Пцр на гепатит с может меняться или нет
ПЦР на гепатит С – обязательный анализ при обследовании пациента с симптомами поражения печени. Исследование назначают для подтверждения диагноза и получения максимально полной информации о возбудителе болезни, активности вирусной инфекции. Результаты служат основанием для назначения противовирусной терапии, определения ее продолжительности и оценки эффективности.
Диагностика с применением методики полимеразной цепной реакции получила распространение сравнительно недавно. Исследования на эту тему велись с середины 1970-х годов. Но первые публикации относительно возможности использования ПЦР в практической медицине появились только в середине 1980-х гг.
При объяснении, что такое ПЦР, врачи подчеркивают, что это самый надежный и достоверный анализ при гепатите С. Данный тест позволяет не только выявить частицы РНК вируса, но и установить его концентрацию (указывает на активность инфекционного процесса) и генотип. Полученные результаты играют ключевую роль для определения тактики и схемы дальнейшей терапии.
В чем состоит суть постановки реакции? При помощи определенных биологически активных веществ добиваются увеличения количество частиц РНК вируса в небольшом объеме крови. Впоследствии участки генома определяются разнообразными физико-химическими методами.
Постановка ПЦР осуществляется при помощи нескольких компонентов:
При некоторых способах постановки ПЦР дополнительно используются РНК-зонды и другие внутренние контроли, используемые в качестве контрольных образцов при выявлении результатов.
Сам процесс увеличения участков вирусной РНК при помощи матрицы именуют амплификацией. Реакция протекает в несколько этапов:
Перечисленные циклы постановки ПЦР повторяются несколько десятков раз, что обеспечивает многократное увеличение количества участков РНК возбудителя гепатита С уровня, определяемого лабораторными способами.
Перед проведением анализа образец забора крови соответствующим образом подготавливается. Содержащиеся РНК адсорбируются на буфере-носителе, затем смываются и используется для постановки полимеразной цепной реакции.
Детекция результатов проводится либо методом электрофореза (горизонтального или вертикального), либо способом гибридизации. Способ расшифровки результатов реакции выбирается исходя из целей проведения исследования (просто выявление РНК, либо определение ее ориентировочного количества).
ПЦР – самый точный анализ крови на гепатит С
Перечень предлагаемых исследований на HCV включает несколько пунктов, отличающихся по стоимости, срокам готовности и способу выполнения.
Если обратиться к протоколам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), порядок диагностики инфекции включает несколько последовательных этапов.
Для начала сдают:
- общий анализ крови и мочи;
- биохимия крови;
- исследование на содержание глюкозы (строго натощак);
- анализ на ВИЧ;
- флюорография;
- иммунограмма (при подозрении на наличие аутоиммунных патологий).
При отклонении показателей биохимического анализа крови от физиологической нормы пациенту назначают тест, основанный на обнаружении специфических антител, вырабатываемых при контакте вируса с кровью (ИФА).
Но подобный анализ крови на гепатит С имеет существенный недостаток. Процесс синтеза антител зависит от функционирования и выработки иммунокомпетентных клеток. Индивидуальные особенности организма могут стать причиной как ложноотрицательного, так и ложноположительного ответа.
Дальнейшая тактика действий зависит от того, что покажет исследование. В случае подтверждения диагноза, пациенту сразу же назначают гепатопротекторы, предупреждают о важности правильного питания и здорового образа жизни. Но таргетная терапия невозможна без определения уровня вирусной нагрузки и генотипа гепатита С.
Некоторые лекарственные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В. Поэтому для исключения осложнений, дополнительно назначают анализы на HBsAg. HCV лечат только после получения отрицательного результата исследования.
Виды: качественный, количественный и генотипирование
При первичной диагностике гепатита С серологическим методом определяется титр вырабатываемых антител. Такой результат приблизительно показывает активность патологического процесса. Но максимально точную информацию доктор может получить только после изучения данных ПЦР.
В настоящее время практически во всех лабораториях анализ выполняют ультрачувствительным методом. Таким образом диагностика HCV возможно уже через 10–14 дней после заражения, реже – спустя 2,5–3 недели. В зависимости от целей, преследуемых в ходе исследования, доктор назначает конкретный тип теста.
Существуют следующие разновидности ПЦР:
- Качественный. При назначении диагностических тестов, у пациентов возникает вопрос, что показывает подобный метод исследования. Качественный анализ способом ПЦР – высокочувствительный тест, определяющий наличие РНК вируса в крови в минимальной концентрации. Обычно подобная разновидность полимеразной цепной реакции ставится по технологии обратной транскрипции. Это один из немногих способов ПЦР, в ходе которого в качестве мишени можно использовать РНК.
