Сыворотки против гепатита у собак

Инфекционный гепатит у собак (Hepatitis infectiosa canis, болезнь Рубарта, вирусный гепатит собак) – острая контагиозная вирусная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, катаром слизистой оболочки дыхательного и пищеварительного трактов, поражением печени и центральной нервной системы.

Возбудитель — ДНК-содержащий вирус (Adenovirus caninae) из рода Mastadenovirus семейства аденовирусов. По своей вирулентности штаммы несколько различаются, но все они однородны в иммунологическом и антигеном отношении и обычно обладают невысокой вирулентностью. В зависимости от выраженности тропизма к тканям печени или мозга штаммы вируса подразделяются на нейро- и гепатотропные. Вирус адаптируется к куриным эмбрионам, проявляет цитопатическое действие в культурах клеток почки и семенника собаки, почки хорька, енота и поросенка, формируя бляшки в монослое.

Возбудитель гепатита собак имеет иммунологическое родство с вирусом инфекционного ларинготрахеита собак, а также одностороннюю антигенную связь с типом 7 аденовируса человека.

Вирионы возбудителя овальные и круглые, располагаются в ядрах клеток. Их структура включает преципитирующий, гемаглютинирующий и комплиментфиксирующий антигены. У всех штаммов имеются одинаковый групповой и специфические комплиментсвязывающие антигены. Групповой антиген родствен антигену аденовируса человека и очень мало — гепатиту человека.

Вирус хорошо переносит высушивание и замораживание. При комнатной температуре он сохраняет активность 10-13 недель, при 4°С – более 9 месяцев, при 37°С –до 29 дней, 50°С -150 минут, 60°С – 3-5 минут, 100°С- 1мин. В патологическом материале, консервированном 50%-м раствором глицерина, вирус при 4°С не погибают до 8 лет. Возбудитель устойчив к эфиру, хлороформу и метанолу.

Под влиянием ультрафиолетовых лучей он быстрее всего инактивируется в водных растворах (за 30-60 мин). Многие дезинфицирующие вещества (формалин, фенол, лизол, свежегашеная известь, щелочи), разрушают вирус.

Эпизоотология. Инфекционным гепатитом поражаются собаки, а также песцы, лисицы, волки, шакалы. К инфекционному гепатиту более восприимчив молодняк в возрасте 1,5-12 месяцев. Животные старше 3лет заболевают редко. Человек, кошки, мыши и обезьяны могут быть скрытыми носителями вируса инфекционного гепатита собак. Источником возбудителя инфекции являются больные животные, реконвалисценты и вирусносители, у которых с носовой слизью, слюной, конъюнктивальным секретом, мочой и фекалиями вирус выделяется на протяжении нескольких недель и даже месяцев. В природе резервуаром вируса служат дикие звери и бродячие собаки. Инфекционный гепатит протекает в виде единичных случаев или эпизоотических вспышек.

В собачьих питомниках инфекционный гепатит иногда охватывает до 75 % собак и сопровождается высокой летальностью (35% и более). Заражение происходит алиментарным путем (через корм и воду). В распространение инфекционного гепатита большое значение могут иметь корм, вода, инвентарь, спецодежда и т.п., зараженные экскрементами больных животных.

Патогенез. В естественных условиях вирус инфекционного гепатита, попав через рот собаки фиксируется на поверхности слизистой глотки и поражает эпителиальные клетки небных миндалин, вызывая из воспаление (тонзиллит).

Прикреплении вируса к клетке мишени осуществляется в условиях низкого рН за счет структур основания пептона, а в нейтральной среде посредством нитевидных отросков. Процесс внедрения вируса в клетку происходит путем пиноцитоза или прямо через клеточную мембрану. Вслед за эпителиальными клетками небных миндалин вирус может поражать лимфоидные клетки (лимфоциты) и фагоциты находящиеся в этом органе. В дальнейшем через лимфатические сосуды и кровь вирус попадает в регионарные (подчелюстные и заглоточные) лимфоузлы, а от туда с током крови разносятся по всему организму. Как правило вирус поражает клетки почек, печени, лимфоузлов, тимуса, кишечника, и т.д. В организме собаки возникают множественные воспалительные очаги. Вирус обладает свойством непосредственно поражать и разрушать клетки эндотелия сосудов. В результате происходит нарушение сосудистой проницаемости и как следствии в различных органах (кишечнике, печени, почках, селезенке, мозговых оболочках, лимфоулах и др.) развиваются множественные отеки и кровоизлияния – характерный признак гепатита собак. При неблагоприятном течении заболевания в этих органах могут образовываться и некротические очажки.

