заражения.
Общеизвестна высокая чувствительность свиней к ящуру. Если в неблагополучном пункте своевременно не приняты соответствующие меры, то заболевание охватывает почти 100% поголовья.
Одним из основных путей заноса инфекции на фермы является скармливание животным необезвреженного обрата, полученного из молока коров, больных ящуром. Часто очаги возникают в стадах свиней, которых кормят не подвергнутыми термической обработке мясными и другими кухонными отходами. Нередко отмечают случаи возникновения болезни после завоза из других хозяйств свиней, находящихся в инкубационном периоде заболевания.

Кроме того, инфекция может быть занесена с кормами, подстилкой, предметами ухода, одеждой, обувью, транспортными средствами, загрязненными выделениями больных животных. Механическими переносчиками инфекции являются люди, птица, плотоядные и грызуны.

Вирусоносительство у свиней, переболевших ящуром, изучено недостаточно. Однако полагают, что оно менее продолжительно, чем у крупного рогатого скота.

Патогенез. Вирусом первоначально поражаются клетки слизистой оболочки глотки. Именно здесь происходит первичное его размножение. В последующем вирус проникает в кровь и лимфу и разносится ими в лимфатические узлы и другие органы и ткани. К этому моменту у свиней отмечают лихорадку и другие клинические признаки болезни. Появляются афтозные поражения. Со временем афты вскрываются, после чего наступает период угасания клинических признаков: лихорадка проходит, виремия постепенно исчезает, начинают образовываться антитела. Затем происходит заживление поражений и постепенное исчезновение вируса из тканей и жидкостей организма. Животное выздоравливает.

При проникновении вируса через поврежденные участки кожи и слизистой оболочки заболевание развивается аналогичным образом.

Клинические признаки. Инкубационный период -2-3, реже 5-12 дней; у вакцинированных животных - свыше 20 дней. Сразу по окончании инкубационного периода наблюдается непродолжительное повышение температуры тела (в пределах 41°С), ухудшение аппетита. В течение двух-трех дней масса животных значительно уменьшается. У большинства заболевших на конечностях образуются афты. Обычно они развиваются сначала на венчике, а несколько позже - в межкопытной щели. Животные хромают. В ряде случаев обнаруживают афтозные поражения на пятачке, значительно реже на слизистых оболочках губ и языка; у свиноматок - на вымени. У молодых животных часто возникают осложнения и гибель достигает 20%, главным образом вследствие поражения сердца. Другие осложнения могут обусловливаться вторичной бактериальной инфекцией после вскрытия афт и дегенеративным поражением мышц (особенно сердечной).

У поросят-сосунов ящур протекает в безафтозной форме с признаками острого катара желудочно-кишечного тракта и с расстройством сердечной деятельти.

Отмечены случаи злокачественного ящура, когда заболевание протекает исключительно тяжело, с высокой летальностью, даже среди взрослых животных. Наблюдаются также случаи субклинического течения болезни - чаще всего среди частично иммунных к ящуру животных и там, где в корм свиньям систематически используют кислые корма.

Патологоанатомические изменения. Отмечают афтозные поражения на коже венчика, мякишей и межкопытной щели, у свиноматок - на вымени. Реже обнаруживают афты на слизистой оболочке ротовой полости и языка. В сердечной мышце иногда наблюдают кровоизлияния и серовато-желтые очаги некроза, в легких - отек и очаги серозной пневмонии. Изменения в других паренхиматозных органах не постоянны и не являются характерными для ящура.

Диагностика. Диагноз ставят на основе характерной клинической картины болезни (наличие афтозных поражений на пятачке, вымени, конечностях) и эпизоотологических данных. Чаще всего болезнь появляется после заболевания крупного рогатого скота.
Для идентификации вируса, вызвавшего болезнь, производят отбор патологического материала и направляют его для исследования в областную ветеринарную лабораторию. Обычно для исследования от 2-3 животных отбирают стенки афт с пятачка, вымени или конечностей в количестве не менее 5 г. Афты должны быть свежие, созревшие, непрорвавшиеся, плотной консистенции, не издающие гнилостного запаха. При отборе, доставке и исследовании патматериала должны быть созданы условия, исключающие рассеивание вируса и вынос его за пределы диагностической лаборатории.

Общепринятым методом идентификации вируса является РСК. Если испытуемый антиген в РСК оказался неактивным, то при необходимости проводят выделение вируса из патологического материала на культуре ткани или мышатахсосунках с последующим исследованием выделенного вируса в РСК.

