Вирус герпеса у коров

Мищенко B.A., Думова B.B., Мищенко А.В. ФГБУ "ВНИИЗЖ", г. Владимир
Черных О.Ю. Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория, г. Кропоткин
Шевченко А.А. Кубанский госагроуниверситет, г. Краснодар

Герпесвирусы, обладающие сложной уникальной структурой, широко распространены в природе. Практически все высшие эукариоты могут быть инфицированы герпесвирусами. Уникальность герпесвирусов в том, что они могут оставаться в латентном состоянии в хозяине, в котором они размножаются. Геном герпесвируса может встраиваться в геном клетки хозяина и длительное время персистировать. При разнообразных стрессах герпесвирусы могут реактивироваться с последующей экскрецией вируса во внешнюю среду.

В настоящее время описано более 80 герпесвирусов. Наиболее широкое распространение имеет инфекционный ринотра-хеит. Вирус ИРТ изолировали и от других видов животных: оленей, лосей, буйволов, антилоп, диких и домашних свиней. Значение этих животных в экологии вируса ИРТ окончательно не выяснено. Методами молекулярной биологии показано существование ряда антигенных вариантов вируса ИРТ.

В последнее время появилось много сообщений о регистрации инфекции крупного рогатого скота, вызываемой герпесвирусом типа 4.

Все герпесвирусы типа 4 близки по молекулярной структуре генома, имеют между собой антигенные связи, относятся к подсемейству гаммагерпесвирусов рода Rhadinovirus [1].

Впервые этот возбудитель был выделен в Венгрии в 1963 год от телёнка с клинической картиной заболевания органов дыхания и кератоконьюктивитом. Указанный штамм был назван Мовар 33/63 [2]. С 1987 года все подобные штаммы были объединены под названием герпесвирус 4 типа.

В последующем, международный комитет по таксономии вирусов (ICTV) официально принял название возбудителя "герпесвирус КРС 4 типа" [1].

Герпесвирусы КРС 4 типа были выделены от животных с поражением органов пищеварения, дыхания и воспроизводства. Доказана инфицированность животных во многих странах мира, в том числе: Венгрии, Италии, Бельгии, Японии, Израиле, США, Индии, Кении, России, Египте, Швейцарии [2, 3, 6, 7, 8, 9, 17].

Герпесвирус 4 типа был выделен из патологического материала от коров с нарушениями функции воспроизводства (аборты, мертворождения, заболевания молочной железы) и от молодняка с поражениями органов дыхания и пищеварения. Также вирус был выделен из тканей абортированных плодов и выделений из влагалища у коров с метритом и при гибели плода [3, 10, 14, 19].

Американские исследователи выделили герпесвирус 4 типа от коров с нарушениями репродуктивной функции (аборты, метриты) (34%) от молодняка с поражениями органов дыхания (34%), от молодняка с нарушением пищеварительной функции (29%) и от коров с заболеванием молочной железы (3%) [8]. При обследовании 5 молочных ферм в штате Джорджия у 15 молочных коров после родов зарегистрированы гнойные язвенные эндометриты, вызванные герпесвирусом 4 типа крупного рогатого скота. Вирусные частицы размером 70-95 нм были обнаружены в эпителиальных и эндотелиальных клетках матки с помощью электронной микроскопии. Наличие герпесвиру-са 4 типа было подтверждено с помощью метода флюоресцирующих антител, выделения возбудителя, индикации геномаполугнездовой ПЦР и электронно-микроскопического исследования культурной жидкости [10].

Бельгийские учёные [5] выделили герпесвирус 4 типа от крупного рогатого скота с различными заболеваниями, в том числе: коньюктивиты, риниты, трахеиты, пневмонии, орхиты, эпидимиты, вагиниты, метриты, аборты, бугорчатка, пустулёзные дерматиты молочной железы, гастроэнтериты. У крупного рогатого скота и кроликов вирус поражает мононуклеарные клетки и лимфоидные органы, также у крупного рогатого скота вирус может пребывать в латентном состоянии в нервной системе. Для серодиагностики использовали ИФА и МФА.

Герпесвирус 4 типа был выделен от молочных коров с поражением кожи на дистальных участках конечностей [4].

Герпесвирус типа 4 КРС выделяли от животных с различными клиническими признаками в том числе: коньюктивиты, пневмонии, метриты, кожные поражения, язвы на вымени, энтериты, поражения мочевого пузыря и рубца. Вирус выделяли и от клинически здорового скота. Вирус персистирует в лимфоидных органах, мононуклеарных клетках крови и клетках нервной системы [11].