Особенно выражены деструктивные изменения в печени, где вирус поражает клетки печеночной паренхимы, вызывая в ней явления зернистого жирового перерождения. Данный процесс при остром течении инфекционного гепатита может сопровождаться интенсивным клеточным распадом и образованием в печени некротических очагов.

Процесс в печени обычно начинается с поражения вирусом эндотелия кровеносных сосудов печени. Происходит повышение их порозности и развиваются многочисленные периваскулярные отеки и геморрагические инфильтрации органа. На гистосрезах в это время можно наблюдать выраженное очертание дольчатого рисунка печени за счет выпота плазмы и клеток крови в просветы Диссе.

Часто при сосудистой патологии возникают коллатерали между воротной и полой венами (портальная гипертензия). Вследствие этого необезвреженные токсические продукты из кишечника, минуя печень попадают в кровеносное русло. У животного развивается токсикоз, который вызывает раздражение рвотных центров мозга. Попадание в кровь желчных пигментов также может быть результатом сосудистых патологий.

Развитие токсикоза в организме больной собаки активно способствует размножению вируса в печеночных клетках Купфера обеспечивающих обезвреживание различных микроорганизмов и их токсинов. В результате эти клетки погибают. Нарушение функции печени и в частности подавления процессов резорбции клетками печени витамина К приводит к снижению продукции факторов свертывания крови (протромбина и др.). Это приводит к множественным кровоизлияниям в слизистых и серозных оболочках. После поражения нервных центров головного и спинного мозга появляются локомоторные расстройства. В период выраженных клинических признаков вирус находится в крови, во всех секретах и экскретах, позднее — только в почках и моче.

Клинические признаки. Инкубационный период при спонтанном гепатите у собак продолжается 6-9 дней и более, у диких зверей 10-20 и более дней. При инфекционном гепатите различают молниеносное, острое, хроническое и латентное течение болезни. Клинические признаки болезни чаще всего проявляются у молодняка 1-9 месячного возраста.

При молниеносном течении смерть у животного наступает внезапно при явлениях судорог, в течение 2-24 часов.

При исследовании крови ее картина характеризуется выраженной лейкопенией. В крови исчезают эозинофилы, а у нейтрофилов отмечаем сдвиг ядра влево (появление юных, менее совершенных и активных клеток). Увеличивается количество моноцитов. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) ускоряется до 20-30мм. В сыворотке крови обнаруживаем повышение уровня билирубина и трансаминаз.

При исследовании крови в период выздоровления, наблюдаем увеличение количества лейкоцитов (до 30-35 тысяч) и в том числе эозинофилов (до нормы). При этой картине крови температура тела у больного животного падает и происходит снижение токсикоза.

Болезнь продолжается обычно от двух дней до двух недель. Признаки расстройства функции нервной системы могут возникнуть и в период выздоровления и напоминают симптомы при чуме. Возникают они в результате сосудистых патологий (отеков и геморрагии) в области оболочек спинного и головного мозга. Проявляются они нарушениями координации движения, судорогами, параличами и парезами. При этом нервные явления при инфекционном гепатите протекают гораздо легче, чем при чуме плотоядных и могут быстро проходить без последствий.

Хроническое течение болезни бывает преимущественно у взрослых собак и кошек или в стационарных эпизоотических очагах. При хроническом гепатите симптомы болезни не характерны и не отчетливы. При хроническом течении у больных животных отмечаем нарушение пищеварительных функций, а постоянные диареи и рвота приводят к истощению и обезвоживанию организма, редкую лихорадку с подъемом температуры тела до 39,5-40°С, анемию,особенно на слизистых оболочках, отечность подкожной клетчатки и флегмону в области головы и конечностей, некрозы в мышцах.