- Количественный. Количественный анализ на гепатит С позволяет определить точный уровень РНК HCV в крови. Проведение исследования возможно только одним способом – методом real-time. В ходе подготовки материала к постановке ПЦР в образец добавляют краситель. После каждого цикла амплификации проводится автоматизированное количественное исследование в режиме реального времени. Нередко методику проводят в сочетании с обратной транскрипцией. Таким образом возможно качественное определение малого количества копий РНК вируса. Устанавливать уровень РНК HCV количественно имеет смысл, если получен положительный результат качественной ПЦР.
- Генотипирование. Анализ сдается проводится на конечной стадии диагностического процесса. Принцип исследования построен на разнице в последовательности нуклеотидов, что отличает один генотип вируса гепатита С от другого. Обычно анализ делают методом мультипраймерной (мультиплексной) ПЦР.
При подозрении на носительство вируса, необходимо выполнить качественную ПЦР. Если результат отрицательный, человек скорее всего здоров. Но для полного исключения заражения рекомендуют повторить исследование через 7–10 дней. Если же РНК вируса обнаружена, проводят дальнейшие тесты (количественный и генотипирование).
Показания к проведению лабораторного теста
Основным показанием к сдаче крови на гепатит С методом полимеразной цепной реакции является положительный результат иммуноферментного анализа (вне зависимости от разновидности: Total, дифференцированный тест на IgG и IgM).
Кроме того, провериться нужно:
- в период беременности (тест делают дважды – в первом триместре и за 7–10 недель до родов);
- при работе, связанной с повышенным риском инфицирования (медсестры, лаборанты, работники донорских центров, косметологи и т.д.);
- при беспорядочных половых связях и незащищенном контакте с малознакомым человеком;
- на фоне ВИЧ, онкологических заболеваний, приема определенных медикаментозных средств и т.д.;
- пациентам, зависимым от внутривенных наркотиков;
- при постоянном проведении инвазивных диагностических или лечебных процедур;
- при проведенном до 1992 года переливании крови (ранее не существовало достоверных способов проверки донорского биологического материала на наличие вируса).
- при соприкосновении открытой раны с чужой кровью, нестерилизованным медицинским инструментарием.
Рост заболеваемости растет с каждым годом. Поэтому для раннего выявления инфекции лабораторные тесты на HCV рекомендуют сдавать один раз в год.
Где сдать анализ
При обращении в поликлинику, пациент имеет право на бесплатные анализы. Но сначала сдают тест ИФА. И только при положительном либо сомнительном результате показано исследование методом ПЦР. Поэтому провести срочную диагностику можно обратившись в платную лабораторию, где сдать кровь на ПЦР можно в удобное для пациента время. Одновременно рекомендуют сразу проверить показатели печеночных ферментов, стандартные клинические параметры крови.
Как правило, изучение крови методом ПЦР доступно практически в любой лаборатории. Если пункт забора крови не оснащен должным оборудованием, биологический материал транспортируют для проведения исследования с соблюдением температурного режима и других условий. Проведение ПЦР в поликлинике возможно только после других обследований, результаты которых косвенно укажут на наличие гепатита С.
Как правильно сдавать кровь
Перед тем, как сдавать кровь на обнаружения возможного вируса, следует соблюсти ряд правил подготовки к анализу.
Основные аспекты указаны в памятке:
- За 5–7 дней отказаться от потребления жирной, жареной пищи, алкоголя. В целом, доктора рекомендуют придерживаться правил питания по диете №5.
- За 12–14 часов до проведения исследования не есть. Пить можно только воду.
- Сдать кровь лучше в первой половине дня.
- До процедуры не курить.
Также следует предупредить доктора о принимаемых лекарственных препаратах, возможных проблемах со здоровьем, хронических заболеваниях.
Забор крови выполняется из вены. После окончания процедуры место прокола медсестра заклеивает стерильным пластырем, предупреждает о необходимости согнуть руку и держать ее в таком положении 10–15 минут. В противном случае высока вероятность появления болезненной гематомы.
Сколько по времени делается исследование?
Сколько делается анализ, зависит от лаборатории. Средний срок выполнения колеблется в пределах 1–3 дней. Некоторые клиники предоставляют платную услугу быстрой постановки ПЦР, однако время проведения ограничивается возможностями медицинской аппаратуры.
В поликлинике результаты могут передаваться врачу в течение 7–10 дней. Это связывают с большим наплывом пациентов. При этом биологический материал хранится в соответствии со всеми требованиями.