Зимой 1994 года в одной из провинций Италии в стаде из 120 коров было зарегистрировано заболевание, проявляющееся дерматитами конечностей. За 3 месяца переболело около 20% коров, в тоже время нетели и телята не болели. На конечностях отмечали эрозии, язвы, часто с грануломатозной пролиферацией, алопеции, сосудистые валики. Из проб патологического материала от 12 коров в первично трипсинизированной культуре клеток почки эмбриона коровы (ПЭК) в первом пассаже было выявлено три цитопатогенных агента. Цитопатическое действие проявлялось через 3-4 дня в виде округления клеток. Обнаружены внутриядерные включения по типу телец Каудри, окрашиваемые гематоксилином. При электронной микроскопии было установлено, что выделенные изоляты по морфологии относятся к герпесвирусам. Доказано, что изолированный патоген является ДНК-содержащим вирусом, чувствительным к рН 3,0, инак-тивируется эфиром (20%), хлороформом (10%), при температуре 50°С за 30 минут. Вирус в культуре клеток формирует бляшки размером 0,5 - 1,0 мм. При идентификации в перекрёстной реакции нейтрализации с кроличьими гипериммунными сыворотками показано, что выделенный вирус гомологичен штамму Movar 33/63 АТСС герпесвируса 4 типа крупного рогатого скота [4].

Изучено 5 штаммов герпесвируса КРС типа 4, из которых три были изолированы от коров с маммилитом и два от коров с респираторными заболеваниями из носовых смывов, лёгких, селезенки, лимфоузлов и мозга [12].

В Израиле инфекция герпесвирусом 4 типа крупного рогатого скота широко распространена и служит причиной спорадических абортов и послеродового вульвовагинита.

В Венгрии герпесвирус 4 типа был обнаружен в 6 из 33 исследованных плацент, взятых на фермах от абортировавших коров. Возбудитель локализовался в эпителиальных клетках, макрофагах и лимфоузлах. В присутствии простагландинов Е2 репликация патогенов в макрофагах усиливается [3, 13].

При обследовании коров с субклиническими маститами герпесвирус 4 типа обнаружен у 50% животных [14].

В Японии на одной из ферм была зарегистрирована вспышка контагиозного мастита, вызванного герпесвирусом 4 типа. Вирус был обнаружен в вымени, лимфатических узлах, лейкоцитах, нервной ткани. Многие инфицированные коровы оставались клинически здоровыми [6].

Из проб патологического материала от клинического здорового африканского буйвола (буффало) из Кении герпесвирус 4 типа был изолирован в культурах клеток МДВК и ERL американского бизона, индийского зебу (Bosindicus, больного пневмонией барана, из фетальной сыворотки крупного рогатого скота [1, 15].

При исследовании в ПЦР лимфатических узлов оленей (Carpeduscapreolus, Crevuselaphus, Damadama), муфлонов, овец и коз венгерские учёные обнаружили герпесвирускрупного рогатого скота 1, 2 и 4 типов [1].

Неожиданными и чрезвычайно важными являются сообщения о выделении герпесвирусакрупного рогатого скота 4 типа от клинически здоровых котят и львов [1, 16, 17, 19].

Известно, что возбудители, относящиеся к роду Phadinovirus, обладают тропизмом к Т-лимфоцитам и латенции. Возбудитель размножается в клетках иммунной, респираторной, пищеварительной и мочеполовой систем. У животных, инфицированных герпесвирусом 4 типа, отмечается иммунодефицитное состояние.

Превалентность инфекции герпесвируса 4 типа в разных странах разная, наиболее высокая (93,6%) у клинически здоровых африканских буйволов [17].

В результате исследований, проведённых в штате Миннесота, установлено, что у 17% клинически здорового поголовья крупного рогатого скота выявились антитела к герпесвирусу 4 типа. Антитела к данному возбудителю обнаруживались и в торакальной жидкости абортированных плодов [18].

У коров с поражениями органов воспроизводства антитела обнаруживались значительно чаще, чем на фермах с клинически здоровым поголовьем крупного рогатого скота [8, 18].

В западной Германии антитела к герпесвирусу 4 типа выявлены в 18,4% исследованных проб сывороток крупного рогатого скота, в Италии - в сыворотках из 50% стад [5]. В результате проведённых в 1987 году исследований сывороток крови крупного рогатого скота из Бельгии антитела к герпесвирусу 4 типа были обнаружены в 22,4% проб. При исследовании 221 сывороток от абортированных коров из провинции Пьеж (Бельгия) антитела к герпесвирусу 4 типа были установлены в 17,2% проб. Из 261 сывороток от клинически здоровых (контрольных) коров антитела к герпесвирусу 4 типа выявлены в 10% проб [19].