Все это влечет за собой нарушение в организме больного животного электролитного обмена (гипокалемию и гипонатремию). Больное животное сильно худеет, слабеет, с трудом поднимается.

Больные самки могут абортировать или родить нежизнеспособных щенков.

Латентная форма болезни сопровождается выделением вируса без признаков заболевания животного инфекционным гепатитом. Однако болезнь может возникнуть под влиянием неблагоприятных факторов, снижающих резистентность организма (переохлаждение, гиповитаминозы, смена хозяина, обстановки и т.д.).

Диагностика. Диагноз ставят на основании анализа эпизоотологических данных, клинических признаков, патолого-анатомических изменений и лабораторных исследований и наличия телец Руперта.

В условиях ветеринарных клиник наиболее часто прижизненный диагноз на инфекционный гепатит ставят на основании клинических признаков болезни и серологических тестов. С целью обнаружения противовирусных антител в сыворотке крови больных инфекционным гепатитом собак применяется реакция диффузной преципитации (РДП) в агаровом геле, имунноферментный, радиоиммуный и другие тесты.

Лечение. Лечение как при всех заболеваниях должно быть комплексным. Больную собаку необходимо изолировать в теплое, без сквозняков, затемненное помещение. Предоставляем полный покой и тишину. Кормим легкопереваримыми белковыми и углеводистыми витаминизированными кормами. Жирную пищу из рациона больной собаки полностью исключаем. Специфическая иммунотерапия проводится за счет специфических гипериммунных сывороток против инфекционного гепатита собак. Наиболее активна в этом отношении сыворотка от переболевших инфекционным гепатитом собак. При этом применение сыворотки наиболее эффективно на ранних стадиях развития болезни.

Для подавления патогенной микрофлоры ветспециалисты чаще всего назначают детские антибиотики цефалоспоринового ряда (кефзол, клафоран, карицеф, фортум и др.) пенициллины: ампициллин, бензилпенициллин, ампиокс. Их больному животному вводят 2-3 раза в день из расчета 10-50 тыс. ЕД на 1кг массы тела в течение недели.

Обязательным является назначение антигистаминных средств: фенкарола, тавегила, супрастина, димедрола или пипольфена.

Симптоматическая терапия больного животного состоит из применения различных витаминных и поливитаминных препаратов. Больному животному необходимо 3-4 раза в сутки вводить аскорбиновую кислоту или аскорутин, витамины В-1, В-2,В-6,В-12, и викасол. Все витаминные препараты инъецируют внутримышечно или подкожно с интервалом по времени. Из поливитаминов внутрь задают: ревит, ундевит, гексавит, поливит, нутрисан и другие.

В лечении инфекционного гепатита ветспециалистам не обойтись без применения гепатопротекторов, из которых наиболее часто употребляются: лиф-52 по 1 таблетке 2-3 раза в день, карсил по ½-1таблетке 2-3 раза в день в течение недели, силибор по ½-1таблетке 3 раза в день ежедневно до двух месяцев. Лучшим из них является эссенциале форте, который вводят 3 раза в сутки в течение 3 месяцев в дозе по 1-2 капсулы, причем в первую неделю его лучше вводить внутривенно капельно в виде раствора по 1-5мл за 1 инъекцию, а затем переходить на капсулы. Долечивать острый гепатит, а также хроническую его форму можно с помощью сирепара, витагепата или внутривенно по 0,5-2мл 2 раза в день в течение двух — трех недель, если гепатит носит подострый и хронический характер.

В тяжелых стадиях болезни очень эффективны внутривенные вливания в виде капельниц растворов глюкозы (5%-й концентрации), Рингера, Рингер-Локка, трисоля и др. По возможности, их инъецируют до существенного улучшения общего состояния больного животного.