Расшифровка результатов
Как правило, расшифровка качественной ПЦР не представляет сложности. Но во избежание ошибочной трактовки, с полученным из лаборатории бланком следует обратиться к врачу. Варианты, что означает та или иная разновидность ПЦР, приведены в таблице.
Вид исследования | Возможный результат и предполагаемая расшифровка | |||||||||||||||||||
Качественная ПЦР | ||||||||||||||||||||
Количественная | ||||||||||||||||||||
Генотипирование |
Вирусная нагрузка (МЕ/мл) | Что обозначает |
---|---|
Нет | Норма для здорового человека, свидетельствующая об отсутствии инфекции в его организме. Иногда такое значение может наблюдаться и при малой концентрации РНК в крови (антитела гепатита С присутствуют, а ПЦР отрицательный). Но подобное явление возникает достаточно редко. |
Не более 1,8х | Нагрузка на организм минимальная, что явно указывает на пребывание патологии в инкубационном периоде. |
Менее 8х | Вирус только начинает развиваться и стремится к стадии обострения. На этом этапе есть смысл в полноценном лечении недуга. |
Больше 8х | Заболевание стремительно прогрессирует, разрушая печень больного. Проявляется первая симптоматика. Шансы на выздоровление очень малы. |
Более чем 2,4х | Болезнь слишком долго паразитирует организм, а ее характер постепенно переходит из острого в хронический. Курс терапии при такой вирусной нагрузке будет максимально долгим, а вероятность полного выздоровления отсутствует. |
Расшифровать результаты генотипирования можно по другой таблице, указанной ниже:
Показатель | Обозначение |
---|---|
РНК 1B, 2B или 3B | В крови человека обнаружен гепатит категории С, со свойственным для территории РФ генотипом. |
РНК 4, 5, 6 или 7 | Вирусная патология имеет природу, не характерную для России и стран СНГ. При таком результате теста пациента отправляют на ряд дополнительных анализов, для определения специфики генотипа. |
Нет | Количество рибонуклеиновой кислоты слишком маленькое, или же такой элемент полностью отсутствует в изученном биоматериале. |
По качественному анализу ПЦР на гепатит С можно определить, было ли обнаружено РНК вируса в крови больного или нет. Остальную информацию о недуге врачу предоставляют два вышеперечисленных теста.
Ложноположительные и ложноотрицательные результаты
Несмотря на то, что исследование полимеразной цепной реакции считается достаточно точным методом определения вирусных патологий, некоторые ошибки в его результатах все-же могут возникнуть.
А провоцируют их чаще всего следующие обстоятельства:
- Смешивание биоматериалов в лаборатории (при попадании плазмы в соскоб со слизистой оболочки, урину, или другие жидкости, результат теста ПЦР будет ложноположительным);
- Несоблюдение правил транспортировки и хранения исследуемого материала (при неправильном обращении биологические жидкости теряют свою информативность, из-за чего анализ покажет ложный отрицательный результат);
- Отсутствие стерильности в лабораторном помещении (данная ситуация полностью аналогична предыдущему обстоятельству, провоцирующему ошибки в расшифровке ПЦР анализа);
- Игнорирование непригодности реагентов (нередко причиной ложного результата исследования полимеразной цепной реакции стают лабораторные материалы, у которых истек срок годности).
При этом, ложную расшифровку можно получить и при несоблюдении вышеперечисленных правил подготовки к сдаче крови. Но в таком случае повторную процедуру придется делать за свой счет.
Частота проведения ПЦР-анализа
Ограничений по проведению ПЦР теста в современной медицине не предусматривается. Но рекомендуемое количество исследований для каждой категории пациентов будет несколько отличаться. А именно:
- Здоровому пациенту анализ проводится один раз в 1-2 года;
- У человека, проходящего терапию от гепатита С, биоматериал проверяется два раза: перед началом лечения и в середине курса;
- Беременным девушкам исследование может проводиться 1-2 раза в месяц на протяжении всего срока вынашивания плода;
- Для новорожденных процедура повторяется 1-2 раза в год.
В отличие от ультразвукового сканирования, такой вариант обнаружения вирусной патологии считается абсолютно безопасным, поэтому применять его можно в любом возрасте.
Единственный недостаток данной процедуры – высокая стоимость. Ну а что касается эффективности, то ПЦР-тест является наиболее информативным анализом, по которому можно определить не только наличие инфекции в организме, но и текущую стадию ее развития. А это ключевой фактор при назначении правильной терапии.
Читайте также:
- Насморк симптом гепатит с
- Сколько живут вирусы в крови вне организма
- Распространен до грипп в италии
- Карты для ксс без вирусов
- Есть ли такой вирус который съедает память