Лабораторная диагностика герпесвирусной инфекции 4 типа основана на обнаружении фрагмента гена, кодирующего фермент тимидинкиназу полимеразной ценной реакцией (ПЦР) и выявлении вирусоспецифических антител в ИФА и МФА.

Выделение герпесвируса 4 типа в культуре клеток весьма затруднительно, поскольку возбудитель имеет длительный цикл репродукции. Средств специфической профилактики указанной инфекции до настоящего времени не разработано.

Всё вышеизложенное свидетельствует о необходимости учёта герпесвируса 4 типа при выяснении этиологии заболеваний крупного рогатого скота и при неадекватном иммунном ответе на вакцину.

Список литературы

1. Инфекционная патология // Под редакцией А.Я. Самуй-ленко и соавт./ - М.:ИКЦ "Академкнига", 2006, Т 1, 633-758.
2. Мищенко В.А., Ярёменко Н.А., Сухарев О.Н., Ручнов Ю.Е. Экологические особенности герпесвирусов КРС // Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных/- Воронеж, 1999. - с. 125-126.
3. Bartha A., Juhasz M., Libermann H. Isolation of a bovine herpesvirus from calves with respiratory disease and keratocojunctivitis // Acta vet. Acad. Sci. Hung., 1966,16, 357-358.
4. Cavirani S., Martelli P., Cabassi C.S., et al. Isolation of bovine herpes virus (BHV - 4) from dairy cows with digital dermatitis // Proc XIX World Buiatric Congress, Edinburg, 1996, 121.
5. Cavirani D.G., Santen S., van Flamraini V. Potential secondary pathogenic rolefor bovine herpesvirus - 4 //1. Clin. Microbiol., 2005, 43, 7, 3421 - 3426.
6. Czaplicki Y., Thiry E. An association exists between bovine Herpesvirus-4 seropositivity and abortion in cows // Prev. Vet. Med., 1998, 3, 235 - 240.
7. Deim Z., Szeredi L., Tompo V., Egyed L. Detection of bovine herpesvirus 4 in aborted bovine placentas // Microb. Pathol, 2006, 41, 4-5,144-148.
8. Dewais B.Gillet L., Gerdesl, Taracho E . et al. Antibodies against bovine herpes 4 are highly prevalent in wild African buffaloes throughout eastern and southern Africa // Vet. Microbiol., 2005,110, 209-220.
9. Evermannj.F., Mueller G.M., Dilbeck P.M. Clinical and Diagnostic implications of bovid herpesvirus type 4 (bovine cytomegalovirus) infections // Amer. Assn. Vet. Lab. Dignost., 1984,125 - 136.
10. Fridgar O., Stram V. Bovine herpesvirus - 4 in Israel diary cattle isolation PCR and serology // Israel j. Vet., Med., 2006, 61, 2.
11. Van OptenboschЕ.,Wellemans G., Ooms A.A., et alBHV - 4 (bovine herpes virus 4) related disorders in Belgiam cattle: a study of twoproblems herds // Vet. Res. Commun, 1988, 12, 347 - 353.
12. Lin T.M., Shi G - V., Tsai С - F. et al., Susceptibly of endothelial cells to bovine herpesvirus type (BHV - 4) // Y. Virol. Meth., 1997, 63, 219 - 225
13. Mohamty S.B., Hullseth B. Other Herpesviruses // Virus infections of ruminants, 1990,151-157
14. Wellenberg G.Y., van der Poel W.H., Van der Vorst T. Y. et al. Bovine herpesvirus 4 in bovine clinical inastitis // Vet. Rec, 2000, 147, 8, 222 - 225
15. NaeemК.,Goval S., Werdin R. Prevalence of bovine herpesvirus - 4 and itsantibody in cattle in Minnesota // Am. Y. Vet. Res., 1989, 50,1931 - 1935*
16. Thiry E., Bubbot M., Pastoret P.P. Bovine herpesvirus - 4 (BHV - 4) infectionsin cattle // Wittman G (ed) herpessvims diseases of cattle, horses and pigs. Kluwer,Norwell, 1989, 96-115.
17. Markine - Gorianoff N., Minner F., De Faysk., et al. Herpesvirus - 4 cattle // Ann. Med. Vet., 2003,147, 215 - 247
18. Wellbernger G.Y., Bruschke C.G., Wisselink H.I., Simultaneous intramamaliary and intranasal inoculation of lactating cows with bovine herpesvirus - 4 induce subclinical mastitis // Vet. Microbiol., 2002, 86,1-2, 115-129
19. Izumi V., Tsuduki S., Murakami K. et al. Characterization of bovine herpesvirus type 4 isolated from cattle with mastitis and subclinical infection by the virus among cattle //1. Vet. Med. Sci., 2006, 68 /2,189-193
20. Frazier K., Pence M., Mauel M., Liggett A. et al. Endometritis in postparturient cattle associated with bovine herpesvirus - 4 infection: 15 cases //1. Vet. Diagn. Invest, 2001,13,502-508
21. Moreno-Lopez I., Goltz M., RehbindezС et al. A bovine herpesvirus (BHV - 4) as a passenger virus in ethmoidaltumours in Indian cattle // Zentbl. Vet med., 13, 1989,36,481-486
22. Kruger I.M., Venta P.I., Swenson C.L. et al. Prevalence of bovine herpesvirus - 4 infection in cats in central Michigan //1. Vet. Intern Med., 2000,145, 93 - 59712. Castrucci G., Frigeri F., Ferrari N et al. A stady of some biological properties of Bovid herpesvirus 4
23. Egued L .,Ballagi - pordany A., Barths A. et al. Studies of in vivo bovine herpesvirus type 4 in the natural host // J. Clin. Microbiol., 1996, 34, 5, 1091 -1095
24. Egyed L., Kluge I., Barta A. Historical studies of bovine herpesvirus type 4 infection in non-ruminant species // Vet. Microbiol., 1997, 51, 283 - 289
25. Goyal S.M., NaeemК . Bovid herpesvirus - 4: a review // Vet. Bulletin, 1992, 62, 3,181-201