Кроме указанных лекарств, в симптоматической терапии используют сердечные, противорвотные, жаропонижающие, обезболивающие, адсорбенты и глюкокортикоиды. В глаза на конъюнктиву закапывают витаминные или витаминно-минеральные средства: витайодуроль, н-каталин и др. 2-3 раза в день до выздоровления.

Профилактика и меры борьбы. Для предупреждения инфекционного гепатита, а также для борьбы с ней проводят общие ветеринарно-санитарные мероприятия, в основу которых должен быть положен принцип комплексности противоэпизоотических мероприятий: предупреждение заноса инфекции, своевременное диагностирование гепатита, проведение мероприятий направленных на ликвидацию болезни.

Ограничения по инфекционному гепатиту собак с питомника снимают через 30 дней после последнего случая выздоровления или падежа животных от инфекционного гепатита, после проведения заключительных мероприятий и дезинфекции.

Необходимы рациональное кормление и хороший уход за собаками, своевременная дезинфекция помещений, профилактическая вакцинация щенков и взрослых собак отечественными и импортными вакцинами в соответствии с наставлениями. В настоящее время для вакцинации используют канвак (Чехия), ноби-вак (Голландия),вангард (Бельгия), пентадог и гексадог (Франция) и др.

Щенков прививают, начиная с двух — или трехмесячного возраста. Вакцинацию щенков желательно проводить одновременно с введением иммуномодуляторов. Взрослых собак необходимо прививать ежегодно.

Вирусный, или инфекционный гепатит – заразное опаснейшее заболевание в среде животных. Поразить может практически все виды как диких, так и домашних особей. Вирусный гепатит у собак чаще всего встречается у животных молодого возраста. Нередко приводит к летальному исходу. Так что же становится причиной болезни, возможно ли излечение, и как защититься от этой напасти? Рассмотрим подробнее.

Возбудитель инфекции

Впервые признаки этого заболевания и сам вирус описал шведский исследователь Руборт. Долгое время название болезни звучало так же, как и его фамилия, сегодня эта инфекция именуетя "вирусный гепатит собак".

В середине прошлого столетия вирус-возбудитель был задиагностирован уже во всех европейских странах и в США. В России уделили внимание этому заболеванию только в 1953 году.

Вирус гепатита принадлежит семейству аденовирусов, которые вызывают целый спектр заболеваний и у животных, и у людей. Семейство так названо по вирусу, который впервые был замечен в аденоидах человека.

Инфекционный гепатит у собак вызывается аденовирусом, относящимся к первому типу. Близкий его родственник – вирус второго типа, который вызывает инфекционный ларинготрахеит. Схожи они как внешним видом, так и принципами патогенности.

Возбудитель инфекционного гепатита способен длительное время существовать в окружающей среде вне тела хозяина. При 37 градусах его выживаемость – три недели, а при температуре 4 градуса (консервирующей) – до десяти месяцев. Вирус долго сохраняется в фекалиях животного, летом может быть заразным на протяжении всего теплого сезона. Несмотря на столь высокие показатели выживаемости, вирус моментально гибнет при воздействии средств, содержащих хлор, фенол, формалин, а также при кипячении.

Ранняя стадия – тонзиллит

Вирусный гепатит у собак часто относят к болезням щенков. Обычно поражается молодняк до одного года. Если у взрослого животного иммунитет значительно ослабевает, то оно также может быстро заразиться. Наблюдается это чаще при глистных инвазиях. Вирус такого типа не распространяется воздушно-капельным путем, проникает в организм только в том случае, если попадает на слизистую, например, при контакте с фекалиями больных животных. Развиваться вирус начинает в тканях миндалин у собаки, поэтому к самым первым признакам заболевания относится их воспаление – тонзиллит.

Гепатит у собак имеет огромную силу патологического воздействия. Жизнедеятельность вируса приводит к отмиранию здоровых клеток. Там, где концентрация его особенно высока, развивается очаг воспаления. Это происходит во всех тканях, где оседает вирус. Эффект получил название цитопатического.