Кроме того, для идентификации вируса могут быть использованы РДП, реакция нейтрализации и РПГА.

Необходимо исключить везикулярную болезнь, вызываемую энтеровирусом и поражающую только свиней. При исследовании в РСК материала от больных везикулярной болезнью с ящурными сыворотками получают отрицательный результат. Кроме того, энтеровирус размножается только в культуре клеток почки свиньи и в отличие от вируса ящура не размножается в культуре ткани бычьей почки.

Энтеровирусом не удается заразить морских свинок, белых мышей и кроликов. Наиболее существенным дифференциальным признаком является устойчивость возбудителя везикулярной болезни к кислой среде (рН 3,0-5,0) при комнатной температуре в течение 30 мин. Вирус ящура в этой среде при тех же условиях полностью инактивируется.

В качестве лабораторных методов дифференциации возбудителя везикулярной болезни свиней от вируса ящура используют РСК, РДП и РН.

Следует отметить особую трудность дифференциации ящура от везикулярного стоматита и везикулярной экзантемы свиней. Ее осуществляют путем постановки биологических проб на крупном рогатом скоте, лошадях и свиньях. При этом учитывают следующие данные: лошади болеют только везикулярным стоматитом и как исключение могут заболеть при введении материала, содержащего вирус везикулярной экзантемы, в язык. Везикулярной экзантемой болеют только свиньи. Крупный рогатый скот восприимчиз к ящуру и везикулярному стоматиту. Однако при внутримышечном введении вируса ящура удается вызвать заболевание, а при введении вируса везикулярного стоматита нет.

Иммунитет. Свиньи после переболевания ящуром приобретают хотя и напряженный, но менее продолжительный, чем крупный рогатый скот, иммунитет - от 22 до 56 недель. Поросята, родившиеся от переболевших ящуром свиноматок, приобретают с молозивом пассивный иммунитет.

В качестве средств пассивной иммунизации при ящуре свиней применяют реконвалесцентную сыворотку свиней или крупного рогатого скота и противоящурный иммунолактон.
Высокоэффективными при ящуре поросят являются гамма-глобулин и комплекс гамма-бета-глобулин из сыворотки крови ящурных реконвалесцентов.

Пассивная иммунизация угнетающе .влияет на формирование поствакцинального противоящурного иммунитета у свиней. Чем сильнее выражен пассивный иммунитет, тем больше его влияние на поствакцинальный. В связи с этим вакцинацию свиней следует проводить через 3 недели после обработки препаратами пассивной иммунизации.

В последнее время широко используется противоящурная гидроокисьалюминиевая формолвакцина с сапонином из лапинизированного вируса А22- Установлено, что в прививной дозе препарата должно содержаться не менее сорока 50процентных защитных доз. Продолжительность создаваемого иммунитета - 2,5- 3 мес.

Концентрированная противоящурная сапониновая гидроокисьалюминиевая формолвакцина из лапинизированного вируса А22 при двукратной прививке с интервалом 7-14 дней в дозе по 5 мл создает у свиней выраженный иммунитет.

С положительными результатами на свиньях испытаны инактивированные вакцины, в составе которых в качестве адъюванта использованы различные масла, ДЭАЭ-декстран, а в качестве инактивантов - глицилальдегид, ацетилэтиленимин, этилэтиленимин. Преимущество этих вакцин в том, что они в незначительных дозах (от 0,25 до 2 мл) создают более напряженный и продолжительный иммунитет.

Меры борьбы и профилактики. Мероприятия по предупреждению и ликвидации ящура свиней регламентируются инструкцией, утвержденной Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР.

Эпизоотическим очагом ящура считают помещение (одно или несколько), отдельную животноводческую ферму, двор, летний лагерь, участок, пастбища, мясокомбинат и другие объекты, где имеются больные ящуром животные или где гранятся продукты животноводства и сырье, полученные от больных или переболевших ящуром животных или инфицированные вирусом иным путем.

Неблагополучным по ящуру пунктом является населенный пункт, животноводческая ферма с помещениями и прилегающими к ней выгонами, пастбищами, водоемами, отдельные пастбища и урочища, участки скотопрогонной трассы и другие объекты, на территории которых установлен эпизоотический очаг.

Угрожаемой по ящуру зоной считают населенные пункты, хозяйства, пастбища (урочища) и другие территории, граничащие с неблагополучным по ящуру пунктом. Территорию угрожаемой зоны определяют местные ветеринарные органы в зависимости от хозяйственных связей, географических, климатических, природных и других условий.