Герпесвирусы, обладающие сложной уникальной структурой, широко распространены в природе. Их уникальность в том, что они могут оставаться в латентном состоянии в хозяине, в котором они размножаются. В настоящее время описано более 80 герпесвиру-сов.

Герпесвирусы КРС 4 типа были выделены от животных с поражением органов пищеварения, дыхания и воспроизводства. Доказана инфицированность животных во многих странах мира, в том числе: Венгрии, Италии, Бельгии, Японии, Израиле, США, Индии, Кении, России, Египте, Швейцарии.

Герпесвирус 4 типа был выделен из патологического материала от коров с нарушениями функции воспроизводства (аборты, мертворождения, заболевания молочной железы), от молодняка с поражениями органов дыхания и пищеварения, из тканей абортированных плодов и выделений из влагалища у коров с метритом, от крупного рогатого скота с различными заболеваниями, в том числе: коньюктивиты, риниты, трахеиты, пневмонии, орхиты, эпидимиты, вагиниты, метриты, аборты, бугорчатка, пустулёзные дерматиты молочной железы, гастроэнтериты. Также, данный вирус инфицирует кроликов, поражая мононуклеарные клетки и лимфоидные органы.

Таким образом, необходимо проводить учёт герпесвируса 4 типа при выяснении этиологии заболеваний крупного рогатого скота и при неадекватном иммунном ответе на вакцину.

Ключевые слова: герпесвирус, крупный рогатый скот, штамм, патологический материал, клинические признаки, вспышка, иммунный ответ, вакцина.

Сведения об авторах

Шевченко Александр Алексеевич, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии, ФГБОУ ВПО "Кубанский государственный аграрный университет"; 350044, Краснодар, ул. Калинина, 13; 8 (918) 15494-61; [email protected].

ECOLOGICAL FEATURES OF BOVINE HERPESVIRUS TYPE 4

Mishchenko V.A., Mishchenko A.V., Dumova V.V., Shevchenko A.A., Chernykh O.Yu.

Infection of animals in many countries, including Hungary, Italy, Belgium, Japan, Israel, U.S., India, Kenya, Russia, Egypt, Switzerland is proved.

Keywords: herpesvirus, large-horned cattle, strain, pathological material, clinical signs, outbreak, immune response, vaccine.