Проникновение в организм

После достижения определенной концентрации в миндалинах аденовирус проникает в иммунные клетки, а далее в лимфатическую систему. Начинает развиваться воспалительный процесс. Из подчелюстных и заглоточных лимфоузлов с током крови и лимфы возбудитель распространяется по всему организму. Главная мишень, в которую метит инфекционный гепатит собаки, – печень, почки, лимфоузлы, кишечник, тимус, кровеносные сосуды. Основным симптомом являются множественные внутренние кровоизлияния. Так аденовирус поражает мелкие кровеносные сосуды, кровь начинает изливаться наружу. При тяжелых формах поражения в таких местах развиваются очаги некроза, а это дополнительные источники токсинов.

Больше других органов при вирусном гепатите у собак страдает печень. Возбудитель способствует перерождению клеток органа в жировую ткань, естественно, она становится не способна выполнять свои функции. Кроме жира в печени образуются некротические очаги, что вызывает сильнейший токсический эффект. Именно поэтому болезнь стали называть гепатитом. Симптомами являются желто-зеленый понос, рвота желтого цвета. Причина в том, что продукты распада, в том числе и аммиак, не обезвреживаются печенью.

Иммунная система у собаки начинает активно реагировать на деятельность вируса, на 5-7 день появляются сильнейшие антитела. Возрастает работа клеточного иммунитета. И если организм животного справляется с болезнью, то у животного формируется пожизненный иммунитет к вирусному гепатиту.

Два этапа болезни

Вирусный инфекционный гепатит собаки в своем течении имеет обычно два этапа. Высокий уровень летальности наблюдается у молодых щенков (до 1 года). Если животное переживает оба эти этапа, то, скорее всего, исход будет благополучным. Первые признаки выздоровления уже свидетельствуют о том, что собака поправится.

- 1 этап. Острая форма течения заболевания. Молниеносное развитие признаков болезни через сутки после заражения. После этого происходит снижение активности вируса.

- 2 этап. Острая форма. Второй пик активности аденовируса, развивается на 3-5 день заражения. Этап очень тяжелый, немногие животные выживают. Лечение вне ветеринарной клиники дает возможность выжить лишь 10%, в 90 % случаев наступает летальный исход.

Сегодня острая форма вируса встречается намного реже, чем в прошлом веке. Объясняется это поголовным привитием молодняка. Возможно, аденовирус успел ослабеть. С другой стороны, ветеринары прогнозируют появление более грозного вируса в природе.

Диагностика

Первые признаки гепатита у собаки начинают проявляться примерно через неделю с момента заражения (минимум 3, максимум - 12 дней). Отмечается следующая картина:

Собака потеряла аппетит.
Общая вялость, больше лежит, не играет.
Спустя сутки после вялости открывается понос и рвота желтого цвета.
Если осмотреть глотку, можно заметить отечность миндалин – тонзиллит.
При тяжелой форме заболеваний течет прозрачная жидкость из носовой и ротовой полостей.

Гепатит у собак. Симптомы и лечение

Примерно через четверо суток после возникновения перечисленных симптомов начинают проявляться вторичные признаки. Очень ярко они выражены в период обострений:

Повышение температуры до 41 градуса.
Частая одышка, поверхностное дыхание.
Нарушение сердцебиения, слабый пульс.
Рвота желчью и желтый понос.
Моча коричневого, темного цвета.
Желтушные слизистые оболочки.
Дыхание становится зловонным с аммиачным запахом.
В области груди отеки.
Животное чаще сидит со склоненной головой, расставив широко лапы.
Возможны судороги, параличи, потеря координации движения.
Обезвоживание, сильное исхудание.

Таким образом проявляется вирусный гепатит у собак. Симптомы и лечение должны быть известны всем собаководам, это поможет спасти вашего питомца. Сразу отметим, что помощь должны оказывать специалисты в ветеринарных клиниках. Лечение требует сложных схем применения препаратов, так как вирусом поражены практически все внутренние органы.

Специфика и схема терапии

Вирусный гепатит собак имеет специфическое лечение. Оно актуально только при этом заболевании. Используется гипериммунная сыворотка против аденовируса гепатита. Лекарство получают из крови переболевших вирусным гепатитом собак. Только таким образом можно получить антитела к данному вирусу. Если вы на ранних стадиях обнаружили гепатит у собак, лечение нужно начинать незамедлительно. Обратившись к ветеринару, вы получите шанс спасти своего любимца.