Для предотвращения заноса ящура в благополучные хозяйства устанавливают строгий контроль за комплектованием свинопоголовья. Его осуществляют только из благополучных хозяйств с предварительным 30-дневным карантинированием. Особое внимание уделяют вопросам обеззараживания обрата и других молочных продуктов, завозимых из молочных заводов для скармливания свиньям.
В откормочных хозяйствах, где в корм свиньям используют кухонные и боенские отходы, последние перед скармливанием надежно обеззараживают. На свинофермах вводят строгий ветеринарно-санитарный режим, систематически ведут клинические наблюдения за состоянием животных. Регулярно проводят очистку, дезинфекцию, дезинсекцию и дератизацию помещений.

В угрожаемой зоне, кроме перечисленных мероприятий, полностью прекращают хозяйственную связь с неблагополучным по ящуру пунктами, устанавливают строжайший ветеринарно-санитарный надзор за заготовкой и вызовом скота и сырья животного происхождения, а также за ветеринарно-санитарным режимом на бойнях и мясоперерабатывающих предприятиях. Оповещают руководителей хозяйств и население об угрозе заноса ящура и мерах его предупреждения. На молочных заводах, сепараторных и молокоприемных пунктах молоко, поступающее из хозяйств угрожаемой зоны, подвергают обязательной пастеризации при температуре 85° С в течение 30 мин или кипячению в течение 5 мин. Возвращаемые хозяйствам, обрат, сыворотка и другие молочные продукты должны подвергаться кипячению.

В необходимых случаях проводят профилактическую вакцинацию свинопоголовья против ящура.

При возникновении ящура мероприятия направлены прежде всего на обеспечение полной изоляции возникшего очага. Территорию очага огораживают, устанавливают в нем круглосуточные сторожевые посты. При входе в очаг организуют ветеринарно-санитарный контрольно-пропускной пункт с пароформалиновой камерой, а также перевалочную площадку для кормов, завозимых извне. Для обслуживания животных и проведения других хозяйственных работ на территории очага закрепляют постоянный транспорт и необходимое количество обслуживающего персонала. Организуют ежедневную дезинфекцию.

Больных животных изолируют и лечат сывороткой реконвалесцентов или специфическим иммунолактоном в сочетании с применением симптоматических лечебных средств (растворов перманганата калия, медного купороса, пенициллина, мазей с обезболивающими средствами и др.). Клинически здоровых свиней подвергают прививке противоящурной вакциной в соответствии с наставлением по ее применению.

При выявлении первых случаев заболевания ящуром в благополучной местности главный ветеринарный врач района имеет право внести предложение райисполкому о немедленном убое всей неблагополучной группы животных с предварительным отбором необходимого патологического материала для идентификации вируса. Убой таких животных проводят на специально отведенных убойных площадках с соблюдением всех ветеринарно-санитарных правил, направленных на предотвращение рассеивания вируса. Трупы павших животных уничтожают путем сжигания или зарытая в траншею непосредственно на территории очага.

В случае появления ящура экзотического типа (варианта), ранее не регистрируемого на территории страны, специальные комиссии по борьбе с ящуром принимают решение о немедленном уничтожении на месте.путем сжигания всех больных и подозреваемых в заболевании животных, остатков кормов, подстилки, навоза и т. д. с проведением тщательной механической очистки и дезинфекции помещений и территории неблагополучной фермы. Животных, подозреваемых в заражении, подвергают противоящурной вакцинации. После снятия карантина с хозяйства их подвергают убою на специально выделенных мясокомбинатах. Мясо от таких животных подлежит промышленной переработке, а субпродукты - уничтожению.

Карантин снимают через 21 день после выздоровления последнего заболевшего в данном пункте животного и проведения заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий. После снятия карантина вводится ряд ограничений. Запрещается в течение 12 мес вывозить и выводить из хозяйств переболевших и иммунизированных против ящура свиней, находившихся в контакте с больными, для племенных и пользовательных целей, а также для продажи на рынках. Не разрешается содержать переболевших животных совместно с неболевшими неиммунизированными свиньями.

Не разрешается ввозить в хозяйство восприимчивых к ящуру свиней, привитых противоящурной вакциной, в течение 21 дня после вакцинации, а невакцинированных свиней - в течение 12 мес.
Животные, переболевшие ящуром и предназначенные для убоя, подлежат убою на специально выделенных мясокомбинатах в пределах данной области до истечения трех месяцев после переболеванйя. Отправлять таких животных в одной партии с неболевшими ящуром запрещается.