[Bovine herpesvirus infections]

Помимо вирусов инфекционного ринотрахеита, маммиллита и злокачественной катаральной лихорадки КРС из трахеи, заглоточных лимфоузлов и других органов животных этого вида удавалось выделить герпесвирусы КРС, не имеющие четкого таксономического положения. Идентичные герпесподобные вирусы были выделены от коров, больных лимфосаркомой, однако этиологическая роль их в появлении лим-фосарком и герпетического маммиллита не выяснена. В 1969 г. Боулинг, Гудхерд и Пламмер выделили шесть герпесподобных вирусов из ротовой полости и гениталий КРС, идентичных между собой в АГ отношении. Предполагают, что генитальный вирус герпеса вызывает рак шейки матки у коров. В 1971 г. Лутер и другие выделили из спонтанно дегенерировавшей почки клинически здорового теленка вирус, характерный для группы герпетических вирусов. Бычьи вирусы герпеса (BHV-1) иммунологи-чески отличны от герпесвируса коз, который является новым членом рода герпесвирусов.

Болезни КРС, вызываемые малоизученными герпесвирусами, проявляются довольно разнообразно, однако чаще характеризуются поражением органов дыхания.

Устойчивость к физико-химическим воздействиям различных вирусов герпеса КРС не изучена. Все они чувствительны к нагреванию, хлороформу, эфиру, трипсину, дезоксихолату натрия и к кислой среде (рН 3).

Секвенирован ген гликопротеина gH (I) бычьего герпесвируса типа 5 (БГВ-5). Ген гликопротеина gH БГВ-5 на 84 % идентичен 1таковому БГВ-1. мРНК гена гликопротеина gH длиной 3,1 т. н. обнаружена через 2 ч после заражения БГВ-5. 12 из 21 МКА к гликопротеину gH БГВ-1 иммунопреципитируют гликопротеин gH БГВ-5 с мол. м. 108—110 кД. Синтез и внутриклеточный лроцессинг гена гликопротеина gH БГВ-5 изучены в клетках MDCK с использованием перекрестно реагирующих МКА экс-прессируется как белок класса Зу и обнаруживается через 3 ч после заражения. Показано, что ген гликопротеина gH содержит N-связанные углеводы, которые существенны для узнавания МКА Это позволило предположить, что N-связанные гликаны участвуют в сворачивании гена гликопротеина gH или являются мишенями для МКА. Изучение нейтрализации показало, что по меньшей мере один антигенный домен гена гликопротеина gH БГВ-1 отсутствует у гена гликопротеина gH БГВ-5.

АГ структура не изучена. В организме КРС, кроликов и морских свинок вирус герпеса КРС образует ВНА. Однако имеется сообщение, что телята, зараженные экспериментально, не дают положительных серологических реакций. Попытки получить антисыворотки к lht. DN-599 на кроликах, цыплятах и крысах оказались безуспешными даже при использовании концентрированного вируса с адъювантом.

В АГ отношении вирусы герпеса КРС (что установлено в перекрестной РН) идентичны, но не родственны вирусам герпеса простого, ринотрахеита, маммиллита — Allerton, болезни Ауески, шт. Мовар 33/63, ЗКЛ, герпеса собак, лошадей и птиц. В перекрестной РН установлено родство шт. СТ-66 с вирусами бычьего герпеса Мовар 33/63, Оксфорд, ТК, ТНЛ и Ну/67, однако все они не имели родства с вирусом ИРТ. Два штамма-изолята ГВ КРС, выделенные в 1972 г. Смитом и др., а также lut. DN 599, FTC и SS, АГ родственные между собой в серологических реакциях, отличались от вируса ИРТ. Штамм, выделенный Луге ром и др. (1971 г.), родственен шт. Reims (возбудителю ЗКЛ КРС).

Несмотря на то, что штаммы ГВ КРС могут различаться по тропизму (оральные, респираторные, генитальные), они идентичны в АГ отношении, по плотности ДНК И характеру ЦПД. Поэтому их нельзя разделить на типы 1 и 2, что принято для вирусов герпеса человека. Высказано предположение о родстве вируса герпеса коров к вирусу герпеса типа Allerton — возбудителю кожной бугорчатки КРС в Африке. В других сообщениях это отрицается.

ГА активностью вирусы герпеса КРС не обладают. У больных животных вирус выделяется с истечениями из носа в течение 10 дней, в смывах из глаз — 3 дней, из легких, бронхов и трахеи — в различные сроки. ГВ КРС (шт. СТ-66) реизолируют из суспензии лейкоцитов крови, носоглоточной слизи, бронхиальных и средостенных лимфоузлов.