После назначения терапии в комплексе по схеме вам порекомендуют:

Иммунностимуляторы.
Гепатопротекторы для защиты печени.
Множество витаминов, особенно водорасвторимых группы В.
Средства для восстановления водно-солевого баланса. Глюкоза, глютаминовая кислота.
При отеках – мочегонные средства.
Для предотвращения бактериальных инфекций – антибиотики.
Противодиарейные и противорвотные препараты.
В рацион собаки должно быть включено больше витаминов, углеводов, микроэлементов. Исключены белки.

Профилактика

Вирусный гепатит у собак, симптомы которого очень тяжелые, – опасное заболевание, которое угрожает жизни питомцев. Именно поэтому все собаководы должно помнить о своевременной вакцинации животных. В ветеринарных клиниках и аптеках вакцины доступны для всех, приобрести их не составит труда. Один флакон может защитить собаку сразу от нескольких вирусов. Разновидностей препарата множество, посоветуйтесь с ветврачом, какую лучше приобрести.

Возраст привития в основном - от двух месяцев, именно тогда у щенков пропадает иммунитет, который они получают с молоком матери.

Если в районе вашего проживания обнаружен вирусный гепатит у собак, в целях профилактики можно сделать инъекцию лечебной сывороткой. Если даже животное заболеет, болезнь пройдет в более легкой форме.

При выгуле избегайте контакта с фекалиями чужих собак. По воздуху вирус не передается.

В случае если в вашем доме погибла собака от вирусного гепатита, тщательно продезинфицируйте все поверхности.

Хронический гепатит у собак

Кроме вирусного у животного могут развиваться и другие формы гепатита. Они не столь опасны для жизни, но тоже резко подрывают здоровье питомца. Так что если у вас в доме есть собака, то лучше знать об этих заболеваниях.

Какие особенности имеет хронический гепатит у собак? Длительно текущие заболевания печени приводят к накоплению воспаленных клеток, а далее к фиброзу. Такой синдром имеет массу причин и часто обнаруживается у собак. Часто хронический гепатит называют болезнью доберманов, кокер-спаниелей. Болезнь эта не самостоятельная, а может развиваться вследствие различных поражающих факторов. Это может быть перенесенный вирусный гепатит, лептоспироз, сильное отравление, иммунноопосредованные причины, аллергические реакции, прием лекарств, то есть любое активное негативное воздействие на печень. Если вы обнаружили признаки гепатита у собаки, незамедлительно отправляйтесь в ветеринарную клинику на обследование. Правильный диагноз, поставленный ветеринаром, и своевременное лечение не дадут заболеванию перейтив тяжелую форму.

Предрасположенность к хроническому гепатиту

Природная и генетическая предрасположенность к хроническому гепатиту наблюдается у следующих пород животных:

вест-хайленд-уайт-терьер;
бедлингтон-терьер;
доберман;
лабрадор-ретривер;
кокер-спаниель;
стандартный пудель;
доберман пинчер;
бедлингтон-терьер;
скай-терьер.

Средний возраст заболевших собак - 6 лет (диапазон - от 2 до 10 лет). У сук заболеваемость бывает выше.

Если подозревается хронический гепатит у собак, симптомы обычно следующие:

Потеря аппетита, анорексия.
Потеря веса.
Сонливость, летаргия.
Понос.
Рвота.
Полидипсия и полиурия. Собака пьет много жидкости и мочится.
Желтуха.
Водянка живота.
Печеночная энцефалопатия.

Острый паренхиматозный гепатит

Паренхиматозный острый гепатит у собаки - это воспалительные процессы в строме печени, которые сопровождаются жировыми, зернистыми перерождениями, зачастую некробиотическим изменением паренхимы. Редко является первичным заболеванием, чаще вторично при гастритах, энтеритах отравлениях, инфекциях. Нарушаются функции печени, меняется углеводный, белковый, жировой обмен, нарушается барьерная функция, наступает интоксикация организма.

Печень увеличивается в объемах, ее края закругляются, сосуды переполняются кровью. Орган окрашивается в неравномерно красно-желтый цвет.

К признакам заболевания животного относятся:

отсутствие аппетита;
угнетенное состояние;
повышение температуры;
поочередно запоры и поносы;
желтушные слизистые;
увеличение в моче билирубина;
болезненность в области печени при пальпации.

Частым осложнением гепатита бывает цирроз печени. Своевременно предпринятые лечебные меры позволят спасти вашего питомца.

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Урюмцева Татьяна Игоревна

Повсеместное распространение инфекционного гепатита собак диктует необходимость разработки новых методов и совершенствования существующих методов лабораторной диагностики данного заболевания. Применение комплекса различных методов диагностики обеспечивает постановку диагноза на инфекционный гепатит при любой форме заболевания и на любой стадии, даже в случае смешанных инфекций, а также дифференцировать его от парвовирусного энтерита, чумы и других сходных с инфекционным гепатитом собак заболеваний. Эффективность методов диагностики во многом зависит от активности и специфичности диагностических препаратов, в том числе диагностических сывороток. Разработанная схема приготовления диагностической сыворотки против инфекционного гепатита собак и выделения из неё иммуноглобулиновой фракции для сенсибилизации носителя для реакции агглютинации латекса позволяет получить антительные препараты с активностью в реакции диффузионной преципитации 1:4 1:8, реакции связывания комплемента 1:8 1:16. Полученные данным способом гипериммунные сыворотки могут быть с успехом использованы при получении диагностических препаратов направленных на выявление вирусспецифического антигена в пробах органов и тканей, фекалий и смывов из ротовой и носовой полостей больных и павших животных.

Production of Immune Serum for Serodiagnosis of Infectious Canine Hepatitis

Omnipresent dispersion of infectious canine hepatitis dictates the necessity of developing new methods and improving existing methods of laboratory diagnosis of this disease. The use of a complex of various diagnostics methods provides diagnosis of infectious hepatitis at any form and any stage of the disease, even in the case of mixed infections, also it allows to differentiate infectious hepatitis from parvovirus enteritis, plague and other diseases, which are similar to infectious canine hepatitis . The efficiency of diagnostics methods mostly depends from activity and specificity of diagnostic preparations, including diagnostic serum. The developed scheme of preparing of diagnostic serum against infectious canine hepatitis and isolating the immunoglobulin fraction from it for sensitization the carrier for the latex agglutination reaction allows to get antibody preparations with activity in the diffusion precipitation reaction of 1:4-1:8, complement fixation test 1:8-1:16. Hyperimmune serum obtained by this method can be successfully used in getting diagnostic preparations, which are aimed to detect a virus-specific antigen in samples of organs and tissues, feces and washouts from the oral and nasal cavities of sick and dead animals.

Урюмцева Татьяна Игоревна

канд. вет. наук, доцент

Инновационный Евразийский университет, г. Павлодар vbh2@mail.ru

Получение иммунных сывороток для серодиагностики инфекционного гепатита

Аннотация. Повсеместное распространение инфекционного гепатита собак диктует необходимость разработки новых методов и совершенствования существующих методов лабораторной диагностики данного заболевания. Применение комплекса различных методов диагностики обеспечивает постановку диагноза на инфекционный гепатит при любой форме заболевания и на любой стадии, даже в случае смешанных инфекций, а также дифференцировать его от парвовирусного энтерита, чумы и других сходных с инфекционным гепатитом собак заболеваний.

Эффективность методов диагностики во многом зависит от активности и специфичности диагностических препаратов, в том числе диагностических сывороток.

Разработанная схема приготовления диагностической сыворотки против инфекционного гепатита собак и выделения из неё иммуноглобулиновой фракции для сенсибилизации носителя для реакции агглютинации латекса позволяет получить антительные препараты с активностью в реакции диффузионной преципитации 1:4 - 1:8, реакции связывания комплемента 1:8 - 1:16. Полученные данным способом гипер иммунные сыворотки могут быть с успехом использованы при получении диагностических препаратов направленных на выявление вирусспецифического антигена в пробах органов и тканей, фекалий и смывов из ротовой и носовой полостей больных и павших животных.