Заболевание воспроизводится у однодневных хомячков, крыс и мышей, у которых в течение 10 дней после внутрибрюшинного заражения развивается кахексия, появляются кожные поражения, и животные гибнут. Все другие штаммы вируса герпеса КРС патогенны для новорожденных крыс. При экспериментальном заражении телят шт. СТ-66 в нос, трахею и внутривенно наблюдают повышение температуры тела, выделения из носа, кашель, одышку. Клинические признаки болезни появляются на 5-й дн после заражения и остаются заметными в течение 10 дней. Данный штамм патогенен для телят при внутрикожном заражении в область морды. Большие заражающие дозы вызывают генерализированные поражения кожи. При заражении в слизистую оболочку рта образуются язвы, а в язык — эритема.

Два штамма герпеса КРС, выделенные в 1972 г. Смитом и другими, при введении телятам вызывали острый некротизирующий лимфоцитарный фарингит и трахеит. У телят, зараженных интраназально или в трахею герпесвирусом КРС (штамм ДН-599, выделенный Махонти и др., 1972 г.), появлялись признаки поражения респираторного тракта, у 50 % больных животных отмечался конъюнктивит, 43 % телят тяжело болели и погибли. Шт. Лутера оказался апатогенным. Бычий вирус герпеса типа 5 (БВГ-5) обладает нейровирулентностью, а БВГ-1 — не обладает ею. Отвечающий за нейровирулентность гликопротеин Е (гЕ) идентичен в двух вирусах на 72 %. Сконструировали рекомбинанты двух вирусов, содержащие или не содержащие гЕ. Вводили кроликам интраназально БВГ-5, лишенный гЕ, либо БВГ-5 с гЕ БВГ-1. Неврологические нарушения выявили только у 10 % кроликов. БВГ-1 с гЕ типа 5 не проникал в ЦНС. Природный БВГ-5 или ревертант вызывали тяжелые неврологические поражения в 70 % случаев. Заключают, что гЕ определяет нейровирулентность БВГ-5, но не влияет на его проникновение в обонятельные пути.

Многие выделенные от КРС штаммы бычьего герпеса размножаются в культуре клеток тестикул и почек телят, овец, кроликов, щитовидной железы телят. В пораженных клетках формируются ДНК-содержащие включения. В культуре клеток эмбрионов коров они вызывают характерные однотипные ЦПИ и многочисленные внутриядерные включения типа А Коудри. Через 3 дня после заражения в инфицированном монослое обычно обнаруживают округлые бляшки с неровными краями диаметром 1—3 мм. В 1969 г. герпесподобные вирусы выделены от коров, больных лимфосарко-мой. В культуре клеток селезенки эмбриона коров они индуцировали образование синцития. Линия клеток RD-4 рабдомиосаркомы человека, зараженная бычьим герпесвирусом типа 4 (БГВ-4), продуцирует в небольшом количествеве ранние и поздние вирусные РНК и инфекционный вирус, но не проявляет цитопатический эффект. С использованием рекомбинантного БГВ-4, несущего ген устойчивости к неомицину (1), получены варианты линии клеток RD-4, персистентно инфицированные БГВ-4. В этих клетках геном БГВ-4 находится преимущественно в кольцевой форме, и все клетки окрашиваются специфической антисывороткой к БГВ-4. Следовательно, эти линии клеток не являются культурами-носителями. На всех изученных пассажах эти клетки продуцируют инфекционный БГВ-4. Хотя клетки поддерживаются при концентрации неомицина в 2,5 раза большей, чем та, которая убивает незараженные клетки RD-4. Персистентно инфицированные клетки содержат один геном БГВ-4 на диплоидный клеточный геном и растут медленнее, чем незараженные клетки, даже в отсутствие неомицина. Медленный рост этих клеток позволил предположить, что любое ростовое преимущество, которое придается множественными копиями БГВ-4 с геном устойчивости к неомицину, преодолевается вредными эффектами экспрессии вирусных генов. Поэтому БГВ-4 отличается от других гаммагерпесвирусов, способных трансформировать клетки к усиленному росту.

Клетки MDBK, экспрессирующие гликопротеин gD (I) бычьего герпесвируса типа 1 (БГВ-1), устойчивы к заражению БГВ-1, вирусом псевдобешенства и вирусом простого герпеса типа 1 (ВПГ-1), но не БГВ-5. Клетки MDBK, экспрессирующие укороченный gD, секретируют растворимый gD и полностью чувствительны к заражению всеми четырьмя вирусами, если клетки подвергаются промывке до заражения. При обработке клеток MDBK или MDBKlgD до заражения средой, содержащей укороченный gD, они приобретают частичную устойчивость к БГВ-1, ВПБ и ВПГ-1, но не к БГВ-2. БГВ-1 и БГВ-5 образуют бляшки нормального размера на клетках MDBKlgD, т. е. способны к межклеточному распространению. Таким образом, присутствие gD на поверхности клеток в момент заражения требуется для блокирования заражения БГВ-1, ВПБ и ВПГ-1, т. е. gD этих вирусов взаимодействуют с общим ко-рецептором.

Помимо прямого контакта больных и здоровых животных в передаче инфекции принимают участие мухи.

Штаммы герпесподобных вирусов, выделенные в 1969 г. от коров, больных лимфосаркомой, непатогенны для морских свинок, кроликов, мышей, хомячков и телят. Патогенность шт. СТ-66 изучена на телятах. Вирулентный шт. Neethling, выращенный в культуре клеток почек ягнят и телят, патогенен для жирафов и антилоп и непатогенен для буйволов и черных антилоп гну. Вспышку болезни со значительным летальным исходом среди буйволов наблюдали в декабре 1969 г. в Национальном парке Танзании и в прилегающих районах Кении. От заболевших животных при заражении культуры клеток почки и тестикул теленка выделили шт. ВА вируса типа Allerton. При исследовании 17 видов диких животных в Танзании, Кении, Уганде обнаружили AT у всех буйволов старше 2 лет, у многих жирафов, гиппопотамов, сернобыков, у нескольких антилоп канна, чернопятнистых и лесных гну. В некоторых районах этих стран инфицированность домашнего КРС старше 2 лет достигала 85—95 %; титры AT были ниже, чем у буйволов. Клинически болезнь у домашних животных не проявлялась. У овец и коз AT встречаются редко. Очевидно, вирус Allerton широко распространен среди буйволов, но инфекция протекает легко. Иммунитет не изучен, специфическая профилактика не разработана.

Представленные в статье материалы любезно предоставлены Яном Мускенсом, доктором ветеринарных наук из компании GD (Нидерланды). Читатель сможет получить информацию не только по данной теме, но и узнать о том, какие программы по борьбе с вирусными заболеваниями КРС разработаны в Нидерландах.

Вирусная диарея (ВД)

Примечательна, если можно так сказать, тем, что клинические признаки отсутствуют или могут быть ассоциированы с иными причинами: повышенная температура, диарея, снижение надоев, аборт на любом месяце стельности (чаще на втором триместре), возврат к эструсу, мертворождения (иногда резорбция или мумификация плода), снижение резистентности и восприимчивость к другим заболеваниям. О том, что в стаде есть больные животные, в том числе хронически инфицированные (далее PI), может свидетельствовать стабильно высокий уровень соматических клеток в молоке.

Лечить животных-носителей бесполезно, никакие вакцины здесь не помогут. Необходима регулярная проверка всего поголовья, как коров, так и молодняка. Анализ основывается на определении вируса ВД, а не антител. Проводится тест крови у телят в возрасте 1 мес. и коров, а также анализ сборного молока от лактирующих коров. Животные-носители удаляются из стада.

В Нидерландах с 1998 года действует добровольная программа для фермеров, позволяющая бесплатно проводить необходимые анализы и получать по их результатам сертификаты. С 2004 года внедрено экспресс-сканирование для исследования конкретных случаев, – обычно это множественные аборты, регистрирующиеся как на отдельной ферме, так и сразу на нескольких фермах в определенном районе. В 2006 году введено в практику хозяйств исследование сборного молока, что обеспечивает более качественный мониторинг ситуации, связанной с распространением ВД в стране.

Экспресс-сканирование включает в себя проверку сборного молока на вирус и антитела, а также анализ индивидуальных образцов крови от 5-ти телок в возрасте 8-12 мес., также проводятся серологические исследования образцов крови от 5-ти коров, отелившихся в предыдущем календарном году (т.е. коров в возрасте 2,5 лет). Если в обеих группах, как коров, так и телок, результаты анализов позитивны – животные-носители присутствуют в стаде или присутствовали недавно; рекомендуется проверить все стадо на наличие ВД. Если коровы серопозитивны, а телки серонегативны, то значит, что животные-носители присутствовали в стаде, но были выбракованы (пали) за последние полгода-год, рекомендуется проверить всех телят в возрасте 1 мес. для скорейшего выявления вирусоносителей. Коровы серонегативны, а телки серопозитивны, – довольно редкое сочетание. И коровы и телки серонегативны – циркуляции вируса в стаде не было последние 3 года.

Таблица 1. Выбор ИРТ-стратегии.

Результаты теста по сборному молоку

Вероятность

Готовность к забору крови и выбраковке

Рекомендации

Нет антител

Заражено 10%

Вакцинация

Инфекционный ринотрахеит (вирус герпеса коров)

Как и в случае с вирусной диареей, инфекционный ринотрахеит (далее ИРТ) поражает скот всех возрастов. Локализуется вирус в нервных клетках. ИРТ опасен тем, что после заболевания животные остаются вирусоносителями на всю жизнь. При стрессах различной этиологии вирус может активизироваться и начать стремительное распространение в стаде, где ранее имелись лишь отдельные особи с ярко выраженными клиническими признаками этого заболевания, либо их вообще не было.

Характерно, что клинические признаки, как таковые, могут вообще отсутствовать или проявляться весьма умеренно. Только если заболевание переходит в тяжелую форму, регистрируются: повышенная температура, снижение продуктивности, респираторные заболевания, аборты на всех стадиях (чаще после 4-го мес. стельности), многократные и безрезультатные осеменения, низкая резистентность, даже гибель животных. Лечение животных-носителей не проводится.

Причиной вспышек ИРТ в стаде может быть как внедрение вируса (покупка нового скота, контакты скота с соседским на пастбище или на выставке, занос вируса посетителями фермы), так и возобновление активности вируса, уже имеющегося в стаде. Экономические потери – снижение надоев, аборты, бесплодие коров, отсутствие продаж племенного молодняка, возросшие затраты на вакцинацию – поистине огромны и уже довели многих фермеров Евросоюза до банкротства.

В Нидерландах специальной программы по борьбе с ИРТ не существует, хотя в свое время была инициирована работа по ее созданию, но приостановлена примерно 10 лет назад. В настоящее время, учитывая все возрастающий экспорт племенного скота, нидерландские фермеры в добровольном порядке осуществляют диагностику поголовья.

В случае, если у коровы или телки регистрируются обильные носовые истечения, производится ПЦР назальных мазков, а также двойной гЕ-серологический анализ с интервалом 3 недели.

В образцах сборного молока, а иногда от конкретных коров, определяются гЕ-антитела.

Неоспора (Neosporacaninum)

Относится к протозойным заболеваниям, которое является основной причиной абортов вирусного происхождения. Клинические признаки заболевания у взрослых коров отсутствуют, хотя вирус может находиться в их организме на протяжении всей жизни. Неоспороз вызывает аборты, как единичные, так и массовые, на любом месяце стельности. В ряде случаев отмечают: преждевременные роды (обычно такие телята нежизнеспособны), эмбриональную смертность (коровы снова приходят в охоту), мумификацию плода (обычно на 3-5 мес. стельности).

Основной путь передачи – вертикальный или транс-плацентарный, и по статистике на него приходится до 90% всех случаев заражения скота неоспорой. Хотя регистрируются случаи передачи заболевания через сперму, полученную от серопозитивных быков-производителей.

Горизонтальный путь передачи неоспоры многоэтапный, где собака является дефинитивным хозяином, а корова лишь промежуточным. У собак клинические признаки неоспороза проявляются редко и, как правило, включают диарею, а также нервные расстройства. Ооцисты, содержащиеся в кале собак, сохраняют жизнеспособность в течение длительного времени. Контаминация скота ооцистами происходит через почву на пастбище, воду и корма (как правило, зеленую массу и силос). Цикл замыкается, если собаки поедают последы и абортировавшие плоды от серопозитивных коров.

Методы лечения не разработаны, потому все серопозитивные телки должны как можно раньше удаляться из стада. В связи с этим, необходимо параллельно проводить профилактические мероприятия и регулярную диагностику.

Например, нидерландским фермерам рекомендуют не заводить собак на фермах, но и всячески препятствовать проникновению их извне.

Для иммунологических исследований берут кровь у телят первых дней жизни или телок старше 6 мес. Гистологическим исследованиям подвергают мозг, печень и сердце абортированных плодов. Производится проверка всего сборного молока: отрицательный тест указывает на то, что в стаде не более 15% лактирующих коров заражены неоспорой; положительный тест – серопозитивных коров в стаде более 15%.

В Нидерландах действует добровольная программа, в рамках которой фермерам предлагается абсолютно бесплатно тестировать 3 раза в год все сборное молоко и проводить анализ крови абортировавших коров.

По материалам семинара, организованного ККЗ Кирова 22 ноября 2012 года

Таблица 2. Диагностика и меры по предотвращению распространения Neospora caninum в стаде

Результаты теста сборного молока

Аборты

Серологические анализы абортировавших коров

Рекомендации

Проверка купленного скота