Ключевые слова: инфекционный гепатит собак, гипериммунизация, диагностикум, реакция преципитации, реакция связывания комплемента.

Инфекционный гепатит собак имеет широкое распространение в Казахстане и России, зарегистрирован во многих странах мира. В условиях мегаполисов болезнь поражает собак различных пород и возрастов, но наиболее часто заболевают щенки в возрасте 2-6 месяцев [7,9,10].

Решающее значение в диагностике придается лабораторным исследованиям, при которых необходимо исключить чуму, лептоспироз, бешенство, сальмонеллез, токсоплазмоз, авитаминоз В1, алиментарные интоксикации, а также парвовирусный энтерит собак [1]. Использование для диагностики любого инфекционного заболевания специфических средств и методов всегда является предпочтительнее гетерологичных диагностических препаратов.

Эффективность методов диагностики во многом зависит от активности и специфичности диагностических препаратов, в том числе диагностических сывороток. Использование для этих целей сывороток крови животных - реконвалесцентов имеет существенный недостаток - в таких сыворотках титр антител различен и колеблется в

зависимости от степени проявления клинических признаков заболевания у животных -продуцентов. Поэтому разработка схем получения, очистки и использования гипериммуных сывороток в тест-системах для диагностики инфекционного гепатита собак весьма актуальна.

По литературным данным известно, что для гипериммунизации применяют органотканевые или культуральные антигены вирусов. [3,4,5,8].

Успех гипериммунизации животных-продуцентов во многом зависит не только от тщательного их подбора, качества антигена и адъювантных веществ, но и от правильно выбранной схемы гипериммунизации, правильной технологии выполнения этих схем иммунизации, а также технологии кровопускания и обескровливания продуцентов в конце их эксплуатации. [2,6]

Цель исследования- разработка способа получения иммунных сывороток пригодных для использования в тест-системах для диагностики инфекционного гепатита собак.

Материалы и методы

В качестве объекта для иммунизации использовали щенков беспородных собак в возрасте 2-3 месяцев и помесных кроликов в возрасте 3 месяцев. Перед введением в опыт у животных проверяли пробы сыворотки на отсутствие вируснейтрализующих антител против вирусов чумы и парвовирусного энтерита. Перед началом цикла гипериммунизации животных за 21 день вакцинировали против инфекционного гепатита.

Для установления титра специфических антител производили забор крови у животных-продуцентов на 7, 14, 21, 28 и 35 сутки с момента начала гипериммунизации, выделяли сыворотку крови и оценивали её на преципитирующую и комплементфиксирующую активность.

При постановке реакции связывания комплемента (РСК) и реакции диффузионной преципитации (РДП) использовали набор нормальных, гомо- и гетерологичных культуральных и органотканевых антигенов. Данные реакции использовали при оценке специфичности полученных гипериммунных сывороток.

Гама-глобулиновую фракцию выделяли из полученных гипериммунных сывороток методом ступенчатого многократного осаждения альбумина и иммунных глобулинов различными концентрациями охлаждённого этилового спирта

Для выделения гамма-глобулиновой фракции производили высаливание насыщенным раствором сульфата аммония полученных гипериммунных сывороток.

Концентрацию белка в растворах иммунноглобулинов определяли фотометрически. Оптическая плотность препарата измерялась на спектрофотометре при длине волны 280 нм. Для разведения испытуемых препаратов использовали бидистиллированную воду.

Динамику нарастания антител у животных-продуцентов сывороток отслеживали на 7, 14, 21, 28 и 35 сутки с момента начала цикла гипериммунизации. Производили оценку выделенной сыворотки на комплементфиксирующую и преципитирующую активность.

На рисунке 1 демонстрируется степень прироста уровня антител в организме гипериммунизированных животных-продуцентов на 7, 14, 21, 28 и 35 сутки с момента начала гипериммунизации.

Читайте также: